用埃尔托霍乱弧菌噬菌体对非O1群霍乱弧菌和拟态弧菌分型探讨
霍乱是怎么回事?

霍乱是怎么回事?*导读:本文向您详细介绍霍乱的病理病因,霍乱主要是由什么原因引起的。
*一、霍乱病因*一、发病原因1.病原霍乱的病原为霍乱弧菌(Vibrio cholerae)。
霍乱弧菌包括两个生物型:古典生物型(Classical biotype)和埃尔托生物型(EL-Tor bio-type)。
这两种型别除个别生物学性状稍有不同外,形态和免疫学性基本相同,在临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。
自1817年以来,全球共发生了七次世界性大流行,前六次病原是古典型霍乱弧菌,第七次病原是埃尔托型所致。
1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株(0139),它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同,但不能被01群霍乱弧菌诊断血清所凝集,抗01群的抗血清对0139菌株无保护性免疫。
在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长,因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。
himada等命名为O139群霍乱弧菌,而且认为它有可能取代O1群霍乱弧菌蔓延到世界各国,尤其是亚、非、拉美各国和地区,这些流行可能标志着第八次霍乱大流行的开始。
O139瑚群霍乱弧菌至今只有一个血清型,由于所分离的新菌株来自沿着孟加拉海湾的城市,故又称为Bengal型,目前这些命名已被“国际腹泻疾病研究中心”所认可。
Albert经过详细研究,将O139霍乱弧菌的病原特征综合如下:①为革兰阴性弯曲杆菌,大小(2~3)μm×0.5μm,单端鞭毛;②O1群霍乱弧菌抗血清不能制动;③在TCBS平板上菌落黄色,TTG A上呈灰色,不透明,中心黑色;④氧化酶、明胶酶试验阳性;⑤发酵葡萄糖、麦芽精、蔗糖、甘露糖,但不产气,不发酵肌醇及阿拉伯糖;⑥赖氨酸、鸟氨酸脱氢酶阳性,精氨酸脱氢酶阴性;⑦能产生吲哚;⑧在无氯化钠或3%氯化钠条件下生长,而8%氯化钠条件下不生长;⑨使羊红细胞溶血,鸡红细胞凝集试验阳性;⑩对多黏菌素B、复方磺胺甲噁唑及对氯苯(O139群霍乱弧菌抑制剂,10μg和150μg)有抗性。
霍乱弧菌实验室检测

霍乱弧菌的实验室检测
目的:提高检出率,减少漏检以及误判的发生 手段:
检测人员是否有足够的责任心? 检测试剂准备是否齐全且符合要求? 是否严格按照检测流程进行操作?
霍乱概述
▪ 什么是霍乱?
霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌(V.cholerae)
引起的急性肠道传染病,发病急、传播速度快、波 及范围广、危害严重的甲类传染病。
霍乱弧菌
O1群 非O1群
古典生物型 埃尔托生物型
小川型 Ogawa (AB) 稻叶型 Inaba (AC) 彦岛型 Hikojim (ABC)
霍乱病原菌
O139群(Bengal)
O2-O200群
腹泻病原菌
▪ 病原体
O1群,O139群霍乱弧菌
▪ 发病特征:
剧烈腹泻、呕吐、严重脱水时致酸中毒、循环衰竭而致死亡 不治疗或医疗很差的条件下病死率可达到20-50%(重症病人达70- 100%)
菌落鉴定
▪ 染色镜检
革兰染色阴性的短杆菌
