建立小鼠肿瘤模型的研究进展
一种自发抗肿瘤小鼠模型的建立及其抗肿瘤机制的研究进展
・
综 肿 瘤 小 鼠模 型 的 建 立 及其 抗 肿 瘤机 制 的研 究 进 展
周 万青综述 ， 李芳秋审校
（ 京军 区南京 总 医院解放 军检 验 医学研究 所 ， 南 江苏南 京 ２ ０ ０ ） １０ ２
摘 要 ： 介 绍 一 种 肿 瘤 自发 性 消 退／ 全 抵 抗 （ Ｒ Ｃ ） 小 鼠 以 及 国外 学 者 对 其 抗 肿 瘤 机 制 的研 究 。 发 现 天 然 免 完 Ｓ／ Ｒ 的
ＺＨＯＵ ａ — ｎ ｅ ｉｗｉｇ ，ＬＩＦ ｎ － ｕ ｃ ｅ ｋｎ Ｗ ｎ ｑｉ ｇ ｒｖ ｅ ｎ ａ ｇ ｑｉ ｈ ｃ ｉ ｇ
（ ． ｓ ｔ ｅｏ ｌ ｉ ｌ ａ ｏａｏ ｄｃ ｅ Ｎ ｎｉ ｅｅ ｌ ｏ ｉ ｌ Ｎ ｎｉ ｌａｙＣ ｍ ａ ｄ， Ｐ ４Ｉ ｔｕ Ｌ ｎ ｉ ｔ ｆＣｉ ｃ ｂ ｒｔ ｙＭｅｉｎ ， ａｊ ｇ Ｇ ｎｒ ｓ ｔ ａｊ ｇＭｉｔｒ ｏ ｍ ｎ ｎａ Ｌ ｒ ｉ ｎ ａ Ｈ ｐａ ｏ ｆ ｎ ｉ
Ｐ ， ａｊ ｇ２ ０ ０ ， ｉｎ ｓ ，Ｃ ｉａ） Ｎ ｎ ｎ １０ ２ Ｊａｇ ｕ ｈｎ ｉ
Ａ ｂ ｔ ａ ｔ： Ａ ｏｏ ｙ ｏ ｃ ｔ ｎ ｑ ｅ ｔａｔｏ ｏ ｔｒ ｓｓａ ｃ ｏ ｔ ｓｒ ｃ ｃ ｌｎ ｆ ｍｉ ｅ ｗｉ ａ ｕ ｉ ｕ ｒ ｉ ｆｈ ｓ ｅ ｉｔｎ ｅ ｔ ｕｍｏ ｉｅ ｅ ｉ ｎ ｕ ｅ ｙ ｔａ ｓ ｈ ｒｇ ｎ ｓｓ ｉ ｄ ｃ ｄ ｂ ｒ ｎ － ｐ ａ ｔｂ ｅ ｃ ｌｓｈａ ｅ ｎ ｅ ｔｂｌ ｈ ｄ ａ ｄ ｓｕ ｉｄ ｂ ｉＺ ｅ ｇ ｅ １ Ｔｈ ｓ ｐ ｎａ ｅ ｕ ｅ ｒ ｓ ｉｎ ｏ ｌ ｎ ａ ｌ ｅｌ ｓ ｂ ｅ ｓａ ｉ ｅ ｎ ｔ ｄ ｅ ｙ Ｃｕ ｈ ｎ ｔａ ． ｓ ｅ ｅ ｓ ｏ ｔｎ ｏ ｓ ｒ ｇｅ ｓｏ ／ｃ ｍ—
肿瘤动物模型构建实验技术
肿瘤动物模型得建立可以：（1）评价抗肿瘤免疫治疗得疗效；（2）作为抗肿瘤药物筛选模型；（3）为肿瘤转移研究提供更好得研究平台；（4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好得实验工具。
实验方法：诱发性肿瘤动物模型实验方法原理：诱发性肿瘤动物模型就是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物得肿瘤等。
实验材料：肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒、无血清培养基质、3%中性甲醇石腊仪器、耗材、低温离心机、血球计数器、游标卡尺实验步骤一、肝癌1．二乙基亚硝胺（DEN）诱发大白鼠肝癌（1）取体重250 g左右得封闭群大白鼠，雌雄不拘；（2）按性别分笼饲养。
除给普通食物外，饲以致癌物，即用0、25%DEN水溶液灌胃，剂量为10 mg/kg，每周一次，其余5天用0、025%DEN水溶液放入水瓶中，任其自由饮用；（3）共约4个月可诱发成肝癌；（4）也可以单用0、005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。
2．4-2甲基氨基氮苯（DBA）诱发大鼠肝癌（1）用含0、06%DBA得饲料喂养大鼠，饲料中维生素B2不应超过1、5～2 mg/kg；（2）4～6月就有大量得肝癌诱发成功。
3．2-乙酰氨基酸（2AAF）诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔肝癌（1）给成年大鼠含0、03% 2AAF标准饲料；（2）每日每平均2～3 mg 2AAF（也可将2AAF混于油中灌喂），3～4月后有80～90%动物产生肝肿瘤。
