麦氏比浊法确定细菌浓度的原理和操作步骤
麦氏比浊管 悬液中细菌浓度估计
麦氏比浊管悬液中细菌浓度估计麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。
具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的，有表可查，这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同，且都有定值。
麦氏比浊管的配比如下：这是传统的麦氏比浊管的配制方法，目前也有市售的商品化产品，不需要自己配制，并且还有由乳胶粒子悬浮液制成的麦氏比浊管，与传统的麦氏比浊管相比，保存时间更长也更稳定。
但麦氏比浊管具体应该怎么使用呢？麦氏比浊管估计悬液中的细菌浓度具体操作方法1、轻摇标准试管。
2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径（大小）的无菌试管中。
3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水（NaCl），直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。
4、直接用眼睛看（需要经验，误差较大）。
5、找张白纸，打上平行直线，然后观察读数（如图示，利用光在不同浓度液体折射不同）。
例如，需配大约100cfu/mL 的细菌菌液浓度：1.无菌操作用接种环挑取测试细菌的纯培养物到盛有一定量无菌生理盐水管中，混悬。
2.以比色卡作为背景目测，直到浊度与0.5 麦氏比浊标准管的浊度相一致，如上图所示。
3.0.5 号麦氏浊度标准管相当于1×108CFU/mL 浓度，以此为参照值，取1mL 浊度跟0.5 号麦氏浊度标准管相一致的菌悬液到9mL 无菌生理盐水管中，作10 倍梯度稀释107、106、105……，102 稀释度含菌量大约为100cfu/mL。
注：1. 测试菌的纯培养物可以是冻干菌株复苏后纯培养物。
2.本法仅供细菌液浓度的粗略计算。
注意事项：1、如果测定的肉汤培养物不澄清，由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。
2、如果肉汤颜色很深，把未接种试管放在标准管的后面读数即可。
3、测定好的细菌，最好做一下梯度稀释涂布计数。
4、此种方法测定的准确性不是很高，如果是对细菌数量要求较精确的，请用紫外分光光度计。
麦氏比浊法
麦氏比浊法制作细菌悬液麦氏比浊管是McFarlaｎd发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。
具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,有表可查,这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。
麦氏比浊管的配比如下：(1.175%w/v BaCL2·2H2O)操作方法：1、轻摇标准试管。
2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。
３、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaＣl）,直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。
使用技巧:１、直接用眼睛看（需要经验，误差较大)。
2、找张白纸,打上平行直线，然后看(如图示，利用光在不同浓度液体折射不同)。
注意事项：1、如果测定的肉汤培养物不澄清，由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。
4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管（校正读数)。
２、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。
编者注:1、测定好的细菌，最好做一下梯度稀释涂布计数。
2、此浓度是对应的大肠杆菌的浓度,如果是其他细菌,会有一定的差别,但编者做过的几个菌差别都在一个数量级之内，适合于普通实验。
3、此种方法测定的准确性不是很高,如果是对细菌数量要求较精确的,请用紫外分光光度计＝＝============＝==在临床微生物学检验中，麦氏比浊法常用于细菌鉴定、药敏实验前配置菌液时大致判断菌液浓度的一种方法,通常认为,如将配菌液浓度配成0.5麦氏比浊管时，相当于1.5×108细菌数／ml，由于方法本身就是一种估计的方法,所以尽管不同细菌大小差异很大，除了真菌孢子,细菌的差别不大,结果不会有影响。
