Runx2蛋白与成骨细胞分化信号

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多发性骨髓瘤成骨细胞活性和Runx2的表达

多发性骨髓瘤成骨细胞活性和Runx2的表达郑晓强陈君敏（福建医科大学附属第一医院血液科，福建福州350000）〔摘要〕目的研究多发性骨髓瘤（MM ）患者间充质干细胞（MSCs ）向成骨细胞（OB ）分化过程中Runx2的表达，探讨MM 骨形成障碍的机制。

方法以4例有明显骨质破坏的MM 患者为研究对象，2例缺铁性贫血和1例特发性血小板减少性紫癜为对照，体外诱导MSCs 向OB 分化，采用CCK-8试剂盒检测MSCs 向OB 分化过程中的增殖能力，以平均光密度值（AOD ）表示；碱性磷酸酶（ALP ）染色和钙结节（Von-Kossa ）染色检测MSCs 的OB 形成能力，分别以IOD sum /Area sum 值和平均钙结节个数表示；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR ）技术检测MSCs 向OB 分化过程中Runx2的表达，以Runx2/GAPDH 平均光密度值表示。

结果在MSCs 向OB 分化过程中，MM 患者MSCs 的增殖能力、ALP 表达、钙结节形成能力、Runx2表达均明显低于对照组（P ＜0.01）。

结论MM 患者骨髓MSCs 向OB 分化过程中的增殖能力和OB 形成能力均下降，可能与Runx2的表达减低有关。

〔关键词〕多发性骨髓瘤；间充质干细胞；成骨细胞〔中图分类号〕R551.3〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202（2011）22-4366-03；doi ：10.3969/j.issn.1005-9202.2011.22.036Osteoblast activity and Runx2expression in multiple myelomaZHENG Xiao-Qiang ，CHEN Jun-Min.Department of Hematology ，the First Affiliated Hospital of Fujian Medical University ，Fuzhou 350000，Fujian ，China【Abstract 】Objective To evaluate Runx2expression of mesenchymal stem cells （MSCs ）from bone marrow of multiple myeloma （MM ），and discuss the mechanism of osteoblast inhibition in MM.Methods Bone marrow was collected from four MM patients with obvious osteolytic lesion.The control group included two patients with iron deficiency anemia and one with idiopathic thrombocytopenic purpura.MSCs were induced to differentiate into OB in K-8kit was employed to analyze MSCs proliferation ，defined as the average optical density（AOD ）.Alkaline phosphatase staining and Von-Kossa staining were performed to assess osteoblast formation ，defined as IOD sum /Area sumand the average of calcium nodules respectively.RT-PCR assays were applied to detect Runx2expression of MSCs ，defined as Runx2/GAPDHaverage optical density.Results There was significant difference in the proliferation of MSCs between MM and control group.The osteoblast formation was less in MM group than that of control group.RT-PCR assays showed that Runx2expression was significantly lower in MM thanthat in control group （all P ＜0.01）.Conclusions In the course of differentiation of MSCs into OB ，bone marrow MSCs from MM patients are characterized with a low proliferation and osteoblast formation ，which may be associated with lower expression of Runx2.【Key words 】Multiple myeloma ；Mesenchymal stem cells ；Osteoblasts基金项目：国家自然科学基金（No.30871111）通讯作者：陈君敏（1963-），男，博士，主任医师，主要从事血液病学研究。

