HPLC 法测定桑叶中芦丁的含量

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高效液相色谱法测定桑葚中芦丁含量注意事项

高效液相色谱法测定桑葚中芦丁含量注意事项

高效液相色谱法测定桑葚中芦丁含量注意事项
1. 样品制备:样品制备过程中要保持卫生,避免污染。

可采用加乙醇或加水加热提取的方法提取样品,提取次数可根据实际情况确定。

2. 色谱柱选择:色谱柱的选择要考虑分离度、效率、稳定性等因素,一般可选择C18色谱柱,柱长为250mm,内径为4.6mm。

3. 色谱条件:在色谱操作中要维持一定的流速,避免色谱柱内压力的过高和过低。

采用梯度洗脱过程中需要注意洗脱液的比例和流速,选择合适的洗脱液组成、洗脱液流速和梯度温度等。

4. 标准品选择:芦丁的标准品选择应根据需测定的范围确定,从而确保测定范围、灵敏度和准确度。

5. 验证方法:为了确保测定结果的准确性和可重复性,在测定前应先进行方法的验证,如方法的特异性、线性、精密度、稳定性等,以及对样品中其他可能存在的干扰物质的筛查。

6. 数据处理:对测定结果进行再计算,确保结果的准确性。

在出现异常结果时应及时进行检查、重复操作或重新测定。

RP-HPLC法测定新疆不同产地药桑叶中芦丁、异槲皮苷的含量

RP-HPLC法测定新疆不同产地药桑叶中芦丁、异槲皮苷的含量

RP-HPLC法测定新疆不同产地药桑叶中芦丁、异槲皮苷的含量阿合买提江·吐尔逊;赵文惠;孙莲;王岩;张煊;古丽江·马合苏提汗【摘要】目的考察新疆不同产地、不同采摘时间药桑叶中芦丁、异槲皮苷的含量变化.方法采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),以大连依利特 Hypersil ODS(150 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,进样量20 μl,流动相为乙腈(A)-水(B)-0.2%磷酸溶液(pH=4.8)(C),梯度洗脱[0 min,A-C(18:82);4 min,A-C(21:79);10 min,A-C(8:92)],流速1.0 ml/min,检测波长为358 nm,柱温为25℃.结果不同产地、不同采摘时间的药桑叶中芦丁和异槲皮苷的含量均有一定的差异,喀什地区、5~6月份二者含量较高.结论药桑叶中芦丁和异槲皮苷的含量与产地和采摘季节等有关,尤其以季节的影响大.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2010(033)010【总页数】4页(P1194-1197)【关键词】药桑叶;芦丁;异槲皮苷;反相高相液相色谱法【作者】阿合买提江·吐尔逊;赵文惠;孙莲;王岩;张煊;古丽江·马合苏提汗【作者单位】新疆医科大学药学院分析/药分教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院分析测试中心,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院化学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院分析/药分教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院分析/药分教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院药学2006-2班,新疆,乌鲁木齐,830011【正文语种】中文【中图分类】R917桑叶为桑科(Moraceae)桑属(Morus L.)植物的叶,中国大部分地区均有栽培生产。

