(完整版)单次给药毒性试验
抗体类药物的安全性评价(IND申报)
重复给药毒性 研究试验期限
单次给药和重复给药毒性试验
药物重复给药毒性试验技术指导原则（201405）
免疫毒性试验
免疫毒理学评价的内容之一是对潜在免疫原性的评估。免疫毒性研究通常在重 复给药毒性研究中评价。
进行筛选实验 （Screening Assay ）
确证实验 （Confirmatory Assay）
hERG实验 大鼠功能组合实验（FOB） 大鼠呼吸实验 大动物的安全性药理学实验
通常大动物的安全性药理学可伴随设计在毒理学、代谢动力学中。
药代动力学与毒代动力学
✓ 吸收 抗体类药物一般为静脉给药，不存在吸收过程。在相关动物种属中进行单次给药和多次给药 的药代动力学、毒代动力学是有用的。 ✓ 分布 通常采用I125标记进行试验。当使用放射性标记蛋白时，显示放射标记的受试物仍保持与非 标记受试物相当的活性和生物学性质是重要的。 ✓ 代谢 抗体类药物代谢的预期结果是降解成为小肽和单个氨基酸。因此，通常对其代谢途径已有了 解，一般不需要进行传统的药物生物转化试验。 ✓ 排泄 通常采用I125标记进行试验。
抗体类药物的安全性评价（IND申报）
研究内容
安全性 药理学
单次给 药毒性 试验
免疫毒 性试验
局部耐 受性试
验
药代动 力学与 毒代动 力学
重复给 药毒性 实验
遗传毒 性试验
安全药理学
安全药理学核心组合试验 安全药理学核心组合试验的目的是研究受试物对人体重要生命功能的影响。心血管系统、呼吸系统 和中枢神经系统通常被认为是重要的器官系统，因此，应列入核心组合试验中进行研究。
单次给药和重复给药毒性试验
✓ 种属的选择 安全性评价项目中一般应包括两种相关动物种属，但在某些已经证明合理的情况下（如只能 确定一种相关动物种属，或对该生物制品的生物学活性已经充分了解），一种相关种属也可 能满足要求。此外，即使短期毒性试验中可能需要用两种动物试验测试毒性特征，随后的长 期毒性试验中可能仍有理由仅使用一种动物（如短期毒性试验中两种动物的毒性特征相似 时）。
右旋雷贝拉唑钠小鼠单次给药毒性试验研究
右旋雷贝拉唑钠小鼠单次给药毒性试验研究
黄传海; 樊红延; 戴晓莉
【期刊名称】《《药学研究》》
【年(卷),期】2018(037)010
【摘要】目的研究单次静脉注射给予右旋雷贝拉唑钠对小鼠产生的毒性,并与左旋雷贝拉唑钠和雷贝拉唑钠进行比较。
方法采用经典半数致死量(LD50)试验法进行小鼠单次给药毒性试验,动物分组后以不同的剂量给药1次,药后连续观察14 d,记录每组动物的症状反应和死亡率,观察结束剖检,观察主要脏器的病变,采用Bliss法计算半数致死量。
结果小鼠单次给予右旋雷贝拉唑钠、左旋雷贝拉唑钠和雷贝拉唑钠的半数致死量分别为192、196和193 mg·kg^(-1),死亡小鼠急性毒性症状主要为挣扎、呼吸困难、俯卧不动、抽搐、角弓反张继而死亡。
结论右旋雷贝拉唑钠、左旋雷贝拉唑钠和雷贝拉唑钠单次给药后对小鼠的毒性反应和半数致死量无明显差异。
【总页数】3页(P572-574)
【作者】黄传海; 樊红延; 戴晓莉
【作者单位】山东省食品药品监督管理局审评认证中心山东济南250014; 山东省药学科学院山东济南250101
【正文语种】中文
【中图分类】R965.3
【相关文献】
1.右旋布洛芬胶囊小鼠灌胃急性毒性的试验研究 [J], 贾庆文;郑智勇;李莉
2.丹参注射液小鼠单次给药毒性试验研究 [J], 郎彤;戴晓莉;薛云
3.右旋雷贝拉唑钠Beagle犬单次给药毒性试验研究 [J], 刘翠玲;戴晓莉;马玉奎;孙蓉
4.丹参注射液小鼠单次给药毒性试验研究 [J], 郎彤;戴晓莉;薛云;;;
5.右旋雷贝拉唑钠小鼠单次给药毒性试验研究 [J], 黄传海;樊红延;戴晓莉
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痛消膏经皮单次给药毒性实验研究
