仙人掌多糖的分离纯化、结构和生物活性研究进展
６ 等形式 。仙人掌多糖功效研究显示 ：具有 良好 的抗癌 、抗氧化及抗衰老 、降血糖 、增强免疫力等活性 。 目 ）
前仙人掌多糖研究方面存在的技术难点有 ：提取方法多采用传统 的水提醇沉法 ，多糖提取得率低 ，纯度不高 ， 原料浪费严重 ，并影响到后续对多糖的结构分析和功效鉴定 。
关 键 词 ：仙 人 掌 多糖 ；分 离纯 化 ；结 构 鉴 定 ；生 物 活性 中图 分 类 号 ：Ｔ ２２ ３ Ｓ０ ． 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１０ ２ １ （００ ０ ０ ８ ０ ０ ６— ５ ３ ２ １ ） ３— １５— ５
仙 人 掌 多糖 的 分 离纯 化 、结 构 和 生 物 活 性研 究进 展
郭利 平
（ 广东 轻工 职业 技术学 院 ，广州
摘
５００ ） １３０
要 ：近 年来 ，国内外许多专家学者在仙人掌 多糖 的分 离纯化 、成分鉴定 、药用功能及 市场前 景等方
面进行 了大量 的研究 ，并取得 了较大进展 。本文对仙 人掌多糖 的分离提取 、多糖 组成 、多糖 的功效 、多糖的 结构分析及 目前存在 的技术难点等方面 的研究进展进行 了综述 。研究显示 ，仙人掌多糖可能 由鼠李糖 、果糖 、 半乳糖 、木糖 、阿拉伯糖 、甘露糖及糖醛酸等聚合而成 。糖苷键主要有 （—２ ，（ —３ ，（ — ４ １ ） １ ） １ ÷ ）及 （ － １－ ＋
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多糖 广 泛地存 在 于 动 物 细胞ｐｉ ｇ
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米邦塔仙人掌多糖的提取纯化及体外抗氧化活性
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多糖 ｐ ｏ ｌ ｙ ｓ ａ ｃ ｃ ｈ ａ ｒ ｉ ｄ ｅ ｓ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｏ ｐ ｕ ｎ ｔ ｉ ａ Ｍｉ ｌ ｐ ａ Ａ ｈ ａ （ ＭＡ Ｐ ） ， ＭＡ Ｐ经过 Ｄ Ｅ Ａ Ｅ 一 纤维素一 ５ ２柱 纯化 得 到 多糖 Ｍ Ａ Ｐ １和 ＭＡ Ｐ ２ ， 经
过 Ｄ Ｅ Ａ Ｅ 一 琼脂糖一 Ｃ Ｌ 一 ６ Ｂ柱 纯化得到 多糖 ＭＡ Ｐ ３ 。采 用凝 胶渗透 色谱 （ Ｇ Ｐ Ｃ） 分析 多糖 的相对分子 质量 ， 采用体外抗 氧化评价体 系研 究米邦塔仙 人 掌 多糖 抗氧化 活性 。结果 ： Ｍ Ａ Ｐ １相对 分子质 量 （ Ｍｎ ） 为４ ７ ６ ． ９ ， ＭＡ Ｐ ２相 对分 子质 量
仙人掌果多糖的分离纯化、结构表征及生理活性研究的开题报告
仙人掌果多糖的分离纯化、结构表征及生理活性研究的开题报告一、研究背景与意义仙人掌（Cactaceae）是一类植物，广泛分布于世界各地的干旱和半干旱地区，是沙漠中的重要生态系统组成部分。
仙人掌植物有着极强的抗逆性，其果实中含有丰富的多糖，具有重要的药用价值。
近年来，越来越多的研究表明，仙人掌果多糖具有广泛的生物活性，包括免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖等作用。
因此，研究仙人掌果多糖的分离纯化、结构表征及生理活性，对开发其药用价值具有重要意义。
二、研究目的1. 分离纯化仙人掌果多糖，并通过物理化学方法对其进行表征和鉴定。
2. 利用现代生物技术手段（如质谱、核磁共振等）对其结构进行分析和鉴定。
3. 研究仙人掌果多糖的生理活性，包括体内抗肿瘤、降血糖、抗氧化等作用。
三、研究内容1. 仙人掌果多糖的提取：以仙人掌果实为原料，采用水提取-酒精沉淀的方法提取仙人掌果多糖。
2. 分离纯化仙人掌果多糖：将提取得到的仙人掌果多糖进行离子交换层析、凝胶过滤层析等方法进行分离纯化。
3. 仙人掌果多糖的理化性质研究：通过紫外-可见吸收光谱、旋光度、糖含量分析等物理化学方法对其进行表征和鉴定。
4. 仙人掌果多糖结构的分析和鉴定：利用现代生物技术手段（如质谱、核磁共振等）对其结构进行分析和鉴定，确定其主要的构成单糖和链状结构。