Runx2基因高表达对脐血间充质干细胞成骨分化相关基因表达的影响

Runx2基因高表达对脐血间充质干细胞成骨分化相关基因表达的影响周大凯;李慧宁;马珊珊;程田【摘要】背景:Runx2在成骨分化的信号途径中起核心作用,在诱导干细胞成骨分化及促进骨愈合方面具有重要的研究意义.目的:观察Runx2基因高表达对脐血间充质干细胞成骨分化的影响.方法:①扩增Runx2基因,利用腺病毒载体构建Runx2重组腺病毒(pAd-Runx2),检测病毒滴度后用重组腺病毒感染脐血间充质干细胞,并于荧光显微镜下观察荧光表达变化;②感染后1,3,7,14 d采用实时荧光定量PCR及Western blot检测脐血间充质干细胞Runx2、BMP-2、OCN、ALP的mRNA和蛋白表达.结果与结论:①成功制备pAd-Runx2重组腺病毒,病毒滴度为1.7×1010 pfu/L;②Runx2重组腺病毒感染脐血间充质干细胞后细胞形态呈成骨样细胞改变,对照组细胞无明显变化;③感染组细胞Runx2、BMP-2、OCN、ALP mRNA和蛋白的表达量随感染时间的增加均有不同程度的上调;④结果表明,高表达Runx2基因腺病毒感染脐血间充质干细胞,能够上调BMP-2、OCN、ALP基因的表达,从而促进脐血间充质干细胞的成骨分化.%BACKGROUND: Runx2 plays a central role in osteogenic differentiation, which is of important significance in new bone formation.OBJECTIVE: To observe the effect of Runx2 over-expression on osteogenic differentiation of human umbilical cordblood mesenchymal stem cells.METHODS: Runx2 was generated by RT-PCR and the recombinant adenovirus (pAd-Runx2) was constructed. The viraltiter was determined by air dilution method. After being transfected into human umbilical cord blood mesenchymal stemcells, the green fluorescence was observed under fluorescence microscope. Real-timefluorescent quantitative PCR andwestern blot were used to detect mRNA expression changes of osteogenesis related genes, Runx2, OCN, BMP-2, ALP,in human umbilical cord blood mesenchymal stem cells at 1, 3, 7 and 14 days after transfection.RESULTS AND CONCLUSION: The recombinant adenovirus was successfully constructed and the titer was1.7×1010 pfu/L. After infection by pAd-Runx2, human umbilical cord blood mesenchymal stem cells expressed greenfluorescence protein clearly under the fluorescence microscope. Cells in the transfected group differentiated intoosteoblast-like cells, and those in the control group stayed the same as pre-infected. The expression of Runx2, OCN,BMP-2 and ALP in the transfected group increased over time to some extent, but these changes were not detected in thecontrol group. These findings indicate that Runx2 over-expression can promote the osteogenic differentiation of humanumbilical cord blood mesenchymal stem cells.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2017(021)009【总页数】6页(P1444-1449)【关键词】干细胞;脐带脐血干细胞;脐血间充质干细胞;腺病毒载体;Runx2基因;成骨分化;国家自然科学基金【作者】周大凯;李慧宁;马珊珊;程田【作者单位】新乡市中心医院脊柱外科,河南省新乡市 453000;新乡市中心医院脊柱外科,河南省新乡市 453000;郑州大学生命科学学院,河南省郑州市450001;郑州大学第一附属医院,河南省郑州市 450052【正文语种】中文【中图分类】R394.20 引言 Introduction自体、异体骨移植和人工骨材料填充等均不能有效治疗大面积骨缺损[1-2]。

MSCs成骨信号轴BMP-2-Smad-Runx2-Osterix与迁移信号轴CXCL12-CXCR

MSCs成骨信号轴BMP-2-Smad-Runx2-Osterix与迁移信号轴CXCL12-CXCR4的交叉影响骨骼是人体一个重要的组成部分，对于整个身体的运动和支撑起着至关重要的作用。

