华南师范大学实验报告 (2).doc
物化实验报告燃烧热的测定

华南师范大学实验报告一、实验目的1、明确燃烧热的定义,了解定压燃烧热与定容燃烧热的差别。
2、掌握量热技术的基本原理;学会测定萘的燃烧热3、了解氧弹量热计的主要组成及作用,掌握氧弹量热计的操作技术。
4、学会雷诺图解法校正温度改变值。
二、 实验原理通常测定物质的燃烧热,是用氧弹量热计,测量的基本原理是能量守恒定律。
一定量被测物质样品在氧弹中完全燃烧时,所释放的热量使氧弹本身及其周围的介质和量热计有关附件的温度升高,测量介质在燃烧前后温度的变化值T ∆,就能计算出该样品的燃烧热。
()p V Q Q RT n g =+∆ (1)()V W W Q Q C W C M+=+样品21总铁丝铁丝水水(T -T ) (2)用已知燃烧热的物质(本实验用苯甲酸)放在量热计中燃烧,测其始末温度,求出T ∆。
便可据上式求出K ,再用求得的K 值作为已知数求出待测物(萘)的燃烧热。
三、仪器和试剂 1.仪器SHR-15氧弹量热计1台;贝克曼温度计;压片机 2台;充氧器1台;氧气钢瓶1个;1/10℃温度计;万能电表一个;天平 2.试剂铁丝;苯甲酸(AR);萘(AR );氧气四、实验步骤1、测定氧氮卡计和水的总热容量(1)样品压片:压片前先检查压片用钢模,若发现钢模有铁锈油污或尘土等,必须擦净后,才能进行压片,用天平称取约0.8g 苯甲酸,再用分析天平准确称取一根铁丝质量,从模具的上面倒入己称好的苯甲酸样品,徐徐旋紧压片机的螺杆,直到将样品压成片状为止。
抽出模底的托板,再继续向下压,使模底和样品一起脱落,然后在分析天平上准确称重。
分别准确称量记录好数据,即可供燃烧热测定用。
(2)装置氧弹、充氧气:拧开氧弹盖,将氧弹内壁擦净,特别是电极下端的不锈钢接线柱更应擦十净,将点火丝的两端分别绑紧在氧弹中的两根电极上,选紧氧弹盖,用万用表欧姆档检查两电极是否通路,使用高压钢瓶时必须严格遵守操作规则。
将氧弹放在充氧仪台架上,拉动板乎充入氧气。
华南师范大学实验报告燃烧热的测定

华南师范大学实验报告学生姓名:学号:专业:化学年级、班级:课程名称:物化实验实验项目:燃烧热的测定实验类型:□验证□设计□综合实验时间:2009年12月7日指导老师:燃烧热的测定一.实验目的1.明确燃烧热的定义,了解恒压燃烧热与恒容燃烧热的区别。
2. 掌握量热技术的基本原理,学会测定奈的燃烧热。
3. 了解氧弹卡计主要部件的作用,掌握氧弹量热计的实验技术。
4. 学会雷诺图解法校正温度改变值。
二、实验原理燃烧热是指1摩尔物质完全燃烧时所放出的热量。
在恒容条件下测得的燃烧热称为恒容燃烧热(O v),恒容燃烧热这个过程的内能变化(ΔU)。
在恒压条件下测得的燃烧热称为恒压燃烧热(Q p),恒压燃烧热等于这个过程的热焓变化(ΔH)。
若把参加反应的气体和反应生成的气体作为理想气体处理,则有下列关系式:c H m = Q p=Q v +Δn RT(1)本实验采用氧弹式量热计测量蔗糖的燃烧热。
测量的基本原理是将一定量待测物质样品在氧弹中完全燃烧,燃烧时放出的热量使卡计本身及氧弹周围介质(本实验用水)的温度升高。
氧弹是一个特制的不锈钢容器(如图)为了保证化妆品在若完全燃烧,氧弹中应充以高压氧气(或者其他氧化剂),还必须使燃烧后放出的热量尽可能全部传递给量热计本身和其中盛放的水,而几乎不与周围环境发生热交换。
但是,热量的散失仍然无法完全避免,这可以是同于环境向量热计辐射进热量而使其温度升高,也可以是由于量热计向环境辐射出热量而使量热计的温度降低。
因此燃烧前后温度的变化值不能直接准确测量,而必须经过作图法进行校正。
