110种培养基配方38页word
培养基配方
/experiment/plant2/159568.shtml11. Glucose Asparagine （葡萄糖、天门冬素琼脂）Glucose （葡萄糖）10g Asparagine （天门冬素）0.5gK2HPO4 0.5g Water （水）1000mlpH 7.2-7.4适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）12. Gause′s Synthetic Agar （高氏合成一号琼脂）KNO3 1g Soluble starch（可溶性淀粉）20gK2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5gNaCl 0.5g FeSO4 0.01gAgar （琼脂）20g water （水）1000mlpH 7.2-7.4适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）、白黄链霉菌、白色链霉菌、抗生链霉菌、双重轮丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊链霉菌、红霉素链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、浅灰链霉菌、灰色链霉菌、吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、黄色长孢链霉菌、藤黄色链霉菌、细黄链霉菌、黑化链霉菌、玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌13. Wort Agar （麦芽汁琼脂）Dilute the world (without hop) to 12 Brix. Add 15g agar into 1000ml of the diluted word..Melt the agar by heating, then distribute the medium into tubes. Autoclave at 110 for 30 minutes. (将发酵啤酒的原料（未加酒花），稀释至12柏林，加琼脂15克，溶化后分装。
15磅灭菌30分钟。
)适用范围：克鲁斯假丝酵母、郎比可假丝酵母、解脂假丝酵母、马其顿假丝酵母、拟热带假丝酵母、粗壮假丝酵母、皱褶假丝酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、果香地霉、地霉属、异常汉逊酵母、异常汉逊酵母变种、阿拉伯糖醇汉逊酵母、施氏汉逊酵母、菅囊酵母、伯顿毕赤酵母、膜醭毕赤酵母、粘红酵母、小红酵母、胶红酵母、深红酵母、卡尔斯伯酵母、酿酒酵母、椰园酿酒酵母、发酵性酵母、洛格酵母、罗斯酵母、鲁氏酵母多形鲁氏酵母、威尔酵母、酵母、路德类酵母、栗酒裂殖酵母、掷抱酵母、贝雷丝孢酵母、皮状丝孢酵母、糙孢曲霉、无壳曲霉、鲜橙曲霉、红曲霉、紫红曲霉、红色红曲霉、红曲霉菌14. Potato Dextrose Agar PDA (马铃薯、葡萄糖琼脂)Potato extract (马铃薯汁) 1000ml Dextrose(glucose) (葡萄糖) 20gAgar (琼脂) 20g[Note]: Potato extract: Slice potatoes thin. Add 1000ml of water, immediately to prevent Oxidtion of juice and boil until soft. (approximately 30min.). Filter through cotton-cloth. Autoclave at 115℃for 20 minutes.（注：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000毫升煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克，溶化后分装，15磅灭菌30分钟。
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文以下是一些常见的培养基配方：1.LB培养基配方：-水：1000mL-蛋白胨：10g-酵母提取物：5g-NaCl：10g*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.0。
加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
2.TSB培养基配方：-水：1000mL-蛋白胨：17g-酵母提取物：3g-葡萄糖：2.5g-NaCl：5g*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.0。
加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
3.M9盐基培养基配方：-水：1000mL-Na2HPO4：6g-KH2PO4：3g-NaCl：0.5g-NH4Cl：1g*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.0。
加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
4. MacConkey琼脂培养基配方：-水：1000mL-蛋白胨：17g-胆盐混合物：1.5g-红薯提取物：10g-中性红：0.03g-结晶紫：0.001g-蔗糖：10g-氯化钠：5g*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.1、加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
5. Sabouraud琼脂培养基配方：-水：1000mL-葡萄糖：40g-氯化钠：5g-氯化钾：1g-磷酸二氢钾：1g-氯化镁：0.5g-氯化钙：0.01g-硫酸亚铁：0.5g-红曲霉素：0.05g*将以上成分溶解在水中，并调节pH至5.6、加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
以上是一些常见的培养基配方，不同的微生物或细胞需要不同的培养基来提供适合它们生长和繁殖的营养条件。
因此，在实际使用时，需要根据具体需求和文献资料进行配方的选择和调整。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总培养基是微生物学研究和实验室工作中常用的一种培养微生物的基础环境，其主要组成包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
下面是一些常用的培养基配方汇总。
1.琼脂培养基琼脂培养基是最常用的固体培养基之一，其主要成分为琼脂、蔗糖、牛肉膏粉和无机盐。
其配方如下：-琼脂：15g-蔗糖：10g-牛肉膏粉：3g-磷酸二氢钾：1g-氯化钠：5g-氯化镁：0.5g-氯化钾：0.2g-高锰酸钾：0.0001g-蛋白胨：3g-酵母提取物：3g- 菜子油：0.5ml- 蒸馏水：1000ml2.肉汤培养基肉汤培养基是一种常用的液体培养基，其主要成分为牛肉膏粉和蛋白胨。
其配方如下：-牛肉膏粉：3g-蛋白胨：5g-葡萄糖：2g-氯化钠：5g-磷酸二氢钾：2g-氯化镁：0.5g- 蒸馏水：1000ml3.紫砂培养基紫砂培养基是一种用于真菌培养的培养基，其主要成分为紫砂和蔗糖。
其配方如下：-紫砂：15g-蔗糖：30g-蛋白胨：2g-磷酸二氢钾：1g-氯化钠：5g-氯化钙：0.1g4.麦芽培养基麦芽培养基是一种用于酵母和酵母菌类培养的培养基，其主要成分为麦芽粉和蔗糖。
其配方如下：-麦芽粉：10g-蔗糖：30g-蛋白胨：5g-氯化钠：5g-氯化钙：0.1g- 蒸馏水：1000ml5.铁蛋白培养基铁蛋白培养基是一种用于菌类和细菌培养的培养基，其主要成分为铁蛋白和蔗糖。
其配方如下：-铁蛋白：10g-蔗糖：10g-蛋白胨：2g-氯化钠：5g-磷酸二氢钾：1g-氯化钙：0.1g这些常用的培养基配方可根据实验需要进行适当调整和改良，以提高微生物的生长和培养效果。
同时，在制备培养基的过程中要注意消毒和无菌操作，以避免试验的污染和杂质的干扰。
最新110种培养基配方