5. 仙人掌果多糖的生理活性研究：包括体内抗肿瘤、降血糖、抗氧化等作用的测定，评估其生物学活性。
四、研究方法1. 实验设备：恒温水浴器、离心机、旋光仪、分光光度计、离子交换层析仪、凝胶过滤层析仪、质谱仪、核磁共振。
2. 实验材料：仙人掌果实、山梨醇、硫酸铵、乙醇、CDCl3。
3. 实验步骤：(1) 仙人掌果多糖的提取：将仙人掌果实加入山梨醇水溶液中，经过搅拌和高温反应提取。
(2) 分离纯化仙人掌果多糖：将提取得到的多糖溶液进行离子交换层析、凝胶过滤层析等方法进行分离纯化。
(3) 仙人掌果多糖的理化性质研究：通过紫外-可见吸收光谱、旋光度、糖含量分析等物理化学方法对其进行表征和鉴定。
仙人掌多糖结构和降血脂作用的研究进展
李 莉梅 ， 李 恒 ， 朱 苗 ， 袁 清霞 ， 曾 富华
（ 湛 江 师 范 学 院 广 东 高校 边 缘 热 带 特 色植 物 工程 技 术 开发 中心 和 生命 科 学与 技 术 学院 ， 广东 湛 江 ５ ２ ４ ０ ４ ８ ） 摘 要： 仙 人 掌 多糖 具 有 降血 脂 、 降血糖 、 增 强免疫 力、 抗 氧 化 等 作 用． 本 文 综 述 了仙 人 掌 多糖 的 结 构 研 究进
近些年 ， 由于 人们生 活水 平逐步 提高 ， 饮食 结构 不断 改变 ， 人 口老 龄化进 程加 快 ， 导致 高血 脂及 其引 发 的
一
系列 疾病 逐年上 升 ， 严 重威 胁着 中老年人 的健 康． 因此 ， 研究 开 发 天然 的无 毒性 降 血脂 药 物 和保 健食 品对 多糖是 一类 天然高分 子化 合物 ， 从二 十世纪 五六 十年 代 开始 ， 多 糖 的多种 生 理 功能 引起 了人 们 的关 注 ．
展， 探 讨 了其降血脂 作用及其机理 ， 旨在 为仙人 掌资源优化和仙人 掌多糖 的进一步研究提 供参考．
仙人掌多糖提取工艺的研究
仙人掌多糖提取工艺的研究仙人掌是一种常见的绿色植物，生活在热带沙漠地区。
我国的东北，内蒙古等地也有栽培。
仙人掌科有8属125种以上。
它们都不是草本植物，因为它们没有根。
植物学家称之为附生植物。
第二天，他用毛笔在仙人掌茎上又划了几道口子，再把仙人掌放进盛满清水的玻璃瓶中，原以为可以减少创口感染，谁知刚才那株仙人掌好像活过来似的，竞使劲往外钻，挤破了玻璃，想爬出来。
真令人惊叹！我觉得这太神奇了，这简直是“野火烧不尽，春风吹又生”。
这里的自然环境还算优越，很适宜仙人掌的生长。
但就这样，仙人掌还是不能够成功的提取到多糖，原因是什么呢？科学家对此做了很多研究，发现仙人掌表面的细胞受损，所以阻止了它吸收多糖的物质进入细胞，而且仙人掌茎部的细胞结构十分特殊，极难被提取出来，只能抽取它的液汁，即用离心技术处理后，经分离、浓缩，才能达到我们需要的目的。
另外，仙人掌生长在沙漠里，那里阳光强烈，蒸发量大，为了节省水分，细胞萎缩，多糖无法渗透到其内部。
把新鲜的仙人掌从沙地里拔起来，去掉所有的刺，切成1毫米厚的薄片，放在自制的培养皿里，装上一半的自来水，用喷雾器把水雾调成细雾状，把它放在光照充足、通风良好的室内。
这种水溶液，能促进仙人掌对多糖的吸收，约3～ 4小时后，根系便会变成黄白色，茎表面布满了黄白色的粘稠胶状物质，也就是多糖，说明水溶液中已存在多糖了。
两个星期后，叶子逐渐枯黄，而且盆底有一些干了的碎屑。
又过了几天，浇过水后，用镊子轻轻夹取碎屑，你会发现，原来翠绿的仙人掌上已长出了一点一点乳白色的根，看着十分诱人，原来老根也能够新生啊！我高兴地拿去观察，发现根表面有一层白色茸毛，顶端有红色浆状物，将这些多糖连同叶子中的一起压榨，果然获得了大量的多糖。
仙人掌中含有许多氨基酸、维生素和矿物质，多吃能增强抵抗力。
仙人掌中所含的多糖是一种低分子量的蛋白质，这种蛋白质不能被人体直接吸收，而是先转化为一种糖类，再在胰脏或肠粘膜中由肠道微生物作用，经过酶的作用下，分解为单糖、双糖和多糖，然后吸收，供人体利用。
仙人掌多糖提取工艺的研究
仙人掌多糖提取工艺的研究仙人掌多糖是由植物细胞壁中的木聚糖，多糖，半乳糖和可溶性蛋白质所组成的一种复杂的黏稠液体，它是仙人掌植物的一种饮料，具有独特的味道和营养价值。
随着现代人对饮食的关注，仙人掌多糖被认为是一种营养价值很高的饮料，因此越来越受到人们的喜爱，成为现代消费的首选。
