缓冲液配制方法
常见缓冲液配制方法
常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂，主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内，有利于提高反应效率。
缓冲液有许多种，其配制方
法也多种多样。
下面将介绍常见缓冲液的配制方法，包括常用缓冲液的配
制方法，复合缓冲液的配制方法，以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。
二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。
比如，将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合，可以
得到一种磷酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液，可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合，以得
到其pH值为2.12的缓冲液。
2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。
比如，将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合，可以
得到一种碳酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液，可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。
3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。
缓冲液配制及注意事项
缓冲液配制及注意事项
缓冲液配制及注意事项
一、定义
缓冲液是一种有机水溶液，其pH值可以在一定范围内稳定。
缓冲液主要分为碱性缓冲液和酸性缓冲液，常用的缓冲液有磷酸-碳酸滴定液、氢氧化钠滴定液、氢氧化钾滴定液等。
二、缓冲液的配制
1、磷酸-碳酸滴定液
磷酸-碳酸滴定液的pH在4～6之间，该液体没有固体溶解度，只能通过溶质溶解来溶解自身，所以要配制磷酸-碳酸滴定液，首先要准备一定的浓度的碳酸氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液，然后根据实验需要选择相应的浓度比例，将两种溶液混合，即可得到磷酸-碳酸滴定液。
2、氢氧化钠滴定液
氢氧化钠滴定液的pH为7，只要准备一定浓度的氢氧化钠溶液，就可以得到氢氧化钠滴定液，由于氢氧化钠能溶解固体，因此，可以将一定物质的固体溶解于氢氧化钠溶液，从而得到一种比较稳定的氢氧化钠滴定液。
3、氢氧化钾滴定液
氢氧化钾滴定液的pH在8～9.5之间，可以通过准备一定浓度的氢氧化钾溶液来得到氢氧化钾滴定液，也可以将一定比例的氢氧化钠溶液和氢氧化钾溶液混合，用离子选择膜将氢离子从氢氧化钠溶液中
筛除，得到浓度为4mol/L的氢氧化钾滴定液。
三、缓冲液的注意事项
1、配制缓冲液时应注意操作步骤，尤其不要添加过多的溶剂。
2、配制的缓冲液应该达到一定的酸碱度，保持比较稳定的pH值，避免极端的酸碱度对实验影响，使实验结果准确可靠。
3、配制的缓冲液必须及时使用，避免受到外来因素的影响，使其滴定性能发生变化。
4、使用缓冲液时应该注意安全，尤其是有机缓冲液，要避免皮肤接触，以免受到烫伤。
缓冲液的配制方法
核酸电泳【2 】相干试剂.缓冲液的配制办法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸,100 mM EDTA配制量 1 L配制办法 1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中.2.3.参加57.1 ml的乙酸,充分搅拌.4.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存.10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度 890 mM Tris-硼酸,20 mM EDTA配制量 1 L配制办法 l.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2.3.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存.10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS,20 mM NaOAc,10 mM EDTA配制量 1 L配制办法 1.称41.8 g MOPS,置于1 L烧杯中.2.加约700 ml DEPC处理水,搅拌消融.3.应用2 N NaOH调节pH值至7.0.4.再向溶液中参加下列试剂.5.用6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质.7.室温避光保存.注：溶液见光或高温灭菌后会变黄.变黄时也可应用,但变黑时不要应用.溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制办法 1.称量1 g溴乙锭,参加到100 ml容器中.2.参加去离子水100 ml,充分搅拌数h完整消融溴乙锭.3.将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存.4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml.留意：溴乙锭是一种致癌物资,必须当心操作.Agarose凝胶配制办法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(平日是0.5×TBE或1×TAE).2.根椐制胶量及凝胶浓度,精确称量琼脂糖粉,参加恰当的锥形瓶中.3.