关于生物指示剂-2
高压灭菌生物指示剂使用说明
高压灭菌生物指示剂使用说明一、高压蒸汽灭菌器使用方法（1）在外层锅内加适量的水，将需要灭菌的物品放入内层锅，盖好锅盖并对称地扭紧螺旋。
（2）加热使锅内产生蒸气，当压力表指针达到33、78kPa时，打开排气阀，将冷空气排出，此时压力表指针下降，当指针下降至零时，即将排气阀关好。
（3）继续加热，锅内蒸气增加，压力表指针又上升，当锅内压力增加到所需压力时，将火力减小，按所灭菌物品的特点，使蒸气压力维持所需压力一定时间，然后将灭菌器断电或断火，让其自然冷后再慢慢打开排气阀以排除余气，然后才能开盖取物。
二、高压蒸汽灭菌器注意事项：（1）待灭菌的物品放置不宜过紧。
（2）必须将冷空气充分排除，否则锅内温度达不到规定温度，影响灭菌效果。
（3）灭菌完毕后，不可放气减压，否则瓶内液体会剧烈沸腾，冲掉瓶塞而外溢甚至导致容器爆裂。
须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。
又名:高压灭菌器,高压灭菌锅,高压蒸汽灭菌锅,手提高压灭菌器,手提高压灭菌锅,手提式高压灭菌器,手提式高压灭菌锅,手提式高压蒸汽灭菌器,手提式高压蒸汽灭菌锅（4）装培养基的试管或瓶子的棉塞上，应包油纸或牛皮纸，以防冷凝水入内。
（5）为了确保灭菌效果，应定期检查灭菌效果，常用的方法是将硫磺粉末（熔点为115℃）或安息香酸（熔点为120℃）置于试管内，然后进行灭菌试验。
如上述物质熔化，则说明高压蒸气灭菌器内的温度已达要求，灭菌的效果是可靠的。
也可将检测灭菌器效果的胶纸（其上有温度敏感指示剂）贴于待灭菌的物品外包装上，如胶纸上指示剂变色，亦说明灭菌效果是可靠的。
（6）现在已有微电脑自控型高压蒸气灭菌器，只需放去冷气后，仪器即可自动恒压定时，时间一到则自动切断电源并鸣笛，使用起来很方便。
3m生物指示剂说明书
3m生物指示剂说明书
3M生物指示剂的使用说明书可能因具体型号而有所不同。
以下是1292型
生物指示剂的使用说明：
1. 适用范围：适用于121℃下排气及132℃预真空压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测。
2. 使用方法：将生物指示剂放入生物测试包中，置于压力蒸汽灭菌器内最难灭菌的位置处，执行正常装载灭菌过程。
灭菌完毕后，取出指示剂冷却10
分钟后，将指示剂内部安瓿瓶压碎，在专用的3m快速生物阅读器内培养3小时左右，在3m快速生物阅读器上观察荧光反应。
3. 结果阅读：荧光阳性表示灭菌失败，荧光阴性表示灭菌合格。
只有对照管为阳性，其生物监测结果才算有效。
4. 注意事项：该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅，及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程。
5. 有效期：24个月。
此外，有些型号的生物指示剂使用方法可能包括将指示剂放于标准测试包中，按国家规范，分别将各测试包放于锅内不同位置，灭菌处理完毕，取出生物指示剂。
挤破内含的安瓿，与一支对照管一起放于37℃恒温箱，48小时后，
阅读结果。
灭菌管不变色（呈绿色），表示灭菌通过；灭菌管变色（呈黄色），表示灭菌不通过；同时培养的对照管应为阳性（黄色）。
以上信息仅供参考，具体使用方法请参照相应型号的生物指示剂说明书。
生物指示剂
生物指示剂：1.芽孢悬液CICC芽孢悬液采用国际通用标准菌株，参照国家药典、相关标准、卫生部《消毒技术规范》等、经严格质量控制制备而成。
芽孢悬液中含有一定数量、具有特定抗性的细菌芽孢，可直接接种，也可用于自制生物指示剂。
萎缩芽孢杆菌芽孢悬液产品名称芽孢悬液菌种名称萎缩芽孢杆菌（B. atrophaeus）ATCC 9372（曾用名：枯草芽孢杆菌黑色变种）产品规格B9372-9 芽孢数：109CFU/ml；包装：5 ml/瓶B9372-8 芽孢数：108CFU/ml；包装：5 ml/瓶B9372-7 芽孢数：107CFU/ml；包装：10 ml/瓶B9372-6 芽孢数：106CFU/ml；包装：10 ml/瓶用途可用于各种化学消毒剂、干热、环氧乙烷等灭菌效果的验证和评价，无菌冷灌装生产线的性能验证，染菌载片的制备以及生物安全柜灭菌效果的验证等。
