血红蛋白的检测

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血红蛋白检验操作SOP

血红蛋白检验操作SOP

1.目的
建立血红蛋白测定的操作步骤,以保证试验的顺利进行和结果的真实可靠。

2.适用范围
适用于血清制品血红蛋白的测定(分光光度计法)
3.职责
检验人员。

4.定义

5.引用标准
《中国药典》2015版四部通则3604
6.材料及设备
6.1 751分光光度计
6.2 1-cm光路的比色杯
6.3 蒸馏水
7.流程图

8.内容
8.1.以蒸馏水为空白对照。

8.2 使用1-cm光路的比色杯,直接测定牛血清样品在576nm、623nm及700nm
波长下的吸光值。

8.3 每个样品至少测定2次。

8.4 计算平均测定值
8.5 按照下式计算样品中血红蛋白含量:
血红蛋白含量(mg/dl)=[(A576×115)−(A623×102)−(A700×39.1)] ×10。

8.6 其中;A576、A623、A700是样品在576nm、623nm及700nm波长下的平均
吸光值。

9.注意事项
9.1. 严格按照仪器说明书进行操作。

9.2. 比色杯要保持清洁,定期在盐酸液中进行浸泡。

9.3. 试验完毕将所有物品放归原处。

10.附录及派生记录
10.1. 血红蛋白检测记录F-SOP-ZL004-01
11.相关文件

12.修订记录。

血红蛋白的检测

血红蛋白的检测

一血红蛋白的提取和分离实验的方法:1:实验材料,仪器,试剂及试剂的配制(1)实验材料:新鲜的鸡血(2)实验仪器:离心机,烧杯(100ml),胶头滴管,玻璃棒,离心管架,漏斗,纱布等。

(3)实验试剂:饱和(NH4)2SO4溶液(PH=6.0~7.0),柠檬酸钠溶液,生理盐水,蒸馏水。

(4)试剂的配制:1. 饱和(NH4)2SO4溶液的配制:100ml蒸馏水中溶解76g(NH4)2SO4,用氨水滴PH值至6.5左右;2.生理盐水的配制:取9gNaCl溶于1000ml蒸馏水中。

3.柠檬酸钠溶液的配制:6g柠檬酸钠溶于100ml生理盐水中(可收集100ml鸡血)。

2:实验步骤:(1)收集并清洗鸡血:用盛有柠檬酸钠溶液的烧杯装新鲜的鸡血(防止鸡血凝固),然后将鸡血用300ml生理盐水稀释,充分搅拌后转移到50ml离心管中,离心(V=5000rpm)5min(此步可除去血清蛋白)。

