修饰血红素提高血红蛋白类过氧化物酶活性
碱性条件下氯化血红素模拟过氧化物酶的研究
血 红素是 血红蛋 白 、 肌红 蛋 白和 红细胞 的辅基 ， 是一
烯醚 （ ａ３ ）十二烷基硫酸钠（ Ｄ ）Ｓｓ 公 司）过氧化 Ｂ ｊ５ 、 Ｓ Ｓ（ｌ ￣ ， 氢、 苯酚红 、 氢氧化钠为 国产分析纯试剂 ， 实验 用水为三次
蒸馏水 。
１ ． 实 验方 法 ２
种 广泛存 在于人 和动物血 液及肌 肉中的具有 卟啉结 构 的 小分子 ， 卟啉分 子中 由四个 吡咯环上 的氮原子与 一个亚 在
刘 凡 ， 张智锦 ， 阳建奇
（ 乐山师范学院 化 学与生命科 学学院， 四川 乐山 ６４ ０ ） １０４
摘
要： 文章研 究 了氯 化血红素 （ ｅ ｉ ） 为模 拟过氧 化物酶在 ［ａ Ｈ ＝ ．１ ｌ－ ｌ Ｈ ｒｎ作 ｏ Ｎ ０ 】３８ ｘ Ｏ％ｏＬ的水溶液及胶 束溶液 （ ｒ３ ／ ／ Ｂｉ ５ ｊ
在 ＮＯ ａ Ｈ水溶液及胶束 溶液 中， 用紫外分光 光度法测
定 Ｈ ｍｎ 化 Ｉ０ 氧化苯酚红反 应的体系吸 光度随时 间 ｅ ｉ催 －： Ｉ ２
变化 的 Ａ ｔ ～ 曲线 。根 据实验中记录 的 Ａ ｔ — 曲线 ， 由初始速 率法【 出反应 的初 速度 ｖ， ６ 求 ｏ即：
Ｔ 一９ １ Ｕ １０ 紫外可见 分光光度计 （ 带恒温 装置 ， 京普 北
级 速 率 常 数 （ｏ ） ｋｂ
Ｔ ｂ ｅ １ ｈ ｂ ｅ ｖ ｄ ｆｒｔ ｏ ｄ ｒ ｒ ｔ ｏ ｓ ｎ ｓ ｏ ａａ ｙ ｉ ａ ｌ Ｔ ｅ ｏ ｓ ｒ ｅ ｓ － ｒ ｅ ａｅ ｃ ｎ ｔ ｔ ｆｃ ｔｌ ｔ ｉ ａ ｃ
基金项 目： 四川省教 育厅科研基金 资助项 目（８ｅ ３ ） ０ ｚ０ ８ 。
作者 简介 ： 刘凡 （９ 一 ， ， １ ６ ） 男 乐山师范 学院化 学与生命科 学学院高级 实验师 ， 究方向： 面化 学及 化学动力学。 ４ 研 表
血红蛋白的生物学特性
血红蛋白的生物学特性作者：任雪平来源：《科教导刊》2011年第33期摘要有研究表明，血红蛋白不仅具有运输氧和二氧化碳的功能,而且还具有储存能量、维持血液渗透压和血压、调节血浆酸碱平衡、抗菌、类氧化酶和过氧化酶活性的作用,属于多功能蛋白。
血红蛋白已成为研究蛋白质多重生物学功能的理想模式分子。
关键词血红蛋白生物学功能中图分类号：Q74文献标识码：A动物在呼吸时，氧气和二氧化碳都要由血液内的特殊运载蛋白来运输。
这类参与动物呼吸作用的蛋白质家族统称为呼吸蛋白。
Hb是呼吸蛋白家族的成员之一。
Hb的主要功能是运输氧和二氧化碳,近年的研究表明，Hb还具有储存能量、维持血液渗透压和血压、调节血浆酸碱平衡、抗菌、类氧化酶和过氧化酶活性的作用,属于多功能蛋白。
Hb已成为研究蛋白质多重生物学功能的理想模式分子。
1 Hb的结构特点血红蛋白（hemoglobin，Hb）是生物体内负责运载氧的蛋白质，也是红细胞中唯一一种非膜蛋白。
Hb由四个亚基构成，每个亚基由一条肽链和一个血红素分子构成，肽链在生理条件下盘绕折叠成球形结构称之为珠蛋白，珠蛋白把血红素分子抱在里面。
血红素是一个具有卟啉结构的小分子，在卟啉分子中心，由卟啉中四个吡咯环上的氮原子与一个Fe2+ 配位结合，珠蛋白肽链中第8位的组氨酸残基中的吲哚侧链上的氮原子从卟啉分子平面的上方与Fe2+配位结合，Fe2+居于环中，Fe2+的6个配位键中有4个与吡咯环的N配位结合，1个与近端的HisF8结合，第6个用来结合O2等外源性配体，未结合配体时该配位键是空的，故生理状态下Hb的血红素-铁是“五配位”形式。
当Hb不结合氧分子时，就有一个水分子从卟啉环下方与Fe2配位结合，4个珠蛋白亚基之间的相互作用力很强,因此没结合氧的血液呈淡蓝色。
当Hb 与氧结合时，则一个氧分子就顶替了水分子的位置形成氧合血红蛋白(HbO2)，使血液呈鲜红色。
