(1,3)-β-D-葡聚糖实验干扰因素的研究进展
（1，3）-β-D-葡聚糖实验干扰因素的研究进展
（1，3）-β-D-葡聚糖是一种重要的多糖类化合物，具有广泛的应用价值。近年来，
随着对（1，3）-β-D-葡聚糖研究的深入，人们发现实验中存在多种可能的干扰因素，这
些因素可能影响（1，3）-β-D-葡聚糖的提取、分离和检测结果。研究人员对（1，3）-β-D-葡聚糖实验干扰因素的研究也逐渐受到关注。本文将从温度、pH值、离子浓度和共存物质等几个方面综述（1，3）-β-D-葡聚糖实验干扰因素的研究进展。
一、温度
温度是影响（1，3）-β-D-葡聚糖提取和检测结果的重要因素。一般来说，提取（1，3）-β-D-葡聚糖的温度过高会导致其降解，从而影响实验结果。在进行葡聚糖提取实验时，需要注意温度控制，避免过高温度对（1，3）-β-D-葡聚糖的影响。
二、pH值
三、离子浓度
离子浓度也是影响（1，3）-β-D-葡聚糖实验结果的重要因素之一。在实验过程中，
高浓度的离子可能会与葡聚糖发生离子交换反应，导致葡聚糖的沉淀或变性，从而影响实
验结果。需要在实验中对离子浓度进行控制，以减少其对实验结果的干扰。
四、共存物质
除了上述因素外，实验中的共存物质也可能对（1，3）-β-D-葡聚糖的提取和检测结
果产生干扰。有些共存物质可能与葡聚糖发生竞争吸附或键合，导致葡聚糖的损失或检测
结果的偏差。在进行葡聚糖实验时，需要对样品中的共存物质进行充分考虑，采取合适的
方法将其去除或减少其对实验结果的干扰。
温度、pH值、离子浓度和共存物质等因素都可能影响（1，3）-β-D-葡聚糖的提取和检测结果。在进行葡聚糖实验时，研究人员需要充分考虑这些因素，并采取相应的措施来
减少它们对实验结果的干扰，以确保实验结果的准确性和可靠性。在今后的研究中，还需
要进一步深入探讨这些干扰因素对葡聚糖实验结果的影响机制，为葡聚糖的提取和检测提
供更为科学和有效的方法。
真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定试剂盒(显色法)产品技术要求kehe
真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定试剂盒（显色法） 适用范围：用于体外定量测定人血清样本中真菌(1-3)-β-D葡聚糖的含量。1.1 规格 24人份/盒、48人份/盒 1.2 主要组成成分 校准品靶值批特异，详见靶值单 质控范围批特异，详见靶值单 2.1 外观 反应主剂为白色冻干块状物，样品处理液、溶解液和主剂复溶液为无色透明液体。 2.2 装量 处理液、溶解液和主剂复溶液装量不小于标示量。 2.3 准确度
试剂盒的回收率须在85%～115%范围内。 2.4 重复性 检测浓度为125pg/mL的溶液，重复检测10次，其变异系数（CV）值应不大于10％。 2.5 线性 2.5.1在浓度[31.25,500]pg/mL范围内，其线性相关系数的绝对值r≥0.990; 2.5.2在浓度[31.25 ,125）pg/mL范围内，其线性绝对偏差的绝对值不大于12.5 pg/mL；在浓度[125 ,500]pg/mL范围内，其线性相对偏差的绝对值不大于10%。 2.6 空白限 试剂盒的空白限不大于16 pg/mL。 2.7 溯源性 根据GB/T21415的有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定等内容，溯源至企业工作校准品。 2.8 质控品赋值有效性 检测质控品，检测结果应在质控范围内。 2.9 批内瓶间差 同一批号的10个待检试剂盒对浓度为250pg/mL的标准溶液进行测试，重复10次，瓶间差的变异系数不得大于10%。 2.10 批间差 3个批号的试剂盒检测结果的变异系数应不大于15％。 2.11 稳定性 2.11.1 2℃～8℃保存，有效期12个月，取过有效期3个月以内的试剂盒进行测定，应符合2.3、2.3、2.5、2.6、2.7、2.8的要求； 2.11.2校准品溶解后，-20℃保存10天后进行测定，应符合2.3的要求； 2.11.3质控品溶解后，-20℃保存10天后进行测定，应符合2.8的要求； 2.11.4反应主剂溶解后，立即冻存至-20℃保存7天后进行测定，应符合2.3、2.5的要求。
β-葡聚糖研究进展
?-葡聚糖的研究进展 程彦伟李魁赵江 燕麦β－葡聚糖是一种存在于大燕麦皮中的天然非淀粉类水溶性植物糖，其基本结构是由D葡萄糖以β14，β1-3糖苷键连接而成的线性多糖，这两种糖苷键的比例大致为7：3。 燕麦β－葡聚糖是一种水溶性膳食纤维，因其具有的黏性阻碍淀粉、蛋白质等物质的消化和吸收，并可增殖消化道有益菌，所以可对人体具有一些极为有利的生理功能：具有显著的降血脂、降血糖及提高免疫能力，维持肠道微生态环境等。另外，它还能加快确定人群的免疫细胞。对细菌感染的反应并控制住细菌感染的位置，使感染面尽快恢复；作为化妆品的有效成分，可以提高皮肤抗过敏能力，激活免疫功能，延缓皮肤衰老。燕麦水溶性膳食纤维和燕麦葡聚糖，可有效降低餐后血糖浓度和胰岛素水平，降低胆固醇和预防心血管疾病.燕麦纤维食品易被人体吸收，并且因含热量很低，既有利于减肥，又适合心脏病,高血压和糖尿病患者食疗的需要。 降低胆固醇 早在多年，科学家就发现bata一葡聚糖能够减少肠胃吸收脂肪酸的速率,降低人体胆固醇的合成.