110种培养基配方110种培养基配方THE COMPOSITION OF MEDIA培养基及成分1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10gCaCO3 20g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added .It is favorable to promote spore formation .适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O 0.1ｇＮa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5gMannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15gAdjust (调) pH to 7.2适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1gGlucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。
常用培养基配方
乳酸杆菌培养基（MRS）蛋白胨10.0 g牛肉膏10.0 g酵母膏 5.0 g柠檬酸氢二铵[（NH4）2HC6H5O7] 2.0 g葡萄糖(C6H12O6·H2O) 20.0 g吐温80 1.0 mL乙酸钠（CH3COONa·3H2O） 5.0 g磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O） 2.0 g硫酸镁（MgSO4·7H2O）0.50g硫酸锰（MnSO4·H2O）0.25 g琼脂15.0 g蒸馏水 1 000 mLpH 6.2~6.6 (115°20min灭菌)脱脂奶粉培养基配方：1.牛肉膏1g，蛋白胨2g，NaCl 1g，脱脂奶粉10-12%，琼脂2%，水200ml，pH 7.0～7.2 115度灭15min 110度15min 108度15min2.培养基分开灭菌.即牛肉膏0.5g，蛋白胨1g，NaCl 0.5g，，琼脂2%，水100ml，pH 7.0～7.2 121度20min脱脂奶粉3g 115度20min酵母菌培养基(复壮)马铃薯200克自来水 1000毫升煮20min 过滤除渣葡萄糖 20克琼脂 20克补足至1000ml水自然PH（培养）YPD :1 溶解10g酵母膏, 20g蛋白胨于900ml水中，如制平板加入20g琼脂粉2 高压121度20min3 加入100ml 20g葡萄糖（葡糖糖溶液灭菌后加入）酵母菌种扩大培养步骤：1.恢复培养。
将深冻菌种在水浴中溶解，用接种环接种到斜面或者平皿，30℃下培养2-3d，这个步骤也可称为“复壮”。
2.从斜面或者平皿中挑取菌种，接到10mlYPD培养基中，30℃，180r/min 转速下恒温摇瓶24小时。
3.以1:100比例，将种子液接到YPD培养基中，以实施扩大培养。
枯草芽孢杆菌培养基（牛肉膏蛋白胨）1L蒸馏水20g葡萄糖15g蛋白胨5g氯化钠0.5g牛肉膏20g琼脂LB培养基的配方如下:胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L酵母提取物(Yeast extract) 5g/L氯化钠(NaCl) 10g/L另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4配制一升溶液，需要189mmoI FeSO4*6H2O；0.586mmoI EDTA*Na2 FeSO4*6H2O 189mmoI*L-1,EDTA*Na2 0.586mmoI*L-1然后用氨水把PH调到7.4，即可。
常用培养基配方
十七常用培养基配方17.1 营养琼脂培养基成分蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15~20g蒸馏水1000mL制法：将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2ML，校正PH7.2—7.4，加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。
分装在三角锥瓶中，在121℃下高压灭菌15分钟。
17.2 乳糖胆盐发酵管培养基（单料）成分蛋白胨20g猪胆盐5g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mlPH7.4制法将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正PH值，加入指示剂分装，每支管10ml，并放入一个小倒管（产气管），在115℃下高压灭菌15分钟。
注：双料乳糖胆盐发酵管培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。
17.3 乳糖发酵管培养基（单料）成分蛋白胨20g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25ml蒸馏水1000mlPH7.4制法将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正PH，加入指示剂分装，每支管3ml，并放入一个小倒管（产生气），在115℃下高压灭菌15分钟。
注：双料乳糖发酵管培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。
17.4 伊红美琼脂（EMB）培养基成分蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂2g2%伊红溶液20ml0.65%美兰溶液10 ml蒸馏水1000mlPH7.1制法将蛋白胨，磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于三角锥瓶内，在121℃下高压灭菌15分钟后备用。
临用时加入乳糖并加热熔化琼脂，冷却至50—60℃，加入伊红和美蓝溶液摇匀，浇注平板。
17.5 远藤氏培养基配方：蛋白栋10.0g乳糖10.0g磷酸氯二钾 3.5g亚硫酸氢钠 2.5g碱性品红0.4g琼脂10.0g蒸馏水100ml制备：配料放入蒸馏水中，搅拌15分钟，使其溶解，分装到三角瓶或试管，121℃灭菌20分钟，冷却后贮于暗处，最佳温度为4—8℃以保持浅粉红色。
17.6 UBA培养基酵母浸膏 6.1g蛋白胨15g番茄汁（244ml）12.2g葡萄糖16gK2HPO4 0.31gKH2PO4 03.1gMgSO·7H2O 0.12gNaCl 0.006gFeSO4·7H2O 0.006gMnSO4·H2O 0.006g琼脂12g蒸馏水750ml啤酒250g将上述配料加入水中，加热至沸，搅拌至完全溶解，趁热加入未脱气的啤酒，轻轻搅拌混合，用HCI 或NaOH调pH为6.0+0.1，分装于三角瓶中，，121℃蒸汽灭菌20min。
70种常用培养基配方大全
70种常用培养基配方大全
1、大肠杆菌培养基：
（1）Luria-Bertani（LB）培养基：10.0 g/L 碳源：肉汤粉；营养素：1.0 g/L 磷酸钠，0.5 g/L 硫酸钾，0.5 g/L 硫酸铵，15.0 g/L 缓
冲剂：Tris-HCl；pH值：7.0；抑制性气体：无。
（2）分离培养基：10.0 g/L 碳源：肉汤粉；营养素：1.0 g/L 磷酸钠，0.1 g/L 硫酸钾，0.1 g/L 硫酸铵，1.5 g/L 葡萄糖，15.0 g/L 缓
冲剂：Tris-HCl；pH值：7.0；抑制性气体：无。
2、沙门菌培养基：
（1）LB培养基：10.0 g/L 碳源：肉汤粉；营养素：1.0 g/L 磷酸钠，0.5 g/L 硫酸钾，0.5 g/L 硫酸铵，1.5 g/L 葡萄糖，15.0 g/L 缓
冲剂：Tris-HCl；pH值：7.0；抑制性气体：N2/CO2（9:1）。
（2）选择性培养基：10.0 g/L 碳源：肉汤粉；营养素：1.0 g/L 磷
酸钠，0.5 g/L 硫酸钾，0.1 g/L 硫酸铵，15.0 g/L 缓冲剂：Tris-HCl；pH值：7.0；抑制性气体：N2/CO2（9:1）；其他：抗生素：10 μg/ml抗
菌素。
3、链球菌培养基：
（1）Loffler-Kennedy培养基： 10.0 g/L 碳源：肉汤粉；营养素：1.0 g/L 磷酸钠，0.2 g/L 硫酸钾，0.2 g/L 硫酸铵。
常用微生物培养基配方大全
