基因诊断与基因治疗
遗传性疾病的基因诊断与治疗研究
遗传性疾病的基因诊断与治疗研究遗传性疾病是指由基因突变所引起的疾病，主要是由基因缺失、突变或重复引起的，现在随着技术和研究的进步，基因诊断和治疗已经成为了遗传性疾病研究的重点。
一、基因诊断的进展1.基因检测的种类基因检测的分类有细胞水平和分子水平，分别对应细胞和基因分子的检测。
细胞水平的检测包括染色体核型、单基因疾病诊断及纯合子和杂合子检测等，分子水平检测包括DNA测序、染色体微阵列等。
2.基因诊断的优势基因诊断的优势在于可以靶向性地进行检测，并且可以尽早发现突变，即便没有出现症状，也能进行检测并提前排除遗传性疾病的影响。
而且还可以对基因突变的风险进行准确定量化，为患者提供更为科学、合理的治疗方案。
3.基因诊断的困难虽然基因诊断的优势很多，但是基因诊断仍存在一些困难。
对于某些难以进行检测的复杂遗传性疾病，目前的诊断方法仍然比较局限。
二、基因治疗的发展1.基因治疗的种类基因治疗的分类有基因打靶、基因敲除和基因增强等。
基因打靶是指通过添加或删减一些基因来控制生物的生长和分化，基因敲除是指采用RNAi技术来切断有害基因和致病基因，而基因增强则是指将可缩短寿命、恶化病情或加剧某一疾病的基因修饰，增强其治疗效果。
2.基因治疗的优势在许多疾病中，基因治疗的优势很明显。
由于基因治疗具有针对性、可逆性和可重复性等特点，这意味着它可以具有更高的安全性和可控性，并且可以在体内对有关疾病的基因进行修复和调整。
现已有大量针对乳腺癌、白血病、唐氏综合症等疾病的基因治疗研究，在未来也将进一步研究和发展。
3.基因治疗的成本由于是新技术，目前基因治疗的花费仍然相当高，在许多国家和地区，它仍然是很少数的富人阶层可及的疗法。
而且对于一些常见的遗传性疾病，基因治疗的效应并不太好，通过对这方面的深入研究，相信在不久的将来基因治疗可以成为救助更多患者的有效手段。
三、结语总的来说，基因诊断和治疗的进展为我们如何预防和治疗遗传性疾病提供了更为科学的依据。
基因诊断与基因治疗
应用
基因治疗可用于癌症、遗传性疾病、造血系统疾病、 免疫缺陷疾病等领域的治疗。目前已有部分基因治 疗药物获得上市许可。
技术方法
常见的基因治疗技术方法包括载体介导基因转移、
挑战与前景
基因治疗涉及到许多复杂的技术问题，同时也存在
基因诊断的案例：新冠病毒检测
检测原理
通过PCR技术检测新冠病毒核酸序列。
技术难点
技术方法
包括PCR、Sanger测序、 二代测序、CRISPRCas9等多种技术方法。
挑战与风险
基因诊断可能涉及个 人隐私、知情权等方 面的伦理道德问题， 同时也存在技术标准、 质量控制等方面的挑 战。
什么是基因治疗？
定义
基因治疗是一种将基因或基因产物直接或间接地传 递至患者体内，以期治疗疾病的治疗方法。
基因诊断与基因治疗
在这个快速发展的科技时代，基因诊断和基因治疗成为了医学领域的热点。 本次分享将带您了解基因诊断和基因治疗的定义、应用和挑战，并引领您领 略这项前沿技术的风采。
什么是基因诊断？
定义
基因诊断是通过分析 个体基因或表观基因 组特征，辅助医疗诊 断、疾病预测等医疗 决策过程的手段。
应用
基因诊断可用于肿瘤、 遗传性疾病、染色体 疾病、感染病等疾病 的诊断、预后评估、 治疗反应的监测等领 域。
3
2018年
中国医学科学院医学遗传研究所成功利用CRISPR/Cas9技术将同父异母的HIV患者 的C-C motif chemokine receptor 5（CCR5）基因进行了敲除，推动了基因治疗这一 领域的研究进展。
