TLC快速分析多糖的单糖组成
多糖含量测定的几种不同方法比较
多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:姓名:指导教师:指导教师职称: 讲师多糖含量测定的几种不同方法比较摘要：本文综述了多糖含量测定的几种常用方法，主要有苯酚-硫酸法、3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。
并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。
这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考，并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。
关键词：多糖；含量；测定；方法A review of different methodsto the determination of polysaccharidesAbstract: Paper reviewed some different methods to the determination of polysaccharides, in it phenol-vitriol method, 3, 5-two nitro salicylic acid (DNS) method, anthrone-vitriol method, chromatography, infrared spectrum quantitative analysis and etc had been dealed with. And the advantages and disadvantages of these methods are analyzed and compared. It provided some related information and based theories to the determination of polysaccharides content.Key words：polysaccharides; content; determination; methods目录中文摘要 (I)英文摘要 (II)1前言 (1)2化学法测定多糖含量 (1)2.1苯酚-硫酸法 (1)2.2 3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法) (2)2.3蒽酮-硫酸法 (2)3色谱法测定多糖含量的研究 (3)3.1气相色谱法(GC) (3)3.2 液相色谱法(HPLC) (3)3.3薄层色谱法(TLC) (4)4其他方法 (4)4.1红外光谱定量分析多糖法 (4)4.2生物传感器法 (5)5结论 (5)6展望 (6)参考文献 (6)致谢 (9)1前言多糖(polysaccharides，PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。
单糖组成分析实用指南：有效提高样品分析效率
单糖组成分析实用指南：有效提高样品分析效率单糖是构成多糖的基本单元，对于生物药物领域的研究和开发具有重要意义。
单糖组成分析是一项关键的技术，可以帮助科研人员了解多糖的结构和特性。
然而，传统的单糖组成分析方法存在着效率低下的问题。
本文将介绍一些提高单糖组成分析效率的方法和技巧，帮助科研人员更加高效地进行样品分析。
1. 选择合适的分析方法在进行单糖组成分析之前，首先需要选择合适的分析方法。
常用的单糖分析方法包括高效液相色谱法（HPLC）、毛细管电泳法（CE）和质谱法（MS）等。
不同的方法具有不同的优缺点，科研人员可以根据实际需求选择最适合的方法。
例如，HPLC 方法适用于分析多样品的情况，而CE方法则适用于分析样品量较少的情况。
2. 优化样品制备过程样品制备是单糖组成分析的关键步骤之一。
优化样品制备过程可以有效提高分析效率。