随着bata一葡聚糖研究的日趋成熟，学者们先后在动物及人体实验水平上进行了大量的实验,证实了bata一葡聚糖在降低胆固醇和低密度脂蛋白方面具有特 异的生理功能.科学家发现bata一葡聚糖对胆固醇的影响主要在于能显著降低血浆中 总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDI一TC),而对高密度脂蛋白(HDL)和甘油三醋(TG)没有明显影响仁。燕麦葡聚糖对高血脂人群有明显的降低胆固醇的作用。 有关燕麦葡聚糖降低胆固醇的机理目前有四种假说: ①可结合胆汁酸,增加了胆汁酸的排泄,从而降低胆汁酸水平和血浆胆固醇浓度。 ②可被肠道中微生物发酵而产生短链脂肪酸，可抑制肝脏中胆固醇的合成。 ③可促进LDL一C分解。 ④可在消化道中形成高粘度环境，阻碍消化道对脂肪，胆固醇和胆汁酸的吸收。 降血糖 每天食用葡聚糖燕麦食品后，患者血糖水平可降低约50%，使用燕麦食品有显著降低血糖作用燕麦汗葡聚糖可通过降低血脂含量，改善血液流动性能,加快糖类成分在吸收利用过程中的转运速度和效率，同时对糖尿病所并发的肝肾组织病变有良好的修复作用，并且可有效降低肝糖原的分解，从而导致血糖降低。 增强免疫力 燕麦葡聚糖具有免疫调节作用,燕麦p一葡聚糖可使小鼠淋巴细胞增值,增强小鼠 抵抗细菌侵袭的能力；可刺激小鼠腹膜巨噬细胞释放肿瘤坏死因子(TNF一ALPHAhe)和白介素一1(In-terlukinIL一1)及巨噬细胞p338DI的释放，经灌胃或肠外注射燕麦葡聚糖,小鼠血清免疫球蛋白数量明显增加，说明燕麦葡聚糖具有提高小鼠免疫力的作用。 抗癌功能
1,3-β-D-葡聚糖(BG)检测侵袭性真菌感染诊断中的影响因素分析
1,3-β-D葡聚糖(BG)在检测侵袭性真菌感染诊断中 的影响因素分析 近20年来，由于大剂量广谱抗生素、抗肿瘤药物的长期应用，器官移植及造血干细胞移植等治疗方法的完善，各种导管在体内的介人以及恶性肿瘤、艾滋病等免疫功能低下患者的不断增加，侵袭性真菌感染的发病率明显上升。侵袭性真菌感染（IFI）临床常无特异性，而真菌实验室诊断方法中镜检、培养、血清学诊断、组织病理学检查和分子生物学方法的检出率较低，G试验检测时间短其为非侵人手段在临床上广受关注。 目的及意义:分清1,3-β-D-葡聚糖检测（G试验）干扰因素，提高准确性。 G试验是及激活试剂中鲎变形细胞裂解物中的凝固酶（G因子），形成凝固蛋白，根据反应物的浓度变化对1,3-β-D葡聚糖浓度进行定量检测。G试验是念珠菌感染的首选检查方法，检测速度快。 G试验是新的真菌抗原检测方法、念珠菌感染首选检查方法，在深部真菌感染早期诊断有重要意义，检查结果作为方法学评价标准，弥补了传统病理学及培养的不足，提高IFI检测率，缩短检查时间，早期治疗赢得时间为临床合理用药提供帮助。 G试验标准值：＜10pg/ml为阴性，10pg/ml-20pg/ml是观察，＞20pg/ml 阳性。一般两次及以上G试验阳性及临床特征，并排除干扰因素就可以确定真菌感染。 BG升高原因：1，3-β-D葡聚糖(（1，3）-β-D-glucan,BG)广泛存在于多种真菌细胞壁中，是真菌的特有多糖成分，包括念珠菌、曲霉菌、镰刀菌及卡氏肺孢子菌．占其干质量的50％以上，细菌、人和病毒都不含该成分,真菌菌丝生长的过程中、进入人体体液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理后，1，3-β-D葡聚糖可从细胞壁中释放出来，使血液和体液(如尿、脑脊液，腹水，胸水等)中1，3-β-D葡聚糖含量升高，故检测血液中的BG可以协助侵袭性真菌感染（IFI）的诊断，当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速清除 1,3-β-D-葡聚糖。 尽管目前BG检测已成为与真菌培养联合诊断IFI 的重要方法，但是BG检测用于诊断IFI仍存在很多不能忽视的问题。
1-3 b-D-Glucan葡聚糖
Does ampicillin-sulbactam cause false positivity of (1,3)-beta-D-glucan assay? A prospective evaluation of 15 patients without invasive fungal infections* 1. Gokhan Metan1, 2. Cigdem Agkus1, 3. A. Nedret Koc2, 4. Ferhan Elmali3 and 5. Malcolm A. Finkelman4 Article first published online: 1 NOV 2011 DOI: 10.1111/j.1439-0507.2011.02131.x ? 2011 Blackwell Verlag GmbH Issue Mycoses Volume 55, Issue 4, pages 366–371,July 2012 How to CiteAuthor InformationPublication History 1. ? A part of this study was presented as a poster at 16th International Symposium on Infections in the Immunocompromised Host, P71, Budapest, 2010. SEARCH ?Advanced > ?Saved Searches >