(2)破碎鸡血细胞:小心倒掉上清,下层细胞加入50ml的蒸馏水,剧烈震荡10min,离心(V=5000rpm)10min.。

取上清溶液,即血红蛋白的溶液,用多层纱布过滤。

(3)盐析分离血红蛋白:向滤液中逐渐加入(NH4)2SO4饱和溶液,边加边摇,约加入与血红蛋白溶液相同体积时,溶液出现浑浊。

静止20min,离心10min(v=5000rpm).。

红色沉淀就是分离出来的血红蛋白。

血红蛋白溶液通过盐析并离心后得到红色沉淀,此时上清溶液基本无色,表明该沉淀就是我们分离得到的血红蛋白,无需用其他方式进行验证。

下面就几点进行讨论;1我们购买鸡血时,为了防止鸡血凝固,把鸡血收集到事先准备好的盛有柠檬酸钠溶液的瓶子里,可以放置一白天,若要过夜,温度须控制在4摄氏度。

2我们用蒸馏水使细胞涨破而不用甲苯(有毒),既简单又安全,同时还可以将血红蛋白溶液进行稀释。

3用盐析法进行蛋白质分离试验,比通过色谱柱,减少了实验难度,降低了试验成本,缩短的试验时间。

血红蛋白检测方法

血红蛋白检测方法

血红蛋白检测方法血红蛋白检测方法是用来测试人体中的血红蛋白水平的一种常规临床检验方法。

血红蛋白是红细胞中的一种含铁蛋白,它的主要功能是将氧气从肺部运输到全身各个组织器官,同时将二氧化碳从组织器官带回肺部排出。

通过血红蛋白的检测,可以了解人体血液中氧气的携带能力以及相关疾病的存在与否。

目前常用的血红蛋白检测方法主要有以下几种:1. 血常规检测血红蛋白:血常规是一种常用的临床检查方法,它可以检测全血的各项指标包括血红蛋白水平。

这种方法在实验室中通常使用自动血液分析仪进行检测,通过红细胞计数和红细胞平均体积等参数计算得出血红蛋白浓度。

2. 血气分析检测血红蛋白:血气分析是一种通过测量动脉血样品中的氧气和二氧化碳浓度来评估呼吸和酸碱平衡的方法。

在这个过程中,也可以通过检测血红蛋白浓度来评估氧气的携带能力。

检测方法一般采用电化学法或光电法。

3. 血红蛋白电泳检测:血红蛋白电泳是一种通过电泳分离血红蛋白亚型来检测血红蛋白变异的方法。

这种方法可以用于鉴定血红蛋白病变或遗传性疾病,例如地中海贫血等。

它通过将患者血液样本与已知血红蛋白亚型标准进行对比来判断血红蛋白的异常情况。

4. 血红蛋白光谱检测方法:血红蛋白光谱检测是一种利用紫外-可见光谱仪测定血红蛋白吸收光谱特性的方法。

这种方法对红细胞中的血红蛋白进行分光分析,进而获得相关的吸收光谱和浓度信息。

这种方法可以帮助鉴定血红蛋白的形态结构变化和一些遗传性疾病。

总结来说,血红蛋白检测方法有血常规、血气分析、电泳和光谱检测等。

这些方法各有特点,常用于临床医学中对血红蛋白水平及相关疾病的诊断和监测。

根据具体的临床情况和医生的建议,我们可以选择适当的方法进行血红蛋白检测。

血红蛋白测定实验报告

血红蛋白测定实验报告

血红蛋白测定实验报告血红蛋白是人体内一种重要的血液蛋白,它能够携带氧气到达身体各个器官和组织。

血红蛋白测定是临床常用的一种检验方法,能够提供有关患者体内氧合情况的重要信息。

本次实验旨在通过测定参与实验的人员的血液样本中的血红蛋白含量,来了解其体内氧合情况及贫血情况。

实验步骤:1. 收集血液样本:准备工作台和所需器材,包括带有一次性安全针头的注射器、耗材等。

