2020高中生物 专题11.2.2 目的基因的导入、检测与鉴定学案 新人教版选修3

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2019-2020年高中生物 基因工程(第一课时)导学案 新人教版必修2

2019-2020年高中生物 基因工程(第一课时)导学案 新人教版必修2

2019-2020年高中生物基因工程(第一课时)导学案新人教版必修2
知识目标
1、什么是基因工程?
2、基因工程的原理是什么?
3、几种常用育种方法进行列表比较从这几个方面比较
学习重点:(1) 基因工程的基本原理。

二、预习任务安排
重难点解读:
本节学习的重点是基因工程的基本原理和大致过程。

同学们可以和前面讲过的对几种常用育种方法进行列表比较从这几个方面比较(处理方法,原理优缺点,实例)
四、知识点睛
在理解基因工程的基本原理的基础上,记住限制酶和质粒的特点以及基因工程的操作过程:用“工具”对目的基因进行“提、剪、拼、接、导、检”。

从而进一步明确基因工程就是按照人们的意愿,把一种生物的基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。

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高三生物一轮复习 基因工程导学案 新人教版

高三生物一轮复习 基因工程导学案 新人教版

第一单元基因工程【重难点突破】一、如何理解基因工程的概念和原理1、操作环境是生物体外,典型过程是基因表达载体的构建。

2、基因工程的优点(1)克服了远缘杂交不亲和的障碍。

基因工程和植物体细胞杂交一样,突破了有性生殖的局限。

(2)定向改造了生物性状。

与诱变育种相比较克服了诱变育种的突变的不定向性。

3、原理是基因重组。

4、操作层次:是分子水平。

是获取某生物的DNA分子片段,把它与另一个DNA分子片段结合成一个DNA分子。

5、实质:A种生物的某个基因通过一定方式导入B种生物体内并能进行基因表达。

基因没有改变,蛋白质没有改变,只是转录和翻译吃场所发生改变。

6、目的基因和载体能够形成重组DNA分子的基础是(1)物质组成相同,都是四种脱氧核苷酸组成。

(2)空间结构相同,都是规则的双螺旋结构。

(3)结构和功能单位相同,基因是控制生物性状的结构和功能单位。

性状都是蛋白质表现的。

(4)遵循的基因表达原则相同,基因表达包括了基因的复制,转录和翻译,都遵循中心法则。

(5)遗传密码相同,所有生物共用一套遗传密码。

【典题演示】1、(2011温州十校)采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵,培育出了转基因羊。

但是,人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。

以下有关叙述,正确的是()A.如果人凝血因子基因的核苷酸序列已知,可用人工合成的方法获得该目的基因B.人体细胞中凝血因子基因进入羊受精卵细胞后,其传递和表达不再遵循中心法则C.在该转基因羊体内,人凝血因子基因存在于乳腺细胞,而不存在于其他体细胞中D.人凝血因子基因开始转录后,DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA【答案】A【解析】掌握基因工程的原理是突破口。

当已知某种基因的核苷酸序列,可以进行人工合成;目的基因的表达仍然遵循中心法则;由于目的基因是导入受精卵,所有体细胞都含有目的基因,只有在乳腺细胞中表达,是因为目的基因连接了乳蛋白的基因的启动子;转录需要的酶是RNA聚合酶。

高中人教版生物备课教案

高中人教版生物备课教案

高中人教版生物备课教案
教学内容:DNA与基因
教学目标:
1. 知道DNA的结构和功能
2. 理解DNA复制的过程
3. 了解基因的概念和作用
4. 掌握DNA和基因在遗传中的重要性
教学重点:
1. DNA的结构和功能
2. DNA复制的过程
3. 基因的概念和作用
教学难点:
1. DNA复制的机理
2. 基因的表达和遗传
教学步骤:
1. 导入(5分钟)
通过展示DNA模型或相关图片引起学生兴趣,激发学生对DNA和基因的好奇心。