4．二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌：（1）用剂量为每日0、3～14 mg/kg体重，混于饲料或饮水中给予；（2）6～9个月后255/300大鼠发生了肝癌。
5．亚胺基偶氮甲苯（OAAT）诱发小鼠肝癌（1）用1%OAAF苯溶液（约0、1 ml含1 mg）涂在动物得两肩胛间皮肤上，隔日一次，每次2～3滴，一般涂100次。
（2）实验后7～8周即而出现第一个肝肿瘤，7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤约55%。
（3）或用2、5 mg OAAT溶于葵瓜子油中，给C3H小鼠皮下注射4次，每日间隔10天，也可诱发成肝癌。
小鼠肿瘤模型研究发展历史
小鼠肿瘤模型研究发展历史最早的肿瘤模型是通过将鼠肿瘤移植到具有免疫活性宿主小鼠中而建立的（图1A）。
这些同种异体移植模型在20世纪60年代至70年代期间用作药物筛选的主力，并且成功地鉴定了许多有效的细胞毒性药物，例如长春新碱和丙卡巴肼。
由于这种模型具有完全免疫活性，因此它们在免疫肿瘤学试剂的评估中也特别有用。
因为它们可用于研究从初始阶段的抗肿瘤免疫应答的产生，并且不需要过继转移免疫群体。
此模型可用于前期筛选鼠源/人鼠同源免疫检查点抑制剂的抗肿瘤作用及机制研究。
然而，这种小鼠模型缺乏人类的肿瘤组织和人类的免疫系统，无法模拟人类肿瘤微环境的异质性和复杂性。
肿瘤研究中应用的基因工程小鼠模型（genetically engineered mouse model，GEMM）通过转基因方法修饰小鼠的癌基因或抑癌基因来诱导肿瘤发生（图1B）。
其自发形成原位肿瘤，模拟了肿瘤形成的过程。
并且其肿瘤微环境含有天然免疫抑制基质和脉管系统。
然而此模型建立耗时长，肿瘤发生非同步化，存在非预期表型产生，缺乏人类免疫系统，并且与同源模型一样，需要考虑鼠免疫靶标是否与相应的人靶标交叉反应。
图1. 免疫肿瘤学的临床前小鼠模型为了创建更真实的人类疾病模型，重现人体免疫系统功能的临床前模型,研究人员开始研究开发人源化小鼠肿瘤模型。
人源化小鼠模型历史上的第一个重要事件是产生免疫缺陷小鼠品系，其能够使人细胞植入（图1C和图2）。
人类细胞或肿瘤组织移植到无胸腺裸鼠体内的过程始于20世纪60年代，但是间隔20年后CB17-Prkdcscid小鼠才被广泛应用。
这些小鼠是严重联合免疫缺陷（scid）突变的纯合子，可以成功移植人PBMC ，胎儿组织和人造血干细胞。
然而，基于CB17-Prkdcscid的人源化小鼠存在着很多缺点，如CB17-Prkdcscid 小鼠存在渗漏现象，随着年龄生长，会部分恢复自体的T和B细胞功能且NK细胞和其他免疫细胞活性处于高水平，这使得其对人类细胞的排斥；移植时为了清除小鼠内源造血干细胞，需要对其进行半致死剂量的放射性辐照，而scid突变产生DNA损伤修复缺陷，导致其抗辐照能力差。
小鼠抗肿瘤实验报告
肿瘤是当今世界严重的公共卫生问题之一，其发病率和死亡率逐年上升。
因此，寻找有效的抗肿瘤治疗方法对于提高人类健康水平具有重要意义。
本研究旨在通过构建小鼠抗肿瘤实验模型，探讨新型抗肿瘤药物的作用效果，为临床抗肿瘤治疗提供理论依据。
#### 二、实验材料与方法1. 实验动物：选取SPF级C57BL/6小鼠，体重18-22g，雌雄各半，由XX实验动物中心提供。
2. 实验药物：抗肿瘤药物XX，由XX制药公司提供。
3. 实验仪器：小鼠抗肿瘤实验模型、显微镜、细胞培养箱、CO2培养箱、酶标仪、凝胶成像系统等。