由于仙人掌多糖给人们带来了许多营养和健康益处，因此它的提取工艺成为当前研究的热点。
研究仙人掌多糖提取工艺，可以有效提高仙人掌多糖的提取效率，获得更高质量的产品，为仙人掌多糖的加工科技技术提供参考。
目前，专家们对仙人掌多糖提取工艺的研究多以传统的手工提取方法为基础，如冷榨法、热榨法和溶剂提取法等。
冷榨法是将仙人掌果汁冷冻处理，在内部的蛋白质凝固，然后将其过滤，以提取仙人掌多糖。
这种方法虽然可以以较低的成本提取出极高质量的仙人掌多糖，但是由于时间和温度对蛋白质的影响，应用范围有限，无法得到高质量的仙人掌多糖。
热榨法是将仙人掌果汁经过加热，使果汁中的多糖和澄清剂等物质能够形成悬浮液，悬浮液上的澄清剂和木聚糖能够把多糖从果汁中抽提出来，并且形成浮渣，从而提取出仙人掌多糖。
它的优点是快速提取出仙人掌多糖，并且可以获得较高质量的产品，缺点是操作复杂，提取过程需要较长时间，耗能量较大。
溶剂提取法是用一种低毒性的有机溶剂将仙人掌中的多糖摩擦出来提取出来，这种方法的优点是快速提取，提取过程简单，提取出的仙人掌多糖的质量比较高，而且不会受到温度影响，缺点是溶剂有一定的毒性，在提取过程中容易受到污染，而且提取出的仙人掌多糖比较贵。
以上是有关仙人掌多糖提取工艺的研究，根据不同的技术和方法，专家们可以结合仙人掌特有的化学成分特点，采用最合适的提取工艺，以获得高质量的仙人掌多糖。
仙人掌多糖的提取工艺目前仍处于技术的发展阶段，未来还有很大的发展空间。
将会有更多的新的技术和方法出现，解决仙人掌多糖提取中的技术难题。
未来，仙人掌多糖在饮料加工科技中将发挥更大的作用，可以为社会健康带来更多的好处。
仙人掌多糖提取工艺的研究
仙人掌多糖提取工艺的研究仙人掌（Opuntiaficus-indica）是一种多肉植物，主要分布在南美洲和大洋洲。
它是一种经济性植物，其结果可以提供食物，药物，娱乐和其他重要的物质材料。
仙人掌的多糖含量较高，近年来被研究者广泛研究。
仙人掌多糖提取工艺的研究是发掘仙人掌的利用价值的关键，它对生物材料的开发和改善具有重要意义。
仙人掌多糖具有许多独特的功能，其中包括抑制血糖升高，保护肝脏和心脏，降低血脂，防止便秘和腹泻，抗炎，抗氧化等。
因此，仙人掌多糖被认为是一种潜在的有益物质，可以应用于食品，医药，化妆品等领域。
仙人掌多糖提取工艺的研究包括直接从仙人掌果实提取多糖和利用微生物转化仙人掌多糖两个方面。
首先，研究人员研究了从仙人掌果实提取多糖的不同方法，如溶剂萃取和超声萃取。
研究发现，溶剂萃取是一种有效的多糖提取方法，可以有效获取多糖，并降低生产成本。
其次，为了提高仙人掌多糖的生物活性，研究人员开发了利用微生物转化仙人掌多糖的方法，如细菌和真菌甲基化。
细菌和真菌甲基化可以有效转化仙人掌多糖，提高其生物活性，从而更好地被利用。
此外，通过将提取的仙人掌多糖进行结晶、干燥、纯化、多组分分析等研究，可以提高仙人掌多糖的利用价值。
仙人掌多糖的结晶是其利用的重要基础，研究者曾尝试采用离子交换法、溶剂热换法和离子沉淀法等方法实现仙人掌多糖结晶，从而获得纯度较高的提取物，提高仙人掌多糖的应用价值。
总之，仙人掌多糖提取工艺的研究及其利用价值对开发生物材料具有重要意义。
研究人员已经从不同的角度展开了仙人掌多糖的提取研究，如溶剂萃取、超声萃取和利用微生物转化等，并且已经尝试通过结晶、干燥、纯化、多组分分析等技术来提高仙人掌多糖的利用价值。
未来，可能需要更多的研究来探究仙人掌多糖的提取研究和其利用价值，为发掘仙人掌的优势提供更多科学依据。
仙人掌多糖的提取分离与性质测定
收稿日期:2009-04-21基金项目:湖南环境生物职业技术学院长基金资助项目(编号:2005-A04-01-03);湖南省教育厅科研资助项目(编号:08D053).作者简介:杨军衡(1969-),男,湖南南岳人,副教授,硕士,研究方向:药用植物资源开发与利用.第15卷第3期湖南环境生物职业技术学院学报Vo.l 15No .32009年9月Jo urna l of Hunan Enviro nment-B i ol ogica l P ol ytechn i c Sep . 2009文章编号:1671-6361(2009)03-0020-04仙人掌多糖的提取分离与性质测定杨军衡1,2, 彭国平2, 饶力群2(1.