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真菌(1-3)-β-d葡聚糖检测操作sop文件
真菌（1-3）-β-D葡聚糖测定规范操作 1.目的 建立真菌（1-3）-β-D葡聚糖检测标准操作规范，保证实验结果的准确性。 2.授权操作人 经培训合格的微生物实验室检验人员。 3.实验原理 （1-3）-β-D葡聚糖检测原理：真菌（1-3）-β-D葡聚糖激活酶反应主剂中的G因子后形成凝固蛋白，根据其所引起的浊度变化对真菌（1-3）-β-D葡聚糖浓度进行定量测定。 4．产品性能指标 4.1 灵敏度10pg/ml 4.2 精密度批间CV≤10% 。 4.3 准确性回收率75-125%。 4.4 标准曲线相关系数r绝对值≥0.980 5．实验组成 5.1实验仪器及器具： MB-80微生物快速动态检测系统、洁净工作台、低速离心机、恒温仪，20~200μl 加样器、100~1000μl加样器、旋涡混合器、定时器。 5.2实验耗材： 200μl无热原吸头、1000μl无热原吸头、无热原平底试管、无热原真空采血管。 5.3试剂盒组成： 真菌（1-3）-β-D 葡聚糖检测试剂盒（光度法）： 试剂盒包括反应主剂和样品处理液。 6．工作环境 相对湿度：20%~80%； 温度控制：10~30℃； 电源电压：220V±10%，50Hz±2%。 7．标本采集及保存 7. 1检测样本： 血液、脑脊液、胸腹水、肺泡灌洗液等。 7.2采集要求： 采样过程要求无菌操作，用专用的无热原真空采血管（肝素类抗凝）。 常规病人早上用药治疗前采血/取样（血透患者透析前采血）。 7.3样本保存： 样本采集后应在3000转/分进行离心，若不能及时检测，应将血浆转移至无热原转移
管内，在-20℃冰箱中冷冻保存，一周内使用。 8．操作程序 8.1 打开MB-80微生物快速动态检测系统主机、电脑及恒温仪预热30min。 8.2 打开MB-80微生物快速动态检测系统软件，录入病人信息、样本种类及检测项目等 信息后点击采集。 8.3 血液前处理过程，无菌操作，用专用无热原真空采血管（肝素类抗凝）抽取静脉血 4ml轻轻混匀，按转速3000r/min进行离心1分钟，得到富含血小板血浆。 8.4 取上述富含血小板血浆100μl，加入到样品处理液中，轻轻摇匀10秒后插入恒温仪 加热区中进行70℃干热10min。 8.5干热结束后，将前处理液冷却5min，至室温后取出（取出时切忌震荡）。 8.6 取上述前处理液中上清液200μl加入到反应主剂中，轻轻混匀（一般混匀10秒即可）， 待完全溶解至透明后，全部移液至平底试管中(不要产生气泡)，立即插入MB-80微生物快速动态检测系统中进行检测。 8.7 反应结束后仪器自动计算结果并保存。 待测血浆样品制备、检测示意图 9．操作注意事项 9.1预热采集 在进行试验之前，仪器一定要提前预热30min，达到工作温度后，按要求填写表头信息，完毕后点击采集，使仪器处于采集状态后再进行试验。 9.2 样本预处理
β-d-葡聚糖和β-葡聚糖
β-d-葡聚糖和β-葡聚糖 β-d-葡聚糖和β-葡聚糖是两种常见的多糖类物质，它们在生物、医药、食品等领域具有广泛的应用价值。本文将分别介绍这两种多糖的特性、应用及相关研究进展。 我们来了解一下β-d-葡聚糖。β-d-葡聚糖是由葡萄糖分子通过β-1,4-糖苷键连接而成的多糖，具有较高的生物相容性和生物可降解性。它可以从多种来源获取，如纤维素、菌类、海藻等。β-d-葡聚糖具有很强的保水性能，可以吸附水分并形成胶体溶液，因此被广泛应用于医药保健品、化妆品、食品等领域。在医药领域，β-d-葡聚糖可以作为药物的载体，提高药物的水溶性和稳定性，延缓药物释放，提高药效。此外，β-d-葡聚糖还具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等生物活性，因此在抗癌药物、免疫疗法等方面有着广阔的应用前景。 接下来，我们来了解一下β-葡聚糖。β-葡聚糖是由葡萄糖分子通过β-1,3-糖苷键连接而成的多糖，与β-d-葡聚糖相比，它的结构稍有不同。β-葡聚糖存在于多种生物体内，如真菌、藻类、昆虫等，是一种常见的天然多糖。β-葡聚糖具有较好的生物活性和生物相容性，具有增强免疫力、调节血糖、降血脂等作用。因此，β-葡聚糖被广泛应用于保健品、药物和食品添加剂等领域。研究表明，β-葡聚糖还具有抗菌、抗病毒、抗氧化等生物活性，对于预防感染和促进伤口愈合具有一定的作用。
近年来，β-d-葡聚糖和β-葡聚糖的研究进展非常迅速。一方面，研究人员对其结构进行了深入研究，探索了不同来源的β-d-葡聚糖和β-葡聚糖的结构特点及其对生物活性的影响。另一方面，研究人员通过改变合成方法、调节分子结构等手段，提高了β-d-葡聚糖和β-葡聚糖的生物活性和稳定性。此外，还有许多研究聚焦于β-d-葡聚糖和β-葡聚糖的生物合成机制和代谢途径，以期进一步揭示其生物学功能和应用潜力。 总结起来，β-d-葡聚糖和β-葡聚糖是两种重要的多糖类物质，具有广泛的应用前景。它们在医药、保健品、化妆品、食品等领域都有着重要的作用。当前，研究人员正在深入探索它们的结构特点、生物活性及其影响因素，并通过改进合成方法和调节分子结构，提高其性能和应用价值。相信随着相关研究的不断深入，β-d-葡聚糖和β-葡聚糖将在更多领域展现出广阔的应用前景，为人类的生活和健康带来更多的益处。