▪ 血清凝集试验:
➢分别使用O1群,O139群霍乱血清进行凝集试验,同时使用生理盐水进行 对照凝集,以排除与生理盐水发生凝集的自凝菌。 ➢生理盐水不凝集,O1群血清明显凝集的菌落,进一步使用稻叶型和小川型 血清进行凝集试验,判定型别:稻叶型血清凝集而小川型血清不凝集的菌落 为稻叶型,小川型血清凝集而稻叶型血清不凝集的菌落为小川型,如稻叶型 血清和小川型血清均出现凝集的时候,要注意鉴别是否为彦岛型,需进行试 管凝集试验且两者的凝集效价均超过一半以上才能判定为彦岛型,因为某些 小川型菌落自身会带有少量的C抗原而出现与稻叶型血清发生弱凝集,因此 如小川型血清凝集较稻叶型血清凝集有明显优势时应维持小川型的判定。 ➢生理盐水不凝集,O139群血清明显凝集的菌落,一般为O139群,但其与 O22群及O155群甚至一些非霍乱弧菌会出现交叉凝集,由上级实验室进行 进一步确认。
O1群及O139群霍乱弧菌病原学研究进展论文

O1群及O139群霍乱弧菌病原学研究进展【关键词】霍乱弧菌;霍乱;病原学【中图分类号】r378.3 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484(2012)11-0651-01霍乱弧菌是霍乱的病原体,根据其o抗原的不同,可分为200多个血清群,其中o1群是引起人类霍乱的主要血清群。
自1992年印度、孟加拉国相继发生了由o139群霍乱弧菌引起的典型的霍乱样腹泻爆发流行后,世界卫生组织规定,霍乱的病原菌除了o1群外,新增o139群[1]。
这两个血清群霍乱弧菌的生物学性状和致病机理大致相同。
o139群霍乱弧菌同样能产生霍乱肠毒素,且临床症状严重者居多,是继o1群后能引起世界范围大流行的新型霍乱弧菌。
近年来,o139在我国内地及东南沿海地区常有流行或散发,并且从一些外环境水体和水生动物体内亦可分离到该菌株,其危害不容忽视。
1 生态学特性霍乱为人类的一种烈性传染病,在流行期间,病人和带菌者通过粪便和呕吐物大量排菌,污染外环境和水体,是霍乱的传染源。
另外,研究证明,水体中的贝壳类和桡足类生物在霍乱弧菌的贮存上起一定作用。
常有从疫区饲养的甲鱼、虾、牛蛙及水体中检出该菌的报导。
o1和o139群霍乱弧菌产生的肠毒素对贝壳生物的上皮细胞具有生物学活性,使得当环境中的钠的浓度低于该菌存活和繁殖所需的量时,通过所分泌的肠毒素,从宿主获得的足够量的钠。
o1群和o139群霍乱弧菌可以粘附于桡足类动物,并且具有几丁质酶,使得其能在桡足类的动物身上定居和降解桡足类动物所具有的几丁质,从而有助于自身的存活、繁殖和越冬。
2 主要生物学性状o1群霍乱弧菌是革兰氏阴性、稍弯曲或直的短杆菌,形态为弧形或逗点状,长度为1.5~2.0um,宽0.3~0.4um,单端有一根鞭毛,鞭毛很长,大约为菌体长度的4~5倍,运动极为活泼,在暗视野显微镜下,犹如夜空中的流星。
无芽胞,无荚膜,生长温度为16~42℃,最适温度为37℃,繁殖的酸碱度为ph6.0~9.2。
霍乱防治知识培训试题及答案

霍乱防治知识培训试题及答案有答案的,答案附后哦一、选择题1、霍乱的传播途径:a.水b.食物c.生活接触d.苍蝇媒介e.血液2、以下哪些条件可以诊断霍乱或疑似霍乱a. 有吐泻症状,粪便培养有霍乱弧菌生长者b. 有典型症状,但病原学检查未确定c. 流行区人群凡有典型症状,但粪便培养无霍乱弧菌生长者,经血清抗体测定效价3被以上增长d. 在流行期间有明显接触史,且发生吐泻症状,不能以其他愿意解释者e. 在流行病学调查中,首次分辨培养阳性前后各5天内有腹泻症状及接触史3、确诊为霍乱后,除补液治疗外,尚应给予抗菌药物治疗。