放出热(样品+点火丝)=吸收热(水、氧弹、量热计、温度计)图 1 氧弹量热计 图 2 氧弹构造示意图 1、氧弹 2、内水桶(量热容器) 1-厚壁圆筒;2-弹盖 3、电极 4、温度计 3-螺帽; 4-进气孔 5、搅拌器 6、恒温外套 5-排气孔;6-电极 构造示意图 7-燃烧皿;9-火焰遮板8-电极(也是进气管)量热原理—能量守恒定律在盛有定水的容器中,样品物质的量为n 摩尔,放入密闭氧弹充氧,使样品完全燃烧,放出的热量传给水及仪器各部件,引起温度上升。
实验六_华南师范大学实验报告

华南师范大学实验报告【前言】1、实验目的①了解纳米二氧化钛染料敏化太阳能电池的组成、工作原理及性能特点。
②掌握实合成纳米二氧化钛溶胶、组装成电池的方法与原理。
③学会评价电池性能的方法。
2、意义能源问题是制约目前世界经济发展的首要问题。
太阳能作为一种取之不尽、用之不竭无污染洁净的天然绿色能源而成为最有希望的能源之一。
目前研究和应用最广泛的太阳能电池主要是硅系太阳能电池。
但硅系电池原料成本高、生产工艺复杂、效率提高潜力有限 其光电转换效率的理论极限值为30%,限制了其民用化,急需开发低成本的太阳能电池。
1991年瑞士洛桑高等工业学院的Gratzel教授等在Nature上发表文章,提出了一种新型的以染料敏化TiO2纳米薄膜为光阳极的光伏电池,它是以羧酸联吡啶钌(II)配合物为敏化染料,称为Cratzel型电池。
这种电池的出现为光电化学电池的发展带来了革命性的创新) 目前,此种电池的效率已稳定在10%左右,制作成本仅为硅太阳能电池的1/5~1/10,寿命能达到20年以上,具有广泛的应用价值。
3、文献综述与总结目前主要从事染料敏化太阳电池研发的机构有瑞士联邦理工学院(EPFL) 、澳大利亚STI( Sustainable Technology International)公司、德国INAP研究所、欧盟以荷兰国家能源研究所( ECN)带头的联合团队、日本产业技术综合研究所(AIST) 、日本日立公司、日本富士公司、日本Peccell(桐荫横滨大学风险型企业,董事长:宫坂力教授)技术公司、瑞典Uppsala(乌普萨拉)大学、瑞士的Leclanche SA与Solaronix公司及美国的Konarka高技术公司等。
以市场角度来看,已经有多家光电池的厂商陆续取得EPFL的专利授权,包括STI、Toyota / IMRA等。
日本和韩国是该类电池研究的两支生力军,他们在柔性电池和电池各类材料研究上都有很强的队伍,特别是在有机染料的合成和应用上,采用吲哚啉类有机染料D205 作敏化剂,获得了9.5%的光电转换效率———这是目前有机染料效率的最高值。
实验3,华南师范大学实验报告

华南师范大学实验报告姓名:课件密码:27137组别: 学号:实验题目:二茂铁及衍生物对柴油的助燃和消烟作用【前言】1、实验目的①本实验选择不同的燃油添加剂;利用氧弹量热计测定燃油在不同添加剂存在下的燃烧热,了解和比较不同汽油添加剂对柴油燃烧效率与速率的影响以及添加剂的节能助燃效应。
②学习和掌握甲醛缓冲溶液吸收-盐酸副玫瑰苯胺分光光度法测定SO2气体的浓度以及盐酸萘乙二胺分光光度法测定NO2气体浓度的分析方法以及气相色谱测定方法,并应用于汽油燃烧后尾气成份的测定。
③通过物理化学实验基本技术---量热技术的使用与气体无机污染物的多种分析方法(包括分光光度法和气相色谱法)的学习与应用使学生综合了解汽油添加剂在燃油助燃、消烟节能以及减少汽油尾气排放减少大气污染中所起的作用。
关注社会、关注环境。
2、实验意义本实验用自制的二茂铁作为添加剂,利用氧弹量热计测定燃油在是否有添加剂存在下的燃烧热,了解和比较添加二茂铁对柴油燃烧效率和速率的影响以及二茂铁的节能助燃效应。
同时,学习和掌握甲醛法和盐酸萘乙二胺分光光度法分别测定SO2和NO2气体的浓度,并应用于柴油燃烧后尾气成分的测定。