骨骼的正常发育和修复需要多种信号轴的协调和调控。

其中，成骨信号轴和迁移信号轴在骨骼发育和修复中起着重要作用。

MSCs（骨髓间充质干细胞）是一种多潜能干细胞，具有成骨和迁移的潜能，是骨骼发育和修复的重要细胞来源。

本文将探讨MSCs成骨信号轴BMP-2/Smad/Runx2/Osterix与迁移信号轴CXCL12/CXCR4的交叉影响。

首先，我们先介绍MSCs成骨信号轴。

BMP-2（骨形态发育因子2）是成骨过程中的关键分子，它通过结合细胞膜上的受体，激活Smad信号通路。

Smad是一组信号转导蛋白，能够进入细胞核，与转录因子Runx2结合，促进成骨相关基因的转录和表达。

Osterix是Runx2的转录调控因子，能够直接调控成骨细胞的分化和成骨过程。

其次，我们来介绍MSCs迁移信号轴。

CXCL12（趋化因子12）是一种趋化因子，能够刺激MSCs的迁移。

CXCR4是CXCL12的受体，它存在于MSCs的细胞膜上。

当CXCL12与CXCR4结合时，能够通过激活一系列下游信号通路，促进MSCs 的迁移。

研究表明，成骨信号轴和迁移信号轴在MSCs的功能调控中相互影响。

首先，BMP-2可以促进CXCL12的表达。

实验证明，BMP-2处理后，MSCs细胞中CXCL12的表达水平明显上调。

而且，BMP-2还能够通过活化Smad信号通路，增强CXCR4在MSCs的表达。

这表明，成骨信号轴可以通过上调CXCL12和CXCR4的表达，促进MSCs的迁移。

其次，迁移信号轴对成骨信号轴也有调控作用。

研究发现，CXCL12可以促进MSCs的成骨分化。

实验证明，添加CXCL12处理后，MSCs的成骨相关基因如Runx2和Osterix的表达水平明显上调。

成骨诱导培养基配方

成骨诱导培养基配方介绍成骨诱导是一种在体外培养条件下诱导干细胞或间充质干细胞向成骨细胞分化的过程。

成骨诱导培养基是通过提供特定的营养物质和生长因子来模拟体内成骨环境的培养基。

本文将详细讨论成骨诱导培养基的配方及其影响因素。

成骨诱导因子成骨诱导培养基的核心是成骨诱导因子，它们是一类能够促进干细胞或间充质干细胞向成骨细胞分化的信号分子。

以下是一些常见的成骨诱导因子：1.骨形成蛋白（BMPs）2.成骨细胞分化因子（RUNX2）3.碱性磷酸酶（ALP）4.骨基质蛋白（BSP）5.Osterix这些因子在不同阶段的成骨分化中起着关键作用，并能够调控细胞增殖、分化和骨基质合成。

成骨诱导培养基配方成骨诱导培养基的配方是根据不同细胞类型和研究目的来确定的。

下面是一种经常使用的成骨诱导培养基配方：成骨诱导培养基配方（基础版）•DMEM/F12培养基•胚牛血清（FBS）或胎牛血清（FCS）•抗生素/抗真菌剂（如青霉素/链霉素）•1% 非必需氨基酸溶液• 2 mM L-谷氨酰胺（L-Glutamine）•10 mM β-甘油磷酸钠（β-glycerophosphate）•10 nM 二磷酸腺苷（dexamethasone）•0.05 mM 抗坏血酸（ascorbic acid）•成骨诱导因子（根据需求添加）成骨诱导培养基的优化成骨诱导培养基的配方可以根据研究需求进行优化。

以下是一些常见的优化因素：1. 成分浓度调节各种成分的浓度可以根据实验需要进行调节。

例如，增加成骨诱导因子的浓度可以提高成骨分化效果，而降低成骨诱导因子的浓度则可以减缓成骨分化速度。

2. 添加辅助因子除了基本的成骨诱导因子外，还可以添加其他辅助因子来增强成骨效果。

例如，添加维生素D3和维生素K2可以提高骨基质合成和骨矿化。

3. 优化培养时间培养时间对于成骨诱导的效果也有一定影响。

较长的培养时间可以促进细胞进一步分化为成熟的成骨细胞，但可能会降低细胞存活率。

Runx2基因与骨相关疾病的研究

Runx2基因与骨相关疾病的研究Runx2是骨发育过程中调节骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化和成熟最关键的转录因子，它通过多条途径参与骨代谢的调控，可影响成骨细胞及破骨细胞活动从而控制骨形成与骨吸收，并与很多骨相关疾病的形成有很大关系，Runx2基因多态性的研究为疾病的早发现及治疗提供新的思路及治疗靶点。

标签：Runx2；锁骨颅骨发育不良综合征；骨质疏松症；骨肉瘤；脊柱后纵韧带骨化Runxx相关因子（runt-related gene，Runxx）是一类转录因子蛋白的统称，它们都是由a和β亚单位构成的异二聚体，其特点是在分子结构中均含有一个由128个氨基酸组成的DNA结合区，该结合区与果蝇属的分节基因Runt同源，因此被称为Runt结构域。

