HPLC 法测定西伯利亚接骨木中槲皮素、芦丁的含量
HPLC法检测光枝勾儿茶内芦丁和槲皮素方法的建立
HPLC法检测光枝勾儿茶内芦丁和槲皮素方法的建立武玉祥;王小平;王虹;秦华军;万合峰;贾强【摘要】[目的]建立一种同时测定光枝勾儿茶中芦丁和槲皮素的含量的方法。
[方法]采用HPLC法对光枝勾儿茶内的芦丁和槲皮素进行测定,色谱柱为ZORBAX SB-C18(250 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,检测波长360 nm,流速1.0 mL/min,柱温25℃；进样量10μL。
[结果]芦丁和槲皮素分别在0.109~1.090和0.104~1.040μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。
芦丁平均回收率为98.84%,RSD为2.34%；槲皮素平均回收率为99.65%,RSD为2.51%。
[结论]该方法简便、准确、精密度高、重复性好,可用于该药材的质量检测。
%[Objective] The determination method of rutin and quercetin in Berchemia polyphylla Wall was established at same time. [Method] The contain of rutin and quercetin in Berchemia polyphylla Wall was tested with HPLC method, in which, the column was ZORBAX SB-C18 (250 mm × 4. 6 mm, 5 μm);the mobile phase of acetonitrile -0. 1% phosphoric acid solution;the detection wavelength, 360 nm;the flow rate, 1. 0 mL / min;the column temperature, 25℃ and the injection volume, 10μL. [Result] There was good linear relationship between the content of rutin and quercetin and the value of testing peak area when the contain of rutin and quercetinin was in the range of 0. 109~1. 090 and 0. 104-1. 040 μg respectively. Average recovery ratio of rutin was 98. 84% and RSD was 2. 34%; average recovery ratio of quercetin was 99. 65% and RSD 2. 51%. [Conclusion] The method is simple, accurate, high precision and goodrepeatability that could be used in the meas-urement of the Chinese medicine quality.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2016(044)013【总页数】3页(P164-166)【关键词】光枝勾儿茶;芦丁;槲皮素;HPLC法;含量【作者】武玉祥;王小平;王虹;秦华军;万合峰;贾强【作者单位】贵州科学院贝科生物资源研究开发中心，贵州贵阳550009; 贵州省生物研究所，贵州贵阳550009;黔东南民族职业技术学院，贵州凯里556000;贵州省生物研究所，贵州贵阳550009;贵州科学院贝科生物资源研究开发中心，贵州贵阳550009; 贵州省生物研究所，贵州贵阳550009;贵州科学院贝科生物资源研究开发中心，贵州贵阳550009; 贵州省生物研究所，贵州贵阳550009;贵州科学院贝科生物资源研究开发中心，贵州贵阳550009; 贵州省生物研究所，贵州贵阳550009【正文语种】中文【中图分类】R284目前，市场上治疗猪、牛、羊腹泻的主要药物是抗生素类，抗生素使用后在动物体内存在残留和抗药性问题，食用后影响人体健康。
HPLC测定不同时期款冬花中芦丁、槲皮素的含量
HPLC测定不同时期款冬花中芦丁、槲皮素的含量冯亭亭;罗飞;王晓远;张永鹏;李永民【摘要】目的：建立HPLC法同时测定不同时期河北蔚县野生款冬花中芦丁和槲皮素含量方法。
方法：Krosmosil C18柱（4.6mm×200mm，5μm）；流动相：A（乙腈）∶B（0.1%磷酸水）（80∶20）；检测波长：254nm。
结果：款冬花花蕾芦丁与槲皮素的含量在0.31%、0.12%左右，已开放的款冬花芦丁与槲皮素的含量在0.18%、0.65%左右。
【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2015(000)008【总页数】1页(P3-3)【关键词】款冬花;HPLC;芦丁;槲皮素;超临界流体萃取【作者】冯亭亭;罗飞;王晓远;张永鹏;李永民【作者单位】河北北方学院张家口 075000;河北北方学院张家口 075000;河北北方学院张家口 075000;河北北方学院张家口 075000;河北北方学院张家口075000【正文语种】中文【中图分类】R927.2本课题通过款冬花花蕾、开放花液相图谱的比较为款冬花未开放花苞入药提供一个有效依据。