真菌葡聚糖检测对血液恶性肿瘤患者早期深部真菌感染的诊断效能
真菌葡聚糖检测对血液恶性肿瘤患者早期深部真菌感染的诊断 效能 李睿;任然;熊大迁 【摘要】目的探讨血浆(1,3)-β-D-葡聚糖检测在早期诊断血液恶性肿瘤患者侵袭性真菌病(IFD)中的价值.方法选择成都中医药大学附属医院2014年10月年至2016年4月收治的非粒细胞缺乏血液恶性肿瘤患者进行筛选分组.确诊血液恶性肿瘤患者160例,其中80例确诊侵袭性真菌感染者为IFD组,非IFD患者80例.采用MB-80微生物动态快速检测系统测定IFD组和非IFD患者血浆(1,3)-β-D-葡聚糖含量,采用受试者工作特征曲线(ROC)评估G试验对IFD的诊断价值.结合真菌培养鉴定,统计不同类型真菌引起的深部感染(1,3)-β-D-葡聚糖水平的差异.结果 IFD组(1,3)-β-D-葡聚糖含量显著高于非IFD组(n g/L:346.54±204.95比43.21±15.11,P ＜0.05).G试验单独诊断IFD的ROC曲线下面积(AUC)、阳性预测值、阴性预测值分别为0.91、86.71％、90.47％;针对血液恶性肿瘤IFD患者,最佳诊断阈值为≥70 ng/L时,诊断敏感度为90％,特异度为88.75％.G试验诊断IFD的时间较传统临床诊断明显缩短(d:4.87±2.55比7.13±4.42,P＜0.01).80例IFD患者40例分离出真菌,其中念珠菌属36株(占90％),(1,3)-β-D-葡聚糖均值为333.55 ng/L;曲霉菌4株(占10％),(1,3)-β-D-葡聚糖均值＞1 000 ng/L.不同念珠菌之间(1,3)-β-D-葡聚糖水平比较差异无统计学意义(P＞0.05),念珠菌属与曲霉菌属之间(1,3)-β-D-葡聚糖水平比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1,3)-β-D-葡聚糖检测是一种快速、准确、简便的诊断IFD方法,对于IFD的早期诊断有重要价值,对于区分念珠菌还是曲霉菌引发的深部真菌感染也有一定临床价值. 【期刊名称】《实用检验医师杂志》
G试验与GM试验的区别与临床意义
G试验与GM试验的区别与临床意义 什么是G试验 （1-3）-β-D葡聚糖是真菌细胞壁上的主要成分，也是真菌细胞的特有成分，能激活鲎（Limulus）变形细胞裂解物提取物，即激活反应主剂中的G因子、凝固酶原等，发生酶的级联反应从而引起吸光度值的变化，根据检测其溶液吸光度变化对真菌（1-3）-β-D葡聚糖浓度进行定量测定，因而称为G试验。用于体外定量测定人血清中真菌（1-3）-β-D葡萄糖聚体的含量。临床上主要用于辅助诊断侵袭性真菌感染。 一、真菌（1-3）-β-D葡聚糖检测的临床意义 试验主要检测真菌的细胞壁成分(1,3)-β-D-葡聚糖。而其他微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液都不含这种成分。因此在机体的体液中检测到(1-3)-β-D葡聚糖是诊断深部真菌感染的有效依据。即使不能确定菌种，但能肯定是否有真菌感染。指导临床科学合理的使用抗真菌药物，因此可以作为侵袭性真菌感染的早期诊断指标。 1、早期诊断：早于临床症状及影像学证据5-8天提示阳性，便于早发现，早治疗。 2、快速诊断：检测时间由培养的数天缩短至1-2小时为临床提供诊断依据，利于及时治疗。 3、动态检测：定期检测，评价药物治疗效果，缩短住院时间，帮助病人愈后。 4、常规筛查：高达97.73%的阴性预测值，可将G试验作为常规。 二、G试验注意事项 1.使用无菌无热原的采血管。如果节假日停做，当日不能检测的标本放置在2-8℃冰箱保存不超过24小时。 2.干扰因素：①应用纤维素膜进行血液透析患者；②某些纱
布或其它医疗物品中含有葡聚糖；③静脉制剂（白蛋白，凝血因子，免疫球蛋白等）含有葡聚糖；④某些细菌败血症患者（尤其是链球菌败血症）；⑤抗肿瘤药物（香菇多糖，裂殖菌多糖）； ⑥磺胺类药物；⑦蘑菇类食物。 什么是GM试验 GM试验是检测成人血清样本中的曲霉菌半乳甘露聚糖。用于高危人群的侵袭性曲霉病的辅助诊断。其主要检测物质是半乳甘露聚糖（Galactomannan，简写GM）抗原。半乳甘露聚糖是曲霉菌特有的细胞壁多糖成份，当机体感染曲霉菌后，随着菌丝生长，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放出来，是最早释放的抗原，被认为是一种可靠的侵袭性曲霉菌感染早期诊断的生物标记物。 一、GM试验临床意义 侵袭性曲霉病IA系指真菌侵入人体，在组织器官或血液中生长.繁殖，并导致炎症反应及组织损伤的感染性疾病。由于抗生素的滥用侵袭性曲霉病的发病率逐年增高。有中性粒细胞缺乏。器官移植及血液病/恶性肿瘤.慢性阻塞性肺病。免疫缺陷等高危因素，同时有肺部影像学感染性病变及肺部相关感染症状的人群，为侵袭性曲霉病的高危人群。其中IA在血液病和造血干细胞移植患者中死亡率高达70%-90%，造成这种死亡率主要原因在于不能在病程早期对IA进行检测诊断，以至患者得不到及时有效的治疗死亡，因此选择早期检测诊断方法具有重要的意义。半乳甘露聚糖是曲霉细胞壁的主要成分，被认为是曲霉感染后最早释放入血的标志性抗原，其释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。 二、GM试验注意事项 1.如样本不能及时检测，需冷藏与2-8度，不超过48小时。如48小时内不能检测标本，需-20度以下保存，避免反复冰溶。