首先，选择合适的提取方法，例如酶解法、酸水解法或酶联免疫吸附法等。
其次，对样品进行适当的预处理，如去除杂质、浓缩样品等。
最后，选择合适的洗脱剂和溶剂，以提高分离和检测的效果。
3. 优化分析条件在进行单糖组成分析时，合理优化分析条件可以提高分析效率。
首先，选择合适的色谱柱和流动相，以实现对单糖的有效分离。
其次，优化色谱条件，如流速、温度和梯度等，以提高分离和检测的效果。
此外，合理选择检测器和检测波长，可以提高检测的灵敏度和选择性。
4. 使用自动化设备自动化设备可以大大提高单糖组成分析的效率。
例如，使用自动进样器可以实现对多个样品的连续分析，节省了操作时间。
同时，自动化设备还可以减少人为误差，提高数据的准确性和可靠性。
5. 数据分析与解释单糖组成分析的结果需要进行数据分析和解释。
科研人员可以使用专业的数据分析软件，如GlycoWorkbench和GlycoMod等，对分析结果进行处理和解读。
此外，结合文献和数据库的信息，可以更加准确地确定单糖的组成和结构。
单糖组成分析是生物药物领域研究的重要技术之一。
柱前衍生化高效液相色谱法分析多糖中的单糖组成
柱前衍生化高效液相色谱法分析多糖中的单糖组成马定远 陈 君 李 萍3胡卓逸(中国药科大学生药药用植物教研室,南京210038)(中国药科大学生化研究室,南京210009)摘 要 报道了多糖中单糖组成的柱前衍生化高效液相色谱测定方法。
采用反向高效液相色谱250nm 紫外检测和使用梯度洗脱,6种还原单糖的12苯基232甲基252吡唑啉酮衍生实现了良好的分离并具有良好的峰形。
对单糖组成的定量测定进行了方法学考察,建立了单糖组成分析的数据分析方法,并用所建立方法对一个多糖中的单糖组成进行了分析,获得良好的重复性。
关键词 单糖,多糖,衍生化,高效液相色谱 2001207204收稿;2002201209接受1 引 言单糖的组成分析是糖分析中的一项重要内容。
已有的糖组成分析方法以气相色谱法和高效液相色谱法为主。
由于单糖分子的多样性,关于糖的分析方法仍在不断发展。
12苯基232甲基252吡唑啉酮(PMP )衍生化方法自运用以来,得到不断完善1～3。
Strydom 运用此法对中性、酸性和碱性醛糖进行了分析,可以使15种单糖得到很好的分离2。
本文首先建立了6种常见单糖(包括一种酸性糖)的分离模式,通过内标法对3种中性单糖的定量进行了方法学考察,并应用所建立的方法对多糖中的单糖进行了组成分析,为此法的更好运用提供了依据。
2 实验部分2.1 仪器与试剂HP1100型高效液相色谱系统,包括G 1312A 二元泵,G 1315A DAD 检测器,HP ChemStation 色谱工作站(Hewlett 2Packard )。
衍生化试剂12苯基232甲基252吡唑啉酮(PMP ,上海化学试剂采购供应站试剂厂),甲醇重结晶两次。
色谱用乙睛(T edia )、三氟乙酸(CP 级,上海化学试剂公司)。
单糖对照品:葡萄糖(G lc ,上海化学试剂公司)、甘露糖(Man ,Sigma 公司)、半乳糖(G al ,Sigma 公司)、鼠李糖(Rham 公司)、葡萄糖醛酸(G lcUA )和木糖(Xyl )(上海化学试剂二厂产品)。
多糖鉴定分析
多糖鉴定分析多糖是由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子碳水化合物，通常由数百甚至数万个单糖分子组成。
多糖与核酸、蛋白质、脂质并称为生命四大基本物质，在许多生命活动中发挥着重要作用。
多糖具有多种生物活性，一些已知的活性包括免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗病毒、消除氧化自由基和延缓衰老等。
多糖的生物活性与其理化性质密切相关。
因此，对多糖进行表征是非常必要的。
细胞膜上的多糖分子。
多糖鉴定分析旨在测定和鉴定多糖的组分、结构、分子量和含量等属性。
由于多糖非常复杂，因此整个分析过程也是多种多样的。
一般来说，首先应确定单糖的组成及其连接位置和序列。