每个珠蛋白结合1个血红素，其Fe2+可逆地结合1个氧分子。
影响酶联免疫吸附试验检测结果的原因分析及应对措施
影响酶联免疫吸附试验检测结果的原因分析及应对措施酶联免疫（EliSA）是检验科目前常用的免疫学检测方法之一，其操作方便、简单，不须要特殊设备，使其在各级医院都可应用。
但如果忽视了影响其结果的因素，难免会造成假阴性或假阳性的结果。
因此了解影响结果的因素，是减少差错事故发生很必要的。
1实验室操作人员的基本素质因素实验室人员的素质主要包括五个方面：思想素质、文化素质、技术素质、心理素质、身体素质。
因为我们是为人服务的，所以我们的职业道德水平直接关系到人们的生命健康和生命安全。
如果在工作中出现了张冠李戴，就有可能造成严重后果。
其次文化素质和技术素质很重要，我们必须熟练掌握本专业的基本理论和操作技术。
还要不断努力学习新的理论知识，努力提高业务水平。
有良好的心理素质勇于面对工作中的挫折，在繁忙工作中有条不紊。
所以人员素质问题对检验结果有重要的影响因素。
2标本处理因素实验室人员收到标本后应：“三查七对”，对不符合要求的标本和申请单拒收，合格标本及时分离血清，避免溶血。
提取血清时不能混有大量纤维蛋白或细胞成分，对不能及时检测的标本要妥善保存于4℃冰箱，做好原始记录。
从冰箱取出的标本要预温至室温，对冰冻的样品要融化好，充分混匀再用。
3操作过程的影响因素3.1 操作前应对实验的物理参数有充分的了解，如环境温度（保持在18～25℃），反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等，各种条件必须符合要求。
3.2 正确使用加样器，加样器应垂直加入标本或试剂，避免摩擦包被板底部。
加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头要一次性使用，加样次序要与说明书一致，否则易发生错误，造成实验重复性差。
3.3 手工洗板加洗液时冲击力不能太大，洗涤次数不超过说明推荐的次数，洗涤液在反应孔内滞留的时间不宜太长。
不要让洗液造成孔间污染，导致假阴性和假阳性。
3.4 要保证加液量一致，我们在使用时感觉加样器比滴瓶加样准确，滴瓶加液量不准造成显色不一，造成判断错误。
2022生化思考题详细答案(医学本科生适用)
生物化学思考题1、叙述L-α氨基酸结构特征，比较各种结构异同并分析结构与性质的关系。
结构特点：α-氨基酸是羧酸分子的α-氢原子被氨基取代直接形成的有机化合物，即当氨基酸的氨基与羧基连载同一个碳原子上，就成为α-氨基酸。
氨基酸中与羧基直接相连的碳原子上有个氨基，这个碳原子上连的集团或原子都不一样，称手性碳原子，当一束偏振光通过它们时，光的偏振方向将被旋转，根据旋转的方向分为左旋和右旋即D系和L系，L-α-氨基酸再被骗争光照射时，光的偏正方向为左旋。
R为侧链，连接-COOH 的碳为α-碳原子为不对称碳原子（除了甘氨酸）不同的氨基酸其R基团结构各异。
根据测链结构可分为：①含烃链的为非极性脂肪族氨基酸，如丙氨酸；②含极性不带电荷的为极性中性氨基酸，如半胱氨酸；③含芳香基的为芳香族氨基酸，如酪氨酸；④含负性解离基团的为酸性氨基酸，如谷氨酸；⑤含正性解离基团的为碱性氨基酸，如精氨酸。
2、简述蛋白质一级结构、二级结构、三级结构、四级结构基本概念及各结构层次间的内在关系。
蛋白质的一级结构就是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序，也是蛋白质最基本的结构。
主要化学键是肽键，二硫键也是一级结构的范畴。
蛋白质的二级结构是指多肽链中主链原子的局部空间排布即构象，不涉及侧链部分的构象。
主要化学键为氢键。