贮藏条件2~8℃，避免阳光直射和接触灭菌剂。
有效期生产日起12个月嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢悬液短小芽孢杆菌芽孢悬液注：CICC亦可按照客户要求提供不同规格包装。
另外根据客户要求可提供：生孢梭菌（Clostridium sporogenes），枯草芽孢杆菌（B. subtilis），巨大芽孢杆菌（B. megaterium），蜡状芽孢杆菌（B. cereus）等的芽孢悬液。
2.工业生物指示剂工业生物指示剂是根据工业企业实际情况，按照标准要求定制加工而成，以满足企业的特殊需求，通常采用不同的载体材料和包装形式，例如钢片、钢线、纸片、棉线、塑料片和滑石粉等，它与芽孢条、自含式等标准生物指示剂相比更具优势。
CICC可按照客户要求提供定制工业生物指示剂。
染菌滑石粉CICC研制的标准专用染菌滑石粉，以符合标准要求的滑石粉为载体，选用CICC 自行生产的微生物材料萎缩芽孢杆菌ATCC 9372芽孢悬液，按标准要求精制而成，每批染菌滑石粉产品均经过芽孢含量检验，确保质量稳定。
生物指示剂标准-概述说明以及解释
生物指示剂标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容可以描述生物指示剂标准的基本概念和背景。
可以包括以下内容：生物指示剂是一种用来评估、监测和验证环境中生物多样性和生态系统健康状况的工具。
它们可以是某种生物物种、种群或者生态系统，在发生环境变化或者受到干扰时，表现出特定的反应或者指示作用。
生物指示剂广泛应用于环境监测、生态研究、生态风险评估以及环境污染和气候变化等方面。
生物指示剂标准的制定是为了确保生物指示剂的使用和结果的准确性、可重复性和可比性。
标准的制定需要考虑多个因素，包括生物指示剂的选择、监测方法和指标以及数据分析和解释等。
通过制定生物指示剂标准，可以实现对于环境变化和生态系统健康的准确评估和监测。
标准可以提供统一的指导和规范，确保不同机构和研究者使用相同的方法和指标进行生物指示剂的研究和应用。
标准还可以促进不同研究和监测结果的比较和合理解释，从而增加生物指示剂在环境保护和生态恢复中的可信度和可行性。
本文将重点介绍生物指示剂标准的制定过程、应用领域以及其重要性、优势和限制，并对未来发展趋势进行展望。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以包括以下几点：1.2 文章结构本文将按照以下结构来探讨生物指示剂标准的问题：第一部分是引言部分，概述了生物指示剂标准的背景和相关的重要性。
其中1.1部分简要介绍了生物指示剂的概念和应用领域，1.2部分则详细介绍了本文的文章结构，以便读者了解整个文章的框架和逻辑。
最后，1.3部分明确了本文的目的，即通过探讨生物指示剂标准的制定、重要性、优势与限制以及未来发展趋势，为相关领域的研究和实践提供参考和借鉴。
第二部分是正文部分，主要分为3个小节。
首先，2.1节将详细阐述生物指示剂的定义，以便读者对该概念有更深入的理解。
接着，2.2节将介绍生物指示剂在不同领域的应用，包括环境监测、食品安全、生物疫苗等。
最后，2.3节将探讨生物指示剂标准的制定过程，涉及到相关的标准机构、制定流程和参考标准等内容。
生物指示剂
生物指示剂的选择和使用
四.环氧乙烷灭菌用生物指示剂 在环氧乙烷灭菌工艺中，常采用枯草
• 有些生物指示剂可直接将孢子接种至液体灭菌物或具有与 其相似的物理和化学特性的替代品中。使用替代品时，应 用数据证明二者的等效性。
生物指示剂的选择和使用
一.湿热灭菌用生物指示剂 湿热灭菌法最常用的生物指示剂为嗜
热脂肪芽孢杆菌孢子。D值为分钟，每片活 孢子数5×105~5×106个，在121℃、19分钟 下应被完全杀灭。此外，还可使用生胞梭 菌孢子，D值为分钟。