桑叶入药首见于《神农本草经》,列为中品。

HPLC法同时测定桑叶中芦丁、异槲皮苷、紫云英苷的含量

HPLC法同时测定桑叶中芦丁、异槲皮苷、紫云英苷的含量
桑叶采摘于安徽医科大学校园区,经安徽中医学院彭华 胜教授鉴定为桑科植物 Morus alba L. 的叶。分别取一定量的 鲜桑叶,于通风干燥处自然晾晒,干燥后称重得晒干样品; 置 真空干燥箱中,以 60℃ 的温度烘干,称重得烘干样品。 2 方法与结果 2. 1 色谱条件 色谱柱: Shim pack ODS 色谱柱( 250 mm × 4. 6 mm,5 μm) ,柱温 35℃ ; 流动相 A: 0. 4% 磷酸乙腈溶液,B: 0. 4% 磷酸水溶液; 梯 度 洗 脱: 0 ~ 9 min A: 15% ,20 min A: 25% ,30 min A: 45% ,40 min A: 60% ; 检测波长 360 nm,流速 1. 0 ml·min - 1 ,进样量 20 μl。按照上述色谱条件进行测定, 结果显示芦丁、异槲皮苷和紫云英苷三种黄酮与其他共存峰 得到较好的分离,分离度均大于 1. 5,各成分理论塔板数均不 低于 3 000。 2. 2 对照品溶液配制 分别精密称取芦丁、异槲皮苷、紫云 英苷置 50 ml 棕色容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,即得 芦丁 0. 048 0 g · L - 1 、异槲皮苷 0. 107 4 g · L - 1 、紫 云 英 苷 0. 105 4 g·L - 1 的对照品贮备液。分 别 精 密 量 取 1. 0 ml 芦 丁、1. 0 ml 异槲皮苷、0. 5 ml 紫云英苷对照品溶液,置 10 ml 棕色容量瓶中,得到混合对照品溶液。 2. 3 供试品溶液制备 将晒干桑叶( 含水量 6. 3% ) 、60℃ 烘 干( 含水量 7. 5% ) 桑叶以及鲜桑叶( 含水量 68. 1% ) 分别于 粉碎机中粉碎,精密称取晒干桑叶粉末和烘干桑叶粉末各约 0. 2 g、鲜桑叶浆末约 4. 0 g,分别置于 100 ml 棕色容量瓶中, 加入甲醇 80 ml,超声 2 h,冷却至室温后,用甲醇定容至刻度, 过 0. 22 μm 微孔滤膜,作为三种桑叶的供试液。 2. 4 线性关系考察 将“2. 2”项下混合对照品溶液,用甲醇 逐级稀释成系列浓度的混合对照品溶液,分别进样 20 μl,以 峰面积为纵坐标,以对照品浓度( mg·L - 1 ) 为横坐标,绘制标 准曲线。结果芦丁的回归方程为 Y = 32 665. 7X - 12. 4 ( r = 0. 999 3) ,异槲皮苷的回归方程为 Y = 42 782. 5X - 260. 7( r = 0. 999 3) ,紫云英苷的回归方程为 Y = 55 208. 9X + 620. 1( r = 0. 999 9) ,其线性范围分别为 0. 076 ~ 1. 920,0. 086 ~ 2. 148 和 0. 042 ~ 2. 108 mg·L - 1 。 2. 5 稳定性实验 取晒干桑叶供试品溶液分别于 0,3,6,12 h 进样,进样体积 20 μl,记录峰面积,根据当天随行标准曲 线,计算样品各成分含量。样品中芦丁、异槲皮苷、紫云英苷 含量的 RSD 分别为 2. 1% 、3. 0% 、2. 1% ,表明样品溶液在 12 h 内基本稳定。

基于高效液相色谱法的桑葚芦丁含量测定

基于高效液相色谱法的桑葚芦丁含量测定

化工设计通讯Chemical Engineering Design Communications研究与开发Research and Development第45卷第7期2019年7月基于高效液相色谱法的桑奁芦丁含量测定刘昕(大连理工大学化工与环境生命学部,辽宁大连116024)摘要:针对桑甚中的芦丁成分测定进行了相关研究,利用反相高效液相色谱法测走桑菩中芦丁成分的含量。

