药物分析特殊杂质检查项目与方法
药物分析特殊杂质检查项目与方法
药物名称特殊杂质检查项目检查方法
阿司匹林游离水杨酸纳氏比色管比色法
布洛芬有关物质TLC,自身稀释对照法
丙磺舒有关物质TLC,自身稀释对照法
盐酸普鲁卡因注射液对氨基苯甲酸TLC,杂质对照品(对氨基苯甲酸)法
对乙酰氨基酚有关物质TLC,杂质对照品(对氯乙酰苯胺)法
对氨基酚纳氏比色管比色法
肾上腺素酮体UV,310nm测定吸光度值
苯巴比妥中性或碱性物质重量分析法,碱性条件下用乙醚提取后称定重量
司可巴比妥钠中性或碱性物质重量分析法,碱性条件下用乙醚提取后称定重量
异烟肼游离肼TLC,杂质对照品（硫酸肼）法
硝苯地平有关物质HPLC，外标法
诺氟沙星有关物质HPLC，外标法
盐酸氯丙嗪有关物质TLC，自身稀释对照法
地西泮及其注射液有关物质HPLC，不加校正因子的主成分自身对照法
奥沙西泮有关物质TLC，自身稀释对照法
硫酸阿托品莨菪碱旋光法
其他生物碱比浊法
盐酸吗啡阿扑吗啡比色法
罂粟酸比色法
其他生物碱TLC，自身稀释对照法与对照品（磷酸可待因）法硫酸奎宁三氯甲烷-乙醇中的不溶物重量分析法
其他金鸡纳碱TLC，自身稀释对照法
硝酸士的宁马钱子碱硝化反应后观察颜色，不得显红色或红棕色
葡萄糖亚硫酸盐与可溶性淀粉加碘试液反应应，应即显黄色
蛋白质与磺基水杨酸反应，不得产生沉淀
右旋糖酐20 分子排阻HPLC，示差折光检测器
醋酸地塞米松有关物质HPLC，不加校正因子的主成分自身对照法
硒UV，氧瓶燃烧破坏后测定吸光度值
维生素B1 总氯量容量分析法，银量法
维生素C 铁盐和铜盐原子吸叫分光光度法
维生素E 生育酚容量分析法，铈量法
正已烷外标法，GC，FID检测器
维生素K1 甲萘醌比色法
顺式异构体HPLC，面积归一化法
青霉素钠（钾）吸光度难关UV
青霉素聚合物分子排阻HPLC，葡聚糖凝胶柱，UV检测器阿莫西林有关物质HPLC，梯度洗脱
阿莫西林聚合物分子排阻HPLC，葡聚糖凝胶柱，UV检测器硫酸庆大霉素G组分HPLC，蒸发光散射检测器
盐酸四环素有关物质HPLC，加校正因子的主成分对照法
罗红霉素有关物质HPLC
药物分析特殊杂质检查项目与方法
药物分析特殊杂质检查项目与方法 药物名称特殊杂质检查项目检查方法 阿司匹林游离水杨酸纳氏比色管比色法 布洛芬有关物质TLC,自身稀释对照法 丙磺舒有关物质TLC,自身稀释对照法 盐酸普鲁卡因注射液对氨基苯甲酸TLC,杂质对照品(对氨基苯甲酸)法 对乙酰氨基酚有关物质TLC,杂质对照品(对氯乙酰苯胺)法 对氨基酚纳氏比色管比色法 肾上腺素酮体UV,310nm测定吸光度值 苯巴比妥中性或碱性物质重量分析法,碱性条件下用乙醚提取后称定重量 司可巴比妥钠中性或碱性物质重量分析法,碱性条件下用乙醚提取后称定重量 异烟肼游离肼TLC,杂质对照品（硫酸肼）法 硝苯地平有关物质HPLC，外标法 诺氟沙星有关物质HPLC，外标法 盐酸氯丙嗪有关物质TLC，自身稀释对照法 地西泮及其注射液有关物质HPLC，不加校正因子的主成分自身对照法 奥沙西泮有关物质TLC，自身稀释对照法 硫酸阿托品莨菪碱旋光法 其他生物碱比浊法 盐酸吗啡阿扑吗啡比色法 罂粟酸比色法 其他生物碱TLC，自身稀释对照法与对照品（磷酸可待因）法硫酸奎宁三氯甲烷-乙醇中的不溶物重量分析法 其他金鸡纳碱TLC，自身稀释对照法 硝酸士的宁马钱子碱硝化反应后观察颜色，不得显红色或红棕色 葡萄糖亚硫酸盐与可溶性淀粉加碘试液反应应，应即显黄色 蛋白质与磺基水杨酸反应，不得产生沉淀 右旋糖酐20 分子排阻HPLC，示差折光检测器 醋酸地塞米松有关物质HPLC，不加校正因子的主成分自身对照法 硒UV，氧瓶燃烧破坏后测定吸光度值 维生素B1 总氯量容量分析法，银量法
维生素C 铁盐和铜盐原子吸叫分光光度法 维生素E 生育酚容量分析法，铈量法 正已烷外标法，GC，FID检测器 维生素K1 甲萘醌比色法 顺式异构体HPLC，面积归一化法 青霉素钠（钾）吸光度难关UV 青霉素聚合物分子排阻HPLC，葡聚糖凝胶柱，UV检测器阿莫西林有关物质HPLC，梯度洗脱 阿莫西林聚合物分子排阻HPLC，葡聚糖凝胶柱，UV检测器硫酸庆大霉素G组分HPLC，蒸发光散射检测器 盐酸四环素有关物质HPLC，加校正因子的主成分对照法 罗红霉素有关物质HPLC
药物的杂质检查
一、选择题： 1．药物中的重金属是指（） A Pb2＋ B 影响药物安全性和稳定性的金属离子 C 原子量大的金属离子 D 在规定条件下与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质 2．古蔡氏检砷法测砷时，砷化氢气体与下列那种物质作用生成砷斑（） A 氯化汞 B 溴化汞 C 碘化汞 D 硫化汞 3．检查某药品杂质限量时，称取供试品W(g)，量取标准溶液V(ml)，其浓度为C(g/ml)，则该药的杂质限量(%)是（） A B C D 4．用古蔡氏法测定砷盐限量，对照管中加入标准砷溶液为（） A 1ml B 2ml C 依限量大小决定 D 依样品取量及限量计算决定 5．药品杂质限量是指（） A 药物中所含杂质的最小容许量 B 药物中所含杂质的最大容许量 C 药物中所含杂质的最佳容许量 D 药物的杂质含量 6．氯化物检查中加入硝酸的目的是（） A 加速氯化银的形成 B 加速氧化银的形成 C 除去CO2+3、SO2-4、C2O2-4、PO3-4的干扰 D 改善氯化银的均匀度 二、多选题： 1．用对照法进行药物的一般杂质检查时，操作中应注意（） A 供试管与对照管应同步操作 B 称取1g以上供试品时，不超过规定量的±1% C 仪器应配对 D 溶剂应是去离子水 E 对照品必须与待检杂质为同一物质 2．关于药物中氯化物的检查，正确的是（） A 氯化物检查在一定程度上可“指示”生产、储存是否正常