然后，再确定键的异头构型、环大小（呋喃糖或吡喃糖）、绝对构型（D 或 L）以及存在的任何其他取代基。
迄今为止，还没有一种方法可以单独完成多糖分析。
通常，需要结合分离和提取技术、成分分析、甲基化分析、糖苷水解、质谱（MS）和核磁共振（NMR）光谱来确定精细结构，同时需要尺寸排阻色谱（SEC）与光散射（LS）检测器相结合来确定分子尺寸分布。
百泰派克生物科技（BTP）通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立七大检测平台，根据多糖分析原理，开发并验证了多糖鉴定分析方法，能独立完成一整套多糖分析流程，包括多糖的提取与纯化、分子量测定、含量测定、多糖成分确定以及结构分析等，为您提供高质量的一站式多糖鉴定分析，欢迎免费咨询，了解更多详情！中/英文项目报告。
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三叶青多糖提取工艺优化及单糖组成分析
三叶青多糖提取工艺优化及单糖组成分析三叶青多糖是一种重要的生物活性物质，具有抗氧化、抗炎和免疫调节等多种生物活性。
其提取工艺优化及单糖组成分析对于深入研究其生物活性和应用具有重要意义。
本文将对三叶青多糖的提取工艺进行优化，并利用色谱法对提取得到的多糖进行单糖组成分析，为三叶青多糖的研究和应用提供参考。
一、三叶青多糖提取工艺优化1. 原料准备三叶青是一种常见的植物，其叶子富含多糖。
首先需要精选新鲜的三叶青叶子作为提取原料，叶子需洗净并晾干。
2. 提取工艺（1）粉碎：将晾干的三叶青叶子进行粉碎，以增加提取效率。
（2）溶剂选择：根据文献报道，三叶青多糖可溶于水和醋酸乙酯等溶剂中，本次实验选择水作为提取溶剂。
（3）提取条件：提取温度、时间、料液比等条件对多糖提取效果有重要影响，需要进行单因素和正交试验优化。
3. 正交试验优化通过正交试验确定最佳提取工艺条件。
本次试验以多糖提取率为指标，选取提取温度、提取时间和料液比为影响因素，进行正交试验优化提取工艺条件，获得最佳提取条件。
4. 多糖含量测定利用酚-硫酸法测定三叶青多糖提取物的多糖含量，确定优化后提取工艺的效果。
二、三叶青多糖单糖组成分析1. 单糖标准曲线的绘制准备葡萄糖、甘露糖、半乳糖、甘氨酸、岩藻糖等单糖的标准溶液，通过高效液相色谱法（HPLC）分别进行浓度梯度的进样，建立单糖标准曲线。
2. 多糖水解将优化后的三叶青多糖提取物进行酸水解或酶水解，得到单糖。
3. 单糖组成分析将水解后的多糖样品进行过滤，并进行HPLC分析，根据单糖在不同条件下的保留时间和峰面积，计算出样品中各单糖的含量。
通过以上工艺优化和单糖组成分析，可以获取三叶青多糖的最佳提取条件，并且了解其单糖组成，为进一步研究其生物活性和应用价值打下基础。
四、参考文献1. 张三, 李四. 三叶青多糖的提取及生物活性研究[J]. 食品科学, 2010, 31(3): 45-48.2. 王五, 赵六. 高效液相色谱法在多糖单糖组成分析中的应用[J]. 分析化学, 2015, 36(2): 78-82.。
多糖单糖组成和甲基化步骤
4、单糖组成分析样品的水解乙酸醋酐吡啶甲苯氯仿所需试剂 TFA（三氟乙酸）甲醇 NaBH4取5mg多糖样品，置于5ml安培管中，加入2mol/L TFA4ml，在110℃下水解2h。
水解完毕后，冷却，溶液于40℃减压浓缩加入3ml甲醇蒸干，重复操作4-5次以除尽TFA。
将完全水解后的样品溶于3ml蒸馏水，加30mgNaBH4，室温下还原3h,期间震荡几次，然后用25%乙酸中和过量的NaBH4，至溶液不再产生气泡为止。
PH应在4-5之间，加甲酸多次,减压蒸干以除去反应副产物及水分，至瓶壁上基本不附固体大颗粒为止，然后置于真空干燥器中过夜。
次日,于110℃烘箱中加热15min，充分除去残留的水分后，加3—5ml醋酐和3ml吡啶,密塞，100℃下反应1h，冷却,加甲苯多次共蒸除去多余醋酐,真空干燥.将乙酰化产物用适量氯仿溶解，经等体积蒸馏水洗涤次，无水硫酸钠干燥，浓缩至小体积(约0.1ml)后直接进行气相色谱分析.GC（气相色谱)条件∶载气N2流速20ml∕min，H2流速30ml∕min，空气流速200ml∕min;柱温230℃，检测器温度250℃，气化室温度280℃。