3、文献综述与总结3.1 1951 年末,Kealy 和Pauson 利用环戊二烯成功地制备出C10H10Fe。
次年,德国的Ficsher 利用X 光衍射技术发现二茂铁化合物具有异常高的化学稳定性。
1956 年Wilkinson 和Woodward 等通过红外光谱、磁化率以及偶极矩等技术手段确定二茂铁具有夹心结构的金属π配位化合物,证实其具有可靠的金属性能。
这些研究成果是20 世纪金属有机化学的重大发现,Ficsher 和Wilkinson 也因此获得1973 年度的诺贝尔化学奖。
是由于其特殊的结构和特别高的稳定性,二茂铁很快就引起了人们的研究兴趣,其合成方法也层出不穷。
20 世纪70年代,德国研发出了电解合成方法,随后又对该方法进行了改进,从而开辟了合成二茂铁的新天地。
燃烧热的测定

华南师范大学实验报告学生姓名学号专业年级、班级课程名称实验项目实验类型试验时间实验指导老师实验评分燃烧热的测定【实验目的】1、明确燃烧热的定义,了解定压燃烧热雨定容燃烧热的差别。
2、掌握量热技术的基本原理;学会测定萘的燃烧热.3、了解氧弹量热计的主要组成及作用,掌握氧弹量热计的操作技术。
4、学会雷诺图解法校正温度改变值。
【实验原理】物质的标准摩尔燃烧热是指1mol物质在标准压力下完全燃烧时所放出的热量。
在恒容条件下测得的1mol物质的燃烧热称为恒容摩尔燃烧热(Qv,m),数值上等于燃烧过程热力学能变化(Δr Um)。
在恒压条件下测得的1mol物质燃烧热称为恒压摩尔燃烧热(Qp,m ),数值上等于等于燃烧过程的摩尔焓变(ΔrHm)。
若参加反应的是标准压力下1mol物质,则恒压热效应Δr Hθm即为该有机物标准摩尔燃烧热Δc Hθm。
若把参加反应的气体和反应生成的气体作为理想气体处理,则有下列关系式:Q p,m=Q V,m+(ΣV B)RT (3-4)本实验采用氧弹热量计为测量仪器。
氧弹是一个特制的不锈钢容器,耐高温、高压、腐蚀,密封性好,是典型的恒容容器。
测定时样品应压片,防止充氧或燃烧时飞散。
量热反应测量的基本原理为能量守恒定律。
热是一个很难测定的物理量,热量的传递往往表现为温度的改变,而温度却很容易测量。
在盛有定水的容器中,样品物质的量为n摩尔,放入密闭氧弹充氧,使样品完全燃烧,放出的热量传给水及仪器各部件,引起温度上升。
设系统(包括内水桶,氧弹本身、测温器件、搅拌器和水)的总热容为C(通常称为仪器的水当量,即量热计及水每升高1K 所需吸收的热量),假设系统与环境之间没有热交换,燃烧前、后的温度分别为T1、T2,则此样品的恒容摩尔燃烧热为:nT T C Q m V )(12,--= (3-5) 式中,Q v,m 为样品的恒容摩尔燃烧热(J ·mol -1);n 为样品的摩尔数(mol);C 为仪器的总热容(J ·K -1或J / o C)。
2燃烧热实验报告

华南师范大学实验报告学生姓名学号专业化学(师范) 年级、班级课程名称物理化学实验实验项目燃烧热的测定实验类型:□验证□设计□综合实验时间年月日实验指导老师蔡跃鹏实验评分【实验目的】①明确燃烧热的定义,了解恒压燃烧热与恒容燃烧热的差别与联系。
②掌握量热技术的基本原理;学会测定奈的燃烧热。
③了解氧弹卡计主要部件的作用,掌握氧弹卡计的实验技术。
④学会雷诺图解法校正温度改变值。
【实验原理】物质的标准摩尔燃烧热(焓)△cH mθ是指1mol物质在标准压力下完全燃烧所放出的热量。
在恒容条件下测得的1mol物质的燃烧热称为恒容摩尔燃烧热Q V,m,数值上等于这个燃烧反应过程的热力学能的变化△rU m;恒压条件下测得的1mol物质的燃烧热称为恒压摩尔燃烧热Q p,m,数值上等于这个燃烧反应过程的摩尔焓变△rH m,化学反应热效应通常是用恒压热效应△rH m来表示。