蛋白质的多肽链在各种二级结构的基础上再进一步盘曲或折迭形成具有一定规律的三维空间结构，称为蛋白质的三级结构，蛋白质三级结构的稳定主要靠次级键，包括氢键、疏水键、盐键以及范德华力等。
具有二条或二条以上独立三级结构的多肽链组成的蛋白质，其多肽链间通过次级键相互组合而形成的空间结构称为蛋白质的四级结构，其中，每个具有独立三级结构的多肽链单位称为亚基。
层次之间的关系：一级结构是空间构象的基础，决定高级结构；氨基酸的残基影响二级结构的形成，二级结构以一级结构为基础；在二级结构的基础上，肽链还按照一定的空间结构进一步形成更复杂的三级结构；具有三级结构的多肽链按一定空间排列方式结合在一起形成的聚集体结构称为蛋白质的四级结构。
生物化学试题及答案
生物化学试题及答案一名词解释1 糖苷：单糖半缩醛结构羟基可与其他含羟基的化合物（如醇、酚等）这类糖苷大多都有苦味或特殊香气，不少还是剧毒物质，但微量时可作药用。
例:苦杏仁苷HCN2. 糖脎：单糖游离羰基与3分子苯肼作用生成糖脎，各种糖脎的结晶形状与熔点都不相同，常用糖脎的生成判断糖的类型3. 糖胺聚糖：同下4.蛋白聚糖：是一种长而不分枝的多糖链，既糖胺聚糖，其一定部位上与若干肽链相连，多糖呈双糖的系列的重复结构，其总体性质与多糖更相近。
（特点：含糖量一般比糖蛋白高，糖链长而不分支作用：由于蛋白聚糖中的糖胺聚糖密集的负电荷，在组织中可吸收大量的水而具有粘性和弹性，具有稳定、支持、保护细胞的作用，并在保持水盐平衡方面有重要作用）5. 酸败：油脂是在空气中暴露过久即产生难闻的臭味这种现象称为酸败。
(酸值（价）中和1g油脂中的游离脂肪酸所需KOH的mg数。
水解性酸败：由于光、热或微生物的作用，使油脂水解生成脂酸，低级脂酸有臭味，称水解性酸败。
氧化性酸败：由于空气中的氧使不饱和脂酸氧化，产生醛和酮等，称氧化性酸败。
)6. 碘价：指100克油脂与碘作用所需碘的克数。
7. 鞘磷脂：即鞘氨醇磷脂，由一个鞘氨醇、一个脂肪酸、一个磷酸、一个胆碱或乙醇胺组成。
8. 卵磷脂：磷脂酰胆碱也称卵磷脂，卵磷脂的结构中极性部分是胆碱，胆碱成分是是一种季铵离子。
卵磷脂是生物膜的主要成分之一。
胆固醇：胆固醇又称胆甾醇。
一种环戊烷多氢菲的衍生物。
甾核C3有一个羟基，C17有8个碳的侧链，C5 ~ C6有一双键。
（胆固醇主要存在于动物细胞，是生物膜的主要成分，也是类固醇激素和胆汁酸及维生D3的前体，过多引起胆结石、动脉硬化等）9. 凯氏定氮法：100克有机物中蛋白质的含量=1克样品中含氮的克数×6.25×100.10.茚三酮反应：茚三酮在弱酸性溶液中与氨基酸共热引起氨基酸氧化脱氨、脱羧反应，最后茚三酮与反应产物发生作用，生成蓝紫色物质。
CTAB对血红蛋白仿过氧化物酶催化活性的影响
Ｓｏ ０８ ｅ． ０ ２
中 国科 技 论 文 在 线
Ｓ ＩＮ Ｐ Ｅ Ｃ Ｅ ＣＥ ＡＰ Ｒ０ＮＬＮＥ Ｉ
第３ 第 期 卷 ９
２ ０ 年 ９月 ０８
ＣＩ Ｂ对血红 蛋 白仿过氧化物酶催化活性 的影 响 － － Ａ
沈 丹 ， － ，刘 继伟 ，缪煜 清
２ Ｉｓｉ ｔ ｏ Ｐ ｙ ｉａ ｅ ｓＧ， ｈ ｊ ｎ ｒ ｌ ｎｖ ｒｉ ， ｈ ａ Ｚ ｅｉｎ ２ ０ ４ ．ｎ ｔｕｅ ｆ ｈ ｓｃ ｌ ｍｉｔ Ｚ ｅｉ ｇＮｏ ｍａ ｉｅｓｔ ￣ｎ ｕ ， ｈｊａ ｇ３ １ ０ ） ｔ Ｃｈ ａ Ｕ ｙ
Ａｂ ｔａ ｔ ｓ ｒ ｃ ：Ｔｈ ｅ ｏ ｉａ ｃｌｋ ａ ａｙｉ ｃｉｉｙ ｏ ｅ ｏ ｌｂｉ ｏ ｏ ｉ ａｉ ｎｏ ａｅ ｈ ｌ ｓｓｕ ｉｄ ｉ ｈ ｓｐ ｐ ｒ Ｔ ｅ ｅｐ ｒ ｘｄ ｓ －ｉ ｅｃ ｔｌ ｔ ａ ｔｖｔ ｆｈ ｍ ｇｏ ｎ ｔ ｘ ｄ ｔｏ ｆｃ ｔｃ ｏ ｔ ｄ ｅ ｎｔ ｉ ａ ｅ ． ｃ ｉ ｈ
物 酶 又 称 触 酶 ，是 一 类 广泛 存 在 于 动 物 、植 物 和 微