常用培养基配方01 糖发酵管成分:牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:1葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌1 5min.2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.另将各种糖类分别配好1 0%溶液,同时高压灭菌.将5mL糖溶液加入于100mL培养基内,以无菌操作分装小试管.注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌.试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2～3d.迟缓反应需观察14～30d.02 ONPG培养基成分:邻硝基酚β-D-半乳糖昔(ONPG) 60mg(O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10mL1%蛋白胨水(PH7.5) 30mL制法:将ONPG溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以过滤法除菌,分装于10mm×75mm试管,每管0.5mL,用橡皮塞塞紧.试验方法:自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种,于36±1℃培养1～3h和24h观察结果.如果β-半乳糖苷酶产生,则于1～3h变黄色,如无此酶则24h不变色.03 西蒙氏柠檬酸盐培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化.然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:挑取少量琼脂培养物接种,于36±1℃培养4d,每天观察结果.阳性者斜面上有菌落生长,培养基从绿色转为蓝色.04 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾5g多胨7g葡萄糖5g蒸馏水1000mLpH7.0制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL,121℃高压灭菌15min.甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2～5d,哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养.滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果.鲜红色为阳性,黄色为阴性.甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20mL蒸馏水.V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2～4d.哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养.加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL,充分振摇试管,观察结果.阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察.05克氏柠檬酸盐培养基成分:柠檬酸钠3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g单盐酸半胱氨酸0.1g磷酸二氢钾1g氯化钠5g0.2%酚红溶液6mL琼脂15g蒸馏水1000mL制法:加热溶解,分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:用琼脂培养物接种整个斜面,在36±1℃培养7d,每天观察结果.阳性者培养基变为红色.06 丙二酸钠培养基成分:酵母浸膏1g硫酸铵2g磷酸氢二钾0.6g磷酸二氢钾0.4g氯化钠2g丙二酸钠3g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH6.8制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水,校正pH后再加入指示剂,分装试管,121℃高压灭菌15min.试验方法:用新鲜的琼脂培养物接种,于36±1℃培养48h,观察结果.阳性者由绿色变为蓝色.07 葡葡糖铵培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类和糖溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化,然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min,放成斜面.试验方法:用接种针轻轻触及培养物的表面,在盐水管内做成极稀的悬液,肉眼观察不见混浊,以每一接种环内含菌数在20～100之间为宜.将接种环灭菌后挑取菌液接种,同时再以同法接种普通斜面一支作为对照.于36±1℃培养24h.阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长;阴性者不生长,但在对照培养基上生长良好.如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果.注:容器使用前应用清洁液浸泡.再用清水,蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用.如果操作时不注意,有杂质污染时,易造成假阳性的结果.08 Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)成分:蛋白胨2g氯化钠5g磷酸氢二钾0.3g琼脂4g葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.2制法:将蛋白胨和盐类加水溶解后,校正pH至7.2.加入葡萄糖,琼脂煮沸,溶化琼脂,然后加入指示剂.混匀后,分装试管,121℃高压灭菌15min,直立凝固备用.试验方法:从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种,同时接种两支培养基,其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面,高度约1cm,于36±1℃培养.09 马尿酸钠培养基成分:马尿酸钠1g肉浸液100mL制法:将马尿酸钠溶解于肉浸液内,分装于小试管内,并于管壁画一横线.以标志管内液面高度,高压灭菌121℃20min.试剂:三氯化铁(FeCl3·6H2O)12g,溶于2%盐酸溶液100mL中即成.试验方法:用纯培养物接种,于42℃培养48h,观察培养液是否到达试管壁上记号处,如不足时,用蒸馏水补足至原量.经离心沉淀,吸取上清液0.8mL,加入三氯化铁试剂0.2mL,立即混合均匀,经10～15min,观察结果.结果:出现恒久之沉淀物为阳性.10营养明胶成分:蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏水1000mLpH6.8～7.0制法:加热溶解,校正至pH7.4～7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固.复查最终pH 应为6.8～7.0.试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在22～25℃培养,每天观察结果,记录液化时间.或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果.11苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏3gDI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g) 2g磷酸氢二钠1g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mL制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面.试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36±1℃培养4h或18～24h.滴加10%三氯化铁溶液2～3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色.12 氨基酸脱羧酶试验培养基成分:蛋白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸馏水1000mL1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mLL-氨基酸或DL-氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法:除氨基酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶100mL,分别加入各种氨基酸:赖氨酸,精氨酸和鸟氨酸.L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入.