•实验观察•痛消膏经皮单次给药毒性实验研究毛得宏I李国俊仏郭亮2刘渝松2彭志财I金贵根I姜维成I郭剑华2(1.重庆市永川区中医院，重庆402160；2.重庆市中医骨科医院，重庆400010)中图分类号:R285.5文献标志码：A文章编号:1004-745X(2019)07-1229-03doi:10.3969/j.issn.l004-745X.2019.07.027【摘要】目的研究痛消膏经皮单次给药对机体所产生的毒性反应，为其临床用药和推广提供实验依据。
方法选取新西兰家兔为研究对象，采用最大给药量法及对照法观察痛消膏经皮单次给药后新西兰家兔出现的毒性反应情况。
结果痛消膏经皮单次给药后对新西兰家兔未见明显毒性反应，亦未见死亡或濒死；对新西兰兔体质量及体质量增长未见明显影响；给药后第14天对全部实验新西兰家兔进行剖检，肉眼观察组织、器官病变，均未见明显异常改变。
结论痛消膏经皮单次给药未见明显毒性反应，具有良好的安全性。
【关键词】痛消膏皮肤单次给药毒性实验新西兰家兔Experimental Study on Toxicity of Tongxiao Ointment by Single Transdermal Administration Mao Dehong,Li Guojun,Guo Liang,et al.Yongchuan District TCM Hospital of Chongqing. Chongqing402160,Chintu[Abstract]Objective:To study the toxic reaction of Tongxiao Ointment to organism by single transdermal administration,and to provide experimental basis for its clinical medication and promotion.Methods:New Zealandrabbits were selected as the study subjects.The maximum dose and contrast method were used to observe theirtoxicity after single transdermal administration.Results:There was no obvious toxicity in New Zealand rabbits after single transdermal administration,without death or sudden death.There was no significant effect on the growthand body weight of rabbits.On the14th day after the administration,all rabbits were examined with necropsy,andno obvious abnormal changes were observed in tissues and organ lesions.Conclusion:Tongxiao Ointment has noobvious toxicity and good safety by single transdermal administration.[Key words]Tongxiao Ointment.；Skin；Single dose；Toxicity test；New Zealand rabbit痛消膏由生大黄、黄苓、梔子、黄柏、姜黄、三七、泽兰、侧柏叶、芙蓉花叶、乳香、没药等中药组成，具有活血化瘀、清热凉血、消肿止痛的作用:"，临床上主要用于急性筋伤。
简述 药物急性毒性试验研究主要设计要点
