血清直接胆红素测定
钒酸氧化法和重氮法检测胆红素的方法学评价
钒酸氧化法和重氮法检测胆红素的方法学评价目的:寻找一种精密、准确、使用方便且特异的检测血清总(直接)胆红素的方法。
方法:对钒酸氧化法和重氮法进行方法学评价,包括精密度、线性范围、准确度、方法比较和干扰因素。
结果:两种方法检测总(直接)胆红素的精密度和准确度均符合要求,两种方法检测结果有良好的相关性(TBIL:r=0.997,DBIL:r=0.987,均符合r≥0.975)同时有极显著性差异(P＜0.01),钒酸氧化法检测直接胆红素的线性范围略窄于重氮法,但是它的精密度和准确度略优于重氮法,而且抗血红蛋白和三酰甘油干扰的能力明显强于重氮法。
结论:钒酸氧化法是一种精密、准确使用方便且特异的、值得推广的、适用于血清总胆红素和直接胆红素日常测定的方法。
标签：钒酸氧化法;重氮法;胆红素;方法学评价血清胆红素作为肝胆疾患等诊断的重要指标已广泛应用于临床[1-3],但长期以来,标本溶血对测定的干扰影响一直未能得到很好解决[4]。
目前,测定血清总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)的方法包括重氮试剂法(如改良J-G法和M-E法等),胆红素氧化酶法和化学氧化法(如钒酸氧化法)。
重氮试剂法存在反应不专一、易受溶血和脂血干扰的弊端,使检测结果出现偏差,有时甚至出现直接胆红素高于总胆红素的错误结果,而且这种方法存在工作液不够稳定的缺点[5]。
胆红素氧化酶法由于酶试剂成本昂贵,需要有高效热稳定的酶及其促进剂﹑抑制剂,影响了其在实际工作中的应用[6]。
1993年日本学者Tokuda[7]建立了钒酸氧化法测定血清胆红素。
建立一个新的分析方法,或引进新的方法、试剂和仪器,都应对它们的技术性能如精密度、方法比较、线性范围,以及干扰等作出评价[8]。
为了寻找一种精密、准确、使用方便且特异的检测血清总(直接)胆红素的方法,本文对钒酸氧化法和重氮法进行了方法学评价,现总结如下:1 材料与方法1.1 仪器日本日立公司HITACHI 7060型全自动生化分析仪,日本东亚公司Sysmex KX-21型全自动血细胞分析仪。
生化全套检查意义
生化全套检查意义 Document number【980KGB-6898YT-769T8CB-246UT-18GG08】1.血清丙氨酸氨基转移酶（ALT或GPT）测定的临床意义：升高：常见于急慢性肝炎、药物性肝损害、脂肪肝、肝硬化、心肌梗塞、心肌炎及胆道疾病等。
2.血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST或GOT）测定的临床意义：升高：常见于心肌梗塞发病期、急慢性肝炎、中毒性肝炎、心功能不全、皮肌炎等。
3.血清总蛋白测定的临床意义：增高：常见于高度脱水症（如腹泻，呕吐，休克，高热）及多发性骨髓瘤。
降低：常见于恶性肿瘤，重症结核，营养及吸收障碍，肝硬化、肾病综合征，溃疡性结肠炎，烧伤，失血等。
4.血清白蛋白测定的临床意义：增高：常见于严重失水导致血浆浓缩，使白蛋白浓度上升。
降低：基本与总蛋白相同，特别是肝脏病，肾脏疾病更为明显。
5.血清碱性磷酸酶（ALP）测定的临床意义：升高：常见于肝癌、肝硬化、阻塞性黄疸、急慢性黄疸型肝炎、骨细胞瘤、骨转移癌、骨折恢复期。
另外，少年儿童在生长发育期骨胳系统活跃，可使ALP增高。
注意：使用不同绶冲液，结果可出现明显差异。
6.血清r-谷氨酰基转移酶（GGT或r－GT）测定的临床意义：升高：常见于原发性或转移性肝癌、急性肝炎、慢性肝炎活动期肝硬化、急性胰腺炎及心力衰竭等。
7.血清总胆红质测定的临床意义：增高：肝脏疾病，肝外疾病，原发性胆汁性肝硬化溶血性黄疸急性黄疸性肝炎新生儿黄疸慢性活动期肝炎闭塞性黄疸病毒性肝炎胆石症阻塞性黄疸胰头癌肝硬化输血错误8.血清直接胆红素测定临床意义:增高：常见于阻塞性黄疸，肝癌，胰头癌，胆石症等。
9.血清甘油三酯测定的临床意义:增高：可以由遗传、饮食因素或继发于某些疾病，如糖尿病、肾病等。
TG值L以上为增多；L以上为严重高TG 血症。
降低：常见于甲亢、肾上腺皮质功能低下、肝实质性病变、原发性B脂蛋白缺乏及吸收不良。
10.血清总胆固醇测定的临床意义:(1)高脂蛋白血症与异常脂蛋白血症的诊断及分类； (2)心、脑血管病的危险因素的判断；(3)CHO增高或过低可以是原发的（包括遗传性），营养因素或继发于某些疾病，如甲状腺病、肾病等。
检验科项目
包括FT3、FT4、TSH
总甲功三项
包括T3、T4、TSH
妊娠甲状腺功能筛查
包括FT3、FT4、TSH、TPO-Ab
三碘甲状腺原氨酸
T3
甲状腺激素
T4
游离三碘甲状腺原氨酸
FT3
游离甲状腺激素
FT4
促甲状腺激素
TSH
抗甲状腺球蛋白抗体
TG-Ab
抗甲状腺微粒体抗体
TM-Ab
抗甲状腺抗体过氧化物酶抗体
TPO-Ab
促甲状腺素受体抗体
TRAb
血清反T3测定
r T3
肾上腺系列检测
中文名称
简写