若参加燃烧反应的是标准压力下的1mol物质,则恒压热效应△rH mθ即为该有机物的标准摩尔燃烧热△cH mθ。
若把参加反应的气体与生成的气体作为理想气体处理,则存在下列关系式。
Q p,m=Q V,m+(∑V B)RT (3-4) 式中,∑V B为生成物中气体物质的计量系数减去反应物中气体物质的计量系数;R为气体常数;T为反应的绝对温度;Q p,m与Q V,m的量纲为J/mol。
本实验所用测量仪器为氧弹量热计(也称氧弹卡计),按照结构及其与环境之间的关系,氧弹量热计通常分为绝热式和外槽恒温式,本实验所用为外槽恒温式量热计。
氧弹为高度抛光的刚性容器,耐高压、耐高温、耐腐蚀,密封性好,是典型的恒容容器。
测定粉末样品时需压成片状,一面充氧时冲散样品或燃烧时飞散开来。
量热反应测量的基本原理是能量守恒定律。
在盛有定量水的容器中,样品的物质的量为n mol,放入密闭氧弹,充氧,然后使样品完全燃烧,放出的热量传给水及仪器各部件,引起温度上升。
设系统(包括内水桶、氧弹本身、测温器件、搅拌器和水)的总热容为C(通常称为仪器的水当量,及量热计及水每升高1K所需吸收的热量),假设系统与环境之间没有热交换,燃烧前、后的温度分别为T1、T2,则此样品的恒容摩尔燃烧热为Q V,m= -C(T2-T1)(3-5) n式中,Q V,m为样品的恒容摩尔燃烧热,J/mol;n为样品的物质的量,mol;C为仪器的总热容,J/K或J/℃。
利用微型实验仪器电解水实验报告

④实验一段时间后,观察电极(大头针)的变化,解释其变化原因,说明该如何解决问题。
【实验记录】
电解2H2↑+O2↑
A、自来水:阴极产生气泡,阳极产生绿色絮状沉淀,溶液逐渐变黄。产生小且少的一些气泡,无法点燃。久置后灰绿色沉淀变黑,溶液变清澈。
E、去离子水:因为纯净,在几分钟内几乎无现象,无电流也无明显气泡
【实验分析】
①由于纯水中可自由移动的离子数量少,因此电解纯水的速率很慢。
②加入稀硫酸,硫酸强碱盐,氢氧化钠等强碱溶液,溶液中放电的离子仍是H+,OH--,因此电解的物质仍然是水
③由于大头针是铁质的,在电解水过程中容易被氧化而生锈。
0512根
带胶塞的导管2根大试管2支
红外灯1盏
盐酸碳酸氢钠
【实验过程】
在相同的红外灯条件下比较二氧化碳及空气的温度效应强度,验证二氧化碳是否对红外长波辐射有强烈吸收。
①二氧化碳及空气制备
用盐酸和碳酸氢钠反应,并用大试管收集二氧化碳,用点燃的火柴伸到试管口,若熄灭,说明已收集满。收满后塞上胶塞。用另外一个等体积的大试管收集空气做对比实验;
设置数据采集器:采样速率为10m/s;采样样本总数为持续
量取NaOH溶液于50ml烧杯中。
开启磁力搅拌器,调节适当的搅拌速度。
开始采集数据,进行滴定操作
实验操作完毕,读取所消耗的盐酸体积。观察软件中的图像,并分析图像拐点。将NaOH溶液换成NaOH与氨水一比一混合溶液,重复上述操作。
图二、盐酸滴定氨水过程pH变化
利用微型实验仪器电解水实验报告
华南师范大学实验报告
学生姓名:郭学号:1239专业:化学班级:08化三科目名称:中学实验教学实验项目:6、1利用微型技术电解水的实验探究实验性质:探究性实验时间:
华南师范大学实验报告

华南师范大学实验报告学生姓名____罗婵_________ 学号________专业___生物技术________年级、班级___07级7班_____课程名称___生物化学实验____实验项目_蛋白质等电点测定和沉淀反应实验类型□验证□设计□综合实验时间_2008年_9 月_23日实验指导老师__李德红______ 实验评分__________________一、实验目的了解蛋白质的两性解离性质;学习测定蛋白质等电点的一种方法;加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识;了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。