简述| 药物急性毒性试验研究主要设计要点急性毒性（Acute toxicity）是指药物在单次或24小时内多次给予后一定时间内所产生的毒性反应。
拟用于人体的药物通常需要进行单次给药毒性试验。
单次给药毒性试验对初步阐明药物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意义。
单次给药毒性试验所获得的信息对重复给药毒性试验的剂量设计和某些药物临床试验起始剂量的选择具有重要参考价值，并能提供一些与人类药物过量所致急性中毒相关的信息。
实验设计注意事项01受试物受试物应采用工艺相对稳定、纯度和杂质含量能反映临床试验拟用样品和/或上市样品质量和安全性的样品，并注明受试物的名称、来源、批号、含量（或规格）、保存条件及配制方法等，并须有研制单位的COA。
来自于市售的辅料、溶媒等应具有相关的说明和规格。
02实验动物年龄| 试验应使用年轻健康成年的动物，如果是儿童用药，必要时采用幼年动物进行试验。
种属| 可根据药代或药效结果选择合适的动物种属，试验应采用至少两种哺乳动物，从多个方面暴露药物动物毒性，选择一种啮齿类和一种非啮齿类动物，如未采用非啮齿类动物进行动物试验，应该说明理由。
性别| 通常采用雌性和雄性动物进行试验，雌雄各半。
若采用单性别动物进行试验，应阐明其合理性。
动物数| 根据研究目的，选择合适的动物数，比如小动物每组动物10只，大动物每组动物4只。
动物数应符合试验方法及其结果分析评价的需要。
体重| 试验中的啮齿类动物初始给药时的每组平均体重差异不应超过或低于平均体重的20%。
03给药途径通常情况下给药途径应至少包括临床拟用途径，或者增加一种能使药物较为完全进入全身暴露的途径如静脉给药。
急性经口给药前啮齿类动物应禁食一段时间，但禁食时间可能会影响暴露量，受到药物代谢酶的活性和受试物肠道内吸收的影响。
04给药剂量水平常用的试验方法有最大给药量法、最大耐受量法、半数致死量法等。
根据不同的试验方法选择合适的剂量，为了充分暴露毒性，高剂量可选择出现严重毒性的给药剂量或达到最大给药量，低剂量可选择未见毒性剂量，同时设空白和/或溶媒（辅料）对照组。
药物研发中的非临床安全性研究和基本要求
全程式新药安全性评价研究新模式内容之四
反应停的再评价研究
新的作用机制： 抗血栓生成 抑制NF-kB途径 免疫调节 促进肿瘤细胞凋亡
临床应用 多发性骨髓瘤 恶性淋巴瘤 骨髓增生异常综合症 血液系统肿瘤 恶性黑色素瘤 前列腺癌
内容介绍
新药研发过程中非临床安全性研究的地位 全程式安全性评价在药物研发中的应用 新药非临床安全性评价的基本原则 药物非临床安全性评价研究内容与基本要求 毒代动力学在药物非临床安全性评价中的应
用
非临床安全性评价基本原则
① 把握药理毒理评价的系统性 ② 充分暴露毒性 ③ 具体问题具体分析 ④ 执行GLP（药物非临床研究质量
发现毒理学
一般毒性
特殊毒性
致癌性 遗传毒性 生殖毒性 局部耐受性、过敏、 依赖性、免疫毒性 光敏和其它试验等
目 了解毒性反应剂量、时间、强度、症状、靶器官及可逆性等， 的 为临床方案提供参考、预测出现的毒性反应，制订临床防护
措施、保证受试者用药安全
创新药物的基本要求
稳定
质控 安全 有效
药物的基本属性（安全性、有效性、稳定性、可控性），在一定意 义上，由药物的化学结构所决定 药物分子设计是实现新药创制的主要途 径和手段
出血性休克 横纹肌溶解/致死
全程式新药安全性评价研究新模式内容之四
上市药品再评价典范－反应停
1961年，全世界范围内发生了臭名昭著 的“反应停”事件－海豹肢畸形的婴儿。
1962.5－1963.3，海豹肢畸形发生率： 西德：5500多名 英国：8000多名 日本： 300多名
药物急性毒性实验
实验一药物急性半数致死量（LD50）的测定【目的】了解药物半数致死量(LD50)测定的意义、原理，掌握半数致死量的测定方法和计算过程。