促肾上腺皮质激素（化学发光法）
ACTH
醛固酮（化学发光法）
ALD
皮质醇（化学发光法）
COR
糖尿病系列检测
中文名称
简写
葡萄糖耐量试验（空腹，餐后30，60，120，180分钟后抽血）
己糖激酶法
胰岛素（INS）（空腹）
九、免疫检测项目
中文名称
简写
1.乙肝两对半
乙型肝炎表面抗原测定
HBsAg
乙型肝炎表面抗体测定
Anti-HBs
乙型肝炎e抗原测定
HBeAg)
乙型肝炎e抗体测定
Anti-HBe
乙型肝炎核心抗原测定
HBcAg)
2.梅毒螺旋体特异抗体测定(凝集法)
不加热血清反应素试验
3.艾滋病抗体检测
十、微生物检测项目
中文名称
地高辛血药浓度测定（荧光偏振免疫法）
DIG
细胞学检查及常用ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ色技术
骨髓涂片细胞学检验
血片2张、骨髓片6张、病史、血常规报告单
池州市人民医院检验项目组合及收费标准
池州市人民医院检验项目组合及收费标准组合名称代码编码项目名称项目内涵计价单位价格收费1、肝功能I gg1250305001血清总胆红素测定酶促法项524 250305002血清直接胆红素测定酶促法项5250305003血清间接胆红素测定手工法项0250305007血清丙氨酸氨基转移酶测定速率法项7250305009血清r-谷氨酰基转移酶测定速率法项72、肝功能II gg2250305001血清总胆红素测定酶促法项540 250305002血清直接胆红素测定酶促法项5250305003血清间接胆红素测定手工法项0250301001血清总蛋白测定化学法项3250301002血清白蛋白测定化学法项3250301006血清前白蛋白测定项10250305007血清丙氨酸氨基转移酶测定速率法项7250305009血清r-谷氨酰基转移酶测定速率法项73、肝功能Ⅲgg3250305001血清总胆红素测定酶促法项580.0 250305002血清直接胆红素测定酶促法项5250305003血清间接胆红素测定手工法项0250301001血清总蛋白测定化学法项3250301002血清白蛋白测定化学法项3250301006血清前白蛋白测定项10 250305007血清丙氨酸氨基转移酶测定速率法项7 250305008血清天门冬氨酸氨基转移酶测定速率法加收40%项7 250305011血清碱性磷酸酶测定速率法项5 250305009血清r-谷氨酰基转移酶测定速率法项7 250305005血清总胆汁酸测定速率法项284、肾功能I sg1250307001尿素测定酶促法项7.512.5 250307002肌酐测定酶促法项55、肾功能II sg2250307001尿素测定酶促法项7.517.5 250307002肌酐测定酶促法项5 250307005血清尿酸测定项56、血脂I xz1250303002血清甘油三脂测定酶法项510 250303001血清总胆固醇测定酶法项57、血脂II xz2250303002血清甘油三脂测定酶法项585.5 250303001血清总胆固醇测定酶法项5 250303004血清高密度脂蛋白胆固醇测置定项10 250303005血清低密度脂蛋白胆固醇测置定进口试剂加收100%项10 250303007血清载脂蛋白AI测定项15 250303009血清载脂蛋白B测定项15 250303013血清载脂蛋白a测定进口试剂加收70%项25.58、生化I sh1250305001血清总胆红素测定酶促法项5102.5250305002血清直接胆红素测定酶促法项5 250305003血清间接胆红素测定手工法项0 250301001血清总蛋白测定化学法项3 250301002血清白蛋白测定化学法项3 250301006血清前白蛋白测定项10 250305007血清丙氨酸氨基转移酶测定速率法项7 250305008血清天门冬氨酸氨基转移酶测定速率法加收40%项7 250305011血清碱性磷酸酶测定速率法项5 250305009血清r-谷氨酰基转移酶测定速率法项7 250305005血清总胆汁酸测定速率法项28 250307001尿素测定酶促法项7.5 250307002肌酐测定酶促法项5 250307005血清尿酸测定项5 250302001葡萄糖测定各种酶法项59、生化II sh2250305001血清总胆红素测定酶促法项5188 250305002血清直接胆红素测定酶促法项5250305003血清间接胆红素测定手工法项0250301001血清总蛋白测定化学法项3250301002血清白蛋白测定化学法项3250301006血清前白蛋白测定项10250305007血清丙氨酸氨基转移酶测定速率法项7 250305008血清天门冬氨酸氨基转移酶测定速率法加收40%项7250305011血清碱性磷酸酶测定速率法项5 250305009血清r-谷氨酰基转移酶测定速率法项7 250305005血清总胆汁酸测定速率法项28 250307001尿素测定酶促法项7.5 