基因诊断和基因治疗的未来
Hale Waihona Puke 未来发展趋势 精度和效率的提高 技术标准的规范化 伦理道德问题的解决
基因技术在医学上的应用
基因技术在医学上的应用近年来，基因技术在医学领域得到了广泛的应用，如基因诊断、基因治疗、基因改造等。
随着科学技术的不断发展，基因技术在医学上的应用将越来越广泛，为人类健康事业作出更大的贡献。
一、基因诊断基因诊断是通过对患者的DNA进行检测和分析，诊断出患者是否存在某种基因缺陷或突变。
目前，基因诊断已经广泛应用于许多疾病的诊断，如乳腺癌、肺癌、糖尿病等。
通过基因诊断，可以准确地确定疾病的种类、病因和治疗方法，从而提高治疗的有效性和预后。
二、基因治疗基因治疗是利用基因技术来治疗患者的疾病。
目前，基因治疗已经在肿瘤、糖尿病、心血管疾病等方面取得了较好的疗效。
其中最为典型的案例是利用基因治疗来治疗免疫缺陷病毒(艾滋病)。
该疗法通过改变患者的基因，使得患者能够抵抗病毒，从而达到治疗的效果。
三、基因改造基因改造是利用基因技术来修改植物、动物和微生物的基因，使其具有更好的性状或功能。
通过基因改造，可以改良农作物的品质和产量，克服一些遗传性疾病，以及开发一些新型药物和医疗设备。
目前，许多国家都在推动基因改造技术的研究和应用，以满足人类对健康的不断需求。
四、基因测序基因测序是通过对人类基因组的分析，了解和解码人类基因组中的所有基因信息。
它可以帮助我们了解人类基因组的结构和功能，从而有助于预防和治疗遗传性疾病。
近年来，“千人基因组计划”、“全球人类基因组计划”等大型集体研究项目已经启动，为基因科学和医学运用做出了重要的贡献。
总之，基因技术在医学上的应用已经取得了明显的进展，为人类健康事业作出了贡献。
它的应用将越来越广泛，为人类健康事业开辟更加广阔的发展前景。
但同时，我们也应该充分认识到基因技术的局限性和风险，正确引导和规范其应用，以充分发挥其作用，为人类健康和发展事业做出更大的贡献。
基因诊断与基因治疗教案
第1节基因诊断和基因治疗【学习目标】1.概述植物栽培和家畜饲养中的繁殖控制技术及其意义。
2.认同生物科学技术的发展和应用推动了农业现代化。
3.形成关心农业发展、热爱农业的情感。
【学习过程】一、探究杂种优势的应用1.定义：杂种优势是指具有一定遗传差异的两个个体进行杂交后，所生产的后代在生活力、生长发育速度、抗逆性以及形态大小等方面明显优于杂交双亲的现象。
2.流程：二、植物微型繁殖1.概念：植物微型繁殖技术是植物组织培养技术的一种，是利用离体的芽、茎等器官在无菌和特定光温条件下，在人工培养基上进行快速无性繁殖的技术。
三、动物人工授精四、 试管家畜解冻与受五、胚胎分割技术1.定义：胚胎分割技术是采用机械方法，即用特制的显微刀片或玻璃微针将早期的胚胎分割成2份、4份或更多份，经体内或体外培养，然后植入代孕母体内，从而获得同卵双生或多生后代。
六、克隆哺乳动物技术定义：哺乳动物的克隆技术，是指利用某哺乳动物的体细胞核，产生一个与该动物几乎完全相同的新个体。
【典题解悟】在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为( )A、细胞丧失了全能性B、基因的表达有选择性C、不同的细胞内基因不完全相同D、在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变[解析]细胞分化的原因是基因的选择性表达的结果,细胞分化的程度越高，细胞的全能性越难表达。