再行校正pH至6.8.对照培养基不加氨基酸.分装于灭菌的小试管内,每管0.5mL,上面滴加一层液体石蜡,115℃高压灭菌10min.试验方法:从琼脂斜面上挑取培养物接种,于36±1℃培养18～24h,观察结果.氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫色.阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色.对照管应为黄色.13蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨) 20g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min.靛基质试剂柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中.然后缓慢加入浓盐酸25mL.欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内.然后缓慢加入浓盐酸20mL.试验方法:挑取小量培养物接种,在36±1℃培养1～2d,必要时可培养4～5d.加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色.注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸.每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用.14 硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)成分:牛肉膏3g酵母浸膏3g蛋白胨10g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mLpH7.4制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固.试验方法:挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于36±1℃培养1～2d,观察结果.产硫化氢者使培养基变为黑色.注:肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基.15 尿素琼脂成分:蛋白胨1g氯化钠5g葡萄糖1g磷酸二氢钾2g0.4%酚红溶液3mL琼脂20g蒸馏水1000mL20%尿素溶液100mLpH7.2±0.1制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶.121℃高压灭菌15min.冷至50～55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液.尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用.试验方法:挑取琼脂培养物接种,在36±1℃培养24h,观察结果.尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色.16 氰化钾(KCN)培养基成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸二氢钾0.225g磷酸氢二钠 5.64g蒸馏水1000mL0.5%氰化钾溶液20mLpH7.6制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.放在冰箱内使其充分冷却.每100mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于12mm×100mm灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月.同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用.17 氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配制,干冰箱内避光保存.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取白色洁净滤纸沾取菌落.加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色,并逐渐加深;再加α-萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色.阴性于两分钟内不变色.以毛细吸管吸取试剂,直接滴加于菌落上,其显色反应与以上相同.18 硝酸盐培养基成分:硝酸钾0.2g蛋白5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:溶解,校正pH,分装试管,每管约5mL,121℃高压灭菌15min.硝酸盐还原试剂:甲液:将对氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.乙液:将甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.试验方法:接种后在36±1℃培养1～4d,加入甲液和乙液各一滴,观察结果.硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色.注:本试验阴性的原因有三:细菌不能还原硝酸盐;亚硝酸盐继续分解,生成氨和氮;培养基不适于细菌的生长.如欲检查培养基中硝酸盐是否未被分解,可再加入锌粉少许,可使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色.19 细胞色素氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取37℃(或低于37℃)培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2～3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上.结果:于2min内呈现蓝色者为阳性.阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应,2min以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果.20 过氧化氢酶试验试剂:3%过氧化氢溶液:临用时配制.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加3%过氧化氢溶液2mL,观察结果.结果:于半分钟内发生气泡者为阳性,不发生气泡者为阴性.21 过氧化物酶试验试剂:2%儿茶酚溶液.3%过氧化氢溶液.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1 mL.静置于室温(20℃)中30～60min,观察结果.结果:阳性反应,细菌变为黑褐色;阴性反应,细菌不变色.注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制.22 磷酸盐缓冲液储存液磷酸二氢钾34g1mol/L氢氧化钠溶液175mL蒸馏水825mLpH7.2制法:先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000mL. 稀释液:取储存液1.25mL,用蒸馏水稀释至1000mL.分装每瓶100mL或每管10mL,121℃高压灭菌15min.23明胶磷酸盐缓冲液成分:明胶2g磷酸氢二钠4g蒸馏水1000mLpH6.2制法:加热溶解,校正pH,121℃高压灭菌15min.24 乳酸-苯酚溶液成分:苯酚10g乳酸(比重1.21) 10g甘油20g蒸馏水10mL制法:将苯酚在水中加热溶解,然后加入乳酸及甘油.