临床检验基础 血液检验重点整理(理论考试版)
临床血液学检验考试重点总结

临床血液学检验考试重点总结临床血液学检验1.骨髓造血:骨髓的造血细胞大部分来源于肝脏,部分来源于脾脏。
骨髓是产生红细胞,粒细胞和巨核细胞的主要场所,骨髓也产生淋巴细胞和单核细胞,因此骨髓不仅是造血器官,同时也是一个中枢淋巴器官。
2.髓外造血:正常情况下,胎儿出生2个月后,骨髓以外的组织如肝、脾、淋巴结等不再制造红细胞、粒和血小板,但是在某些病理情况下,这些组织又可从头恢复其造血功能,称为髓外造血。
3.血细胞的分化是指分裂后产生新的子细胞在生物学性状上产生了新的特点,即通过特定基因的表达合成了特定的蛋白质,与原来的细胞有了质的例外。
这种分化过程是不可逆的,是血细胞失去某些潜能同时又获得新功能的过程。
4.血象和骨髓象检验是诊断血液系统疾病、观察疗效及病情的严重手段之一。
5.粒细胞系统包括原始粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞、杆状粒细胞和分叶核粒细胞,粒细胞是由于胞质中常有许多颗粒而得名的。
颗粒从II型原始粒细胞开始出现,称为非特异性颗粒(又称为A颗粒、嗜天青颗粒、嗜苯胺蓝颗粒),从中幼粒细胞开始出现特异性颗粒(即S颗粒),S可以有三种:中性颗粒、嗜酸性颗粒及嗜碱性颗粒。
6.早幼粒细胞其胞体直径12~25um,较原始粒细胞大。
7.骨髓穿刺:最为理想的穿刺部位是髂骨上棘(包括髂骨前、髂骨后上棘)8.骨髓取材情况判断:(1)取材满意:a.抽吸骨髓液时,患者感到有瞬间的酸痛感(有的患者无这种感觉);b.抽出的骨髓液中有较多的黄色小粒(多为骨髓小粒,有的是脂肪);c.显微镜下涂片中可见较多骨髓特有细胞:稚童粒细胞、有核红细胞、巨核细胞、浆细胞、造骨细胞、破骨细胞、脂肪细胞、肥大细胞、组织细胞、吞噬细胞等;d.中性杆状核粒细胞/分叶核粒细胞比值大于外周血中性杆状核粒细胞/分叶核粒细胞比值,有核细胞数大于外周血有核细胞数。
(2)取材失败(即骨髓稀释):如抽吸骨髓液时混进血液,称为骨髓部分稀释;如抽出的骨髓液实际上就是血液,称为骨髓完全稀释。
临床检检验基础考点整理

临检知识点第一章—第二章一.名解全血、血浆、血清、抗凝、毒性颗粒、空泡、杜勒体、核左移、核右移、贫血、血细胞比容、mcv、mch、mchc、嗜碱点彩红细胞、豪焦小体、卡波环、网织红细胞、红细胞沉降率。
二.简答1.各种抗凝剂的比较(列表:原理、常用试剂、使用方法、适用项目、不适用项目)。
2.瑞士染色的原理和步骤3.外周血正常白细胞的形态特征(书上有个表)4.中性粒细胞的毒性变化有(填空)5.血红蛋白的测定方法及其评价6.根据红细胞平均值对贫血的分类7.异常红细胞的形态有(填空)第三章一.名解RDW、HDW、MPV二.简答1.库尔特原理2.VCS法检测原理第四章血型检验一.名解血型、交叉配血试验、成分输血、自身输血二.简答1.成分输血的优点2.天然抗体与免疫性抗体的区别(列表:很重要,考过)第五章到第八章尿液检验一.名解多尿、少尿、无尿、尿比密、蛋白尿、糖尿、尿沉渣、闪光细胞、复粒细胞。
镜下脓尿、管型、本周蛋白。