5、糖残基连接方式的确定所需试剂 DMSO NaOH 碘甲烷氮气乙酸甲酸甲醇三氟乙酸 NaBH4 5.1甲基化将样品置于干燥器中80℃处理5h以上，然后置于含有P2O5的真空干燥器中过夜。
分别取18mg干燥后的多糖置于甲基化反应瓶中,加入4ml干燥的DMSO 后超声处理30min使样品完全溶解,然后快速加入20mg预先干燥的NaOH粉末，超声2h使NaOH粉末完全溶解，冰浴甲基化反应瓶5min至反应完全冻结。
取出反应瓶，用移液管分别缓慢加入0。
6ml干燥的碘甲烷至冻结的反应完全溶解，充入氮气，再分别超声处理反应液1h。
然后分别加入1ml蒸馏水至反应瓶中使甲基化反应结束。
再加入1mol∕L的乙酸中和反应液。
流水透析至反应液颜色转为无色,冷冻干燥，红外检测多糖羟基是否完全甲基化，若没有则需重复上述操作。
多糖组成多样性：圆二色谱测定方法分析
多糖组成多样性：圆二色谱测定方法分析多糖是一类重要的生物大分子，广泛存在于生物体内，如细胞壁、细胞膜、软骨、骨骼、肌肉、皮肤、血管、眼球等组织中。
多糖的结构和组成对其生物学功能具有重要影响。
因此，多糖的分析和表征对于深入了解其生物学功能具有重要意义。
圆二色谱是一种常用的多糖分析方法，可以用于分析多糖的结构和组成。
1.多糖的结构和组成多糖是由单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物。
多糖的结构和组成对其生物学功能具有重要影响。
多糖结构包括链式结构和支链结构，链式结构包括直链和分支链。
多糖的组成包括单糖种类、单糖的连接方式和单糖的相对比例等因素。
2.圆二色谱测定方法圆二色谱是一种常用的多糖分析方法，可以用于分析多糖的结构和组成。
圆二色谱是利用多糖分子的手性结构对圆偏振光的旋转方向产生影响，从而分析多糖的结构和组成。
圆二色谱可以分析多糖的二级结构，如α-螺旋、β-折叠和无规卷曲等结构。
圆二色谱还可以分析多糖的单糖组成和连接方式等信息。
3.圆二色谱的应用圆二色谱广泛应用于多糖的分析和表征。
圆二色谱可以用于分析多糖的结构和组成，如多糖的二级结构、单糖组成和连接式等信息。
圆二色谱还可以用于分析多糖的空间结构和分子间相互作用等信息。
圆二色谱在生物医学领域中也有广泛应用，如用于分析多糖药物的结构和组成，以及多糖药物与受体的相互作用等信息。
4.圆二色谱的优势和局限性圆二色谱具有高灵敏度、高分辨率和非破坏性等优点，可以分析多糖的结构和组成等信息。
但是，圆二色谱也存在一些局限性，如需要高纯度的样品、需要专业的仪器和操作技能等。
此外，圆二色谱也不能直接分析多糖的三维结构和分子间相互作用等信息。
图1。
5.结论多糖是一类重要的生物大分子，其结构和组成对其生物学功能具有重要影响。
圆二色谱是一种常用的多糖分析方法，可以用于分析多糖的结构和组成。
圆二色谱具有高灵敏度高分辨率和非破坏性等优点，但也存在一些局限性。
圆二色谱在多糖的分析和表征中具有重要应用价值，可以为深入了解多糖的生物学功能提供重要信息。
高效液相色谱法测两头尖多糖的单糖组成
高效液相色谱法测两头尖多糖的单糖组成
闫攀凤;樊东升
【期刊名称】《山西中医学院学报》
【年(卷),期】2017(018)001
【摘要】目的:测定两头尖多糖中单糖的组成.方法:两头尖多糖采用2 mol/L三氟
醋酸水解后通过1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生,用高效液相色谱法梯
度洗脱测定;检测波长250 nm.结果:两头尖多糖由D-葡萄糖、D-核糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、L-岩藻糖、D-甘露糖、D-半乳糖、D-木糖)组成.结论:高效液相色谱
法测两头尖多糖的单糖组成,操作方法简便,具有良好的重复性及稳定性.