（1，3）-β-D葡聚糖和曲霉菌半乳甘露聚糖抗原联合检测对侵袭性真菌感染的诊断价值
（1，3）-β-D葡聚糖和曲霉菌半乳甘露聚糖抗原联合检测对 侵袭性真菌感染的诊断价值 张淑瑛;卢小东;王玉月 【摘要】目的：评价（1，3）-β-D 葡聚糖[（1，3）-β-D-glucan assay，G test]和曲霉菌半乳甘露聚糖（Aspergillus galacto-mannan，GMtest）抗原联合检测对侵袭性真菌感染（invasive fungal infection，IFI）的临床诊断价值。方法：根据欧洲癌症研究治疗组织和真菌病研究组（EORTC ／MSG）的诊断标准结合我国血液病和恶性肿瘤患者 IFI 的诊断标准与治疗原则，将临床72例高度怀疑IFI 的患者分为临床诊断组32例，非感染组40例，采集外周血进行 G 试验和GM试验检测。结果：G 试验和 GM试验的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Youden 指数分别为68．75％、80．0％、73．33％、76．19％、0．4875和62．50％、82．5％、74．07％、73．33％、0．45；G／GM试验敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Youden 指数分别为90．63％、72．5％、72．5％、90．63％、0．6313。经统计学分析，单独检测时两试验敏感性、特异性均无显著性差异，而联合检测可提高敏感性。结论：G 试验和 GM 试验对 IFI 有一定诊断价值，而联合检测大大提高了敏感性，对 IFI 的诊断更有价值。 【期刊名称】《江苏大学学报（医学版）》 【年(卷),期】2014(000)006 【总页数】3页(P495-496,500) 【关键词】(1, 3)-β-D葡聚糖;半乳甘露聚糖;侵袭性真菌感染
真菌(1-3)-β-D葡聚糖
附1真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测标准操作规程 1.目的 规范真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测的操作规程，保证结果准确性。 2.原理 实验条件下，来源于某些真菌细胞壁的(1-3)-β-D葡聚糖能够特异性地激活本试剂盒反应试剂的酶促凝集系统，使反应溶液的透光度发生变化。利用(1-3)- β-D葡聚糖标准品建立β-D-葡聚糖生物效应与透光度变化关系的标准曲线，便可定量地测定人血液的(1-3)- β-D葡聚糖含量。 3.试剂 真菌（1-3）-β-D葡聚糖检测试剂盒，湛江安度斯生物有限公司。 试剂盒包装规格：20人份/盒。 复溶后的试剂溶液应在10分钟内使用。若当次试验有剩余，可将剩余的试剂溶液置-20℃以下冷冻保存，一周内使用。不能反复冻融试剂溶液。 4.检测设备：LKM动态试管检测仪。 5.实验用具：250 μl无热原吸头、20-200 μl移液器、75℃试管恒温仪、旋涡混合器、塑料试管架、 无热原真空采血管（肝素抗凝剂）。 6.标本采集及送检要求 6.1标本采集要求 6.1.1采集过程要求无菌操作，用指定的肝素类抗凝、无菌、无β葡聚糖采血管； 6.1.2常规住院病人早上用药前空腹采血，血透患者透析前采血。 6.2标本的送检和保存要求 标本采集后应在半小时内离心，4小时内检测完。若当日不能及时检测的标本应将离心后的血浆转移至无β葡聚糖的容器内-20℃以下冷冻保存，一周内使用。 7.实验操作 7.1在试验开始前，先开启LKM动态试管检测仪，预热，一段时间后发出哔的一声，试管仪温度 达到37℃，待用； 7.2取本试剂盒所配的无热原真空采血管取受试者静脉血1～2 ml，以400 g离心10分钟； 7.3取富含血小板的血浆100 μl，加到样品稀释瓶中，在旋涡混合器上轻轻混匀，然后插入75℃ 试管恒温仪中加热10分钟； 7.4加热10分钟后，将样品稀释瓶从75℃试管恒温仪中取出，使其降至室温即可，即为1:10稀释的样品供试溶液； 7.5取β-G试剂1支，开启； 7.6取β-G试剂复溶液1支，开启后用移液器取0.25 ml加入β-G试剂中，轻轻摇匀，澄清后得试 剂溶液备用；
真菌β-D-葡聚糖检测与真菌感染诊断之欧阳美创编