湖南环境生物职业技术学院,湖南衡阳421005;2.湖南农业大学生物科技学院,湖南长沙410128)摘 要:仙人掌多糖具有降血糖、抗炎、免疫、抗溃疡等作用.经热水提取、乙醇沉淀、DE AE Sepharose fastfl o w 离子交换色谱和Sephadex G 系列凝胶滤过色谱纯化得到5种仙人掌多糖组分.采用醋酸纤维薄膜电泳检测多糖纯度,凝胶色谱测定相对分子质量,高效液相色谱测定糖的组成.经测定,它们的相对分子质量依次为2.0@103、1.0@106、4.0@103、9.2@105、5.0@103.ODP1由鼠李糖组成,ODP2可能由鼠李缚和葡萄糖组成,ODP 4可能由鼠李糖和D-半乳糖组成.ODP3和ODP5分别由鼠李糖和一未知糖组分组成.表3,参12.关键词:仙人掌;多糖;纯化;性质中图分类号:R 284.2,R 286.02 文献标识码:A仙人掌Opuntia dilleniiH aw .为仙人掌科植物,仙人掌味淡性寒,有抗炎、免疫、降血糖、抗溃疡等作用.能行气活血、清热解毒、消肿止痛,健脾止泻、安神利尿,可内服、外用治疗多种疾病.仙人掌中的多糖(Opuntia dillen ii pol y sacchari d e ,ODP)是仙人掌具有多种功效的原因之一.关于仙人掌药理作用的报道很多[1-6],但鲜有具有药理作用的化学成分提取分离的报道[7-8].本实验室已从仙人掌中提取出粗多糖,经动物实验证明其具有降血糖作用[9].现对仙人掌粗多糖提取分离,拟进一步探讨化学成分与降血糖活性之间的关系.1 材料和仪器新鲜仙人掌采自湖南株洲仙人掌生物有限公司,经湖南中医药大学彭菲教授鉴定.阿拉伯糖、半乳糖、木糖、鼠李糖、葡萄糖、考马斯亮蓝G -250、DEAE -Sepharose f ast fl o w 、Sephadex G -75、Sephadex G -200、蓝色葡聚糖B1ue D extran -2000等试剂均为分析纯.KD M 型调温电热套;RE -52A 旋转蒸发器;Bio-Rad 低压色谱系统、Labo -conco 冷冻干燥机.2 仙人掌粗多糖的提取分离2.1 仙人掌粗多糖的提取仙人掌新鲜茎(挖除刺状叶)约0.5kg ,固定捣碎,95%乙醇回流除单糖、其它醇溶性成分及色素.药渣常法水煮3次,滤过,减压浓缩至稠,加4倍量乙醇,静止48h,抽滤,沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚抽洗,挥散溶剂至干,得灰白色粗多糖粉末,收率0.92%,本品难溶于乙醇、乙醚、苯等有机溶剂,可溶于热水呈透明淡棕色溶液.2.2 仙人掌粗多糖的组成分析采用苯酚-硫酸法,以半乳糖、阿拉伯糖按质量比3︰1作标准曲线,测定总糖;D NS 法测定还原糖;考马斯亮蓝法测定蛋白质;定磷法测定核酸.结果含多糖、还原糖,蛋白质、核酸的量分别为48.98%、3.38%、9.86%和7.35%.用碘化铋钾试剂、硅钨酸试剂、苦味酸试剂、碘-碘化钾试剂鉴定生物碱,用醋酐-浓硫酸试剂、三氯化锑试剂、10%三氯醋酸试剂鉴定甾体类化合物.结果棕色环试验、蒽酮-硫酸法检测呈阳性,淀粉试验呈阴性,双缩脲试验稍微变红,茚三酮试验颜色稍微变化.2.3仙人掌粗多糖的分离纯化2.3.1离子交换色谱结果:采用DEAE Sepharose fast flo w离子交换柱(30c m@2.5c m)进行色谱分离,用含有0.02、0.1、0.3mol/L NaCl 的Tris)H Cl缓冲溶液(p H8.0)以0.6mL/m i n 依次洗脱,6mL/管分部收集.再采用Sephadex G 系列凝胶滤过柱(75c m@1.5c m)进行色谱分离,用0.05mol/L NaCl溶液以0.15mL/m in洗脱,3mL/管分部收集,冷冻干燥得多糖样品.苯酚-硫酸法测定各收集管在490nm处吸光度,作多糖洗脱曲线,合并主峰部分;低压色谱系统紫外检测仪记录280nm(蛋白质)紫外吸收曲线.各峰百分比=各组分多糖量/各组分多糖量之和@100%,回收率=各组分多糖量之和/进样多糖量@100%.表1仙人掌粗多糖的DEAE Sepha rose fast flo w离子交换色谱Tab.1DEAE Sepharose fast fl o w i on-exchange chro m ato graphy ofODP分析指标多糖质量/mg各峰比例组分Ñ10.7217.24组分Ò31.0349.90组分Ó20.4332.86由表1可知,仙人掌多糖至少存在3个主要组分峰,各组分中都含有少量的蛋白质组分.