1 材料与方法1.1 材料：野生款冬花（蔚县），芦丁对照品、槲皮素对照品购自中国药品生物制品检定所；乙腈为色谱纯，甲醇、冰醋酸等试剂均为分析纯，双蒸水（自制）。
1.2 实验仪器：日本岛津2010A高效液相色谱仪，Sartorius分析天平。
Spe-ed SFE超临界流体萃取仪（美国Applied2Separations公司）。
2 方法与结果2.1 溶液配制2.1.1 对照品溶液的配制：分别精密称取芦丁、槲皮素对照品适量，加70%甲醇溶解，制成浓度分别为0.2312mg/mL、0.1872mg/mL的对照品贮备液，备用。
精密吸取芦丁对照品贮备液2mL、槲皮素对照品贮备液2mL，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，制得混合对照品溶液。
2.1.2 供试液的配制：款冬花60℃减压真空干燥4h，粉碎过40目筛得款冬花粉末备用。
HPLC测定雪莲中芦丁和槲皮素的含量
HPLC测定雪莲中芦丁和槲皮素的含量
卢永昌;闫红
【期刊名称】《华西药学杂志》
【年(卷),期】2007(22)1
【摘要】目的建立测定雪莲中芦丁和槲皮素含量的方法。
方法采用HPLC法，色谱柱为AgilentZorbax SB—C18（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-0．04％磷酸溶液（40：60），流速1．0ml·min^-1，检测波长360nm，柱温35℃。
结果芦丁和槲皮素的线性范围分别为0．01～0．20μg和0．007～0．099μg；r分别为0．9999和0．9997；平均回收率分别为102．1％
（RSD=2．0％，n=6）和99．5％（RSD=1．4％，n=6）。
结论所建法快速、简便、准确、重复性好，可作为雪莲药材质量控制的方法。
【总页数】2页(P79-80)
【关键词】高效液相色谱法;雪莲;芦丁;槲皮素
【作者】卢永昌;闫红
【作者单位】青海民族学院化学系
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.雪莲中绿原酸、芦丁、木犀草素含量的HPLC法测定 [J], 张海霞;卢永昌;王庶
2.HPLC法测定金线莲中芦丁的含量 [J], 郑维锋;刘知远
3.HPLC法测定蒙药材黄花铁线莲中槲皮素含量 [J], 吕彩莲
4.RP-HPLC法测定唐古特铁线莲中芦丁的含量 [J], 张兴旺;牛迎凤;陶燕铎;邵斌贝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
芦丁和槲皮素的几种快速鉴定方法
第27卷增刊分析试验室V01．27．S蝌．2008年5月Chinese Joumal of Analysis bbora￡or j，2008—5芦丁和槲皮素的几种快速鉴定方法赵希1，张黎明¨，高文远2(1．天津科技大学生物工程学院，天津市工业微生物重点实验室，天津300457；2．天津大学药物科学与生命技术学院，天津300072)摘要：采用热分析(TA)、红外光谱法(nm)和x-射线衍射技术(xPm)对以槐米为原料制备的芦丁和槲皮素提取物进行了测定，通过分析二者谱图特征探讨快速鉴别这两种黄酮类化合物的方法。
实验结果表明，芦丁的微商热重(明陷)曲线于278℃出现明显的热分解失重峰，差示扫描量热(DSC)曲线未出现明显相变峰；槲皮素的ITII；曲线于349 oC出现明显的失重峰，DSC曲线分别于323 和361't2出现一个吸热峰和一个放熬峰。
红外谱图显示，3386 CEll-1羟基伸缩振动吸收峰，1656 cm‘1羰基伸缩振动吸收峰以及2931、1064、881锄。
1糖基的特征吸收峰可作为区分芦丁和槲皮素的标准峰。
芦丁的X．射线衍射图谱呈多峰重叠的弥散峰，结晶度低；而槲皮素峰形明锐，结晶度高。
因此，热分析、红外光谱及x-射线衍射技术可用于鉴别芦丁争槲皮素。
相应谱图可作为它们各自的特征指纹图谱。
关键词：一芦丁；槲皮素；热分析法；红外光谱法；X-射线衍射法···为建立中药提取生产质量管理规范，促进植谱各具特征，这种衍射图的晶相“指纹”性构成了物提取物质量标准化，发展多种快速、有效、操作定性鉴别的依据，可以作为中药质量控制方法的简便、适于推广的质量控制检测方法十分必要。
有力补充哺1。
目前，高效液相色谱(mK)【11和薄层色谱(TIC) 槐米是豆科植物槐树(鲫km向枷锄L．)的等方法已经用于中药提取物有效成分的测定。
然未开放花蕾，其主要药用化学成分为芦丁和槲皮而，Ht'LC作为一种分离检测手段，耗时长，工作素等黄酮类化合物，其中芦丁含量高达12％一量大。
催化动力学光度法测定接骨木中槲皮素