用途:检验真菌形态时用.25 肉浸液肉汤成分:绞碎牛肉500g氯化钠5g蛋白胨10g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000mL制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000mL,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量.加入蛋白胨,氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH7.4～7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30min.26肉浸液琼脂成分:肉浸液肉汤(PH7.4) 1000mL琼脂17～20g制法:加热溶化琼脂,分装烧瓶或试管,121℃高压灭菌30min.根据需要,倾注平板或放成斜面.27牛肉(或牛心)消化汤成分:绞碎牛肉(或牛心) 1000g15%氢氧化钠溶液27mL胰蛋白酶40mL三氯甲烷1mL氯化钠10g蒸馏水2000mL制法:1 称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15min.2 加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷至40℃.3 加胰蛋白酶,氯仿,在36±1℃放置4～5h,每小时摇动一二次.4 4h后,吸取上层液5mL于试管中,加5%硫酸铜溶液0.1mL,4%氢氧化钠溶液5mL,混合之.若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出.5 加入15%乙酸溶液45mL,对pH试纸呈酸性.6 煮沸15min,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜.7 次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸.8 校正pH7.4～7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL),加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需加蛋白胨.②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500mL,蒸馏水1500mL,混合之,装人玻塞瓶内.每日摇匀三次.3d后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用.28血消化汤成分:绞碎猪胃100g绞碎猪血块100g蒸馏水1000mL浓盐酸10mL制法:1 洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机绞碎.2 用绞肉机将猪血块绞碎.3 将蒸馏水加热至55℃,加入猪胃,猪血块和盐酸,置55℃水浴中24h,时常加以摇动.4 从水浴内取出,加入1moL/L碳酸钠溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱内一夜.5 吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至75℃,加入1mol/L碳酸钠溶液45mL,煮沸,校正pH7.2～7.4.6 用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.29豆粉琼脂成分:牛心消化汤(PH7.4～7.6) 1000mL琼脂20g黄豆粉浸液50mL制法:将琼脂加在牛心消化汤内,加热溶解,过滤.加入豌豆粉浸液,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g,氯化钠10g,加入蒸馏水100mL.置100℃水浴内加热1h,放于冰箱中过夜.吸取上清液即为豌豆浸液.30血琼脂成分:pH7.4～7.6豆粉琼脂100mL脱纤维羊血(或兔血) 5～10mL制法:加热溶化琼脂,冷至50℃,以灭菌手续加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板.亦可分装灭菌试管,置成斜面.亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂.31营养琼脂成分:蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15～20g蒸馏水1000mL制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2～7.4.加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化.分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面.如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%.32营养肉汤成分:蛋白陈10g牛肉膏3g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225mL,121℃高压灭菌15min.33 乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨20g猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g乳糖10g0.04%滇甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.34乳糖发酵管成分:蛋白胨20g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL,10mL或3mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:①双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.②30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3mL乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用.35 EC肉汤成分:胰蛋白胨20g3号胆盐(或混合胆盐) 1.5g乳糖5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mL制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min,最终pH为6.9±0.2.36 缓冲蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 9g磷酸二氢钾 1.5g蒸馏水1000mLpH7.2制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min.临用时无菌分装每瓶225mL.注:本培养基供沙门氏菌前增菌用.37 氯化镁孔雀绿增菌液(MM)甲液胰蛋白胨5g氯化钠8g磷酸二氢钾 1.6g蒸馏水1000mL乙液氯化镁(化学纯) 40g蒸馏水100mL4.13.3 丙液0.4%孔雀绿水溶液.制法:分别按上述成分配好后,121℃高压灭菌15min备用.临用时取甲液90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以无菌操作混合即可.注:本培养基亦称Rappaport 10(R10)增菌液.38 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基多胨或眎胨5g胆盐1g碳酸钙10g硫代硫酸钠30g蒸馏水1000mL碘溶液碘6g碘化钾5g蒸馏水20mL制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL.分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀.121℃高压灭菌15min备用.临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL,0.1%煌绿溶液1mL.39 四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)基础液:蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠3g碳酸钙45g蒸馏水1000mL将各成分加入于蒸馏水中,加热至约70℃溶解,校正pH至7.0±0.1,121℃高压灭菌20min.