4、霍乱吐泻“米泔水”样物质是因为吐泻物中。
5、霍乱患者肌肉痉挛主要是由于。
6、目前,全球已经发生次霍乱世界大流行,前次为型霍乱弧菌引起,最后一次为型霍乱弧菌引起。
7、 o1群有、、三种特异性抗原,其中为o1群所共有,而为特异性抗原。
8、是霍乱的主要传染源。
9、典型霍乱的临床病程分为三期:、、。
10、爆发型(中毒型)霍乱又叫。
11、我国在霍乱防治研究中,根据噬菌体-生物分型方案,对分离的埃尔托霍乱弧菌株区分为与,其中具有引起霍乱流行的潜力。
12、根据某些生化特征和噬菌体敏感性,o1群霍乱弧菌可分为、两个生物型。
13、霍乱的传播途径主要为粪口途径,病原体主要通过污染的生活密切接触和而传播。
14、霍乱能引起世界性大流行,因此被列为国际检疫传染病之一,《中华人民共和国传染病防治法》将其规定的传染病,《国内交通卫生检疫条例》将其列为交通检疫传染病。
15、世界卫生组织已将霍乱列为新发传染病,与o1霍乱同样对待。
四、简答题1、霍乱的治疗原则是什么?2、切断霍乱传播途径方法有哪些?3、霍乱的诊断与疑似诊断标准?4、病原学方法对诊断霍乱的判别能力次序?5、儿童患者如何补液?6、请简述诊断霍乱病人都依据哪些方面?7、请简述霍乱的确诊标准是什么?8、请简述霍乱的预防控制措施?9、请简述病人治疗的补液原则是什么?10、简述口服补液盐的配方及其补液要求。
霍乱

(四)生化反应
➢ O1群霍乱弧菌和非O1群霍乱弧菌均能发 酵蔗糖和甘露糖,不发酵阿拉伯糖。非O1 群霍乱弧菌对蔗糖和甘露糖发酵情况不同。 此外埃尔托生物型能分解葡萄糖产生乙酰 甲基甲醇。O139群霍乱弧菌能发酵葡萄 糖、麦芽糖、蔗糖和甘露糖,产酸不产气, 不发酵肌醇和阿拉伯糖。氧化酶试验和明 胶试验阳性,对绵羊红细胞溶血试验结果 不定,对多粘菌素和复方新诺明不敏感, 鸡血球凝集试验阳性。
吐的症状,迅速出现严重脱水,循环衰竭和肌肉 痉挛者。虽然粪便未培养出霍乱弧菌,但并无其 他原因可查者。如有条件可作双份血清凝集试验, 滴度4倍以上者可诊断。 32.疫源检索中发现粪便培养阳性前5天内有腹泻 症状者,可诊断为轻型霍乱。
诊断
(二)疑似诊断 1.具有典型霍乱症状的首发病例,病原学检
查尚未肯定前。 2.霍乱流行期间与霍乱患者有明显接触史,
发病机制与病理改变
霍乱肠毒素还能促使粘膜杯状细胞分泌粘 液增多,使腹泻水样便中含有大量粘液。 此外腹泻导致的失水,使胆汁分泌减少, 因而腹泻出的大便可成“米泔水”样。 除肠毒素外,内毒素和霍乱弧菌产生溶血 素、酶类及其他代谢产物,也有一定的致 病作用。
发病机制与病理改变
(二)病理生理 1.水和电解质紊乱 2.代谢性酸中毒 (三)病理解剖
发病机制与病理改变
(一)发病机制 霍乱弧菌经口进入人体胃部,当胃酸缺乏或被稀释或 入侵菌量较多时,便经胃抵达肠道后通过鞭毛运动,以及弧菌产生的 蛋白酶作用,穿过肠粘膜上的粘液层,在毒素协同菌毛和胡乱弧菌血 凝素的作用下,粘附于小肠上段粘膜上皮细胞刷状缘上,并不侵入肠 粘膜下层,在小肠的硷性环境中大量繁殖,并产生大量的肠毒素,细 菌崩解还可释出内毒素。霍乱肠毒素为分子量84kd的蛋白质,由亚单 位A和B组成,肠毒素借助于亚单位B与细胞膜表面的单涎酸神经节苷 脂结合,使活性亚单位A进入细胞膜,A单位中具二磷酸腺苷(ADP) ―核糖基转移酶活性,刺激ADP―核糖,使其转移到具有控制腺苷环 化酶(AC)活性的三磷酸鸟呤核苷(GTP)结合蛋白中,使GTP酶 活性受到抑制,GTP不能水解成GDP,使AC活性相对增强,促使细 胞内三磷酸腺苷转变为环磷酸腺苷(cAMP)。cAMP浓度的急剧升 高,抑制肠粘膜细胞对钠的正常吸收,并刺激隐窝细胞分泌氯化物和 水,导致肠腔水份与电解质大量聚集,因而出现剧烈的水样腹泻和呕 吐。
