饲料产品及饲料添加剂中沙门氏菌的检测
食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准主要包括以下步骤：
1.样品采集：从待检测的食品中采集适量样品，确保样品的代表性。
2.样品处理：将采集的样品进行适当处理，如破碎、研磨等，以便后续的
检测操作。
3.增菌培养：将处理后的样品接种到选择性培养基中，进行增菌培养。
选
择性培养基可以抑制其他微生物的生长，促进沙门氏菌的增殖。
4.分离培养：将增菌培养后的样品划线接种到鉴别培养基上，进行分离培
养。
鉴别培养基可以进一步筛选出沙门氏菌，并对其进行鉴别。
5.生化鉴定：对分离培养得到的沙门氏菌进行生化鉴定，以确定其是否为
沙门氏菌。
常用的生化鉴定方法包括API 20E、三糖铁试验等。
6.血清学鉴定：对生化鉴定为沙门氏菌的菌株进行血清学鉴定，以确定其
具体血清型。
常用的血清学鉴定方法包括玻片凝集试验、试管凝集试验等。
7.药敏试验：对分离得到的沙门氏菌进行药敏试验，以确定其对不同药物
的敏感性，为临床治疗提供参考。
需要注意的是，食品沙门氏菌测试方法标准可能因不同国家和地区而有所差异。
因此，在实际操作中，应根据当地的标准和法规进行相应的调整和操作。
饲料及饲料添加剂中沙门氏菌的分离鉴定
摘要：目的：检测菜籽粕等样品中污染沙门氏菌情况。
方法：参照国家标准《饲料中沙门氏菌检测方法》病原分离鉴定技术。
结果：分离鉴定出田纳西沙门氏菌（S.Tennes-see）、山夫登堡沙门氏菌（S.Senftenberg）、姆班达卡沙门氏菌（S.Mbandaka）、布伦登卢普沙门氏菌（S.Braenderup）、布雷登尼沙门氏菌（S.Bredeney）各1株。
结论：本试验从大豆，菜籽粕，鱼粉等饲料及饲料添加剂分离出的沙门氏菌主要分布于C1群，沙门氏菌是污染饲料及饲料添加剂的常见致病菌。
关键词：饲料；沙门氏菌；分离鉴定沙门氏菌属(salmonella)是一种寄生于人类和动物肠道内的细菌，可以引起禽伤寒、猪霍乱、鼠伤寒沙门氏菌病、猪副伤寒、马流产沙门氏菌等疾病，是一种需氧或兼性厌氧菌。
适合的生长温度是35℃~37℃，不耐热，55℃的温度下1h 即可被杀死。
在外界的生活力很强，在粪便、土壤、食品中可以存活2个月，更久的能存活2年之久 [1]。
沙门氏菌血清型众多，有2500种以上，在中国发现的有500多种。
许多血清型的沙门氏菌均能产生毒素尤其是肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和猪霍乱沙门氏菌，能致多种动物的沙门氏菌病 [2]。
沙门氏菌是饲料中的主要危害菌群，国内已有多次报道，因沙门氏菌污染的饲料而导致畜禽大量死亡，给养殖业造成巨大的经济损失。
人的大多数沙门氏菌感染直接或间接地与动物性食品有关， 而动物的沙门氏菌感染和带菌与所食用的动物性饲料中的沙门氏菌污染有直接的关系[3-4]。
沙门氏菌的传播途径很广，食品在加工、运输、出售、烹饪、储存过程中被其感染的可能性很大，尤其是动物饲料中沙门氏菌的感染情况对全球的肉类加工厂都是很大的隐患[1]。
因此， 检测饲料中的沙门氏菌，控制沙门氏菌的安全性非常重要。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 样品：饲料，来自饲料生产企业。
1.1.2 标准菌株：沙门氏菌（AB94007），购自中国典型菌种保藏中心，作为检测过程中的阳性对照菌株。
控制饲料中沙门氏菌的高效非化学方法
控制饲料中沙门氏菌的高效非化学方法摘要：控制饲料中沙门氏菌的方法是：尽量减少使用生的原材料，防止微生物生长，执行可靠的沙门氏菌灭杀步骤，避免饲料在加工和处理过程中再次受到污染。