真菌β-D-葡聚糖检测与真菌感染 一、概述 经研究表明，(1-3)-β-D-葡聚糖是一种广泛存在于真菌细胞壁的抗原成分, 占其干燥重量的80%～90%，其它微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有。深部真菌感染患者中血浆(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高,两者存在相关性。 当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化代谢后，（1-3）-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液或其它体液中（1-3）-β-D葡聚糖含量增高。当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速对其清除。而在浅部真菌感染中，（1-3）-β-D葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高，它在血液及无菌体液中的存在可以很大程度上视为IFI （深部真菌感染）的标志。 二、深部真菌感染的诊治 近年来，由于造血干细胞移植、实体器官移植的广泛开展、高强度免疫抑制剂和大剂量化疗药物的应用以及各种导管的体内介入、留置等，临床上侵袭性真菌感染(invasive fungal infections，IFI)的患病率明显上升。IFI也日益成为导致骨
髓及器官移植受者、接受化疗的恶性血液病和恶性肿瘤患者、AIDS以及其他危重病患者的严重并发症及重要死亡原因之一。由于缺少有效的早期诊断手段，深部真菌感染病死率居高不下。对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断，及早用药治疗。 常规病原学诊断“微生物培养”可为临床提供直接的诊断依据，但其培养方法耗时长（4-7天），不适宜用作早期诊断。并且，随着光谱抗生素、抗菌药物的大量应用，使得培养的阳性率极低。常用的免疫学方法，也由于抗原抗体反应的特异性差，往往对某一疑似真菌感染患者要作多种真菌抗原或抗体检测，既费时又不经济，而且当所用药盒的抗原谱或抗体谱不全时也极易造成漏诊。对一些以往接触过相应真菌抗原的个体，作抗体检测时还会出现阳性反应，因而对抗体的检测往往要求作动态观察才能作出诊断，期末属性较差。 有研究报道血清葡聚糖在念珠菌血症时明显升高，将其用于念珠菌血症的早期诊断明显优于传统的培养法和血清学诊断试验。虽然检测（1-3）-β-D葡聚糖只能提示有无真菌侵袭性感染，不能确定为何种真菌，但也可能转化为一种优势。因近年来，一些罕见的条件致病真菌也可引起深部感染，这就要求一种能迅速确定有无深部真菌感染的方法。因系统抗真菌药物种类较少，抗菌谱较广，且不因真菌种类而异，当检测到标本中
体外真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测影响因素探讨
体外真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测影响因素探讨 摘要】目的：探讨真菌细胞壁（1-3）-β-D葡聚糖体外检测的影响因素。方法： 实验组：将白色假丝酵母菌分别用正常血浆、无热原蒸馏水、0.9%的生理盐水、0.02%两性霉素B生理盐水和0.75%氟康唑生理盐水稀释为0.05麦氏单位（含白 色假丝酵母菌1×107CFU/ml）,对照组：将上述各液稀释100倍，采用免疫沉淀试 验（G试验）检测其10次（1-3）-β-D葡聚糖含量，并进行体外培养，以此探讨 生理盐水、抗真菌药物对（1-3）-β-D葡聚糖体外检测的影响。结果：实验组中，正常血浆葡聚糖含量为（92.5±14.2）ug/L，蒸馏水组含量为（94.5±15.2）ug/L， 生理盐水组含量为为（93.6±14.8）ug/L，两性霉素B组含量为（95.5±16.2）ug/L, 氟康唑组（97.3±16.8）ug/L,经统计检验组内结果间无显著性差异（P＞0.05）。对照组中：正常血浆含量为（6.8土2.7）ug/L，蒸馏水组含量为（6.1±2.4）ug/L， 生理盐水组含量为为（7.3±2.0）ug/L，两性霉素B含量为（6.8±2.5）ug/L,氟康唑 组（6.7±2.8）ug/L,经统计检验组内间结果无显著性差异（P＞0.05）。实验组与对照组比较有显著差异（P＜0.05）。结论:体外真菌细胞壁（1-3）-β-D葡聚糖含量 变化与液体介质无关，与真菌治疗药物无关，与真菌数量密切相关。 【关键词】（1-3）-β-D葡聚糖；体外检测；两性霉素B氟康唑 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）16-0043-02 【Abstract】Objective To study the influence factors of the detection of fungal cell wall 1,3-β-D-glucan in virto. Methods The experimental group: the Candida albicans were diluted with normal plasma, Pyrogen-free distilled water, 0.9% of physiological saline, 0.02% amphotericin B saline, and 0.75% fluconazole saline as 0.05 McIntosh unit (containing candida albicans 1×107CFU/ml). The control group: diluting the precursory solutions to 100 times. Measuring the concentration of 