二.简答1.临床常用的尿液标本种类及用途2.常用的尿液化学防腐剂3.血红蛋白尿、血尿、假性血尿的鉴别(列表:考过)4.管型的形成条件5.多联试剂带的结构6.尿液显微镜复检的情况第三篇分泌物与排泄物的检验第九章粪便检验一.名解粪便隐血试验、夏科-籁登结晶、脂肪泻二.简答1.粪便颜色改变及可能的原因2.粪便隐血试验检测方法的比较第十章精液检验一.名解液化时间、精子活动力、生精细胞、精子密度二.简答精子活动力分级(列表:考过)第十一章阴道分泌物检验一.名解细菌性阴道炎、线索细胞二.简答1.阴道清洁度概念及判断标准2.细菌性阴道炎的临床诊断标准第四篇体腔液检验一.名解Froin—Nonne综合征、Donnan平衡二.简答1.穿刺损伤出血和脑或蛛网膜下隙出血的鉴别(表格)2. 常见中枢神经系统疾病csf的实验室检查特点(列表)3. 漏出液与渗出液的鉴别(列表:考过)第五篇脱落细胞学基本检验一.名解退变、增生、再生、化生、不典型增生、核异质、细针吸取细胞学(FNAC)二.简答1.恶性肿瘤核异型性表现(最好列表:考过)2.改良巴氏五级分类法3.CIN分级。
血液学与血液检验——考试复习要点

⾎液学与⾎液检验——考试复习要点⾎液学与⾎液检验考试复习要点:1.原始细胞⼀般形态特征原始粒细胞:胞体直径10-20um,呈圆形或类圆形。
胞核较⼤,占胞体的4/5左右,圆形或类圆形,居中或略偏位;核染⾊质呈细颗粒状,分布均匀平坦,犹如⼀层薄纱,⽆浓集;核膜不清楚;核仁2-5个,较⼩,清楚,呈淡蓝⾊。
胞质较少,呈⽔彩样透明的天蓝⾊或深蓝⾊,绕于核周,有时近核处染⾊较淡,⽆颗粒或有少量细⼩颗粒。
根据颗粒的有⽆,将原始粒细胞分为1型和2型:1型为典型的原始粒细胞,胞质中⽆颗粒;2型除具有典型原始粒细胞的特征外,胞质中还有少量细⼩的颗粒。
原始红细胞:胞体直径15-25um,圆形或椭圆形,常有不规则瘤状或伪⾜状突起,有时因核糖核酸聚集使胞质呈假颗粒状或泡沫样。
胞核圆形,居中或稍偏⼀侧,约占胞体的4/5左右;核染⾊质呈紫红⾊粗颗粒状,核膜清楚;核仁1-3个,⼤⼩不⼀,染浅蓝⾊,边界不清楚。
胞质较多,深蓝⾊不透明,呈油画蓝感,染⾊较不均匀,在核周围常有淡染区;胞质中⽆颗粒,但因核糖核酸丰富⽽⾃⾏聚集,使胞质中出现蓝⾊“颗粒”。
原始巨核细胞:胞体直径15-30um,较其他原始细胞⼤,圆形或不规则。
胞核较⼤,占细胞的3/4,圆形、椭圆形或不规则,胞核常1-2个;核染⾊质较其他原始细胞粗,排列紧密呈浓密⽹状,分布不均匀,染深紫红⾊;核仁2-3个,呈淡蓝⾊,常不清晰。
胞质较少,蓝⾊或深蓝⾊,周边深染,⽆颗粒,常可见胞质指状突起,细胞周边常有少量⾎⼩板附着。
原始淋巴细胞:胞体直径10-18um,胞体及胞核呈圆形或类圆形,居中或稍偏⼀侧。
核染⾊质呈颗粒状,但⽐原粒细胞稍粗且⾊深,排列均匀,核膜浓厚,周界清晰;核仁1-2个,较清晰,淡蓝⾊,好像凹陷之⼩洞。
胞质少,蓝⾊,⽆颗粒,常有狭窄的核周淡染区。
原始单核细胞:胞体直径14-25um,圆形或不规则,有时可有伪⾜。
胞核圆形或不规则,可有折叠或扭曲现象,核居中或偏位;核染⾊质纤细、疏松,呈细⽹状,较其他原始细胞着⾊淡,染淡紫红⾊,核膜不明显,核仁1-3个,常⼤⽽清晰。
临床血液学检验(理论)核心考点

血液检验红细胞检验(一)再生障碍性贫血(AA)简称再障,是因为化学、物理、生物因素及不明原因使骨髓造血组织减少导致骨髓造血功能衰竭,引起外周血全血细胞减少的一组造血干细胞疾病。
特征是造血干细胞功能障碍和(或)造血微环境功能障碍,造血红髓被脂肪组织所替代(红髓脂肪变),导致全血细胞减少的一类贫血。
临床表现为进行性贫血、出血和感染(伴发热),罕有淋巴结核肝脾肿大.【分型】国内根据其病程及临床表现和血象、骨髓象特征将AA分为急性和慢性.国外主要注重实验室特征,将AA依据严重程度分为重型(I 型、II 型)和轻型(I 型、II 型)①急性AA:起病急、进展迅速、病程短。
