HPLC法测定食品中三氯蔗糖
不确定度 HPLC- 三氯蔗糖
编制人:日期审核人:日期测试项目:测试方法:SOP 名称及编号1. 目的2. 测试程序完整的测试程序参见SOP 。
如下流程图只给出大概的测试描述。
三氯蔗糖含量的测定方法不确定度Evaluation of Uncertainty 不确定度评定报告3. 不确定度来源分析3.1 不确定度模型Individual compounds(μg/g)=（A-A空）*4/W3.2 确定不确定度的来源3.2.1 精密度3.2.2 准确度3.2.3 校准曲线3.2.4 标准品标准品的不确定度或纯度。
如标准品为固体标物，还需考虑标准品称量引入的不确定度3.2.5 天平称量样品质量质量m 由已扣除皮重的称量得出。
制造商的说明书确认扣除皮重称量的三个不确定度来源:重复性（归并为方法重复性中）,天平最大允差(包括天平的灵敏度及其线性,其中灵敏度可忽略,因为减量称量是用同一架天平在很窄范围内进行的)。
3.2.6 试样体积体积的不确定度主要由容量瓶的不确定度引起,容量瓶的体积主要有两个不确定度来源：a. 体积最大允差引起的不确定度；b. 由实验室温度变化引起的体积不确定度。
4 不确定度各分量的计算 测试物质： 4.1 方法精密度4.2 方法准确度(回收率）三氯蔗糖含量测定制备多个浓度/基体的加标样品/标准品进行重复性测试。
结果如下4.4 标准品的不确定度This reference standard is pured, the uncertainty from weighed preparation should be considered.该标物是纯品，需考虑称量引入的不确定度根据标准溶液稀释的不确定度计算结果可知，将标准溶液逐级稀释为标准工作溶液中间引起的不确定度可以忽略不计。
由于实验的温度是在15℃～25℃之间变动，温度变化范围为10℃，该影响引起的不确定度可通过估算该温度范围和体积膨胀系数来进行计算。
液体的体积膨胀明显大于容量瓶的体积膨胀，因此只需要考虑前者。
反相高效液相色谱法分离测定三氯蔗糖
法简 便 、 速 ， 敏 度 高 ， 现 性好 。 快 灵 重
ｗ ｒ ｕ ｅｃ ｓｌ Ｃ一１ （５ ｍｍｘ ｍｍ ． ， ｍ） ｅ ｅ Ｓ ｐ ｌｏ ｉ ｔ ％ ８ ２Ｏ ４６ ｉ ５ ｄ
ｕ ｉｇ ｓｎ ＣＨ ＣＮ— Ｈ— （ （５５８ ， Ｖ Ｖ ａ ｔｅ ３ ＣＨ Ｈ２ １ ：：０ ／ ） ｓ ｈ ）
２ 结 果 与 讨 论
２ １ 色 谱 的定 性 与 分 离 ．
在 本 文 建 立 的 分 析 条 件 下 ，采 用 保 留 时 间 对 照 法 和 标 准 追 加 法 确 定 三 氯 蔗 糖 峰 的 位 置 ， 由 图 ２ 可
文 献 ８ 用 薄 层 色 谱 法 对 合 成 三 氯 蔗 糖 的 中 间 ］ 采 体 蔗 糖 一 一 进 行 在 线 控 制 ， 便 、 单 ， 得 了 较 好 ６酯 方 简 获
提纯 样 品 ） 由本 课 题组 合 成 。
ｏ ｔ ｅ ｆ ｈ ｍ ｅ ｈ ｗｅｒ ９９ ５ ａｎ ｒ ａ ｉｅ ｔ ｄａｒ ｔ ｏｄ ｅ ％ ｄ ｅｌｔｖ ｓａｎ ｄ ｄｅｒ ａ ｉｎ ｉ ｔｏ ｗａ ０． ｖ ｓ ８４％ ｔ ｓ ｍ ｅ ｈ ｉ ｓｉ ｐｌ ｈｉ ｔ ｏｄ Ｓ ｍ ｅ．
１ ｗｏｒ ｖ ｄｓ ＨＰＬ ｓ ｃｒ ｌ Ｃ； ｕ ａｏｓ
中 图 分 类 号 ：１ ２ ２３ 、Ｏ＿ ｓ
文献标识码 ：Ａ
文 章 编 号 ：１ ０ — ３ ６（ ０ ２）６ ０ ６ — ２ ０ ２００ ２０ ０ －０ ６０
１２ 色谱 分 离 条 件 ．
色 谱 柱 ： ｕ ｅｃ ｓｌ Ｌ Ｓ ｐ ｌ ｏ ｉ ￣ Ｃ一１ （ ５ ｍｍｘ ． ｒ ｍ ． ． Ｔ ２０ ８ ４６ ａ ｉ ， ｄ
ｏ ｓｕ ａｌ ｅ ｆ ｃｒ ｏｓ ｗａ ０． ｍ ｇ ｓ ２ ／Ｌ． ｅ Ｔｈ ａｖ ａｇｅ ｅ ｖ ｙ ｅｒ ｒ ｃｏ ｅｒ
高效液相色谱法分析(三氯蔗糖)原始记录
0.0025g/kg
定量限
0.0075g/kg
样品空白值
公式：X=
式中：X--样品中三氯蔗糖的含量,（g/kg）; C0--由标准曲线得出的空白样液中三氯蔗糖的浓度，（mg/mL）