选择一个适当的部位,通常是患者的指尖。

在清洁皮肤后,用注射器抽取一定量的血液样本。

2. 采用血红蛋白计测定仪测定血红蛋白含量:将血液样本倒入已经预装了染剂的检测管中,混合均匀。

将检测管放入血红蛋白计测定仪中。

根据血红蛋白计测定仪的说明书,操作仪器进行测定。

实验结果:本次实验中测得参与者A的血红蛋白含量为X克/升,参与者B的血红蛋白含量为Y克/升,参与者C的血红蛋白含量为Z克/升。

讨论与分析:通过本次实验,我们发现不同参与者的血红蛋白含量存在一定的差异。

血红蛋白含量的正常范围可能因个人的年龄、性别、健康状况和生活习惯等因素而有所不同。

血红蛋白在人体中起着至关重要的作用,它能够与氧气结合形成氧合血红蛋白,并将氧输送到身体各个组织和器官中。

因此,血红蛋白含量的变化往往与身体的氧合情况有关。

根据世界卫生组织的建议,成年男性的正常血红蛋白范围为130-170克/升,成年女性的正常血红蛋白范围为120-150克/升。

如果血红蛋白低于这个范围,就可能存在贫血的情况。

贫血是一种常见的疾病,其主要特征是机体内的红细胞数量或质量的减少,导致无法满足身体对氧气的需求。

贫血可以由多种原因引起,例如缺铁、缺维生素B12或叶酸、慢性疾病等。

血红蛋白测定不仅在临床中广泛应用,而且在科研领域也扮演着重要角色。

通过测定血红蛋白的含量,可以了解机体的氧合情况,为临床诊断和治疗提供重要依据。

总结:通过本次血红蛋白测定实验,我们了解到血红蛋白是人体中不可或缺的重要物质。

血红蛋白含量的测定可以为医生提供诊断和治疗贫血等疾病的依据,也为科研人员提供了重要的实验数据。

红细胞和血红蛋白的检测

红细胞和血红蛋白的检测

(1)RBC生成减少
红细胞
骨髓造血干细胞

原红细胞

早幼红细胞

中幼红细胞

晚幼红细胞

成熟红细胞
造血干细胞 增殖/分化异常
RBC生成调 节异常等
DNA合成障碍
血红蛋白合成 /利用障碍
再障.骨髓增生异 常综合征.白血病
肾性贫血. 内分泌性贫血. 慢性疾病性贫血.
巨幼细胞贫血. 营养不良性贫血
缺铁性贫血. 铁粒幼细胞贫血
• 生理性贫血:
• 妊娠中晚期血浆容量增加血液稀释; • 婴幼儿及15岁以前的儿童生长发育造血原料相对不足 • 部分老年人造血功能减退;
• 病理性贫血:
病因学分类(1)生成不足(2)破坏过多(3)丢失过多 形态学分类(1)正细胞性(2)大细胞性(3)小细胞性
骨髓增生程度分类(1)增生性(2)增生不良性
(2)RBC破坏增多
RBC破坏增多
RBC内在异常
RBC外在异常
膜缺酶陷缺生珠陷成蛋障白P碍N免H 疫机性械性化 物学 理感染 脾亢
(3)RBC丢失过多
急性失血性贫血、慢性失血性贫血(缺铁性贫血)。
(三)红细胞形态的异常改变
红细胞形态异常包括: ☆ 大小改变 ☆ 形态改变 ☆ 染色改变 ☆ 结构改变
☆ 红细胞形态学异常的临床意义: 与Hb浓度、红细胞计数结合判断贫血
的病因,有助于贫血的诊断和鉴别诊断。
• 正常红细胞形态
• 正常红细胞呈双凹圆盘形,在血涂片中见到为圆形, 大小较一致,直径6-9um,平均7.5um。染色后四周 桔红色,中央淡染。
(1)红细胞大小改变的临床意义
大小异常 主要临床意义 正常大小 健康人、再障、溶贫、急性失血性贫血 小红细胞 缺铁性贫血、遗传性球形红细胞增多症、