但是,标准比浊管的浓度，是药敏实验结果的影响因素之一。
K-Ｂ法药敏试验时接种物配制有两种方法，第一种是肉汤增菌法（对数生长法），是用接环挑取３-5个细菌菌落入肉汤增菌管中进行增菌4-6小时，然后用生理盐水或肉汤对增菌管中的培养物进行稀释校正使其浓度达到０.5麦氏比浊标准（因为经过增菌培养其培养物浓度一般都高于此标准）。
麦氏比浊管
麦氏比浊管【产品名称】通用名：麦氏比浊管英文名：McFarland Standard【包装规格】5支/盒【预期用途】麦氏比浊管的一系列不同的标准，用于评价菌液的浓度。
对于微生物学方法的标准化是非常必要的。
菌液浊度的判定依据原始麦氏比浊管的标号【检验原理】菌液浓度是通过与已知同一直径安瓿瓶中菌悬液浊度比较得到的。
【主要组成成分】6支直径17.5mm的麦氏标准管（0.5，1，2，3，4，5）标准成分：BaSO4 BaSO40.5号标准管 2.40 10-5 mol/l 3号标准管 1.44 10-4mol/l1号标准管 4.80 10-5 mol/l 4号标准管 1.92 10-4mol/l2号标准管 9.60 10-5 mol/l 5号标准管 2.40 10-4mol/l【储存条件及有效期】●安瓿瓶必须于2-30℃避光保存，有效期为6个月●不要打开麦氏标准安瓿：标准悬液实在原始、密封的安瓿内使用【检验方法】●取出选择的比浊管●用同一直径安瓿内制备菌悬液，混匀。
●充分混匀标准比浊管。
●立即在黑背景下比较出2个比浊管的浊度。
●如果必要，调整菌液浊度，混匀标准比浊管后重新比浊。
【检验结果的解释】等效标准比浊管细菌浓度（1）×106/ml 650nm 理论光密度（2）0.5 150 0.1251 300 0.252 600 0.503 900 0.754 1200 1.005 1500 1.251.细菌浓度取决于微生物大小。
效量代表细菌的平均有效值。
对于大分子量的酵母菌，细菌的数量大约除以30。
2.比浊管数值相当于菌液的光密度。
因为细菌大小和颗粒的不同，光的衍射不同，因此BaSO4没有同样的光密度。
【检验方法的局限性】不要用这些安瓿瓶管检测DENSIMAT【注意事项】●仅用于体外诊断●仅用于专业人员●使用前，检查安瓿是否完整。
基于麦氏比浊原理的细菌浊度分析仪校准方法探讨
万滔：基于表氏比浊原嫂的细菌浊歲分祈仪校准方法稼讨117基于麦氏比浊原理的细菌浊度分析仪校准方法探讨万滔(绵阳市计量测试所，四川绵阳625100)摘要:本文对基于麦氏比浊原理的细菌浊度分析仪进行了简要概述，探讨了该类仪器零点漂移、示值稳定性、重复性、示值误差的测量方法以及示值误差测量值的不确定度评定，并进行了实验验证，为该类仪器的校准和测试提供了合理方法，保证了仪器量值的准确性。
关键词:麦氏比浊原理;细菌浊度分析仪;示值稳定性;重复性;示值误差;不确定度评定中图分类号:TB9文献标识码:A国家标准学科分类代码:410.55DOI：10.15988/ki.1004-6941.2018.07.043Discussion on Calibration Metliod of Bacterial Turbidity AnalyzerBased on McFarland Turbidity PrincipleW a n T a oAbstract：T h is thesis gives a b rie f overview o f the ba cteria tu rb id ity analyzer based on the p rin c ip le o f M cF a tu r b id ity.T he m easurem ent m ethods o f zero d r if t,in d ic a tio n s ta b ility,r e p e a ta b ility,in d ic a tio n e rro r instrum ents are discussed.T he u n ce rta in ty o f in d ic a tio n e rro r o f m easurem ent results is assessed and ve rifie d by experim ents，w h ich provides a reasonable m ethod fo r the ca lib ra tio n and testing o f the in s tru m e n ts，and ensures theaccuracy o f the in stru m e n ts.Keywords:M cF arla nd tu rb id ity p r in c ip le;ba cteria tu rb id ity a n a lyze r;in d ic a tio n s ta b ility;re p e a ta b ility;in d ic a tio n e rro r；u n ce rta in ty assessment0引言麦氏比浊法（M c fa la n d)是一种简单而经典的 细菌浓度计算方法，其核心原理是细菌溶于水中会 造成与浓度相关的混浊度。