二、实验原理蛋白质是两性电解质,其解离状态和解离程度受溶液的酸碱度影响。
当溶液的PH达到一定数值时,蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等,在电场中既不向阴极移动,也不向阳极移动,此时溶液的PH值称为此种蛋白质的等电点。
在等电点时,蛋白质的理化性质都有变化,可利用此种性质的变化测定各种蛋白质的等电点。
最常用的方法是测其溶解度最低时的溶液PH值。
在水溶液中的蛋白质分子由于表面生成水化层和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒,在一定的理化因素影响下,蛋白质颗粒可因失去电荷和脱水而沉淀。
蛋白质的沉淀反应可分为两类,可逆的沉淀反应和不可逆的沉淀反应。
三、实验步骤及结果(一)酪蛋白等电点的测定四、结果分析(一)酪蛋白等电点的测定结果如图:④③②①该实验通过测酪蛋白溶解度最低时的溶液PH值来测定其等电点。
蛋白质在等电点时,以两性离子的形式存在,其总净电荷为零,这样的蛋白质颗粒在溶液中因为没有相同电荷而互相排斥的影响,所以最不稳定,溶解度最小,极易借静电引力迅速结合成较大的聚集体,因而沉淀析出。
该实验结果如图所示,第3支试管中的溶液最为混浊,因此酪蛋白的等电点为第3支试管的PH值,即酪蛋白的PI=4.7该实验应注意,蒸馏水的PH必须调到7,因为蒸馏水的PH值会影响所配置的溶液PH 的改变,可能会出现混浊度区分不明显的现象,从而影响等电点的测定。
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华南师范大学实验报告
学生姓名李思颖学号 20070004004
专业综合理科二班年级、班级07 级
课程名称生物化学实验实验项目酚法测定血清蛋白的含量
实验类型□验证□设计□综合实验时间 2008 年10 月 6 日
实验指导老师陈老师实验评分
一、目的
1、学习分光光度计的原理和使用方法。
2、学习—酚法测定蛋白质含量的原理和方法。
3、进一步掌握比色法或分光光度法,准确测定未知样品。
二、原理
蛋白质浓度从它们的物理化学性质,如折射率,比重,紫外吸收测定而得知,或用化学方法,如定氮,双缩脲反应,—酚法是一般实验室中经常使用的方法。
—酚法是双缩脲法的发展,反应的第一步涉及到在碱性溶液中铜一蛋白质复合物的形成,然后这个复合物去还磷钼酸—磷钨酸试剂(氏剂),产生深蓝色(钼蓝和钨蓝混合物)。
优点:—酚法灵敏度高,较双缩脲法灵敏100倍。
缺点:所测蛋白质样品中若含酚类及柠檬酸均有干扰作用,浓度较低的尿素(约0.5%左右),胍(0。
5%左右),硫酸钠(1%),硝酸钠(1%),三氯乙酸(0.5%),乙醇(5%)乙醚(5%),丙酮(0。
5%)等溶液对显色反应影响,这些物质浓度高时必须做校正曲线。
含硫酸铵的溶液只须加浓碳酸钠-氢氧化钠溶液即可显色测定.若样品酸度较高,显色后色浅。
则必须提高碳酸钠—氢氧化钠溶液的浓度1—2倍。
三、材料、试剂与器具
(一)材料
血清:使用前稀释100%
(二)试剂
1、标准酪蛋白溶液:称取125毫克酪蛋白粉末,用0.1N氢氧化钠溶液溶解,加蒸馏水到250 毫升,则配成500微克/毫升的标准酪蛋白溶液。
2、—酚试剂甲:由下述四种溶液配制而成。
(1)4%碳酸钠溶液
(2)0.2N氢氧化钠溶液
(3)1%硫酸铜(4·5H2O)溶液