Runxx家族主要有Runxl、Runx2和Runx3，Runx2又称为核心结核因子α1（core binding factor α1，Cbfa1），多瘤病毒增强子结合蛋（polymavimsenchancerbinding protein，PEBP）或急性髓系白血病因子（acute myeloidleukemia，AML）。

Runx2基因位于人类常染色体的6p21，长约220kb，包括8个外显子，并具有和其它家族成员相似的Runt结构域，是骨发育过程中调节骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化和成熟最关键的转录因子[1]，Runx2的表达是成骨细胞开始分化的标志，因此它是骨形成过程中最早和最具特异性的标志基因，此基因的缺失将导致骨发育不良或终止[2]。

Runx2包括N端的多谷氨酰胺/丙氨酸重复序列结构域（Q/A）、中部的runt结构域以及C端的富含脯氨酸、丝氨酸及苏氨酸的PST结构域。

Runx2能特异地识别并结合许多靶基因上PyGPyGGTPy序列，产生不同的生物效应[3]。

Runx2基因的变化与很多疾病相关，特别是骨相关疾病，对其研究有利于疾病的早期发现提供新思路及早期治疗提供新靶点。

失神经支配在胫骨牵张成骨延长过程中的骨再生及Runx2表达

失神经支配在胫骨牵张成骨延长过程中的骨再生及Runx2表达郑科;宋冬惠;冯兴梅;祝颂松;胡静;叶斌【摘要】BACKGROUND:During the healing of fractures, removal of sciatic nerve can result in insufficient mechanical rigidity of newborn woven bone. However, there are less reports concerning the denervation effects during distraction osteogenesis. OBJECTIVE:To observe the effect of removal of the sciatic nerve on bone regeneration and the expression of Runt-related transcription factor 2 (Runx2) protein during distraction osteogenesis in a rabbit model. METHODS:Twenty-four adult male New Zealand rabbits were selected and underwent left tibial osteodistraction to construct animal models of distraction osteogenesis. Before distraction, the animals were randomly divided into group R (resecting the left sciatic nerve) and group I (intact left sciatic nerve). Six weeks after completion of distraction, the animals were kil ed and the lengthened tibias were harvested for radiography, three-dimensional CT reconstruction, histological evaluation, connectivity density (Conn.D) evaluation. RESULTS AND CONCLUSION:New regenerated bone was present and Runx2 protein was expressed in the distraction gaps of al animals at the end of the study, as revealed by radiography, three-dimensional CT reconstruction, and histological observation. However, less new bone formation and a lower degree of mineralization and expression of Runx2 protein were observed in group R compared with group I. The results suggest that thedenervation appears to have an inhibitory effect on bone formation and the expression of Runx2 protein during distraction osteogenesis.%背景：研究发现，去除坐骨神经会导致骨折愈合过程中新生编织骨机械硬度不足，而目前对有关失神经因素在牵张成骨过程中作用的相关报道较少。

转录因子Runx2调控前成骨细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达

转录因子Runx2调控前成骨细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达孙玉娇;宫春梅;郝建忠;孙岩;刘晓影【摘要】背景：细胞外基质磷酸化糖蛋白基因在骨的矿化和吸收、成骨细胞与破骨细胞的平衡中起重要的作用，研究细胞外基质磷酸化糖蛋白的功能及其调控机制可为骨质疏松症的治疗提供新的思路。

<br> 目的：分析转录因子Runx2在小鼠前成骨细胞中对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的调控作用，进而初步研究转录因子Runx2在骨形成发育过程中的作用。

<br> 方法：首先根据Genbank中Runx2的基因序列构建Runx2真核表达载体；然后利用双荧光素酶基因检测报告系统分析Runx2对不同长度的细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子转录活性的影响，以确定Runx2有明显作用的启动子区段，分析3种MAPK信号通路抑制剂调控Runx2对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子转录活性的影响；最后利用定时定量RT-PCR法分析Runx2对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子表达活性的影响。