贫血呈进行性(加重),常伴有严重出血,出血部位广泛并常有内脏出血;半数病例起病时即有感染,严重者可并发败血症.治疗效果差,预后不佳,常在一年内死亡.此型又称重型再障— I 型。
②慢性AA:起病缓慢、病程进展慢、病程较长(一般在4年以上)。
以贫血为主,出血和感染较轻,经恰当的治疗,病情可缓解或治愈,预后较好.此型又称轻型再障.慢性AA病情恶化,血象和骨髓象转变为急性AA的表现,称为重型AA- II 型.【检验】1、血象:以全血细胞减少,网织红细胞绝对值降低为主要特征,三系减少的程度各病例有所不同。
贫血多为正常细胞性,少数为轻、中度大细胞性。
网织红细胞绝对值明显减少.各类白细胞都减少,其中以中性粒细胞减少尤为明显,而淋巴细胞比例相对增多血小板不仅数量减少,而且体积小、颗粒减少。
急性AA时,网织红细胞<1%,绝对值<15×10^9/L;中性粒细胞绝对值常<0。
5×10^9;血小板<20×10^9/L;慢性再障血红蛋白下降速度较慢,网织红细胞、中性粒细胞和血小板减低,但各指标叫急性再障指标为高,达不到急性再障的程度。
2、骨髓象①。
急性再障:红髓脂肪变是AA的特征性病理改变,骨髓涂片可见脂肪滴明显增多。
多部位穿刺结果均显示有核细胞增生减低。
临床血液学检验考试重点总结

临床血液学检验1.骨髓造血:骨髓的造血细胞大部分来源于肝脏,部分来源于脾脏。
骨髓是产生红细胞,粒细胞和巨核细胞的主要场所,骨髓也产生淋巴细胞和单核细胞,因此骨髓不仅是造血器官,同时也是一个中枢淋巴器官。
2.髓外造血:正常情况下,胎儿出生2个月后,骨髓以外的组织如肝、脾、淋巴结等不再制造红细胞、粒和血小板,但是在某些病理情况下,这些组织又可从头恢复其造血功能,称为髓外造血。
3.血细胞的分化是指分裂后产生新的子细胞在生物学性状上产生了新的特点,即通过特定基因的表达合成了特定的蛋白质,与原来的细胞有了质的例外。
这种分化过程是不可逆的,是血细胞失去某些潜能同时又获得新功能的过程。
4.血象和骨髓象检验是诊断血液系统疾病、观察疗效及病情的严重手段之一。
5.粒细胞系统包括原始粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞、杆状粒细胞和分叶核粒细胞,粒细胞是由于胞质中常有许多颗粒而得名的。
颗粒从II型原始粒细胞开始出现,称为非特异性颗粒(又称为A颗粒、嗜天青颗粒、嗜苯胺蓝颗粒),从中幼粒细胞开始出现特异性颗粒(即S颗粒),S可以有三种:中性颗粒、嗜酸性颗粒及嗜碱性颗粒。
6.早幼粒细胞其胞体直径12~25um,较原始粒细胞大。
7.骨髓穿刺:最为理想的穿刺部位是髂骨上棘(包括髂骨前、髂骨后上棘)8.骨髓取材情况判断:(1)取材满意:a.抽吸骨髓液时,患者感到有瞬间的酸痛感(有的患者无这种感觉);b.抽出的骨髓液中有较多的黄色小粒(多为骨髓小粒,有的是脂肪);c.显微镜下涂片中可见较多骨髓特有细胞:稚童粒细胞、有核红细胞、巨核细胞、浆细胞、造骨细胞、破骨细胞、脂肪细胞、肥大细胞、组织细胞、吞噬细胞等;d.中性杆状核粒细胞/分叶核粒细胞比值大于外周血中性杆状核粒细胞/分叶核粒细胞比值,有核细胞数大于外周血有核细胞数。
(2)取材失败(即骨髓稀释):如抽吸骨髓液时混进血液,称为骨髓部分稀释;如抽出的骨髓液实际上就是血液,称为骨髓完全稀释。
临床医学检验技术血液学知识点

临床医学检验技术血液学知识点一、血液学概述血液学是临床医学中的重要学科之一,主要研究血液的形态学、生理学和病理学变化,以及与其相关的疾病的诊断和治疗。
血液学检验技术是血液学研究的重要工具,通过对血液样本的分析,可以获得有关血液成分、功能及病理变化的重要信息。