【总页数】3页(P35-37)
【作者】闫攀凤;樊东升
【作者单位】山西中医学院,山西太原030024;山西省中西医结合医院,山西太原030006
【正文语种】中文
【中图分类】R285
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展开系统 ２：分别把正丁醇、丙酮、水按 ４：３：１（体 积比） 的比例混合摇匀。
展开系统 ３ ：分别把正丁醇、乙酸乙脂、异丙醇、 醋酸、水、吡啶按３５：１００：６０：３５：３０：３０（体积比）的比例混 合摇匀。 １．５ 显色剂的配置
分别称取果糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、鼠李 糖，分别溶于蒸馏水中制得五种单糖标准液。浓度均 为 １．００ｍｇ／ｍｌ。
分别称取葡萄糖、半乳糖、果糖、木糖、鼠李 糖，共溶于 ２ｍｌ 蒸馏水制得混合单糖标准液。各单糖在 混合单糖标准液中的浓度为 ０．５０ｍｇ／ｍｌ。 １．３ 水解多糖样品的制备
称取 ２０ｍｇ 多糖，溶解在 ５ｍｌ 重蒸水中，加入 １２ｍｏｌ／Ｌ 的 ＨＣｌ ０．２５ｍｌ，置于高压釜中在 １２０～１２６℃条件下水解 ４ ｈ 。中和、透析后稀释至 １ ０ ｍ ｌ 。 １．４ 展开系统配置
量进行正确的测量，我们自制了几种样品。自制样品 组成为：１．０ × １０ －４ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ、ＫＣｌ、Ｃａ（ＮＯ３） ２、葡 萄糖、麦芽糖、果糖、蔗糖、酒石酸及柠檬酸及 ０ ． ５ × １０－５～１ × １０－５ｍｏｌ／Ｌ 抗坏血酸。其测定结果如表 ２ 所 示。由表 ２ 可知，测定的抗坏血酸含量与已知含量基本 一致。
No.2 extending system
编号
２ 半乳糖 Ｒｆ ＝０．３４３
１ 混合单糖 ＋
７ 多糖
３ 葡萄糖 Ｒｆ ＝０．４２４
＋ ＋
４ 果糖 Ｒｆ ＝０．４８４
＋ ＋
５ 木糖 Ｒｆ ＝０．５８
＋
６ 鼠李糖 Ｒｆ ＝０．６６４
＋
Fig.1
１２ ３ ４５６ ７
图 １ 展开系统１的展层效果图 The result presented by using No.1 extending system
单糖组分的分离测定方法目前主要有高效液相色谱 法（ＨＰＬＣ） 、气相色谱法（ＧＣ）、薄层色谱法（ＴＬＣ）等［６］。 采用 Ｇ Ｃ 测定糖类，遇到的主要困难是糖本身没有足够 的挥发性，所以必须在气相色谱分析之前预先转化成易 挥发、对热较稳定的衍生物。另外，由于糖的异构化， 在某些衍生物的制备过程中，会产生衍生物的异构体， 使色谱分析时每种糖产生几个峰，这往往影响组分的分 离和定量。Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 有分离速度快、分辨率高、分离效 果好、重现性好、不破坏样品的优点。但糖类本身没 有紫外吸收，只能采用示差折光检测器（ＲＩ）或蒸发光散 射检测器（ＥＬＳＤ）检测。ＲＩ 分辨率低而 ＥＬＳＤ 虽然效果好 但目前价格昂贵。另外，采用 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 分析时，色谱柱 的选择也比较困难。一般采用氨基柱但分离效果欠佳， 而专用的糖柱又十分昂贵。为了找到一种常规实验室即 可快速分析单糖组成的方法，我们摸索了薄层色谱法 （ Ｔ Ｌ Ｃ ）。该方法是一种微量而快速的分析方法。它兼备 了柱层析和纸层析两者的优点并且操作方便，设备简 单，容易掌握、便宜、灵活的特点。本文采用 Ｔ Ｌ Ｃ 对水解多糖的单糖组成进行分析，确定了适用于单糖分 析的展开系统、显色系统及 Ｒ ｆ 值。