生物体内的末端氧 酶 ．酶 分子 结均由台有铁卟啉 匕
环 ，ｌ，分子 酶 蛋 白 中 含有 ４个铁 子 。过 氧 化物 ＼
与乇机催 ｆ剂铌 ，它具 有岛教 、专一 、多坶卡 涅 Ｌ 口 阳［ 搏 ： Ｈ Ｌ ｒ ＝ ＿ ｌ ＝ 皇 － ， 摆ｔ 酶瞧 ￡ 眨：暑 芎高 ｊ 催
性和 反应条件 ，并探讨 了表面活性剞对酶催化反应的影， 甸及可能梗理，稳 态速率法测定了米氏常数（ ）、米 氏速 率（ ）爰≮壹坂教等功力学参数。试验表 明本体 系在阳离子表面活 ｌ Ｊ Ｔ Ｂ 在和ｐ Ｏ３ 的条件下形 生￣Ｃ Ａ 存 Ｈｌ． 成的产物 在 ２ ８ｎ 。 ５ ｍ壹 有最女的吸收峰。 关键词 ：有机化学 ；血红蛋 白；过 氧化物酶 ；邻苯二酚；表面活性剂 ・
猪血中主要功能成分的制备、修饰及应用研究进展
排列形式组成的复杂线性、环形结构的不同肽类的统 称,具有增强免疫、抑菌、激素调节、抗病毒、降血脂、降 血压等功效叫传统的猪血红蛋白肽的分离提取方法
破胞
酶解分离T上清液—血球蛋白
沉淀一＞ 提取红血素 主要是通过胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶等酶 解成小分子肽阴。例如张凤英问通过不同酶水解猪血 红蛋白制备抗氧化肽的比较,发现中性蛋白酶分离提 取效果明显高于胰蛋白酶、木瓜蛋白酶。王鹏口哒一步 通过优化酶解条件结合纳米纤维素膜、超滤膜等分离 工艺优化提纯到小分子肽，而且膜通量回复率高，适 合用于血红蛋白粉制备降血压活性肽的工业化生产。
Research Progress into the Preparation, Modification and Application of the Main Functional Components in Porcine Blood
WU Jin-song, XU Mei-juan, WANGXiao-fang, CHEN Xiao-pei, YANGXin-ling, REN Cong, WANG Y* ong-fen
摘 要:猪血是屠宰加工产生的主要副产品之一，营养成分丰富，尤其是含有免疫球蛋白、生物活性肽、血红素、超氧 化物歧化酶等具有特定生理功能的成分,应用前景广阔。该文对来源于猪血液中的主要功能成分血浆蛋白粉、血红蛋 白務、血红素、生物活性肽等的制备和修饰成分在食品药品中的应用进行综述 ，以期为猪血液资源的综合利用和研究 提供参考。 关键词：猪血液;功能成分;血红蛋白；修饰成分
2021年6月 第42卷第12期
—218----------------------
DOI: 10.12161Zj.issn.1005-砧21.2021.12.034
血红素合成流程及调控方式
成熟红细胞中，血红蛋白(hemoglolin,Hb)占红细胞内蛋白质总量的95%，它是血液运输O2的最重要物质，和CO2的送输亦有一定关系。
血红蛋白是由4个亚基组成的四聚体，每一亚基由一分子珠蛋白(globin)与一分子血红素(heme)缔合而成。
由于珠蛋白的生物合成与一般蛋白质相同，因此本节重点介绍血红素的生物合成。
血红素也是其它一些蛋白质，如肌红蛋白(myoglobin)，过氧化氢酶(catalase)，过氧化物酶(peroxidase)等的辅基。
因而，一般细胞均可合成血红素，且合成通路相同。
在人红细胞中，血红素的合成从早动红细胞开始，直到网织红细胞阶段仍可合成。
而成熟红细胞不再有血红素的合成。
(一)血红素的合成通路(过程)血红素合成的基本原料是甘氨酸、琥珀酰辅酶A及Fe＋＋。
合成的起始和终末过程均在线粒体，而中间阶段在胞液中进行。
合成过程分为如下四个步骤：1.δ-氨基-γ-酮戊酸(δ-aminplevulinic acid,ALA)的生成：在线粒体中，首先由甘氨酸和琥珀酰辅酶A在ALA合成酶(ALa synthetase)的催化下缩合生成ALA。