2. 知识讲解(15分钟)
a. 讲解DNA的结构和功能,包括碱基对、双螺旋结构等。

b. 讲解DNA复制的过程,包括解旋复制、合成新链等。

3. 案例分析(10分钟)
通过案例分析DNA的意义和作用,让学生理解DNA在生物遗传中的重要性。

4. 活动设计(15分钟)
设计小组活动,让学生通过模拟DNA复制的过程来加深理解。

5. 知识巩固(10分钟)
设计简答题或选择题,让学生复习巩固所学知识。

6. 作业布置(5分钟)
布置练习题,要求学生进一步巩固所学内容。

教学反思:
通过本节课的教学,学生能够对DNA和基因有更深入的理解,能够知道它们在生物遗传中的重要作用。

可以针对学生的理解情况进行调整和适当再授,确保学生掌握基本知识。

学案1:3.2.2 将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定

学案1:3.2.2 将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定

第2节第2课时将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定【课标要求】阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。

【核心素养】1.科学思维:结合生产实例,举例说出基因工程的基本操作程序。

2.科学探究:针对人类生产和生活的某一需求,尝试提出初步的基因工程构想,完成初步设计。

【新知探究】三、将目的基因导入受体细胞1.转化:目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内________和________的过程。

2.目的基因导入受体细胞的方法(1)目的基因导入植物细胞①花粉管通道法Ⅰ.用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入________中。

Ⅱ.在植物受粉后的一定时间内,剪去柱头,将DNA溶液滴加在花柱切面上,使目的基因借________________进入________。

②农杆菌转化法Ⅰ.农杆菌的特点:农杆菌自然条件下侵染________植物和________植物;农杆菌的Ti质粒上的________能够整合到所侵染细胞的________________上。

Ⅱ.转化方法:将目的基因插入农杆菌________________中,让农杆菌侵染植物细胞。

(2)目的基因导入动物细胞①常用方法:________法。

②常用受体细胞:________。

(3)目的基因导入微生物细胞①方法:用________处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,然后将重组表达载体导入其中。

②常用受体细胞:原核细胞(使用最广泛的是大肠杆菌)。

四、目的基因的检测与鉴定1.分子水平检测(1)通过________等技术检测受体细胞染色体DNA上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录出mRNA。

(2)从转基因生物中提取蛋白质用相应的抗体进行________________杂交,检测目的基因是否翻译成了蛋白质。

2.个体水平鉴定包括抗虫、抗病的接种实验,以确定是否有抗性及抗性程度。

人教版高中生物学选择性必修3生物技术与工程精品课件 第3章 将目的基因导入受体细胞并进行检测与鉴定

人教版高中生物学选择性必修3生物技术与工程精品课件 第3章 将目的基因导入受体细胞并进行检测与鉴定

关键点拨 将目的基因导入不同细胞的方法
项目 常用 方法 受体 细胞
植物细胞 农杆菌转化法 花粉管通道法
体细胞
体细胞
动物细胞 显微注射法
微生物细胞
受精卵
原核细胞
转化 过程
致用
1. [2023江苏扬州高二期中改编]我国科学家在进行抗虫棉的培育过程中独创了“花粉 管通道法”,该方法有多种操作方式。下图表示花粉管通道法介导植物基因转移,下 列说法错误的是( )
3. 如果目的基因是抗虫基因,在个体水平上怎么检测?如果目的基因是耐盐基因呢? 提示 如果目的基因是抗虫基因,则要通过抗虫接种实验来检测;如果目的基因是耐盐 基因,则要用一定浓度的盐水浇灌来检测。
Байду номын сангаас
知新
1. 分子水平的检测
抗原—抗体杂交
2.个体生物学水平的鉴定:抗虫、抗病接种实验等。 关键点拨 1.目的基因的检测与鉴定
第3章 基因工程
第2节 基因工程的基本操作程序
第2课时 将目的基因导入受体细胞并进行检 测与鉴定
学习 目标
01 考点一 将目的基因导入受体细胞 02 考点二 目的基因的检测与鉴定
03
01 考点一 将目的基因导入受体细胞
导入
2. 将基因表达载体导入农杆菌细胞时,应怎样处理农杆菌细胞?
3. 植物的受精卵或体细胞都可以作为受体细胞,如果将目的基因导入动物细胞,选用 体细胞是否可行? 提示 动物体细胞分化程度高,全能性受到限制,因此一般采用受精卵作为受体细胞。
旁栏边角 想一想
提示 在分子水平上提高转基因抗虫棉的抗虫性和抗虫持久性,包括在棉花中转入多个 杀虫基因、构建组织特异性表达的启动子、提高杀虫基因的表达量等。