比浊法测定菌浓度的原理
比浊法测定菌浓度的原理比浊法是一种用于测定液体中菌量的有效方法，它经常被用于检测各种致病菌和乳酸菌的浓度。
比浊法的基本原理是利用菌产生的浊度来检测菌的数量，从而计算出菌的浓度。
比浊法的基本原理是，当添加细菌到液体中时，细菌将产生浊度，即颗粒性物质的浓度增加。
这将导致液体变得混浊，并且浊度与菌的数量成正比。
因此，可以通过测量液体的浊度，来推算出菌的数量。
比浊法的测定菌浓度的具体步骤如下：首先用液体中的细菌培养一定的时间，使细菌的数量及浊度达到一定的水平；其次，在灭菌的情况下，称取一定体积的液体；然后，根据液体的浊度，推算出菌的数量；最后，把结果乘以测试液体的体积，即可计算出菌浓度。
比浊法虽然简单，但是它的测定结果还是很可靠的。
它可以快速、准确、灵敏地检测出菌浓度，使得很多实验可以得到精确的测定结果。
比浊法能够快速检测各类致病菌和乳酸菌的浓度，为疾病的预防和控制提供了有效的技术手段。
比浊法的基本原理就是利用细菌产生的浊度来检测菌的数量，从而计算出菌的浓度。
比浊法可以快速、准确、灵敏地检测出菌浓度，使得很多实验可以得到精确的测定结果。
然而，比浊法有时也可能出现误差，比如细菌的浊度变化太小，以致计算出的浓度偏低，这时就需要借助其他方法进行检测，以保证检测结果的准确性。
综上所述，比浊法是一种用于测定液体中菌量的有效方法，它基本原理是利用细菌产生的浊度来检测菌的数量，来推算出菌的浓度。
它可以快速、准确、灵敏地检测出菌浓度，使得很多实验可以得到精确的测定结果，为疾病预防和控制提供了有效的技术手段。
然而，比浊法也存在一定的误差，所以除了比浊法，还可以借助其他方法来检测菌量，以确保检测结果的准确性。
比浊法测定菌浓度的原理
比浊法测定菌浓度的原理
比浊法测定菌浓度的原理
1、定义：比浊法（turbidimetric method）是根据尘悬浮液发散时表现
出的比浊度变化，来测定测样中悬浮液含量的一种方法。
2、基本原理：比浊法测定菌浓度时，所以悬浮微生物必须具足量的荧
光及Homtra闪光测定试剂，以有效地放射入射小|粒子和液滴的荧光；
在进行比浊法测定时，先将样品及比较标准液搅匀，然后以精密的荧
光比对仪，测量比对液的比浊度，然后根据测量结果计算出菌体的含量，这就是比浊法测定菌浓度的基本原理。
3、作用：比浊法是用以判断菌浓度的一种简便方法，既可以用于分析
大批量膜生物，也可以用于分析少量菌浓度，从而实现快速准确地测定，可以替代传统的休止、活性测定或培养。
4、优点：比浊法测定菌浓度的优点是，1、实时准确 ;2、操作简单，
可以在极短的时间内快速自动测定，为菌浓度的检测提供准确的数据；
3、准确度高，重复性强，拥有更高的精度，可更好地检测菌浓度，保
证结果的可靠性；4、可以检测病菌和有效细菌；5、低成本易于控制。
5、缺点：比浊法检测菌浓度有一定的局限性，不适用于低悬浮微生物
含量的测定。
比浊法也不具有检测活性微生物含量的能力，因此无法
准确反映微生物的活性状态。
同时，比浊法测定的准确性和精确性也
受到试验流程的影响，受操作水平的限制。
6、用途：比浊法测定菌浓度广泛应用于医学微生物实验室中，用于观
察菌株的增殖状况，及各种分析、比较实验中，还可以利用比浊法测
定温和、中度蓄积型毒菌、恶性真菌的毒性，方便快捷，并可反映亚细菌群的变化，为医学研究和病原研究提供便利。
比浊法测定菌浓度的原理
比浊法测定菌浓度的原理比浊法是一种常用的微生物检测方法，可用来测定微生物的菌浓度。
这种方法可以测出特定微生物的菌群数量，是比较有效的方法之一。
比浊法是利用菌群生长及其产生的悬浮液来测定菌浓度的方法，它基本上是建立在菌体能够因其自身存在而改变液体浊度和颜色的特性上。
一般来说，比浊法采用比较液体的浊度来测定菌浓度。
在比浊法的过程中，先用一定的消毒剂对样本中的微生物进行杀菌，然后在被杀菌的样品中添加测定菌的抗原，并将样品加入到特定的培养基中培养，直到浊度达到一定的数值。
在比浊法中，可以获得两种不同的样品，一种是未被杀菌的“原始样本”（原始浊度），一种是被杀菌后的“杀菌样本”（杀菌浊度）。
湮没样本（原始浊度）和杀菌样本（杀菌浊度）的浊度比值就是菌群数量的测定值。
比浊法可以用来测定菌群的菌浓度，它主要用于清洗送食物、准备食品添加剂或添加化学消毒剂时，检测出消融液中的细菌浓度，也可以用来检测水份或受污染的土壤中的微生物浓度。
比浊法测定菌浓度的原理是微生物的存在会改变液体的浊度和颜色。
其基本原理是，测定在一定条件下，杀菌前和杀菌后液体的浊度比值，可以用来测定菌浓度。
