α-半乳糖苷酶(α-Galactosidase, α-GAL)试剂盒说明书
LacZ染色试剂盒使用说明书
华越洋⽣生物提供 QQ: 1733351176LacZ染⾊色试剂盒使⽤用说明书β-‐Galactosidase S taining K it M annual编号 名称 产品规格北京华越洋生物RS3601-‐23 LacZ染色试剂盒 250次分析基本信息：大肠杆菌中的LacZ基因是应用极广的报告基因之一，被用来检测表达载体介导的基因转移效率，也用于基因启动子研究。
LacZ编码β-‐半乳糖苷酶，该物质非常稳定，能抵抗蛋白酶的水解，并且可以利用许多底物，包括X-‐gal。
X-‐Gal是β-‐半乳糖苷酶（β-‐galactosidase）的显色底物，在β-‐半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物，所以可以轻易的检测出LacZ基因的表达。
The LacZ gene from E. coli is one of the most commonly used reporter genes f or t esting t he e fficiency o f e xpression v ector m ediated g ene t ransfer and for studying the regulation of promoters of genes. The LacZ gene encodes the enzyme β-‐galactosidase, which is very stable, resistant to proteolytic d egradation, c an u tilize a v ariety o f s ubstrates a nd c an b e e asily assayed in situ. The β-‐Galactosidase staining kit utilizes X-‐gal as the substrate.产品说明：华越洋的β-‐半乳糖苷酶染色试剂盒利用X-‐gal作为底物，配合试剂盒内提供的其他试剂，可以完成250次染色反应。
alpha-galactosidase 分子式
alpha-galactosidase 分子式alpha-半乳糖苷酶(Alpha-galactosidase)，也被称为α-半乳糖苷酶，是一种酶蛋白，具有水解α-半乳糖苷键的能力。
它广泛存在于天然界中，包括微生物、植物和动物中，对生物体的消化系统发挥着重要的作用。
这篇文章将详细介绍alpha-半乳糖苷酶的分子式及其在生物学中的重要性。
alpha-半乳糖苷酶的化学式为C36H62O31，其分子质量约为约970克/摩尔。
它是一种酶蛋白，属于水解酶中的一种，通过加速α-半乳糖苷键的水解反应来催化底物分子的分解。
在这个过程中，底物分子中的α-半乳糖苷键被酶催化水解成单糖分子，具体来说就是将底物中的α-半乳糖释放出来，使得底物能够在生物体内得以消化。
alpha-半乳糖苷酶的产生主要来源于微生物、植物和动物。
在微生物中，特别是在许多细菌和真菌中广泛表达。
一些常见的微生物来源包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和黄酵母等。
植物中，alpha-半乳糖苷酶主要存在于种子中，用于帮助种子中的碳水化合物储存和供应。
动物中，alpha-半乳糖苷酶主要存在于消化道中，尤其是在小肠和结肠中。
alpha-半乳糖苷酶在生物学中具有重要的作用。
它对食物中的α-半乳糖含量较高的食物进行水解，有助于消化和吸收。
一些食物，如豆类、豆制品、全麦谷物和某些蔬菜，含有较高水平的α-半乳糖，这些食物在人体内的消化过程中，需要alpha-半乳糖苷酶的参与，才能被有效地消化和吸收。
因此，alpha-半乳糖苷酶被认为是食物消化和营养吸收的关键酶之一。
除了在食物消化方面的作用外，alpha-半乳糖苷酶还被广泛应用于食品工业中。
由于某些食物中的α-半乳糖会导致胃肠道不适，如腹胀和气体的产生，所以alpha-半乳糖苷酶被用作食品添加剂，用于降低食物中α-半乳糖的含量，从而减轻食物引起的不适反应。
此外，alpha-半乳糖苷酶也被广泛应用于生物工程和制药工业中。
在生物工程中，alpha-半乳糖苷酶可用于生产高纯度的半乳糖和低半乳糖食品，如乳糖和婴儿配方奶粉。
α-半乳糖苷酶清除猪细胞表面的α-Gal抗原
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β-半乳糖苷酶β-galELISA试剂盒使用方法
β-半乳糖苷酶（β-gal）ELISA试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T0.8 pg/ml -35pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定微生物样本中β-半乳糖苷酶（β-gal）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中β-半乳糖苷酶（β-gal）水平。
用纯化的β-半乳糖苷酶（β-gal）体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入β-半乳糖苷酶（β-gal），再与HRP标记的β-半乳糖苷酶（β-gal）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的β-半乳糖苷酶（β-gal）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中β-半乳糖苷酶（β-gal）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
小鼠α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒使用说明书本
小鼠α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒使用说明书本本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中α半乳糖基抗体(Gal)的含量。
试验原理：Gal试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知Gal浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将Gal和生物素标记的抗体同时温育。
小鼠α半乳糖基抗体洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中Gal的浓度呈比例关系。
试剂盒组成：自备材料蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明
β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明产品简介：β-半乳糖苷酶染色试剂盒(β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时SA-β-Gal(senescence-associatedβ-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。
在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。
绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力，在不能分裂后就进入衰老状态。
此时细胞仍然是存活的，但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。
衰老细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂，并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊，不同于一些损伤诱导的细胞休眠，也不同于细胞生长接触抑制的情况。
衰老细胞通常体积变会大，表达pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。
细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式，同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。