几十年来，控制饲料中的沙门氏菌一直是饲料生产商的首要任务。
其原因是沙门氏菌在干燥的环境下可以持续存活数月(甚至数年)，它是与饲料和干性食品安全事件最为相关的重要病原体。
沙门氏菌会对动物的健康产生不利影响，同时也可以感染动物产品，进而传播给消费者。
为了控制沙门氏菌，人们已经研究出了许多解决方案，但是随着立法的改变、人类沙门氏菌病的增多以及细菌耐药性的增加，迫使饲料行业重新审视现有方案的合理性。
控制饲料产品中沙门氏菌的最常见做法之一是使用甲醛作为饲料添加剂。
然而，欧盟委员会最近投票禁止出于此目的来使用甲醛(欧盟法令2018/183)。
这一改变的主要原因是甲醛会对使用它的工作人员产生致癌和毒性作用。
不仅欧洲的法律新近做出了这一改变，美国食品和药物管理局的《食品安全现代化法案》(Food Safety Modernization Act，FSMA)是美国历史上对食品和饲料安全改革最彻底的法律，该法案出台了对动物饲料现行药品生产管理规范、危害分析、人类食品风险预防控制的最终规范(自2017年开始实施，美国联邦政府行政法规汇编第21章第11、16、117节，等等)。
该新规定要求每一家生产、加工、包装或拥有动物饲料的工厂都要执行一项书面的饲料安全计划，重点是防止动物饲料中的此种危害。
这是第一次要求为动物饲料建立现行药品生产质量规范(Current Good Manufacturing Practices，CGMP)。
除了法律的要求外，已经发生的大量人类沙门氏菌病的事实也向人们提出了类似的要求。
最近发表的一份报告指出，欧洲在2016年报道了近95 000例人类沙门氏菌感染病例(EFSA和ECDC，2017)。
由肠炎沙门氏菌引起的疾病比例的增加已经引起了人们的注意。
饲料中沙门氏菌的检测
增 菌 液 使 其 充 分 混 匀 ，混 匀 后 取 １ ０毫 升 前 增 菌 液 接 种 与 １ ０毫 升 四 硫 磺 酸 钠 煌 绿 增 菌 液 （ ０ ＴＴＢ） ， 中 ３￣ 温 培养 箱培养 ２ ７Ｃ恒 ４小 时 。 另 取 前 增 菌 液 １ ０毫
糖 葡 吲 甲 摘 要 ： 实验 通过 常规 分 离培 养 鉴 定技 术 ， 某 脂 ， 发 酵 管 ， 萄 糖 蛋 白 胨 水 ， 哚 试 剂 ， 基 红 本 对 饲料 厂 随机 抽取 的 ３ 鱼粉 样 品进行 了沙 试 剂 ， ０份 Ｖ－Ｐ试 剂 ， 沙 门 氏菌 因 子 血 清 等 。 ， 门氏 菌的分 离鉴定； 结果从 这 些份 样 品 中 １３ 实 验 方 法 １３ １ 前 增 菌 取 所 采 样 品 每 份 ２ ．． ５克 进 行 乳 分 离到 四株 沙 门氏茵菌株 ， 别为 鼠伤 寒 沙 分 加 ２ 置 ７Ｃ 门氏 菌 ２株 ， 沙 门 氏菌 １株 ， 炎 沙 门 氏 化 ， 入 ２ ５毫 升 缓 冲 蛋 白胨 水 增 菌 液 中 ， ３ ￣ 鸭 肠 培 养 ４小 时 。 茵１ 。 株 阳性 率 为 １３％。 ３ 关键词 ： 饲料 ；沙 门氏菌 ； 测 检 １３２ 选 择 性 增 菌 培 养 接 种 前 先 轻 轻 摇 动 前 ．．
Ａｂ ｔ ｃ： Ｉ ｈｓ ｔｓ ｂ ａ ｓ ｏ ｈ ｕｅ ｄ ｐ ｒｓ ｓｒ ｔ ｎ ｔｉ ｅｔ ｙ ｍｅ ｎ ｆｔ ｅ ｒ ｌ ｅ ａｔ ａ
ｆ ｓｅ ｓ ｈ ａ ｐ ￣ｓ ｔｃ ｉ ｕｅ ， ｏ ｔ ｒ ｔ ｅ ｐ ｒ ａ ｅ ｈｎ ｑ ｌ ３ ｆ ｈ ０ ｉ ｓ ｍｅ ｓ ｅ ｉ ｎ ｃ ｌｃ ｅ ｒ ｎ ｏｍｌ ｈ ｖｅ ｌ ａ ｐ ｃｍｅ ｓ ｏｌ ｔｄ ｅ ａｄ ｙ ａ
饲料添加剂检验标准