结果与结论：成功构建Runx2真核表达载体；双荧光素酶基因检测报告系统分析显示Runx2能够上调细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子在前成骨细胞中的转录活性，在(-300-+66)366 bp片段区域内上调效果较为显著，Runx2可通过激活MEK激酶MAPK通路上调细胞外基质磷酸化糖蛋白启动子活性；定时定量RT-PCR法检测再次验证Runx2上调细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达水平。

提示转录因子Runx2可以通过MEK激酶MAPK信号通路对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因表达进行调节，为探讨细胞外基质磷酸化糖蛋白在骨形成发育过程中的意义奠定基础。

%BACKGROUND:Matrix extracel ular phosphoglycoprotein phosphorylated extracel ular matrix glycoprotein (MEPE) gene plays an important role in bone mineralization andabsorption as wel as the balance of osteoblasts and osteoclasts. Studies on the function and regulatory mechanism of MEPE can provide new ideas for the treatment of osteoporosis. OBJECTIVE:To analyze the regulatory effects of transcription factor Runx2 on MEPE promoter in mouse preosteoblasts, thereby preliminarily studying the Runx2 effects in the process of bone formation and development. METHODS:First of al , the Runx2 eukaryotic expression vector was built according to the gene sequence of Runx2 in Genebank;then the dual luciferase reporter assay was employed to analyze the effects of Runx2 on transcription activity of MEPE promoters with different lengths in order to determine the promoter region in which Runx2 has significant effect. Afterwards, the effects of Runx2 on transcipition activity of MEPE gene promoter which induced by three MAPK signaling pathway inhibitors were investigated. Final y, real-time PCR was used to analyze the expression activity of MEPE gene promoter regulated by Runx2. RESULTS AND CONCLUSION:We successful y constructed the Runx2 eukaryotic expression vector. Dual luciferase reporter assay showed that Runx2 could increase the transcription activity of MEPE gene promoter in preosteoblasts, and the fragment area in which Runx2 exhibited the more significant up-regulatory effectiveness was (-300 to+66)366 bp. Runx2 could increase the transcription activity of MEPE gene promoter by activating the MAPK single pathway. The real-time PCR verified that Runx2 increased the expression activity of MEPE gene promoter. These findings indicate that Runx2 can regulate the express ofMEPE gene promoter by the MAPK single pathway, in order to build the basis for exploring the process of bone formation and development.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2015(000)037【总页数】6页(P5905-5910)【关键词】组织构建;骨细胞;细胞外基质磷酸化糖蛋白;Runx2;信号通路;双荧光素酶基因检测;定时定量RT-PCR;组织工程;国家自然科学基金【作者】孙玉娇;宫春梅;郝建忠;孙岩;刘晓影【作者单位】潍坊医学院口腔医学院，山东省潍坊市 261053;潍坊医学院口腔医学院，山东省潍坊市 261053;潍坊医学院附属医院，山东省潍坊市 261031;潍坊医学院，山东省潍坊市 261053;潍坊医学院，山东省潍坊市 261053【正文语种】中文【中图分类】R318文章亮点：1 关于细胞外基质磷酸化糖蛋白的研究国内外主要集中在对骨及牙髓、牙本质形成功能方面研究，本实验从分子信号通路方向研究细胞外基质磷酸化糖蛋白基因在骨细胞中的调控通路，为骨质疏松症的发病机制提供新的依据，不仅具有重要的科学价值，也为骨质疏松的治疗提供新的靶点。

Nature子刊：泛素连接酶WWP2以单泛素的方式促进RUNX2蛋白在成骨分化中的作用

Nature子刊：泛素连接酶WWP2以单泛素的方式促进RUNX2蛋白在成骨分化中的作用文章的题目是The E3 ubiquitin ligase WWP2 facilitates RUNX2 protein transactivation in a mono-ubiquitination manner during osteogenic differentiationE3，作者是复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系暨代谢分子医学教育部重点实验室甘肖箐课题组的师生，在这篇文章中作者发现泛素连接酶 WWP2 以单泛素的方式促进RUNX2 蛋白在成骨分化过程中的转染。

研究背景：造血源性破骨细胞可以控制骨吸收，骨骼间充质成骨细胞促进骨矿物质沉积，这两个过程的不平衡会导致骨质疏松症。

而间充质干细胞成骨分化促进NEDD 4家族E3泛素蛋白家族成员的WWP 2表达及核内积聚，在骨髓间充质干细胞和成骨细胞中敲除WWP 2基因导致成骨功能下降，矿物质沉积减少和成骨标记基因的下调。