同一个生物个体中，不同细胞的细胞核内的遗传物质是相同的。
【答案】B【当堂检测】1.在农业生产中，常用杂交的方法获得所需的品系。
下列做法正确的是：（）A．杂交后的个体基因发生了突变B．杂交技术不会改变原有的遗传物质，但获得的个体形状是不能遗传的C．杂交个体的生活力、生长速度、抗逆性以及形态大小等方面明显优于杂交双亲的现象D．杂交后的个体，具有了很强的变异性，自交后代不会发生性状分离2.克隆技术的原理是：A．细胞的全能性。
B．细胞的相似性。
C．动物细胞的易繁殖、分化速度快。
基因疾病的诊断和治疗方法
基因疾病的诊断和治疗方法基因疾病，指由于遗传物质基因的缺陷或突变导致的疾病。
随着科技的不断发展，对于基因疾病的诊断和治疗方法也得到了极大的进展。
本文将介绍基因疾病的诊断和治疗方法。
一、基因疾病的诊断方法1. 基因测序技术基因测序技术是目前最常用的基因疾病诊断方法之一。
通过对患者的基因进行测序，可以准确地检测出基因序列中的缺陷或突变。
目前，常用的基因测序技术有Sanger测序、二代测序（如Illumina测序技术）和第三代测序（如PacBio测序技术）。
基因测序技术的发展使得基因疾病的诊断更加精准和迅速。
2. 基因芯片技术基因芯片技术是另一种常用的基因疾病诊断方法。
基因芯片可以同时检测数千个基因的表达水平或突变情况，从而快速获得大量的基因信息。
基因芯片技术广泛应用于癌症等基因疾病的早期筛查和分型诊断。
3. 荧光原位杂交技术（FISH）荧光原位杂交技术是一种基因疾病诊断的常用方法。
该技术通过使用特定的DNA探针与患者的基因进行杂交，可以检测出基因的缺失、复制或移位等异常情况。
FISH技术在染色体异常疾病的诊断中具有较高的准确性和灵敏性。
二、基因疾病的治疗方法1. 基因治疗基因治疗是一种新兴的治疗方法，旨在通过修复或替换患者体内出现缺陷或突变的基因，从而达到治疗基因疾病的目的。
常见的基因治疗方法包括基因替代治疗、基因编辑和基因靶向治疗等。
基因治疗的突破为基因疾病的治疗带来了新的希望。
2. 药物治疗对于一些基因疾病，药物治疗是目前常用的治疗方法。
根据疾病的发生机制和基因缺陷的具体情况，可以设计和选择针对特定基因疾病的药物。
例如，针对某些突变基因所导致的蛋白质功能异常的疾病，可以开发针对该蛋白质的特效药物。
3. 基因康复治疗基因康复治疗是针对基因疾病患者进行干细胞或基因修复后再植入患者体内的治疗方法。
通过干细胞的定向分化或基因修复的技术，可以让患者体内的缺陷基因得到修复或替换，并恢复正常功能。
基因康复治疗为一些无法通过传统治疗手段治愈的基因疾病患者提供了新的治疗选择。
生物化学及分子生物学(人卫第九版)-26基因诊断与基因治疗
基因诊断与基因治疗
作者 : 李存保 单位 : 内蒙古医科大学
目录
第一节 基因诊断
第二节 基因治疗
重点难点
掌握
基因诊断与基因治疗的概念
熟悉
基因诊断技术、基因治疗的基本策略和基本程序
了解
基因诊断和基因治疗在医学中的应用
第1节
基因诊断
一、基因诊断的概念与特点
（1） 基因诊断的概念：
是指利用分子生物学技术和方法直接检测基因结构及其表达水平是否正常，从而 对疾病作出诊断的方法。
（2）直接体内疗法
临床上可用于基因诊断的样品有血液、组织块、羊水和绒毛、精液、毛发、唾液 和尿液等。
三、基因诊断的基本技术