血红蛋白测定参考方法

血红蛋白测定参考方法

血红蛋白测定参考方法血红蛋白测定是常见的一种体检项目,通过测定血液中的血红蛋白含量,可以判断人体的贫血程度。

下面就来介绍一下血红蛋白测定的参考方法。

一、血红蛋白测定的原理血红蛋白测定是基于血红蛋白的吸收光谱原理进行的。

血红蛋白是一种含有铁元素的蛋白质,可以与光谱吸收的波长产生特定的反应。

在测定过程中,将血样与某种试剂混合后,产生的反应物质与血红蛋白结合,使血红蛋白发生变化。

根据血红蛋白的吸收光谱变化,可以测定出血红蛋白的含量。

二、血红蛋白测定的参考方法1.静脉血法静脉血法是一种比较准确的血红蛋白测定方法,适用于对血红蛋白含量有精确要求的实验室检测。

在采集静脉血时,需要注意消毒、穿刺和采血的技术操作规范。

2.指尖采血法指尖采血法是一种简单的血红蛋白测定方法,适用于现场采集和快速测定。

采血时需先用清水和消毒液清洗手指,再用采血针穿刺手指取血。

3.自动化测定方法现代医疗技术已经发展出一些自动化的血红蛋白测定仪器,可以快速、准确地测定血红蛋白含量。

这些仪器通常包含一个血样处理模块和一个光学检测模块,能够自动完成血样处理和血红蛋白含量的测定。

三、血红蛋白测定的注意事项1.在进行血红蛋白测定之前,务必清洗手部、消毒针头和瓶塞,避免细菌感染和交叉污染。

2.采集血样时,注意不要把气泡吸入采血器中,否则会影响测定的准确性。

3.参考值仅供参考,具体结果仍需要根据个体情况综合判断。

总之,血红蛋白测定是一项重要的身体健康指标,需要进行科学、规范的操作。

只有掌握了正确的测定方法,才能得到准确的结果,并为健康管理提供科学依据。

血红蛋白检测原理

血红蛋白检测原理

血红蛋白检测原理
血红蛋白检测是一种检测血液中血红蛋白浓度的方法,其原理基于法国科学家吕赛克发现的光吸收定律。

血红蛋白在不同波长的光线中,会吸收不同程度的光线。

常用的检测方法是将一定量的血液置于一个透光性良好的玻璃或石英池中,然后通过光源照射,测量经过血液后的光线吸收程度。

通常使用可见光区域内的黄光(546nm)或绿光(578nm),这两种颜色的光线被证明可以被血红蛋白特异性吸收。

血红蛋白的含量和吸收光线的程度成正比关系,因此可以通过测量血液吸收光线的程度来计算血液中血红蛋白的浓度。

常见的血红蛋白浓度测试方法包括血红蛋白色谱法、血红蛋白浓度计法等。

血红蛋白测定及注意事项

血红蛋白测定及注意事项

(2)以上述同样的方法取血,并使血红蛋白转化为氰化高铁血红蛋白。

然后以转化液作空白,测定标本吸光度A。

(3)通过标准曲线查出待测样本的血红蛋白浓度或用K值来计算血红蛋白浓度,即Hb(g·L-1)=K×A (6.2-2)3.使用沙里氏血红蛋白计测定沙里氏比色法是用HCl使血红蛋白酸化形成棕色的高铁血红蛋白,然后和标准比色板进行比色。

(1)沙里血红蛋白计主要具有标准褐色玻璃比色箱和1只方形刻度测定管组成。

比色管两侧通常有两行刻度;一侧为血红蛋白量的绝对值,以g·dl-1(每100 ml血液中所含血红蛋白的克数)表示,从2~22 g;另一侧为血红蛋白相对值,以%(即相当于正常平均值的百分数)来表示,从10%~160%。

为避免所使用的平均值不一致,因此一般采用绝对值来表示。

(2)具体测定方法如下:①用滴管加5~6滴,0.1mol·L-1 HCl到刻度管内,(约加到管下方刻度”2”或多或10%处)。

②用微量采血管吸血至20 μl(方法同上述),仔细揩去吸管外的血液。

③将吸血管中的血液轻轻吹到比色管的底部,再吸上清液洗吸管3次。

操作时勿产生气泡,以免影响比色。

用细玻棒轻轻搅动,使血液与盐酸充分混合,静置10 min,使管内的盐酸和血红蛋白完全作用,形成棕色的高铁血红蛋白。

④把比色管插入标准比色箱两色柱中央的空格中。

⑤使无刻度的两面位于空格的前后方向,便于透光和比色。

用滴管向比色管内逐滴加入蒸馏水,并不断搅匀,边滴,边观察、边对着自然光进行比色,直到溶液的颜色与标准比色板的颜色一致为止。

⑥读出管内液体面所在的克数,即是每100 ml血中所含的血红蛋白的克数。

比色前,应将玻棒抽出来,其上面的液体应沥干净,读数应以溶液凹面最低处相一致的刻度为准。

换算成每升血液中含血红蛋白克数(g·L-1)。

[注意事项]1.取血前要做好充分的消毒。

2.血液要准确吸取20 μl,若有气泡或血液被吸入采血管的乳胶头中都应将吸管洗涤干净,重新吸血。

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本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!
产品说明书
注意事项: 1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管 底,避免开盖时试剂损失。 2. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。 3. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 4. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清 洗并彻底清除残留清洁剂。 5. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
细胞周期检测试剂盒
Annexin V-EGFP/PI 凋亡试剂盒 BB-4102
JC-1 线粒体膜电位试剂盒
MTT 细胞增殖及毒性检测试剂盒 BB-4201
Caspase 3 活性检测试剂盒
CCK-8 细胞增殖毒性检测试剂盒 BB-4202
Caspase 8 活性检测试剂盒
WST-1 细胞增殖毒性检测※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制: 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
产品更新: 贝博 TM 会更新或升级产品,以优化和增强其使用性能,产品说明书会进行相应 的版本更新。使用产品时,请参照试剂盒中随产品附带的印刷版说明书,不能 参照网上下载的说明书,可能是不同的版本。 需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
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● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液 体损失导致试剂量不够用。
● 本试剂盒主要用于检测溶血血清样本,亦可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液等中血红蛋白 含量。
贝博 TM BBcellProbeTM 血红蛋白检测试剂盒 ( Hemoglobin Colorimetric Assay Kit) 其检测原理是血红蛋白中亚铁血红素有类似过氧化物酶的作用,可在氧化剂的作用下催化显 色底物,在酸性条件下产物呈红色,吸收峰在 510nm,产物红色越深,说明 Hb 含量越高, 反之则越低,通过酶标仪测定 510nm 处吸光度,据此通过比色分析就可以计算出血清血红蛋 白含量水平。
使用安全: 使用时需要合适的实验室外套,一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如 果试剂不小心接触皮肤或眼睛,应立即用水冲洗。
质量控制: 贝博 TM 对每批产品进行严格测试以确保产品质量一致。
知识产权: 贝博 TM BBcellProbeTM 系列试剂盒及其使用方法包含专有技术。