B 氯化物检查可反应Ag+的多少 C 氯化物检查是在酸性条件下进行的 D 供试品的取量可任意 E 标准NaCl液的取量由限量及供试品取量而定 3．检查重金属的方法有（） A 古蔡氏法 B 硫代乙酰胺 C 硫化钠法 D 微孔滤膜法 E 硫氰酸盐法 4．关于古蔡氏法的叙述，错误的有（） A 反应生成的砷化氢遇溴化汞，产生黄色至棕色的砷斑 B 加碘化钾可使五价砷还原为三价砷 C 金属新与碱作用可生成新生态的氢 D 加酸性氯化亚锡可防止碘还原为碘离子 E 在反应中氯化亚锡不会铜锌发生作用 5．药品的杂质会影响（） A 危害健康 B 影响药物的疗效 C 影响药物的生物利用度 D 影响药物的稳定性 E 影响药物的均一性 三、填空题： 1．药典中规定的杂质检查项目，是指该药品在___________和____________可能含有并需要控制的杂质。 2．古蔡氏检砷法的原理为金属锌与酸作用产生____________，与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的___________，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的______，与一定量标准砷溶液所产生的砷斑比较，判断药物中砷盐的含量。 3．砷盐检查中若供试品中含有锑盐，为了防止锑化氢产生锑斑的干扰，可改用__________。 四、名词解释： 1. 一般杂质： 2. 特殊杂质：
药物中特殊杂质的检查
药物中特殊杂质的检查 一、目的要求 1．掌握阿司匹林片、盐酸普鲁卡因注射液、盐酸四环素片中特殊杂质检查的基本原理和方法； 2．掌握薄层色谱法在药物杂质检查中的应用； 3．掌握薄层色谱法的基本操作； 4. 掌握检验结果的处理与判断，能够规范书写检验原始记录及检验报告书； 5. 正确并更科学合理地解释检验中的现象，处理检验中的异常情况。 二、试剂与仪器 1．试剂（查阅《中国药典》，进行所用试剂的配制） 2. 仪器 纳氏比色管、玻璃板（5×15cm）、全自动点样器、层析缸、可见分光光度计 三、实验步骤 （一）阿司匹林肠溶片中游离水杨酸的检查 取本品5片，研细，用乙醇30mL分次研磨，并移入100mL量瓶中，充分振摇，用水稀释至刻度，摇匀，立即过滤，精密量取滤液2mL，置50mL纳氏比色管中，用水稀释至50mL，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液（取1mol/L盐酸溶液1mL，加硫酸铁铵指示液2mL后再加水使成100mL）3mL，摇匀，30秒钟内如显色，与对照液（精密量取0.01%水杨酸溶液4.5mL，加乙醇3mL，0.05%酒石酸溶液1mL，用水稀释至50mL，再加上述新配制的稀硫酸铁铵溶液3mL，摇匀）比较，不得更深。 （二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 薄层板的制备：取硅胶H2.5g，加0.5%羧甲基纤维素钠水溶液5.5～6mL调成糊状，均匀涂布于光滑、平整、洁净的玻璃板（5×15cm）上，置水平台上晾干，在110℃烘0.5小时，置干燥器备用。 操作：精密量取本品，加乙醇稀释使成每1mL中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。另取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1mL中含30μg 的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各10微升，分别点样于同一羧甲
药物分析的方法学验证所要做到的事项
药物分析的方法学验证所要做到的事项（一） 新药申报时，药品质量标准中分析方法必须验证；药物生产工艺变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，则质量标准分析方法必须进行验证；2005版药典中分析方法验证指导原则只规定了项目和基本方法而没有合格标准:附录XIX A；中国GMP(98)非常关注验证的过程,分析方法验证不完善是常见的问题 药物分析检验时药品生产的GMP的药物分析的方法学验证，是保证药物分析结果准确性的前提和基础，也是实现药物分析检测GMP的必然要素。 构成药物分析中的检测方法验证，这要涉及到以下些方面的内容： 1、分析方法验证成功的前提条件： （！）仪器已经确认、校正并在有效期内（2）经过培训的人员（3）可靠稳定的对照品 （4）可靠稳定的实验试剂（5）确认受试溶液的稳定性，在规定时间内无降解。 2、分析方法学验证所要求验证的内容：（1）含量的测定（2）杂质的含量测定（3）药物的定性鉴定（4）药物的含量均匀度测定（5）药物的微生物检测（6）药物的细菌内毒素的检测 验证内容： 准确度：准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。 测定回收率R（recovery）的具体方法可采用加样回收试验法来进行测定。加样回收试验已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M。数据要求:规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备高、中、低三个不同浓度样品各测三次 精密度：（重复性、中间精密度和重现性精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。 （1）重复性(repeatability):在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作100%，至少测6次进行评价 （2）中间精密度同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备
杂质检查方法的方法学验证各项指标分析