人教版高中生物学选择性必修3生物技术与工程精品课件 第3章 将目的基因导入受体细胞并进行检测与鉴定

人教版高中生物学选择性必修3生物技术与工程精品课件 第3章 将目的基因导入受体细胞并进行检测与鉴定

4.如果棉花中插入的Bt基因转录成功,是否一定能够翻译出相应的蛋白质 呢?如何从分子水平进行检测? 提示 不一定成功翻译。可从转基因棉花中提取蛋白质,用相应的抗体进行 抗原—抗体杂交,检测Bt基因是否翻译成Bt抗虫蛋白等。
【方法突破】
1.目的基因的检测与鉴定
2.不同分子检测原理的异同 (1)检测目的基因是否插入受体DNA中、目的基因是否转录时,用的探针都 是放射性同位素等标记的含有目的基因的DNA片段。检测原理都是碱基 互补配对原则,只是被检测的物质不同,一个是转基因生物的基因组DNA, 一个是转基因生物细胞内的mRNA。 (2)进行翻译水平的检测,通常以目的基因表达产物(蛋白质)作抗原,制备相 应抗体,检测转基因生物的蛋白质,利用抗原与抗体特异性结合的原理。 (3)不论是复制水平、转录水平还是翻译水平的检测,都是在体外进行的。
旁栏边角想一想 判断是否成功扩增出DNA片段的依据是什么? 提示 可以通过在紫外灯下直接观察DNA条带的分布及粗细程度来评价扩 增的结果。
结论语句辨一辨 1.PCR利用了DNA的热变性原理,通过调节温度来控制DNA双链的解聚与 结合。( √ ) 2.在电场的作用下,带电分子会向着与它所带电荷相同的电极移动。( × ) 3.在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象 等有关。( √ ) 4.凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出 来。( √ )
结论语句辨一辨 1.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测。( × ) 2.抗虫基因即使成功地插入植物细胞染色体上也未必能正常表达。( √ ) 3.检测目的基因是否插入受体细胞的DNA中,可用抗原—抗体杂交技术。
( ×) 4.抗虫、抗病鉴定可用于确定转基因生物是否具备相关性状。( √ )

人教版高中生物基因突变教案

人教版高中生物基因突变教案

人教版高中生物基因突变教案一、教学目标:1. 知识目标:了解基因突变的概念,掌握基因突变的分类和影响因素。

2. 能力目标:能够区分不同类型的基因突变,分析基因突变对个体的影响。

3. 情感目标:培养学生对生物多样性和基因变异的兴趣,增强对生物遗传变异的理解和认识。

二、教学重点和难点:1. 教学重点:基因突变的概念和分类、基因突变对个体的影响。

2. 教学难点:基因突变的概念理解、不同类型基因突变的区分和分析。

三、教学准备:1. 教材:人教版高中生物教材2. 粉笔、黑板、多媒体设备四、教学过程:Step 1:引入通过一个实例引入基因突变的概念,比如白化基因突变导致的白化动物。

