高效液相色谱法测定食品中农药残留量的新进展_陈静

情况，进行了农药残留分析的研究，提出了优化 法的回收率。Ｎｅｇｅｒｉ［１８］比较了用索氏提取法（ＳＯＸ）、加
ＳＰＭＥ 的系统方法。Ｍｅｓｔｒｅｓ 等［１１］发展并改进了 ＨＳ－ 速溶剂萃取（ＡＳＥ）和 ＭＥ ３ 种不同提取方法提取咖
ＳＰＭＥ 方法，可以同时分析酒类中的硫醇、硫醚和二 啡豆中百菌清杀菌剂。
试验数据可以看出利用超临界流体萃取技术进行提 率为 ６４％￣１０６％，相对标准偏差为 ５％￣１５％。Ｂｌａｓｃｏ［２１］
取其回收率有高有低，这可能与 ＳＦＥ 操作条件的选 将此技术和液相色谱分析结合测定蔬菜和水果中的
取有关，当然也有可能是跟被提取物质本身的性质 杀菌剂。Ｖａｌｅｎｚｕｅｌａ［２２］将此技术与 ＨＰＬＣ –ＵＶ 联用
超声波提取应用于食品中农药残留分析已有报 道。杜晓刚等［７］将超声提取技术用于检测茶叶中的农 药残留。实验表明：３ 个不同水平的标准添加， 其回 收率范围甲胺磷为 ７５．２％￣９５．３％、乐果为 ８６．７％￣ １１０．２％；相对标准偏差为 ４．８％和 ３．５％；检出限为 ０．０１ ｍｇ／ｋｇ 和 ０．０２ ｍｇ／ｋｇ。试验数据说明运用超声波 来提取食品中农药并结合相应色谱仪测定具有灵敏 度高和重现性好等特点。郑申西［８］比较了 ６ 种不同前 处理方法对提取、净化茶叶中有机氯农药的试验结 果， 超声波振荡 ０．５ ｈ 比机械振荡 ０．５ ｈ 样品的得率 明显要高，在同样的净化条件下，超声波振荡 １ ｈ 与 浸泡过液相比，两种方法所得的样品得率无明显差 别。说明运用超声波振荡可以大大缩短提取时间，提 高提取效率。梁祈［９］利用丙酮／正己混合溶剂超声波 法提取，双柱柱层析净化，高效液相色谱法测定药材 中的有机氯农药残留量。当添加水平为 ０．０７￣０．７× １０－６ 时，回收率为 ８１．７％￣９５．１％，相对标准偏差为
在食品中农药分析方面，超声波主要用于强化 提取过程［５］。超声波与媒质间的相互作用机制包括热 机制、机械机制和空化机制 ３ 种［６］，而在食品中农药 提取方面主要运用的是后两种机制。超声波的机械 机制使溶剂对细胞壁渗透力更大，强化细胞内外的 质量传输，破坏细胞壁使细胞内容物更容易释放；同 时空化机制产生的微冲流能有效打破界层，使扩散 速度增加，从而使萃取或浸出速度提高 ２￣１０ 倍［５］。
样品处理步骤少，故而在提取分析中越来越多地得 要研究其影响因素以及与其它萃取方法提取效果的
到运用。
比较。Ｐｙｌｙｐｉｗ［１７］用 ＭＡＥ 萃取 ５ 种农作物中的 ７ 种农
固相微萃取法应用于食品农药残留分析已有报 药残留，并讨论了微波萃取时间及温度因素对萃取
道。Ｂａｔｌｌｅ 等［１０］利用乙醇和水的混合物来模拟食品的 结果的影响，同时比较了 ＭＡＥ 萃取与传统萃取方
１ ＨＰＬＣ 测定食品中农药残留的样品预处理方法 研究进展
农药残留分析样品的预处理包括提取和净化［２］，提 取是将样品中的农药溶解分离出来的操作步骤。常 用的提取方法有浸渍—振荡法，索氏抽提法，超声波 提取法［３］。同时由于样品组成复杂，提取后往往还需 经过净化步骤以达到待测物与干扰杂质分离， 常用 的净化方法是柱层析法，其填料一般为弗里罗硅土、 氧化铝及活性炭［３］。经典的样品预处理方法如索氏 抽提法需进行反复多次操作，往往花费大量的时间， 同时造成大量使用有机溶剂对环境带来的污染。所 以近年来发展较快的是［４］超声波（Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ Ｅｘｔｒａｃ－ ｔｉｏｎ，ＵＳＥ）法 ，超 临 界 流 体 萃 取（Ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ Ｆｌｕｉｄ