二、血细胞计数与分类血液中的主要细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
血细胞计数是血液学检验中最基本的项目之一,通过计算单位体积内血细胞的数量,可以判断血细胞的增减情况。
血细胞分类则是根据细胞的形态和功能特点,将白细胞分为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞等不同类型。
三、血常规检查血常规检查是血液学检验中最常用的项目之一,包括血红蛋白测定、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数等。
血红蛋白是红细胞中的重要组成部分,可以反映贫血程度;红细胞计数和血红蛋白浓度可以用于判断贫血类型;白细胞计数可以辅助诊断感染和炎症等疾病;血小板计数可以判断出血和凝血功能的异常。
四、血液凝固功能检查血液凝固功能检查主要包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)等项目。
这些项目可以评估血液凝固功能的正常与否,对于判断出血和凝血功能障碍疾病具有重要意义。
五、血型与免疫检测血型与免疫检测主要包括ABO血型、Rh血型、免疫球蛋白测定、自身抗体检测等项目。
ABO血型和Rh血型是判断输血安全和妊娠期间防止溶血反应的重要指标;免疫球蛋白测定可以评估机体的免疫功能;自身抗体检测可以辅助诊断自身免疫性疾病。
六、造血功能检查造血功能检查主要包括骨髓象、网织红细胞计数、血红蛋白电泳等项目。
骨髓象可以评估骨髓中造血细胞的形态和数量,对于骨髓异常和造血功能障碍疾病的诊断具有重要意义;网织红细胞计数可以反映骨髓中红细胞生成的活跃程度;血红蛋白电泳可以判断血红蛋白异常和地中海贫血等遗传性疾病。
七、血液肿瘤标志物检测血液肿瘤标志物检测主要针对血液肿瘤(如白血病、淋巴瘤等)的诊断和疗效评估,常见的标志物包括白细胞酯酶(WBC-esterase)、酸性磷酸酶(ACP)、髓过氧化物酶(MPO)等。
临床血液学检验重点汇总

(一)粒cell系统1. 原始粒cell(myeloblast):10~18μm,胞体圆或类圆形,核占cell的2/3以上,居中或略偏位,核染色质呈细颗粒状排列均匀,核仁2~5个、较小、清楚;胞浆量少,染天蓝色,有透明感,无颗粒。
2. 早幼粒cell(promyelocyte):12~20μm,较原粒cell大,核染色质较原粒cell粗糙,染色质颗粒开始有聚集,核仁可见或消失;胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色,含大小不等、形态不一的紫红色颗粒(即非特异性颗粒)。
3.中幼粒cell(myelocyte)①中性中幼粒(neutrophilic myelocyte):10~18μm,胞核椭圆形或一侧开始扁平,可有凹陷,其凹陷处约占cell的2/3~1/2,核染色质聚集呈索块状,核仁隐约可见或消失;胞浆量多,染淡红或少数区域略偏蓝,含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒(致少有一个区域)。
②嗜酸性中幼粒(eosinophilic):15~20μm:核与中性中幼粒相似;胞浆内充满粗大而均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。