硫代硫酸钠溶液硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O) 50g蒸馏水加至100mL碘溶液碘片20g碘化钾25g蒸馏水加至100mL将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中,加入碘片,振摇玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸馏水至规定量.贮于棕色玻瓶内,紧塞瓶盖备用.煌绿水溶液煌绿0.5g蒸馏水100mL存放暗处,不少于1d,使其自然灭菌.牛胆盐溶液干燥的牛胆盐10g蒸馏水100mL煮沸溶解,121℃高压灭菌20min.制备:基础液900mL硫代硫酸钠溶液100mL碘液20mL煌绿溶液2mL牛胆盐溶液50mL临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入于基础液中,每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL.40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨5g乳糖4g亚硒酸氢钠4g磷酸氢二钠 5.5g磷酸二氢钾 4.58L-胱氨酸0.01g蒸馏水1000mL1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g(或DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成.制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中,加热煮沸,俟冷备用.另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合.再加入1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL,pH应为7.0±0.1.41 GN增菌液成分:胰蛋白胨20g葡萄糖1g甘露醇2g柠檬酸钠5g去氧胆酸钠0.5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.0制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶225mL,115℃高压灭菌15min.42 肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨1 10g葡萄糖5g牛胆盐20g磷酸氢二钠8g磷酸二氢钾2g煌绿0.015g蒸馏水1000mLpH7.2制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶30mL,115℃高压灭菌15min.43 亚硫酸铋琼脂(BS)成分:蛋白胨10g牛肉膏5g葡萄糖5g硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠4g煌绿0.025g柠檬酸铋铵2g亚硫酸钠6g琼脂18～20g蒸馏水1000mLpH7.5制法:1 将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中.2 将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解.3 将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃4 将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀.冷至50～55℃,倾注平皿. 注:此培养基不需高压灭菌.制备过程不宜过分加热.以免降低其选择性.应在临用前一天制备,贮存于室温暗处.超过48h不宜使用.44 DHL琼脂成分:蛋白胨20g牛肉膏3g乳糖10g去氧胆酸钠1g硫代硫酸钠 2.3g柠檬酸钠1g柠檬酸铁铵1g中性红0.03g琼脂18～20g蒸馏水1000mLpH7.3制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中,校正pH. 再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50～55℃,倾注平板.45 HE琼脂成分:脙胨12g牛肉膏3g乳糖12g蔗糖12g水杨素2g胆盐20g氯化钠5g琼脂18～20g蒸馏水1000mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mLAndrade指示剂20mL甲液20mL乙液20mLpH7.5制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL蒸馏水内,加热溶解.加入甲液和乙液于基础液内,校正pH.再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50～55℃,倾注平板.注:①此培养基不可高压灭菌.②甲液的配制硫代硫酸钠34g柠檬酸铁铵4g蒸馏水100mL②乙液的配制去氧胆酸钠10g蒸馏水100mL②Andrade指示剂酸性复红0.5g1mol/L氢氧化钠溶液16mL蒸馏水100mL将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液.数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1～2mL.46 SS琼脂牛肉膏5g眎胨5g三号胆盐 3.5g琼脂17g蒸馏水1000mL再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用.完全培养基:基础培养基100mL乳糖10g柠檬酸钠8.5g硫代硫酸钠8.5g10%柠檬酸铁溶液10mL1%中性红溶液2.5mL0.1%煌绿溶液0.33mL加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板.注:①制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用.②煌绿溶液配好后应在10d以内使用.③可以购用SS琼脂的干燥培养基.47 WS琼脂成分:②胨12g牛肉膏3g氯化钠5g乳糖12g蔗糖12g十二烷基硫酸钠2g琼脂15gAndrade指示剂20mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mL甲液20mL蒸馏水1000mLpH7.0制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正pH后加入指示剂和甲液,倾注平板应呈草绿色.注:①供沙门氏菌分离用.②Andrade指示剂和甲液的配制均见HE琼脂.48 麦康凯琼脂成分:蛋白胨17g眎胨3g猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g琼脂17g蒸馏水1000mL乳糖10g0.01%结晶紫水溶液10mL0.5%中性红水溶液5mL制法:1 将蛋白胨,眎,胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中,校正pH7.2.将琼脂加入600mL加热溶解.将两液合并,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.2 临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至50～55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板.注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌.49 伊红美蓝琼脂(EMB)成分:蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂17g2%伊红Y溶液20mL0.65%美蓝溶液10mL蒸馏水1000mLpH7.1制法:将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50～55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板.50三糖铁琼脂(TSI)成分:蛋白胨20g牛肉膏5g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁铵〔Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O〕0.2g硫代硫酸钠0.2g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min.