饲料添加剂检验标准一、样品检测1.样品来源：样品应从生产厂家或经销商处取得，保证其具有代表性。
样品应按照国家或行业标准进行采集、保存和运输。
2.样品处理：样品到达实验室后，应按照国家或行业标准进行预处理，如粉碎、混合、干燥等，以便进行后续检测。
二、常规理化指标1.外观：添加剂应呈均匀的固体或液体，无杂质、无沉淀、无结块等现象。
2.水分：水分含量应符合产品标准要求，以保证产品的质量和贮存稳定性。
3.粗灰分：粗灰分应符合产品标准要求，粗灰分过高会影响添加剂的效用和动物的吸收利用。
4.粗蛋白质：粗蛋白质含量应符合产品标准要求，以保证添加剂的营养价值。
5.钙、磷含量：钙、磷含量应符合产品标准要求，以保证添加剂的矿物元素含量。
6.有机物及挥发性物质：有机物及挥发性物质含量应符合产品标准要求，以评估添加剂的有效成分及对动物的影响。
7.其他指标：根据不同类型添加剂的其他特定指标进行检测，如脂肪、纤维等。
三、重金属及有害物质1.重金属：如铅、汞、镉、砷等重金属含量应符合国家或行业标准要求，避免对动物和人类造成危害。
2.有害物质：如三聚氰胺、瘦肉精、霉菌毒素等有害物质应不得检出或限量符合国家或行业标准要求，以确保饲料安全和动物健康。
四、微生物指标1.菌落总数：菌落总数是评估饲料卫生状况的重要指标，应符合国家或行业标准要求。
2.大肠菌群：大肠菌群是评估饲料卫生状况的常用指标，应符合国家或行业标准要求。
3.其他微生物：根据不同类型添加剂的特定微生物指标进行检测，如沙门氏菌、志贺氏菌等。
五、其他检测项目1.稳定性：评估添加剂在贮存过程中的稳定性，以确保产品质量和效果。
2.药理活性：针对某些具有药理活性的添加剂，如抗菌剂、抗球虫剂等，需对其药理活性进行检测和评估。
3.交互作用：评估添加剂与其他饲料成分或药物的交互作用，以避免潜在的相互作用风险。
4.残留量：针对某些添加剂，如抗生素、驱虫药等，需对其在动物体内的残留量进行检测和控制，以确保动物食品安全和人类健康。
饲料中沙门氏菌的监测概况及常规检测技术应用
TSI-时，进行 ONPG试验， ONPG阴性时 进行血清学鉴 定
H2S+、靛基质- 、尿素-、KCN-、赖氨酸+后进行血清学鉴定
结果判定
其他商品化生化鉴定系统
VITEK GNI+ 应用一系列小的多孔的聚苯乙烯卡片进行测 试，卡片含有干燥的抗菌药物和生化基质。先制 备一定浓度的欲鉴定菌株的菌悬液，然后将菌悬 液接种到各种细菌的小卡上，将其放入具有读数 功能的孵箱内，每隔一定时间，仪器会自动检测 培养基的发酵情况，并换算成能被计算机所接受 的生物编码。最后由计算机判定，打印出鉴定结 果。
禽沙门氏菌病的症状
（1）雏鸡感染：引起败血症，可造成大批死忙 ；病鸡 表现虚弱，口渴，食欲不振，腹泻，发育迟滞等。 （2）成年鸡：最常见产蛋量降低或停止。另外可引起 卵巢炎，可在卵黄内带菌而传给幼雏。
牛沙门氏菌病的症状
（1）犊牛：体温升高，呼吸困难；排出血丝粪便；病 期延长时，腕和跗关节可能肿大，有时伴有支气管炎和 肺炎症状。
意义26牙3844个饲料样品检测发现沙门氏菌的检出率为48美国对12个牛场的295份饲料样品进行沙门氏菌检测检出率为98国外沙门氏菌污染情况27传统检测方法分子生物学方法免疫学方法常规沙门氏菌检测技术29国内现行标准分子生物学方法免疫学方法传统检测方法gbt130912002培养法gbt478942010培养法gbt296422012pcr法snt105972010实时荧光pcr法gbt224292008酶联免疫法db34t8162008免疫色谱反应法30传统检测方法31传统检测方法原理沙门氏菌生化特性修复受损伤的沙门氏菌饲料中含大量杂菌32