1,3-β-D-glucan in the solutions 10 times through G test , and culturing the Candida albicans in each solution in virto to study the influence of antifungal drugs, physiological saline on the testing of 1,3-β-D-glucan in vitro. Results The experimental group: the concentration of 1,3-β-D-glucan in normal plasma, Pyrogen-free distilled water, 0.9% of physiological saline, 0.02% amphotericin B saline, and 0.75% fluconazole saline were (92.5±14.2) ug/L，(94.5±15.2) ug/L, (93.6±14.8) ug/L，(95.5±16.2) ug/L, and (97.3±16.8) ug/L. The differences in the group are not significant by statistics test (P>0.05). The control group: the concentration of 1,3-β-D-glucan in normal plasma, Pyrogen-free distilled water, 0.9% of physiological saline, 0.02% amphotericin B saline, and 0.75% fluconazole saline were (92.5±14.2) ug/L，(94.5±15.2) ug/L，(93.6±14.8) ug/L，(95.5±16.2) ug/L, and (97.3±16.8) ug/L. The differences in the group are not significant by statistics test (P>0.05). There were significant differences between the experimental group and the control group (P< 0.05). Conclusion The concentration of Fungal 1,3-β-D-glucan in virto has noting to do with liquid mediums or antifungal drugs, but is closely related to the number of fungi. 【Key words】1,3-β-D-glucan; Detection in virto;Amphotericin B; Fluconazole 真菌(1-3)-β-D葡聚糖的检测是诊断深部真菌感染的快速准确的方法，其特异 性和敏感性已经得到一致的公认[1.2.3.4.5]。但是据报道生物大分子和头孢菌素等 对检测结果有影响[3.4.5]，常常出现假阳性、假阴性结果。为了观察体外检测过 程中是否受到常见介质的影响。我们选择了正常血浆、无热原蒸馏水、0.9%的生
血浆(1-3)-β-D-葡聚糖在新生儿侵袭性真菌感染中的诊断价值
血浆(1-3)-β-D-葡聚糖在新生儿侵袭性真菌感染中的诊断价 值 黄鹂莺姿;邓丽娟;付翔;陈薇 【摘要】目的:探讨血浆(1-3)-β-D-葡聚糖在诊断新生儿侵袭性真菌感染中的临床价值.方法:选择2012年12月至2013年12月确诊为侵袭性真菌感染的新生儿22例作病例组,59例同年龄段非真菌感染新生儿作对照组.采用微生物快速动态检测系统检测两组新生儿血浆(1-3)-β-D-葡聚糖中的含量.以血浆100 pg/ml(1-3)-β-D-葡聚糖为界值,分析检测敏感度、特异度.结果:病例组血浆(1-3)-β-D-葡聚糖为(214.8±149.4) pg/ml,高于对照组(67.2±27.1) pg/ml,差异有统计学意义(P＜0.05).以100 pg/ml为界值,血浆(1-3)-β-D-葡聚糖检测灵敏度为81.8％,特异度83.1％.结论:血浆(1-3)-β-D-葡聚糖是辅助诊断新生儿侵袭性真菌感染的良好指标.【期刊名称】《华夏医学》 【年(卷),期】2016(029)001 【总页数】3页(P42-44) 【关键词】(1-3)-β-D-葡聚糖;诊断;新生儿侵袭性真菌感染 【作者】黄鹂莺姿;邓丽娟;付翔;陈薇 【作者单位】桂林医学院研究生学院,广西桂林541004;桂林医学院附属医院门诊部,广西桂林541001;桂林医学院附属医院门诊部,广西桂林541001;桂林医学院附属医院门诊部,广西桂林541001 【正文语种】中文