催化动力学光度法测定接骨木中槲皮素高扬;翁慧;刘雅静;李英杰;马莹莹;张力;包玉敏【摘要】基于稀H2SO4介质中,槲皮素对KBrO3氧化甲基橙褪色反应的明显催化作用,建立了测定槲皮素的动力学光度法.采用超声波法和回流法提取接骨木中槲皮素,用催化动力学光度法测定其含量,检测波长为517nm,测定槲皮素的线性范围为0.00～0.05 mg/L,检出限为0.002 mg/L.两种提取方法测得接骨木中槲皮素含量分别为2.522 mg/g和3.420 mg/g,平均回收率分别为91.3%和96.9%.结果表明,超声波辅助萃取法简便快捷,提取率高.【期刊名称】《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(025)001【总页数】2页(P24-25)【关键词】接骨木;槲皮素;甲基红;动力学光度法【作者】高扬;翁慧;刘雅静;李英杰;马莹莹;张力;包玉敏【作者单位】内蒙古民族大学,化学化工学院,内蒙古,通辽,028043;内蒙古民族大学,化学化工学院,内蒙古,通辽,028043;内蒙古民族大学,化学化工学院,内蒙古,通辽,028043;内蒙古民族大学,化学化工学院,内蒙古,通辽,028043;内蒙古民族大学,化学化工学院,内蒙古,通辽,028043;内蒙古民族大学,化学化工学院,内蒙古,通辽,028043;内蒙古民族大学,化学化工学院,内蒙古,通辽,028043【正文语种】中文【中图分类】O657.32接骨木（Sambucus）又名公道老、扦扦活、马尿骚.蒙药名：包格—音—包勒岱，忍冬科接骨木属.接骨木为常用蒙药，具有接骨续筋，活血止痛，祛风利湿作用〔1〕.槲皮素(Quercetin)为黄色针状结晶，是一种天然的黄酮类化合物，存在于多种植物的花、叶、果实中，具有抗炎、抗病毒、降血糖、降血脂、降低血压以及免疫调节作用〔2〕.本文用两种方法对接骨木中的槲皮素进行提取，基于稀H2SO4介质中，槲皮素对KBrO3氧化甲基橙褪色反应有明显的促进作用，建立了测定槲皮素的动力学光度法〔3〕，用于测定蒙药材接骨木中槲皮素含量测定，取得了较好的研究成果.1 实验部分1.1 仪器、试剂与实验材料仪器：721型分光光度计（上海第三分析仪器厂)，KH-100型超声波清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司），FA2104N型电子天平（上海民桥精密科学仪器有限公司），DK-600S型三用恒温水箱（上海精宏实验设备有限公司），SZ-93A自动双重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）.试剂：无水乙醇（A.R.，天津市东丽区天大化学试剂厂），甲基红，硫酸，溴酸钾均为分析纯，实验用水为二次石英亚沸蒸馏水.材料：槲皮素(中国药品生物制品检定所，批号：100081-200406)，接骨木（购于内蒙古蒙王医药公司）.1.2 实验方法1.2.1 测定标准曲线准确称取槲皮素对照品10.2 mg于烧杯中，加入约50 mL无水乙醇溶解，转移至100 mL容量瓶中，用无水乙醇定容，摇匀，得到浓度为10.2 mg/mL槲皮素对照品.精密移取对照品溶液2.00 mL于100 mL容量瓶中，用无水乙醇定容，摇匀，得浓度为0.0204 mg/L对照品溶液.在六支10 mL比色管中，分别加入1.00 mL0.02%甲基红乙醇溶液，0.30 mL1.0mol/L硫酸溶液，用水稀释至约8 mL.其中一支不加槲皮素，另五支比色管中分别精密量取0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mL浓度为0.0204 mg/L的槲皮素对照品溶液，最后分别加0.25 mL0.025 mol/L溴酸钾溶液，用水稀释至10 mL，摇匀，放入温度为70±0.1℃水浴中加热5 min，迅速取出比色管，冷水冷却5 min，以终止反应.以水作参比，在517 nm处测定吸光度，分别记为A0、A1、A2、A3、A4、A5，计算△A=A0-AX的值，得回归方程：Y=0.1652+548.0392X(X为浓度)，r=0.99396，测定浓度在0.00～0.05 mg/L范围内与吸光度呈线性关系.1.2.2 槲皮素的提取超声法：精密称取80℃烘干粉碎后的接骨木2.0000 g，置于100 mL锥形瓶中，加入95%乙醇70 mL，超声40 min，室温放置过夜，过滤，定容于100 mL容量瓶中，作为供试品液.回流法：精密称取80℃烘干粉碎后的接骨木2.0000 g，置于圆底烧瓶中，加入95%乙醇50 mL，78℃水浴回流3h，趁热过滤，定容于100 mL容量瓶中，作为供试品液.1.2.3 槲皮素含量测定方法精密移取1.00 mL0.02%甲基红乙醇溶液，0.30 mL 1.0 mol/L硫酸溶液于10 mL比色管中，用水稀释至约8 mL，加入样品溶液1.00 mL，0.25 mL0.025 mol/L溴酸钾溶液，用水稀释至10 mL，摇匀，放入温度为70±0.1℃水浴中加热5 min，迅速取出，冷水冷却5 min，以终止反应.以水作参比，在517 nm波长处测定吸光度值（A），代入回归方程，计算槲皮素含量.1.2.4 回收率的测定方法精密移取1.00 mL0.02%甲基红乙醇溶液，0.30 mL 1.0 mol/L硫酸溶液于10 mL比色管中，用水稀释至约8 mL，加入样品溶液1.00 mL，0.25 mL0.025 mol/L溴酸钾溶液，0.4 mL0.0204 mol/L标准槲皮素溶液，用水稀释至10 mL，摇匀，放入温度为70±0.1℃水浴中加热5 min，迅速取出，冷水冷却5 min，以终止反应.以水作参比，在517 nm波长处测定吸光度值（A），代入回归方程计算回收率.2 结果与讨论2.1 样品中槲皮素的含量按1.2.3方法测定样品中槲皮素的含量，结果见表1.