4. 实验方法：（1）构建肿瘤模型：采用皮下注射法，将S180肿瘤细胞悬液注入小鼠腋下，建立S180荷瘤小鼠模型。
（2）分组与给药：将荷瘤小鼠随机分为以下四组：A组：空白对照组，不给予任何处理；B组：模型组，给予等量生理盐水；C组：低剂量实验组，给予低剂量抗肿瘤药物；D组：高剂量实验组，给予高剂量抗肿瘤药物。
（3）观察指标：1）肿瘤体积：每周测量肿瘤直径，计算肿瘤体积；2）体重：每周测量小鼠体重；3）生存率：记录各组小鼠的存活天数；4）肿瘤细胞凋亡：采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况；5）肿瘤微环境：检测肿瘤组织中巨噬细胞、淋巴细胞等免疫细胞浸润情况。
1. 肿瘤体积：经过4周实验，各实验组肿瘤体积均较模型组显著减小（P<0.05），且高剂量实验组肿瘤体积最小。
2. 体重：各实验组小鼠体重与模型组相比无显著差异（P>0.05）。
3. 生存率：高剂量实验组小鼠生存率最高，达80%，显著高于模型组（P<0.05）。
4. 肿瘤细胞凋亡：TUNEL法检测结果显示，高剂量实验组肿瘤细胞凋亡率显著高于模型组（P<0.05）。
5. 肿瘤微环境：高剂量实验组肿瘤组织中巨噬细胞、淋巴细胞等免疫细胞浸润情况较模型组显著增加（P<0.05）。
#### 四、讨论本研究通过构建小鼠抗肿瘤实验模型，观察了新型抗肿瘤药物XX在不同剂量下的抗肿瘤效果。
研究肿瘤动物实验报告
研究肿瘤动物实验报告
本报告旨在探讨肿瘤动物实验的研究成果和相关发现。
实验目的是通过对动物模型进行肿瘤实验，从而加深对肿瘤发展机制的理解，挖掘新的治疗方法和疗效评估指标。
实验设计中，我们选用了经典的小鼠肿瘤模型，并通过不同的实验组和对照组进行比较，以确保实验数据的准确性和可靠性。
在实验过程中，我们详细记录了动物模型的建立、肿瘤的发展和治疗干预等关键步骤的信息。
通过对肿瘤动物实验的观察和分析，我们发现了一系列关于肿瘤生长、转移和治疗等方面的重要发现。
首先，我们观察到肿瘤在小鼠体内呈现出逐渐增大的趋势，并表现出不同的生长速率和特点。
此外，我们还注意到肿瘤可通过血液或淋巴系统进行转移扩散，进一步危及生命。
在治疗实验中，我们使用了常见的抗肿瘤药物，观察和记录了肿瘤对药物的反应和治疗效果。
结果显示，不同药物对肿瘤的治疗效果具有一定差异，且肿瘤对药物基因的敏感性也存在差异。
这些发现为肿瘤治疗提供了新的思路和策略。
此外，我们还做了一系列生物学分析，包括组织切片、免疫组织化学染色和基因表达分析等。
通过这些实验，我们深入了解了肿瘤的组织学特征和分子机制，为进一步研究提供了有效的实验数据和依据。
总结而言，肿瘤动物实验为我们提供了关于肿瘤的重要信息和
数据。
通过对动物模型中肿瘤的观察和实验干预，我们深入了解了肿瘤的发展机制、治疗响应和分子特征。
这些发现为肿瘤治疗和研究提供了新的理论基础和临床指导。
在未来的研究中，我们将进一步优化实验设计，加强实验数据的统计和分析，以推动肿瘤研究的进一步发展和转化应用。
小鼠癌症模型的建立及治疗策略研究
小鼠癌症模型的建立及治疗策略研究近年来，癌症带来的威胁越来越大，不仅给人类带来巨大的伤害，也给动物带来不少困扰。
小鼠在癌症模型的建立上具有很大优势，因为小鼠与人类的遗传相似度较高，又可以轻松获取，更因其短生命周期、高繁殖速度和低成本等特征，成为了目前最为理想的癌症研究模型之一。
一、小鼠癌症模型的建立1、人工诱导模型人工诱导模型是一种基于实验室操作、通过引入损伤而引发癌症的模型。
这种模型常用的方法有放射线照射、化学物质注射等。
人工诱导模型的优点在于可以直接控制造模方式，不过可能存在某些限制和安全性问题。