250307002肌酐测定酶促法项5 250307005血清尿酸测定项5 250302001葡萄糖测定各种酶法项5 250303002血清甘油三脂测定酶法项5 250303001血清总胆固醇测定酶法项5 250303004血清高密度脂蛋白胆固醇测置定项10 250303005血清低密度脂蛋白胆固醇测置定进口试剂加收100%项10 250303007血清载脂蛋白AI测定项15 250303009血清载脂蛋白B测定项15 250303013血清载脂蛋白a测定进口试剂加收70%项25.510、肝炎五项gy5250403001甲型肝炎抗体测定项10115 250403004乙型肝炎表面抗原测定(HBsAg)项4250403005乙型肝炎表面抗体测定(HBsAb)项4250403006乙型肝炎表面抗原测定(HBeAg)项4250403007乙型肝炎表面抗原测定(HBeAb)项4250403009乙型肝炎表面抗原测定(HBcAb)项4250403010乙型肝炎核心IgM抗体测定项10250403014丙型肝炎抗体测定(Anti-HCV)IgM项25250403015丁型肝炎抗体测定(Anti-HDV)项25 250403016戊型肝炎抗体测定(Anti-HEV)项2511、电解质I dj1250304001钾测定离子选择电极法项530 250304002钠测定离子选择电极法项5 250304003氯测定离子选择电极法项5 250304004钙测定离子选择电极法项5 250304010血清总二氧化碳(TCO2)测定项1012、电解质II dj2250304001钾测定离子选择电极法项540 250304002钠测定离子选择电极法项5 250304003氯测定离子选择电极法项5 250304004钙测定离子选择电极法项5 250304005磷测定比色法项5 250304006镁测定比色法项5 250304010血清总二氧化碳(TCO2)测定项1013、肝纤四项gx4250305018-A增敏化学发光免疫分析法定量检测血清IV型胶原项60240250305026增敏化学发光免疫分析法定量检测血清III型前胶原酶肽项60 250305022-A增敏化学发光免疫分析法定量检测血清透明质酸项60 250305020-A增敏化学发光免疫分析法定量检测血清层粘连蛋白项60 14、心肌酶谱1xj1250306001血清肌酸激酶测定速率法项1047 250306005乳酸脱氢酶测定速率法项10250305008血清天门冬氨酸氨基转移酶测定速率法加收40%项7 250306002血清肌酸激酶-MB同工酶活性测定速率法项10250306007血清a羟基丁酸脱氢酶测定项1015、心肌酶谱2 xj2250306001血清肌酸激酶测定速率法项10167 250306005乳酸脱氢酶测定速率法项10250305008血清天门冬氨酸氨基转移酶测定速率法加收40%项7 250306002血清肌酸激酶-MB同工酶活性测定速率法项10250306007血清a羟基丁酸脱氢酶测定项10250306009血清肌钙蛋白I测定免疫、化学发光法12016、二对半Ldb 250403004乙型肝炎表面抗原测定项430 250403005乙型肝炎表面抗体测定项4250403006乙型肝炎e抗原测定项4250403007乙型肝炎e抗体测定项4250403009乙型肝炎核心抗体测定项4 250403010乙型肝炎核心IgM抗体测定项1017、凝血象sq 250203020血浆凝血酶原时间测定仪器法项2055 250203024白陶土部分凝血活酶时间测定仪器法项20 250203030血浆纤维蛋白原测定仪器法项1518、溶血筛选rx 250202007红细胞渗透脆性试验项1050 250202011蔗糖溶血试验项5 250202012血清酸化溶血试验项5 250202034直接抗人球蛋白试验IgG、IgM、C33项3019、TORCH to 250403020弓形虫抗体测定IgM IgG项43.2172.8 250403021风疹病毒抗体测定IgM IgG项43.2250403022巨细胞病毒抗体测定IgM IgG项43.2250403024单纯疱疹病毒抗体测定IgM IgG项43.220、尿11A11A250102002尿常规检查仪器法（11项）次1111 21、尿常规+沉渣检查ncz250102003尿常规检查仪器法（11项）次1130 250102023尿沉渣镜检3项项2250102024尿沉渣定量8项项322、血型鉴定RH 260000002ABO血型鉴定项1020 260000004RH血型鉴定指仅鉴定RhD项1023、血常规+血型ABO250101015血细胞分析全血细胞三分类项14.434.4260000002ABO血型鉴定项10260000004RH血型鉴定指仅鉴定RhD项10 24、雌激素测定cjs250310037孕酮测定化学发光法项40200 