参加必定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量).注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须同一.4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜,并在膜上扎些小孔,然后在微波炉中加热融化琼脂糖.加热进程中,当溶液沸腾后,请戴上防热手套.当心动摇锥形瓶.使琼脂糖充分平均融化.此操作反复数次,直至琼脂糖完整融化.必须留意,在微波炉中加热时光不宜过长,每次当溶液起泡沸腾时停滞加热,不然会引起溶液过热暴沸,造成琼脂糖凝胶浓度不准,也会破坏微波炉.融化琼脂糖时,必须保证琼脂糖充分完整融化,不然,会造成电泳图像隐约不清.5.使溶液冷却至60℃阁下,如须要可在此时参加溴乙锭溶液(终浓度0.5 µg/ml).并充分混匀.注：溴乙锭是一种致癌物资.应用含有溴乙锭的溶液时,请戴好手套.6.将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在恰当地位处插上梳子.凝胶厚度一般在3~5 min之间.7.在室温下使胶凝固(大约30 min~1 h),然后放置于电泳槽中进行电泳.注：凝胶不立刻应用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存,一般可保存2~5天.琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辩规模6×Loading Buffer(DNA电泳用)组份浓度配制量配制办法 1.称量下列试剂,置于500 ml烧杯中.2.3.参加180 ml的甘油(Glycerol)后,应用2 N NaOH调节pH值至7.0.4.用去离子水定容至500 ml后,室温保存.10 × Loadlng Buffer(RNA电泳用)组份浓度配制置配制办法 1.称量下列试剂,置于10 ml离心管中.2.3.参加5 ml的甘油(Glycerol)后,充分混匀.4.用DEPC处理水定容至10 ml后,室温保存.四.核酸.蛋白质杂交用相干试剂.缓冲液的配制办法20×SSC组份浓度 3.0 M NaCl,0.3 MNa3citrate·2H2O(柠檬酸钠)配制量 1 L配制办法 1.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2.3滴加14 N HCl,调节pH值至7.0后,加去离子水将溶液定容至1 L.4.高温高压灭菌后,室温保存.20×SSPE Buffer组份浓度 3.0 M NaCl,0.2 M NaH2PO4,0.02 M EDTA配制量 1.L配制办法 1.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2. 3.加NaOH 调节pH 值至7.4(约6.5 ml 的10 N NaOH). 4.加去离子水将溶液定容至l L. 5.高温高压灭菌后,室温保存.50 X Denhardt’S 溶液 组份浓度 配制量 500 ml 配制办法 1.称量下列试剂,置于500 ml 烧杯中. 2.加去离子水约400 ml,充分搅拌消融3.加去离子水将溶液定容至500 ml.4.用0.45µm 滤膜过滤后,分装成每份25 ml.5.-20℃保存.0.5 M 磷酸盐Buffer 组份浓度 0.5 M Na 2HPO 4. 配制量 l L配制办法 1.称量134 g Na 2HPO 4·7H 2O 置于l L 烧杯中. 2.参加约800 ml 的去离子水充分搅拌消融. 3.参加85%的H 3PO 4(浓磷酸)调节溶液pH 值至7.2. 4.加去离子水定容至1 L. 5.高温高压灭菌后,室温保存.Salmon DNA (鲑鱼精DNA)组份浓度 10 mg/ml Salmon DNA配制量约100 ml配制办法 1.称取鲑鱼精DNA 2 g置于500 ml烧杯中,参加约200 ml的TE Buffer.2用磁力搅拌器室温搅拌2~4h,消融后参加4 ml的5 M NaCl,使其终浓度为0.1 M.3.用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次.4.收受接管水相溶液后,应用17号皮下打针针头快速吸打溶液约20次,以割断DNA.5.参加2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀.6.离心收受接管DNA后,消融于100 ml的去离子水中.测定溶液的OD260值.7.盘算溶液的DNA浓度后,稀释DNA溶液至10 mg/ml.8.煮沸10min后,分装成小份(1 ml/份).-20℃保存.9.应用前在滚水浴中加热5min后,敏捷冰浴冷却.DNA变性缓冲液组份浓度 1.5 M NaCl,0.5 M NaOH配制量 1 L配制办法 1.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2.3.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存.预杂交液/杂交液(DNA杂交用)组份浓度Array配制置 100 ml配制办法 1.称量下列试剂,置于200ml烧杯中.分混匀后,应用质后应用.(RNA 杂交用)组份浓度 配制量 100 mL 配制办法 1.称量下列试剂,置于200ml 烧杯中.分混匀后,应用杂质后应用.(Western 杂交用)组份浓度 39 mM Glycine,48 mM Tris,0.037%(W/V)SDS,20%(V/V)甲醇 配制量 1 L配制办法 1.称量下列试剂,置于l L 烧杯中.2. 3.加去离子水将溶液定溶至800 ml 后,参加200 ml 的甲醇. 4.室温保存.TBST Buffer(Western 杂交膜清洗液)组份浓度 20 mM Tris-HCl,150 mM NaCl,0.05%(V/V)Tween 20 配制量 1 L配制办法 1.