致病性弧菌

古典生物型(Classical biotype) 埃尔托生物型(EL-Torbio-type)。
一、生物学性状
1、形态与染色
革兰染色阴性;弧性或逗点状;在病人“米泔水” 样便中呈“鱼群”样排列;
有一根单鞭毛,运动非常活泼,呈鱼群穿梭样或流 星状,
有菌毛和性菌毛,0139群有荚膜。
致病性弧菌
弧菌属(Vibrio)
弧菌属,为一大群菌体短小、弯曲成弧形的 革兰阴性菌
主要特点
有单鞭毛,运动活泼 培养要求为碱性环境 自然界广泛分布,以水中最多 只要有霍乱弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌
一、霍乱弧菌
霍乱主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水,死亡率 甚高。属于国际检疫的烈性传染病。
诊断
标本采集:患者粪便、肛拭或剩余食物 分离培养:SS琼脂平板或嗜盐菌选择平板 嗜盐性试验与生化反应 诊断血清进行鉴定
防治
治疗可用抗菌药物 严重病例需输液和补充电解质
抵抗力
El Tor生物型和其它非01群霍乱弧菌 在外环境中的生存力较古典型为强
不耐酸,在正常胃酸中仅能存活4分钟 水中存活长,河水、井水、海水中1-3周 怕热,100℃1-2分钟死亡
致病物质
ToxR蛋白调控的ctxA、ctxB、tcp、zot、ace等基 因
不受ToxR蛋白调控的毒力因子基因hlyA和hap
生化反应:
过氧化氢酶、氧化酶阳性 发酵多种糖类,产酸不产气 还原亚硝酸盐,吲哚反应阳性 霍乱红反应阳性,不同生物型生化反应不同 (当培养在含硝酸盐及色氨酸的培养基中,产生靛基质与亚硝
酸盐,在浓硫酸存在时,生成红色,称为霍乱红反应)
抗原的构造与分群
有不耐热H抗原和耐热的O抗原。
非O1群、非O139群霍乱弧菌致败血症1例报道

c i n e s s e n s i t i v i t y .T h e b i o c h e mi c a l i d e n t i i f c a t i o n a n d me d i c i n e s s e n s i t i v i t y we r e c a r r i e d o u t u s i n g Mi c r o S c a n Wa l k Awa y 4 0 i d e n t i i f c a t i o n i n s t r u me n t ,t h e t y p e o f s e r l l m w a s c o n i f r me d wi t h s l i d e a g g l o me r a t i o n me t h o d .P CR a mp l i i f e d c o n s e r —
Abs t r a c t Two s us p e c t e d V i b r i o c h o l e r ae s t r a i n s i s o l a t e d i n t he ho s p i t a l we r e i de nt i ie f d a n d d e t e r mi ne d f o r t h e i r me di —