(4)2%酒石酸钾钠溶液,在使用前,将(1)和(2)等体积混合成碳酸钠—氢氧化钠溶液.将(3)与(4)等体积混合配成硫酸铜—酒石酸钾钠溶液。
然后将这两种溶液按50:1的比例混合,即为-酚试剂甲。
该试剂只能用一天,过期失效。
3.—酚试剂乙:在2升的磨口回流装置内加入钨酸钠(24·2H2O)100克,钼酸钠(24·2H2O)25克,蒸馏水700毫升,85%磷酸50毫升和浓盐酸100毫升,充分沸合后以小火回流10小时,再加入硫酸锂(24)150克,蒸馏水50毫升及数滴液体溴。
然后开口继
续沸腾15分钟,以驱除过量的溴。
冷却后定容到1000毫升,过滤,溶液呈绿色。
用—酚试剂乙滴定标准氢氧化钠溶液(1N左右)以标定-酚试剂乙的浓度。
以酚酞为指示剂。
当溶液的颜色由红色变为紫红色、紫灰,再突然转变为墨绿时,即为终点。
该试剂酸度一般为2N左右,此为贮存液。
也可以用氢氧化钠去滴定—酚试剂乙,但终点较不易掌握,此时溶液颜色由浅黄变为浅绿,再变为灰紫为终点.
使用前应予以适当稀释,使其成为1N的酸,此为—酚试剂乙使用液。
以上两液均应装于棕色瓶内,贮于冰箱中,可以长期保存.
(三)器具
1、试管及试管架
2、吸量管(1,5毫升)
3、可见光分光光度计
四、操作步骤
(一)标准曲线的制作
取12支试管,分别加入0,0。
2, 0.4, 0.6, 0.8,1。
0毫升标准酪蛋白溶液(500微克/毫升)用水补足到1。
0毫升,以上每种浓度各做一份重复,即平行做两份,按顺序向各管加入3毫升—酚试剂甲,混匀,室温下放置10分钟,再依次向各管加入0.3毫升—酚试剂乙,立即摇匀,在室温下放置30分钟,然后于500处比色。
看两个平行管的光密度值是否接近,取其平均值,以光密度(0)为纵坐标,以酪蛋白溶液浓度为横坐标,绘制酪蛋白的标准曲线。
此次实验时室温是:28℃
(2)第二组试管
(4)酪蛋白的标准曲线
现象分析:
两组试管分别加入3酚试剂甲后,试管1和1’仍显示无色透明,但从试管2至6、试管2’至6’均出现淡紫红色,并随试管序号递增依次加深(每支试管必须与试管1或1'在白色背景下才能看出淡紫红色)。
因为酚试剂甲试剂有碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜及酒石酸甲钠组成.蛋白质中的肽键在碱性条件下,与酒石酸钠铜盐溶液起作用,生成紫红色络合物,而各支试管的蛋白质浓度均不大,所以紫红色非常浅。
两组试管分别加入3酚试剂乙后,均呈现蓝色,而且随着试管序号的递增蓝色依次加深,呈现一定的梯度。
因为乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成。
此试剂在碱性条件下,易被蛋白质中的酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应,其色泽深浅与蛋白质含量呈正比。
(二)血清样品的测定
取2支试管,各加入一定量血清稀释液(应使其蛋白质含量在酪蛋白标准曲线范围之内)本实验取0。
4毫升血清稀释液,再加0.6毫升蒸馏水使样品体积达到1毫升。
其他操
现象分析:
试管1至3的血清浓度理论上是一致的,试管1和试管2测得的A值一致,不过试管2测得的A值与其它两支管的值相差较大,原因可能是加入2号试管的血清过少或蒸馏水的量过多,导致2号试管血清浓度比1号和3号试管小,最后使A值偏少。
因此2号试管的值不采用。
(三)计算
将血清样品的光密度读数在标准曲线上查出相应标准酪蛋白溶液的浓度,再折算成每毫升血清稀释液含蛋白质的微克数.然后乘以稀释倍数,得出每毫升未稀释血清蛋白质的微克数,最后打算成临床化验上通用的单位克%,即100毫升血清中含蛋白质的克数.