250310036雌二醇测定化学发光法项40250310002血清泌乳素测定化学发光法项40250310004血清促卵泡刺激素测定化学发光法项40250310005血清促黄体生成素测定化学发光法项4025、性激素测定xjs250310038人绒毛膜促性腺激素测定化学发光法项40280 250310036雌二醇测定化学发光法项40250310002血清泌乳素测定化学发光法项40250100030睾酮测定化学发光法项40250310037孕酮测定化学发光法项40250310004血清促卵泡刺激素测定化学发光法项40250310005血清促黄体生成素测定化学发光法项4026、粪便常规+隐血OB250103001粪便常规次515 250103002粪便隐血试验单抗金标法项1027、病毒8项BD8250403004乙型肝炎表面抗原测定项4125 250403005乙型肝炎表面抗体测定项4250403006乙型肝炎e抗原测定项4250403007乙型肝炎e抗体测定项4250403009乙型肝炎核心抗体测定项4250403010乙型肝炎核心IgM抗体测定项10250403014丙型肝炎抗体测定IgM项25250403019人免疫缺陷病毒抗体测定免疫法项50250403053梅毒密螺旋体抗体测定项20 28、甲状腺激素测定3项J3250310001血清促甲状腺激素测定化学发光法项40120 250310010血清甲状腺素（T4）测定化学发光法项40250310011血清三碘甲状腺原氨酸（T3）测定化学发光法项4029、甲状腺激素测定5项J5250310001血清促甲状腺激素测定化学发光法项40200 250310010血清甲状腺素（T4）测定化学发光法项40250310011血清三碘甲状腺原氨酸（T3）测定化学发光法项40250310013血清游离甲状腺素（FT4）测定化学发光法项40250310014血清游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）测定化学发光法项4030、抗“O”+类风湿因子ASO250403043抗链球菌溶血素O测定（ASO）免疫法项2040 250402035类风湿因子测定免疫法项20。
重氮法与钒酸盐氧化法测定新生儿血清胆红素的比较分析
重氮法与钒酸盐氧化法测定新生儿血清胆红素的比较分析目的：对血清总胆红素重氮法和钒酸盐氧化法的测定结果进行方法比对和偏倚评估，探讨两种方法之间检测结果是否具有可比性。
方法：按照有关文件的要求，以重氮法为比较方法，钒酸盐氧化法为实验方法，分别检测50例患者新鲜血清，记录检验结果，去除离群值，计算回归方程，评估两种方法的CV值。
结果：血清总胆红素重氮法和钒酸盐氧化法测定结果的相关回归方程为Y=1.092X+4.815，相关系数r为0.9958。
新生儿的直接胆红素测定差异较大，重氮法和钒酸盐氧化法测定结果的相关回归方程为Y=0.1372X+1.8，相关系数r为0.5831，成年人及大于30 d儿童直接胆红素测定结果相关回归方程为Y=1.1368X—3.818，相关系数r为0.9997。
结论：血清总胆红素重氮法和钒酸盐氧化法测定结果的预期偏倚在可接受范围内，新生儿直接胆红素测定偏倚不可接受。
标签：重氮法；钒酸盐氧化法；新生儿直接胆红素；总胆红素测定胆红素是血红素代谢的产物，临床上多用于黄疸的诊断和性质鉴别，亦是重要的肝功能试验指标，准确测定具有重要的意义。
目前，我国临床实验室测定血清总胆红素（total TB）的方法主要有3种：重氮法、胆红素氧化酶法和化学氧化法（如钒酸盐氧化法）[1]。
酶法测定胆红素具有准确性高、稳定性好等优势，但由于试剂昂贵，仅为少数临床实验室所接受。
重氮法和钒酸盐氧化法是多数临床实验室首选的检测方法。
目前仍广泛使用的方法是重氮法，而钒酸盐氧化法因其稳定性、精密度、准确度均能满足实验室要求，且试剂简单，能在全自动生化分析仪上面使用，被越来越多的实验室所采用，在使用过程中，本实验室发现重氮法胆红素测定结果稍高于钒酸盐氧化法测定结果，但两者的系统误差均属临床可接受水平[2]，与大量的文献报道一致，但新生儿直接胆红素两种方法的测定结果差异较大。
1 资料与方法1.1 试剂和仪器重氮法和钒酸盐氧化法测定结果的相关回归方程为Y=1.092X+4.815，相关系数r为0.9958，T.bil试剂盒（批号：Z109218）、D.bil 试剂盒（批号：Z109218）均为美国贝克曼公司提供的配套试剂；钒酸盐氧化法T.bil试剂盒、D.bil试剂盒均为北京利德曼公司提供，总胆红素试剂盒批号为111011J，直接胆红素试剂批号为111011J。
生化项目SOP
沭阳县仁慈医院检验科生化室作业指导书文件编号：SYXRCYYLAB-SH –SOP第A版编制：路珊珊钱丽萍审核：李萍批准：侯波生效日期：2012年10月01日沭阳县仁慈医院检验科修订页血清总胆红素(T-BIL)测定一、目的保证总胆红素测定的结果准确、可靠。
二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。
