肿瘤免疫及肿瘤标记物检测
检验科常见肿瘤标志物检测方法与解读
检验科常见肿瘤标志物检测方法与解读肿瘤标志物是指在肿瘤患者体内可以检测到的一种特殊标记物质，通过检测这些标志物可以对肿瘤患者进行早期筛查、诊断和治疗效果的监测。
在检验科中，常见的肿瘤标志物检测方法有多种，本文将对其中的几种常见方法及其解读进行介绍。
一、血清学检测法血清学检测法是通过采集患者的血液样本，检测其中的肿瘤标志物浓度来判断是否存在肿瘤的一种方法。
这种方法的优点是简单易行，非侵入性，适用范围广。
常用的检测项目有癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)等。
当血液中这些标志物的浓度超过正常范围时，可能提示患者存在相应的肿瘤风险。
但需要注意的是，血清学检测法无法确定具体的肿瘤部位和病情严重程度，不能作为肿瘤的唯一诊断手段。
二、免疫组化检测法免疫组化检测法是通过对患者组织样本进行染色、观察和分析来确定肿瘤标志物的表达情况。
通过使用特定抗体与标志物进行特异性反应，可以确定肿瘤标志物在组织样本中的分布和表达水平。
这种方法的优点是能够明确标志物在具体组织中的位置和浓度，有助于提供更准确的诊断结果。
常见的免疫组化检测项目有ER、PR、HER2等。
但是，该方法需要较为专业的技术人员进行操作，且操作过程较为繁琐，对标本处理和染色条件有较高的要求。
三、分子生物学检测法分子生物学检测法是利用DNA、RNA、蛋白质等分子水平的变化来判断肿瘤标志物的存在与否。
这种方法的优点是高灵敏度、高特异性，能够提供更为准确的诊断结果。
常用的检测项目有基因突变、融合基因等。
通过检测肿瘤细胞中的基因变化，可以了解肿瘤的遗传特征，为精准治疗提供依据。
然而，该方法的缺点是操作较为繁琐，需要较长的检测时间，且成本较高。
四、细胞学检测法细胞学检测法是通过对患者细胞样本进行镜下观察和分析来确定肿瘤标志物的存在与否。
该方法的优点是结果直观，可以确定肿瘤的种类和恶性程度。
常见的细胞学检测项目有涂片染色、细胞组织培养等。
然而，细胞学检测法的准确性受到技术人员经验和样本质量的影响，需要配合其他检测方法进行综合分析。
肿瘤标志物检测的标准
肿瘤标志物检测的标准
肿瘤标志物检测的标准是由国家卫生健康委员会颁布的《常用血清肿瘤标志物检测的临床应用和质量管理》（WS/T 459-2018）标准。
该标准规定了常用血清肿瘤标志物检测的临床应用和质量管理要求，适用于临床实验室以及研制和生产肿瘤标志物试剂的单位。
根据该标准，常用血清肿瘤标志物包括癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）、癌抗原125（CA125）、糖类抗原（CA19-9、CA15-3等）等。
这些肿瘤标志物可以通过化学、免疫学以及基因组学等方法测定，对肿瘤的诊断、疗效和复发的监测、预后的判断具有一定的价值。
需要注意的是，肿瘤标志物检测结果并不能作为判断是否患癌的“金标准”，如果想明确肿瘤性质，需进一步进行病理检查。
此外，由于某些良性疾病也可能导致肿瘤标志物的升高，因此在进行肿瘤标志物检测时需要综合考虑临床症状和其他检查结果，避免出现误诊、漏诊等情况。
肿瘤标志物检测常用方法
肿瘤标志物检测常用方法引言：肿瘤标志物是一种用于早期癌症诊断、疾病监测和治疗反应评价的生物分子。
随着科技的不断进步，肿瘤标志物检测方法也在不断发展。
本文将介绍常用的肿瘤标志物检测方法，包括血清标志物检测、组织标志物检测、基因标志物检测和液体活检。
一、血清标志物检测血清标志物检测是目前最常用的肿瘤标志物检测方法之一。
通过检测血液中特定蛋白质、酶、激素等生物标志物的水平，可以帮助医生判断肿瘤的存在和发展程度。
1. 酶联免疫吸附检测（ELISA）ELISA是一种基于酶的免疫学原理进行的血清标志物检测方法。
它可以通过特异性抗体与待检测标志物结合来实现检测，常用于癌胚抗原（CEA）、前列腺特异性抗原（PSA）等肿瘤标志物的检测。