RUNX2（core binding factor alphal 1）是Runt家族转录因子的成员之一，它们含有共同的DNA结合runt结构域，能与核心结合因子β（core binding factor betaCbfb) 形成异二聚体。

RUNX2在软骨形成、骨代谢相关疾病方面至关重要，它能诱导骨骼间充质细胞的分化，并使间充质细胞向成骨细胞方向分化，抑制脂肪细胞和软骨细胞分化。

具有颅骨锁骨发育不全综合征的患者RUNX22发生突变，其表现为身材矮小、锁骨发育不全、多生牙和囱门不能闭合。

实验发现敲出小鼠的RUNX2基因，小鼠软骨形成分化完全中断，说明其在软骨发育中的重要作用。

免疫共沉淀结果显示WWP 2与RUNX 2相互作用，WWP 2通过可以促进runx 2的单泛素化，进而促进成骨分化。

研究结果：作者为了证明Hect结构域促进WWP 2在胞质积累，首先利用体外培养的C3H10T1/2细胞分化模型，检测出WWP 2在成骨前后细胞中的表达及亚细胞定位，发现成骨后细胞中WWP 2的表达有所增加。

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医学综述２００７年１２月第ｌ３卷第２４期
Ｍ，．，．７丝
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１９・９５
Ｒｕｘｎ２蛋白与成骨细胞分化信号
马
中图分类号：３８８３Ｒ１；Ｑ１
信号途径中起中心作用。
ｈｌｒｇｌｔｄｋｎｓｉａｅｅｔｃｌｌｒａ—ｅｕａｅｉａｅｋｎｓ／ｘｒｅｌａａｕ
胞外信号调节激酶（ｘａｅｕｒｉｅｔｃｌｌｇｒｌａｓ —
ｓｎＪｅｕｔｉｓ，Ｅ／Ｒ是ｉａｒｇｌｅｋａｅＭＫＥＫ）ｇ — ａｄｎ
ＡｂｔａｔＲｕｘｌｙｌｉｅａａｔｍｌｓｏｌｔｄｆｅｅｔａｏｎｏｅｉｆｒｔｎ，ｆｗｉｈｔｅａ — ｓｒｃ：ｎ２ｐａｓａｍｐｌｎｅｉｏｔｂａｉｒｎｉｔｎａｄｂｎｎｏｍａｉｏｈｃｅｎｅｓｉｏｈ
慧，赵红斌
文章编号：０６２８（０７２—９９０１０ —０４２０）４１５ —４
（国人民解放军兰州军区总医院信息科，中兰州７０５）３００文献标识码：Ａ
摘要：ｕｘ白在成骨细胞的分化和骨形成方面起重要的作用。Ｒｎ２通过丝裂原活化蛋成骨细胞特异性元件２参与才能实Ｒｎ２蛋ｕｘ白激酶信号通路使其磷酸化调节其活性和功能，ｕｘＲｎ２蛋白参与了多种信号转导途径，胞外基现信号的转导Ｊ细。质、骨形态发生蛋白、成纤维细胞生长因子、力学刺激、甲状旁腺激素等信号途径均对Ｒｎ２的活ｕｘ丝裂原活化蛋白激酶激酶／细性有一定的影响；另外，多因子作为Ｒｎ２的上游调节因子对Ｒｎ２的活性起调节功能，许ｕｘｕｘ同时Ｏｘｅ做为Ｒｎ２的下游靶基因其功能受Ｒｎ２的严格控制。Ｒｎ２蛋白在成骨细胞分化的多种ｓｒｔｕｘｕｘｕｘ