ALA合成酶由两个亚基组成，每个亚基分子量为60，000。
其辅酶为磷酸吡哆醛。
此酶为血红素合成的限速酶，受血红素的反馈抑制。
2.卟胆原的生成：线粒体生成的ALA进入胞液中，在ALA脱水酶(ALa dehydrase)的催化下，二分子ALA脱水缩合成一分子卟胆原(prophobilinogen,PBG)。
ALA脱水酶由八个亚基组成，分子量为26万。
为含巯基酶。
3.尿卟啉原和粪卟啉原的生成：在胞液中，四分子PBG脱氨缩合生成一分子尿卟啉原Ⅲ(uroporphyrinogen Ⅲ，UPG Ⅲ)。
此反应过程需两种酶即尿卟啉原合酶(uroporphyrinogen synthetase)又称卟胆原脱氨酶(PBG deaminase)和尿卟啉原Ⅲ同合酶(uroporphyrinogen Ⅲcosynthase)。
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万方数据
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修饰血红素提高血红蛋白类过氧化物酶活性
作者：凌辉生， 李阳， 封琳， 李任强， LING Huisheng， LI Yang， FENG Lin， LI Renqiang 作者单位：暨南大学,生物工程学系,广州,510632
刊名：
生物加工过程
英文刊名：CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING
年，卷(期)：2011,09(2)
1.李得加;邹国林血红蛋白模拟辣根过氧化物酶在酶联免疫分析中的应用[期刊论文]-武汉大学学报(理学版)
2003(06)
2.王全林;刘志洪;蔡汝秀血红蛋白的过氧化物酶催化特性研究[期刊论文]-化学学报 2003(01)
3.Hayashi T;Hisaeda Y New functionalization of myoglobin by chemical modification of heme-propionates[外文期刊] 2002(01)
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5.Song H Y;Liu J Z;Weng L P Activity,stability,and unfol-ding of reconstituted horseradish peroxidase with modified heme[外文期刊] 2009(1/4)
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10.Ryu K;Dordick J S How do organic solvents affect peroxi-dase structure and function[外文期刊] 1992(09)
11.Hayashi T;Hitomi Y;Ando T Peroxidase activity of myoglobin is enhanced by chemical mutation of heme-propionates[外文期刊] 1999(34)
12.Sato H;Hayashi T;Ando T Hybridization of modified-heme reconstitution and distal histidine mutation to funtionalize sperm whale myoglobin[外文期刊] 2004(02)
本文链接：/Periodical_swjggc201102014.aspx。