酵母培养基
酵母表达培养基介绍
毕赤酵母表达的培养基配制［5］2.1 LB（Luria－Bertan i）培养基：Trypto n l％YeastExtrac t 0.5％NaCl l％PH 7.0制作平板时加入2％琼脂粉。
121℃高压灭菌 20min。
可于室温保存。
用于培养pP ICZαA原核宿主菌TOP10F’时可加入Ze ocin25ug / ml。
2.2 LLB（Low Salt LB）培养基：Trypto n l％YeastExtrac t 0.5％NaCl 0.5％PH 7.0制作平板时加入2％琼脂粉。
121℃高压灭菌 20min。
可于室温保存数月。
用于培养pP ICZαA 原核宿主菌TOP10F’时，加入Zeoc in 25ug / ml，可以4℃条件下保存1～2周。
2.3 YPD （又称YEPD）YeastExtrac t Pepton e Dextro se Medium，（YeastExtrac t Pepton e Dextro se Medium，酵母浸出粉/胰蛋白胨/右旋葡萄糖培养基）Trypto n 2%dextro se (glucos e) 2%+agar 2%+Zeocin100μg/ml液体YPD培养基可常温保存；琼脂YPD平板在4℃可保存几个月。
加入Zeoc in 100ug/ ml，成为YPDZ培养基，可以4℃条件下保存1～2周。
2.4 YPDS + Zeocin培养基（YeastExtrac t Pepton e Dextro se Medium）：yeastextrac t 1%pepton e 2%dextro se (glucos e) 2%sorbit ol （山梨醇）1 M+agar 2%+ Zeocin100μg/ml不管是液体YPDS培养基，还是YPDS + Zeocin培养基，都必须存放4℃条件下，有效期1～2周。
酵母菌培养基
麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。
马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。
豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。
察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。
麦芽汁培养基为天然培养基，马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基，而察氏培养基则为合成培养基。
培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。
(一)麦芽汁培养基的配制1．培养基成分新鲜麦芽汁一般为10-15波林。
2．配制方法 (1)用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h，置于15℃阴凉处发芽，上盖纱布，每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用。
(2)取一份麦芽粉加四份水，在65℃水浴锅中保温3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化完全)。
(3) 糖化液用4-6层纱布过滤，滤液如仍混浊，可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清，加水20 m1，调匀至生泡沫，倒入糖化液中，搅拌煮沸，再过滤)。
(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度，将滤液用水稀释到10-15波林，调p H至6．4。
如当地有啤酒厂，可用未经发酵，未加酒花的新鲜麦芽汁，加水稀释到10-15波林后使用。
(5)如配固体麦芽汁培养基时，加入2％琼脂，加热融化，补充失水。
(6)分装、加塞、包扎。
(7)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 mi n。
（二)马铃薯葡萄糖培养基的配制1、培养基成分马铃薯20g 葡萄糖2 g 琼脂1.5-2g 水100ml自然pH 2．配制方法(1)配制20％马铃薯浸汁取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000m1。
酵母菌发酵培养基优化要点
❖ 本实验以菌体生物量为指标，用四因素三水 平的正交试验确定酵母菌的最优培养基。
实验步骤
一、培养基的配制
1.将葡萄糖、蔗糖、酵母提取粉、KH2PO4作为培养基的主要 影响因素，每一因素设定3个水平，进行四因素三水平的正交 试验，试验设计如表1
因素水平 A葡萄糖 /%