C--由标准曲线得出的样液中三氯蔗糖的浓度，（mg/mL）; V--样液定容体积，（mL）；
m--样品质量，单位为克(g）;1000---换算系数。结果保留三位有效数字。来自质控（自控）情况
样品总数
平行样个数
质控样个数
仪器使用情况使用前：使用后：
检验人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（三氯蔗糖）原始记录第页，共页
样品编号
试样质量
(g)
定容体积
（mL）
峰面积
（A）
浓度
（mg/mL）
结果
（g/kg）
平均值
(g/kg）
相对偏差（%）
备注
试验允差要求：≤10%
仪器使用情况使用前：使用后：检验人：复核人：审核人：
根据GB22255-2014对样品进行处理。
标准使用液名称及浓度
三氯蔗糖标准使用液：1.0mg/mL
仪器
检测条件
检测器：RI检测器
色谱柱：C18反相柱
柱温：35 ℃
流速：1.0mL/min
进样量：100μL
流动相：水:乙腈=89+11
标准曲线
序号
1
2
3
4
5
6
浓度（mg/mL）
峰面积（A）
回归方程
Y=aX+b a= b= r=
高效液相色谱法分析（三氯蔗糖）原始记录
受理号：第1页，共页
检测项目
三氯蔗糖含量测定方法
三氯蔗糖含量测定方法
嘿，朋友们！今天咱就来聊聊三氯蔗糖含量测定方法。
这可关系到好多方面呢，比如说在食品行业，要是不知道怎么准确测定三氯蔗糖含量，那生产出来的东西能靠谱吗？就好像做菜不知道放多少盐一样，那味道能好吗！
先来说说一种常见的方法——高效液相色谱法。
就好像在一个大迷宫
里找特定的宝藏一样，通过这种方法可以把三氯蔗糖从一堆其他东西里精准地揪出来并测定它的量。
比如说，你可以拿一杯加了三氯蔗糖的饮料，通过这个方法就能知道里面到底有多少三氯蔗糖呀！
还有分光光度法，这就像是给三氯蔗糖穿上一件特殊的“衣服”，让它在特定的光线照射下“闪闪发光”，从而被我们发现和测量。
哎呀，你想想啊，要是没这个办法，我们怎么能搞清楚那些复杂混合物里三氯蔗糖的含量呢！
总之，这些方法都超级重要的！它们就像是我们了解三氯蔗糖的“眼睛”和“手”，帮助我们准确把握它的情况。
所以说，一定要好好掌握这些测定方法呀！。
高效液相色谱法检测三氯蔗糖的方法比较
第一作者 E-mail院 215236031@ 收稿日期院 2019-05-13
窑 15 窑
JOURNAL OF INSPECTION AND QUARANTINE 检验检疫学刊
Vol.29 No.3 2019 年第 3 期
我国对三氯蔗糖的添加有一定的限量[4]遥 食品中三氯蔗糖测定方法包括离子色谱法[5-7]尧
1 前言 随着社会经济不断发展袁 人民生活水平在不断
提高袁对吃的需求不仅限于温饱袁对食品的质量要求 也越来越高遥 随着食品行业迅猛发展袁 作为最受欢 迎的饮料已经成为了其中的佼佼者袁 甜味剂也应运 而生遥 甜味剂种类较多袁 按其来源可分为天然甜味 剂和人工合成甜味剂遥 天然甜味剂有甜菊糖尧甘草尧 甘草酸二钠尧甘草酸三钾和甘草酸三钠等曰人工合成 甜味剂有糖精尧糖精钠尧环己基氨基磺酸钠尧天门冬 酰苯丙氨酸甲酯尧阿力甜等遥 葡萄糖尧果糖尧蔗糖尧麦 芽糖尧淀粉糖和乳糖等糖类物质袁虽然也是天然甜味
剂袁但因长期被人食用袁且是重要的营养素袁通常视 为食品原料袁在我国不作为食品添加剂遥
三 氯 蔗 糖 又 名 三 氯 半 乳 蔗 糖 [1]尧 蔗 糖 素 尧4,1,6 三氯-4,1,6,-三脱氧半乳型蔗糖袁是一种白色或近白 色结晶性粉末的蔗糖衍生物袁 其甜度约为蔗糖的 600 倍袁口味纯正袁没有任何异味或苦涩味袁甜味特 征曲线几乎与蔗糖重叠袁 具有很好的溶解性和稳定 性袁又兼具低热量尧高甜度的特点遥 相比高热量尧低 甜 度的 食 品 添 加 剂 [2]要 要 要食 糖 袁 三 氯 蔗 糖 越 来 越 普 遍用于饮料中袁 被认为是当今最理想的甜味剂遥 但 三氯蔗糖对人体健康也可能产生一些危害[3]袁所以