按出峰顺序,将此3个洗脱峰组分分别命名为组分I、组分Ò、组分Ó.经计算,离子交换色谱回收率达85.04%,分离效果好.2.3.2分子筛色谱结果:根据/当被分离物质的K av值约为0.5时,其凝胶滤过的分离效率最高0[9]的原理,来判断分离效果.(1)Sephadex G-75分离仙人掌多糖组分I:通过反复试验,确定采用Sephadex G-75对组分I洗脱.柱床体积V t为120mL,蓝色葡聚糖B1ue Dextran-2000柱色谱测得V0为37mL.从洗脱曲线得知,洗脱到第28管出现最高峰,即V e为84 mL,根据K av=(V e-V0)/(V t-V0),计算得K av =0.57,凝胶分离效率高.结合蛋白质洗脱曲线可知分离过程除去了微量蛋白质组分.收集多糖峰组分,并命名为ODPI.(2)Sephadex G-200分离仙人掌多糖组分Ò:采用Sephadex G-200对组分Ò进行洗脱.测得V0为44mL,柱床体积V t为125mL.洗脱过程得到了两个组分峰,按洗脱顺序分别命名为ODP2、ODP3.第一峰不含有蛋白质组分,洗脱到第15管出峰,即V e1为45mL,第二峰含有蛋白组分,洗脱到第37管出峰,即V e2为111mL,经计算得K av1=0.01、K av2=0.83,两个峰组分的分离效率都不高.ODP3在收集后采用孔径更小的凝胶进一步分离,发现它仍为单一组分.(3)Sephadex G-200分离仙人掌多糖组分Ó:采用Sephadex G-200对组分Ó洗脱.测得V0为40mL,柱床体积V t为125mL.第一峰为洗脱到第15管出峰,即V e1为45mL,第二峰为洗脱到第29管出峰,即V e2为87mL,经计算得K av1=0.06、K av2=0.55,第二峰分离效率高.但组分Ó的第一峰和第二峰有重叠,总分离效率不高.结合蛋白质洗脱曲线可知,第一峰、第二峰为多糖峰,在第二峰洗脱出来后约120m in,分离除去一微量蛋白质峰.收集多糖峰组分,按洗脱顺序,分别命名为O DP4、ODP5.通过上述分析和实验结果分析(表2)可知,离子交换色谱所得组分I、组分Ò、组分Ó经浓缩处理后,上柱Sephadex G-75、Sephadex G-200、Sephadex G-200,分离得到ODPI、ODP2和O DP3、ODP4和ODP5,其回收率分别为93.25%、88.30%、78.90%,分离效果较好.3仙人掌多糖的性质测定3.1仙人掌多糖的纯度鉴定采用醋酸纤维薄膜电泳法.电极液为0.05 mo1/L、pH8.0硼砂缓冲液,电压110V,电流11 ma/c m2,时间30m in,1%甲苯胺蓝染色,90%乙醇脱色,冰醋酸–乙醇(15B85)混合液透明,观察电泳区带.5种多糖样品电泳结果都为单一区带,表明它们为电泳纯.21第15卷第3期杨军衡等:仙人掌多糖的提取分离与性质测定表2Sephadex G系列分子筛色谱洗脱结果Tab.2R esu lt of Sephadex G ser i es m ol ecular sieve chro m atography分析指标多糖质量/m g 各组分多糖之合/m g进样量/m g各峰比例/%回收率/%ODP12.092.903.1110093.25 ODP23.1381.30ODP30.723.854.3618.7088.30 ODP43.154.305.4573.26ODP51.1526.7478.903.2多糖的相对分子质量测定采用Sephadex G-200凝胶色谱柱,用不同相对分子质量的标准葡聚糖洗脱体积对其相对分子质量对数作回归分析,制作回归直线及方程,将ODP1,ODP2、ODP3、ODP4、ODP55种多糖组分的洗脱体积代入方程,求得5种多糖组分的相对分子质量分别为2.0@103、1.0@106、4.0@103、9.2 @105、5.0@103.3.3多糖的组成分析取样品多糖40mg,加入4mol/L H2S O44 m,l安瓿管封管,100e水解8h,冷却;用Ba CO3中和,滤过得上清液.于45e下减压浓缩至干,加入蒸馏水定容至10m.l再将20mg/m l单糖对照品和仙人掌多糖酸水解样品进行高效液相色谱分析单糖组成.