1
1.0
2
2.0
3
3.0
表1 正交试验表设计
(X1+X2+X3)/3 (X4+X5+X6)/3 (X7+X8+X9)/3
K最大- K最小
B
1 2 3 1 2 3 1 2 3
(X1+X4+X7)/3 (X2+X5+X8)/3 (X3+X6+X9)/3
K最大- K最小
C
1 2 3 3 1 2 2 3 1
(X1+X5+X9)/3 (X2+X6+X7)/3 (X3+X4+X8)/3
1(1.0)
1(0)
1(1.0)
2(1)
1(1.0)
3(2)
2(2.0)
1(0)
2(2.0)
2(1)
2(2.0)
3(2)
3(3.0)
1(0)
3(3.0)
2(1)
3(3.0)
3(2)
C酵母提 取粉/%
1(0.5) 2(1) 3(1.5) 2(1) 3(1.5) 1(0.5) 3(1.5) 1(0.5) 2(1)
C酵母提取 D KH2PO4
粉/%
/%
1(0.5)
1(0.5)
2(1)
2(1)
3(1.5)
酵母表达培养基介绍
毕赤酵母表达的培养基配制［5］2.1 LB（Luria－Bertani）培养基：Trypton l％Y east Extract 0.5％NaCl l％PH 7.0制作平板时加入2％琼脂粉。
121℃高压灭菌20min。
可于室温保存。
用于培养pPICZαA原核宿主菌TOP10F’时可加入Zeocin 25ug / ml。
2.2 LLB（Low Salt LB）培养基：Trypton l％Y east Extract 0.5％NaCl 0.5％PH 7.0制作平板时加入2％琼脂粉。
121℃高压灭菌20min。
可于室温保存数月。
用于培养pPICZαA 原核宿主菌TOP10F’时，加入Zeocin 25ug / ml，可以4℃条件下保存1～2周。
2.3 YPD （又称YEPD）Y east Extract Peptone Dextrose Medium，（Y east Extract Peptone Dextrose Medium，酵母浸出粉/胰蛋白胨/右旋葡萄糖培养基）Trypton 2%dextrose (glucose) 2%+agar 2%+Zeocin 100 μg/ml液体YPD培养基可常温保存；琼脂YPD平板在4℃可保存几个月。
加入Zeocin 100ug / ml，成为YPDZ培养基，可以4℃条件下保存1～2周。
2.4 YPDS + Zeocin 培养基（Y east Extract Peptone Dextrose Medium）：yeast extract 1%peptone 2%dextrose (glucose) 2%sorbitol （山梨醇）1 M+agar 2%+ Zeocin 100 μg/ml不管是液体YPDS培养基，还是YPDS + Zeocin 培养基，都必须存放4℃条件下，有效期1～2周。
2.5 MGYMinimal Glycerol Medium （最小甘油培养基）（34%YNB；1%甘油；4*10-5%生物素）。
酵母液体培养基配方
酵母液体培养基配方
酵母是一种单细胞真菌，广泛应用于食品、饮料、医药和工业等领域。
酵母液体培养基是酵母生长和繁殖的基础，其配方的优劣直接影响到酵母生长的效果和产物的质量。
以下是一种常用的酵母液体培养基配方：
1. 酵母营养素：10克/升
2. 柠檬酸：5克/升
3. 葡萄糖：20克/升
4. 氯化镁：1克/升
5. 柠檬酸钠：5克/升
6. 酵母提取物：1克/升
以上配方在水中充分溶解混合后，以121°C高压灭菌30分钟即可使用。
此配方可支持大多数酵母生长和繁殖。
需要注意的是，不同的酵母种类对营养素的需求有所不同，因此在实际应用中，可以根据具体情况调整培养基的配方，以获得更好的生长效果和产物质量。
- 1 -。
酵母表达过程中用到的培养基
酵母表达过程中用到的培养基毕赤酵母表达的培养基配制［5］2.1 LB（Luria－Bertani）培养基：Trypton l％Yeast Extract 0.5％NaCl l％PH 7.0制作平板时加入2％琼脂粉。
121℃高压灭菌20min。
可于室温保存。
用于培养pPICZαA 原核宿主菌TOP10F’时可加入Zeocin 25ug / ml。
2.2 LLB（Low Salt LB）培养基：Trypton l％Yeast Extract 0.5％NaCl 0.5％PH 7.0制作平板时加入2％琼脂粉。
121℃高压灭菌20min。
可于室温保存数月。
用于培养pPICZαA原核宿主菌TOP10F’时，加入Zeocin 25ug / ml，可以4℃条件下保存1～2周。
2.3 YPD （又称YEPD）Yeast Extract Peptone Dextrose Medium，（Yeast Extract Peptone Dextrose Medium，酵母浸出粉/胰蛋白胨/右旋葡萄糖培养基）Trypton 2%dextrose (glucose) 2%+agar 2%+Zeocin 100 μg/ml液体YPD培养基可常温保存；琼脂YPD平板在4℃可保存几个月。