【中图分类】R446 新生儿侵袭性真菌感染（neonatal invasive fungal in⁃fections，NIFI）是指侵袭新生儿深部组织、内脏和全身的真菌感染，包括深部组织感染及真菌血症，临床表现无明显特征，具有诊断困难、病情凶险、治疗周期长、病死率高等特点。由于传统的真菌培养阳性率低、耗时较长，加之新生儿采血困难等原因，致使新生儿侵袭性真菌感染的早期诊断极为困难。血浆（1-3）-β-D-葡聚糖检测也叫G试验，其 原理是利用真菌细胞壁（1-3）-β-D-葡聚糖能够特异性地激活酶促凝集系统，使 反应溶液的透光度发生变化。这是目前临床上常用的快捷辅助早期诊断真菌的方法。因此，检测血浆中（1-3）-β-D-葡聚糖的含量对侵袭性真菌感染患者的早期诊断 具有重要意义［1-2］。笔者通过分析桂林医学院附属医院新生儿患者血浆（1-3）-β-D-葡聚糖，探讨血浆（1-3）-β-D-葡聚糖在诊断新生儿侵袭性真菌感染中的临床价值。 1.1 病例选择 根据儿童侵袭性肺部真菌感染诊疗指南（2009版）［3］，儿童侵袭性真菌感染 的诊断分为确诊和临床诊断，确诊指宿主因素+临床证据+肺组织病理学和（或） 有确诊意义的微生物学证据；临床诊断指宿主因素+临床证据+有临床诊断意义的 微生物学证据。本研究中的新生儿是指胎儿娩出母体并自脐带结扎起，至出生后满28 d。2012年12月至2013年12月我院新生儿科诊治的真菌感染患儿（包括确诊和临床诊断患儿）共22例，同期非真菌感染患儿59例为对照组，病例组男15例，女7例，出生体重0.96～4.28 kg，平均（2.54± 1.13）kg；对照组男38例，女21例，出生体重（1.05～4.54）kg，平均（2.74±0.91）kg。两组患者性别体重等基本资料差异无统计学意义。 1.2 方法 1.2.1 标本采集使用不含β-D-葡聚糖的采血管采集空腹新生儿的静脉血1 ml，4
(1,3)-β-D-葡聚糖实验干扰因素的研究进展
（1，3）-β-D-葡聚糖实验干扰因素的研究进展 作者：马兴璇唐石伏阳建伶黄毅勇龙康张红雨 来源：《中国当代医药》2020年第09期 [摘要]（1，3）-β-D-葡聚糖实验是作为诊断真菌感染内脏器官、皮下组织等深部器官和组织的侵袭性真菌感染指标，在辅助临床的诊断和治疗上有很大的帮助，但作为一个实验指标，在检测的过程中，总是存在一定的干扰因素，使实验结果出现假阳性或假阴性。本文通过查阅国内外文献关于（1，3）-β-D-葡聚糖实验干扰因素的研究情况进行归纳总结，并进行综述，为临床使用（1，3）-β-D-葡聚糖实验指标提供指导并为进行（1，3）-β-D-葡聚糖实验干扰因素的研究提供参考依据。 [关键词]（1，3）-β-D-葡聚糖实验;干扰因素;侵袭性真菌感染 [中图分类号] R446.5; ; ; ; ; [文献标识码] A; ; ; ; ; [文章编号] 1674-4721（2020）3（c）-0021-03 Research advances in interference factors of （1， 3）-β-D-glucan test MA Xing-xuan; ;TANG Shi-fu; ;YANG Jian-ling; ;HUANG Yi-yong; ;LONG Kang; ;ZHANG Hong-yu Department of Clinical Laboratory， Liuzhou Traditional Chinese Medical Hospital， Guangxi Zhuang Autonomous Region， Liuzhou; ;545001， China [Abstract] （1， 3）-β-D-glucan test is an index of invasive fungal infection for the diagnosis of deep organs and tissues such as internal organs and subcutaneous tissues of fungal infections. It is of great help to clinical diagnosis and treatment， but as an experimental indicator， there are always some interference factors in the process of detection， which makes the test result false positive or false negative. This article summarizes the domestic and foreign literature on the （1， 3）-β-D-glucan test interference factors， and reviews them， so as to provide guidance for the clinical application of （1， 3）-β-D-glucan test and provide reference for the study of interference factors in （1， 3）-β-D-glucan test. [Key words] （1， 3）-β-D-glucan test; Interference factors; Invasive fungal infection 侵袭性真菌感染（invasive fungal infection）是指致病性真菌侵犯人体深部组织和器官所引起的感染性疾病，又称深部真菌感染或系统性真菌感染[1]。目前侵袭性真菌感染的辅助诊断