③嗜碱性中幼粒(basphilic):10~15μm,核圆形或椭圆形、但常常轮廓不清,核染色质较模糊;胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。
4、晚幼粒cell(metamyelocyte)①中性晚幼粒(neutropilic metamyelocyte):10~16μm,核明显凹陷呈肾形,马蹄形,半月形,但其核凹陷程度不超过假设直径的一半,核染色质粗糙,排列更紧密,无核仁;胞浆量多,浅红色,充满中性特异性颗粒。
②嗜酸性晚幼粒(eosinophilic metamyelocyte):10~16μm,核形及结构与中性晚幼粒相似;胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。
③嗜碱性晚幼粒(basophilic metamyelocyte):10~14μm,核固缩呈肾形,轮廓模糊;胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。
血液学检验常考知识点

血液学检验常考知识点一、造血检验1、血液学主要研究血液和造血组织,包括细胞形态学、细胞生物学;血液流变学、细胞和体液免疫、血液遗传学、血液生化学。
2、临床血液学检验以血液学的理论为基础,检验学实验方法为手段,分析研究血液和造血器官的病理变化,阐述血液系统疾病的发生机制,协助诊断、疗效观察和预后监测的一门学科。
(一)造血器官与造血微环境1、胚胎期造血分为中胚层造血、肝脏造血和骨髓造血。
①中胚叶造血期:在人胚发育第2周末开始,到人胚第9周时止。
卵黄囊是最早的造血器官,卵黄囊壁上的血岛是人类最早的造血中心。
②肝脏造血期:始于胚胎第6周,3~6个月的胎肝是体内主要的造血场所。
③骨髓造血期:第14周时开始造血,胚胎第5个月时骨髓成为造血中心。
2、人出生后骨髓是在正常情况下是唯一能产生红细胞、粒细胞和血小板的场所,也产生淋巴细胞和单核细胞。
3、骨髓分为红骨髓和黄骨髓,成人的红骨髓和黄骨髓各约占50%。
脂肪化的骨髓称为黄骨髓,主要由脂肪细胞组成,黄骨髓仍然保持有造血的潜能。
正常情况下,骨髓造血的代偿能力较强。
成年后,红骨髓仅存在于扁骨、短骨及长管状骨的近心端。
红骨髓有丰富的血管系统,血窦是最突出的结构。
4、各类血细胞产生的顺序依次是:红细胞、粒细胞、巨核细胞、淋巴细胞和单核细胞。
5、生理情况下,出生2个月后,婴儿的肝、脾、淋巴结等已不再制造红细胞、粒细胞和血小板。
但在某些病理情况下,这些组织又可重新恢复其造血功能,称为髓外造血。
6、造血细胞赖以生长发育的内环境称为造血微环境,包括微血管系统、末梢神经、基质、基质细胞及基质细胞分泌的细胞因子等。
骨髓基质细胞包括成纤维细胞、内皮细胞、脂肪细胞和巨噬细胞等。
(二)造血干细胞及分化调控▲20世纪60年代初,Till和McCulloch用小鼠脾集落生成实验及体外培养方法证实了造血干细胞的存在。
证实了每一个脾集落是由一个造血干细胞分化而来。
1、造血干细胞是一类具有高度自我更新能力,并有多向分化能力的最早的造血细胞。
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血液标本全血:用于细胞计数、分类、形态观察;血浆:全血去除血细胞,用于血栓止血检测;血清:全血自然凝固后析出的液体,用于生物化学、免疫学检测等。
血液标本采集方法:一、毛细血管采血法:用于微量检测部位:耳垂或手指末梢,主要是中指或无名指尖内侧,半岁以下拇指或足部,特殊人员视情况而定所用器材:采血针、吸管,简要步骤:1、准备材料;2、选择采血部位;3、按摩皮肤;4、消毒皮肤;5、针刺皮肤;6、拭去第一滴血;7、吸血;8、止血;9、稀释血液。