杂质检查方法的方法学验证各项指标分析 姓名：王芳 药物分析中药品检验基本程序包括：鉴别、检查、含量测定、写实验报告等步骤 检查项下包括反映药品安全性有效性的试验方法和限度、均一性、纯度等制备工艺要 求等内容。药物的杂质是指药物中存在的无治疗作用或者影响药物的稳定性、 疗效,甚至对 人体的健康有害的物质。杂质的来源可由生产和贮藏过程中引入：①生产过程中主要是由 于所用原料不纯或者原料反应过程中反应未完全 ，以及反应的中间产物、 反应的副产物等 造成药品原料中杂质的存在；或者是由原料生产过程中反应的溶媒、催化剂等溶剂的残留 所造成的药物的杂质。②贮藏过程引入主要是受温度、 湿度、日光、空气等外界条件的 影响或者受微生物的作用产生的杂质。 在药物的研究、 生产、贮存和临床应用等方面，必 须保持药物的纯度，降低药物的杂质，这样才能保证药物的有效性和安全性。 原料药和制剂主要是对药物中的微量杂质进行纯度检查，以判断药物纯度是否符合杂 质限量的规定要求，而生物制品的杂质检查除包括一般杂质检查，特殊杂质检查外还应对 其进行安全性检查。杂质定量、定性检查方法主要是根据药物和特殊杂质在理化性质上的 差异来进行的，可以采用容量分析法，光谱法分析法，色谱分析法等，各种检测方法所需 的方法学验证的指标包括准确度，精密度，专属性，线性，范围，检测线、定量线，耐用 性八项指标，但采用不同方法所需的指标不尽相同，杂质限量检查一般需要验证专属性， 检测线，耐用性。而杂质定量分析方法除检测限外其它指标一般都需验证 ⑷。 不同实验应该根据不同实验目的对对各项指标进行验证，下面就杂质种类及近年来检 测杂质最常用的检测方法进行分析： 1、 特殊杂质 特殊杂质是指在药物制备和贮存过程中 ， 或 合成过程中产生的副产物等，多指有机杂质, 性的对 映体。 HPLC 法测定萘普生缓释片有关物质的含量： 该缓释片主药是萘普生，特殊杂质为(6 —甲氧基—2—萘乙酮)，方法采用高效液相色谱法(HPLC)法；色谱柱：以十八烷基硅烷键 合硅胶为学号: 由于药物性质不稳定而产生的降解产物 也包括残留溶剂和手性化合物中无特殊毒
中国药典2020年版 9101 分析方法验证指导原则
9101分析方法验证指导原则 分析方法验证（analytical method validation）的目的是证明建立的方法适合于相应检测要求。在建立药品质量标准、变更药品生产工艺和制剂组分、修订原分析方法时，需对分析方法进行验证。生物制品质量控制中采用的方法包括理化分析方法和生物学测定方法，其中理化分析方法的验证原则与化学药品基本相同，所以可参照本指导原则进行，但在进行具体验证时还需要结合生物制品的特点考虑；相对于理化分析方法而言，生物学测定方法存在更多的影响因素，因此本指导原则不涉及生物学测定方法验证的内容。 验证的分析项目：鉴别试验、杂质检查（限度或定量分析）、含量测定（包括特性参数和含量/效价测定，其中特性参数如：药物溶出度、释放度等）。 验证的指标有：专属性、准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、检测限、定量限、线性、范围、耐用性。在分析方法中，须用标准物质进行试验。由于分析方法具有各自的特点中，并随分析对象而变化，因此需要视具体情况拟订验证的指标。表1列出的分析项目和相应的验证指标可供参考。 表1检验项目和验证指标 项目内容鉴别杂质测定含量测定 -特性参数 -含量或效价测定定量限度 专属性②++++ 准确度-+-+ 精密度重复性-+-+中间精密度-+①-+① 检测限（LOD）--③+- 定量限(LOQ)-+-- 线性-+-+ 范围-+-+ 耐用性++++ 1已有重现性验证，不需要验证中间精密度； 2如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充； 3视具体情况予以验证。 方法学验证内容如下： 一、专属性 专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的分析方法能正确测定出被测物的能力。鉴别反应、杂质检査和含量测定方法，均应考察其专属性。如方法专属性不强，应采用一种或多种不同原理的方法予以补充。
实验2 药物特殊杂质检查(学生)
实验2 药物特殊杂质检查 一、目的要求 1、掌握葡萄糖分析中砷盐限度检查的原理和方法。 2、了解某些药物中特殊杂质的检查意义，并掌握其操作方法。 二、实验原理 As 3+ +3Zn +3H +3Zn 2++AsH AsO 3 3-+3Zn +9H +3Zn 2++AsH +H 2O AsO 43-+4Zn +11H +4Zn 2++AsH +4H 2O AsH 3+3HgBr 23HBr +As(HgBr)3黄色2As(HgBr)3+AsH 33AsH(HgBr)2棕色As(HgBr)3 +AsH 3 3HBr +3As 2Hg 3 棕黑色 本实验采用古蔡（Gutzeit ）法检查药物中微量的砷盐，其原理为金属锌与酸作用生成新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，判断供试品中砷盐含量是否符合限量规定。 O OH OH 水杨酸 OCOCH 3 OH O 乙酰水杨酸 O OH OH +Fe 3+ +3H + 3 O O Fe /3 3 O H 利用乙酰水杨酸结构中无酚羟基，不能与高铁盐作用，而水杨酸则可与高铁盐反应呈紫(堇)色，与一定量水杨酸对照液生成的色泽比较，从而控制游离水杨酸的限量。 C 2H 5OOC 2H 5+2KI H 2O C 2H 5OC 2H 5I 2 2 KOH + ++ I 2 遇淀粉显色，判断供试品中是否有过氧化物存在。 5CH 3OH+2MnO 4-+ 6H + 5HCHO +2Mn 2++ 8H 2O 3Mn 2++ 2MnO 4-+2H 2 O 5MnO 2+ 4H + 甲醇在磷酸溶液中，被高锰酸钾氧化成甲醛，用偏重亚硫酸钠除去过量的高锰酸钾，甲醛与变色酸在浓硫酸存在下，先缩合，随之氧化，生成对醌结构的蓝紫色化合物。
化学药物分析方法验证的内容和评价