主要培养基试剂血清缓冲蛋白胨水bpw氯化镁孔雀绿增菌液rv亚硒酸盐胱氨酸增菌液sc赖氨酸脱羧酶肉汤高压灭菌锅干热灭菌箱培养箱水浴锅接种环培养瓶或三角25g样品225mlbpw361620h1mlbpw增菌液10mlscmm增菌液在42sc增菌液在36各培养24h01mlbpw增菌液10mlmm分别从mm和sc增菌液中取1环接种到酚红黄绿和dhl琼脂上培养在36培养2024hdhl琼脂在36培养24h分别选择性培养基上挑选可以菌落进行tsi等生化鉴定35tsi生化试验底层产h2s底层产酸斜面产碱斜面底层底层产酸斜面产碱底层产h2s情况下可判定无沙门氏菌其余任何情况均需进行生化鉴定36第一步第二步第三步37生化鉴定试剂套装色氨酸肉汤经361824h培养后滴加靛基质试剂片刻观察结果阳性为玫瑰红色氨酸脱羧酶及对照和氰化钾及对照转种结束后需滴加液体石蜡覆盖试验管方可进行培养靛基质试验露醇山梨醇试验试验阳性后进行血清学鉴定tsi时进行onpg试验onpg阴性时进行血清学鉴h2s靛基质尿素kcn赖氨酸后进行血清学鉴定38结果判定39其他商品化生化鉴定系统vitekgni应用一系列小的多孔的聚苯乙烯卡片进行测试卡片含有干燥的抗菌药物和生化基质
动物性饲料中沙门氏菌的检测
选择 性增 菌培 养 ： 预增 菌 培 养物 ｌ 升接 种 取 ０毫 于 装 有 １０毫 升 四硫 磺 酸 钠 煌 绿 增 菌 液 的 培 养瓶 ０
维普资讯
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２ ８・ ５
广西农业科学
２０ 年 第 ５ ０２ 期
动物 性饲 料中沙 门氏菌 的检 测
余 莲 磨 龙春
（ 西 区 兽 药监 察 所 南 宁 ５ ０ ０ ） （ 西 区 兽 医 防 疫 检 疫 站 ） 广 ３ ０ ０市市 场随机抽取 动物性饲料检样 ３ 份 （ 中鱼粉 ２ 份 、 ３ 其 ９ 蚕蛹 ２份 、 骨粉 ２份） 行实验 进
１ 材料和方法
被检样 品，Ｏ２年 ３ ２Ｏ 月从 广西 贺 市 、 宁市 、 南 Ｈ 市场 分别 随机 抽 样 １ 份 和 ２ 份 ， ３ １ ２ 共 ３份 。样 品采
集按 Ｇ １ ６９ １ ｌ９ 操作 。 Ｂ ４ ９ ．一 ９ ３ 检测中所使用的各种 培 养 基 均 按 ＧＢ ３ ９－ ９ （ 料 中 沙 门 氏菌 的 检验 １０ １ １饲 （ 方 法 》 定 配 制 。沙 门 氏 菌 检 验 程 序 （ 据 规 根 ＧＢ ３ ９ － ９ １ ０ １ １规 定 ） 下 ： 如
的大批死亡 ， 造成巨大的经济损失 ， 从此次随机抽样 检查 中， ６份 样 品沙 门 氏检 出 阳性 ， 有 阳性 率 达 １． 。 目前 ， ８ １／ ９ ５ 国际标 准 、 国家标 准均 明确规 定饲 料 中不得检出沙 门氏菌 ， 可见在我 区市场上销售的动
饲料检验化验员找答案(三)
饲料检验化验员找答案（三）1、单选在催化剂作用下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵，加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出含氮量，从而计算出（）含量。
A、粗蛋白B、真蛋白（江南博哥）C、纤维素D、粗灰分正确答案：A2、单选一般动物脱水（）即可致死。
A、5%B、10%C、20%D、30%正确答案：C3、判断题行为原则和行为规范的总和。
正确答案：对4、判断题淀粉溶液的配制过程中须加热煮沸。
正确答案：对5、判断题(）天平放在平稳的台面上就可以了，周围环境物体的震动、空气流动和阳光直射不会对天平造成影响和干扰。