三、适用范围钒酸盐氧化法测定总胆红素。
四、试剂来源本标准操作程序适用于上海执诚生物科技股份有限公司生产的总胆红素测定试剂盒。
五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。
六、原理此方法基于样品中的总胆红素在pH3.0 环境中，在有机复合物氧化剂的作用下，可以被氧化成胆绿素，而胆红素特有的黄色也随即消失，在450nm 处测定吸光度的变化，即可计算出样品中总胆红素的浓度。
七、试剂R1：硫磺酸缓冲液（pH2.9） 0.1mol/L表面活性剂R2：磷酸缓冲液（pH7.0） 10mmol/L有机钒酸盐 4mmol/L 不同批号试剂盒中各组份不能互换。
本试剂对光敏感，2～8℃密闭避光保存可以稳定18个月（勿冷冻）；首次开启试剂后，避光保存于2～8℃防污染环境中，可继续稳定至效期。
校准液： Randox 公司提供的系列校准品。
八、标本采血清总胆红素(T-BIL)测定血清、血浆。
样本2～8℃保存可以存放约3天，-20℃保存可以存放3个月，但只能冻融一次。
九、操作步骤1、标本编号，分离血清，依顺序置样品架上。
2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。
3、仪器校准：将校准液置试管架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值测定符合要求即可应用。
一般每3～6个月校准一次，若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准。
4、测定参数：血清量 7μl试剂Ⅰ 200μl试剂Ⅱ 50μl主波长 444nm次波长 548nm反应类型终点法；负反应测定时间 10分钟温度 37℃报告单位μmol/L5、结果计算：ΔA 样品样本中总胆红素的含量 = ------- ×标准液浓度ΔA 标准单位换算：mg/dl×17.1=μmol/L十、正常参考值5.1-20μmol/L血清总胆红素(T-BIL)测定十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再做一组质控品，共三组。
直接胆红素重氮盐法作业指导书
直接胆红素（重氮盐法）作业指导书1概述直接胆红素[1](英文缩写DBIL)又称结合胆红素。
未结合胆红胆红素用凡登伯定性试验呈直接反应，故将这种胆红素称为合胆红素的升高，说明经肝细胞处理和处理后胆红素从胆道的排泄发生障碍。
2标本的收集新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。
血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。
样本在4摄氏度可稳定7天。
采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。
3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。
不建议采用血浆标本。
3：方法原理样品中直接胆红素与重氮对氨基苯磺酸反应，生成酸性偶氮胆红素，其在570nm处光吸收值增加与杨品中直接胆红素的浓度成正比，通过测定570nm处吸光度的变化，即可计算出样品中直接胆红素的浓度。
4剂来源，配置及储存试剂来源：迪瑞试剂配置：试剂一和试剂二按100:1的比例。
即10ml 试剂一加0.1ml试剂二，混合后即成工作液试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。
5分析仪器CS-600B全自动生化分析仪分析参数：样品量25 u/l 试剂量：250 u/l测光点0--41 测定模式：1点终点法正反应分析波长：570nm/660nm(主波长/副波长)6计算方法总胆红素浓度（μmol/L）=样本管吸光度×校准液浓度（μmol/L）校正管吸光度μmol/L7 线性范围：本实验的线性范围：0---300μmol/L8参考范围成人1.7—6.8μmol/L9 失控控理1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。
2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。
3：进行仪器维护，重测失控项目。
检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。
生化全套项目含临床意义