【原理】LD50是指在一群动物中能使半数动物死亡的剂量。
由于实验动物的抽样误差，药物的致死量对数值大多在50％质反应的上下呈正态分布。
在这样的质反应中药物剂量和质反应间呈S型曲线，S型曲线的两端处较平，而在50％质反应处曲线斜率最大，因此这里的药物剂量稍有变动，则动物的死或活的反应出现明显差异，所以测定半数致死量能比较准确地反映药物毒性的大小。
【实验材料】1、动物：小白鼠，体重18-24g，雌、雄各半，实验前禁食12小时，不禁水。
2、药品：盐酸普鲁卡因，苦味酸。
3、器械：小鼠笼，天平，注射器（1mL），电子计算器。
【方法和步骤】（一）预备实验1、探索剂量范围：先找出100%及0%死亡的剂量，此即上下限剂量（D m及D n）。
方法是先取出小鼠9-12只，每组3只，按估计量（根据经验或文献资料定出）给药，如3只小鼠全死则降低剂量一半，如全不死则增加剂量一倍，如部分死亡，则按2：1的比例向上、向下调整剂量，由此找出上下限剂量。
2、确定组数，计算各组剂量：确定组数（G）：可根据适宜的组距确定组数，一般分5-8个剂量组。
计算各组剂量：要求各组剂量按等比级数排列，在找出D m及D n和确定组数后，可按下列公式求出公比r：r再按公比计算各组剂量D1,D2,D3,D4,D5……D m，其中D1=D n=最小剂量，D2=D1⨯r; D3=D2⨯r; D4=D3⨯r; D5=D4⨯r; ……D G=D G-1⨯r。
r值一般以1.7~1.15之间为宜。
计算举例：已知某药在致死毒性实验中，Dm=187.5 mg/kg; Dn=76.8 mg/kg, 确定组数G=5，求r及各组剂量。
先代入公式求r=1.25，再计算各组剂量D1=Dn=76.8 mg/kg,D2=76.8⨯1.25=96 mg/kg, 依次计算D3，D4，及D G(D5)分别为120，150，187.5 mg/kg。
丹参注射液小鼠单次给药毒性试验研究
丹参注射液小鼠单次给药毒性试验研究郎彤;戴晓莉;薛云【摘要】目的观察单次静脉和腹腔注射给予丹参注射液后对小鼠产生的毒性.方法采用经典半数致死量(LD50)法进行小鼠单次给药毒性试验,动物分组后以不同的剂量静脉或腹腔注射给药1次,药后观察小鼠反应,检测体重和死亡率,连续观察14 d 后剖检,观察主要脏器的病变.结果丹参注射液小鼠单次静脉和腹腔注射给药半数致死量分别为3.2 g?kg-1和6.3 g?kg-1.死亡小鼠毒性症状主要表现为俯卧不动、抽搐、呼吸困难、昏迷、尿失禁继而死亡.结论丹参注射液大剂量腹腔和静脉注射可致小鼠全部死亡,但其半数致死量分别为临床用药剂量的65和129倍,安全范围较大.【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2018(037)004【总页数】3页(P201-202,233)【关键词】丹参注射液;单次给药毒性;小鼠;半数致死量【作者】郎彤;戴晓莉;薛云【作者单位】潍坊市第二人民医院,山东潍坊261041;山东省药学科学院,山东济南250100;山东省药学科学院,山东济南250100【正文语种】中文【中图分类】R994.39丹参(Salvia miltiorrhiza)是植物丹参的根茎，性微寒，味苦，是应用已有上千年历史的最常见中药材之一[1]。
丹参具有活血化瘀之功效，丹参注射液属于《国家基本药物目录》中的中药注射剂，临床上主要用于心绞痛、冠心病、心肌梗死、心肌炎以及辅助抗肿瘤等疾病[2－3]。
中药注射液为我国特有的药物品种，临床上应用广泛，但因其成分复杂，其不良反应事件也越来越频发，中药注射液的安全性也越来越受到关注[4]。
因此，为了更好地评估中药注射剂的安全性和有效性，我国启动了中药注射剂再评价工作。
随着临床上应用越来越广泛，丹参注射液的不良反应也经常发生，其主要的不良反应包括变态反应、心动过缓、心动过速、药物性肝炎、腹泻、肌肉震颤及尿毒症等[5－6]。