2、遗传性模型遗传性模型通常是通过引入特定基因完成，以模拟人类遗传癌症疾病。
该类模型具有遗传多变性，可以在不同的背景上诱导不同的癌症类型。
遗传模型介绍最广泛的例子是P53突变小鼠模型，这些小鼠胚胎会带有p53 突变，从而使正常细胞失去周期和死亡机制，成为体内肿瘤的最终形成因素。
3、转移性模型转移性瘤模型是通过将人类癌细胞注射到小鼠体内，通过它转变成更具有侵略性的癌症类型，具有可应用性强的特点。
二、小鼠癌症治疗策略研究癌症治疗的核心目标是发现癌症细胞生长与传播所依赖的特定靶标，这被称为“拿下癌症的脚踏实地”。
1、药物治疗药物治疗是癌症治疗的核心部分之一，其核心目标是发现治疗癌症所依赖的特定靶标，然后研究合适的化学物质，以达到影响癌症细胞可持续性生长的效果。
比如，索非布韦（sorafenib）是通过抑制血管生成来阻止癌细胞迅速生长的化学物质。
2、放疗治疗放疗，即同位素治疗，是一种通过放射性同位素结合寻找癌症细胞，从而与癌症细胞特异性相结合的治疗方法。
同位素在特定时间释放出粒子，杀死癌细胞，起到治疗作用。
3、免疫治疗免疫疗法是癌症治疗中的一项重要策略，用于提高体内免疫细胞对某种癌细胞的抗体反应。
癌症也被称为“免疫逃避性疾病”，因为它可以通过发生在免疫细胞和肿瘤组织之间的复杂相互作用，从而在某种程度上逃避宿主的免疫攻击。
小鼠模型在肿瘤免疫研究中的进展与意义
究 恶 性 细 胞 与 免 疫 细 胞 之 间 的 关 系 。 恶 性 肿 瘤 的 各 种 小 鼠 模 型 奠 定 了 肿 瘤 免 疫 学 的 基 础 ,指 导 了 免 疫 监 视 、免
疫平衡和免疫逃逸理论的形成,故构建 动 物 模 型 在 研 究 中 起 到 至 关 重 要 的 作 用。本 文 就 近 年 来 有 关 肿 瘤 免 疫
immunecellscanbestudied.Various mouse modelsof malignanttumorshavelaidthefoundationfortumor immunologyandguidetheformationofimmunesurveillance,immunebalanceandimmuneescapetheory,so
肿瘤的小鼠模型研究
肿瘤的小鼠模型研究引言：肿瘤是一种常见的疾病，造成了全球广泛的健康问题。
为了研究这种疾病的发生机制以及开发有效的治疗方法，科学家们一直在寻找合适的动物模型来进行实验。
其中，小鼠模型已经成为肿瘤研究领域最常用的模型之一。
本文将介绍小鼠模型在肿瘤研究中的应用，包括模型建立、体内实验和数据分析等方面。
一、小鼠模型的建立1.1 选择适当的小鼠品系建立肿瘤小鼠模型时，选择合适的小鼠品系非常重要。
由于不同品系的小鼠在遗传背景、免疫系统和易感性等方面存在差异，因此需要根据具体的研究目的选择合适的品系。
目前常用的小鼠品系包括NOD/SCID小鼠、BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠等。
1.2 形成肿瘤模型形成肿瘤模型的方法有很多种，常用的方法包括植入肿瘤细胞、化学诱导和基因敲除等。
其中，植入肿瘤细胞是最常用的方法之一。
这种方法将肿瘤细胞注射到小鼠体内，使其形成肿瘤。
根据不同的实验目的，可以选择不同的细胞类型，如肿瘤细胞系、原代肿瘤细胞或转基因小鼠肿瘤细胞等。
此外，还可以通过化学物品诱导小鼠形成肿瘤，或者利用基因敲除技术使小鼠体内特定基因缺失从而形成肿瘤。
二、小鼠模型的应用2.1 病理学研究小鼠模型可以用于病理学研究，通过对小鼠形成的肿瘤进行组织学和病理学检查，可以了解肿瘤的组织结构、细胞类型和病理特征等。
这对于肿瘤的诊断和鉴别诊断非常重要。