把血清的平均光密度值0。
154代入标准方程0。
000090.516中的y
即可得x值为114,再把114代入以下方程
6
2.5100(/100)10010ml ⨯⨯=⨯标准曲线查得值血清蛋白含量克 则实验的血清蛋白含量为:0.0285(克/100)
五、讨论
1、分光光度计的结构
分光光度计是一种靠光栅或棱镜提供单色光的,复杂、精巧的仪器。
它不仅能在可见 光区测定有色物质的吸收光谱,而且也能在紫外光区和红外光区测定无色物质的吸收光 谱。
分光光度计的种类很多,其原理和结构基本相似,一般都包括以下几个部件: (1)光源 分光光度计上常用的光源有两种,即钨灯和氢灯(或氘灯).在可见光区, 近紫外光区和近红外光区常用钨灯;在紫外光区,多使用氢灯(或氘灯)。
(2)单色器 它是把混合光分解为单一波长光的装置.多用棱镜或光栅作为它的色
散元件。
光波通过棱镜时,不同波长的光折射率不同,波长愈短,折射率则愈大,反之,波 长愈长,折射率则愈小,因而能将不同波长的光分开.
(3)吸收池(比色皿、比色池)一般由玻璃、石英和熔凝石英制成,用来盛被测试的 溶液。
(4)检测器 由光电池、光电管、光电倍增管组成.
(5)测量装置 以电流表、波长分度盘和测量读数盘的形式输出测量结果,现代的仪 器常附有自动记录器,可自动描出记录曲线。
2、比色皿的使用和清洗 分光光度计比色皿类型多样,但最常用的是光径1方形杯.由于330以下的光不能透过玻璃比色皿,紫外光区测量时要用石英比色皿。
同组使用的比色皿必须配套,以装有纯溶剂的比色皿,在试验波长下,测定光吸收是否一致而进行挑选、搭配。
比色皿四面仅有两面系光滑透明,具有光学性质,另两面则无,它们常以磨玻璃为材 料,以示区别.比色皿光学表面不能有任何污损,否则会引起光吸收的增加。
比色皿中所盛溶液不能太少,否则光路不能透过待测溶液;但也不能太多,否则溶液
易洒出,从而污损或腐蚀仪器,一般所盛液体约占全部容积的2/3。
每次使用后,应立即倒空或以吸液泵吸干,然后用水冲洗比色杯3-4次。
比色皿的外表面应以高质量的柔软擦镜纸擦干净,不能使用易磨损比色皿的普通纱布。
3、加入—酚试剂时的注意事项
—酚法所用的试剂是由两部分组成,试剂甲相当于双缩脲试剂,可与蛋白质中的肽键起显色反应,试剂乙(磷钼酸和磷钨酸混合液)在碱性条件下极不稳定,易被铜-蛋白质复合物还原成钼蓝和钨蓝。
因此,在进行测定时加—酚试剂要特别小心,因为—酚试剂乙仅在酸性条件下稳定,但上还原反应只是在10的条件下发生,故当—酚试剂乙加到碱性的铜—蛋白质溶液中时,必须立即混匀。
以便在磷钼酸—磷钨酸试剂被破坏之前,(还原反应即能发
生)能有效地被2+—蛋白质结合物所还原.
4、其它侧蛋白质浓度的方法
总氮量的测定、双缩脲法、紫外线法、染色法。
六、小结
1、在对两组试管分别加进酚试剂甲后只是每支拿起来直接观看,所以没有看到颜色,当老师提醒后,在白色背景依次拿2至6号试管与1号试管对照才发现2至6号试管是带有淡淡
的紫红色的,第二组的现象相似.所以以后做实验必须非常小心,否则会漏了某些现象.
2、用分光光度计对各组溶液进行测定时,只是用了空的比色杯进行调零,而没有用装了蒸馏水的比色杯,因此对后来各溶液测定的A值造成一定的影响,可能存在一定的误差。
由于预习不够仔细,不知道需要用怎样的空白对照组,不过以后肯定会吸取此次教训。
参考文献:
[1]王晓华,朱文渊.生物化学与分子生物学实验技术[M].北京:化学工业出版社,2008:10-14
[2]李建武.生物化学实验原理和方法[M]。
北京:北京大学出版社,1994:107-115。