A Ca s e Re po r t o n No n・ O1 a n d No n- O1 3 9 Vi b r i o c ho l e r a e s e pt i c e a mi a
Z OU J i u — mi n g ,Z HANG Ai — p i n g ,L I Z h i — s h a n ,YANG Ya n ,Z HAO J i a n - z h o n g
霍乱弧菌的分离与鉴定.总结

霍乱弧菌的分离与鉴定濮阳市疾病预防控制中心一、标本的采集和送检:1.标本的采集:1)粪便标本:应争取在发病早期、服用抗菌药物之前采集;2)采便方法:可用棉拭采取自然排出的新鲜大便,亦可用直肠棉拭采便管由肛门插入直肠内3~5厘米处采取。
3)采样要求:☞水样便采取1~2毫升,成形便采取指甲大小的粪量。
病人呕吐物、沾染粪便的衣物、尸体的肠腔和口腔内容物亦可作为检材。
☞外环境样本可采取病人的污染衣物、剩饭菜、可疑食品、抹布、污水、坑塘水、井水、公厕粪便、苍蝇等。
☞按1:10比例置入碱性蛋白胨水增菌液中,迅速送往实验室。
4)肛拭采集的注意事项:1.棉拭子要用竹签,圆形、光滑以免采样时易断;2.棉拭子做的要稍大而紧固(避免采集时脱落);3.采集者应穿戴一次性手套;4.采集前将棉拭子用碱性蛋白胨水(APW)蘸湿,多余的液体紧靠管壁挤出;5.采集时要求被采集者双腿分立、微屈、手扶墙或凳子趴下,劝其用单手或双手协助分开股沟(或采集者用左手分开股沟),右手持棉拭子轻轻旋转插入肛门内约4~5cm(幼儿约2~3cm)处,转动数秒钟从紧靠肛环边的隐窝旋转擦取直肠表面黏液后退出;6.棉拭子在推进时如感觉遇到阻力,应调整角度后缓缓旋转推进,避免用力过大或推进太快造成肛壁出血而影响病原菌的检出;棉拭子进入的深度一定要够,否则采集的有效标本量会很少;7.采集的标本拭子应立即置入APW内,手接触的部分在管口折断弃去。
填写采样登记表(单),并在采样管上填写被采集者的样品编号、姓名、性别、年龄,尽快送检。
二、快速诊断:1.直接镜检:为争取最快速度作出诊断,采取病人“米泔水样”大便或呕吐物,悬滴法镜检(最好用暗视野),可见具有流星状动力的细菌。
2.特异性制动试验:☞取检材或新鲜碱性蛋白胨水培养物一滴,置于载玻片上,再加霍乱弧菌O1多价或O139诊断血清,加盖玻片,用暗视野显微镜观察,3分钟内流行状运动细菌被抑制的即为阳性,此法优点是快速而特异,操作简便,可☞在几分钟之内做出初步诊断。
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382 C N R PC L ME II E V 12N . A gs 2 0 中 国热带 医学 2 O 年 第 2 第 3 HIA T O I A D CN o o 3 u ut 0 2 02 卷 期
.
文章鳊号: 0 — 7 ( 0) — 3 — 3 1 9 92 2 20 08 0 0 70 3 2
的 2 4株 非 0 群 霍 乱 弧 菌 和 9株 拟 态 弧 菌 用 埃 尔 托 8 ,
12 方 法 .
菌株鉴定 和噬菌体 裂解试验 按文献 l 方 卫
法进 行 , 合 非 O 群 霍 乱 弧 菌或 拟 态 弧 菌 的菌 株进 符 ,
行 噬菌体 裂解分 型试验 , 少数 疑难 菌株 经培 养基 传代
并 进行解 离试验后 进行 本试验 。
13 埃 尔 托 霍 乱 弧菌 分 型 噬菌 体 和第 Ⅳ组 噬 菌 体 、 .