结果显示芦丁标准溶液在0.464~2.32pg时的线性回归方程为Y=21200X+13697,平均回收率为99.4%。

实验表明该方法快捷且准确度高。

为芦丁提取,条件优化和其他过程的选择提供了理论依据,为提取芦丁原料提供了实验依据,为桑树的质量评价和桑檯的药用价值研究提供了参考。

关键词:反相高效液相色谱法;桑套;芦丁;含量测定中图分类号:R284文献标志码:A文章编号:1003-6490(2019)07-0143-02Determination of Mulberry Rutin Based on HighPerformance Liquid ChromatographyLiu Xin-yuanAbstract:The main research on the determination of rutin in mulberry was carried out.The content of rutin in mulberry was determined by reversed-phase high performance liquid chromatography.The results showed that the linear regression equation of the rutin standard solution in the range of0.464-2.32u g was Y=21200X+13697>and the average recovery was99.4%.Experiments show that the method is fast and accurate.This study provides a theoretical basis for n.iin extraction,condition optimization and other process selection,and provides experimental basis for people to extract rutin raw materials,which provides a reference for the quality evaluation of mulberry and the medicinal value of mulberry.Key words:reversed-phase high performance liquid chromatography;mulberry;rutin;determination高效液相色谱是色谱的重要分支。

高效液相色谱法测定桑葚中芦丁含量

高效液相色谱法测定桑葚中芦丁含量

高效液相色谱法测定桑葚中芦丁含量
一、实验原理
芦丁是一种常见的黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

本实验采用高效液相色谱法测定桑葚中芦丁含量。

二、实验步骤
1. 粉碎采样
取适量桑葚样品,去除杂质,将其均匀粉碎并过筛,取其中约2克的粉末备用。

2. 超声提取
将2克桑葚粉末加入50 mL的50%乙醇,超声提取30分钟,再过滤,将提取液收集入50 mL瓶中。

加入足量50%乙醇使其体积达到标线,摇匀备用。

3. 色谱条件设置
在高效液相色谱仪上设置如下条件:
色谱柱:Agilent Poroshell C18(4.6mm×250mm, 5μm)
流动相:20% 乙腈-80% 水(含0.1% 的磷酸二氢钾,pH 2.5,用磷酸调节)
流速:1.0 mL/min
检测波长:350 nm
4. 样品测定
取一定体积的上述提取液,通过过0.45 μm的滤膜滤过后注入色谱柱中,利用UV-Vis检测器检测样品的峰面积与标准品的峰面积相比较,从而测定芦丁的含量。

5. 统计分析
按照芦丁的质量浓度标准曲线计算样品芦丁的含量。

三、实验注意事项
1. 所有仪器必须严格按照说明书操作。

2. 色谱柱上必须不断充填流动相以保持流动速度。

3. 芦丁标准品的制备要严格按照操作说明进行。

4. 桑葚样品粉末应保持细腻均匀。

5. 提取液要在避光条件下保存,避免有机溶剂挥发。

高效液相色谱法测定桑叶中芦丁含量

高效液相色谱法测定桑叶中芦丁含量

高效液相色谱法测定桑叶中芦丁含量
测定样品:桑叶样品
仪器设备:高效液相色谱仪、色谱柱、加样器、移液器、电子天平、pH计等。

试剂:甲醇、磷酸二氢钾、三乙胺、芦丁标准品。

操作步骤:
1、将桑叶样品粉末状,称取0、5g,加入50 ml甲醇中,超声提取15分钟,静置,离心,将上清液过滤。

2、取上清液10 ml,加入8 ml磷酸二氢钾(0、2 mol/L)中,pH 调节至4、5,加入适量三乙胺中和至pH值为7、0左右。

3、将上述溶液过滤,进样至高效液相色谱仪中。

4、据芦丁标准曲线,计算样品中芦丁的含量,并作相应的校正。

结果计算:芦丁含量(mg/g)= (样品进样量x 芦丁标准品浓度)/样品质量
注意事项:
1、样品须充分搅拌均匀,以保证提取效率和准确性。

2、溶液pH值应根据实际情况进行调节,以达到较好的色谱分离效果。

3、标准品浓度适宜,不宜过高或过低,以避免出现测定值偏差。

4、操作过程中应严格遵守实验室安全规定,避免操作失误。

高效液相色谱法测定桑葚中芦丁含量

高效液相色谱法测定桑葚中芦丁含量一、实验原理芦丁是一种黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎和抗癌等作用,常被应用于医疗、化妆品、保健品等领域。