称量下列试剂,置于l L 烧杯中.2.3.参加0.5 ml Tween 20后充分混匀.4.加去离子水将溶液定容至l L后,4℃保存.关闭缓冲液(Western杂交用)组份浓度 5%(W/V)脱脂奶粉/TBST Buffer配制量 100 ml配制办法 1.称5 g脱脂奶粉参加到100 mlTBST Buffer中,充分搅拌消融.2.4℃保存待用(本关闭液应当现配现用).五.试验室常用造就基的配制办法Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)组份浓度 100 mg/ml Ampicillin配制量 50 ml配制办法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中.2.参加40 ml灭菌水,充分混杂消融后,定容至50 ml.3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌.4.小份分装(1 ml/份)后,-20℃保存.IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)组份浓度 24 mg/mL IPTG配制量 50 mL配制办法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中.2.参加40 ml灭菌水,充分混杂消融后,定容至50 ml.3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌.4小份分装(1 ml,份)后,-20℃保存.X-Gal (20 mg/ml)组份浓度 20 mg/ml X-Gal配制量 50 ml配制办法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中.2.参加40 ml DMF(二甲基甲酰胺),充分混杂消融后,定容至50 ml.3.小份分装(1 ml/份)后,-20℃避光保存.LB造就基组份浓度 1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨),0.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物),1%(W/V)NaCl 配制量 1 L配制办法 1.称取下列试剂,置于l L烧杯中.2.3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1),调节pH值至7.0.4.加去离子水将造就基定容至1 L.5高温高压灭菌后,4.C保存.LB/Amp造就基组份浓度配制量 1 L配制办法 1.称取下列试剂,置于l L烧杯中.2.3.滴加5 N NaOH(约0.2 mL).调节pH值至7.0.4.加去离子水将造就基定容至1 L.5.高温高压灭菌后,冷却至室温.6.参加1 ml Ampicillin(100 mg/ml)后平均混杂.7.4℃保存.TB造就基组份浓度配制量 1.L配制办法 1.配制磷酸盐缓;中液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml.消融2.31 g KH2PO4和l2.54 g K2HPO4于90 ml的去离子水中,搅拌消融后,加去离子水定容至100 ml,高温高压灭菌.2.称取下列试剂,置于l L烧杯中.3.4.加去离子水将造就基定容至1 L后,高温高压灭菌.5.待溶液冷却至60℃以下时,;参加100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液.6.4℃保存.TB/Amp造就基组份浓度配制量 1 L配制办法 1.配制磷酸盐缓冲液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml.消融2.31 g KH2PO4,和12.54g K2HPO4于90 ml的去离子水中,搅拌消融后,加去离子水定容至100 ml,高温高压灭菌.2.称取下列试剂,置于l L烧杯中.第11页，－共11页。
常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。
2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。
3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。
4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。
配制方法如下：- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。
5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。
以上是一些常见的缓冲溶液配制方法，具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。
在配制缓冲溶液时，一定要注意使用高纯度的试剂，并按照配制方法进行准确的实验操作。
缓冲液配制方法
25.5
5.8
42.3
4.5
8.7
5.2
28.8
5.9
43.7
4.6
11.1
5.3
31.6
4.7
13.6
5.4
34.1
邻苯二甲酸氢钾Mr = 204.23，0.1mol/L溶液为20.42g/L
9．磷酸盐缓冲液
(1)磷酸氢二钠—磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L）
pH
0.2mol/L
Na2HPO4/ml
pH
Na＋浓度
/mol/L
柠檬酸/g
C6H8O7·H2O
氢氧化钠/g
NaOH(97%)
盐酸/ml
HCl(浓)
最终体积/L*
2.2
0.20
210
84
160
10
3.1
0.20
210
83
116
10
3.3
0.20
210
83
106
10
4.3
0.20
210
83
45
10