化学药物分析方法验证的内容和评价 质量可控是活性化合物成药及进行药品安全有效性评价的前提。对药品的质量进行控制应该是多方面的，其中包括生产环境的控制、原辅料来源和质量的控制、生产工艺过程的控制，以及按照质量标准进行成品检验控制等。 但是，在药品研发过程中，揭示药品的品质、控制药品的质量，通常是要针对研制药品的特性 (主药的理化性质及制剂的质量要求等 )确定相应的研究测 试项目，再根据测试项目的需要，建立适宜的分析方法 (包括方法的选择和方法的验证 )，最后是根据药品质量的要求及安全性研究结果确定各测试项目的限度，起草制订检验药品质量的质量标准。分析方法是揭示药品品质的工具和手段，方法验证是判断采用的分析方法是否科学、可行的过程。实际上，方法验证就是根据确定的检测项目的要求，预先设置一定的验证内容，并通过设计合理的试验来验证所采用的分析方法能否符合检测项目的要求。下面就根据《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》解读分析方法验证的内容和评价要点，在对目前申报资料中分析方法验证工作中存在的问题进行分析的基础上，以高效液相色谱法为例，阐述方法验证的思路及验证要点，希望能对药物研发者有所帮助。 一、方法验证的内容 首先应该明确的是：方法验证的内容应根据检测项目的要求，同时结合所采用的分析方法的特点确定。相同的分析方法用于不同的检测项目时，其验证要求是不同的。例如，采用高效液相色谱法用于制剂的鉴别和杂质定量检查时的验证要求是不同的；前者重点要验证方法的专属性，而后者重点要验证方法的专属性、准确度和定量限。通常需要验证的检测项目：鉴别、杂质检查 (限度试验、定量试验 )、定量测定 (含量测定、溶出度、释放度等 )，还有其他特定的检测项目 (粒径分布、分子量分布)等。方法验证的内容包括专属性、线性、范围、准确度、精密度、检测限、定量限、耐用性 (粗放度 )和系统适用性等。 1、专属性专属性系指在其他成分 (如杂质、降解物、辅料等 )存在下，采用的分析方法能够正确鉴定、检出被测物的特性。通常，鉴别、杂质检查、含量测定均应验证方法的专属性，排除非主药成分的干扰。 2、线性线性系指在设计的测定范围内，检测结果与供试品中被测物的浓度(量)直接呈线性关系的程度，是定量测定的基础，涉及定量测定的项目，如杂质定量试验和含量测定均需要验证方法的线性。
第三章药物的杂质检查
一、氯化物检查法 药物的生产过程中，常常要用到盐酸，或原料、中间体呈盐酸盐等，氯化物因此极易被引入到药物中。Cl-对人体虽然无害，但它的量可以反映出药物的纯净程度及生产过程是否正常。因此作为信号杂质，氯化物在很多药物中需要检查。 原理中国药典对氯化物的检查是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，浊度不得更大。 方法除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml(溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10ml；溶液如不澄清，应滤过；置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml 纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0m1，用水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置5min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较。 中国药典对无水葡萄糖中氯化物的检查记叙为：取本品0.60g，依法检查(附录ⅤⅢA)，与标准氯化钠溶液6.0ml制成的对照液比较，不得更浓(0.010%)。 讨论以上检查方法中使用的标准氯化钠溶液每1ml相当于10μg的Cl-。在测定条件下，氯化物浓度以50ml中含50μg～80μg的Cl-（相当于标准氯化钠溶液5.0ml～8.0ml）所显浑浊梯度明显，便于比较。因此设计氯化物的检查方法时，应根据其限量，取用适宜的供试品量，使氯化物的浓度处在适宜比浊的范围内。 氯化物检查宜在硝酸酸性溶液中进行，因加入硝酸可避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成而干扰检查，同时还可加速氯化银沉淀的生成并产生较好的乳浊。 为了避免光线使单质银析出，在观察前应在暗处放置5min。由于氯化银为白色沉淀，比较时应将比色管置黑色背景上，从上向下观察，比较。 供试品处理有的药物在上述试验条件下对检查有干扰，应排除干扰后再检查。供试品溶液如不澄清，可用含硝酸的水洗净滤纸中的氯化物后滤过。供试品溶液如带颜色，可按中国药典附录所规定的方法处理。即取两份供试品溶液，于其中一份中先加入硝酸银试液1.0m1，摇匀，放置10min，如显浑浊，可反复滤过，至滤液澄清，即得无氯化物杂质又具有相同颜色的澄清溶液，再在其中加入规定量的标准氯化钠溶液与水适量使成50ml，作为对照溶液；另一份中加入硝酸银试液1.0ml与水适量使成50ml，作为供试品溶液，将两液在暗处放置5 min后比较，即可消除颜色的干扰。某些有颜色的药物也可根据其化学性质，设计其他的排除干扰的方法。如高锰酸钾中的氯化物检查，可先加乙醇适量使高锰酸钾还原褪色后，再依法检查。检查碘化物（如碘化钠），I-也能与硝酸银形成沉淀，干扰检查。可在供试品中加入一定量的酸和过氧化氢溶液，加热煮沸，使氧化产物碘挥去、溶液澄明无色后，再依法检查。也可以利用碘化银沉淀稳定，在氨溶液中不溶解，而氯化银、溴化银沉淀在氨溶液中溶解的性质，除去碘化物的干扰。如检查碘中氯化物和溴化物，是将供试品加水研磨、滤过，于滤液中加锌粉使碘还原为无色的碘化物，再在氨碱性条件下滴加硝酸银试液使生成碘化银沉淀而滤除。向滤液中加入硝酸，破坏络离子后，AgBr和AgCl沉淀复析出，与一定量标准氯化钠溶液生成的沉淀比较，即可确定氯化物和溴化物是否符合要求。 溶于水的有机药物，可按中国药典附录规定的方法直接检查氯化物。不溶于水的有机药物，多数采用加水振摇，使所含氯化物溶解，滤除不溶物；或加热溶解供试品，放冷后析出沉淀，滤过，取滤液依法检查。如药物在稀乙醇或丙酮中有一定溶解度，也可加稀乙醇或丙酮溶解后依法检查。三氯叔丁醇、氯法齐明中氯化物的检查即如此。 检查有机氯杂质，可根据杂质结构，将有机氯转变为离子状态，再依法检查。若有机氯为氯代脂烃或氯在环的侧链上，可在碱性溶液中加热使水解生成Cl-。若杂质中氯原子连接于环
药物的杂质检查