（一）核酸分子杂交技术
1. Southern 印迹法 其可以区分正常和突变样品的基因型，并可获得基因缺失或插入片段大小等信息。 DNA印迹一般可以显示50 bp～20 kbp的DNA片段，片段大小的信息是该技术诊断基因缺 陷的重要依据。 2. Northern 印迹法 Northern印迹法（Northern blot）能够对组织或细胞的总RNA或mRNA进行定性 或定量分析，及基因表达分析。Northern印迹杂交对样品RNA纯度要求非常高，限制了 该技术在临床诊断中的应用。
是以改变人遗传物质为基础的生物医学治疗，即通过一定方式将人 正常基因或有治疗作用的DNA片段导入人体靶细胞以矫正或置换致病基因 的治疗方法。它针对的是疾病的根源，即异常的基因本身。
一、基因治疗的基本策略
（一）缺陷基因精确的原位修复
1.基因矫正 gene correction 致病基因的突变碱基进行纠正 2.基因置换 gene replacement 用正常基因通过重组原位替换致病基因 这两种方法属于对缺陷基因精确的原位修复，既不破坏整个基因组的结构，又可达到治 疗疾病的目的，是最为理想的治疗方法。
遗传性疾病的基因诊断与治疗
遗传性疾病的基因诊断与治疗遗传性疾病是由遗传变异和突变引起的疾病。
遗传性疾病具有遗传性和家族性等明显特征，其严重程度和预后往往与基因变异的性质和各种环境因素密切相关。
目前，随着技术的进步，遗传性疾病的基因诊断和治疗取得了重要的进展。
一、基因诊断基因诊断是通过分析患者的基因组DNA序列，确定引起疾病的基因序列变异，诊断遗传性疾病的方法。
现代基因诊断技术包括单基因遗传病的Sanger测序、高通量测序和SNP芯片检测等，这些技术都具有高速、高精度和高通量的特点。
在基因诊断中，还需要对不同种类的基因变异进行分析和分类。
这包括突变、多态性、缺失、插入、删除等多种变异类型。
与传统的基因诊断方法相比，现代基因诊断技术已经实现了高度的自动化和高通量的检测，具有更高的准确性和可靠性。
这种技术的应用使得遗传性疾病的诊断变得更加准确，同时也为疾病的治疗提供了更加精确的基础。
二、基因治疗随着基因疗法的发展，对于某些遗传性疾病，基因治疗已成为一种治疗方案。
基因疗法是一种介入人类基因表达和功能的治疗方法，通过改变基因表达和功能，调节细胞、组织和器官的生理和代谢状态，从而达到治疗疾病的目的。
基因治疗的实现需要通过基因转移技术将基因表达载体（如质粒、病毒）送往目标细胞，并在有效的浓度下表达基因。
基因治疗可分为替代性基因治疗、抑制性基因治疗、基因修饰治疗等多种类型。
目前，已有一些基因疗法被应用于一些遗传性疾病的治疗中，如乙酰胆碱酯酶缺乏症、家族性高胆固醇血症等。
基因治疗的方法还远不止于此，有很多新的治疗策略和方法在开发，如CRISPR-Cas9基因编辑技术，这种技术能够针对人类基因进行精确的编辑，有望为治疗遗传性疾病带来突破性变革。
三、基因诊断与基因治疗在生殖健康中的应用在生殖健康领域中，基因诊断和基因治疗在多个方面都有应用。
例如，包括人类遗传性疾病的筛查、胚胎筛查、计划生育、辅助生殖技术、基因诊断咨询等多个方面。
通过进行遗传咨询和基因检测，可以尽早诊断和预测诱发遗传疾病的危险因素，及时了解遗传疾病的状态，制定和实施有效的疾病预防措施以及生殖规划。
第十八章基因诊断与基因治疗
(gene diagnosis and therapy)
本章主要内容
基因诊断 基因治疗
2
第一节
基 因 诊 断
一.