2.2 药物筛选小鼠模型可以用于筛选新的抗肿瘤药物。
通过将候选药物注射到小鼠体内，观察其对肿瘤的治疗效果，可以评估药物的抑制肿瘤生长的能力。
这种方法可以帮助科学家们确定哪些药物具有潜在的治疗效果，并优先发展。
2.3 肿瘤发生机制研究肿瘤的发生机制是肿瘤研究的重要课题之一。
小鼠模型可以通过研究肿瘤的发生过程以及相关信号通路的调控机制，揭示肿瘤的发生机制。
这对于进一步了解肿瘤的发生发展规律以及找到干预和预防肿瘤的新途径具有重要意义。
三、小鼠模型研究的数据分析小鼠模型研究产生的数据通常需要进行统计分析，以便得出可靠的结果。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
建立小鼠肿瘤模型的研究进展摘要：建立一种理想的肿瘤动物模型对研究肿瘤的发病、治疗和预防有重大的意义。
其中小鼠肿瘤模型具有生长周期快、易获得、易操作等优点被基础实验研究所广泛采用，如何选择和建立一个合适的小鼠肿瘤模型对肿瘤的整个研究有着举足轻重的作用。
关键字：肿瘤，动物模型，小鼠肿瘤，是一种严重威胁人类健康的多发病和常见病。
对肿瘤的研究一般都是在人类疾病动物模型的基础上展开的。
建立一个完全反映人类疾病的动物模型比较困难，但可依据不同的实验目的选择相应的动物实验模型。
1.实验动物的选择可用作肿瘤模型的动物有很多，小鼠肿瘤模型作为其中一种常用模型主要因为有以下几个优点。
（1）易获得，常用的肿瘤模型小鼠通常采用SPF级小鼠，SPF级小鼠一般医学院校及研究所都能买到。
（2）生长周期短，一般小鼠肿瘤模型两周左右就能长大，能大大缩短实验周期。
（3）易操作，小鼠的动物实验操作一般简便，因此可适当增加组内样本数量，使实验数据更具说服力。
2.理想的建立肿瘤模型应具备的条件（1）肿瘤生长的过程应与人类肿瘤生长过程相似，做到尽可能复制出与人类肿瘤相同的模型。
（2）制作模型的方法简单易行。
（3）动物模型的重复性要好，要能满足实验的多次重复试验结果稳定性好。
（4）采用的建模方法对实验人员和环境无危害或危害较小。
3.肿瘤来源的选择现在世界上保有近500种的动物移植瘤，但常用于筛药的不到40种，多数为小鼠肿瘤，其次是大鼠和仓鼠移植瘤，包括小鼠L1210淋巴白血病，P1534淋巴白血病，艾氏腹水瘤，Friehd病毒白血病，肉瘤180，白血病P388，Lewis肺癌，腺癌755，白血病615，Walker-256，吉田肉瘤，肉瘤45，Liol淋巴瘤，Dunning 白血病，Ｗagner癌肉瘤，白血病L5170Y，P1798淋巴肉瘤，LPC-1浆细胞瘤，淋巴瘤8，B16或Cloadman黑色素瘤，Ridaway骨肉瘤，Gardner 淋巴肉瘤，肉瘤37，P315白血病，Mur hy-sturm淋巴肉瘤，Jensen肉瘤，Geurin氏癌，仓鼠十二指肠腺癌和人体肉瘤HSL第1代杂交鼠移植。
它们对抗癌药作用的敏感性大致可分为敏感，中度敏感，低敏感和不敏感瘤株四类，同样敏感株对抗癌药的疗效水平也不相同。
4.常用的肿瘤建模方法4.1自发或诱发小鼠肿瘤模型自发性肿瘤模型是指利用实验动物本身某种自发肿瘤发病率高所建立的动物模型，如利用AKR小鼠建立白血病模型、利用C3H小鼠建立乳腺癌模型。
优点：自发性肿瘤通常比用实验方法诱发的肿瘤与人类所患的肿瘤更为相似，有利于将试验结果推用到人；这一类肿瘤发生的条件比较自然，有可能通过细致观察和统计分析而发现原来没有发现的环境致癌因子。
缺点：肿瘤的发生率参差不齐，不可能在短时间内获得大量的肿瘤学材料，观察时间长，实验消耗大。
诱发性肿瘤模型是指对实验动物给予致癌物质、射线以及某些致病病毒而诱发各种肿瘤的动物模型。