本实验采用高效液相色谱法对桑葚样品中芦丁含量进行测定。

二、实验仪器高效液相色谱仪、分光光度计、电子天平、移液器、手动剪切器、1 mL量筒、色谱柱、色谱柱前锋过滤器、溶解器、离心机。

三、实验药品和试剂标准品:芦丁(纯度高于98%)。

对照品:芦丁(纯度高于98%)。

试剂:无水甲醇(HPLC级)、乙酸(分析纯级)、去离子水(电阻率大于18 M Ω/cm)。

四、实验步骤1. 样品制备精确称取5 g桑葚样品,加入50 mL无水甲醇中,以超声波方式进行提取10 min,过滤后将提取液置于50 mL体积瓶中,用无水甲醇补足至刻度线。

2. 色谱分析将样品液经过前处理,用移液器取20 μL进样于色谱柱中,洗脱剂为甲醇-乙酸-水(70:1:29),流速为1.0 mL/min,检测波长为353 nm。

用标准品进行校正和定量。

5. 数据处理计算出桑葚中芦丁的含量(mg/kg),计算公式:C = (A / B)* (a *1000 / w)其中,C为芦丁含量(mg/kg),A为样品的浓度(mg/L),B为标准曲线回归方程的斜率,a为取样量(g),w为样品稀释液的体积(L)。

六、实验注意事项1. 实验操作需穿戴实验服和手套,注意个人安全。

2. 样品过多、过浓会影响色谱分析的精度,应注意控制样品的量和浓度。

3. 样品提取和前处理应严格按照步骤操作,避免误差的发生。

4. 实验中所用仪器和试剂应按照使用说明操作和管理。

5. 实验结束后,应彻底清洗和消毒仪器和场地,避免交叉污染。

HPLC同时测定桑叶中绿原酸_芦丁_异槲皮苷_紫云英苷_槲皮素含量

HPLC 同时测定桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素含量邸学,谷丽艳,王海波,许亮,包琳琳( 辽宁中医药大学,辽宁大连11660)[摘要]目的: 建立桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素含量的方法,对不同来源的桑叶药材质量进行评价。

方法: HPLC 同时测定Therm o OD S色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm,5 μm),柱温35 ℃,流动相为磷酸乙腈溶液( 0. 1% ,A)和磷酸( 0. 16% )-三乙胺( 0. 18% )水溶液( B)梯度洗脱,流速1. 0 mL·min -1,检测波长360 nm。

结果: 桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素5 种活性成分在60 min 内分离效果理想,线性范围分别为0. 32 ~13. 73 μg ( r = 0. 999 6) ,0.05 ~3. 13 μg ( r = 0. 999 8) ,0.03 ~9. 50 μg( r = 0. 999 4) ,0.03 ~5. 60 μg ( r = 0. 999 5) ,0.001 ~0. 05 μg ( r = 0. 999 7) ; 帄均加样回收率在99. 61%~106. 09%,RSD≤2. 8%。