本实验按照中药注射液再评价的技术规范要求，在药物非临床研究质量管理规范(GLP)条件下对丹参注射液进行了单次给药毒性再评价研究，为其临床应用及不良反应监测提供参考。
药物的安全性评价试验方法
观察途径： 日常观察（生长率、食耗、一般观察等） 测定指标：器官重量、血液学变化、血液生化学指标
01
一般指标：被毛、皮肤、眼睛、呼吸、行为活动、病理检查等。 生胞、网织红细胞计数、血红蛋白、白细胞总数级分类、血小板等） 血液生化指标（天门冬氨酸氨基转换酶、 丙氨酸氨酸氨基转换酶、碱性磷酸酶、尿酸氮 、总蛋白、白蛋白、血糖、 总胆红素、肌酐、 总胆固醇） 器官重量
目的：观察受试药物经注射给药后有无过敏反应。
01
试验方法： 动物：豚鼠 分组：3组（给药组、空白对照组、阳性致敏组） 给药方法：腹腔注射 结果观察：过敏性反应（痉挛、呼吸困难、 皮疹等）
02
3、过敏性试验（致敏试验）
4、热原试验
热源：微生物产生的能引起人及恒温动物体温异常升高的物质，主要是革兰氏阴性菌细胞壁分离出来的内毒素。
第二节 眼睛用药刺激性试验
1、试验目的：观察动物眼睛接触受试药物产生的刺激 反应情况。 2、试验材料 （1）动物：成年健康家兔 （2）受试药物：原液或原 3、试验方法 （1）试验分组：1个剂量组，1个对照组 （2）给药方案：将药物滴入或涂敷于动物一侧眼结膜囊内，另一侧作为对照。 （3）观察指标：6、24、48、72h、7d观察眼部反应情况（具体观察评分方式见书177页）
观察指标：行为学变化、对神经系统的兴奋或抑制作用。
常用动物：小鼠
精神神经系统
一般药理学评价的基本要求
常用动物：大鼠、犬、猫等
观察指标：血压、心率、心电、血流动力学变化等
心血管系统
常用动物：犬、猫等大动物
01
观察指标：呼吸频率、呼吸深度、呼吸类型等。
02
呼吸系统
01
02
03
04
药物单次给药毒性研究技术指导原则
药物单次给药毒性研究技术指导原则一、概述急性毒性（Acute toxicity）是指药物在单次或24小时内多次给予后一定时间内所产生的毒性反应[1、2]。
狭义的单次给药毒性研究（Single dose toxicity study）是考察单次给予受试物后所产生的急性毒性反应[2]。
本指导原则所指为广义的单次给药毒性研究，可采用单次或24小时内多次给药的方式获得药物急性毒性信息。
拟用于人体的药物通常需要进行单次给药毒性试验（见注释1）。
单次给药毒性试验对初步阐明药物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意义。
单次给药毒性试验所获得的信息对重复给药毒性试验的剂量设计和某些药物临床试验起始剂量的选择具有重要参考价值，并能提供一些与人类药物过量所致急性中毒相关的信息[1]。
本指导原则适用于中药、天然药物和化学药物。
二、基本原则（一）试验管理用于支持药品注册的单次给药毒性试验必须执行《药物非临床研究质量管理规范》（GLP）。
（二）具体问题具体分析单次给药毒性试验的设计，应该在对受试物认知的基础上，遵循“具体问题具体分析”的原则。
对于化学药，应根据受试物的结构特点、理化性质、同类化合物情况、适应症和用药人群特点、试验目的等选择合适的试验方法，设计适宜的试验方案，并结合其他药理毒理研究信息对试验结果进行全面的评价。
对于中药和天然药物，还应考虑到其与化学药的不同特点，试验时应根据各自不同的情况进行针对性设计。
（三）随机、对照、重复单次给药毒性试验应符合动物试验的一般基本原则，即随机、对照和重复。
三、基本内容（一）受试物中药、天然药物：受试物应采用能充分代表临床试验拟用样品和/或上市样品质量和安全性的样品。
应采用工艺路线及关键工艺参数确定后的工艺制备，一般应为中试或中试以上规模的样品，否则应有充分的理由。
应注明受试物的名称、来源、批号、含量（或规格）、保存条件、有效期及配制方法等，并提供质量检验报告。
