测定猪肉中土霉素及金霉素残留的HPLC法建立

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HPLC法测定畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素的残留

HPLC法测定畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素的残留王鲁勤;蒋江云【期刊名称】《海峡药学》【年(卷),期】2007(019)009【摘要】目的通过确立流动相比例和回收率验证,建立一种高效液相色谱法同时测定畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留的分析方法.方法色谱柱SinoChromODS-BP C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈∶0.01mol·L-1磷酸二氢钠溶液(20∶80);流速:1.0ml·min-1;检测波长:355nm.结果土霉素、四环素在0.1～1 μg·mL-1之间线性良好,土霉素r=0.9999,四环素r=0.9974;金霉素在0.2～2 μg·mL-1之间线性良好,r=0.9985.采用标准加量法,外加混合标准溶液80～120 μL(土霉素、四环素标准加入量8～12 μg,金霉素标准加入量16～24 μg),回收率为85.0%～112.5%,RSD在4.7%以内.【总页数】2页(P60-61)【作者】王鲁勤;蒋江云【作者单位】福建省三明市药品检验所,三明,365000;福建省三明市药品检验所,三明,365000【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.高效液相色谱法测定鸡肉中土霉素、四环素、金霉素和强力霉素残留量的方法优化探讨 [J], 夏洁贞;区敏霞2.HPLC法测定牛羊肉中土霉素、四环素、金霉素残留量 [J], 高广慧;李阳;孙晓娟;王晓黎3.SPE-HPLC法检测早胜牛肉中土霉素、四环素和金霉素的残留 [J], 叶永丽;赫欣睿;高旭东;陈士恩;马忠仁4.高效液相色谱法测定畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量 [J], 叶英5.高效液相色谱法对畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素的残留检测研究 [J], 吕振娥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法对畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素的残留检测研究

恒温振荡 20 min，再超声 5 min，最后在 25 ℃、7 000 r/min
离心 5 min。重复 1 次后，合并上清液于鸡心瓶中，用旋转
蒸发器蒸发至近干，然后准确加入 2.00 mL 乙腈溶解后转移
到 2 mL 离心管中高速离心，上清液经过 0.45 μm 滤膜，滤
液供液相色谱测定，本方法色谱图见图 1。
（2）提取液。将磷酸盐缓冲液与乙腈按照 2 ∶ 1 的比例混合（pH=2.5）。
所有玻璃器皿包括样品瓶均用 10% 的硝酸浸泡（长时间较好），之后放置在马弗炉中于 250 ℃条件下烧 2 h。
表 1 目标抗生素结构式及主要性质
结构式
中英文简称
主要性质
OH O
OHOHO
O NH2
OH HO CH3 H N(CH3)2
1.4 质量控制
定性依据：相对于标样，保留时间差别在 2% 以内；定
量方法：外标法定量；方法检出限（MDLs）：将实际环境
样品不断稀释进样（S/N ≥ 3）。
作者简介：吕振娥（1987—），女，河南南阳人，硕士，农艺师。研究方向：农产品质量安全。
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四环素 TC
1. 四环素 pKa 约为 3.32，在有氧、光照、强酸碱条件下会降解产生多种代谢产物，一定条件下代谢产物会转化为母体。
2. 溶于甲醇且易溶于水
OH O
OHOHO
O NH2
OH HO CH3OHH N(CH3)2
土霉素 OTC
1. 土霉素母体易溶于甲醇， pKa 值为 3.22；
2. 土霉素很容易降解为差向土霉素，且差向土霉素对动物的