二、静脉采血法:用于血沉、免疫、生化等检测项目部位:主要是肘静脉。
还可以在:手背部手腕部等部位采血,幼儿可采用颈外静脉采血。
采血器材:一次性注射器,检验用真空定量采血装置。
简要步骤:1、准备试管;2、标记试管;3、消毒双手;4、选择静脉;5、检查注射器;6、扎压脉带;7、选择进针部位;8、消毒皮肤;9、穿刺皮肤;10、抽血;11、止血;12、放血【质量控制】标本采集时应规范操作,以减少误差;毛细血管采血时应避开伤损部位,避免挤压皮肤,血液应自然流出;静脉采血时压脉带压迫时间不宜太长;动脉采血后应立即与空气隔绝,阻止血气交换;容器要洁净干燥,避免强力振荡引起溶血;血液标本采集后应立即送检;抗凝的标本其比例要准确,必要时需修正;尽量避免输液时采血,因可干扰测试结果抗凝:用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性,以阻止血液凝固,称为抗凝。
一、草酸盐,抗凝原理:与血液中钙离子形成沉淀;使用方法:草酸钠0.1mol/L和血液1:9。
优点:溶解性好,价廉。
缺点:①对凝血因子保护功能差,影响凝血因子;②形成草酸钙沉淀物,影响自动凝血仪器的使用。
使用范围:逐步被淘汰。
二、柠檬酸钠(枸橼酸钠),抗凝原理:与钙离子生成可溶性的鳌合物。
使用方法:配成109mmol/L的浓度和血液1:9(用于凝血试验);106mmol/L的浓度和血液1:4(用于血沉)。
优点:对凝血因子有很好的保护作用。
缺点:血液中溶解度低,抗凝作用较弱。
使用范围:止血学检验、血沉、输血保养液(毒性小)。
三、乙二胺四乙酸(EDTA)盐,抗凝原理:与钙离子生成可溶性的鳌合物。
使用方法:15g/L EDTA和血液1:10。
优点:对红细胞和白细胞形态影响小。
缺点:影响血小板的聚集。
使用范围:全血细胞分析和血细胞比容测定,但不适用于出凝血实验和血小板功能。
四、肝素,抗凝原理:加强抗凝血酶作用,阻止凝血酶形成。
使用方法:肝素钠1g/L与血液1:10。
优点:抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易溶血、能耐高温。
缺点:引起白细胞聚集,使白细胞计数降低,不利于制备血涂片,价格昂贵。
使用范围:血浆生化/免疫项目,红细胞脆性实验,科学研究等。
【保存】血液学检验标本,室温2d;分离以后的血浆20~30℃室温中储存<4h;4℃冰箱可储存1d,-80℃冰箱可储存30d;生化检验和免疫学检验的标本4℃冰箱可储存1周。
【处理原则】血液标本在不抗凝情况30~60min凝固后析出血清;血凝测定,应充分抗凝后尽早离心分离血浆,在2h内完成测定或4℃冰箱中保存;血液形态学检验的抗凝标本应放置在室温中,不宜冷冻,1~4h内无影响,但应及时制作血涂片。
亚铁血红素:血红蛋白色素部分,由铁原子及原卟啉区组成。
血涂片的制备1、用途:血细胞形态学检验、网织红、异常细胞检验、寄生虫检验。
2、制备步骤:(手工推片法)将推玻片向1的方向稍抽回,当血液充满推玻片的宽度后,以一定均匀的速度向2的方向滑动。
3、质量评价:均匀、厚薄、头体尾、边缘、两侧注意:血滴大,速度快、角度大----血膜厚瑞氏染色法【原理】:分两相进行,第一相是酸性伊红与细胞中的碱性物质如血红蛋白、嗜酸性颗粒结合;碱性染料天青B与细胞中的酸性物质如核染色质、特异中性颗粒、血小板结合。