基因诊断概念
利用分子生物学方法，直接检测基因结 构及其表达水平是否异常，从而对疾病作出 诊断,为治疗提供依据。
3
二.
基因诊断特点：
针对性强，特异性高 检测灵敏度和精确性高 实用性强，诊断范围广
优点：
缺点：
简便、快速、灵敏、样本用量少；
特异性不高，有一定比例的假阳性。
用途：
检测样本中存在的微量DNA或RNA
14
（4）菌落杂交
该法可从大量细菌中筛选含特异的DNA序列及基因工程重组体。
15
（5）夹心杂交法
RE
A A A
片断A 检测探针
RE
B B
片段B捕捉探针
B
固 相 支 持 物
本法优点：
16 特异性强，对样本纯度要求不高，定量较准确。
模板DNA 扩增倍数T=2n (n:
循环次数)。
21
2.
PCR各要素及其作用
PCR模板可以是DNA或RNA。 以线性DNA模板为佳，量适中，一般为102105个拷贝； RNA作为模板时，需要：
（1） 模板
RNA 逆转录 cDNA
PCR, 称此为RT-PCR.
（2）耐热DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶) 是从耐热细菌体内提取的一种 DNA聚合酶，可在95℃稳定 30分钟。从而保证PCR在[94℃变性→ 52℃退火→72℃延伸]
4
三.
基因诊断常用技术方法
核酸分子杂交技术
聚合酶链反应（PCR）技术
基因诊断与基因治疗
突变型探针．在基因诊断时，只需用PCR扩增受检者目 的DNA片段，再分别与上述探针杂交．
PCR-ASO
ASO1 ASO2
N
H M
N：正常基因；H：杂合子基因；M：突变基因
（三）单链构象多态性分析
（single-strand conformation polymorphism, SSCP）
repeats, STRs ,mini- satellites ) 1990s 单核苷酸多态性 (single-
nucleotide polymor-phisms SNPs)
RFLPs
• 由于DNA 变异产生新的酶切位点或原有的 酶切位点消失，在用限制性核酸内切酶消 化时产生不同长度或不同数量的片段。
（一）核酸分子杂交
（二） PCR在基因诊断中的应用
• RT-PCR • 荧光定量PCR • 多重-PCR • PCR-ASO • AS-PCR • PCR-SSCP • PCR-RFLP
PCR-ASO
Allele specific oligonucleotide, ASO 等位基因特异性寡核苷酸分子杂交
• 主要用于一些基因较大且突变类型不清楚 的单击因遗传病的诊断。
PCR-RFLP
镰状红细胞贫血的间接基因诊断
——β-珠蛋白RFLP标记的连锁分析
NH
7.6kb
正 常 HapⅠ
13kb
患 者 HapⅠ
HapⅠ
HapⅠ
P 13kb 7.6kb
Southern印迹杂交
N：正常；H：杂合子；P：患者（纯合子）；黄色区域为探针
• 以SNP单倍型（多位点SNP 分析）为遗传标志，结合
基因诊断与基因治疗习题及答案
第十八章基因诊断与基因治疗一、填空题1. 基因突变可导致____的改变，从而引起____。
2. 基因变异包括____和____。
3. 内源性基因变异包括____、____、____和____等。
4. 外源性基因变异是指____疾病。
5. 基因诊断常用技术方法有____、____、____和____。
6. 核酸分子杂交技术是依据____、____和____原理设计的技术方法。
7. 常用固相核酸杂交方法有____、____、____、____、____和____等。
8. PCR是____的缩写，译为____。
9. PCR过程由____、____和____步骤组成。