表1 样品中槲皮素含量Table 1 Eetermination resules of Samgle提取方法回流法超声波法样品中槲皮素的含量（10-4mg/g）2.598 2.462 2.507 3.237 3.420 3.602平均值(10-4mg/g)2.522 3.420 RSD（%）2.73 5.322.2 回收率的测定按1.2.4方法，测定加标准样的回收率，结果见表2.表2 试样回收率Table 2 The recovery rate delermina提取方法回流法超声法样品含量（mg）0.052 0.049 0.050 0.065 0.068 0.072加标量（mg）0.08160.0816 0.0816 0.0816 0.0816 0.0816样品与标样量（mg）0.129 0.125 0.121 0.147 0.147 0.150回收率（%）93.9 92.8 87.2 100.6 96.2 93.9平均回收率（%）91.3 96.93 结论催化动力学光度法测定接骨木中槲皮素的方法灵敏度高，准确度好，试剂用量少，易于操作.超声波法提取槲皮素简便快捷，提取率高.参考文献【相关文献】〔1〕《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编〔M〕.北京：人民卫生出版社，2000.〔2〕中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部)〔M〕.北京:化学工业出版社，2000. 〔3〕贺峰嘎，包萨日娜.分光光度法测定四种植物中总黄酮含量〔J〕.内蒙古民族大学（自然科学版），2007，22(3)：259.。
高效液相色谱法测定漆姑草中芦丁和槲皮素含量
高效液相色谱法测定漆姑草中芦丁和槲皮素含量摘要:建立了漆姑草(Sagina japonica)中芦丁和槲皮素含量的反相高效液相色谱—二极管阵列检测法,采用乙醇—超声波提取, 以Shim-pack VP-ODS(200 mm×4.6 mm)为色谱柱, 以甲醇∶水(含0.2%磷酸)=60∶40(V/V)为流动相, 流速为0.8 mL/min, 柱温为30 ℃, 检测波长为255 nm｡芦丁和槲皮素能得到较好的分离, 分别在0.03~15.00 μg/mL(r=0.999 0)和0.04~20.00 μg/ mL(r=0.999 4)的浓度范围内与峰面积成良好线性关系, 检测限分别为12.6和15.2 ng/mL｡本方法操作简单､准确度高､重现性好, 可用于漆姑草药材的质量控制,为漆姑草质量标准的制定提供依据｡关键词:漆姑草(Sagina japonica);芦丁;槲皮素;高效液相色谱法Contents of Rutin and Quercetin in Sagina japonica(Sweet) Ohwi Determined by HPLCAbstract: To establish a HPLC-PDA method for the determination of rutin and quercetin in Sagina japonica(Sweet) Ohwi, the extraction of rutin and quercetin from S. japonica by ethanol with ultrasound wave was performed. Experiments were performed on C18 (Shim-pack VP-ODS 200 mm×4.6 mm) column, with MeOH and H2O(60∶40, V/V) which contained 0.2% phosphoric acid as mobile phase at a flow rate of 0.8 mL/min. The column temperature was 30 ℃and the determination wavelength was 255 nm. External standard method was used and the calibration curves showed good linearity ove r the range of 0.03~15.00 μg/mL(r=0.999 0)and 0.04~20.00 μg/mL(r=0.999 4) for rutin and quercetin, respectively. The detection limits were 12.6 and 15.2 ng/mL for rutin and quercetin, respectively. This established method was accurate, reliable, reproducible, and could be used to control the quality of S. japonica and it offered a basis for S. japonica standards.Key words: Sagina japonica(sweet) ohwi; rutin; quercetin; RP-HPLC漆姑草(Sagina japonica(Sweet)Ohwi),又名牛毛粘､蛇牙草､大龙叶､虾子草､大龙草等,为石竹科植物漆姑草的全草｡分布于江苏､四川､湖南､湖北､贵州､云南等地｡该药常用于治疗漆疮､秃疮､湿疹､丹毒､瘰疬､无名肿毒､毒蛇咬伤､龋齿痛､跌打内伤等[1]｡漆姑草味苦,性凉,有散结消肿,解毒止痒之功效[2]｡研究表明,漆姑草中含有黄酮类成分[3]｡分析漆姑草中的芦丁和槲皮素含量对漆姑草的药物开发应用具有重要意义｡