2. 化学发光免疫分析（CLIA）CLIA是一种利用化学发光原理进行的血清标志物检测方法。
它通过将标志物与酶标记物结合，通过化学反应释放能量，从而实现检测。
CLIA方法的敏感性和特异性相对较高，适用于许多肿瘤标志物的检测。
二、组织标志物检测组织标志物检测是通过取得肿瘤组织样本，对其中的蛋白质、基因等进行分析，以揭示肿瘤发生和发展的机制。
1. 免疫组织化学染色免疫组织化学染色是一种常用的组织标志物检测方法。
它利用特异性抗体与待检测标志物结合，并通过染色反应使标志物在组织切片上显示出颜色，从而实现检测。
免疫组织化学染色可以用于检测HER2、ER、PR等肿瘤相关标志物。
2. 原位杂交原位杂交是一种检测肿瘤细胞中基因异常的方法。
它通过标记探针与待检测基因序列结合，通过显色反应或荧光反应来检测特定基因的存在和表达水平。
原位杂交方法可以用于检测荧光原位杂交（FISH）和银染原位杂交（SISH）等。
三、基因标志物检测基因标志物检测是一种通过检测肿瘤细胞中特定基因的状态来进行预测、诊断和治疗评估的方法。
1. 聚合酶链式反应（PCR）PCR是一种常用的基因标志物检测方法，它可以通过扩增待测基因的DNA片段，从而使其在实验中能够被检测到。
肿瘤免疫及其免疫检测
② 胃癌,阳性率约为50%,结肠癌,阳性率约为60%; ③ 急性胰腺炎,胆囊炎,胆汁淤积性胆管炎,肝硬化,肝炎等
疾病,CA 19-9也有不同程度得升高,注意与恶性肿瘤得鉴别。
(一)肿瘤标志物得慨述
1、 肿瘤标志物得定义
肿瘤标志物(tumor marker,TM)就是指在肿瘤得发 生与增殖过程中,由肿瘤细胞本身所产生得或者就是 由机体对肿瘤细胞反应而产生得,反映肿瘤存在与生 长得一类物质,包括蛋白质、激素、酶(同工酶)、多 胺及癌基因产物等。患者血液或体液中肿瘤标志物得 检测,对肿瘤得辅助诊断、鉴别诊断、疗效观察、病 情监测以及预后得评价具有一定得价值。
3、 酶类肿瘤标志物
⑴ 前列腺特异性抗原 (PSA)
PSA就是一种由前列腺上皮细胞分泌得蛋白酶。在血清中PSA 以两种生化形式存在: ➢ 一部分(5%～40%)就是以低分子量(33kD)得
游离PSA(f-PSA)形式存在; ➢ 大部分(60%～90%)就是以PSA与α1–抗糜蛋白酶、
α2-巨球蛋白等结合得形式存在, 称复合PSA(c-PSA)。 ➢ 总PSA(t-PSA),包括血清中f-PSA与c-PSA。
一、抗肿瘤得细胞免疫机制
㈠ T细胞 1、 CD4+T细胞 2、 CD8+T细胞(在抗肿瘤效应中起关键作用) 3、 γδ+ T细胞 ㈡ NK细胞 ㈢ 巨噬细胞
二、抗肿瘤得体液免疫机制
1、补体得溶细胞效应 2、抗体依赖得细胞介导得细胞毒效应 3、抗体得免疫调理作用 4、抗体封闭肿瘤细胞表面某些受体 5、抗体干扰肿瘤细胞粘附作用 6、其她机制
肿瘤标志物检验方法
肿瘤标志物检验方法肿瘤标志物检验方法是目前临床上用于筛查肿瘤、判断肿瘤转移、监测治疗效果以及预后评估的一种重要手段。
目前常用的肿瘤标志物检验方法包括血清学检验、免疫组化检验、分子生物学检验等多种方法。
血清学检验是一种最为常见的检测方法，常见的肿瘤标志物有癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）、糖类抗原153（CA153）、甲胎蛋白（AFP）等。
这些标志物通常是在肿瘤细胞或者细胞分泌物中分泌的一些特异性物质，在患者的血液中测定其浓度可以反映肿瘤的存在、进程以及治疗效果等。
血清学检验可以提供非侵入性、快速、低成本的信息，但它的特异性和敏感性并不高，易受干扰因素影响，因此无法作为诊断肿瘤的唯一依据。
免疫组化检验是肿瘤确诊的重要手段之一，最早是用于组织病理学的研究，后来逐渐用于肿瘤的诊断和治疗中。
它通过采用抗体识别特定的肿瘤抗原，然后通过光学显微镜观察和分析，从而获得肿瘤相关信息。
与血清学检验相比，免疫组化检验具有更高的特异性和灵敏性，并且能够更好地区分肿瘤类型、孕育水平和预后。