Step 2:基因突变的定义和分类1. 讲解基因突变的概念和分类:点突变、插入突变、缺失突变和整合突变。

2. 介绍不同类型突变的具体影响和例子。

Step 3:基因突变的因素1. 探讨基因突变的发生原因:化学因素、物理因素、生物因素等。

2. 引导学生分析不同因素对基因突变的影响。

Step 4:基因突变的影响1. 分析基因突变对个体的影响:形态、生理和行为等方面。

2. 讨论基因突变在生物进化中的作用。

Step 5:巩固提高设计小组活动,让学生结合教材内容或自己的理解,讨论一个基因突变的案例,并展示给全班同学。

五、课堂作业1. 阅读课外相关书籍或文章,了解更多基因突变的案例。

2. 思考一个自己熟悉的物种,分析可能发生的基因突变对其的影响。

六、教学反思本节课主要围绕基因突变的概念、分类和影响展开,通过引入实例、知识讲解和小组讨论等多种方式,激发学生对基因突变的兴趣,提升他们的认识水平。

下节课可以进一步探讨基因突变在人类遗传疾病中的应用和研究。

高中生物选修 基因工程 目的基因的导入、检测与鉴定

高中生物选修    基因工程   目的基因的导入、检测与鉴定

第8课时目的基因的导入、检测与鉴定[学习目标] 1.理解目的基因导入受体细胞的方法。

2.掌握检测与鉴定目的基因的方法。

[核心素养] 1.科学思维:结合生产实际,举例说出基因工程的基本程序。

2.社会责任:针对生产生活中的某一需求,尝试提出基因工程构想,完成初步设计。

一、将目的基因导入受体细胞1.转化的含义目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。

2.转化的方法(1)导入植物细胞①农杆菌转化法:将目的基因导入双子叶植物和裸子植物时最常用的方法。

a.土壤农杆菌的特点:植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌侵染,其Ti质粒上的T-DNA(可转移的DNA)可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞的染色体的DNA上。

b.方法步骤:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→目的基因插入植物细胞中的染色体DNA上→目的基因表达。

②基因枪法:将目的基因导入单子叶植物常用的方法。

表达载体DNA包裹在微小的金粉粒子或钨粉粒子表面→用基因枪高速射入受体细胞或组织中→目的基因表达。

③花粉管通道法:在植物受粉后,花粉形成的花粉管还未愈合前,剪去柱头,滴加DNA(含目的基因),使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。

(2)导入动物细胞①方法:显微注射技术。

②常用受体细胞:受精卵。

③步骤:目的基因表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→胚胎早期培养→移植到雌性动物的输卵管或子宫内→获得具有新性状的转基因动物。

(3)导入微生物细胞①原核生物的特点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。

②常用的方法a.用Ca2+处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为感受态细胞)。

b.感受态细胞和重组表达载体DNA分子在缓冲液中混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子。

1.将胰岛素基因的表达载体导入大肠杆菌,从大肠杆菌中获得的“胰岛素”未能达到期待的生物活性,导致这种差异的原因可能是什么?提示大肠杆菌是原核生物,无内质网、高尔基体等细胞器,大肠杆菌中基因表达获得的蛋白质未经加工。

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1.2.2 目的基因的导入、检测与鉴定[学习目标] 1.理解目的基因导入受体细胞的方法。

2.掌握检测与鉴定目的基因的方法。

方式一通过前面的学习,我们了解了基因工程中目的基因的获取和基因表达载体的构建。

在目的基因与载体连接成重组DNA分子以后,下面的重要工作主要是将其导入受体细胞进行扩增和筛选,获得大量的重组DNA分子,这就是外源基因的无性繁殖,即克隆(cloning)。

方式二目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。

这是基因工程的第四步工作。

在完成将目的基因导入受体细胞这一步骤后,在全部的受体细胞中,真正能够摄入重组DNA分子的受体细胞是很少的。

因此,必须通过一定的手段对受体细胞中是否导入了目的基因进行检测。

检测的方法有很多种,例如,大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。

重组DNA分子进入受体细胞后,受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达过程。

一、将目的基因导入受体细胞1.转化的含义目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。

2.转化的方法(1)导入植物细胞①农杆菌转化法:将目的基因导入双子叶植物和裸子植物时最常用方法。

a.土壤农杆菌的特点:植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌侵染,其Ti 质粒上的T-DNA(可转移的DNA)可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞的染色体的DNA上。

b.方法步骤:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→目的基因插入植物细胞中的染色体DNA上→目的基因表达。

②基因枪法:将目的基因导入单子叶植物常用的方法。

目的基因包裹在微小的金粉粒子或钨粉粒子表面→用基因枪高速射入受体细胞或组织中→目的基因表达。

③花粉管通道法在植物受粉后,花粉形成的花粉管还未愈合前,剪去柱头,滴加目的基因,使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。