本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测，也可以用于组织切片的衰老检测。
β-半乳糖苷酶染色试剂盒以X-Gal为底物，在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物，光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
本试剂盒仅染色衰老细胞，对衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞等不会染色。
对于组织切片或组织块，可以检测的样品数量视样品的大小而定，对于普通的切片也至少足够检测100个样品，使用6孔板测定，足够测定100个样品。
产品组成：试剂(C):β-半乳糖苷酶染色液A1ml4℃避光试剂(D):β-半乳糖苷酶染色液B1ml4℃避光试剂(E):β-半乳糖苷酶染色液C100ml4℃避光使用说明书1份自备材料：1、PBS或HBSS2、细胞培养器皿3、显微镜操作步骤(仅供参考)：(一)贴壁细胞染色：1、对于6孔板中培养的细胞，吸除细胞培养液，用PBS或HBSS洗涤1次，加入1ml β-半乳糖苷酶染色固定液，室温固定15min。
人α葡萄糖苷酶α-glucosidase试剂盒使用方法
人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）试剂盒使用方法检测范围：96T7 U/L -200 U/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）水平。
用纯化的人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α葡萄糖苷酶（α-glucosidase），再与HRP标记的α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）浓度。
试剂盒组成1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
β-半乳糖苷酶（β-Galactosidase）活性的整体封片免疫组化检测实验
β-半乳糖苷酶（β-Galactosidase）活性的整体封片免疫组化检测实验β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）是一种水解酶，催化β-半乳糖苷水解成单糖。
使β-半乳糖苷酶作用的底物包括神经节苷脂GM1、乳糖苷、乳糖、各种糖蛋白。
准备大组织的厚切片进行β-半乳糖苷酶染色材料：小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂（盒）：磷酸盐缓冲液（PBS) 冰冷β-半乳糖苷酶固定剂β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液β-半乳糖苷酶染色液仪器、耗材：5毫升或10毫升的聚苯乙烯或聚丙烯帽盖的试管或1.5~2 毫升的离心管;转动平台;染色用密闭箱;附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片;纤光照明的解剖显微镜;照相显微镜步骤⑴在冰冷的PBS里解剖胚胎或组织。
置β-半乳糖苷酶固定剂，室温至合适的时间。
固定小鼠胚胎和组织：外植体和E 6.5~E 7.5胚胎5~10 分钟；E 8~E 9.5胚胎或尾巴切面 15~30 分钟；E 10 ~ E 12.5 胚胎 30 ~90分钟;E 13~ E 14.5 胚胎 2 小时;E 15.5 或更大的组织则需要解剖出来或切一半，然后固定2小时。
新生幼鼠或更大的小鼠的灌注需要在解剖特定组织染色之前进行。
⑵用β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液室温洗涤3次，每次15 分钟 (针对小胚胎或尾巴切面），或每次30分钟(针对Ell胚胎和大组织），头尾相接地轻柔转动。
⑶将组织置于β-半乳糖苷酶染色液中（室温，30℃或37℃取决于β-半乳糖苷酶表达丰度），在5 毫升或10 毫升的帽盖的试管或1. 5~2毫升的离心管中孵育，以防蒸发。
可用肉眼或解剖显微镜调节染色程度。
⑷得到预期的信号背景比之后（1~48 小时)，在PBS中洗涤组织3次，每次30 分钟。
⑸通过解剖镜观察和拍摄样本染色的组织，使用低功率的物镜和来自侧面和顶端的光纤照明。
为了得到最好的结果，将组织放置在附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片，用足够的PBS覆盖组织。
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货号：QS2614 规格：50管/24样α-半乳糖苷酶（α-Galactosidase,α-GAL）试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
α-GAL (EC 3.2.1.22)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，能专一地催化α半乳糖苷键的水解，主要参与棉子糖、水苏糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。
α-GAL对于植物种子的萌发至关重要，种子萌发初期，其催化产生的D-半乳糖通过糖酵解途径迅速转化和消耗，为种子的萌发提供最初的能量来源，后期则主要参与细胞壁储藏多糖水解。
测定原理：
α-GAL分解对-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算α-GAL活性。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入5mL蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
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充分混匀，400nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定-A对照。
每个测定管需设一个对照管。
α-GAL活性计算：
标准条件下测定的回归方程为y =0.00543x -0.0027；x为标准品浓度（nmol/mL），y为吸光值。
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟产生1nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
α-GAL活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(V样×Cpr)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷Cp r
需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织每分钟产生1nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
α-GAL活力(nmol/min /g鲜重)＝[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T =61.39×(ΔA+0.0027) ÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟产生1nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
α-GAL活力(nmol/min /104 cell)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00543×V反总]÷(500×V样÷V样
总)÷T
=0.123×(ΔA +0.0027)
V反总：反应体系总体积，0.5mL；V样：加入反应体系中样本体积，0.05mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g； 500：细胞或细菌总数，500万；T：反应时间，30min。
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