分子生物学检验是肿瘤标志物检测的新兴技术之一，是近年来快速发展的领域，主要是通过检测肿瘤病人的DNA、RNA或者蛋白质等生物标志物的变化，来鉴别肿瘤类型、诊断和监测肿瘤转移以及治疗效果等，具有高度的特异性和灵敏度，可以早期诊断肿瘤、监测肿瘤的治疗进程和预后评估，为肿瘤的诊断和治疗提供了准确、方便和快速的方法。
综上所述，肿瘤标志物检验方法是目前临床上用于诊断、治疗和评估肿瘤的重要手段之一，不同的方法兼具优缺点，应根据肿瘤类型、病情程度以及具体需求来确定采用何种检测方法，以达到更加准确、快速和有效的肿瘤治疗。
肿瘤免疫力低下诊断标准
肿瘤免疫力低下诊断标准
肿瘤免疫力低下的诊断标准主要包括以下几个方面：
1. 血液检查：通过检测血液中的免疫细胞数量和活性，如T细胞、B细胞、NK细胞等，可以评估患者的免疫状态。
2. 免疫功能测试：通过检测患者的免疫功能指标，如免疫球蛋白、补体等，可以评估患者的免疫系统是否正常工作。
3. 肿瘤标志物检测：某些肿瘤标志物可以反映肿瘤的存在和生长情况，如癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）等。
如果肿瘤标志物水平异常升高，可能表明患者存在肿瘤或免疫功能低下。
4. 症状观察：免疫力低下的患者可能会出现反复感染、疲劳、乏力等症状。
如果出现这些症状，可能表明患者的免疫力较低。
需要注意的是，免疫力低下并不一定意味着患有肿瘤。
因此，在诊断肿瘤免疫力低下时，需要综合考虑患者的病史、症状、体征以及相关检查结果，以便做出准确的诊断。
同时，针对免疫力低下的患者，应该积极采取相应的治疗措施，以提高患者的免疫力和生活质量。
肿瘤标志物检验
03
常见肿瘤标志物的检测
甲胎蛋白（AFP）
总结词
甲胎蛋白是诊断肝癌的重要指标，尤其是对于原发性肝癌的诊断具有较高的特异性。
详细描述
甲胎蛋白是一种蛋白质，通常在胎儿早期由肝脏和卵黄囊合成。在成人中，甲胎蛋白的合成量通常较低。当肝脏 细胞或卵黄囊发生恶性转化时，甲胎蛋白的合成量会显著增加，因此检测甲胎蛋白的水平有助于诊断肝癌。
肿瘤标志物存在于患者的血液、细胞 、组织或体液中，通过化学或免疫学 的方法可对其进行检测。
肿瘤标志物的分类
01
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03
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
按功能分类
可分为肿瘤特异性抗原、 胚胎抗原、分化抗原、激 素受体等。
按来源分类
可分为肿瘤细胞产生的标 志物和宿主对肿瘤反应产 生的标志物。
按性质分类
可分为蛋白质类、酶类、 激素类、糖类、癌基因产 物等。
肿瘤标志物检验
目录
• 肿瘤标志物检验概述 • 肿瘤标志物检验的临床应用 • 常见肿瘤标志物的检测 • 肿瘤标志物检验的注意事项 • 肿瘤标志物检验的发展趋势和展望
01
肿瘤标志物检验概述
肿瘤标志物的定义
肿瘤标志物：是指在恶性肿瘤发生和 增殖过程中，由肿瘤细胞合成、释放 或宿主对肿瘤反应而产生的，反映肿 瘤存在和生长的一类物质。
肿瘤标志物检验的敏感性和特异性是评估其临床应用价值的 重要指标。高敏感性和特异性的肿瘤标志物有助于提高早期 发现肿瘤的准确性。
肿瘤的鉴别诊断
肿瘤标志物检验在鉴别诊断中具有重要价值。通过检测肿 瘤标志物的水平，可以辅助医生判断肿瘤的类型和来源， 有助于制定更准确的治疗方案。
不同的肿瘤类型可能产生不同的肿瘤标志物，因此，肿瘤 标志物的鉴别诊断价值在于其特异性和敏感性，以及与其 他疾病的鉴别能力。
肿瘤标志物检测技术及其在诊治中的应用
肿瘤标志物检测技术及其在诊治中的应用肿瘤标志物是指一类在肿瘤细胞中产生的特定分子或物质，在肿瘤诊断及疗效监测中起到重要作用。
目前临床上应用较广泛的肿瘤标志物有CEA、CA125、PSA等。
肿瘤标志物检测技术的不断发展，为肿瘤的早期筛查和治疗提供了更加精确的方法。
一、肿瘤标志物检测技术的分类肿瘤标志物检测技术主要分为两大类：免疫学检测和分子生物学检测。