药物的杂质检查 (总分：61.50，做题时间：90分钟) 一、A型题(总题数：43，分数：43.00) 1.检查维生素C中重金属时，若取样量为0.1g，要求含重金属不得超过百万分之十，应取标准铅溶液(0.01mgPb/m1) ?A．0.1ml ?B．0.2ml ?C．0.4ml ?D．1ml ?E．2ml （分数：1.00） A. B. C. D. √ E. 解析： 2.药物中氯化物质检查的一般意义在于 ?A．它是有效的物质 ?B．它是对药物疗效有不利影响的物质 ?C．它是对人体健康有害的物质 ?D．可以考核生产中引入的杂质 ?E．检查方法比较方便 （分数：1.00） A. B. C. D. √ E. 解析： 3.检查砷盐限度时，使用醋酸铅棉花的目的是 ?A．使溴化汞试纸呈色均匀 ?B．防止发生瓶内的飞沫溅出 ?C．除去硫化氢的影响 ?D．使砷还原成砷化氢
?E．使砷化氢气体上升速度稳定 （分数：1.00） A. B. C. √ D. E. 解析： 4.《中国药典》(2000年版)铁盐检查法中，所使用的显色剂是 ?A．硫氰酸盐 ?B．水杨酸盐 ?C．氰化钾 ?D．过硫酸铵 ?E．盐酸 （分数：1.00） A. √ B. C. D. E. 解析： 5.杂质是指 ?A．盐酸普鲁卡因中的盐酸 ?B．溴酸钾中的氯化钾 ?C．阿莫西林中的结晶水 ?D．维生素C注射液中的亚硫酸氢钠 ?E．维生素B1中的硫酸盐 （分数：1.00） A. B. √ C. D. E. 解析： 6.杂质限量
?A．检查药物中遇到硫酸易炭化而成色的重量有机杂质 ?B．药物在规定条件下经干燥后所减失的重量 ?C．有机药物经炽灼炭化，再加硫酸湿润，低温加热至硫酸除尽后于高温(700～800度)炽灼至完全灰化 ?D．药物中杂质最大允许量 ?E．检查杂质的量是否超过限量的杂质检查方法 （分数：1.00） A. B. C. D. √ E. 解析： 7.葡萄糖中重金属检查方法如下：取本品4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml，依法检查，含重金属不得过百万分之五。应取标准铅溶液(每lml相当于10μg的Pb)的体积为 ?A．2ml ?B．2.0m1l ?C．4ml ?D．4.0ml ?E．5ml （分数：1.00） A. B. √ C. D. E. 解析： 8.检查某药物杂质限量是，称取供试品w克，量取待检杂质的标准溶液体积为V(ml)，浓度为C(g/m1)，则该药品的杂质限量是 ?A．w/CV×100％ ?B．CVw×100％ ?C．VC/w×100％ ?D．Cw/V/×100％ ?E．Vw/C×100％
药品质量标准分析方法验证
药品质量标准分析方法验证山西省药品检验所(030001) 任晋斌 李嵘立 分析方法的验证已于1994年10月经I CH执委会讲座通过国际协调,形成最后文本推荐给美国、日本、欧共体国家药政管理部门采用。美国药典(U SP)23版已将“质量标准方法的认证”载入其附录。由于美国联邦法规已明确规定U SP收载的药品质量标准为法定标准,故凡分析工作者使用U SP收载的分析方法时不必再去验证其准确性与可靠性而仅需证实其在实际使用条件下的适用性。基于U SP2N F标准的法定地位,对推荐U SP采用新的或修订的质量标准分析方法则必须有足够的以实验数据支持的文件资料对该法的准确、可靠性进行验证。鉴于我国仍有大量的地方药品标准其水平参差不齐,有的分析方法缺乏专属性、重现性,急待整顿提高为国家标准。而分析方法的质量直接影响药品标准的质量,因此有必要参照I CH有关指导原则和U SP,结合我国国情,将药品质量标准分析方法的验证作为对分析方法的质控手段,形成规程性资料,逐步载入药典,必将有利于提高我国药品质量标准的总体研究水平。 质量标准分析方法的验证是通过实验室研究,确立该方法的性能特征符合预定分析申报要求,以证明该分析方法的适用性。需要验证的分析方法种类一般应包括:①原料药主成分及制剂中活性成分(含防腐剂)的定量分析。②原料药的杂质及制剂降解产物的定量分析与限度试验。③性能特征测定的分析方法如药物溶出度和释放度、原料药的粒度试验等。④药品的鉴别试验。⑤拟推荐国家标准采用的新的或修订质量标准的分析方法。 1 分析方法的验证参数 分析方法的验证参数一般包括分析方法的准确性、精密度、专属性、检测限度、定量限度、线性、范围等,它们的定义及测定方法如下。 111 准确性(accu racy) 是指用该分析方法所得的测试结果与真实值的接近程度。可通过用该法测定含有已知量被测物的样品或加有较已知量略高或略低的被测物与赋形剂的混合物,然后从试验结果计算被测物的含量百分回收率用以表示准确性,要求至少测定高、中、低三个浓度,每个浓度测定3次共提供9个数据进行评价。 112 精密度(p recisi on) 是指对同一匀质样品进行多次取样(其样本数应能满足统计分析要求),用该法测定每个样品所得测试结果的符合程度。通常以标准差(s)或相对标准差(变异系数R SD)来评定。精密度可以三种形式表达:A:重视性,B:中间精密度,C:重复性。精密度是在正确操作条件下分析方法重现性程度或重复性的一种量值。重现性指在不同实验室中使用此种分析方法的精密度。中间精密度表示实验室内部的差异,如不同的实验时间(日子),或在同一实验室中由不同的分析者或用不同的仪器进行测定的结果变异程度。重复性指在同一实验室短期内由同一分析者用同一仪器进行测定结果的变异程度,一般用三种浓度重复测定各3次,以均数的R SD和可信限表示。 113 专属性(specificity) 是指在含有该组份的样品中,用该法能准确并专一测出被测物(analyte)的能力。通常通过分析含有加了杂质、降解产物、有关化学物质或安慰剂成分的样品,将所获分析结果与未加前述成分之样品的测试结果进行比较,两组测试结果 ? 8 8 3 ?ShanxiM ed J,O ct1998,V o l27,N o.5
药物中特殊杂质的检查