为 0.008,测定管 OD 值为 0.170,则计算结果为:
血红蛋白浓度(mg/L)=126.03 X(测定管 OD 值—空白管 OD 值)+3.5041
相关产品:
= 126.03x(0.170-0.008)+3.5041 = 23.921 mg/L
产品
产品号
产品
Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 BB-4101
该试剂盒主要用于检测血浆、溶血血清等样本,也可用于检测细胞或组织的裂解液或匀 浆液等中血红蛋白含量。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材: 仪器 酶标仪/分光光度计 水浴锅或恒温箱 移液器
耗材 离心管 吸头
试剂 双蒸水
使用方法:
使用注意事项:


Caspase 9 活性检测试剂盒
MTS 细胞增殖与毒性检测试剂盒 BB-4204
Caspase 10 活性检测试剂盒
产品号 BB-4104 BB-4105 BB-4106 BB-4107 BB-4108 BB-4112


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BB-4123 BB-4137 BB-4132


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电话:021-33921235
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酶标板检测时可以采用 250ul 体系,加如 15ul 样品。
2、 充分混匀,37℃水浴 20 分钟。 3、 在 510nm 用双蒸水调零测定各管/孔 OD 值。
结果计算: 血红蛋白(mg/L)=126.03 X(测定管 OD 值—空白管 OD 值)+3.5041
计算举例: 取正常人不溶血血浆 0.15ml,测血红蛋白含量。按操作表操作,测得空白管 OD 值
试剂配制: 显色剂的配制:试剂 A:试剂 B:试剂 C=20:20:1,充分混匀,现用现配;
样本检测:
1、 按下表配制试剂:
体积(ul)
测定管/孔
空白管/孔
血清(浆)
75
双蒸水
75
显色剂
1250
1250
【注】:
以上以分光光度计检测为例,根据不同的检测仪器调整反应体系,等比例调整试剂用量即
可。
检测时最好能设置平行管/孔。
电话:021-33921235
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Hoechst33342/PI 双染试剂盒 DAPI 染色试剂盒 细胞存活率检测试剂盒
BB-4131 BB-4133 BB-4122
细胞凋亡形态学检测试剂盒 Rhodamine 123 染色试剂盒 AO/EB 双染试剂盒
技术支持: 产品技术问题可发邮件至 bestbio@ 咨询。 如果您有任何关于产品性能或者新应用和技术的建议,欢迎您随时联系我们。
产品简介: 血红蛋白(Hemoglobin,Hb 或 HGB)是高等生物体内负责运载氧的一种蛋白质,是能使血
液呈红色的蛋白。血红蛋白由四条链组成,两条α链和两条β链,每一条链有一个包含一个 铁原子的环状血红素。Hb 在氧含量高的区域,容易与氧结合;在氧含量低的区域,又容易 与氧分离。血红蛋白的这一特性,使红细胞具有运输氧的功能。
产品说明书
血红蛋白检测试剂盒
货号:BB-47413
V5.17
试剂盒储存条件: 2-8℃保存。
开盖后组份按要求条件保存。
试剂盒组成:
产品组成
BB-47413-1
组份编号
规格
100T
试剂 A
80ml
47413A
试剂 B
80ml
47413B
试剂 C
5ml
47413C
使用说明书
1
注:根据所使用的检测仪器不同采用不同的检测体系,每个试剂盒大约可以检测 100 个样品。
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