结论: 该方法操作简单,结果准确,专属性强,可为桑叶药材的质量控制标准提高提供参考。

[关键词]桑叶; 绿原酸; 芦丁; 异槲皮苷; 紫云英苷; 槲皮素[中图分类号]R284. 1[文献标识码] A[文章编号] 1005-9903( 2014) 15-0092-04[d oi] 10〃 13422 / j〃 cnki〃 s yf j x〃 2014150092Simultaneous Determination of Chlorogenic Acid,Rutin,Isoquercetin,Astragalin and Quercetin in Mori Folium by HPLCDI X ue,GU Li-yan,WANG H ai-bo,XU Liang,BAO Lin-lin( School of Pharmaceutical Sciences,Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Dalian 116600)[A b s t rac t]Ob j ective: To establish HP LC method f or simultaneous determination of chlor ogenic acid,rutin,isoquercetin and astragalin quercetin in M ori Folium〃Method: A HP LC equipped w ith a T herm o OD S[收稿日期] 20130715( 007)[第一作者]邸学,硕士,实验师,从事中药品种鉴定评价研究,E-mail:di x_email@ 163〃c o m檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶[5]廖玉麟〃中同动物志棘皮动物门海参纲[M]〃北京:[参考文献][1]南京中医药大学〃中药大辞典〃下册[M]〃上海:上海科学技术出版社,2006: 2724.[2]Sév erine V D, Pasca l G, Patrick F〃 Qualitati v e and quantitati v e sap o nin c o ntents in f i v e sea cucumbers f r o mthe Indian Ocean[J]〃M arine Dru g s,2010,8( 1): 173. [3]张淑瑜,汤海峰,刘世君,等〃海参中海参烷型皂苷的研究进展[J]〃药学实践杂志,2008,26( 5): 321.[4] Xia o qian Hu,Y umin g W an g,J in gf en g Wan g,e t al〃D ietar y sap o nins of sea cucumber alle v iate o r o ticacid- induced f att y li v er in rats v ia PPARαand SREBP-1c si g nalin g[J]〃 Lipid s in H ealth and Disease,2010,9 ( 1): 25.科学出版社,1997: 108.[6]刁小琴,田晓菊,关海宁,等〃以齐墩果酸为标准品测定大豆皂甙的研究[J]〃中国油脂,2009( 11): 53.[7]张小鸿,吴杨峥,徐先祥〃不同显色剂对牛膝总皂苷含量测定的影响[J]〃中国实验方剂学杂志,2013,19( 21): 113.[8]董帄〃革皮氏海参皂苷化合物的分离鉴定、结构修饰及活性研究[D]〃青岛:中国海洋大学,2008.[9]董帄,薛长虹,盛文静,等〃海参中总皂苷含量测定方法的研究[J]〃中国海洋药物杂志,2008,27( 1): 28.[责任编辑顾雪竹]( 4.6mm×250mm,5μm) column and UV detection w as used〃 T he column temperature w as at35℃and the f l ow rate1.0m L·min-1 〃 T he mobile phase w as consisited of phosphoric acid in acetonitrile ( 0.1%,A) and phosphoric acid ( 0.16% ) and triethylamine ( 0.18% ) in w ater ( B ) w ith gradient elution〃T he detection w avelength w as set at360nm〃Res u l t: T he good saperation of f ive f l avo noids w as achieved w ithin60min〃 L inear calibration curves w ere obtained w ith0.32-13.73μg ( r=0.9996) ,0.05-3.13μg ( r=0.9998) ,0.03-9.50μg ( r = 0. 999 4 ) ,0. 03-5. 60 μg ( r = 0. 999 5 ) ,0. 001-0. 05 μg ( r = 0. 999 7 ) ; the average recovery was 99.61%-106.09%,RSD≤2.8%〃Con cl u si on: T he proposed method is simple,accurate,repeatable,and can be used f or qualit y control as w ell as a pow er f ul t ool t o evaluate the processing of M ori Folium〃[K ey w ords]Mori Folium; chlorogenic acid; r utin; isoquercetin; astragalin; quercetin桑叶始载于《神农本草经》,为桑科植物桑Morus a l ba L〃的干燥叶。