猪组织中的链霉素残留的微生物学检测方法

目录1 引言 (1)1.1 抗生素残留的危害 (1)1.1.1 引发过敏反应 (2)1.1.2 导致病源菌产生耐药性 (2)1.1.3 破坏微生态环境，造成正常菌群失调，导致二次感染.. 21.1.4 损害听力 (3)1.1.5 损害肾脏 (3)1.2 链霉素的应用 (3)1.3 链霉素的化学结构与理化性质 (4)1.3.1 链霉素的化学结构 (4)1.3.2 链霉素的理化性质 (4)1.3.3 链霉素的作用机理 (5)1.4 兽药残留分析技术研究进展 (5)1.5 兽药残留检测方法的国内外现状 (5)1.6 研究的目的和意义 (7)2 材料与方法 (7)2.1 材料 (7)2.1.1 仪器与试剂 (7)2.1.2 药品与试剂 (7)2.1.3 实验菌种 (8)2.2 方法 (8)2.2.1 溶液配制: (8)2.2.2 培养基的制备 (8)2.2.3 菌液的制备 (9)2.2.4 平板的制备 (9)2.2.5 标准曲线的制备 (9)2.2.6 回收率测定 (10)2.2.7 计算 (11)3 结果 (11)3.1 标准曲线的制备 (11)3.2 回收率的测定 (13)4 讨论与分析 (14)4.1 标准曲线 (14)4.2 回收率试验 (15)4.3 菌悬液 (14)4.4 去除蛋白质方法的选择 (15)4.4.1 加热 (15)4.4.2 紫外线照射 (16)4.4.3 调节pH值 (16)4.4.4 乙睛或乙醇 (16)4.4.5 氯仿 (16)5 小结 (16)6 待讨论问题 (17)参考文献 (18)致谢 (20)鸡肉组织中的链霉素残留的微生物学检测方法的研究1 引言20世纪70年代以来，抗生索、抗菌素、生长促进剂等兽药和药物添加剂等在畜牧业生产中的长期大量使用，造成了兽药成分在动物体内不同程度地残留，这些残留的药物通过动物性食品进入人体和生态系统，进而影响了人类和环境的健康，因此动物性食品中的药物残留量直接影响着动物性食品的安全卫生问题，已经成为当前供认的农业和环境问题[17]。