渊Guangdong Institute of Food Inspection, Guangzhou, Guangdong, 510435, China冤 Abstract院 By comparing the performance of different chromatographic columns in the detection of sucralose in beverages by High Performance Liquid Chromatography (HPLC), different analytical methods are provided. The same sample is detected by high performance liquid chromatography with differential refractive detector, C18 reversed phase column and Hi-Plex H column, respectively. The results show that when the two methods are 20要400 mg/L, the concentration of sucralose and the corresponding peak area are used as the standard curve, r=0.999 9. The correlation between the two methods is good. The recovery of standard addition is 98%要103%, and the detection limit is 0.000 5 g/kg. It is concluded that the two methods can meet the requirements of national standards, and are fast, sensitive and environmentally friendly, which improves the detection efficiency and safety of sucralose in beverages by high performance liquid chromatography. Key Words院 Sucralose; HPLC; C18 Reverse Phase Column; Hi-Plex H Column
食品添加剂三氯蔗糖分析方法
460.01.02.03.04.05.06.07.08.09.0min12345678uRIU 0.000.250.500.75mL/min三氯蔗糖食品添加剂三氯蔗糖的分析方法摘要 开发了三氯蔗糖的HPLC 分析方法，该方法简单而且重复性好，最低检出限为2.1ppm ，在8ppm 至5000ppm 的浓度范围内，相关系数可达到0.9999以上。
该方法既可以作为三氯蔗糖质量检测方法，也可以作为三氯蔗糖在食品中添加量的控制检测方法。
关键词 HPLC 三氯蔗糖 食品添加剂三氯蔗糖是以蔗糖为原料经氯代而制得的一种非营养型强力甜味剂，其化学名4，1’，6’-三氯-4，1’，6’-三脱氧半乳型蔗糖，是一种白色粉末状产品，极易溶于水（溶解度28.2克，20℃），水溶液澄清透明，其甜度是蔗糖的400～800倍，三氯蔗糖具有如下优点：（1）水溶液化学稳定性好，高温下甜味不变，而且与食物中的蛋白质果胶等主要成分不起化学反应，在焙烤工艺中甜度更稳定。
（2）无毒副作用，在人体内几乎不被吸收，热量值为零，是糖尿病人的甜味代用品。
（3）甜味纯正，与蔗糖一样没有不愉快的苦后味和其他怪味，它不被龋齿病菌利用,所以不会引起龋齿。
正是基于这些优点，三氯蔗糖是目前食品和医药领域研究开发的热点。
仪器配置包括脱气机DGU-20A 3；泵LC-20AD ；自动进样器SIL-20AC ；高压混合器； 柱温箱CTO-20AC ；示差折光检测器RID-10A ； 系统控制器CBM-20A ； LC-Solution 数据处理软件分析条件流动相:水/乙腈 85/15 流速: 1 mL/min 进样体积: 20 μL色谱柱: Shim-pack VP-ODS (150 mmL x 4.6 mmid) 柱温: 40℃检测池温度: 40℃标样处理称取标样40mg ，流动相稀释至10mL ，完全溶解后，0.45μm 膜过滤，取20μL 进样。