黄酮类物质对人体健康有重要作用,因其在抗氧化､清除自由基以及对过敏､感染､高血压､肿瘤等疾病治疗方面的积极作用,受到研究者的重视[4]｡黄酮的分析方法有分光光度法[5-7]､荧光法[8,9]､电化学分析法[10,11]等,目前分析测定芦丁和槲皮素使用最广泛的是高效液相色谱法[12-15]｡但用反相高效液相色谱—二极管阵列检测法(RP-HPLC-PDA)测定漆姑草中黄酮类化合物尚未见报道｡本研究对漆姑草中芦丁和槲皮素进行了分离与测定,方法简便可行､重现性好｡1 材料与方法1.1 仪器和试剂Shimadzu LC-2010AT型高效液相色谱仪,SPD-M20A二极管阵列检测器(日本岛津公司);SY3200超声波清洗器(上海声源超声波仪器设备有限公司);RE-5299旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);电子天平(上海越平科学仪器有限公司);DHG-9070A型新型电热恒温鼓风干燥箱(宁波江南仪器厂);自制索式提取器;植物粉碎机(20~120目);800型离心沉淀器(上海手术器械厂);微孔过滤装置｡芦丁和槲皮素标准品(98%)均购自国药集团化学试剂有限公司,芦丁标准品批号:F20090702;槲皮素标准品批号:F20090225;乙腈(色谱纯,天津市科密欧化学试剂有限公司),甲醇(分析纯,遵义师范学院试剂厂),盐酸(AR)､H2SO4(AR)､石灰水(自制)､脱脂棉､无水乙醇(徐州试剂二厂),石油醚(上海试剂一厂)｡所有溶液使用前均由0.45 μm孔径的滤膜过滤｡收集了不同产地漆姑草药材｡经遵义医学院黎刚老师鉴定为石竹科植物漆姑草(Sagina japonica (Sweet)Ohwi)的全草｡1.2 色谱条件色谱柱:Shim-pack VP-ODS(200 mm×4.6 mm)｡流动相为甲醇∶水(含0.2%磷酸)= 60∶40(V/V),用前经0.45 μm 滤膜过滤,流速0.8 mL/min;柱温30 ℃;检测波长255 nm;进样量20 μL｡1.3 标准溶液的配制准确称取0.010 0 g芦丁和槲皮素, 用甲醇(分析纯)溶解,超声振荡15 min,放置至室温用甲醇并定容至50 mL,摇匀备用｡吸取已配制好的标准溶液来配制一系列不同浓度溶液分别进样｡所有溶液使用前均由0.45 μm孔径的滤膜过滤｡1.4 样品前处理将购买的漆姑草分别用粉碎机粉碎,40目过筛后,放在烘箱中于65 ℃烘10 h｡准确称取40 g漆姑草粉末置于索氏浸提管中,高度不超过虹吸管,以石油醚为脱脂剂于45 ℃水浴锅中脱脂20 h｡充分除去样品中脂类和脂溶性色素后,将滤纸包取出,先用电吹风吹干｡再置于干燥箱65 ℃烘2 h后｡置于100 mL三角烧瓶中,待下一步制备[16]｡1.5 样品溶液的制备称取脱脂的漆姑草粉末10.00 g,置入超声破碎仪,加入200 mL 70%乙醇,超声破碎处理30 min,超声频率为20 kHz,每工作7 s暂停3 s,温度设置为25 ℃｡抽滤,滤液减压浓缩,冷冻干燥,得粗提物[16]｡准确称取样品适量,甲醇溶解完全后转入50 mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,得到供试品溶液｡2 结果与分析2.1 检测波长的选择通过SPD-M20A二极管阵列检测器对芦丁和槲皮素的标准溶液进行在线扫描,得到化合物芦丁和槲皮素的紫外吸收光谱｡结果表明槲皮素在255 nm 和372 nm 处均有较强吸收,芦丁在256 nm 和355 nm 处有较强吸收｡通过试验在255 nm 处各物质能取得较强吸收, 故选择测定波长为255 nm｡在该波长下进行测定,既保证了较高的分析灵敏度,又无干扰｡2.2 流动相的选择黄酮类物质都微溶于水,而溶于有机溶剂,分别以乙腈/离子对溶液､乙腈/水､甲醇/离子对溶液和甲醇/水体系作流动相,对芦丁和槲皮素及其杂质的分离效果进行考察,当选用甲醇-水溶液作溶剂时分离效果最佳｡当甲醇∶水>70∶30(V/V)时,分离效果不好;当甲醇∶水<50∶50(V/V)时,分析时间明显增长,峰形扩展严重｡而在甲醇∶水=60∶40(V/V)时,能取得较好的分离效果,但是色谱峰稍有拖尾现象,通过加入0.2%的磷酸溶液能消除峰拖尾, 本试验选择甲醇∶水(0.2%磷酸)=60∶40(V/V)作为流动相｡2.3 流速的选择随流速增加,各峰的保留时间均减少,流速在0.3~0.8 mL/min均能很好分离,但流速在0.5 mL/min以下时,色谱峰逐渐扩展,检测灵敏度下降｡流速在0.8 mL/min以上时,芦丁峰与相邻峰重叠,分离度下降｡在一定波长､流动相的条件下,分别测定了不同流速时的标准芦丁和槲皮素,发现以流速为0.8 mL/min时,芦丁和槲皮素与杂质分离完全､峰形对称｡本试验选择实验进样流速为0.8 mL/min｡2.4 线性范围及检出限在上述色谱条件下,测定不同浓度的芦丁和槲皮素标准品,以溶液浓度(x)与峰面积(y)作标准曲线｡芦丁和槲皮素分别在0.03~15.00 μg/ mL､0.04~20.00 μg/ mL 范围内,浓度(x)与峰面积(y)有很好的相关性,回归方程为y=6.915×104x+2.063×103､y= 8.989×104x+115.200,相关系数分别为0.999 0和0.999 4,能够满足定量分析的要求｡检出限分别为12.6和15.2 ng/mL｡芦丁和槲皮素标准品色谱图见图1｡