〔3〕制造商还应该提供如下信息：D 值、D 值测定 的方法、微生物数量、生物指示剂在有效期内耐 受才能、推荐的储存条件、使用指令等。
〔4〕生物指示剂制造商还应该提供使用后生物指示 剂处置的本卷须知，确保实验人员平安和防止对 环境造成破坏影响
制备生物指示剂用微生物的根本要求
不同的灭菌方法使用不同的生物指示剂，制备生 物指示剂所选用的微生物必须具备以下特性： ①菌种的耐受性应大于需灭菌产品中所有可能污染 微生物的耐受性； ②菌种应无致病性； ③菌株应稳定。存活期长，易于保存； ④易于培养。 假设使用休眠孢子，生物指示剂中休眠孢子含量要 在90%以上。
生物指示剂
目录
• 生物指示剂的定义 • 生物指示剂的组成形式 • 生物指示剂的制备 • 生物指示剂的选择和使用
生物指示剂的定义
生物指示剂，简称为BI〔biological indicator),是对特定灭菌工艺具有一定耐受 性并且可以定量测定效力的微生物制剂， 适用于制备生物指示剂的微生物多为芽孢 类细菌，这是因为，除辐射灭菌外，芽孢 类细菌比常规的生长态微生物对灭菌工艺 具有更强的耐受性。生物指示剂既可用来 测定一个给定的灭菌工艺条件的灭菌效果 ，也可判别它是否符合无菌保证要求。
生物指示剂.
生物指示剂：1.芽孢悬液CICC芽孢悬液采用国际通用标准菌株，参照国家药典、相关标准、卫生部《消毒技术规范》等、经严格质量控制制备而成。
芽孢悬液中含有一定数量、具有特定抗性的细菌芽孢，可直接接种，也可用于自制生物指示剂。
萎缩芽孢杆菌芽孢悬液产品名称芽孢悬液菌种名称萎缩芽孢杆菌（B. atrophaeus）ATCC 9372（曾用名：枯草芽孢杆菌黑色变种）产品规格B9372-9 芽孢数：109CFU/ml；包装：5 ml/瓶B9372-8 芽孢数：108CFU/ml；包装：5 ml/瓶B9372-7 芽孢数：107CFU/ml；包装：10 ml/瓶B9372-6 芽孢数：106CFU/ml；包装：10 ml/瓶用途可用于各种化学消毒剂、干热、环氧乙烷等灭菌效果的验证和评价，无菌冷灌装生产线的性能验证，染菌载片的制备以及生物安全柜灭菌效果的验证等。
贮藏条件2~8℃，避免阳光直射和接触灭菌剂。
有效期生产日起12个月嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢悬液短小芽孢杆菌芽孢悬液注：CICC亦可按照客户要求提供不同规格包装。
另外根据客户要求可提供：生孢梭菌（Clostridium sporogenes），枯草芽孢杆菌（B. subtilis），巨大芽孢杆菌（B. megaterium），蜡状芽孢杆菌（B. cereus）等的芽孢悬液。
2.工业生物指示剂工业生物指示剂是根据工业企业实际情况，按照标准要求定制加工而成，以满足企业的特殊需求，通常采用不同的载体材料和包装形式，例如钢片、钢线、纸片、棉线、塑料片和滑石粉等，它与芽孢条、自含式等标准生物指示剂相比更具优势。
CICC可按照客户要求提供定制工业生物指示剂。
染菌滑石粉CICC研制的标准专用染菌滑石粉，以符合标准要求的滑石粉为载体，选用CICC 自行生产的微生物材料萎缩芽孢杆菌ATCC 9372芽孢悬液，按标准要求精制而成，每批染菌滑石粉产品均经过芽孢含量检验，确保质量稳定。
R22058-A 生物指示剂管理规程
北京百慧生化制药有限责任公司工作标准文件名称生物指示剂管理规程文件编号22058-A 编制人编制部门编制日期审核人审核部门审核日期批准人批准部门批准日期生效日期年月日版本第2版颁发部门质量管理部制作备份1份分发部门质量管理部1 目的：为了安全、合理地使用生物指示剂，加强生物指示剂控制管理，制定本规程。
2 范围：本规程适用于干热灭菌、湿热灭菌验证或其他灭菌规程用生物指示剂的选择、购买、核对领取、保存、使用、销毁等。
3 责任：QC检验员对本规程实施负责。
4 内容：4.1 操作依据：《中国药典》2015年版四部通则1421灭菌法；生物指示剂说明书。