HPLC测定新疆药桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷和槲皮素

Center, Urumqi 830054, China) ABSTRACT: OBJECTIVE An HPLC method was established for the simultaneous determination of Chlorogenic Acid, Rutin, Isoquercitrin and Quercetin in drug Mulberry Leaves of Xinjiang. METHODS The chromatographic separation was carried out on a Yilite Hypersil BDS (4.6 mm × 250 mm, 5 μm) with a mobile phase composed of acetonitrile (A) and 0.01 mol·L1 ammonium acetate(pH=4.8) (B) with gradient elution [0 min, A-B (8∶92);30 min, A- B (30∶70)] . The flow rate was 1.0 mL·min-1, the detection wavelength was set at 350 nm and the column temperature was 25 ºC. RESULTS The linear ranges of Chlorogenic acid , Rutin, Isoquercitrin, and Quercetin were between 1.052 05.067 9 μg(r=0.999 3), 1.029 45.031 7 μg (r=0.999 8), 1.076 85.065 5 μg (r=0.999 0) and 1.075 05.055 0 μg (r=0.999 1), respectively. The average recoveries of Chlorogenic Acid, Rutin, Isoquercitrin and Quercetin were 102.2% (RSD=1.3%), 104.6% (RSD=0.9%), 104.0% (RSD=1.9%), 104.7% (RSD=1.2%). The detection limits were 0.160, 0.081, 0.033, 0.640 μg·mL1(S/N=3), respectively. CONCLUSION The method is simple, rapid, sensitive and accurate. Therefore it is applicable for the determination of Chlorogenic Acid, Rutin, Isoquercitrin and Quercetin in drug Mulberry Leaves of Xinjiang. KEY WORDS:drug mulberry leaves; chlorogenic acid; rutin; isoquercitrin; quercetin; HPLC

HPLC测定桑叶中绿原酸、芦丁和木犀草苷含量

HPLC测定桑叶中绿原酸、芦丁和木犀草苷含量
HPLC测定桑叶中绿原酸、芦丁和木犀草苷含量
郑娟;茅纯;邹耀华
【期刊名称】《中国现代应用药学》
【年(卷),期】2014(031)002
【摘要】目的建立同时测定桑叶中绿原酸、芦丁和木犀草苷含量的方法.方法样品用70%乙醇溶液提取,采用Phenomenex Luna C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)分离;流动相:0.1%磷酸-乙腈,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;检测波长:348 nm.结果绿原酸、芦丁、木犀草苷分别在3.048~152.4,1.059~52.96,1.437~71.85 μg·mL-1内具有良好的线性关系;加标回收率分别为100.4%,98.3%,98.7%; RSD分别为1.7%,2.0%,1.9%(n=9).结论该方法简单易行,准确性和重复性好,可用于桑叶的质量控制.
【总页数】4页(218-221)
【关键词】高效液相色谱法;桑叶;绿原酸;芦丁;木犀草苷
【作者】郑娟;茅纯;邹耀华
【作者单位】杭州市药品检验所,杭州310017;杭州市药品检验所,杭州 310017;杭州市药品检验所,杭州 310017
【正文语种】中文
【中图分类】R917.101
【相关文献】
1.HPLC法同时测定桑叶药材及其炮制品中绿原酸、芦丁和异槲皮苷的含量[J], 程聪梅; 毛菊华; 余乐
2.桑叶中绿原酸和主要黄酮苷含量的RP-HPLC测定 [J], 吴好好; 蒋惠娣; 高处。

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228第12卷 第5期 2010 年 5 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 12 No. 5 May,2010桑叶为桑科桑属植物桑Morus alba L.的干燥叶,味苦甘、寒,归肺、肝经,具有疏散风热、清肺润燥、清肝明目之功能,用于风热感冒、肺热燥咳、头晕头痛、目赤昏花等症。

在《中华人民共和国药典》2005版中[1],桑叶中芦丁的含量测定采用的是HPLC 法梯度洗脱,其操作重复性差,对实验设备要求相对较高,旨在建立以等度洗脱,采用HPLC 法测定桑叶中芦丁的含量。

1 仪器 试剂和药材1.1 仪器 高效液相色谱仪(岛津LC-10A,日本),KQ-100型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 试剂 甲醇、乙腈均为色谱纯,其他试剂为分析纯。