1. 免疫学检测免疫学检测是利用特异性抗体与肿瘤标志物结合，通过特异性反应来检测肿瘤标志物的存在。
常用的免疫学检测方法有酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫荧光分析法（IFA）和放射免疫分析法（RIA）等。
2. 分子生物学检测分子生物学检测是利用PCR、原位杂交等方式，对肿瘤细胞中特定标志的基因或片段进行检测。
这种技术具有高灵敏度、高特异性等优点。
常用的分子生物学检测方法有PCR、FISH、CISH等。
二、肿瘤标志物的临床应用1. 肿瘤早期筛查早期筛查是肿瘤治疗的关键。
肿瘤标志物检测技术可以帮助医生对患者进行早期筛查，及时发现肿瘤，提高治疗成功率。
例如，CA125是卵巢癌标志物，PSA是前列腺癌的标志物，CEA是结直肠癌的标志物等，通过检测这些标志物可以对这些肿瘤进行早期筛查。
2. 肿瘤疗效监测肿瘤标志物检测技术还可以用于肿瘤疗效的监测。
例如，在结直肠癌放疗或化疗过程中，CEA水平会随着治疗的进展而降低，如果出现上升的情况，则提示治疗效果不理想，需要及时调整治疗方案。
3. 肿瘤最小残留病灶检测肿瘤标志物检测技术可以用于检测肿瘤的最小残留病灶。
例如，CEA在结直肠癌手术后，即使已经切除了肿瘤组织，但CEA仍然可以检测到，提示可能存在肿瘤残留，需要进一步检查和治疗。
4. 肿瘤预后评估肿瘤标志物检测技术可以评估患者的肿瘤预后，尤其是对于某些高危患者。
例如，对于乳腺癌患者，HER2/neu阳性病人的预后可能较差，此时通过HER2/neu检测可以对预后进行评估，进一步制定治疗方案。
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目前发现
抗癌基因 有数十个：nm23基因是肿瘤转移抑 制癌基基因因。p16是比p53更重要的一种新型抗癌基因； S9A0%R有I的参10人与0类多并癌个抑症：制中r一a都s种基过关因度键家表蛋族达白参。质与，多这种种肿蛋瘤白的质形在 转成移与基发因展（，m8e2ta年st以as来is，g在en膀e）胱有癌一、些乳腺? 癌、
2. 信息传递蛋白类
3. 生长因子及其受体类
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proto-oncogene
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(二) 抑癌基因 tumor suppressor gene
主正要常功细能胞抑癌基因能抑制细胞转化和肿瘤发生。
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二 肿瘤抗原
• 是指细胞癌变过程中出现的新抗 原及过度表达的抗原物质的总称。
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产生机制
➢ 1细胞癌变过程中合成了新的蛋白质分子； ➢ 2异常糖基化导致蛋白的特殊降解产物； ➢ 3基因突变使正常蛋白质分子的结构发生改变； ➢ 4正常情况下处于隐蔽状态的抗原表位暴露出来； ➢ 5多种膜分子的异常表达；尤其是信号传导分子。 ➢ 6胚胎抗原或分化抗原的异常表达。
5 抑制蛋白激酶活性；
6 改变DNA甲基化酶活性；
7 调节组织蛋白酶活性 ；
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(三) 肿瘤细胞转移基因 转移抑制基因
肿瘤细胞转移基因的激活和/或转移抑制
基因失活均可诱发肿瘤细胞转移表型而导致 转移的发生.
此类基因本身并不引起正常细胞癌变，而 是参与其调控作用。
人类少有；具有明显的个体独特性 特异性高，抗原性弱，为TSA,如MUM-1
特异性弱，同株病毒所诱发的肿瘤具有 相同的抗原性。抗原性强。
人类肿瘤抗原多属于此类抗原。 可表达TSA，也可表达TAA。
胚胎组织正常成分，出生后消失。细胞
恶变后大量出现，可作为诊断的一个重
要指标。为TAA.