生化全套项目和临床意义1．血清丙氨酸氨基转移酶测定2．血清天门冬氨酰基转移酶测定3．血清γ-- 谷氨酰基转移酶测定4．血清碱性磷酸酶5．血清总蛋白测定6．血清白蛋白测定7．球蛋白8． A/G9．血清总胆红素测定10．血清直接胆红素测定11．血清间接胆红素测定12．血清前白蛋白测定13．ALT/AST14．血清总胆固醇测定15．血清甘油三酯测定16．血高傲密度脂蛋白胆固醇测定17．血清低密度脂蛋白胆固醇测定18．血清载脂蛋白A1 测定19．血清载脂蛋白 B 测定20．血清载脂蛋白 a 测定21．尿素测定22．肌酐测定23．尿酸测定24．血清碳酸氢盐测定25．乳酸脱氢酶测定26．血清肌酸激酶27．血清肌酸激酶－ MB同功酶活性测定28．血清 a 羟基丁酸脱氢酶测定29．钾测定30．钠测定31．氯测定32．钙测定33．葡萄糖测定临床意义：1.血清丙氨酸氨基转移酶（ ALT 或 GPT）测定的临床意义：高升：常有于急慢性肝炎、药物性肝伤害、脂肪肝、肝硬化、心肌堵塞、心肌炎及胆道疾病等。
2.血清天门冬氨酸氨基转移酶（ AST或 GOT）测定的临床意义：高升：常有于心肌堵塞发病期、急慢性肝炎、中毒性肝炎、心功能不全、皮肌炎等。
3.血清总蛋白测定的临床意义：增高：常有于高度脱水症（如腹泻，呕吐，休克，高热）及多发性骨髓瘤。
降低：常有于恶性肿瘤，重症结核，营养及汲取阻碍，肝硬化、肾病综合征，溃疡性结肠炎，烧伤，失血等。
4.血清白蛋白测定的临床意义：增高：常有于严重失水致使血浆浓缩，使白蛋白浓度上涨。
降低：基本与总蛋白同样，特别是肝脏病，肾脏疾病更加显然。
5.血清碱性磷酸酶（ ALP）测定的临床意义：高升：常有于肝癌、肝硬化、堵塞性黄疸、急慢性黄疸型肝炎、骨细胞瘤、骨转移癌、骨折恢复期。
此外，少年少儿在生长发育期骨胳系统活跃，可使 ALP 增高。
注意：使用不一样缓冲液，结果可出现显然差异。
6.血清 r- 谷氨酰基转移酶（ GGT或 r － GT）测定的临床意义：高升：常有于原发性或转移性肝癌、急性肝炎、慢性肝炎活动期肝硬化、急性胰腺炎及心力弱竭等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血清直接胆红素（D-BIL）测定
1. 实验原理
直接胆红素与2,4-二氯苯胺重氮盐形成重氮化合物，在酸性条件下呈红色。
2. 标本：
2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。
3. 标本存放：15～25℃保存可稳定2天；2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不
可反复冻融！。
4. 标本运输：常温条件下避光保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。
6. 实验材料
6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒：141 0827170 1 试剂＋试剂2
6.1.1 试剂组成
试剂1：16×64ml
EDTA-Na2 0.07mmol/L
氯化钠 6.6g/L
氨基磺酸 70mmol/L
试剂2：6×16ml
2,4-二氯苯胺重氮盐 0.09mmol/L
盐酸 130mmol/L
EDTA-Na2 0.02mmol/L
6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。
试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。警告！腐蚀剂！不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如果
接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。
6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校
准品和质控品.SOP文件
6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件
7. 仪器：奥林巴斯AU680生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数：参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2 仪器操作步骤：参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪操作规程.SOP文件
检验结果的判断与分析
10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告
限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法 以TruCal U复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报
告可靠的检测结果无需手工计算，以μmol/L报告。手工测定计算方法为：
△Au
直接胆红素(μmol/L) =--------×校准液浓度
△As
12. 参考值范围：≤6.8mol/L