由于中药的特殊性，建议现用现配，否则应提供数据支持配制后受试物的质量稳定性及均匀性。
GLP概述
GLP
2．SOP的起草：
（1）在开始SOP文件起草前，通常需要成立一个 专门的组织机构负责协调工作。 该组织通常QA人员，其职责是：
1）建立SOP文件总目录； 2）建立SOP设计与编码系统； 3）确定各部门参与文件协调的人员； 4）文件审查，保证文件的准确性、完整性、可操 作性
32
GLP
2．SOP的起草
设施、标本、原始数据
10
GLP
专题负责人
（1） 医药本科以上学历，业务素质和工作能力； （2） 制定实验方案，提出修订或补充相应的标准操作规程 的建议，分析研究结果，撰写总结报告； （3） 严格执行实验方案，若有修改，应经QA确认，机构负 责人批准； （4） 确保工作人员明确所承担的工作，掌握标准操作规程 （5） 掌握研究工作的进展，检查各种实验记录及时、直接 、准确、清楚； （6） 详细记录实验中出现的意外情况和采取的补救措施； （7） 实验结束后，将实验方案、原始资料、应保存的标本 、有关记录文件和总结报告等归档保存； （8） 及时处理质量保证部门提出的问题。
（2） SOP 文件架构确立后，将SOP 条目分派至各相关部门 组织编写。 “写我所做，做我所写”。“按照写的做，照着 做的写，书面化，程序化”。 对编写人员的要求：经GLP学习和培训，熟悉本专业的技术和 业务，掌握SOP文件撰写的基本要求。 （3）SOP的审核批准： 文件起草后，编写小组组织对样稿 进行广泛的讨论和审查。初稿确立后经质量保证部门签字确 认和机构负责人批准后生效。 （4）SOP的颁发： QA部门和档案室各保留一份原件备查，“按需要份数印刷， 按涉及范围发放。”
QC
监查
monitor
视查
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记 录
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单次给药毒性试验-近似致死剂量法
• 估计可能的毒性范围：根据小动物的毒性试验 结果、受试物的化学结构和其它有关资料，估 计可能引起毒性和死亡的剂量范围
• 按50%递增法，设计出含10-20个剂量序列表 • 根据估计，由剂量序列表中找出可能的致死剂
观察指标
• 临床症状（动物外观、行为、饮食、对刺激的反应、分泌物、排泄物 等）
• 死亡情况（死亡时间、濒死前反应等） • 体重变化（给药前、给药期结束各称重一次，观察期间可多次称重，
动物死亡或濒死时称重 • 记录所有死亡情况，出现症状以及症状的起始时间、严重程度、持续
时间、体重变化等 • 进行大体解剖（所有动物），当组织器官出现体积、颜色、质地等改
变时，应进行组织病理学检查
结果分析与评价
• 根据上述观察指标的结果判断受试物引起 的毒性反应性质、严重程度、可恢复性及 安全范围
• 根据毒性可能涉及的部位，综合大体解剖 和组织病理学检查结果，初步判断毒性靶 器官。
– LD50法（1/10，1/50，1/100） – MTD法（1，1/3，1/10)
• 蓄积性毒性剂量设计
– 1/10LD50，然后按等比级数1.5倍逐渐递增
试验目的和意义-为特殊毒性试验剂量选择提供依据
– 生殖毒性试验高剂量为母鼠MTD – 致突变试验
• 啮齿类动物微核试验高剂量为1/2 LD50 • 精原细胞染色体畸变试验高剂量应为1/2 LD50
• 动物体重：小鼠18-22g，同次体重相差不超 过平均体重20%；大鼠120-150g，同次体重 不超过平均体重20%；犬用成年犬
• 性别：雌雄各半
给药方法
• 动物禁食
– 为减少吸收差异和大容量给药造成急性扩张，小鼠和大鼠至少应停食4-6h，要求一夜停 食（不停水），给药后再禁食3-4h
• 给药途径