常用的诱癌物有放射线局部照射、化学致癌物（烷化剂、亚硝胺类、芳香胺类）、生物毒素（黄曲酶毒素）、细菌（幽门螺杆菌）、肿瘤病毒感染。
如7，12一二甲基苯蒽诱发的小鼠恶性肿瘤动物模型，四氯化碳乙醇诱导小鼠原发性肝癌，利用二乙基亚硝胺诱发小鼠肺癌；利用甲基胆葸诱发小鼠胃癌和宫颈癌；感染小鼠白血病病毒可诱发白血病等等[]。
诱癌方法分为原位诱发和异位诱发，原位诱发：指将致癌物直接与动物靶组织或靶器官接触而诱发该组织或器官发生肿瘤，接触方法可通过涂抹、灌注、喂养或埋置等。
异位诱发：将与致癌物接触后的动物组织或器官埋置于该动物或另一正常动物皮下而产生的该组织或器官的肿瘤。
异位诱发肿瘤具有易于观察和取材的优点[1~3]。
4.2移植型小鼠肿瘤模型移植性肿瘤模型是将肿瘤细胞接种于相关种属的实验动物所建立的动物模型。
移植模型分为同种移植和异种移植，同种移植就是用于移植的肿瘤细胞来源于同系或同种动物，此种移植一般不会产生免疫排斥现象或排斥现象很小，方法一般最常用的就是SPF级小鼠皮下移植和原位移植。
裸鼠因为没有免疫排斥作用，因此为理想的异种移植受体，但裸鼠饲养条件要求太高，一般基础实验可以不选用此法。
常用的将肿瘤移植如体内的方法有肿瘤组织块移植法，肿瘤组织悬液移植法，肿瘤细胞培养液移植法和腹水瘤细胞移植法。
组织块移植法操作复杂，成功率不高，目前已基本不使用此法造模。
目前较常用的是采用肿瘤组织悬液移植法和肿瘤细胞培养液移植法进行皮下移植或原位移植。
其基本操作步骤为首先收集肿瘤细胞悬液，皮下移植常采用的接种量为每只0.2ml,肿瘤细胞数为1×10 6个。
原位移植由于受接种体积限制，所以可以将肿瘤细胞悬液浓度提升至1×10 7个/ml。
张煜等采用原位注射细胞悬液法成功获得小鼠肝癌模型，其模型成功率高，稳定性好[4]。
但需注意的是，在科学实验中，要警惕移植瘤株生物学特性的改变，包括：传代后组织学类型，生长特性(接种成活率，生长速度，自动消退率，宿主寿命与宿主反应等)，侵袭和转移特性以及对化疗药物敏感性等[5~6]的改变。
4.3转基因小鼠肿瘤模型转基因技术是把外源基因用实验方法导入动物基因组中, 并使之在动物体内表达的一种技术。
转基因动物技术包括四个重要步骤: ①靶基因(被导入的外源基因, 又称目的基因、转基因)的获得和改建; ②靶基因向生殖细胞或ES 细胞转移; ③受精卵或胚胎组织的发育;④筛选、鉴定和稳定转基因动物品系。
Gordon等[7]。
在20世纪80年代初创立了转基因小鼠技术。
转基因小鼠是指通过不同的方法将外源基因导入小鼠受精卵，然后产生携带外源基因的小鼠品系，并能通过生殖细胞将外源基因传递给后代的小鼠。
现在最常用的转基因方法是显微注射法，该法始于1974年，Jaenisch等[8]用显微注射法将多瘤病毒SV 40的DNA 导入到小鼠的囊胚（blastocyst ）中，在子代小鼠的肝、肾组织中检测到了SV 40的DNA 。
这一结果证明，将外源基因导入胚胎细胞中并实现整合是可能的。
在此基础上，人们又开发了可诱导的转基因技术，该技术可以调控转基因模型的基因表达，目前，最常用的是反式因子rtTA 与四环素衍生物强力霉素结合后激活四环素操纵子表达的方法（tet-on），而tTA与强力霉素结合则起抑制四环素操纵子表达的作用（tet-off）。
这样，tet-on转基因小鼠可以通过摄入四环素的方法激活癌基因的表达；tet-off 转基因小鼠则持续表达癌基因，直至因强力霉素的摄入而被特异性抑制。
应用此系统已构建了可诱导性表达c-myc和SV40Tag的转基因小鼠肿瘤模型[9~10]。
4.4基因敲除肿瘤小鼠模型随着基因打靶技术的进步,基因敲除肿瘤小鼠模型的研究已经有了长足的发展,其种类也越来越多。