第二相是天青B和伊红结合在适宜条件下形成紫色的天青B-伊红复合物,结果使白细胞核染色质成紫色(疟原虫的染色质成红色),中性粒细胞的颗粒及血小板颗粒区成紫色。
【试剂】1. Wright染液:瑞氏染粉0.1g,甲醇60.0ml甲醇:有强大的脱水力,可将细胞固定为一定形态,并使蛋白质沉淀为颗粒状、网状等结构,增加细胞与染料接触表面积,提高对染料的吸附作用,增强染色效果。
2.磷酸盐缓冲液(PBS):磷酸二氢钾(无水)0.3g,磷酸氢二钠(无水)0.2g, 蒸馏水加到1000ml。
配好后用磷酸盐溶液校正pH(6.4-6.8),塞紧瓶口备用。
【方法】:a. 用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上。
b. 加瑞氏染液覆盖血膜,固定1min。
c. 滴加等量或稍多的缓冲液,混匀,染色5-10分钟。
d. 用清水冲洗,待干后镜检。
红细胞计数(RBC):测定单位体积血液中红细胞的数量【计数方法】显微镜计数法:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数(一般200倍)后,滴入血细胞计数盘,然后于显微镜下,计数一定范围内的红细胞数,经过换算即可求得每升血液中的红细胞数。
【红细胞稀释液】:Hayem液、枸橼酸钠液、1%甲醛-生理盐水。
要求:等渗、防粘连、防腐。
Hayem稀释液:氯化钠(调节渗透浓度),硫酸钠(调节渗透浓度,防止红细胞聚集),氯化高汞(防腐剂,有毒)。
缺点:如遇高球蛋白血症或自身凝集素增高患者,红细胞易凝集或形成串钱状,影响计数。
【操作】:1、取小试管一支,准确加入红细胞稀释液2.0ml。
2、毛细血管采血,取血10ul,稀释200倍。
3、混匀,充池,静置2min后以低倍镜计数中间大方格的四角和中央5个中方格内的红细胞。
计算:红细胞数/L=5个中方格内红细胞×5 ×10 ×200 ×10^6/L【参考值】成年男性:(4. 0 ~5. 5) ×10^12/L,成年女性:(3. 5 ~ 5. 0) ×10^12/L;新生儿:(6. 0 ~7. 0) ×10^12/L低于3.5×10^12/L可诊断为贫血,低于1.5×10^12/L应考虑输血。
【临床意义】1、病理性增多相对性增多:血浆水分丢失,有形成分相对增加,绝对值没有发生变化绝对性增多:继发性(心、肺疾病、异常血红蛋白病、某些肿瘤等);原发性(真性红细胞增多症)2、病理性减少骨髓造血功能低下(再障);造血原料缺乏(缺铁贫、巨幼贫);红细胞破坏增加(溶贫);红细胞丢失过多网织红细胞(Ret)是未完全成熟的红细胞,是晚幼红细胞脱核后到完全成熟的红细胞之间的过渡型(未成熟)红细胞。
【分型】花冠型(0):骨髓中;丝球型(I):骨髓中:网型(II):骨髓中;破网型(III):外周血中可见;点粒型(IV):外周血中最多见【计数方法】显微镜计数法:(活体染色)染料1、煌焦油兰:常用,染色效果好,但沉渣较多。
2、新亚甲兰:WHO推荐,染色效果好,但试剂昂贵。
试验方法1、试管法:染色时间长(30min),效果好,易重复计数。
2、玻片法:染色时间短,水分易蒸发,结果偏低。
制薄片,不复染,油镜下计数1000个RBC中Ret数(缩小视野法或Miller窥盘)。
【参考值】成人:0.005~0.015或(24-84)×10^9/L;儿童:0.02~0.06【临床意义】1. 反映骨髓的造血功能Ret增高:骨髓生长旺盛,溶血性贫血时高达0.2以上;急性失血5~10d,Ret升高明显,2周后恢复;巨幼贫、缺铁贫时轻度升高;慢性失血时Ret持续增高。