2.5 药材的提取方法实验取贵州产漆姑草按照3种不同方法制备的供试品溶液,分别进样20 μL,测定芦丁和槲皮素含量(n=5),测定平均值,采用水法提取､索氏法提取､乙醇-超声波辅助法提取的芦丁和槲皮素含量如表1｡2.6 重复性实验取同一批漆姑草药材粉末6份,按1.5制备方法进行制备,平行测定,以芦丁和槲皮素的含量为指标,RSD为2.23%和2.14%,表明方法重现性良好｡2.7 稳定性实验取供试品溶液,分别于0､2､4､8､12､24 h测定,结果芦丁和槲皮素峰面积的RSD 为1.64%和2.01%,说明供试品溶液24 h内稳定性良好｡2.8 方法的精密度和回收率在选定的色谱条件下进行添加回收实验,漆姑草样品分别以0.01､0.05､0.10 mg/kg 3个添加水平,按照样品处理方法进行提取､净化,测定芦丁和槲皮素含量,计算回收率｡贵州产漆姑草样中芦丁和槲皮素添加回收率在92.6%~99.5%,RSD(n=3)为1.70%~2.77%,方法的回收率和标准偏差符合国内外有关标准｡因此,本方法具有很高的灵敏度与精密度,重现性好､回收率稳定,可以为漆姑草样品中芦丁和槲皮素的测定提供参考｡2.9 样品测定对不同产地的漆姑草样品中的芦丁和槲皮素进行测定,漆姑草样品色谱图见图2,结果见表2｡3 结论本文建立了漆姑草中芦丁和槲皮素的HPLC-PDA含量分析的方法｡研究结果表明,该方法检出限低､重现性好､精密度高,并且操作简便､快速｡参考文献:[1] 《全国中草药汇编》编写组. 全国中草药汇编(上册)[M]. 第二版. 北京:人民卫生出版社,1996.919.[2] 江苏省植物研究所.新华本草纲要[M].上海:上海科学技术出版社,1991.508.[3] 李焱,晏雨寒,黄筑艳.中药漆姑草化学成分的初步研究[J].广州化工,2011,39(1):92,148.[4] 朱海扬,曾慧兰.黄酮类化合物的药理作用研究进展[J].山东医药,2009,49(17):114-115.[5] 李满秀,张静,张海蓉,等. 吸收紫外光度法同时测定槐米中的芦丁和槲皮素[J].光谱实验室,2005,22(1):42-45.[6] 蒋德锡,陈文芝,贾建静,等. 分光光度法测定角花胡颓子中的总黄酮[J].华西药学杂志,2011,26(1):81-82.[7] CASTRO G, BLANCO S E. Structural and Spectroscopic Study of 5,7-Dihydroxy-Flavone and its Complex with Aluminum[J]. Spectrochimica Acta Part A, 2004,10(60):2235-2241.[8] 穆宏磊,郜海燕,陈杭君,等. 荧光光度法测定芦笋中总黄酮含量[J].中国食品学报,2010,10(2):201-204.[9] 常永芳,冯俊霞,于宏伟,等. 荧光光谱法测定香椿叶总黄酮的含量[J].光谱实验室,2010,27(5):1773-1776.[10] JIN G P, HE J B, RUI Z B, et al. Electrochemical behavior and adsorptive stripping voltammetric determination of quercetin at multi-wall carbon nanotubes modified paraffin-impregnated graphite disk electrode[J]. Electrochimica Acta,2006,21(51):1-6.[11] 陈刚,叶剑农,张剑霞. 槐米中芦丁和槲皮素的毛细管电泳-电化学检测[J].华东师范大学学报(自然科学版),2001(4):82-86.[12] 张帆,杨屹,郭振库. 微波辅助萃取鬼箭羽叶中芦丁和槲皮素[J].高等学校化学学报,2007,28(8):1480-1482.[13] 贾晓斌,刘光敏,封亮.等. HPLC测定夏枯草中的芦丁和槲皮素[J].华西药学杂志,2010,25(1):70-71.[14] HUANG X. Simultaneous determination of eight main flavonoidsin floslonicerae by HPLC[J]. Acta Phamaceutica Sinica,2005, 40(3):285-289.[15] 卢金清,喻樊,陈黎,等.RP-HPLC测定绞股蓝中芦丁和槲皮素的含量[J].中草药, 2007, 29(8):1193-1195.[16] 刘焱,高智席,李丽,等.金樱子中芦丁和槲皮素不同提取方法的比较研究[J].安徽农业科学,2011,39(8):4521-4522, 4525.。
反相高效液相色谱法测定芦丁中槲皮素的含量