比浊法测定菌浓度还需要准备一些硬件设备，如：可以同时测定多种悬浮液浊度的浊度仪、溴化钾灯、温度控制器、细菌孢子夹及相关的实验室材料和装备。
比浊法测定菌浓度的步骤如下：1.准备样品：根据检测的内容，准备可检测的样本。
2.加入消毒剂：将消毒剂加入样本中，用于杀菌。
3.添加测定菌：将测定菌添加到样本中，以形成新的混合液。
4.培养：将混合液培养到一定浊度。
5.监控样品：定期监测样品，以定期比较原始样本和杀菌样本的浊度比值，从而获取悬浮液中菌浓度值。
以上是比浊法测定菌浓度的原理和步骤，比浊法是一种比较有效的微生物检测方法。
它可以用来测定水中、食物中和受污染的土壤中的细菌浓度，从而保证我们的饮食健康。
0.5麦氏比浊标准
0.5麦氏比浊标准麦氏比浊是用于评价水体浑浊度的一种测量指标，可以反映水体中悬浮颗粒物的数量和大小。
0.5麦氏比浊标准是指当水体的麦氏比浊度达到0.5时，水体可被认为浑浊。
本文将介绍0.5麦氏比浊标准的背景、应用以及对水质评估的重要性。
背景：麦氏比浊是由美国化学家麦克法兰（McFarland）于1887年提出的，用于评估革兰氏染色中细菌悬浮液的浓度。
后来，麦氏比浊被应用于评价水体浑浊度，成为了一种常用的水质测量方法。
0.5麦氏比浊标准是在这个基础上发展而来的。
应用：0.5麦氏比浊标准广泛应用于水质监测、环境保护和饮用水处理等领域。
在水质监测中，通过测量水样的麦氏比浊度可以了解水体中悬浮颗粒物的浓度，进而判断水体的清澈程度。
在环境保护中，对于一些需要保护的水生生物而言，水体的浑浊度对它们的生存环境和繁殖状况有着直接的影响。
因此，通过0.5麦氏比浊标准可以评估水体的生态状况，为环境保护提供依据。
在饮用水处理中，0.5麦氏比浊标准也是评估水体处理效果的重要指标，可以确保饮用水的质量符合相关标准和要求。
重要性：麦氏比浊标准中的0.5是一个重要的界限，超过这个值就意味着水体已经变得浑浊。
浑浊的水体容易造成视觉疲劳，同时也会降低水体的透明度。
对于饮用水而言，浑浊度的增加可能会导致水味变差，并且悬浊物中可能存在一些对人体健康有害的物质。
此外，浑浊的水体还可能影响水中的生物群落和水生态系统，对水生生物的生存和繁殖造成影响。
因此，通过监测和控制水体的麦氏比浊度，可以提高水体的质量，保护人类健康和生态环境。
在实际应用中，测量0.5麦氏比浊度的方法多种多样，可以使用光度法、显微镜法或者激光散射等技术手段。
这些方法在测量结果的准确性和重复性上都有一定的差异，因此在实际应用中需要选择适合的方法来进行测量，并对测量结果进行准确的判读。
总结：0.5麦氏比浊标准是评价水体浑浊度的一种重要标准，它在水质监测、环境保护和饮用水处理等领域有着广泛的应用。
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麦氏比浊法确定细菌浓度的原理和操作步骤
以麦氏比浊法确定细菌浓度的原理和操作步骤为标题
一、原理
麦氏比浊法是一种常用的确定细菌浓度的方法，其原理是利用细菌悬浮液对光的散射作用，通过测量光的透射度来确定细菌的浓度。
细菌悬浮液越浓，对光的散射就越强，透射度就越低。
二、操作步骤
1. 准备工作
a. 准备所需材料：细菌悬浮液、比色皿、比色计、移液器、离心机等。
b. 将比色皿用去离子水清洗干净，确保无杂质。
c. 打开比色计，进行预热，使其达到工作温度。
2. 准备细菌悬浮液
a. 选择需要测定浓度的细菌液体培养物。
b. 用移液器取适量的细菌液体培养物，加入一定量的去离子水，制备一系列不同浓度的细菌悬浮液。
c. 将细菌悬浮液进行均匀摇匀，确保细菌分布均匀。
3. 开始测定
a. 将比色皿放入比色计中，调整为透射模式。
b. 在比色皿中加入一定量的去离子水作为空白对照组。
c. 将细菌悬浮液加入另一个比色皿中，确保液面平整，避免气泡产生。
d. 将比色皿放入比色计，调整为透射模式，记录下透射度数值。
e. 重复上述步骤，分别测定不同浓度的细菌悬浮液的透射度。
4. 统计数据
a. 将测得的透射度数值记录下来，建立细菌浓度与透射度之间的对应关系。
b. 绘制透射度-浓度曲线图，根据图像确定未知浓度细菌悬浮液的浓度。
5. 计算浓度
a. 根据绘制的透射度-浓度曲线图，找到未知浓度细菌悬浮液对应的透射度数值。
b. 根据透射度和对应关系，计算出未知浓度细菌悬浮液的浓度。
6. 结果分析
a. 根据计算结果，得到未知浓度细菌悬浮液的浓度。
b. 将测定结果与实际浓度进行比较，评估测定的准确性和可靠性。
总结：
通过麦氏比浊法可以快速、简便地测定细菌悬浮液的浓度。
其原理是利用细菌悬浮液对光的散射作用，通过测量光的透射度来确定细
菌的浓度。
操作步骤包括准备工作、准备细菌悬浮液、开始测定、统计数据、计算浓度和结果分析。
通过该方法可以得到准确的细菌浓度，为后续的实验和研究提供可靠的数据支持。