4.2 指示剂定义：生物指示剂系一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。
用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。
4.2.1 制备生物指示剂用微生物的基本要求不同的灭菌方法使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的微生物必须具备以下特性：4.2.1.1 菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所有可能污染菌的耐受性。
4.2.1.2 菌种应无致病性。
4.2.1.3 菌株应稳定。
存活期长，易于保存。
4.2.1.4 易于培养。
若使用休眠孢子，生物指示剂中休眠孢子含量要在90%以上。
4.2.2 生物指示剂的制备4.2.2.1生物指示剂的制备应按一定的程序进行，制备前，需先确定所用微生物的特性，如D 值(微生物的耐热参数，系指一定温度下，将微生物杀灭90%所需的时间，以分钟表示）等。
菌株应用适宜的培养基进行培养。
培养物应制成悬浮液，其中孢子的数量应占优势，孢子应悬浮于无营养的液体中保存。
4.2.2.2 生物指示剂中包含一定数量的一种或多种孢子，可制成多种形式。
通常是将一定数量的孢子附着在惰性的载体上，如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等；孢子悬浮液也可密封于安瓿中；有的生物指示剂还配有培养基系统。
D 值除与灭菌条件相关外，还与微生物存在的环境有关。
生物指示剂管理规程
生物指示剂管理规程
目的：为安全、合理地使用生物指示剂（BI），对生物指示剂进行控制管理。
范围：用于灭菌法验证所用的生物指示剂。
责任人：质量检验部部长生物指示剂管理员验证人员检验员
内容：
1 购买：生物指示剂应从有资质的生产厂家购得，购买的生物指示剂应附有相应的质量报告，内容包括微生物种类、含量、D值、有效期等。
2 质量复核：
2.1 生物指示剂在使用前要进行质量复核，进行微生物数量的确认。
2.2. 微生物数量确认：将原生物指示剂的所有含有微生物的部分转移到生理盐水中，稀释后进行计数，与质量报告中的数量进行比较。
2.3 微生物复核报告应包含以下内容：含菌量确认、生厂商、菌名、批号、标示含菌量、D值、效期、稀释过程、稀释倍数、计数结果、每个生物指示剂的含菌量、是否合格等。
可以将生物指示剂的产品质量报告或其复印件与上述文件一起存放。
3 保存与使用
3.1 生物指示剂严格按说明书要求存放。
3.2 检验合格的生物指示要经过批准和发放后才可以使用。
3.3 所用的生物指示剂严格按说明书要求使用。
3.4 领用时要登记领用人、日期、数量。
生物指示剂复核记录
记录编号：
检验
人：复核人：。
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关于生物指示剂
生物指示剂系一类特殊的活微生物制品。
可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。
用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。
（一）制备生物指示剂用微生物的基本要求
不同的灭菌方法使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的微生物必须具备以下特性：①菌种的耐受性应大于需灭菌产品中所有可能污染微生物的耐受性；②菌种应无致病性；③菌株应稳定。
存活期长，易于保存；④易于培养。
若使用休眠孢子，生物指示剂中休眠孢子含量要在90%以上。
（二）生物指示剂的制备
生物指示剂的制备应按一定的程序进行，制备前，需先确定所用微生物的特性，如D值（微生物的耐热参数，系指一定温度下，将微生物杀灭90%所需的时间，以分表示）等。
菌株应用适宜的培养基进行培养。