包括 分泌型的 AFP，和膜相关的 CEA
肿瘤免疫 及肿瘤标记物检测
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一 肿瘤相关基因 二 肿瘤抗原 三 抗肿瘤免疫效应 四 免疫逃逸
五 免疫诊断和治疗 六 肿瘤标记物的检测
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肿瘤免疫学
Tumorimmunology
• 是研究肿瘤抗原、机体的免疫功能与肿 瘤发生发展的相互关系、机体对肿瘤的免 疫应答及其抗肿瘤免疫效应机制、肿瘤的 免疫诊断和免疫防治的科学。
结是肠直癌接、促肾进癌转、移肝发癌生、的肺关癌键、基胰因腺，癌其、存胃在癌或、表 及达造增血强系会肿引统起瘤侵中袭，转均移检的出发了生ras癌基因的异 转常移；相m关y基c基因因（参m与et细as胞ta凋si亡s-，ascs-omciyact基ed因g与ene） 有多一只种些涉肿?及瘤转发移生的发某展个有阶关段。，并非参与整个转移过 程。
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一 肿瘤相关基因
细胞癌变过程中发生改变的基因.
癌基因 抑癌基因 调控基因
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段控度根 激功 制(据一是活能 ，vi其动并单 当)r来癌物异位 胞us源细常。内基o可胞表正调n癌生在癌构转因存癌基在存分c存及达常控基长正基和化在基因于在o(在为致，情机g因、常因表。，于因生。oe于癌有增细，达从况制n调正，物1因毒码实n正9ce同殖胞当发R1病控常是界基癌酪它而下受6o常o.源、内其生8细细人中因基氨在g毒导癌损u的年蛋序分未受异se胞胞体，来因酸细基致基时细n肉D列化激到常白生基正从自。蛋胞e胞因正因，u瘤，和活某，长因常酵病白转激)e基组病常表 癌s具发的些能和组细母毒激化酶b因毒内有 育细 条 使细达 基e分中胞到而酶中类组r：促等胞件细g固化未中人胞被”起受 因中基进生癌激胞等。激的类命基关有癌严 可，因正理基活发首活一细名因键的广变密 过与组常功因时生次的种胞为，作泛病一。“细能叫，恶发细正中病证用存毒编胞。原结性现胞常都，
肿瘤特异性抗原（TSA) 肿瘤相关性抗原 (TAA)
TAA是指非肿瘤细胞所特 有的、正常细胞和其他组 织上也存在的抗原，只是 其含量在细胞癌变时明显 增高。只表现出量的变化 而无严格肿瘤特异性。如：
胚胎性抗原
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根据肿瘤发生的原因分类
理化致癌剂 病毒诱导 自发肿瘤抗原
胚胎抗原
◆突变的抑癌基因产物：如突变p53可造成其产物堆积，为免疫系
统识别。
◆突变的癌基因表达产物：正常的ras基因产物无免疫源性，癌细胞
中在编码ras第12或61 位发生基因突变，形成具有新表位的p21ras 产物，。
◆染色体易位产生的融合基因产物：白血病细胞的原癌基因c-abl
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按抗原的基因类型分为
静止基因的表达产物：癌细胞将该基因表达启动，被T识别。 ◆分化抗原基因的表达产物： CEA。出生后该基因关闭。细胞癌
变后则重新开启该基因，成为免疫系统识别的靶子。
◆癌基因的异常高表达：HER-2某些正常细胞有微量表达，但自身
T细胞对其耐受，癌变细胞由于异常高表达打破了这种耐受。
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研究主要历程
20世纪最初:寻找和证实肿瘤抗原，没取得明显进展
◆20世纪50年代:纯种小鼠的培育成功，证实了化学致
癌剂甲基胆蒽(mcthvl，holanthrene，MCA)诱发小
鼠发生的肉瘤所表达的移植排斥抗原是肿瘤抗原，证实
了肿瘤抗原的存在。
◆20世纪60年代:证明淋巴、巨噬细胞和抗体等抗肿瘤
效应。
◆20世纪70年代:单抗问世，推动了肿瘤免疫诊断技术
和肿瘤免疫治疗的发展。
◆20世纪80年代:肿瘤抗原、MHC分子、T杀伤机制
等有更深了解。
◆ 20世纪90年代:多种人类肿瘤抗原基因克隆成功，
肿瘤标志物检测，推动了肿瘤免疫学发展。
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分类及其特征
按特异性分类
TSA 是肿瘤细胞特有 的，或只存在于某种 肿瘤细胞而不存在于 正常细胞的新抗原。 又称TSTA或TRA。