1.3 药材 桑叶经辽宁中医药大学植物教研室王冰教授鉴定为桑科桑属植物桑Morus alba L.的干燥叶。

2 实验方法2.1 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-乙腈-醋酸-水(15:10:2.6:72.4)为流动相,检测波长为358nm,流速:1mL·min -1。

理论塔板数按芦丁计算应不低于3000。

芦丁与相邻成分色谱峰的分离度应不小于1.5。

见图1~2。

图1 芦丁对照品溶液HPLC色谱图图2 桑叶供试品溶液HPLC 色谱图2.2 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品10.32mg,置100mL 量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成每1mL 含0.1032mg 的溶液,作为芦丁对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 精密称定桑叶1g, 置25mL 容量瓶中,甲醇超声提取30min,放冷,加甲醇至刻HPLC 法测定桑叶中芦丁的含量周美环1,赵书楷1,陈 淼2,张东方3(1.沈阳东北大药房连锁店,辽宁 沈阳 110023;2.神威药业有限公司,辽宁 沈阳 110003;3.中国医科大学药学院,辽宁 沈阳 110001)收稿日期:2009-10-05作者简介:周美环(1975-),女,辽宁大连人,工程师,学士,主要从事药品质量管理。

通讯作者:张东方(1975-),男,辽宁朝阳人,副教授,博士,研究方向:中药复方研究及新药开发。

E-mail: syzdf@。

摘 要:目的:在《中华人民共和国药典》中,桑叶中芦丁的含量测定方法采用的是HPLC 法梯度洗脱,其操作重复性差,对实验设备要求高,旨在建立以等度洗脱,采用HPLC 法测定桑叶中芦丁的含量。

方法:采用HPLC 法,以甲醇-乙腈-醋酸-水(15:10:2.6:72.4)为流动相等度洗脱,以建立芦丁的含量测定方法。

结果:采用HPLC 法测定桑叶中芦丁的含量稳定性良好,精密度良好,重复性良好,加样回收率良好,芦丁含量为0.46%~0.49%。

结论:采用HPLC 等度洗脱测定桑叶中的芦丁方法可行。

关键词:桑叶;HPLC;芦丁中图分类号:R927.2 文献标识码:A 文章编号:1673-842X (2010) 05- 0228- 02Content of Rutin from Follium Mori is Determined by HPLCZHOU Mei-huan 1, ZHAO Shu-kai 1, CHEN Miao 2, ZHANG Dong-fang 3(1.Shenyang North-East Drug Store Chain, Shenyang 110023, Liaoning, China; 2.Shenwei Pharmaceutical Company, Shenyang 110003, Liaoning, China; 3. College of PharmaceuticalScience, China Medical University, Shenyang 110001, Liaoning, China)Abstract:Objective : Content of rutin from Follium Mori is determined by HPLC in China Ph.,but gradient elution is difficult to repeat and equipment is not public. Methods : HPLC was used to determined content of rutin from Follium Mori, and its mobile phase is methanol-acetonitrile-acetic acid -water(15:10:2.6:72.4). Results : Stability, Precision, repetition of HPLC all were better .Content of rutin was 0.46%~0.49%. Conclusion : The content determination of rutin from Follium Mori are feasible.Key words:Follium mori; HPLC; rutin DOI :10.13194/j.jlunivtcm.2010.05.230.zhoumh.097229第12卷 第5期 2010 年 5 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 12 No. 5 May,2010度,摇匀,即得。

2.4 测定波长的选择 取芦丁对照品溶液,扫描紫外图谱,结果在358nm 处有最大吸收,故确定检测波长为358nm。

2.5 线性范围考查 精密吸取浓度为0.1032mg·mL -1的芦丁对照品溶液2、4、6、8、10μL,分别进样,测定色谱峰面积,以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,绘制标准曲线,回归方程为Y = 900023.3X-22730,r = 0.9997。