土霉素、金霉素和四环素的检测方法

土霉素、金霉素和四环素的检测方法1、分析目标化合物:土霉素,金霉素,四环素2、仪器设备:带荧光检测器的高效液相色谱仪,3、试剂:除下列试剂外,使用附录2所列试剂,咪唑:特级咪唑缓冲溶液:将68.08g咪唑、0.37g EDTA 和10.72g乙酸镁溶解在800mL水中,用乙酸调节pH7.2后,加水至1,000mL,含有乙二胺四乙酸的柠檬酸缓冲溶液:第1液:将21.0g柠檬酸溶解在水中至1,000mL,第2液:将71.6g磷酸氢二钠溶解在水中至1,000mL,在1.86g乙二胺四乙酸中加入307mL第1液和193mL第2液混合的溶液溶解,苯乙烯二乙烯苯共聚物小柱 (265mg):在内径8～9mm 聚乙烯管中填充265mg柱色谱用苯乙烯二乙烯苯共聚物或具有同等分离特性的物质,4、标准品:盐酸土霉素:本品1.000mg 含有土霉素0.850mg以上效价,分解点为190℃～194℃,盐酸金霉素:本品1.000mg含有盐酸金霉素0.900mg以上效价,分解点为210℃以上, 盐酸四环素:本品1.000mg 含有盐酸四环素0.900mg以上效力,分解点为214℃以上,5、试验溶液的制备:A．提取方法:①肌肉、肝脏和肾脏肌肉:尽可能除去脂肪层,搅碎混合均匀后,称取其5.00g,肝脏和肾脏:搅碎混合均匀后,称取其5.00g,加入30mL含有乙二胺四乙酸的柠檬酸缓冲溶液,搅拌1分钟后,以每分钟3000转离心分离10分钟,水层移入100mL分液漏斗中,离心分离管的残留物中加入20mL含有乙二胺四乙酸的柠檬酸缓冲溶液,用振荡器激烈振荡1分钟后,按上述同样条件离心分离,合并水层于上述分液漏斗中,加入20mL正己烷, 用振荡器激烈振荡5分钟后,以每分钟3000转离心分离10分钟,分取水层,②脂肪脂肪:尽可能除去肌肉层,搅碎混合均匀后,称取其20.0g,加入200mL正己烷,搅拌1分钟后,加入40mL含有乙二胺四乙酸的柠檬酸缓冲溶液,再搅拌1分钟后,以每分钟3000转离心分离10分钟,分取水层,正己烷层中加入20mL含有乙二胺四乙酸的柠檬酸缓冲溶液,用振荡器激烈振荡1分钟后,按上述同样条件离心分离,分取水层,合并于先分取的水层中,③奶称取5.00g样品,加入30mL含有乙二胺四乙酸的柠檬酸缓冲溶液和20mL正己烷,用振荡器激烈振荡5分钟后,以每分钟3000转离心分离10分钟,分取水层,④蛋除去蛋壳,充分均匀后,称取其5.00g,加入30mL含有乙二胺四乙酸的柠檬酸缓冲溶液,均匀后,加入100mL正己烷,搅拌1分钟后,以每分钟3000 转离心分离10分钟,水层移入100mL 分液漏斗中,离心管的残留物中加入20mL含有乙二胺四乙酸的柠檬酸缓冲溶液,用振荡器激烈振荡1分钟后,按上述同样条件离心分离,合并水层于分液漏斗中,加入20mL正己烷, 用振荡器振荡5分钟后,以每分钟3000转离心分离10分钟,分取水层,⑤鱼贝类有壳贝类:除去壳,搅碎混合均匀后,称取其5.00g,其它的鱼贝类:搅碎混合均匀后,称取其5.00g,加入30mL含有乙二胺四乙酸的柠檬酸缓冲溶液,搅拌1分钟后,以每分钟3000转离心分离10分钟,水层移入100mL分液漏斗中,离心管的残留物中加入20mL含有乙二胺四乙酸的柠檬酸缓冲溶液,用振荡器激烈振荡1分钟后,按上述同样条件离心分离,合并水层于分液漏斗中,加入20mL正己烷, 用振荡器激烈振荡5分钟后,以每分钟3000转离心分离10分钟,分取水层,B．净化方法:在苯乙烯二乙烯苯共聚物小柱（265mg）中,顺次注入 10mL甲醇、10mL水和5mL饱和EDTA 溶液,弃去流出液,柱中注入a提取方法所得的溶液后,注入10mL水,弃去流出液,注入10mL 甲醇,收集流出液于磨口减压浓缩器中,40℃以下除去甲醇,残留物中加入1.0mL 1.36％磷酸二氢钾溶液溶解,此为试验溶液,6、操作方法:A．定性试验按下列操作条件进行试验,试验结果必须与标准品的一致,操作条件:柱填充剂:十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒度5μm),柱:内径4.0～6.0mm,长150mm不锈钢管,柱温: 40℃检测器:激发波长380nm,发射波长520nm,流动相:土霉素和四环素试验时,用咪唑缓冲溶液:甲醇(17:3)的混合溶液,调整流速使土霉素约5分钟流出,金霉素试验时,用咪唑缓冲溶液:甲醇(3:1)的混合溶液,调整流速使金霉素约7分钟流出,B．定量试验根据与A定性试验相同操作条件所得的试验结果,峰高法或峰面积法定量,7、定量限:A．肌肉,肝脏,肾脏,奶,蛋和鱼贝类土霉素:0.02mg/kg金霉素:0.03mg/kg四环素:0.02mg/kgB．脂肪土霉素:0.005 mg/kg8、注意事项:(1)试验溶液的制备:①离心分离温度保持在室温,②抽滤后滤液混浊时,滤液再次进行离心分离,③在苯乙烯/二乙烯苯共聚物柱色谱中,注入试验溶液后,30mL水分数次加入效果较好地洗浄柱中残留的乙二胺四乙酸,(2)标准溶液的配制:①称取相当于10.0mg土霉素的标准品,溶解在甲醇中至10mL,作为土霉素的标准原液（土霉素1,000mg（效价）／L,1,000mg／L）,本标准原液保存在-20℃,1年内稳定,②称取相当于10.0mg金霉素的标准品,溶解在甲醇中至10mL,作为金霉素的标准原液（金霉素1,076mg（效价）／L,1,000mg／L）,本标准原液保存在-20℃,1年内稳定,③称取相当于10.0mg四环素的标准品,溶解在甲醇中至10mL,作为四环素的标准原液（四环素1,082mg（效力）／L,1,000mg／L）,本标准原液保存在-20℃,1年内稳定,④用1.36%磷酸二氢钾溶液将土霉素,金霉素和四环素各标准原液递减稀释,作为制作标准曲线用的标准溶液,(3)其它:①同时进行很多样品试验的筛选试验法提高判断効率时,用「土霉素,金霉素和四环素的筛选法（参照117 页）」判断为陽性的,不妨用本检测方法实施试验,②使用本检测方法检出土霉素,金霉素和四环素时,最好用带质量检测器的高效液相色谱仪确证.。

畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量测定方法

畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量测定方法1主题内容与适用范围本标准规定了畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的检测方法。

本标准适用于各种畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定。

最低检出浓度为:0.15，0.20，0.65mg/kg。

2原理样品经提取，微孔滤膜过滤后直接进样，用反相色谱分别，紫外检测器检测，与标准比较定量，出峰顺序为土霉素、四环素、金霉素。

标准加法定量。

3试剂3.1乙腈(分析纯)。

3.20.01mol/L磷酸二氢钠溶液:称取1.56g(±0.01g)磷酸二氢钠(NaH2PH4·2H2O)溶于蒸馏水中，定容到100mL，经微孔滤膜(0.45μm)过滤，备用。

3.3土霉素(OTC)标准溶液:称取土每素0.0100g(±0.0001g)，用0.1mol/L盐酸溶液每毫升含土霉素1mg。

3.4四环素(TC)标准溶液:称取四环素0.0100g(±0.001g)，用0.01mol/l盐酸溶液溶解并定容10.00mL，此溶液每毫升含四环素1mg。

3.5金霉素(CTC)标准溶液:称取金霉素0.0100g(±0.0001g)，溶于蒸馏水并定容成10.00mL，此溶液每毫升含金霉素1mg。

以上标准品均按1000单位/mg折算。

3.3～3.5溶液应于4℃以下保存，可使用1周。

3.6混合标准溶液:取3.3、3.4标准溶液各1.00mL，取3.5标准溶液2.00mL，置于10mL 容量瓶中，加蒸馏水至刻度。

此溶液每毫升含土霉素、四环素各0.1mg，金霉素0.2mg，临时现配。

3.75%高氯酸溶液。

4仪器4.1高效液相色谱仪(HPLC):具紫外检测器。

5色谱条件5.1柱:ODS-C18(45μm)6.2mm×15cm。

5.2检测波长:355nm。

5.3灵敏度:0.002AUFS。

5.4柱温:室温。

5.5流速:1.0mL/min。

5.6进样量:10μL。

几种常见抗生素的相关性质和检测方法

几种常见抗生素的相关性质和检测方法本页仅作为文档封面，使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March四环素四环素类抗生素是由放线菌产生的一类广谱抗生素及半合成抗生素，具有菲烷的基本骨架。