Ret下降:造血机能减弱。
再生障碍性贫血:治疗后增高不明显,低于0.005。
如低于15ⅹ10^9/L可作为急性再障的诊断指标。
2. 疗效判断和治疗性试验的观察指标缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血病人在治疗前,Ret仅轻度升高(正常or轻度减少)。
给予相应药物,Ret的升高先于红细胞之前,在用药3~5d后Ret升高,7~10d达高峰,2周后,Ret 下降,Hb和RBC才开始升高。
3、放/化疗/骨髓移植后监测:观察骨髓恢复造血的情况网织红细胞生成指数(RPI)=(被测HCT * 被测Ret%)/(正常人HCT * Ret成熟天数)血红蛋白(Hb/HGB)是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质,是红细胞内的运输蛋白。
【检测原理】血液在血红蛋白转化液中溶血后,除SHb外各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白(Hi),Hi与氰化钾的氰根(CN-)生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白(HiCN),HiCN在540nm有吸收峰。
在特定的实验条件下,可测得吸光度并计算Hb(G/L)。
但在实际工作中,一般实验室的分光光度计达不到WHO规定的标准条件,所以利用Hb参考液制备标准曲线,换算出Hb(G/L)。
【参考值】成年男性:120-160 g/L,成年女性:110-150 g/L;新生儿:170-200 g/L70岁以上老年男性:94.2-122.2 g/L;70岁以上老年女性:86.5-111.8 g/L【相关】:贫血(anaemia):单位容积循环血液中红细胞、血红蛋白、血细胞比积低于参考值下限,称为贫血。
临床上通常以血红蛋白为标准:轻度贫血:男性<120g/L,女性<110g/L,>90g/L ;中度贫血:90~60 g/L;重度贫血:60~30 g/L;极度贫血:<30 g/L;低于45g/L应考虑输血。
红细胞比积(HCT/PCV):指红细胞在全血中所占体积百分比。
【参考值】(温氏法)①成年:男性0.40~0. 50,女性0.37~0. 48;②新生儿0.47~0.67;③儿童:0.33~0.42。
【临床意义】增高:1. 血液浓缩;2. 红细胞增多症;3. 新生儿。
降低:1. 贫血;2. 其他原因的稀血症应用:1. 疗效观察;2. 计算红细胞指数血小板计数(PLT)【参考值】(100~300)×10^9/L降至(20~50)×10^9/L时可有轻度出血或手术后出血;低于20×10^9/L,可有较严重的出血;低于5×10^9/L可导致严重出血。
【临床意义】1、病理性血小板减少:①血小板生成障碍(急性白血病、再障骨髓肿瘤、放射性损伤、巨幼贫);②血小板破坏增加(脾亢进、系统性红斑狼疮、特发血小板减少性紫癜);③血小板消耗增多(DIC,血栓性血小板减少性紫癜);④血小板分布异常(脾大,血液稀释);⑤先天性。
2、病理性血小板增多:①骨髓增生性疾病;②急性大出血、急性溶血;③外科手术/脾切除后;④感染及炎症性疾病;⑤肿瘤;⑥其他。
红细胞平均容积(MCV):指每个红细胞平均体积的大小,以飞升(fl)为单位。
红细胞平均血红蛋白含量(MCH):指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量,以皮克(pg)为单位。