5.3
0.35
245
144
68
10
5.8
0.45
50
11.0
10.0
50
43.0
9.6
50
23.0
10.1
50
46.0
硼砂Na2B4O7·10H2O，Mr = 381.43，0.05mol/L溶液为19.07g/L
硼砂/ml
0.2mol/L
硼酸/ml
7.4
1.0
9.0
8.2
3.5
6.5
7.6
1.5
46种缓冲液配制
46种缓冲液配制1.乙醇－醋酸铵缓冲液取5mol/L醋酸溶液，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调剂pH值至，用水稀释至1000ml，即得。
2.三羟甲基氨基甲烷缓冲液取三羟甲基氨基甲烷,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调剂pH值至,即得。
3.三羟甲基氨基甲烷缓冲液取氯化钙,加L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调剂pH值至，加水稀释至100m l，即得。
4.三羟甲基氨基甲烷缓冲液取三羟甲基氨基甲烷,加盐酸赖氨酸、氯化钠、乙二胺四醋酸二钠，再加水溶解使成1000ml，调剂pH值至，即得。
5.乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液，再用水稀释至250ml,即得。
6.巴比妥缓冲液取巴比妥钠,加水使溶解并稀释至400ml，用2mo l/L盐酸溶液调剂pH值至，滤过，即得。
7.巴比妥缓冲液取巴比妥与巴比妥钠,加水使溶解成2000ml，即得。
8.巴比妥－氯化钠缓冲液取巴比妥钠,加氯化钠及水适量使溶解,另取明胶加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用L盐酸溶液调剂pH值至，再用水稀释至500ml，即得。
9.甲酸钠缓冲液取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调剂pH值至～,即得。
10.邻苯二甲酸盐缓冲液取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调剂pH值至,加水稀释至1000ml，混匀，即得。
11.枸橼酸盐缓冲液取枸橼酸,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml，即得。
12.枸橼酸盐缓冲液取％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调剂pH值至，即得。
13.枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保留。
各种缓冲液的配制方法_
各种缓冲液的配制方法_
一、磷酸缓冲液的配制方法
1.准备：蒸馏水或纯净水、磷酸二铵，滴定级别不低于AR级；
2.计算配制用量：根据实验要求，计算出所需磷酸二铵的总量，用m1表示（单位：克）；
3.将磷酸二铵加入蒸馏水或纯净水中，用称取出适量的磷酸二铵，用m2表示（单位：克），加入搅拌槽中，充分搅拌均匀，然后加入剩余的磷酸二铵（m3=m1-m2，单位：克），继续搅拌；
4.检查温度：温度应大于室温；
5.检查pH值：用pH计测量溶液的pH值，调整到与实验要求相符的值；
6.搅拌均匀，过滤，储存，可使用或直接投放使用；
二、碳酸缓冲液的配制方法
1.准备：蒸馏水或纯净水、碳酸氢钠，滴定级别不低于AR级；
2.计算配制用量：根据实验要求，计算出所需碳酸氢钠的总量，用m1表示（单位：克）；
3.将碳酸氢钠加入蒸馏水或纯净水中，用称取出适量的碳酸氢钠，用m2表示（单位：克），加入搅拌槽中，充分搅拌均匀，然后加入剩余的碳酸氢钠（m3=m1-m2，单位：克），继续搅拌；
4.检查温度：温度应大于室温；
5.检查pH值：用pH计测量溶液的pH值。
各种缓冲液配制方法
各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂，可以帮助维持溶液的酸碱度。
下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。
一、甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸，加入适量的水稀释至200毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至3.6之间，X和Y的取值见上表。
二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸，加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至3.8之间，X和Y的取值见上表。
三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法：根据上表中的数据，取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸，加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至8.0之间，具体取值见上表。
以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。
在实验过程中，正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。
以下是已经修改好的文章：柠檬酸的浓度可以用毫升表示，其浓度数据如下：9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4，其分子量为141.98，0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。