抑制剂）能快速抑制ＥＫ的磷酸化Ｒ
（ＴＰＨ）ａｅａａｅＳｍｅａｆｔｏｔａｔｉ．ｅｄｓｔｔｓｆｔｓｓｇｌｅｉａｔｔａｉｒｌｖｅｃｒｉｅｅｓｎｉｃｉｔＢｓｅｈ，ｍｅａｏａｏｒｕａｔｃｉｙｓｔｌｈｏｔｎｃｓｖｙｉａｏｃｒｌｅｔｓｖｓｄｉ
ｕｓｒａｒｇａｏｙｆｔｒ，ａｗｈｌ，ｅｄｗｔｅｍｔｒｅｅｅｆｎｔｎｏｐｔｅｍｅｕｌｔｒａｏｓｍｅｃｎｉｅａｈｏｎｓａａｇｔｎ，ｕｃｏｆＯｓｔｒｃｎｂｔｃｌｅｕｌｔｓｒｇｉｘｅａｅｓｔｒｇａｅｉｒｙｄ
和ＥＭ依赖的骨钙素基因的激活。Ｃ构建ＥＫＲ１过表达载体转染细胞
后，Ｒ１促进骨钙素ｍＮ的水ＥＫＲＡ
ｂｕｘｗｉｈｐａｓｃｒｌｎｍａｙｓｇａｒ￣ｕｔｏｅａｅｏｏｔｏｌｉｅｅｔｔｎｙＲｎ２，ｈｃｌｙｏｅｒｅｉｎｉｌｔａｏｎｎｃｉｎｒｌｔｔｓｂａｄｆｒｎａｉ．ｄｅｓｉｏＫｅｒｓＲｎ２；Ｏｓｅｂａｔｉａｔｎｄｃｉｎ；Ｃｅｌｄｆｅｅｔａｉｎｙｗｏｄ：ｕｘｔｏｌ；Ｓｇｌｒｓｕｔｏｓｎａｌｉｒｎｉｔｆｏ
关键词：ｕｘ；骨细胞；号转导；Ｒｎ２成信细胞分化
Ｒｎ２ａｄＳｇａｒｎｄｃｉｆｔｏｌｔｉｅｅｔｔｎＭＡＨｉＺＡｏｇｂ（ｅａｔｅｔｆｕｘｎｉｎｌａｓｕｔｎｏｅｂａｆｒｎｉｉＴｏＯｓｓＤａｏｕ，ＨＯＨｔ－ｉＤｐｒｎ￣ｎ．ｍｏ号通路之一，当信号分子激活整合ｉｏｎｔｎ。ｅｅａＨｓｉｌｆＬｎｌｕＭｉｔｒｒＬ，ａｚｏ３００Ｃｉａｎ．ａｉＧｎｒｌｏｔａｚｆｏｐａｏｍｌａｙＡｅｏ４Ｌｎｈｕ７０５，ｈ）ｉａｆＰｎ
整合素信号向细胞核传递的重要信素后，它可以促进Ｒｎ２依赖的转ｕｘ
录活性，Ｕ１６ＥＫ／特异性用０２（Ｒ１２的
ｔｉｄｆｎｔｎｃｎｂｇｌｅｙｐｏｈｒｌｉｒｇｉｇｎａｔａｒｅｉａｅＭＰ）ｐｔ— ｉｔａｃｏａｅｒｕａｄｂｈｓｏａｏｔｏｈｍｔｅ—ｃｉｔｐｏｉｋｎｓ（ＡＫａｖｙｎｕｉｅｔｐｙｔｎｈｕｏｖｅｄｔｎｈｗｙＲｎ２ｐｒｃａｎｙｓｎａｓｕｔｎｐｔｗｙｍｏｇｗｉｘａｅｕａａｉ（Ｃ，ｏｅａ．ｕｘａｔｉｔｉｍａｉａｔｄｃｏａａ，ｎｎｈｃＥｔｃｌｌＭｔｘＥＭ）ＢｎｉｐｅｎｄｇｌｒｎｉｈｈｒｌｒｒＭｏｈｇｎｃＰｏｉＢＰ）ＦｂｂａｔＧｏｔａｔ－ＦＦ）Ｍｅｈｉｏｄｎ，ａｔｙｏｏｎｒｏｅｉｒｔｎ（Ｍ。ｉｌｒｗｈＦｃｏ２（Ｇ２，ｃａｃｌｉｇＰｒｒｉｈｒｅｐｅｏｒｓｒｎａａｌａｈｄｍｏ