量范围，在此范围内，每间隔一个剂量给一只 动物，测出最低致死剂量和最高非致死剂量， 然后用二者之间的剂量给一只动物，此剂量即 为所要求的近似致死剂量
单次给药毒性试验要求
• 试验动物
– 啮齿类：大鼠或小鼠 – 非啮齿类：犬、猴或其它
• 作为一类创新药物必须用两种动物（啮齿 类和非啮齿类）；其它类酌情用二种动物
• 近似致死量法 • 最大给药量法 • 最大耐受量法 • 固定剂量法 • 上下（序贯法） • 累积剂量法（金字塔法） • 半数致死量法
定义
• 最大给药量（MFD）：指动物单次或24小时内多次（2-3次）给药所采用的最 大给药剂量
• 最大耐受量法（Maximal tolerance dose, MTD)：是指动物能够耐受的而不引起 动物死亡的最高剂量；是引起动物出现明显的中毒反应而不产生死亡的剂量
单次给药毒性试验-LD50法
• LD50测定法剂量设计
– 预试验：找出0%及100%估计致死量 – 正式试验：根据预试验药物毒性大小一般在1:0.6-1:0.9范围
内设计4-7档剂量
• LD50计算方法
– Bliss法 – 改进寇氏法 – 点斜法 – 简化概率单位法
单次给药毒性试验-最大给药量法
• 半数致死量（Median lethal dose, LD50）：预期引起50%动物死亡的剂量，该 值是统计学处理推算出的结果
• 单次口服固定剂量法：选择5、50、500和2000mg/kg四个固定剂量
– 实验动物首选大鼠，给药前禁食6-12小时，给受试物后再禁食3-4小时。如无资料证明雄 性动物对受试物更敏感，首先用雌性动物进行预试。根据受试物的有关资料，
单次给药毒性试验
单次给药毒性试验 （Single dose toxicity study）
• 定义
– 是为观察和评价急性毒性的有害作用或中毒反 应而设计的一种毒理学试验。研究药物一次或 24小时内多次给予受试药物后，一定时间内所 产生的毒性反应
单次给药毒性试验目的意义
• 了解新药急性毒性强度 • 计算新药相对毒性参数 • 为临床毒副反应监护提供参考依据 • 为进一步毒性试验选择剂量提供依据 • 其它方面
– 动物短期致癌试验高剂量应是MTD – 主要药效学剂量限度、安全药理和药代动力学
剂量也要参考急性毒性的LD50
试验目的和意义-其它方面
• 系列化合物的合格率分析（除理化性质为 主外）也参考LD50
• 复方中药物的相互作用，有时也通过拆方 及合用的LD50来判别相互作用的性质
单次给药毒性试验常用试验方法
– LD5基本无害量 – LD1肯定无害量 – ED95基本有效量 – ED99肯定有效量
试验目的和意义-为临床毒副反应监护提供参考
• 中毒症状 • 起始时间 • 持续时间 • 恢复时间 • 对抗试验为临床急救提供依据
试验目的和意义-为重复给药、蓄毒试 验剂量选择提供依据
• 重复给药毒性剂量设计
试验目的和意义-新药急性毒性强度
动物及给药途径
剧毒
毒
大鼠LD50 ig（mg/kg)
≤25
25-200
ห้องสมุดไป่ตู้
大鼠或兔经皮LD50
≤50
（mg/kg)
大鼠LC50（mg/L/4h)
≤0.5
50-400 0.2-2
有害 200-2000 400-2000 2-20
试验目的和意义-相对毒性参数
• 治疗指数TI=LD50/ED50 • 安全系数SF=LD5/ED95 • 可靠或确实安全系数CSF=LD1/ED99 • LD50/ED50，越大越安全
– 中药新药除临床给药途径外，一、二类水溶性药应同时采用静脉给药途径，其他如油剂、 混悬剂之类可擦爱用皮下给药途径。腹腔注射在人体极少用，中药粗制剂成分复杂，动 物毒性试验中也尽可能少用，以避免腹腔刺激性的干扰。
• 各给药途径的容量
– 小鼠一般：0.4-0.5ml/20g，大鼠1ml/100g – 小鼠最大：口服不超过0.8ml/20g，其他途径不超过0.5ml/20g – 大鼠最大：口服不超过2ml/100g，其他途径不超过1ml/100g