放置高层斜面备用.51 三糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨15g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用.52 克氏双糖铁琼脂(KI)上层培养基成分血消化汤(pH7.6) 500mL琼脂 6.5g硫代硫酸钠0.1g硫酸亚铁铵0.1g乳糖5g0.2%酚红溶液5mL下层培养基成分血消化汤(pH7.6) 500mL琼脂2g葡萄糖1g0.2%酚红溶液5mL制法:1 取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别加入琼脂,加热溶解.2 分别加入其他各种成分.将上层培养基分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌12mm×100mm试管内,每管约2mL.115℃高压灭菌10min.3 将上层培养基放在56℃水浴箱内保温;将下层培养基直立放在室温内,使其凝固.4 当下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约1.5mL,放成斜面.53 克氏双糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨20g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g葡萄糖1g氯化钠5g柠檬酸铁铵0.5g硫代硫酸钠0.5g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层.121℃高压灭菌15min.放置高层斜面备用.54 葡萄糖半固体发酵管成分:蛋白胨1g牛肉膏0.3g氯化钠0.5g1.6%溴甲酚紫酒精溶液0.1mL葡萄糖1g琼脂0.3g蒸馏水100mLpH7.4制法:将蛋白胨,牛肉膏和氯化钠加入于水中,校正pH后加入琼脂加热溶解,再加入指示剂和葡萄糖,分装小试管,灭菌121℃15 min.55 5%乳糖发酵管成分:蛋白胨0.2g氯化钠0.5g乳糖5g2%溴麝香草酚蓝水溶液1.2mL蒸馏水100mLpH7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH.将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌12 1℃15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内.注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d内发酵.56 CAYE培养基此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内,如无此培养基,亦可用Honda氏产毒肉汤.57 Honda氏产毒肉汤成分:水解酪蛋白20g酵母浸膏粉10g氯化钠 2.5g磷酸氢二钠15g。
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110种培养基配方THE COMPOSITION OF MEDIA培养基及成分1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10gCaCO3 20g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added .It is favorable to promote spore formation .适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O 0.1ｇＮa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15gAdjust (调) pH to 7.2适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1gGlucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。
15磅再次灭菌15小时。
)5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基 I )Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5gGlucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2gTomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5mlDistilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）、嗜热乳酸链球菌6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培养基Ⅱ)Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5gTween (吐温) 80 1g K2HPO4 2gNa-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2gMgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05gDistilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY （蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基）Peptone（蛋白胨） 10g Yeast extract （酵母膏） 5gGlucose （葡萄糖） 1g Distilled water （蒸馏水） 1L8. Glycerol Agar （甘油琼脂）Peptone （蛋白胨） 5g Beef extract （酵母膏） 3gGlycerol （甘油） 20g Top water （自来水） 1000mlAgar （琼脂） 15g pH 7.0-7.29. Rhizobium medium （根瘤菌培养基）AS 9Yeast eztract （酵母膏） 1g Soil eztract （土壤浸提液） 200ml Mannitol （甘露醇） 10g Agar （琼脂） 15gDistilled water （蒸馏水） 800ml pH 7.2[Note]：Soil extract：Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed.（土壤浸提液的制法：取土壤50克，加水200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加水补足到200毫升。