加入Zeocin 100ug / ml，成为YPDZ培养基，可以4℃条件下保存1～2周。
2.4 YPDS + Zeocin 培养基（Yeast Extract Peptone Dextrose Medium）：yeast extract 1%peptone 2%dextrose (glucose) 2%sorbitol （山梨醇）1 M+agar 2%+ Zeocin 100 μg/ml不管是液体YPDS培养基，还是YPDS + Zeocin 培养基，都必须存放4℃条件下，有效期1～2周。
2.5 MGYMinimal Glycerol Medium （最小甘油培养基）（34%YNB；1%甘油；4*10-5%生物素）。
酵母菌发酵培养基的优化
酵母菌可以利用多种碳源，如糖、糖蜜、淀粉等，其中葡萄糖是最常用的碳源， 因为其易得且能够快速被酵母菌利用。在优化培养基时，可以根据实际需求选 择合适的碳源及其浓度。
氮源
总结词
氮源是酵母菌发酵培养基中必不可少的成分，用于合成蛋白质、核酸等细胞成分 。
详细描述
酵母菌可以利用多种氮源，如氨、尿素、氨基酸等。在选择氮源时，需要考虑其 适用性和成本效益。在某些情况下，添加适量的氨或尿素可以促进酵母菌的生长 和代谢。
研究结论
优化后的培养基能够显著提高 酵母菌的发酵效率和产物产量， 降低生产成本。
通过实验对比，优化后的培养 基在营养成分、pH值、渗透压 等方面均表现出更好的性能。
优化过程中采用的单因素实验 和正交实验方法为培养足与展望
1
尽管本研究取得了一定的成果，但仍需进一步探 究不同酵母菌种的最佳培养条件和营养需求。
正交实验法
总结词
通过设计正交表，对多个因素进行同时调整，以找出最优组合。
详细描述
正交实验法是一种高效且科学的方法，通过设计正交表，对多个因素进行同时调整，以找出最优组合。这种方法 可以同时考虑多个因素对酵母菌生长的影响，避免了单因素实验的片面性，提高了实验效率和准确性。
响应面法
总结词
通过构建数学模型，描述酵母菌生长与培养 基成分之间的关系，并找出最优解。
结果讨论
本实验通过添加不同种类的营养物质，发现 葡萄糖、蛋白胨和酵母提取物对酵母菌的生 长具有促进作用。
在实际生产中，可以根据需要选择合适的营 养物质配比，以达到最佳的酵母菌发酵效果 。
本实验结果可为酵母菌发酵培养基的优化提 供一定的参考依据，有助于提高酵母菌发酵 产物的产量和质量。
05
酵母菌培养操作
酵母菌培养操作一、引言酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于自然界中的土壤、水体、植物和动物体内。
它们在生物学、医学和工业领域中具有重要的应用价值。
为了研究酵母菌的生理特性和生物学功能，科研人员经常需要进行酵母菌的培养操作。
本文将介绍一种常用的酵母菌培养方法。
二、材料和试剂准备1. 培养基：选择适合酵母菌生长的培养基，如YPD培养基（1%酵母粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖）。
2. 培养器具：培养皿、试管、离心管等。
3. 酵母菌菌株：选择所需的酵母菌菌株。
三、酵母菌的分离和接种1. 从酵母菌菌株保存液中取出所需的菌株。
2. 在无菌条件下，将菌株转移到含有YPD培养基的试管中。
3. 进行适当的稀释，使培养液中的菌落数量适中。
4. 震荡培养液，使菌落均匀悬浮于培养基中。
四、酵母菌的培养条件1. 温度：酵母菌的生长温度一般为28-30摄氏度，根据不同的菌株和实验目的可以进行调整。
2. pH值：酵母菌的最适生长pH通常在5-6之间，也可以根据具体要求进行调整。
3. 培养时间：酵母菌的培养时间根据实验目的和菌株的生长速度而定，一般为24-48小时。
五、酵母菌的培养方法1. 平板培养法：将适量的酵母菌培养液均匀倒在培养皿中，待其凝固后，将所需的酵母菌菌株接种在培养基表面，然后在恰当的温度下培养一段时间，观察菌落形态和数量。
2. 液体培养法：将适量的酵母菌培养液倒入无菌的离心管中，加盖后在恰当的温度下培养一段时间，观察菌液浑浊度和细胞数量的变化。
3. 摇瓶培养法：将适量的酵母菌培养液倒入无菌的摇瓶中，盖紧盖子后在恰当的温度下进行摇床培养，可以获得大量的酵母菌菌液。
六、酵母菌的保存1. 冷冻保存：将酵母菌培养液加入等体积的甘油溶液中，混匀后分装在无菌冷冻管中，置于-80摄氏度的冷冻箱中保存。
2. 高温保存：将酵母菌培养液均匀涂布在含有蔗糖的平板培养基上，置于30-37摄氏度的恒温箱中保存。
七、实验注意事项1. 所有实验操作必须在无菌条件下进行，避免外界细菌和真菌的污染。