培养物应制成悬浮液，其中孢子的数量应占优势，孢子应悬浮于无营养的液体中保存。
生物指示剂中包含一定数量的一种或多种孢子，可制成多种形式，通常是将一定数量的孢子附着在惰性的载体上，如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等；孢子悬浮液也可密封于安瓿中；有的生物指示剂还配有培养基系统。
生物指示剂应选用合适的材料包装，并设定有效
期。
载体和包装材料在保护生物指示剂不被污染和损耗的同时，还应保证灭菌剂穿透并能与生物指示剂充分接触。
载体和包装应设计原则是便于贮存、运输、取样、转移接种。
有些生物指示剂可直接将孢子接种至液体灭菌物或具有与其相似的物理和化学特性的替代品中。
使用替代品时，应用数据证明二者的等效性。
（三）生物指示剂的应用
在灭菌程序的验证中，尽管可通过灭菌过程某些参数的监控来评估灭菌效果，但生物指示剂的被杀灭程度，则是评价一个灭菌程序有效性最直观的指标。
可使用市售的标准生物指示剂，也可使用由日常生产污染菌监控中分离的最耐受微生物制备的孢子。
在生物指示剂验证试验中，需确定孢子在实际灭菌条件下的耐受性，并测定孢子的纯度和数量。
验证时，生物指示剂的微生物用量应比日常检出的微生物污染量大，耐受性强，以保证灭菌程序有更大的安全性。
在最终灭菌法中，生物指示剂应放在灭菌柜的不同部位。
并避免指示剂直接接触到被灭菌物品。
生物指示剂按设定的条件灭菌后取出，分别置培养基中培养，确定生物指示剂中的孢子是否被完全杀灭。
过度杀灭产品灭菌验证一般不考虑微生物污染水平，可采用市售的生物指示剂。
对灭菌手段耐受性差的产品，设计灭菌程序时，根据经验预计在该生产工艺中产品微生物污染的水平，选择生物指示剂的菌种
和孢子数量。
这类产品的无菌保证应通过监控每批灭菌前的微生物污染的数量、耐受性和灭菌程序验证所获得的数据进行评估。
常用的生物指示剂
1、湿热灭菌法：湿热灭菌法最常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子，如NCTC10007、NCIMB8157、ATCC7953。
D值为1.5—3.0min，每片（或每瓶）活孢子数5*10（5）—5*10（6）个，在121℃、19min 下应被完全杀灭。
此外，还可使用生孢梭菌孢子如NCTC8594、NCIMB8053、ATCC7955，D值为0.4—0.8min。
2、干热灭菌法：干热灭菌法最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子，如NCIMB8058、ATCC9372。
D值大于1.5min，每片活孢子数5*10（5）—5*10（6）个。
去热原验证时使用大肠杆菌内毒素，加量不小于1000细菌内毒素单位。
3、辐射灭菌法：辐射灭菌法最常用的生物指示剂为短小芽孢杆菌孢子，如NCTC10327、NCIM10692、ATCC27142。
每片活孢子数10（5）—*10（6），置于放射剂量25kGy条件下，D值约3kGy。
但应注意灭菌产品中所负载的微生物可能比短小芽孢杆菌孢子显示更强的抗辐
射力。
因此短小芽孢杆菌孢子可用于监控灭菌过程，但不能用于灭菌辐射剂量的建立。
4、气体灭菌法;环氧乙烷灭菌最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子，如NCTC10073、ATCC9372。
气态过氧化氢灭菌最常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子，如NCTC10007、NCIM8157、ATCC7953。
每片活孢子数1*10（5）—5*10（6）个。
环氧乙烷灭菌中，枯草芽
孢杆菌孢子D值大于2.5min，在环氧乙烷浓度为600mg/l，相对湿度为60%，温度为54℃下灭菌，
60min应被杀灭。
5、过滤除茵法：过滤除菌法最常用的生物指示剂为缺陷假单胞菌(如ATCC19146），用于滤膜孔径为0.22um的滤器；黏质沙雷菌（ATCC14756），用于滤膜孔径为0.45um的滤器。