１ 材料与方法
１．１ 药品与材料 银耳多糖 本实验室自制；Ｄ－ 葡萄糖、Ｄ－ 半乳糖、
Ｄ－ 木糖、Ｌ － 鼠李糖、Ｄ－ 果糖 上海试剂二厂；盐酸、
乙酸乙脂、吡啶、无水乙醇、正丁醇、丙酮、正丁 醇、异丙醇、醋酸、磷酸、硫酸、苯胺、二苯胺 皆为分析纯试剂；实验用水为蒸馏水。
微量定量点样毛细管 美国科尔帕默公司；２０ｃｍ × ２０ｃｍ 硅胶层析板 德国默克公司。 １．２ 单糖和混合单糖标准溶液的配置
１２ ３ ４ ５６７
图 ２ 展开系统２的展层效果图 Fig.2 The result presented by using No.2 extending system
萄糖、半乳糖斑点。由所得的 Ｔ Ｌ Ｃ ，计算展开系统 ２ 中各单糖斑点的 Ｒ ｆ 值。结果见表 ２ 。
Table 2
表２ 展开系统２中检出单糖组分表 The monosaccharide composition analyzed by using
［２］ 胡慰望， 谢笔钧． 食品化学［Ｍ］． 北京： 科学出版社， １９９２． ２４３． ［３］ 黄伟坤， 等． 食品检验与分析［Ｍ］． 北京： 中国轻工业出版社， １９８９．９６． ［４］ Ａ Ｈ Ｅｎｓｍｉｎｇｅｒ， Ｍ Ｅ Ｅｎｓｍｉｎｇｅｒ， Ｊ Ｅ Ｋｏｎｌａｎｄｅ， 等． 食品与营养百科
显色剂 １（ 苯胺 － 二苯胺 － 磷酸显色剂） ：２％ 二苯胺 丙酮溶液：２％ 苯胺丙酮溶液：８５％磷酸按 ５：５：１的比例混合 摇匀。
显色剂 ２：把 １０ｍｌ 硫酸缓慢倒入 ９０ｍｌ 水中混合冷 却，制得 １ ０ ％ 的硫酸溶液装瓶待用。 １．６ 操作步骤
１．６．１ 点样 将水解多糖、已知单糖标准液和混合单糖标准
开剂中 ０．３～０．５ｃｍ，至展开剂距离薄层板的上端约 １ｃｍ 左右时取出自然风干。 １．６．３ 显色
在除去溶剂后的薄层板上，均匀喷上显色剂，烘 箱中加热显色。
２ 结果与分析
２．１ 展开剂的比较 ２．１．１ 展开系统 １
用展开系统 １ 按 １．６ 对样品（１．混合单糖；２．果糖； ３．半乳糖；４．葡萄糖；５．木糖；６．鼠李糖；７．水解多糖） 进行 Ｔ Ｌ Ｃ 分析，展层效果见图 １ 。
全书［Ｍ］． 王淮洲， 王惟球， 王模善， 等译． 北京：农业出版社， １９８９．
604 2006, Vol. 27, No. 12
食品科学
※分析检测
ａｃｑｕｉｒｅｄ ａｓ ｓｈｏｗｎ ｂｙ ｔｈｅ ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ． Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｃａｎ ｂｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｉｎ ａｃｃｏｒｄａｎｃｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ Ｒｆ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｐｏｔｓ． Ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｆｉｇｕｒｅｓ ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＴＬＣ．Ｔｈｅ ｅｘｔｅｎｄｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｉｎ ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ． Ｋ ｅ ｙ ｗ ｏ ｒ ｄ ｓ：ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ；ｔｈｉｎ－ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ ＴＬＣ） 中图分类号：ＴＳ２０７．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－６６３０（２００６）１２－０６０３－０５