反相高效液相色谱法测定芦丁中槲皮素的含量尹丽平【摘要】[目的]建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定芦丁中槲皮素含量的方法.[方法]用C(18)(250 mm × 4.6 mm)色谱柱,流动相为水-乙腈-冰乙酸(1060:350:45,V:V:V),流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm.[结果]采用水-乙腈-冰乙酸系统为流动相,分离效果好,峰型好,分离时间短,计算结果准确;以甲醇为溶媒提取时间短,提取杂质少.槲皮素含量在4-12 mg/L范围内呈良好的线性关系,回归方程Y=1285X+3645,平均回收率为99%.所测样品芦丁中槲皮素的含量平均为0.813g/ml.[结论]采用RP-HPLC测定芦丁中槲皮素含量简便、灵敏、准确、重复性好,可作为质量和生产控制的有效方法.%[Objective] The main biological traits of three species of mushroom(Pleurotus ostreatus) : Pinggu, Jigu and Xiuzhengu, were fu-ture understand. [ Method] The yield, the biological efficiency, the morphologic character of fruiting body, the spore print, shape and size of spore of three species of mushrooms were compared and analyzed. [ Result] The yield and biological efficiency of three species of mushrooms was Pinggu > Jigu > Xiuzhengu and also the length and diameter of stem was Pinggu > Jigu > Xiuzhengu. There were some differences in the color spore print and class and the shape and size of spore of three species of mushrooms, which was obvious. [ Conclusion ] Pinggu, Jigu, Xiuzhengu were the allied species of Pleurotus. In general, the body of individual Pinggu was largest with higher yield; the body of Jigu was middle size with the highest price in the products of Pleurotus, which economic benefit was the most significant and the size of Xiuzhenguwas delicate and precious with the crab flavor, which was a the best variety in Pleurotus.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)016【总页数】2页(P9588-9589)【关键词】反相高效液相色谱法;芦丁;槲皮素;含量【作者】尹丽平【作者单位】青岛盛瑞德实业有限公司,山东,青岛,266100【正文语种】中文【中图分类】S567芦丁又叫芸香苷、维生素P或紫槲皮甙，是从荞麦或别的植物中得来的无臭无味、淡黄色至淡黄绿色结晶性粉末，在185～192℃树脂化，约215℃分解。
芦丁槲皮素鉴定实验报告
一、实验目的1. 了解芦丁和槲皮素的理化性质。
2. 掌握芦丁和槲皮素的提取、分离与鉴定方法。
3. 熟悉光谱分析在有机化合物结构鉴定中的应用。
二、实验原理芦丁和槲皮素均为黄酮类化合物，具有多种生物活性。
芦丁是槐米中的一种主要活性成分，槲皮素则广泛存在于多种植物中。
本实验通过碱酸法提取芦丁和槲皮素，并利用光谱分析（紫外-可见光谱、红外光谱、核磁共振波谱）对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐米、芦丁标准品、槲皮素标准品、无水乙醇、浓盐酸、镁粉、10%萘酚溶液、浓硫酸、聚酰胺薄层板、紫外-可见分光光度计、红外光谱仪、核磁共振波谱仪等。
2. 实验仪器：电子天平、恒温加热器、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、紫外-可见分光光度计、红外光谱仪、核磁共振波谱仪等。
四、实验步骤1. 芦丁和槲皮素的提取（1）将槐米粉末用无水乙醇回流提取，过滤，收集滤液。
（2）将滤液浓缩至一定体积，用热水溶解，冷却后用盐酸调节pH值至2～3。
（3）静置沉淀，取上清液，用旋转蒸发仪浓缩至近干。
（4）用少量无水乙醇溶解残渣，定容至一定体积，得到芦丁和槲皮素的提取液。
2. 芦丁和槲皮素的鉴定（1）紫外-可见光谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用紫外-可见分光光度计测定其在200～400nm范围内的吸收光谱，与标准品进行比较。
（2）红外光谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用红外光谱仪测定其红外光谱，与标准品进行比较。
（3）核磁共振波谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用核磁共振波谱仪测定其核磁共振波谱，与标准品进行比较。
3. 芦丁和槲皮素的分离（1）薄层色谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，点样于聚酰胺薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯-冰醋酸（5:4:1）为展开剂进行薄层色谱分析，与标准品进行比较。