色谱图如下：图 1 三氯蔗糖色谱图47重现性实验将上述样品连续进样6次，分别计算保留时间和峰面积的重复性。
高效液相色谱法测定食品中三氯蔗糖的含量
211 XIANDAISHIPIN 现代食品三氯蔗糖，别称蔗糖素，甜度是蔗糖的600~800倍，其凭借纯正的甜味与无热量的优点，在各类食品中广泛应用[1]。
《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》（GB 2760—2014）中明确规定，食品中使用的三氯蔗糖的添加量在0.25~1.5 g ・kg -1。
虽然在规定剂量范围内使用三氯蔗糖不会对人体构作者简介：王振雷（1988—），女，本科，工程师，研究方向为食品检验。
doi:10.16736/41-1434/ts.2023.8.066高效液相色谱法测定食品中三氯蔗糖的含量Determination of Sucralose in Food by High Performance Liquid Chromatography◎ 王振雷，王 影，张 威， 姜 珊（辽源市食品质量安全检测中心，吉林 辽源 136200）WANG Zhenlei, WANG Ying, ZHANG Wei, JIANG Shan(Liaoyuan Food Quality and Safety Inspection Center, Liaoyuan 136200, China)摘 要：本文建立了用于测定食品中三氯蔗糖含量的高效液相色谱法。
以国家现行标准为基础，样品经前处理后，采用高效液相色谱-示差检测法检测。
在0.02~0.60 mg ・mL -1三氯蔗糖线性关系良好，相关系数为0.999 7，方法检出限为2.0 mg ・kg -1，回收率为98.33%~100.03%，三氯蔗糖标准溶液色谱峰面积相对标准偏差为0.54%。
采用该方法测定市售饼干样品共计50份，有三氯蔗糖标识的样本全检出且均未超过0.25 g ・kg -1的检出限，未有标识的样本均低于0.25 g ・kg -1的检出限，符合饼干不超过0.25 g ・kg -1的国家标准。
该方法便捷高效，具备可观的准确度与灵敏度，适用于测定食品中的三氯蔗糖含量。
HPLC-DAD法快速测定三氯蔗糖-6-乙酯的含量
文章编号 ：１ ６ ７ １ — ９ ６ ４ ６（ ２ ０ １ ３ ）１ ２ ａ 一 ０ ０ ７ １ — ０ ２
ＨＰ Ｌ Ｃ — Ｄ Ａ Ｄ法快 速测定三氯蔗糖 一６一乙酯 的含量
佘 觉民 ，陈子 昂 ，罗紫薇 ，陆夏莲
（ 福建科宏生物２ １ ２ 程有限公司 ，福建 三 明 ３ ６ ６ ０ ０ ０ ） 摘 要 ：二 三 氯 蔗糖 一６一乙酯是甜味剂三氯蔗糖 合成 过程 的关键 中间体 ，采用带阵列二极 管检测器的液相色谱５ ％ （ ｎ ＝ ６ ） ，Ｓ Ｏ ｉ ｔ ＇ ｓ ｅ ａ ｓ ｙ ｔ ｏ ｔ ｒ ａ ｃ ｋ ａ ｎ ｄ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ山ｅ ｓ ｕ ｃ ｒ ａ ］ ｏ ｓ ｅ一 ６一 ｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ．
Ｓ ＨＥ Ｊ ｕ ｅ — ｍｉ ｎ，ＣＨＥＮ Ｚ ｉ — ａ ｎ ｇ ，Ｌ ＵＯ Ｚ ｉ － ｗｅ ｉ ，Ｌ Ｕ Ｘｉ ａ — ｌ ｉ ａ ｎ
（ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ Ｆ ｏ ｏ ｄ Ｉ ｎ ｇ ｒ ｅ ｄ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ Ｃ ｏ ． ，Ｌ ｔ ｄ ． ，Ｓ ａ ｎ ｍ ｉ ｎ ｇ ，Ｆ ｕ ｊ ｉ ａ ｎ ３ ６ ６ ０ ０ ０ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
中 图 分 类 号 ：Ｔ Ｓ １ ５ ５ ． ５ 文 献 标 志 码 ：Ａ ｄ ｏ ｉ ：１ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ １ — ９ ６ ４ ６ （ Ｘ） ． ２ ０ １ ３ ． １ ２ ． ０ ２ ４