而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05，0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。
最后，Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22，0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。
对于C6H8O7·H2O，其分子量为210.14，0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。
以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据：pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L)：10使用时可以每升中加入1克酚。
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1、1M TrisHCl * 组份浓度1M TrisHCl （pH7.4，7.6，8.0）* 配制量1L* 配置方法1.称量121.1gTri s置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表量加渗入渗出浓盐酸调节所需要的pH 值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4.将溶解定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5M TrisHCl *组份浓度1.5M TrisHCl （pH8.8）*配制量1L*配置方法1.称取181.7gTri s置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调pH 值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃。
溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer *组份浓度100 mM TrisHCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）*配制量1L*配置方法1.量取下列溶液。
置于1L烧杯中。
1M TrisHClBuffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500 mM EDTA（pH8.0）20mL2.向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定至1L后。
高温高压灭菌。
4.室温保存。
4、3 M 醋酸钠*组份浓度3M 醋酸钠（pH5.2）*配制量100mL*配置方法1.称取40.8gNaOAc.3H2O置于100～200mL烧杯中。
加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3.加入去离子水将溶液定容至100mL。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
5、PBSBuffer*组份浓度137mM NaCl，2.7mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4*配制量1L*配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。
NaCl 8 gKCl 0.2gNa2HPO4 1.42 gKH2PO4 0.27g2.向烧杯中加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.滴加HCl将pH 值调节至7.4。
然后加入去离子水将溶液定容至1L。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mM CaCl2 和0.5mM MgCl2。
6、10 M 醋酸铵*组份浓度10M 醋酸铵*配制量100mL*配置方法1.称量77.1g 醋酸铵置于100～200 mL烧杯中，加入约30mL 的去离子水搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至100mL。
3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.密封瓶口于室温保存。
注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。
7、TrisHCl平衡苯酚*配置方法1.使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。
但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。
同时也应避免使用结晶苯酚。
结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物。
这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。
因此，苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要。
我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。
2.操作注重：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤。
操作时应戴手套及防护镜等。
所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。
3.苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上，苯酚平衡操作方法如下：①液化苯酚应贮存于20℃，此时的苯酚呈现结晶状态。