四环素类抗生素在赶早状态下比较稳定，但遇日光可变色。

在酸及碱性条件下都不够稳定，易发生水解。

四环素类药物主要有以下化学性质：1.酸性条件下不稳定：C-6羟基和C-5α上的氢正好处于反式构型易发生消除反应，生成无活性橙黄色脱水物。

在pH2～6条件下C-4位二甲氨基很易发生可逆反应的差向异构化。

医学|教育网搜集整理土霉素由于存在C-5羟基与C-4二甲氨基之间形成氢键，4位的差向异构化比四环素难。

而金霉素由于C-7氯原子的空间排斥作用，使4位异构化反应比四环素更容易发生。

2.碱性条件下不稳定：在碱性条件下生成具有内酯结构的异构体。

3.和金属离子的反应：在近中性条件下能与多种金属离子形成不溶性螯合物。

四环素化学结构本品为黄色结晶形粉末,无臭,空气中稳定,微溶于水,易溶于稀硫酸及氢氧化钠,略溶于乙醇,不溶于氯仿及乙醚,pH2以下溶液不稳定,碱性溶液中很快破坏。

土霉素子式C22H24N2O9,分子量。

又称地霉素、氧四环素。

是一种广谱抗菌素,黄色结晶性粉末,无嗅微苦。

有二个分子结晶水。

熔点181～182℃ (分解)。

微溶于水,溶于乙醇、丙酮和乙二醇,不溶于氯仿和乙醚。

在空气中稳定,遇强光颜色变深。

在碱性溶液中容易破坏失效。

化学结构金霉素子式C22H23ClN2O8，分子量。

又称氯四环素，是一种广谱抗菌素，金黄色结晶。

无臭味苦。

熔点168～169℃。

一般医药上用其盐酸盐。

熔点210℃（分解）。

微溶于水和乙醇，不溶于乙醚、丙酮和氯仿。

见光颜色变深。

在空气中和弱酸性溶液中较稳定，在碱性溶液中易分解。

化学结构强力霉素强力霉素是抗生素类药，四环素类药物，可以治疗衣原体支原体感染。

HPLC法测定牛羊肉中土霉素、四环素、金霉素残留量

２０１３年８月第３４卷第１６期ＤＯＩ：１０．３９６９０．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１３．１６．０２７
ＦｏｏｄＲｅｓｅａｒｃｈＡｎｄ１）ｅｖｅｌｏｐｍｅｌｉｔ
ＧＡＯＧｕａｎｇ－ｈｕｉ，ＬＩＹａｎｇ，ＳＵＮＸｉａｏ－ｊｕａｎ，ＷＡＮＧＸｉａｏ－ｌｉ
（１．ＬｉａｏｎｉｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００２３，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｈｅｎｙａＬＣ法测定牛羊肉中土霉素、四环素、金霉素残留量
高广慧，李阳，孙晓娟，王晓黎（１．辽宁省食品药品检验所，辽宁沈阳１１００２３；２．沈阳市产品质量监督检验食品所，辽宁沈阳１１００２３）
ＰｒｏｄｕｃｔＱｕａｌｉｔｙＳｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎａｎｄＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００２３，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＯｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ，ＴｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅａｎｄＣｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅＲｅｓｉｄｕｅｓｉｎＢｅｅｆａｎｄＭｕｔｔｏｎｂｙＨＰＬＣ

出口肉及肉制品中新霉素残留量检验方法

出口肉及肉制品中新霉素残留量检验方法1.适用范围本方法适用于出口猪肉中新霉素残留量的检验。

2.原理概要用磷酸盐缓冲液-乙腈提取试样中的新霉素，提取液经加热、冷却和过滤以除去蛋白质和脂肪。

在阳离子交换柱上与邻苯二甲醛进行衍生化，用四硼酸钾缓冲液-甲醇洗脱，洗脱液用带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。