(2)导入动物细胞①方法:显微注射技术。

②常用受体细胞:受精卵。

③步骤:目的基因表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的转基因动物(3)导入微生物细胞①原核生物的特点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。

②常用的方法:a.用Ca2+处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为感受态细胞)。

b.感受态细胞和重组表达DNA分子在缓冲液中混合,细胞吸收重组表达载体DNA分子。

归纳总结1.上述方法中,在将目的基因导入受体细胞之前,都必须进行基因表达载体的构建,也就是说导入受体细胞的必须是重组DNA分子,而不是直接导入目的基因。

2.对于植物来说,受体细胞可以是受精卵或体细胞,因为植物细胞具有全能性。

3.对于动物来说,受体细胞一般是受精卵,因为受精卵的全能性高,而高度分化的动物体细胞的全能性受到抑制。

4.大肠杆菌和酵母菌在基因工程中都可以作为受体细胞,但又有所不同。

大肠杆菌为原核细胞,而酵母菌为真核细胞(具有多种细胞器),所以酵母菌在用于生产需要加工和分泌的蛋白质时比大肠杆菌有优势。

例1农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下感染植物,因而在植物基因工程中得到了广泛的运用。

下图为农杆菌转化法的示意图,试回答下列问题:(1)一般情况下农杆菌不能感染的植物是____________,利用农杆菌自然条件下感染植物的特点,能实现____________________________________________________________________________________________________________________________________________的目的。

具体原理是在农杆菌的Ti质粒上存在T-DNA片段,它具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞____________上的特点,因此只要将携带外源基因的DNA片段插入到____________(部位)即可。

(2)根据T-DNA这一转移特点,推测该DNA片段上可能含有控制______________________酶合成的基因。

(3)图中c过程中,能促进农杆菌向植物细胞转移的物质是__________类化合物。

(4)植物基因工程中除了农杆菌转化法之外,还可采取____________________________(至少写出两种)。

答案(1)单子叶植物将目的基因导入植物细胞染色体的DNA T-DNA片段(内部) (2)DNA连接酶、限制(3)酚(4)基因枪法、花粉管通道法解析(1)一般农杆菌不能感染的植物是单子叶植物,可感染双子叶植物和裸子植物。

利用其感染性,可实现目的基因导入植物细胞的目的。

真正可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上的是农杆菌T-DNA片段,因此目的基因必须插入到该部位才能成功。

(2)根据T-DNA这一转移特点,可以推测该DNA片段能控制合成DNA连接酶、限制酶以实现与双子叶植物细胞染色体DNA的整合。

(3)植物细胞受伤后可产生酚类物质,促进农杆菌向植物细胞转移。

(4)植物基因工程中除了农杆菌转化法之外,还有基因枪法和花粉管通道法等。

易错易混农杆菌转化法中两次拼接、两次导入的辨析第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA的中间部位,第二次拼接(非人工操作)指被插入目的基因的T-DNA被拼接到受体细胞染色体的DNA上;第一次导入是将含目的基因的Ti质粒重新导入农杆菌,第二次导入(非人工操作)是指含目的基因的T-DNA导入受体细胞。

例2下列关于目的基因导入受体细胞的描述,不正确的是( )A.基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济和有效B.显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法C.大肠杆菌最常用的转化方法,是使细胞的生理状态发生改变D.农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法答案 A解析不同受体细胞导入目的基因的方法不同,每种方法都有利弊。

目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法,该方法比较经济和有效;目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射技术;目的基因导入大肠杆菌细胞最常用的转化方法就是用钙离子处理细胞,使细胞的生理状态发生改变,完成转化。