正确答案：错6、判断题国家标准GB13078—91中规定鱼粉中氟含量不超过500mg/kg。
正确答案：对7、判断题(）天平放在平稳的台面上就可以了，周围环境物体的震动、空气流动和阳光直射不会对天平造成影响和干扰。
正确答案：错8、单选高锰酸钾溶液的标定过程中，以下描述不正确的是（）。
A、终点为粉红色B、需加甲基红作为指示剂C、近终点时需加热至70-85℃D、开始滴定时反应速度很慢，所以滴定要慢正确答案：B9、单选测定时应用酸碱滴定的是（）。
A、测油脂皂化价B、莫尔法测定盐分C、钙的测定D、都不是10、单选干燥器内干燥剂一般是变色硅胶和无水二氧化钙，也有用（）的。
但在长期的使用过程中，应注意更换干燥剂。
A.高氯酸B.稀硫酸C.偏磷酸D.浓硫酸正确答案：D11、判断题感官检验的方法包括味觉检验，它是通过鉴别具有特征气味的饲料；察看有无霉臭、腐臭、氨臭、焦臭等。
正确答案：对12、判断题饲料标签标准规定了商品饲料和饲料添加剂（包括进口饲料和饲料添加剂）标签设计制作的基本原则、要求以及标签标示的基本内容和方法，不适用于合同定制饲料、自用饲料、药物饲料添加剂。
正确答案：对13、判断题饲料中含有六种营养物质。
正确答案：对14、判断题粗纤维测定中干燥和灰化后使用的干燥剂是硅胶。
正确答案：对15、判断题粗灰分的检测结果一般用质量分数来表示。
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化 乙锭 （ 使其终浓度达 到 ０ ． ５“ ｇ ／ ｍ１ ） 混匀 ， 倒 人 已插 上 梳 子
的胶 槽 内 。 待凝 固后 ， 转 入 电泳 槽 中 ， 在 每 个 泳 道 中加 入 ８“ １
・
１ Ｏ ・Leabharlann 《 上 海 畜 牧 兽 医通 讯 》 ２ ０ １ ３年 第 ２期
饲 料 产 品 及 饲 料 添 加 剂 中 沙 门 氏 菌 的 检 测
狄 元 冉 董 鹏 李金 磊 高延玲 邱 富 娜 刘 金 娥
（河 南 省 饲 料 产 品质 量 监 督 检 验 站 河南 郑 州
４ ５ ０ ０ ０ ８）
【 摘 要 １ 目的 ： 检 测 饲 料 及 饲 料 添 加 剂 中 沙 门 氏 茵 的 污 染情 况 。 方 法 ： 利用Ｐ Ｃ Ｒ技 术 对 动 物 源 性 饲 料 产 品 、 植 物
性 饲料 产 品 、 微 生 态制 剂 以及 酶 制 剂 等共 计 ２ ０ ７批 样 品 进 行 了沙 门氏 茵 的 检 测 。结 果 ： 共检 出沙 门氏 茵 ８ 株 ， 其 中动 物 源 性 饲 料 检 出率 为 １ １ ． ４ ， 微 生 态 制 剂 原料 检 出率 为 １ １ ． １ ， 微 生 态 制 剂检 出率 为 １ Ｏ ， 酶 制 剂 检 出率 为 ８ ． ３ ， 配 合 饲 料 检 出率 为 １ ． ２ ５ ， 植 物 源 性 饲 料 和 饲 料 粉 尘 检 出率 为 ０ 。结 论 ： 沙 门 氏 菌 在 饲 料 产 品 及 饲 料 添 加 剂 中 的 污
大肠杆菌 和梭菌 属 相 比， 沙 门 氏 菌 是 饲 料 中 的 主 要 危 害 菌 群 。 国 内 已有 多 次报 道 ， 因 沙 门 氏菌 污 染 的 饲 料 而 导 致 畜 禽
１． ２ 方 法 １ ． ２ ． １ 增菌： 称取样 品 ２ ５ ｇ或 量 取 ２ ５ ｍｌ ， 加入 装有 ２ ２ ５ ｍｌ
可能导致人类食源性疾病。有报道称 ， 人 的大 多数 沙 门 氏 菌