10. 生物芯片技术包括____、____、____、____、____和____。
11. 基因测序是将有关基因进行____，测出____，从中找出____所在。
12. 基因治疗在概念上分为____和____。
目前普遍接受的是____。
13. 基因治疗的总体策略主要有____、____、____、____、____、____和____等。
14. 基因治疗的基本程序包括____、____、____、和____。
15. 获得治疗性基因的方法包括____、____、____、和____。
16. 常被用于基因治疗的基因转移载体有____、____和____。
17. 基因治疗中的靶细胞也称为____细胞，靶细胞有____和____两大类。
18. 基因转移方法概括地讲有____、____和____等。
二、名词解释19. 基因诊断20. 基因治疗21. 核酸分子杂交22. Southern blotting23. 生物芯片24. 免疫基因治疗25. 基因矫正26. 基因置换27. 基因增补28. 基因失活29. 自杀基因30. 夹心杂交31. 引物32. Northern blotting33. PCR三、问答题34. 简述基因诊断的特点。
35. 简述分子杂交程序。
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基因变异的多样性
遗传疾病的致病基因和易患基因都是相 应的正常基因突变产生的。 染色体的结构与数目，如由于21号染色 体增多导致的先天愚型。 基因缺失，如α地中海贫血。
基因片段的插入与缺失 基因点突变：同义突变，错义突变，无 义突变，移码突变，终止密码突变和非 编码区的突变等等。
扩增 2.扩增片段的酶切 3.酶切产物的电泳
4.多态性（突变）的确定
扩增血红蛋白特定基因片段
1.利用特异性的引物扩增编码血红蛋白β链 含有GAA→ GTA突变部位的DNA片段。 2.扩增既含有特定的突变部位又能存在具有 鉴别性内切酶的DNA片段是开展PCRRFLP的关键。 3.当含有突变的部位目前尚不能发现有可用 的限制性内切酶时，可以考虑引入错配碱 基的方法导入内切酶识别序列。
2 基因诊断的重要性
1.除外伤性疾病外，所有的疾病都 是遗传因素和环境因素相互作用 的结果。 2.随着营养性疾病和传染性疾病的 减少和控制，遗传性疾病的防治 日显重要。 3.正确诊断是实施有效治疗的基础 和保证。
3 基因诊断技术的多样性
1.基因变异的多样性 2.基因诊断技术的多样性 3.聚合酶链反应（PCR） 4.PCR-RFLP 5.PCR-SSCP 6.DNA测序
LPL的一般简介
1. LPL(EC 3.1.1.34）由448个氨基酸残基 组成，活性形式为非共价键相连的同二聚体。 2. LPL基因定位于8P 22上，全长30kbp，包 括十个外显子和九个内含子。 3. LPL 活性中心由Ser132- Asp156 -His241 组成，Apo-CⅡ为其激活因子。 4. LPL的功能是水解脂蛋白中甘油三酯为甘油 和脂肪酸，结构缺陷可致异常脂蛋白血症。
分子病--脂蛋白脂肪酶变异
1.脂蛋白脂肪酶是水解富含甘油三酯 脂蛋白中的甘油三酯为甘油和脂肪 酸的关键酶，该酶结构和功能的缺 陷可致患者血浆甘油三酯水平极度 升高 2.成熟的脂蛋白脂肪酶由448个氨基酸 残基组成，本病患者经分子生物学 检测确定为脂蛋白脂肪酶读码框架 误义突变所致
3. 镰刀状红细胞性贫血症
HbA
↓ ----CCTTAGG-------GGAATCC---↑
GAA, GAG
(Glu)
HbS
----CCATAGG-------GGTATCC---GUA,GUG (Val)
扩增片段的酶切(B)
HbA