从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。
②加入羟基喹啉（8Quinolinol）至终浓度0.1％。
该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色。
有助于方便识别有机相。
③加渗入渗出等体积的1M TrisHCl（pH8.0），使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。
④重复操作步骤③。
⑤加入等体积的0.1M TrisHCl（pH8.0）。
使用磁力搅拌器搅拌15分钟。
静置使其充分分层后。
除去上层水相。
⑥重复操作步骤⑤，稍微残留部分上层水相。
⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。
⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。
8、苯酚/氯仿/异戊醇*配置方法1.说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/氯仿/异戊醇（25：24：1）。
氯仿可使蛋白（25 ：24 ：1）质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
2.配置方法：将TrisHCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24：1）均匀混合后，移渗入渗出棕色玻璃瓶中4℃保存。
9、10％（W/V）SDS *组份浓度10％（W/V）SDS *配制量100mL*配置方法1.称量10g高纯度的SDS 置于100～200mL烧杯中，加入约80mL的去离子水，68℃加热溶解。
2.滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。
3.将溶液定容至100mL后，室温保存。
10、2 N NaOH *组份浓度2N NaOH *配制量100mL*配置方法1.量取80mL去离子水置于100～200mL塑料烧杯中（NaOH溶解过程中大量放热。
有可能使玻璃烧杯炸裂）。
2.称取8g NaOH 小心地逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌。
3.待NaOH完全溶解后，用去离子水将溶液体积定容至100mL。
4.将溶液转移至塑料容器中后。
室温保存。
11、2.5N HCl *组份浓度2.5 N HCl *配制量100mL*配置方法1.在78.4mL的去离子水中加入21.6mL的浓盐酸（11.6N），均匀混合。
2.室温保存。
12、5 M NaCl *组份浓度5M NaCl *配制量1L*配置方法1.称取292.2gNaCl置于1L烧杯中，加入约800mL的去离子水后搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至1L后，适量分成小份。
3.高温高压灭菌后，4℃保存。
13、20％（ W/V）Glucose *组份浓度20％（W/V）Glucose *配制量100mL*配置方法1.称取20gGlucose 置于100～200mL烧杯中，加入约80mL的去离子水后。
搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至100mL。
3.高温高压灭菌后，4℃保存。
14、Solution I *组份浓度25mM TrisHCl（pH8.0），10mM EDTA，50mM Glucose （质粒提取用）*配制量1L*配置方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1M TrisHCl（pH8.0）25mL0.5M EDTA（pH8.0）20mL20％Glucose（1.11M）45mLdH2O 910mL2.高温高压灭菌后，4℃保存。
3.使用前每50mL的Soliution I中加渗入渗出2mL的RNase A （20mg/mL）。
15、Solution II *组份浓度250mM NaOH。
1％（W/V）SDS （质粒提取用）*配制量500mL*配置方法1.量取下列溶液置于500mL烧杯中。
10％SDS 50mL2N NaOH 50mL2.加灭菌水定容至500mL，充分混匀。
3.室温保存。
此溶液保存时间最好不要超过一个月。
注重：SDS易产生气泡。
不要剧烈搅拌。
16、Solution III *组份浓度3M KOAc，5M CH3COOH （质粒提取用）*配制量500mL *配置方法1.量取下列溶液置于500mL烧杯中。
KOAc 147gCH3COOH 57.5mL2.加入300mL去离子水后搅拌溶解。
3.加去离子水将溶液定容至500mL。
4.高温高压灭菌后，4℃保存。
17、0.5M EDTA *组份浓度0.5M EDTA (pH8.0) *配制量1L*配置方法1.称取186.1g Na2EDTA.2H2O，置于1L烧杯中。
2.加渗入渗出约800mL的去离子水，充分搅拌。
3.用NaOH调节pH 值值8.0（约20gNaOH）。
注意：pH 值至8.0时，EDTA 才能完全溶解。
4.加去离子水将溶液定容至1L。
5.适量分成小份后，高温高压灭菌。
6.室温保存。
18、1 M DTT *组份浓度1M DTT *配制量20mL*配置方法1.称取3.09gDTT。
加入到50mL塑料离心管内。
2.加20mL的0.01 M 的NaOAc（pH5.2）。
溶解后使用0.22μm滤器过滤除菌。
3.适量分成小份后，20℃保存。
19、10mM ATP *组份浓度10mM ATP *配制量20mL*配置方法1.称取121mg Na2ATP.3H2O，加入到50mL塑料离心管内。
2.加20mL的25mM TrisHCl（pH8.0），搅拌溶解。
3.适量分成小份，20℃保存。