感染直接或间接地与动物性食品有关 ， 而 动 物 的 沙 门 氏菌 感 染 和 带 菌 则 与 其 所 食 用 的 被 沙 门 氏 菌 污 染 的 饲 料 有 直 接 关 系“ 。由 于 沙 门 氏 菌 很 容 易 在 自然 环 境 及 动 物 体 内 存 活 和 增殖 ， 并且饲料原 料 、 饲 料 的 粉 碎 加 工 及 包 装 储 存 过 程 中 都
有可能引入沙 门氏菌 而造成 污染 。因此 ， 检测饲 料原 料 、 加
后悬浮于 １ ０ ０ １ Ｔ Ｅ缓 冲液 中， 煮沸 １ ５ ｍｉ ｎ ， ８ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ 离
心 ５ ｍｉ ｎ ， 取上清液 ， 即为 Ｄ ＮＡ 模 板 溶 液 。 １ ． ２ ． ３ Ｐ Ｃ Ｒ检 测 ： 反 应体 系： Ｔａ ｑ Ｐ Ｃ Ｒ Ｍａ ｓ ｔ ｅ ｒ Ｍｉ ｘ ２ ５“ ｌ ， ｄ ｄ Ｈ２ Ｏ １ ８ ｌ ， Ｐ １ 、 Ｐ ２各 １ ｌ ， 模 板 ５ １ 。Ｐ Ｃ Ｒ反应条件： ９ ５℃ 预 变 性 ５ ｍｉ ｎ ； ９ ５℃变 性 ３ ０ Ｓ ， ６ ０℃ 退 火 ３ ０ Ｓ ， ７ ２ ℃延
伸４ ０ Ｓ ， ３ ５个 循 环 ； ７ ２℃保 温 ５ ｍｉ ｎ ； ４℃ 保 存 。 同时 设 置 阴
性对照 、 阳 性 对 照 和 空 白对 照 。
１ ． ２ ． ４ Ｐ Ｃ Ｒ产 物 的 电 泳 检 测 ： 配制 浓度 为 １ ． ５ 的琼 脂 糖 溶液 ， 于 微 波 炉 中加 热 溶 解 ， 待冷 却至 ５ Ｏ ～６ Ｏ℃ 时 ， 加 入 溴
染 情 况 不 容 忽视 。
关键词 ： 饲 料产品 ； 饲 料 添 加 剂 ；沙 门氏 茵 ； Ｐ Ｃ Ｒ； 检 测
沙 门 氏菌 （ Ｓ ａ ｌ ｍ ｏ ｎ ｅ ｌ ｌ ａ ） 属 于 肠 杆 菌 科 沙 门 氏菌 属 ， 是 重 要 的人 畜 共 患 病 病 原 菌 之 一 ， 在公 共卫 生学 占有重 要地位 。 沙 门 氏菌 感 染 能 引 起 人 和 动 物 肠 热 症 、 胃肠 炎 及 败 血 症 等 。 欧 洲 食 品安 全 局 （ Ｅ Ｆ Ｓ Ａ） 。 的专 家 小 组 认 为 ， 与李斯特菌 属 、
工 环 境 及 成 品 中 的沙 门 氏菌 具 有 重 大 意 义 。 为 了解 河 南 省 饲 料 中沙 门 氏菌 的 污 染 情 况 ， 本 次 试 验 抽 取 了来 自不 同养 殖 场 及 饲 料 厂 的 共 ２ ０ ７批 样 品 进 行 了 沙 门
氏菌 的检 测 ， 旨在 为 全 省 饲 料 安 全 生 产 及 应 用 提 供 一 定 的 预 警， 为获得安全的畜产品奠定基础 。
缓 冲蛋 白胨 水 的 ５ ０ ０ ｍｌ 广 口瓶 内， ３ ７℃培养 ｌ ６ ～２ ０ ｈ 。取 上述培养物 １ ０ ０“ ｌ 转接 于装有 １ ０ ｍｌ 氯 化镁 一孑 Ｌ 雀 绿 增 菌 液 的试 管 中 ， ４ ２℃ 选 择 性 增 菌 培 养 ２ ４ ｈ 。 １ ． ２ ． ２ 模板 Ｄ ＮＡ： 参 考 胡 建 华 等 的 试 验 设 计 ， 为 避 免 饲 料 中复杂的成分对 Ｐ Ｃ Ｒ体 系造成 影 响， 我 们 采 用 热 裂 解 法 进行模 板 Ｄ ＮＡ 的 制 备 。方 法 如 下 ： 取ｌ ｍｌ 增 菌 液 置 于 离 心
管中 ， １ ２ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ离 心 ２ ｍｉ ｎ ， 灭 菌 蒸 馏 水 重 悬 洗 涤 ２次 ， 最
大量 死 亡 ， 给 养 殖 业 造 成 巨大 的经 济 损 失 。 。饲料是“ 从 农 场 到餐 桌 ” 食 品安 全 链 的第 一 个 环 节 ， 饲 料 被 病 原 菌 污 染 也