-----CCTTAGG---------∥---------------------CCTTAGG------CCTTAGG-----GGAATCC---------∥---------------------GGAATCC------GGAATCC-------∣---------∥-------1.15kbp-------------------∣-----0.2kbp-----∣
1.家族性高胆固醇血症
1. 低密度脂蛋白 (LDL)的代谢 2. 低密度脂蛋白受体 (LDL-R)的结构与 功能 3. LDL-R缺陷与动 脉粥样硬化和冠心 病
2.脂蛋白脂肪酶缺陷病
正常血浆清澈透明， 甘油三酯（TG）水 平低于1.7mmol/L （150 mg/dl） 本病例血浆明显混浊 静置后可出现“奶油 盖”，高达36mmol/ L（3200mg/dl）
基因诊断与基因治疗
一. 基因与疾病
第一节 基因与疾病
1.基因与疾病的关系：除外伤性疾病外， 所有的疾病都是遗传因素和环境因素相 互作用的结果。 2.单基因疾病（如苯丙酮尿症和镰刀状 红细胞性贫血等）基因变异是疾病发生 的唯一原因。 3.多基因疾病（如糖尿病和冠心病等） 基因变异可能是发病的重要原因； 4.其他许多疾病(如心理障碍和智力低下 等)也和基因变异密切相关。
1.基于核酸杂交的基因探针，等位基因特 异性寡核苷酸探针（Allele specefic oligonucleotide, ASO)，基因芯片等。 2.基于核酸杂交与电泳的技术，如 Southern blot 和Northern blot等等。 3.基于PCR和电泳技术的PCR-RFLP和 PCR-SSCP等。 4.基于电泳和免疫技术的免疫印迹 （Western blot)
5.常用技术-- 电泳
1.电泳的概念 2.电泳迁移率 3.电泳应用的广泛性 4.电泳迁移率与DNA
电泳迁移率与DNA
1.在一般的聚丙烯凝胶电泳中，双链 的电泳迁移率与其链长呈反相关， 据此建立了PCR-RFLP技术。 2.在一般的聚丙烯凝胶电泳中，单链 的电泳迁移率不仅与其链长有关， 更与其构象有关，而构象则与其一 级结构有关，据此建立了PCRSSCP技术。
抑癌基因的概念
抑癌基因的发现源于细胞杂交实验。当 肿瘤细胞与正常细胞融合为一个杂交细 胞时，多数并不具有肿瘤型；即使两种 不同肿瘤细胞融合成的杂交细胞也不一 定具有肿瘤型，只有当一些亲代细胞失 去某些基因后才有可能形成肿瘤的子代 细胞。这种由于基因丢失或失活能够形 成肿瘤的基因成为抑癌基因（tumor suppressor gene,recessive oncogene)。
1. 癌基因的基本特征：广泛存在，具有 高度保守性，有重要的生物学功能。 2. 凡能编码生长因子，生长因子受体， 细胞生长信息传递分子以及与生长有 关的调节因子的基因均应归属于癌基 因的范畴。 3. 癌基因是机体的正常基因，只是由于 历史的原因，才沿用“癌基因”。 4. 癌是基因组疾病。
4.3 基因与传染性疾病
4.常用技术--PCR
1.聚合酶链反应（PCR）是基于细胞内 DNA复制原理而发展建立的细胞外大 量复制DNA片段的分子生物学技术。 2.聚合酶链反应（PCR）是基因诊断的 基本技术，该技术的建立和 发展为利 用相当微量的DNA样品开展基因诊断 成为可能。 3.聚合酶链反应（PCR）是开展PCRRFLP和PCR-SSCP的基础。
6. PCR-RFLP 1.聚合酶链反应-限制酶切片 段长度多态性简称PCRRFLP 2.PCR-RFLP (Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism)
限制性核酸内切酶
1.定义 2.分类 3.命名 4.酶切位点 5.酶切末端