3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂乙腈；甲醇：紫外光谱纯；三乙胺；磷酸(85%)；氯化钠；磷酸盐缓冲液：将33.46g磷酸氢二钾和1.046g磷酸二氢钾溶解在水中，并定容至1L；混合提取液：磷酸盐缓冲液-乙腈(1＋1)；硼酸钾缓冲液：将2.5g硼酸溶于80mL水中，用50%(m/V)氢氧化钾溶液调pH至10.5，用水定容至100mL；邻苯二甲醛试剂：将100mg邻苯二甲醛溶于1mL甲醇中，加入200μL 2-巯基乙醇和10mL硼酸钾缓冲液，用棕色瓶(有盖)贮存于冰箱中，一周内有效；碱性缓冲液：将76g四硼酸钾溶于400mL水中，用50%(m/V)氢氧化钾溶液调pH至11.0，用水定容至500mL；洗脱剂：碱性缓冲液-甲醇(1＋4)；阳离子交换树脂：D152；硫酸新霉素标准品：生化试剂，已知纯度，700 IU/mg以上(硫酸新霉素1mg ＝1000 IU)；硫酸新霉素标准溶液：称取适量的硫酸新霉素标准品(精确至0.1mg)，用水配成浓度为0.100mg/mL的标准储备溶液，根据需要再用水配成适当浓度的标准工作溶液；新霉素衍生物标准溶液：将适量的标准工作溶液注入到阳离子交换柱中，按5.2步骤进行衍生化反应，制成新霉素衍生物标准溶液。

3.2.仪器液相色谱仪：配有荧光检测器；高速捣碎机；振荡器；离心机；过滤漏斗：滤孔为80～120μm、40～80μm；阳离子交换柱：120mm×5mm(内径)玻璃柱。