高效液相色谱条件为:30e柱温的Agilent car bohydrate柱,体积流量1.5m l/m in,乙腈–水(75︰25)的流动相,示差折光检测器检测.对单糖对照品在HPLC上的保留时间和仙人掌多糖酸水解样品在H PLC上的保留时间比较(表3),考虑到实验误差,认为ODP1由鼠李糖组成,ODP2可能由鼠李糖和葡萄糖组成,ODP4可能由鼠李糖和D–半乳糖组成,ODP3和ODP5组成成分中含有鼠李糖,但由于缺少单糖对照品,它们的第二峰都不能确定是何种糖类.其具体组成有待进一步研究.表3多糖的组成分析Tab.3Ana l ysi s Of polysacchar i des单糖名称保留时间/m i n多糖样品名称保留时间1/m i n保留时间2/m i n 鼠李糖4.333ODP14.232D)木糖5.549ODP24.2868.122L)阿拉伯糖6.237ODP34.3339.167D)果糖7.534ODP44.3488.725D)葡萄糖8.195ODP54.2979.315D)半乳糖8.6614结果与讨论通过实验对仙人掌多糖的提取分离,粗多糖得率0.92%,离子交换色谱回收率达85.04%,分离效果好.离子交换色谱所得组分I、组分Ò、组分Ó,其回收率分别为93.25%、88.30%、78.90%,分离效果较好.5种多糖样品电泳结果表明均为电泳纯.5种多糖组分的相对分子质量分别为2.0@ 103、1.0@106、4.0@103、9.2@105、5.0@103.多糖的组成为:ODP1由鼠李糖组成,ODP2由鼠李糖和葡萄糖组成,ODP4由鼠李糖和D-半乳糖组成, ODP3和ODP5组成成分中含有鼠李糖.考虑到工业化大规模生产需要,仙人掌多糖的分离纯化采用了廉价的水提)醇沉法.虽然此法所需的乙醇较多,但可以对旋转蒸发出来的废液重蒸,回收乙醇,工艺总成本低.实验中未采用脱蛋白、脱色素步骤,既减少了仙人掌多糖提取工艺所需消耗的时间,也有利于对仙人掌多糖进行药理学实验研究.从实验结果可以看出,利用物质之间的物理吸附、离子交换力和相对分子质量的不同,可以将多糖和未与多糖结合的蛋白质分离开来.如在组分I、组分Ó的分子筛柱色谱过程中,各自分离出一个蛋白质组分.本实验发现仙人掌5种多糖样品中部含有鼠22湖南环境生物职业技术学院学报2009年9月李糖组分,据文献报道[10-12],仙人掌粘液质是一种阿拉伯半乳聚糖,主链为(1y 4)连接的半乳糖.本实验结果和文献报道不一致.分析原因,可能与多糖的分离纯化工艺不同有关,亦可能是发现了仙人掌多糖新的化学成分,这有待进一步证实.本试验结果为仙人掌多糖的药理作用研究提供依据,对糖尿病小鼠模型有明显的降血糖作用,可能与调节免疫机能有关[6]等,还有待进一步研究.参考文献:[1]Laurenz J C ,Collier C C ,Kuti J O .H y pogl ycae m ic e ffectof Opuntia li ndhe i m e ri Engle m i n a diabetic p i g m o de l [J].Phytother R es ,2003,17(1):26-29.[2]A larcon-Ag u ilar F J ,Va l des-A rzate A ,Xola l pa-M o 2li na S ,e t a.l H ypo glyce m ic acti vity of t w o polysaccha 2rides isolated fro m Opunti a ficus-i nd i ca and O .S trepta 2cantha [J].P roceed i W estern Pha r m acol Soc ,2003,(46):139-142.