（2）高效液相色谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，经适当处理后，用高效液相色谱仪测定其含量，与标准品进行比较。
五、实验结果与分析1. 紫外-可见光谱分析芦丁和槲皮素的紫外-可见光谱与标准品的吸收光谱基本一致，表明提取液中含有芦丁和槲皮素。
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第３ ７卷 第 ２ 期
２ Ｏ １ ４年 ２月
新 疆 医 科 大 学 学 报
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｘｉ ｎ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ
Ｖｏ １ ． ３ ７ Ｎｏ ． ２ Ｆ ｅ ｂ ． ２ Ｏ １ ４
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标 伯 利 亚 接 骨 木 ； 芦丁； 槲皮 素 ； 高 效 液 相 色 谱 法
中图分类号 ： Ｒ ９ １ ４ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ９ — ５ ５ ５ １ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ２ — ０ １ ６ ３ — ０ ３
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ９ — ５ ５ ５ １ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ２ ． ０ ０ ９
柱： Ａ ｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ Ｃ ８ （ ４ ． ６ ｍｍ ×２ ５ ０ ｍｍ ， ５ ｍ） ， 流动相 ： 甲 醇一 ０ ． １ 磷酸水溶液 （ ４ ９： ５ １ ） ， 柱温 ２ ５ ℃， 流速 １ ． ０ ｍＬ ／ ｍｉ ｎ ， 检测波长 ２ ５ ４ ｎ ｍ。 结 果 芦 丁 在 ０ ． ２ ～１ ｍｇ ／ ｍＬ 浓 度 范 围 内 线 性 关 系 良好 （ ｒ一０ ． ９ ９ ９ ９ ） ， 平 均 回 收 率 为
Ｘｉ ｎ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｍｅ ｄｉ ｃ ａ ｌ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ，Ｕｒ ｕ ｍｑ ｉ ８ ３ ０ ０ １ １ ，Ｃ ｈｉ ｎ ａ） （ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｐｈ ａ ｒ ｍａ ｃ ｙ，
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：０ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔｏ ｃ ｏ ｎ ｓ ｕ ｍｍａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ａ ｒ ｄ ａ ｎ ｄ ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｄ ｅ ｔ ｈ ｅ ｏ ｒ ｙ ｅ ｖ ｉ ｄ ｅ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ Ｓ ａ ｍ ｂ ｕ ｃ ｕ ｓ
１ ０ ０ ． ３ ８ ， ＲＳ Ｄ一２ ． Ｏ ４ （ ＝９ ） ； 槲 皮 素在 Ｏ ． ８ ４ ８／ ￣ ｇ ／ ｍＬ浓度 范 围 内线 性 关 系 良好 （ ｒ＝０ ． ９ ９ ９ ７ ） ， 平 均 回收 率 为 ９ ９ ． ２ ３ ， Ｒ Ｓ Ｄ＝Ｏ ． ９ ６ （ 一９ ） 。 槲皮 素 含 量 为 Ｏ ． ０ ９ ７ １ ～Ｏ ． １ ９ ８ ５ ｍｇ ／ ｇ ， 芦 丁含量为 ７ ． ７ ８ ５ ～１ ３ ． ３ ０ ０ ｍｇ ／ ｇ 。 结 论 此方 法简便 、 准确 、 可靠 ， 可作为西伯利亚 接骨木药材芦丁 、 槲 皮素含量的测定方法 ， 为 完 善 西 伯 利 亚 接 骨 木 的质 量
ＨＰ Ｌ Ｃ法测定 西伯利亚接骨木中槲皮素 、 芦丁 的含量
李 莉 ，王 婷 媛 ，热 娜 ・ 卡 斯 木
（ 新 疆 医科 大 学 药 学 院 ，乌 鲁 木 齐 ８ ３ ０ ０ １ １ ）
摘 要 ： 目 的 建 立 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 西 伯 利 亚 接 骨 木 中 槲 皮 素 、 芦 丁 含 量 。 方 法 采 用 ＨＰ Ｌ Ｃ法 ， 色 谱
Ｈ ＰＬＣ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｒ ｕｔ ｉ ｎ，ｑ ｕ ｅ ｒ ｃ ｅ ｔ ｉ ｎ ｉ ｎ Ｓａ ｍｂ ｕ ｃ ｕ ｓ ｓ ｉ ｂ ｉ ｒ ｉ ｃ ａ Ｎａ ｋａ ｉ
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