多糖作为来自高等植物、动物细胞膜和微生物细胞 壁中的天然高分子化合物，是构成生命的四大基本物质 之一。随着人们对多糖组成、性质、结构与功能研究 的不断深入。对多糖的生物活性也有了更多的认识，能 提高机体免疫力，增强机体耐缺氧能力，清除自由基， 抑制肿瘤，可用于治疗高血压、高血脂、糖尿病、乙 型肝炎等多种现代医学中的疑难病症［１ ～３］ 。多糖的研究 受到了越来越广泛的重视。并取得了丰硕的成果，已 有香菇多糖、灵芝多糖等应用于临床。国内外研究表 明，多糖的活性与许多因素有关，如分子量、溶解性 等，特别是与其空间结构密切相关［ ４ ， ５ ］ 。由于一级结构 是空间结构的基础，而多糖的单糖组成是一级结构的主 要内容，所以有必要找到一种简便、灵敏的方法以确 定多糖的单糖组成。
ＴＬＣ ｔｏ Ｆｌｅｅｔｌｙ Ａｎａｌｙｚｅ Ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ＹＡＮ Ｊｕｎ，ＧＵＯ Ｘｉａｏ－ｑｉａｎｇ，ＬＩ Ｘｉａｏ－ｇｕａｎｇ，ＷＵ Ｘｉａｏ－ｙｏｎｇ，ＧＯＵ Ｘｉａｏ－ｊｕｎ＊ （Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｃｈｅｎｇｄｕ Ｕｎｉｖｈｉｎａ）
由图 １ 可得，在展开系统 １ 中混合单糖中各单糖完 全分离，各单糖斑点集中无拖尾现象；水解多糖中呈现 半乳糖、葡萄糖、果糖、木糖斑点。由所得的 Ｔ Ｌ Ｃ ， 计算展开系统 １ 中各单糖斑点的 Ｒ ｆ 值，结果见表 １ 。
液，７ 种样品按一定顺序分别点样在薄层板上。点样量 约 １０μｌ，分次滴加，使点样扩散后其直径不超过 ２ｍｍ 。 点样过程中用吹风机使样品干燥。
１．６．２ 展层 将点好样品的薄层板置于密闭的层析缸中，用配置
的展开剂，采用倾斜上行法，将薄层板的下端浸在展
※分析检测
食品科学
2006, Vol. 27, No. 12 605
Table 1 Effect of foreign species
ＫＣｌ
Ｃａ（ＮＯ３） ２
葡萄糖
２００
２００
１００
麦芽糖 １００
果糖
蔗糖
１００
１００
酒石酸 １００
柠檬酸 １００
误差控制在± ５ ％ 之内时） 。因此，该电极应用于蔬菜 和水果中抗坏血酸的测定将具有很好的选择性。
２．３．２ 样品测定 为了验证该修饰电极能否在实际样品中抗坏血酸含
※分析检测
食品科学
2006, Vol. 27, No. 12 603
ＴＬＣ 快速分析多糖的单糖组成
颜 军，郭晓强，李晓光，邬晓勇，苟小军 ＊ （成都大学中药化学实验室，四川 成都 ６１０１０６）
摘 要：本文采用薄层色谱法分析多糖的单糖组成。从斑点分离度、清晰度、有无拖尾现象及展层时间等方面 综合评价展层效果。通过实验确定了适合的展开剂为展开系统（乙酸乙脂：吡啶：无水乙醇：水 ＝８：１：１：２）、合适的显 色剂为苯胺 － 二苯胺磷酸显色剂。通过此体系确定了单糖的 Ｒｆ 值，可用于快速分析水解多糖的单糖组分。 关键词：多糖；单糖组成；薄层色谱
３ 结 论
该新型的修饰电极具有极高的化学稳定性，且对溶 液中的抗坏血酸具有良好的电催化作用，已成功地应用 于水果中抗坏血酸含量的测定，获得了比较满意的结