药物中特殊杂质的检查 一、实验目的 1.掌握某些药物中特殊杂质的来源和检查原理。 2.掌握薄层色谱法用于特殊杂质检查的一般操作。 3.掌握旋光光度法用于特殊杂质检查的一般操作。 二、仪器与试药 1.仪器 Mettler AL204电子天平 WZZ-1型自动旋光仪 刻度移液管 规格：1mL 、5mL 、10mL 研钵 容量瓶 规格：50mL 、100mL 、1000mL 酸式滴定管 规格：50mL 2.试药 乙酰水杨酸 硫酸阿托品 盐酸普鲁卡因 规格：2mL/支 乙醇 硫酸铁铵 水杨酸 冰醋酸 对氨基苯甲酸 羧甲基纤维素钠 苯 硅胶H （薄层层析用） 冰醋酸 丙酮 甲醇 对二甲氨基苯甲醛 蒸馏水 三、实验原理 1.乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查 游离水杨酸为生产中未反应的原料或乙酰水杨酸贮存过程中的水解产物，由于结构中酚羟基在空气中逐渐被氧化，成为淡黄到红棕色的一系列醌型化合物，而使乙酰水杨酸变色。 2.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 盐酸普鲁卡因分子中含酯键，因此盐酸普鲁卡因注射液在贮藏期间，普鲁卡因易水解。其注射液制备过程中受灭菌温度、时间、溶液pH 值、光线等因素影响，可发生水解反应生成对氨基苯甲酸和2-二乙氨基乙醇。其中对氨基苯甲酸随贮藏时间的延长或高温加热，可进一步脱羧转化为苯胺，而苯胺又可被氧化为有色物，使注射液变黄。已变黄的注射液不仅疗效下降，而且毒性增加。故药典规定检查对氨基苯甲酸。 -二甲氨基苯甲醛溶液，在冰醋酸存在下与对氨基苯甲酸缩合形成Schiff 碱呈有色斑点，并同时与对照品溶液的主斑点进行比较。 COOH OCOCH 3 +H 2O COOH OH +CH 3COOH 6 COOH OH + 4 Fe 3+ Fe( COO O --)23 Fe ++ 12H + N C H 3C H 3N H 2COOH CH=N N C H 3C H 3COOH N C NH C H 3H 3COOH + + H +
含量和有关物质方法学验证内容
含量测定方法学验证内容及可接受标准： 1．准确度该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般要求分别配制浓度为80％、100％和120％的供试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在98.0%-102.0%之间，9个回收率数据的相对标准差（RSD）应不大于2.0%。 2．线性线性一般通过线性回归方程的形式来表示。具体的验证方法为：在80％至120％的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定其主峰的面积，计算相应的含量。以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.998，Y轴截距应在100％响应值的2％以内，响应因子的相对标准差应不大于2.0%。 3．精密度1）重复性配制6份相同浓度的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试液含量的相对标准差应不大于2.0%。2）中间精密度配制6份相同浓度的供试品溶液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得12个含量数据的相对标准差应不大于2.0%。 4．专属性可接受的标准为：空白对照应无干扰，主成分与各有关物质应能完全分离，分离度不得小于2.0。以二极管阵列检测器进行纯度分析时，主峰的纯度因子应大于980。5．检测限主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于3。 6．定量限主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于10。另外，配制6份最低定量限浓度的溶液，所测6份溶液主峰的保留时间的相对标准差应不大于2.0%。 7．耐用性分别考察流动相比例变化±5％、流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5℃、流速相对值变化±20％时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰与杂质峰必须达到基线分离；各条件下的含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%。 8、系统适应性配制6份相同浓度的供试品溶液进行分析，主峰峰面积的相对标准差应不大于2.0%，主峰保留时间的相对标准差应不大于1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰与杂质峰必须达到基线分离，主峰的理论塔板数应符合质量标准的规定。 有关物质测定方法学验证内容及可接受标准： 1．准确度该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般要求根据有关物质的定量限与质量标准中该杂质的限度分别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某杂质的限度为0.2%，则可分别配制该杂质浓度为0.1％、0.2％和0.3％的杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算9个回收率数据的相对标准差（RSD）。该项目的可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%，相对标准差应不大于10%。 2．线性线性一般通过线性回归方程的形式来表示。具体的验证方法为：在定量限至一定的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定该杂质峰的面积，计算相应的含量。以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.990，Y轴截距应在100％响应值的25％以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。 3．精密度1）重复性配制6份杂质浓度（一般为0.1%）相同的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试液含量的相对标准差应不大于15%。2）中间精密度配制6份杂质浓度（一般为0.1%）相同的供试品溶液，分别