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３．３％￣６．４％，检出限为 １．２×１０－１１￣５．３×１０－１０。
的农药品种，故 ＳＦＥ 法是一种具有发展前景的农残
１．２ 固相微萃取方法在食品农药残留分析中的应用 检测的新技术。
固 相 微 萃 取 （Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｍｉｃｒｏ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ， １．４ 微波辅助萃取法在食品农药残留分析中的应用
水果中多菌灵，２，４－ 二氯苯氧乙酸等农药进行检 测，以 ＣＯ２ 为流体，在 ３３ ｋＰａ、５０ ℃下萃取并结合 ＨＰＬＣ－ ＤＡＤ 法，其回收率为 ９０％￣９３％，２，４－ Ｄ 回收
ＭＳＰＤ）技术是将样品吸附在比表面达 ５００ ｍ２／ｇ 的 Ｃ８ 或 Ｃ１８ 键合相上，并利用极性不同的溶剂进行洗脱， 提取比较彻底。ＭＳＰＤ 所需样品量及溶剂剂量极少，
收稿日期：２００６－ ０４－ １１ 作者简介：陈静（１９８２－ ），女，重庆人，在读硕士，主要研究食品安全与
质量控制。
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ＳＦＥ），固相微萃取（Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｍｉｃｒｏ Ｅｘ－ ｔｒａｃｔｉｏｎ，ＳＰＭＥ），微波辅助萃取（Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ Ａｉｄｅｄ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ＭＡＥ），凝胶渗透色 谱 （Ｇｅｌ Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ，ＧＰＣ），基质固相分散 （Ｍａｔｒｉｘ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈｒａｓｅ Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ，ＭＳＰＤ） 等简单高效的样品预处理 方法。 １．１ 超声波萃取法在食品农药残留分析中的应用
限在 ０．１２～１．７ μｇ／Ｌ 之间，相对标准偏差在 ２．８％～ 理，不仅可用来分离和测定小分子物质，而且还可以
６．１％之间，回收率在 ９８．３％～１０２％之间，说明此法具 分析具有相同化学性质但分子体积不同的高分子同
有灵敏度高、准确度高等优点。
系物。
１．３ 超临界流体萃取法在食品农药残留分析中的
ＳＰＭＥ）是利用待测物在基体和萃取相间的非均向平
微 波 辅 助 萃 取 （Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ Ａｉｄｅｄ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，
衡，使待测组分扩散吸附到石英纤维表面的固定相 ＭＡＥ）是 １９８６ 年匈牙利学者 Ｇａｎｚｌｅｒ 等人通过利用
涂层，待吸附平衡后再与气相色谱或高效液相色谱 微波能强化溶剂萃取的效率，使固体或半固体试样
率为 ８５％￣９０％［１４］。Ｓｔｅｆａｎｉ［１５］根据不同的 ＳＦＥ 操作条 特别适合于单个和某一类化合物的分离。
件，通过掺入适量农药强化苹果基质，可同时检测出
Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ［２０］将此技术用于蔬菜和水果中 １３ 种
９２ 种农药残留，并得到较好的回收率和重现性。从 氨基甲酸酯类农药的液相色谱分析，所得平均回收