二、目的基因的检测与鉴定1.分子水平的检测(1)检测目的基因是否插入受体细胞的DNA中:DNA分子杂交技术。

用放射性同位素标记的含有目的基因的单链DNA片段制成基因探针。

将转基因生物的基因组DNA提取出来,和基因探针进行杂交,如果出现杂交带,说明目的基因已插入受体细胞的DNA中。

(2)检测目的基因是否转录:分子杂交技术。

将转基因生物提取出来的mRNA和基因探针进行杂交,如果出现杂交带,说明目的基因已经转录。

(3)检测目的基因是否翻译:抗原-抗体杂交技术。

从转基因生物提取出来的蛋白质和相应的抗体进行杂交,如果出现杂交带,说明目的基因已经翻译。

2.个体水平的鉴定(1)抗虫或抗病的接种实验。

(2)有的基因工程产品需要与天然产品的功能进行活性比较。

归纳总结1.目的基因的检测与鉴定归纳2.不同分子检测原理的异同(1)在DNA分子、mRNA分子上检测目的基因是否插入、目的基因是否转录时,用的探针都是放射性同位素等标记的含有目的基因的DNA片段。

检测原理都是碱基互补配对原则,只是被检测的物质不同,一个是转基因生物的基因组DNA,一个是转基因生物细胞内的mRNA。

(2)进行翻译水平的检测,则是利用抗原与抗体特异性结合的原理。

例3目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过鉴定和检测才能知道。

下列属于目的基因检测和鉴定的是( )①检测受体细胞的染色体上是否有目的基因②检测受体细胞是否有致病基因③检测目的基因是否转录出了mRNA ④检测目的基因是否翻译出了蛋白质A.①②③B.②③④C.①③④D.①②④答案 C例4利用外源基因在受体细胞中表达,可生产人类所需要的产品。

下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是( )A.棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D.酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白答案 D解析基因表达的产物是蛋白质,因此,只有在受体细胞中检测或提取到了相应蛋白质才能证明目的基因在受体细胞中完成了表达,A、C项只能说明完成了目的基因的导入,B项只能说明完成了目的基因的导入和目的基因的转录过程。

名师点拨关注基因工程操作过程的四个易误点(1)限制酶剪切目的基因与质粒的次数不同:获取一个目的基因需限制酶剪切2次,共产生4个黏性末端或平末端,切割质粒一般只需要限制酶剪切1次,产生2个黏性末端或平末端,因为质粒是环状DNA分子,而目的基因在DNA分子链上。

(2)切割目的基因和载体并非只能用同一种限制酶:如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同时,在DNA 连接酶的作用下,目的基因与载体也可以连接起来。

(3)目的基因的插入点不是随意的:基因表达需要启动子与终止子的调控,所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位。

(4)基因工程操作过程中只有第三步“将目的基因导入受体细胞”没有碱基互补配对现象。

1.将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵,应分别采用的方法是( )A.显微注射技术农杆菌转化法B.基因枪法花粉管通道法C.农杆菌转化法显微注射技术D.基因枪法显微注射技术答案 D解析玉米是单子叶植物,对单子叶植物来说,常用的方法是基因枪法;对于动物细胞来说,常用的方法是显微注射技术。

2.(2017·福建厦门一中期中)下列关于目的基因导入微生物细胞的叙述中,不正确的是( )A.常用原核生物作为受体细胞,是因为原核生物繁殖快,且多为单细胞,遗传物质相对较少等B.受体细胞所处的一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态称为感受态C.感受态细胞吸收DNA分子需要适宜的温度和酸碱度D.常用生理盐水处理细胞,使其处于感受态答案 D解析因为原核生物繁殖快,且多为单细胞,遗传物质相对较少,故常用原核生物作为受体细胞;Ca2+处理后细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态称为感受态,感受态细胞吸收DNA分子需要适宜的温度和酸碱度;常用Ca2+处理细胞,使其处于感受态。

3.(2017·广东潮南实验学校高二月考)在基因诊断技术中,所用的探针DNA分子中必须存在一定量的荧光分子或放射性同位素,后者的作用是( )A.为形成杂交DNA分子提供能量B.引起探针DNA产生不定向的基因突变C.作为探针DNA的示踪元素D.增加探针DNA的相对分子质量答案 C解析DNA探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子,放射性同位素的作用是作为探针DNA的示踪元素,C项正确。

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