FDA最新版-药物分析程序及方法验证指导原则-中文翻译版
药品及生物制品的分析方法和方法验证指导原则 目录 1.介绍 (1) 2.背景 (2) 3.分析方法开发 (3) 4.分析程序内容 (3) A.原则/范围 (4) B.仪器/设备 (4) C.操作参数 (4) D.试剂/标准 (4) E.样品制备 (4) F. .................................................................................................................... 标准对照 品溶液的制备 (5) G.步骤 (5) H.系统适应性 (5) I.计算 (5) J.数据报告 (5) 5.参考标准和教材 (6) 6 分析方法验证用于新药，仿制药，生物制品和DMF (6) A.非药典分析方法 (6) B.验证特征 (7) C.药典分析方法 (8) 7.统计分析和模型 (8) A.统计 (8) B.模型 (8) 8.生命周期管理分析程序 (9) A.重新验证 (9) B.分析方法的可比性研究 (10) 1.另一种分析方法 (10) 2.分析方法转移的研究 (11) C.报告上市后变更已批准的新药，仿制药，或生物制品 (11) 9.美国FDA 方法验证 (12) 10.参考文献
前言 本指导原则草案，定稿后，将代表美国食品和药物管理局（FDA）目前关于这个话题目前的想法。它不会创造或赋予或任何人的任何权利，不约束FDA 或公众。您可以使用另一种方法，如果该方法符合适用的法律和法规的要求。如果你想讨论一个替代方法，请与FDA 工作人员负责实施本指南。如果你不能确定适当的FDA 工作人员，请拨打本指南的标题页上所列的电话号码。 介绍： 该修订指南草案将取代行业2000 年的指导分析方法和方法验证草案，并最终确定后，也将取代1987 年美国FDA 行业指南《提交的样品和分析数据的方法验证》。该草案提供了有关申请人如何提交分析程序和方法验证数据来支持说明原料药和制剂具有强度、质量、纯度和效用的文件。它会帮你收集信息和现有数据来支持你的分析方法。该指导原则适用于原料药和制剂产品涵盖新药申请（NDA），简化新药申请（仿制药），生物制品许可申请（BLA），以及这些申请的补充申请。在这个修订草案指导原则也适用于原料药和制剂产品涵盖二类药物主文件（DMFs）。 该修订指南草案补充了国际协调会议（ICH）Q2（R1）指导原则《分析程序的验证：开发和验证的分析方法Q2（R1）和方法的文本。 该修订指南草案不涉及研究性新药申请（IND）方法验证，但研究者在准备研究性新药申请时应考虑该指导原则中的建议。研究性新药申请需要在研究的每个阶段有足够的信息，以确保正确鉴别性，质量，纯度，强度和/或效力。对分析方法和方法验证的信息量将随研究中不同阶段而变化。有关分析程序和需提交的阶段方法验证资料方面的指导意见的研究中，申请者可以参考FDA 的指导原则《Ⅰ期研究药物的IND 的内容和格式，包括性状、疗效和生物技术衍生产品》。一般考虑在第三阶段的研究进行之前，分析方法和分析方法验证（例如，生物测定）是在FDA 行业指导原则《人类药物和生物制剂、化学、制造、控制信息会议》。 该修订指南草案不涉及生物和免疫化学检测的表征和许多原料药和制剂产品质量控制的具体方法验证的建议。例如，一些基于动物模型的生物测定，并且免疫原性评估或其它免疫测定具有独特的特征，应开发和验证过程中予以考虑。 此外，需要对现有的分析方法再验证时可能需要在制造过程中产品的生命周期的变化予以考虑。有关适当的验证方法的分析程序或者提交本指南中未提及的信息的问题，您应该向用FDA 产品质量评审人员咨询。 如果您选择了与本指导草案中不同的方式，我们建议您在提交申请前与相应的FDA 产品质量评审人员讨论。 FDA 的指南文件，包括本指导原则，不具有法律强制性的责任。相反，指南描述的是FDA 对某个主题目前的想法，并应仅作为建议，除非有明确的法律或法规要求的引用。使用“应该”这个词在FDA 指南意味着什么建议或推荐，但不是必需的。 II.BACKGROUND 背景 每个NDA 和ANDA 都必需包括必要的分析程序，以确保原料药和制剂的鉴别，强度，质量，纯度和效果.每个BLA 必须包括完整的制造方法描述，包括能够确保产品身份、质量、安全、纯度和有效的分析程序。数据必须能够用于建立满足精度和可靠性标准的分析方法并适合与拟定目的.对于BLAs 及补充补充，分析方法和方法验证是许可证申请或补充申请必须提交的一部分，并通过美国FDA
药物分析选择题与答案
一、A 型题（最佳选择题 ?）每题 1分。每题的备选 ?答案中只有?一个最佳答?案。 1.用于原料药 ?或成药中主 ?药含量测定 ?的分析方 法 ?验证不需要 ?考虑A A.定量限和检 ?测限 B.精密度 C.选择性 D.耐用性 E.线性与范围 ? 2.回收率属于 ?药物分析方 ?法验证指标 ?中的 B A.精密度 B.准确度 C.检测限 D.定量限 E.线性与范围 ? 3.方法误差属 ?E
A.偶然误差 B.不可定误差 ? C.随机误差 D.相对偏差 E.系统误差 4.0.119与 9.?678 相乘?结果为 D A.1.15 B.1.1516 C.1.1517 D.1.152 E.1.151 5.鉴别是 B A.判断药物的 ?纯度 B. 判断已知药 ?物的真伪 C. 判断药物的 ?均一性
D. 判断药物的 ?有效性 E. 确证未知药 ?物 6.取样要求：当样品数为 x? 时，一般应按 D? A.?x ≤300时，按 x 的 1/30 取样 B.?x ≤30时0 ，按 x 的1/10 取样 C.x≤3时，只取 1 件 D.?x≤3时，每件取样 E.x>300 件时?，随便取样 7.中国药典主 ?要由哪几部 ?分内容组成 ?C A.正文、含量测定、索引 B.凡例、制剂、原料 C.凡例、正文、附录、索引 D.前言、正文、附录 E.鉴别、检查、含量测定 8.对药典中所 ?用名词（例：试药，计量单位，溶解度，贮藏，温度等）作出解释的 ?属药典哪一?部分内容 B?