[3]Q i u Y,Chen Y .Co nstit uents with rad i ca l scavengi ngeffect fro m Opunrta dillen i:i struct 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-qun2(1.Hunan Environm en t-Bi o l og i cal Pol ytechn ic ,H engyang 421005,China ;2.H unan Agri cu lturalU 2n i vers i ty ,Changsha 410128,Ch i na)Abstr act :To isolate ,purif y ,and identif y the Opuntia d illen ii pol y sacchari d e(ODP).Fresh cact u s was extrac 2ted by hotwater ,prec i p itated by ethano,l fractionated by DE AE Sepharose f ast flo w ,separated by Sephadex G series ,and treated by freeze-dr ying .A f ter the above purificati o n ,fi v e po1ysaccharides were obta i n ed .Purity of the m was exa m ined by e l e ctrophoresis ,relative mo1ecular we i g h t of the m wasmeasured by gel chr o m atogra 2phy ,and che m i c al co mpositi o n was deter m ined byH PLC .A11ofODP were pr oved to be ho mogenous ,re lati v emo1ecu l a r weight of the m were 2.0@103、1.0@106、4.0@103、9.2@105、and 5.0@103.ODP1was co m 2posed of r ha mnose on ly ,ODP2wasmade up of rha mnose and D-glucose ,ODP4conta i n ed rha mnose and D -galactose ,ODP3and ODP5consisted of rha mnose and another un i d entified monosacchari d e ,respective l y .The deproteinized or decolorized pr ocedure is not necessary f or the purificati o n ofODP ,and a11ofODP are i d enti 2fied to be ho mogenous .3tabs .,12ref s .K ey w ord s :Opuntia dillen iiH a w ;polysaccharide ;purificati o n;property23第15卷第3期 杨军衡等:仙人掌多糖的提取分离与性质测定。
仙人掌多糖的研究进展
仙人掌多糖的研究进展摘要】仙人掌多糖具有明显的增强免疫、抗肿瘤、降血糖、抗氧化、抗衰老等活性，是仙人掌具有多种功效的原因之一。
本文主要综述了仙人掌多糖的提取、分离纯化方法和生物活性的研究进展。
【关键词】仙人掌多糖提取分离纯化生物活性仙人掌（Opuntia dillenii Haw.）为仙人掌科植物的根及茎，具有行气活血、清热解毒等功效，用于心胃气痛、痞块、痢疾、痔血、咳嗽、喉痛、肺痈、乳痈、疔疮、火伤、蛇伤等症，在我国有广泛分布。
仙人掌多糖（Opuntia dillenii polysaccharides，ODP）是从仙人掌科植物仙人掌中提取的蛋白多糖，是仙人掌具有多种功效的原因之一。
近年来，许多学者对仙人掌多糖进行了研究，取得较大进展。
本文对近年来仙人掌多糖的提取方法、分离纯化方法和生物活性作一综述。
1 仙人掌多糖的提取提取工艺:原料粉碎→烘干→提取→提取液→醇沉→离心→沉淀物→有机溶剂洗涤→冷冻干燥→仙人掌粗多糖。
1.1 水提法水提法为仙人掌多糖的传统提取方法。
金鑫等[1]研究了仙人掌多糖水提法的最佳工艺条件，以多糖提取得率为指标得最佳工艺：提取温度为80℃，提取时间为1h，固液比为1:40。
而刘洋等[2]应用响应面分析法优化仙人掌多糖的浸提工艺，结果表明：水料比5.5:1，浸提温度75℃，浸提时间2.2h，浸提1次，仙人掌多糖的提取率为0.81％。