ＨＰＬＣ－ ＭＳ 联用技术的研究开始于 ２０ 世纪 ７０ 年代。与 ＧＣ－ ＭＳ 联用技术相比，ＨＰＬＣ － ＭＳ 联用经 历了更长时间的研究过程，直到 ２０ 世纪 ９０ 年代才 被广泛应用。ＨＰＬＣ 与 ＧＣ 相比具有应用范围广，对 样品处理要求较 ＧＣ 低等优点。通过 ＨＰＬＣ 与 ＭＳ 的 连用可以在定量测定农残含量的同时定性地分析出 食品中的农残组成，这有利于对在 ＨＰＬＣ 上峰值接 近而不易定性的物质进行定性，同时也可以对存在 的某些不明物质进行定性等。Ｖａｌｖｅｒｄｅ［２３］用 ＬＣ－ ＭＳ 分离测定样品中的四溴菊酯和溴氰菊酯残留，四溴 菊酯在气相色谱仪的进样口部分转化成溴氰菊酯， 因而无法用气相色谱法分析测定这两种物质。 Ｈｏｇｅｎｂｏｏｍ［２４］用大体积进样 ＬＣ－ ＭＳ 测定胡萝卜及土 豆中多种农药残留。Ｙｏｓｈｉｉ［２５］用 ＨＰＬＣ－ ＭＳ 确认农作 物中的 ｅｍａｎｍｅｃｔｉｎ 多种杀虫剂残留。Ｐｉｃｏ［２６］综述了 ＬＣ－ ＭＳ 在测定水果和蔬菜中农药残留的应用。 ２．２ ＨＰＬＣ－ ＵＶ 联用在食品农药残留分析中的应用
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高效液相色谱法测定食品中农药残留量的新进展
陈静
（西南大学食品科学学院，重庆 ４００７１６）
摘 要：高效液相色谱法测定食品中农药残留样品的预处理方法有超声波萃取法、固相微萃取法、超临界流体
萃取法、微波辅助萃取法、凝胶渗透色谱法、基质固相分散萃取法等。高效液相色谱法还可以和 ＭＳ、ＵＶ、ＮＭＲ 联用，
品中待测组分的萃取方法。它是通过升压、升温使流 测了 ５ 种 ＧＣ 无法检测的农药（杀虫隆、氟虫脲、四
体达到超临界状态，在该状态下萃取样品，再通过减 螨嗪、噻螨酮、除虫脲），方法灵敏度高、准确度及精
压、降温或吸附收集后分析。ＳＦＥ 是食பைடு நூலகம்农药残留分 密度好、数据线性范围宽（２￣４０ ｎｇ），能够很好地分离
来测定食品中的农药残留。
关键词：预处理；联用；农药残留；高效液相色谱
中图分类号：ＴＳ ２０７．５３
文献标识码：Ａ
文章编号：１００７－ ６３９５（２００６）０６－ ００８２－ ０４
农药是现代农业生产中不可缺少的生产资料， 由于其广泛应用大大提高了农作物的产量，但对生 态环境、人类生命安全也造成了威胁。尤其是近十几 年来，新型高效农药不断出现，所使用的农药品种正 在迅速地更新换代，使农药的环境影响及残留农药 的检测方法发生了新的变化［１］ 。特别是对于科技发 达的国家，随着气相、液相色谱技术及许多高灵敏 度、高选择性检测器应用技术的不断完善，农药残留 分析技术也得到很快发展，欧盟、日本等国家和地区 对农药残留检测的指标日益增多并且对农药残留限 量标准也逐渐降低，这就造成了我国农产品进入国 际市场的技术壁垒，所以提高我国的农产品农药残 留检测技术已成为一个亟待解决的问题。本文就食 品中农药残留分析的样品预处理方法研究进展，液 相色谱法研究的发展以及检测器技术的发展进行综 述，以期能为进一步的研究提供理论依据。
ＧＰＣ 是多农药残留分析中一种常用有效的提
应用
纯方法，由于具有自动化程度高、较好的净化效率以
超临界流体萃取（Ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ Ｆｌｕｉｄ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ， 及较好的回收率，被广泛用于纯化含类酯的复杂基
ＳＦＥ）是指利用处于超临界状态的流体为溶剂对样 体组分。Ｂａｌｉｎｏｖａ［１９］采用 ＧＰＣ 提纯步骤，用 ＨＰＬＣ 检
有关，但是应当看到的是在部分物质的农残提取中 检测，样品添加回收率在 ７４％￣８４％，相对标准偏差
用 ＳＦＥ 法能达到较高的回收率，并且提高了可检出 为 ２％￣４％。