测定结果提示,进样量在 0.2064~1.032μg 范围内线性关系良好。

2.6 稳定性试验 精密吸取供试品溶液5μL,于0、2、4、6、8h 时间间隔,分别进样,测定,平均色谱峰面积为912142.2,RSD 为1.7%,稳定性良好。

2.7 精密度试验 精密吸取供试品溶液5μL,连续进样6次,测定色谱峰面积992757.4,RSD 为1.1%,仪器精密度良好。

2.8 重复性试验 取同一样品依法操作6次,测定,计算含量平均值为0.463%, RSD 为1.8%.2.9 回收率实验 分别取本品1g(含量为0.463%),6份,分别精密加入芦丁对照品溶液(2.26mg·mL -1)2mL,按含量测定方法测定,计算加样回收率平均值为99.0%, RSD 为0.7%。

2.10 芦丁的含量测定 取3批不同桑叶样品,依法操作,测定,计算芦丁的含量分别为0.46%、0.49%、0.48%。

3 讨论与结论桑叶中主要含黄酮、多糖类和生物碱类成分,在《中华人民共和国药典》(2005版)中,对芦丁进行了含量测定,其方法是采用HPLC 法梯度洗脱,操作重复性差,对实验设备要求高。

采用高效液相色谱法等度洗脱,对桑叶中芦丁的含量测定进行了改进,其分离度良好,经方法学考察,精密度、稳定性、重现性和加样回收率均良好,具有推广价值。

◆参考文献[ 1 ] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典[ M ] .北京:化学工业出版社,2005:209.广金钱草为豆科植物广金钱草Desmodiumstyracifolium(Osb.) Merr.的干燥地上部分,收载于《中华人民共和国典》2005年版一部。

具有清热除湿,利尿通淋之功,用于热淋、砂淋、石淋,小便涩痛,水肿尿少,黄胆尿赤,尿路结石[1]。

其中广金钱草总黄酮具有预防草酸钙结石形成、抗炎等作用[2],但对其最佳提取方法的研究未见报道,笔者采用正交试验法,以总黄酮提取量为考察指标,筛选最佳提取工艺,为广金钱草总黄酮的提取工艺研究提供科学依据。

1 仪器与试药7520紫外分光光度计(上海分析仪器厂);芦正交法优选广金钱草总黄酮提取工艺研究王 鑫1,王 静2,袁子民2(1.辽宁中医学院药业有限公司,辽宁 沈阳 110164;2.辽宁中医药大学,辽宁 大连 116600)收稿日期:2009-10-05作者简介:王鑫(1975-),女,主管中药师,学士,研究方向:中医药现代化研究。

摘 要:目的:采用正交试验法优选广金钱草中总黄酮的提取工艺。

方法:以总黄酮提取量为指标,醇浓度、加醇量、提取时间、提取次数为因素进行正交试验。

结果:最佳提取艺条件为:50%乙醇为溶媒,提取3次,溶媒为 12、10、10倍量,每次1.5h。

结论:提取工艺简便易行。

关键词:广金钱草;总黄酮;正交试验中图分类号:R943 文献标识码:A 文章编号:1673-842X (2010) 05- 0229- 02Optimization of Study on Extraction Process of Total Flavonoids inDesmodium Styracifolium by Orthogonal Experimental DesignWANG Xin 1,WANG Jing 2,YUAN Zi-min 2(1. Liaoning College of Traditional Chinese Medicine Pharmaceutical Co., Ltd, Shenyang 110164,Liaoning, China; 2.Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600,Liaoning, China)Abstract:Objective : Use orthogonal experimental design,optimization of study on extraction process of total flavonoids in Desmodium styracifolium. Methods : Four factors including the Ethanol consistence, the quantity, the time of extraction and the number of times of extraction. Results : The optimal procedure was set as follows:50% ethanol's, 12,10,10 fold solvent and 3 times of extraction, 1.5 hour of each reflux.Conclusion : The technology is simple.Key words:Desmodium styracifolium; total flavonoids; orthogonal experimental design。

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