基因敲除又称基因打靶，是指利用外源DNA与受体细胞染色体DNA上的同源序列之间发生重组，使之整合到预定位点上，并替代原有基因，从而改变细胞遗传性的方法。
利用此方法产生的去除特定基因的小鼠模型称为基因敲除小鼠模型。
这其中包括①同源重组法，可产生目的基因完全缺失的小鼠，但发现这些小鼠往往会有较高的致死率，生长发育迟缓不育或主要的器官系统发育缺陷。
②Cre / l oxP诱导的条件敲除体系法，可在特殊的部位或特定的生长阶段使目的基因缺失，这个方法的最大好处就是大大降低了致死率[11]。
5.展望小鼠肿瘤模型的建立为肿瘤的病因学、发展过程和治疗研究提供了极大的帮助，尤其是近来分子生物学技术的提高及在小鼠肿瘤模型中的应用，为肿瘤有关基因研究提供了依据，为进一步研究肿瘤发生机制及靶向治疗提供了广阔的前景。
不可否认，目前仍存在一些问题有待解决，比如：基因修饰鼠基因稳定性的问题；另外，在移植性动物模型的建立中，对所移植的肿瘤细胞国内没有统一的监控体系，有些细胞可能已经发生肿瘤细胞株的变异。
但是随着研究的深入以及各种技术的完善，人们将建立更为完善的肿瘤模型，在研究肿瘤及治疗肿瘤方面取得更大的突破。
参考文献[1] 孙顶,韩玲等．7，12一二甲基苯蒽诱发小鼠恶性肿瘤动物模型的建立[J]．海军医学志．2009，30（４）：296－299．[2] 肖祖刚,余径松等．四氯化碳／乙醇在小鼠原发性肝癌模型中的应用及其作用机理的探讨[J]．医学动物防制．2006，22(3)：164－165．[3] MicheleT,Yip-Schneider,CourtneyJ.Doyle,Alcohol Induces Liver Neoplasia in a Novel Alc-oohl-Preferring Rat Model,Alcoholism:Clinical and Experimental Research,Vol.35,No.12.December 2011.[4] 张煜,徐涵文等．注射法制作ICR小鼠肝癌模型及其改进[J]．细胞生物志．2007，29：434－438．[5] 杜伟,陈明清．建立小鼠肿瘤模型的研究进展[J]．中华医学实践杂志．2005，4(11)：1120－1122．[6] 刘福英．可移植性肿瘤动物模型的复制应用及问题[J]．医学动物防制．2000，16(9)：482—485．[7] Gordon J W，et al.[ J ].Porc Natl Acad Sci USA,1980,77(12):7380-7384.[8] Jaenisch R, Mintz B. Simian virus 40 DNA sequences in DNA of healthy adult mice derivedfrom preimplantation blastocytes injected with viral DNA. Proc Natl Acad Sci USA, 1974, 71:1250-1254.[9] 张成香，程言信．Te-on诱导表达c-myc和S V40Tag的转基因小鼠肿瘤模型[J]．中国实验动物学报．2008，16(4)：276－281．[10] 吴红，张成香等．Tet-on系统诱导表达c-myc转基因小鼠的建立[J]．肿瘤．2002，22（3）：190－193．[11] Liu J L, Yakar S, LeRoith D. Conditional knockout ofmouse insulin Like grow factor geneusing the Cre / loxP system [ J ]. Exp BiolMed, 2000,223 (4) : 344 - 351.。