A.附录［医学教育网搜集整理］ B.凡例 C.制剂通则 D.正文 E.一般试验 9.日本药局方 ?与 usp 的?正文内容均 ?不包括 B A.作用与用途 ? B.性状 C.参与标准 D.贮藏 E.确认试验 10.药典所指的 "?精密称定 "，系指称取重 ?量应准确至 ?所取重量的?B A.百分之一 B. 千分之一 C. 万分之一
二药物中特殊杂质的检查
实验二药物中特殊杂质的检查 【目的要求】 1. 掌握药物特殊杂质的来源、检查原理及杂质限量的计算。 2. 掌握薄层色谱法用于特殊杂质检查的一般操作。 3. 熟悉薄层板的制备。 【仪器与材料】 分析天平、层析缸、量瓶（25ml、10ml）、刻度吸管（5ml、2ml）、10μl微量进样器、薄层板、甲醇、硅胶G、羧甲基纤维素钠、醋酸乙酯、异丙醇、氨水、水、碘 【实验内容】 1. 薄层板的制备 取薄层用硅胶G 3克，加CMC-Na约10ml，研磨至适宜稠度，可铺于10×20cm板1块（厚度0.2～0.3mm）。等自然干燥后，于105℃活化1小时，置干燥器内备用。 2. 盐酸雷尼替丁胶囊中有关物质的检查 取本品的内容物适量，加甲醇使盐酸雷尼替丁溶解并制成每1ml 中约含10mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密量取适量，加甲醇分别稀释制成每1ml 中含0.05mg、0.10mg、0.15mg、0.20mg、0.40mg的溶液，作为对照溶液(1)、(2)、(3)、(4)和(5)。照薄层色谱法（附 Ⅴ）试验，吸取上述六种溶液各10μl，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板录B 上，以乙酸乙酯–异丙醇–浓氨溶液–水(25:15:5:1) 为展开剂，展开，晾干，置碘蒸气中显色后，立即检视。供试品溶液如显杂质斑点，其颜色分别与对照溶液(1)、(2)、(3)、(4)和(5)所显的主斑点比较，杂质总量不得过4.0％。
【注意事项】 1. 点样采用微量注射器进行，在距薄层板底边 2.5cm处开始，点样应少量多次点于同一原点处，原点面积应尽量小。 2. 采用倾斜上行法展开，展开剂应浸入薄层板底边约1cm深度。 3. 显色后，应立即检视斑点，并用针头定位，以便记录图谱。 【思考题】 1. 薄层色谱法用于杂质检查常用的方法有哪些？ 2. 试计算盐酸雷尼替丁胶囊中有关物质的杂质限度。 【参考资料】 《药物分析》第六版刘文英主编 《中华人民共和国药典》2010年版二部 1
药物的杂质检查总结
第三章 药物的杂质检查 杂质（forin 、impurities ）是指： 1. 有毒副作用的物质 2. 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质 3. 本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质 药物中杂质的来源 1. 生产过程中引入 （1）原料、反应中间体及副产物 （2）试剂、溶剂、催化剂类 （3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质 2. 贮藏过程中产生 水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等 易发生水解反应的结构： 酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等 药物中的杂质按来源分为 1. 一般杂质（general impurities ）如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质的检查方法收载在中国药典的附录中。 2. 特殊杂质（special impurities ）：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的有关物质。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。 杂质限量：指药物中允许杂质存在的最大量，通常用百分之几或百万分之几来表示 药物的杂质检查法 1. 对照法 限量检查法 （Limit Test ） 特点：不需知道杂质的准确含量 2. 灵敏度法 系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。 特点：不需对照物质 3. 比较法 含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸光度、pH 值等。 特点：准确测定杂质的量，不需对照品 杂质限量的计算 供试品量 允许杂质存在的最大量 杂质限量
药品质量标准分析方法验证指导原则
药品质量标准分析方法验证指导原则 《中国药典》2015年版 药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应检测要求。在建立药品质量标准时，分析方法需经验证；在药品生产工艺变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，则质量标准分析方法也需进行验证。方法验证理由、过程和结果均应记载在药品质量标准起草说明或修订说明中。生物制品质量控制中采用的方法包括理化分析方法和生物学测定方法，其中理化分析方法的验证原则与化学药品基本相同，所以可参照本指导原则进行，但在进行具体验证时还需要结合生物制品的特点考虑；相对于理化分析方法而言，生物学测定方法存在更多的影响因素，因此本指导原则不涉及生物学测定方法验证的内容。 验证的分析项目有：鉴别试验、限量或定量检查、原料药或制剂中有效成分含量测定，以及制剂中其他成分（如防腐剂等，中药中其他残留物、添加剂等）的测定。药品溶出度、释放度等检查中，其溶出量等的测定方法也应进行必要验证。 验证指标有：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。在分析方法验证中，须采用标准物质进行试验。由于分析方法具有各自的特点，并随分析对象而变化，因此需要视具体方法拟订验证的指标。表1中列出的分析项目和相应的验证指标可供参考。
一、准确度 准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（％）表示。准确度应在规定的范围内测定。 1.化学药含量测定方法的准确度 原料药采用对照品进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定的结果进行比较。制剂可在处方量空白辅料中，加入已知量被测物对照品进行测定。如不能得到制剂辅料的全部组分，可向待测制剂中加入已知量的被测物对照品进行测定，或用所建立方法的测定结果与已知准确度的另一种方法测定结果进行比较。 准确度也可由所测定的精密度、线性和专属性推算出来。 2.化学药杂质定量测定的准确度