1典型的单基因遗传性疾病
1.家族性高胆固醇血症(FHC) 2.脂蛋白脂肪酶缺陷病(LPLD) 3.镰刀状红细胞性贫血(HbS) 4.腺苷脱氨酶缺陷(ADA) 5.其它如苯丙酮尿症(PKU)等
分子病(molecular diseases)
分子病通常是指源于蛋白质
一级结构改变而产生蛋白质 功能异常所致的遗传性疾病。 究其根本的发病原因主要是 编码蛋白质基因的读码框架 改变。
严重混合型免疫缺陷综合症的诊断 1.生后反复发作的感染。 2.血检淋巴细胞减少 免疫球蛋白减 低。 3.实验室红细胞检查，腺苷脱氨酶 活性明显降低,dATP水平极度升高 （50倍以上） 4.预后严重不良，死亡率极高
严重混合型免疫缺陷综合症的治疗
1. 抗生素治疗 2. 注射免疫球蛋白 3. 静脉注射牛腺苷脱氨酶-聚乙 二醇(bADA-PEG)藕联物 4. 骨髓移植 5. 基因治疗
4 腺苷脱氨酶缺乏症
1.腺嘌啉核苷酸的分 解代谢 2.腺苷脱氨酶的功能 3.腺苷脱氨酶缺乏的 影响 4.常染色体隐性遗传 5.人类第一个成功基 因治疗的疾病
重度联合免疫缺陷综合征
患有重度联合免疫缺陷综合征（severe combined immunodeficiency, SCID）的患者由 于体内先天性缺少腺苷脱氨酶（Adenosine Deaminase, ADA），致使细胞内脱氧腺苷大量 积累，导致T淋巴细胞中毒死亡。由于缺乏正常 人的免疫系统，患者非常容易受到细菌和病毒 的感染。患有这种遗传疾病的小孩通 常最后都 会因感染而死亡，很难活到成年，即使一场常 见的水痘，对于患者来说都是致命的打击，他 （她）们只能一直过着一种“与世隔绝”的生 活——避免外 出，静静地呆在家里的无菌环境 中，无休止地使用大量抗生素来与细菌和病毒 作斗争。
多肽生长因子 生长因子受体 蛋白激酶 受体后信息传递分子 转录调控因子 其他
原癌基因的激活
点突变 (point mutation) 启动子插入 (promoter insertion) 增强子插入(enhancer insertion ) 染色体移位 (translocation)或重 排(rearrangement) 5. 基因扩增 (gene amplification) 1. 2. 3. 4.
常见的抑癌基因
目前研究比较深入的抑癌基因有视网膜母细胞 肿瘤基因(Retinoblastoma, Rb )和野生性P53. Rb定位于13q 14,由其转录的mRNA 长度为 4.7kb,由27外显子组成,编码蛋白质P105,与转录 因子E-2F的功能有关. P53定位于17P13,由其转录的mRNA 长度为 2.8kb,由11外显子组成,编码蛋白质P53,是核内 一种磷酸化蛋白
癌基因与抑癌基因
癌基因与抑癌基因均是细胞的正常基因, 他们编码的蛋白质分别正向和负向调控 细胞的生长、增殖和分化。 癌基因和抑癌基因共同作用，相互拮抗， 维持平衡，保证细胞生长增殖精确调控。 癌基因的结构变异或表达失控以及抑癌 基因的丢失或失活均可导致细胞生长增 殖失控发展形成肿瘤。
癌基因的本质
MstⅡ酶切识别位点: ↓ ----CCTNAGG-------GGANTCC---↑ (Glu) ----GGAATCC--↑ (Val) ----GGTATCC--†
GAA , GAG
GUA , GUG
扩增片段的酶切(A)
MstⅡ酶切识别位点:
↓ ----CCTNAGG-------GGANTCC---↑
4.2 基因与肿瘤
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 癌基因的概念 原癌基因的概念 癌基因的功能 原癌基因的激活 抑癌基因的概念 常见的抑癌基因 癌基因与抑癌基因 癌基因的本质