）适用范围：大豆根瘤菌（慢生型）、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、大豆根瘤菌（快生型）、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂)Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3gMannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) 1000ml11. Glucose Asparagine （葡萄糖、天门冬素琼脂）Glucose （葡萄糖） 10g Asparagine （天门冬素） 0.5gK2HPO4 0.5g Water （水） 1000mlpH 7.2-7.4适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）12. Gause′s Synthetic Agar （高氏合成一号琼脂）KNO3 1g Soluble starch（可溶性淀粉） 20gK2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5gNaCl 0.5g FeSO4 0.01gAgar （琼脂） 20g water （水） 1000mlpH 7.2-7.4适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）、白黄链霉菌、白色链霉菌、抗生链霉菌、双重轮丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊链霉菌、红霉素链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、浅灰链霉菌、灰色链霉菌、吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、黄色长孢链霉菌、藤黄色链霉菌、细黄链霉菌、黑化链霉菌、玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌13. Wort Agar （麦芽汁琼脂）Dilute the world (without hop) to 12 Brix. Add 15g agar into 1000ml of the diluted word..Melt the agar by heating, then distribute the medium into tubes. Autoclave at 110 for 30 minutes. (将发酵啤酒的原料（未加酒花），稀释至12柏林，加琼脂15克，溶化后分装。
15磅灭菌30分钟。
)适用范围：克鲁斯假丝酵母、郎比可假丝酵母、解脂假丝酵母、马其顿假丝酵母、拟热带假丝酵母、粗壮假丝酵母、皱褶假丝酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、果香地霉、地霉属、异常汉逊酵母、异常汉逊酵母变种、阿拉伯糖醇汉逊酵母、施氏汉逊酵母、菅囊酵母、伯顿毕赤酵母、膜醭毕赤酵母、粘红酵母、小红酵母、胶红酵母、深红酵母、卡尔斯伯酵母、酿酒酵母、椰园酿酒酵母、发酵性酵母、洛格酵母、罗斯酵母、鲁氏酵母多形鲁氏酵母、威尔酵母、酵母、路德类酵母、栗酒裂殖酵母、掷抱酵母、贝雷丝孢酵母、皮状丝孢酵母、糙孢曲霉、无壳曲霉、鲜橙曲霉、红曲霉、紫红曲霉、红色红曲霉、红曲霉菌14. Potato Dextrose Agar PDA (马铃薯、葡萄糖琼脂)Potato extract (马铃薯汁) 1000ml Dextrose(glucose) (葡萄糖) 20g Agar (琼脂) 20g[Note]: Potato extract: Slice potatoes thin. Add 1000ml of water, immediately to prevent Oxidtion of juice and boil until soft. (approximately 30min.). Filter through cotton-cloth. Autoclave at 115℃ for 20 minutes.（注：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000毫升煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克，溶化后分装，15磅灭菌30分钟。
）适用范围：酵米面假单胞菌（酵米面黄杆菌）、白色链霉菌、烬灰链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、灰色链霉菌、龟裂链霉菌、伞枝梨头霉、雅致放射毛霉、棒曲霉、米曲霉、出芽短梗霉、白僵霉、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛壳、长刺毛壳、橄榄包毛壳、反曲毛壳、琥珀毛壳、圆酵毛壳、束状刺盘孢、新月弯孢霉、奇异翅孢壳、地生翅孢壳、串珠镰孢、尖镰孢、盘长孢菌（鲁保一号）、银白杨盘长孢、玉蜀黍长蠕孢、深黄被孢霉、小被孢霉、多头被孢、拉曼被孢霉、葡萄色被孢霉、生香毛霉、卷枝毛霉、两型孢毛霉、直立毛霉、球孢毛霉、丝球毛霉、大毛霉、多型孢毛霉、总状毛霉、鲁氏毛霉、五通桥毛霉、黑球漆斑菌、露湿漆斑菌、玫烟色拟青霉、棉铃虫拟青霉、拟青霉、球形阜孢、白腐菌、少根根霉、华根霉、科恩根霉、戴尔根霉、日根霉、爪哇根霉、米根霉、点头根霉、绿穂霉、簇孢匍柄霉、雅致枝霉、康宁木霉、绿色木霉、黄萎轮枝孢、大丽花轮枝孢15. Czapek′s Agar（察氏琼脂）Sucrose （蔗糖） 30g NaNO3 3gMgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4.7H2O 0.01g K2HPO4 1gAgar (琼脂) 13g Distilled water (蒸馏水) 1000mlpH 7.2适用范围：红霉素链霉菌、洋葱曲霉、金头曲霉、泡盛曲霉、泡盛曲霉烟色变种、亮白曲霉、炭黑曲霉、鹿皮色曲霉、棒曲霉、无花果曲霉、黄柄曲霉、黄曲霉、烟曲霉、构巢曲霉、黑曲霉、赭曲霉、米曲霉、寄生曲霉、酱油曲霉、土曲霉、宇佐美曲霉、焦曲霉、杂色曲霉、温特曲霉、阿达青霉、产黄青霉、黄绿青霉、桔青霉、顶青霉、园弧青霉、绳状青霉、灰黄青霉、岛青霉、淡紫青霉、特异青霉、赭绿青霉、产紫青霉、娄地青霉、小刺青霉、荨麻青霉、16. Concentrated Sucrose Czapek′s (浓糖察氏琼脂)Sucrose (蔗糖) 200g NaNO3 3gMgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4.4H2O 0.01g K2HPO4 1gAgar (琼脂) 13g Distilled water (蒸馏水) 1000ml适用范围：谢瓦曲霉17. Synthetic Potato Medium (综合马铃薯培养基)20%Potato extract (马铃薯汁) 1L Glucose (葡萄糖) 20gKH2PO4 3g MgSO4.7H2O 1.5gVitanib B1 (硫胺素) Trace (微量) Agar (琼脂) 15gpH 6适用范围：米曲霉、酱油曲霉、栖土曲霉、宇佐美曲霉、出芽短梗霉、白僵霉、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛客、长刺毛壳、球毛壳、橄榄包毛壳、反曲毛壳、琥珀毛壳、圆酵毛壳、多主枝孢、束状刺盘孢、葫芦科刺盘孢、新月弯孢霉、奇异翅孢壳、地生翅孢壳、串珠镰孢、蚀脉镰孢霉、盘长孢菌（鲁保一号）、银白杨盘长孢、瓶毛壳、金龟子绿僵菌、生香毛霉、卷枝毛霉、两型孢毛霉、直立毛霉、球孢毛霉、丝球毛霉、大毛霉、多型孢毛霉、总状毛霉、鲁氏毛霉、五通桥毛霉、黑球漆斑菌、露湿漆斑菌、玫烟色拟青霉、棉铃虫拟青霉、淡紫色拟青霉、拟青霉、白腐菌、少根根霉、根霉属的菌、华根霉、科恩根霉、戴尔根霉、台湾根霉、日根霉、爪哇根霉、黑根霉、雪白根霉、少根根霉、米根霉、点头根霉、三宝垄根霉、根霉属的种、绿穂霉、康宁木霉、木素木霉、拟康氏木霉、木霉、粉红木霉、绿色木霉、黄萎轮枝孢、大丽花轮枝孢、双孢蘑菇、大肥菇、发光假蜜环菌、木耳、皱木耳、毛木耳、大秃马勃、长根菇、金针菇、棘托竹荪、短裙竹荪、短裙竹荪东北变种（暂定）、长裙竹荪、白鬼笔、无裙竹荪、宽鳞大孔菌、凸圆灵芝（白芝）、紫芝、灵芝（红芝，赤芝，日灵芝，韩国灵芝）、灰树花、猴头菌、香菇、粗毛斗菇、洁丽香菇、豹皮菇、玉蕈、真姬菇、安络小皮伞菌、鬼毛针、黑柄皮伞菌、尖顶羊肚菌、圆锥羊肚菌、高羊肚菌、黑脉羊肚菌、羊肚菌、滑菇、光帽黄伞、尖鳞黄伞、金顶側耳、榆黄磨、金顶磨、白黄側耳、紫孢平菇、姬菇、裂皮側耳、拟囊体側耳（鲍鱼菇）、真线側耳短孢变种、真线側耳、扇形平菇、扁形平菇、佛罗里达无孢子側耳、佛罗里达側耳、蚝菇、糙皮側耳、平菇、贝形側耳、鹰翅菌、肺形側耳、柳树菌、树窝、扁柄側耳、美味側耳、紫孢側耳、粉褶側耳、粉红側耳、凤尾菇、漏斗状側耳、榆干側耳、大榆磨、側耳、茯苓、黑菇、烟色红菇、裂褶菌、鸡纵、金耳、黄木耳、银耳、白木耳、紫晶口磨、银丝菇、丝盖小包脚菇、草菇18. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Mix corn meal with water [20:100(W/V)] well . Distribute the mixtureinto 100ml bottles , each bottle contains about 30ml of the mixture . Autoclave at 121℃ for 30minutes . (20%玉米粉装瓶，15磅灭菌30分钟。