用碱性缓冲液将阳离子交换树脂制成悬浮液，平衡2h，装入玻璃柱中，高度约为6cm，用5mL洗脱剂淋洗，流速为0.8mL/min，然后用水洗至流出液呈中性，备用。

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称取猪肉样品７，每份为５０（份．精确到± ０ｇ０１）．，分别加人土霉素、金霉素的工作液０、０ｇ２５、５０、１０、１０、２０５Ｌ含土霉素、四０５０、２０（环素各为０２５５０１．、１．、２．、２．、．、．、００５０００５０
能力。土霉素和金霉素是我国应用最广、应用时
间最长的动物保健性抗生素，曾经为我国的“ 菜篮
收稿日期：２１一ｌ一２００１ｌ
类和畜禽类疾病的治疗。随着土霉素、金霉素在畜
基金项目：黑龙江省青年基金项目（Ｃ８９）Ｑ０Ｃ６；黑龙江省教育厅科研项目（０３０５１５１０）作者简介：智若岚（９５）１８一，女，硕士研究生，研究方向为动物病理学。Ｅｍａ：ｕｌ２９＠１３ｃｍ — ｉｒｏａ５９６．ｏｌｎ通讯作者：张瑞莉，副教授，研究方向为动物病理学。Ｅｍｉｚａｇｕｌ９０ａｏ．ｏｃ－ａｌｈｎｒｉ１７＠ｙｈｏｃｍ．ｎ：ｉ
智若岚，刘中成，李广兴，张瑞莉
（１东北农业大学动物医学学院，哈尔滨．１０３；２哈尔滨市兽药饲料监察所，哈尔滨５００．１０４５００）
摘
要：文章建立了测定猪肉组织中土霉素及金霉素残留量的ＨＰＣ法。该方法按照国家检测标准采用了５Ｌ％
第４卷第９期２
２１年９０１月
东
北
农
业
大
学
学
报
４（）１１１４２９：４－４
Ｓｐ．０１ｅ２１
ＪｕｎｌｏｒｈａｔｒｃｌｒｌＵｎｖｒｉｏｒａｆＮｏｔｅｓｉｕｔａｉｅｓｔＡｇｕｙ
测定猪肉中土霉素及金霉素残留的ＨＬ法建立ＰＣ
简便、快速且灵敏度高，适用于土霉素、金霉素残留的定性定量分析。
关键词：高效液相色谱法；土霉素；金霉素；猪肉；残留检测中图分类号：￥２８８文献标志码：Ａ文章编号：１０ — ３９２１）９０４ — ４０５９６（００ — １１０１
病，兽药及化学药品被广泛地应用做饲料添加剂，以促进其生长速度，控制其生殖周期和繁育
子工程 ” 驾护航，但是这两种抗生素在动物性食保品中的残留不仅危害人体健康，而且更为严重的是动物性食品中残留较低浓度的土霉素、金霉素容易诱导各种致病菌产生耐药性，不利于两种药物对人
称取绞匀的猪肉样品５１ｇ．，置于５Ｌ锥形００ｍ烧瓶中，加入２５ｍＬ的５％高氯酸，在振荡器上震
荡１ｉ，移入离心管，３００ｒｍｉ离心ｌ０ｍｎ０・ｎ０
１材料与方法
１主要仪器．１
・
１２・４
东北
农
业
大
学
学报
第４卷２
牧养殖业的不断应用，其残留问题已经引起社会及有关部门的高度重视。因此，探究科学、快速的检测动物源性食品中土霉素和金霉素方法对人类健康
和畜牧业发展有着重要意义。本试验通过建立高效
检测波长：３５ｎ５ｍ，柱温：室温，流动相：乙腈＋
ｌｅｉｐｒ．ｃｏｄｇｔｅｎｔｎｌｅｅｔｅｓｎａｄ５ｐｒｈｒｃ５）ａｄｐｅｓｉｏｋＡｃｒｉｔａｉａｄｔｃｉｔｄｒ，％ｅｃｌｉａｉ０ｍＬｗｓａｏｔｄａｎｎｎｏｈｏｖａｏｃｄ（
ｔｒａｙＭｅｉｉｅｅｉｒｄｃｎ，ＮｏｔｅｓｒｕｔｒｌＵｎｖｒｉ，Ｈａｂｎ１０３，Ｃｈｎ；．ＨａｂｎＩｓｉｔｆｎｒａｔＡｇｉｌａｉｅｓｔｈｃｕｙｒｉ００５ｉａ２ｒｉｎｔｕｅｏｔ