宿 主 菌 及 阳 性 对 照 菌 株 来 源 由 中 国 预 防 医 学 科 学 院 流 行 病 学 微 生 物 学 研 究 所 提 供 , 分 由本 实 验 室 自 部 行增 殖 , 检 测合 格后使用 。 经
[ 检验技术 ]
用 埃 尔 托 霍 乱 弧 菌 噬 菌 体 对 非 0 群 霍乱 弧 菌 和 拟态 弧 菌 分 型探 讨
P e mia y s d n tet go o h l avb i n su o oe ir yE trc oe ir rl n r t y o h gn fn n Ol oe iroa d pe d c lr vb i b l h l vb i i u c r h a o o a r o
p a e, ANG a hg H Xin— fn , A a g T NG h n z u, ON Ja , t 1 Gu n x h a g Nain h y Auo o u Z e h G G i e . a g iZ u n a n t a t tn mo s o
Re in He l a d Ant e d mi t i n, n n 3 021, a g i P. . n go at n h i— pi e c Sat o na nig 5 0 Gu n x , R Chia
型 霍 乱 弧 菌 噬 菌 体 进 行 分 型 探 讨 , 将 结 果 报 道 如 现
下。
1 材料与方 法 11 菌 株 来 源 . 18 96~20 0 1年分 离 保 存 的 菌 株 , 要 主 是 近 年 南 宁市 腹 泻 病 人 、 水 养 殖 动 物 疫 病 和 淡 水 养 海 殖 动 物 疫 病 等 送 检 标 本 分 离 的 菌 株 , 部 分 是 正 常 水 少 养动物 ( 括 海 水 养 殖 和淡 水 养 殖 ) 检 分 离 所 得 。 包 抽 地域 分 布是广西沿 海各 市县海 养 区 , 水 养殖 的标本 淡 大 多 是 南 宁 市 和 邕 宁 、 林 、 色 等 地 养 殖 区 域 市 场 桂 百
置 导 尿 管 。 因 为 导 尿 管 留 置 时 间 长 短 与 泌 尿 道 感 染
参
考
文
பைடு நூலகம்献
[ ]王枢 群 , 1 张邦 燮 . 医院感 染 [ . M] 重庆 : 学 技 术 文 献 出 版 社重 庆 分 科
社 ,90,7 19 2 4~24,4 8 34.
[ ]关 于合 理使 用 抗 生 素 的 意见 . 院感 染 监 测 协 调 小 组 文 件 . 京 : 2 医 北 中华 人 民共 和 国卫 生 部 医政 司 .9 2, 19 4. [ ]陆 佩芳 .8 0例 老 年患 者 医院感 染前 瞻 性调 查 . 3 19 中华 医 院感 染 学 杂
样 品
2 结果 和分析
用 于 本 试 验 的菌 株 是 : 0 非 群 霍 乱 弧 菌 2 4株 , 8
其 中病 人 分 离 菌 株 5 2株 , 占总 数 的 l .% , 自海 区 83 来 菌株 4 o株 , 1 1 , 水 区 菌 株 1 1 , 6 .% , 占 4.% 淡 7 株 占 02
梁 贤 芳 唐 振 柱 龚健 陈敏 莉 余 尚杨
中图分 类 号 : 383 R 7 .
文 献标 识 码 : A
18 99年 我 们 在 作 埃 尔 托 霍 乱 弧 菌 噬 菌 体 分 型 的 同时 , 把非 O 群霍 乱弧 菌 的菌株 同时 进行 分 型 , 也 结 果 发 现 非 0 群 霍 乱 弧 菌 也 可 被 某 些 型 别 的 噬 菌 体 裂 解 , 此 我 们 将 18 为 96~20 年 从 各 类 标 本 中 分 离 所 得 01
苍 蝇 4株 占 1 4 , 详 l .% 不 7株 , 6 O , 见 表 1 占 .% 详 。而
9株 拟 态 弧 菌 的 来 源 是 牡 蛎 1株 , 它 8株 , 来 自淡 其 均
水 和淡水 产 品 、 、 等 。 鱼 虾
谱 抗 生 素 者 感 染 发 生 率 愈 高 , 倡 采 用 该 疗 法 会 减 少 提 重 症 瘫 痪 病 人 的 医 院 感 染 率 。 再 次 , 强 护 理 、 早 加 尽 进 行 肢 体 活 动 及 康 复 训 练 也 是 至 关 重 要 的 。 我 们 提 议 , 人 病 情 允 许 时 应 尽 量 增 加 床 上 肢 体 活 动 、 时 病 定 翻 身 、 背 、 动 咳 嗽 、 早 进 行 瘫 痪 肢 体 的 活 动 和 下 拍 鼓 尽 床 康 复训练 , 量 减少卧床 时 间。 尽 最后 , 少 侵入 性 操作 及 严 格 操 作 程 序 的 消毒 , 减 例 如 , 尿 失 禁 病 人 尽 量 使 用 一 次 性 尿 垫 , 进 行 留 对 少