1.2 醇提法严赞开等[3]比较了用不同体积分数的乙醇溶液提取米邦塔仙人掌茎多糖的效率，结果表明以60%的乙醇为最佳。
提取优化工艺为：以体积分数60％的乙醇为浸提剂，按每克仙人掌加15ml提取液投料，在70℃下浸提5h。
1.3 超声波提取法兰琦杰等[4]据回归模型及其期望函数途径进行模拟选优，得到仙人掌多糖提取率的优化条件为超声破碎时间38min左右，料液比1:36（g/ml），pH值7.16左右。
其中，影响仙人掌多糖活性的主要因子是pH值，在酸性或碱性环境下提取到的仙人掌粗多糖活性较低。
仙人掌中水溶性多糖的分离研究
茚 三 酮 ： 析纯 分 １％苯 肼 试 剂 ： 析纯 ０ 分 １％醋 酸钠 ： 析纯 ５ 分 淀 粉 ： 析 纯 分
去离 子 水 。
１ 代 器 、 品 药
［ ｔ 日期 １０ １— ６—２ Ｓ稿 ２０ ０ ８
【 作者简 介】 文（９ ４ ） 女 ， 葛 １６ 一 ， 江苏泗 阳人 ， 江西教育学院化 学 系副教授 ， 中山大学访 问学者 ， 从事分析化 学研 究。
ａ ｔｎ ｉｎ Ｏ ｔ Ｔｈ ａ ｔ ｒ ｈ ｓ ｄｉｓ ｌｅ ｓ ｃ ｅ ｓｕｌ ｔ ｅ ｔｅ ｔｏ ｔ ｉ． ｅ ｎ ｈｅ ａ ｓｏｖ ｄ ｕ ｃ ｓ ｆ ｌｙ ｈ ｗａ ｅ ｔ ｒ— ｓ ｌ ａ ｌ ｐ ｌｓ ｃ ｒｄｅ ｆｏ ｏ ｕ ｂ ｅ ｏｙ ａｃ ｈａ ｉ ｒ ｍ ｃ ｃｕｔ ｂ ｍｅ ｎｓ ｆ ｔ ｒ— ａｔｓ ｙ ａ ｏ ｗａ ｅ ｅ ｌａ ｔｏ ａ ｄ ｈ ｓ ｘｒ ｃｉ ｎ ｎ ｔ ｕ ｍａ ｅ ｉ ｒ ｓｕ ｙ ｎ ｔ ｋ ａ ｐｒｍａ ｙ ｔ ｄ ｏ ｉ．
苯酚 ： 分析 纯 盐 酸 ： 析纯 分 硫酸 ： 分析 纯
微生 物 中 。多糖 化 合物 参 与人 体 生理 过 程 ，在 细胞 识别 、细 胞 间物 质 运输 和对 免 疫功 能 调节 方 面 起着 关 键 作用 。 目前 多 糖 已在 治疗 疾 病 和营 养保 健 方 面 得 到 了广 泛应 用 ， 作用 越 来越 受 到人 们 的重视 。 其 仙 人 掌 （ｐ ｒａｄｌ ｎｉＨ ｕ）属 仙 掌科 ， 生 ｏ ｕｔ ｉｅｉ ａｅ ｉ ｌ 野 或栽 培 ， 要 分 布云 南 、 主 贵州 、 四川 、 东 、 西 、 广 广 福建 等地 。 中医主 要用 其 花 、 果及 肉茎 的浆 汁凝 结 物 （ 玉 芙 蓉 ） 药 ， 寒 味苦 ， 用 于行 气 活血 ， 热解 毒 。 人 性 功 清 目前 对仙 人 掌 的多糖 物 的提 取 和相 关研 究 ，国 内外 未见 报 道 。希 望本 实 验 的初 步研 究 ，能 起 抛砖 引 玉
仙人掌多糖提取工艺的研究
仙人掌多糖提取工艺的研究
仙人掌，又名仙人掌果，是一种营养丰富的植物，它含有丰富的维生素、胡萝卜素、矿物质和多糖等成分。
与其他植物相比，它具有很高的营养价值，也被用于制作药物和其他口味类食品。
本文将重点研究仙人掌多糖提取工艺。
仙人掌多糖的提取可分为两个主要步骤，即初步提取多糖和纯化多糖。
初步提取多糖时，首先要将仙人掌果剥去外皮，然后将果肉研磨成细粉，再用适量的溶剂，如水或油，进行提取。
经过几次连续提取，就可以获得多糖溶液。
纯化多糖步骤包括沉淀法和浓缩法。
沉淀法一般需要添加适量的盐类和热处理，可以有效的沉淀出仙人掌多糖溶液中的细胞壁物质和残留杂质，例如蛋白质、碳水化合物和矿物质等，以达到最终的纯度。
而浓缩法则是通过蒸发、冷凝和离心分离，从而获得较高纯度的多糖溶液。
在仙人掌多糖提取过程中，需要注意一些技术参数，如提取溶剂液体流量、提取温度、提取时间等，这些参数对于仙人掌多糖提取效率和纯度有着重要的影响。
例如，提取温度太低容易影响多糖的提取，提取时间过长也可能降低多糖的抗氧化活性等。
总之，仙人掌多糖提取工艺是一个复杂的过程，虽然需要耗费大量时间和精力，但可以有效提取出营养丰富的仙人掌多糖，为食品和医药行业提供了良好的原料。
因此，希望有更多的研究可以改进仙人掌多糖提取技术，以期获得更高纯度的仙人掌多糖。
仙人掌多糖提取工艺是一项重要的研究，它不仅对于食品和医药行业的发展具有重要意义，而且也能为临床治疗提供更多有效的原料。
因此，未来应该继续加强对仙人掌多糖提取工艺的研究，以便发掘更多的仙人掌多糖营养价值和抗氧化活性。