ｄｅｃａｂｅｌｉｆｏｙｅｒｙｌｅａｈｏｒｔｔａｙｌｅｗｅｒ０ａｄ１ｇ・ｇ．Ｔｈｅｕｔｎｉａｅｅｔｔｌｉｔｏｘｔｔａｃｃｉｎｄｃｌｏｅｒｃｃｉｍｓｎｎｅ２ｎＰｋ一０ｅｒｓｌｉｄｃｔｄｓｔａｈｅｈｄｐｅｓｔｄｗａｆｃｎｅｅｃｈｔｔｅｍｔｏｒｅｎｅｓｏｏｖｎｉｎｅ，ｓｍｐｌｎｓ，ｑｕｃｎｓａｄｈｇｈｓｓｔｉ．Ａｎｈｉｅｅｓｉｋｅｓｎｉｅｎｉｖｔｉｙｄｔｅｍｅｈｄｗａｐｉａｂｅｔｐｏｆｑａｎｉｔｅａａｌｓｓｏｘｔｔａｙｌｅａｄｃｌｏｅｒｃｃｉｅｒｓｄｕ．ｔｏｓａｐｌｃｌｏｒｏｕｔａｉｎｙｉｆｙｅｒｃｃｉｎｈｏｒｔｔａｙｌｅｉｅｔｖｏｎｎ
０１ｏ・－．ｌＬｌ０ｍ磷酸二氢钠溶液（Ｈ２用３％硝酸调ｐ．５０
节３：５，进样量是１Ｌ５６）０。
１．样品处理及分析检测．２５
液相色谱方法，检测猪肉中土霉素和金霉素的残留
量，控动物源性食品中土霉素和金霉素药物残为监留提供安全可靠的方法依据。
ｍｎｉ，取上清液，重复两次，进行浓缩后过０４．５Ｉｘｍ的滤膜，取１进样，记录峰高，从标准曲Ｏ
线上查出含量。
１．标准工作曲线的测定．３５
１２泵高效液相色谱仪：紫外检测器２８、５５４７色谱工作站、自动进样器７７和柱温箱（国１美
Ｗａｒ公司）ｔｓｅ；电子天平（日本岛津公司）；高速离心机（海医用仪器分析厂）上；超声波清洗器（江苏省昆山市超声仪器有限公司）及抽滤器（天津恒奥特
科技发展有限公司）。１药物与标准品．２
ｓｍｐｅｅｔａｔａｃｔｉｉ０。ａｌｘｒｃ，ｅｏｎｔｌｒｅ＋０１ｍｏｌＬ’ｓｉ・ ’ ｏｄｕｍｈｄｏｎｐｈｓｈｔｄｉｙｒｇｅｏｐａｅａｓｍｏｂｌｈｓｄ３ｍｓｉｐａｅａｎ５５ｎａｅｄｔｃｉｎｗａｅｌｎｔＩｈｓｃｎｔ，ｈｅｕｌｓｏｗｅｄｔａｈｔｎｒｕｓａｎｅｓｃｃｎｒｔｆｅｅｔｖｅｇｈ．ｎｔｉｏｄｉｏｎｔｅｒｓｔｈｏｉｈｔｔｅｓａｄａｄｓｂｔｃｏｎｅｔａｉｏｏｎｏｙｅｒｃｃｉｅａｎｃｏｒｔｔａｙｉｅｉｅａｏｒｌｔｎｇｏｄｔｅｔｔ． — ．ｇ・ｍａｎ０．— ０ｘｔｔａｙｌｄｈｌｏｅｒｃｃｌｌｎｎｎｒｃｒｅａｉｏｏｘｅｎ０１１０Ｕｏｄ２２．ｇ・ｍｏｈｉｈｒａｏｒｈｃｃｌｎｔｓｃｏｍｔｇａｐｉｏｕｍｎｏｎｉｏｃｄｔｎ，ｏｙｅｒｃｃｉｅ：ｄｆｅｔｃｎｅｎｒｔｎｖａｇｉｘｔｔａｙｌｎｉｅｒｎｏｃｔａｉａｅｒｅｏ
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ＡｂｔａｔＴｓａｌｈａＬｔｏｏｅｅｍｉａｉｎｏｘｔｔｃｃｉｅａｄｃｌｒｔｔｃｃｓｒｃ：ｏｅｔｂｉｎＨＰＣｍｅｈｄｆｒｄｔｒｎｔｆｏｙｅｒｙｌｎｈｏｏｅｒｙ－ｓｏａｎａ
高氯酸５ＯｍＬ样品提取液；乙腈＋．１ｌＬ磷酸二氢钠溶液（３％硝酸调节ｐ２５＝５６流动相；检测波为Ｏ０・ｍｏ用０Ｈ．）３：５为
长为３５ｎ５ｍ，进行测定。在此色谱条件下，土霉素、金霉素标准品浓度在Ｏ１１ｇｍ～．２０Ｉ・－范围．．ｔ・Ｌ、Ｏ２．ｘｍＬ～０ｘ－ｇ内线性关系良好，在３不同浓度添加水平的回收率为７．％～７２％，变异系数为３２～．２个８０６８．１．％７７％，金霉素的回０收率为７．％～５６％，变异系数为３４％一．％。土霉素及金霉素的最低检测线为２和１ｇｋ～６４８．２５．６６３２００・ｇ。该检测方法
ｒｃｖｒｒｅｅｏｅｉｗｅｅｆｏｍ７．ｅｓ８０６％ｔ７．％．ａＲＳＤａ０２一．２．Ｃｈｌｒｔｒｙｌｅ：ｄｉｅｅｎｏ８２１ｎｄｗｓ３．％７７％ｏｏｅａｃｃｉｎｆｒｔ
ｃｃｔａｉｎａｅａｅｒｏｅｒｓｗａ４５８６ｏｎｅｎｒ－ｔｖｒｇｅｃｖｉｓ７６．％－５．２％ａｄｏｅｎＲＳＤｗａｓ３．６％－６３４．２％．Ｔｈｌｗｅｔｅｏｓ