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己
的参考值。
13. 临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白
蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯
由胆管排入肠道。
溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形
成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞
后以及出生后红细胞破碎增多，使60～70%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总
胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆
红素的差来估计游离胆红素的含量。
14. 操作性能
14.1 线性范围：1.7～171mol/L
14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5，AU680批内精密度小于4%或SD≤0.04，总精密度
小于5%或SD≤0.07。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
批内精密度 n=20 x (μmol/L) s (μmol/L) CV (%) 批间精密度 n=20 x (μmol/L) s (μmol/L) CV
(%)
样品1 6.0 0.20 3.34 样品1 6.2 0.19 3.12
样品2 12.8 0.12 1.00 样品2 13.0 0.19 1.46
样品3 36.4 0.26 0.71 样品3 35.4 0.46 1.30
14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对85个样品进行DBIL检测，将检测结果
作方法学比较，其统计结果如下：y=0.95x+0.68μmol/L；r=0.995。
14.4 灵敏度：1.7mol/L。
14.5 病人结果可报告范围：1.7～171μmol/L
15 超出范围结果处理 本法线性上限为171mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶
液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。
16. 病危报警值的处理 无。
17. 方法局限性
17.1 本法线性上限为171mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1:1稀释，重新
测定，结果乘以2。
17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度≤1704μmol/L，甘油三酯浓度≤22.6mmol/L时没有观察到干扰。
血红蛋白浓度≥0.50g/L将产生干扰。
18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
19. 参考文献：
Tietz, N.W.(Ed), Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd Edition, W.B. Saunders,1987.
Van den Bergh, A. and Mueller, P., Biochem Z,77:90,1916
NCCLS, Interference Testing in Clinical Chemistry, EP7-P,1986.
Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, 4th Edition, AACC Press, 1995.
NCCLS, Evaluation Protocol EP5-T2,1992.
Rand, R. N., DI Pasque, A., Clin Chem 1962; 8: 570
Henry, J., Cannon, D. C., Winkelmann, J. V., Clinical chemistry, principles and technics, Harper
& Row Publishers Ins., Hagerstown Maryland, 1974:1042
Thomas, L.: Labor and diagnose, 4th edition, Die Medizinische Verlagsgesellschaft, Marburg, 1992:
235
20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。