2015版中国药典 丹参中丹酚酸B的测定
HPLC法测定药典方丹参片中丹参酮ⅡA及丹酚酸B的含量
ＨＰＬＣ法测定药典方丹参片中丹参酮ⅡＡ及丹酚酸Ｂ的含量作者：柳涛来源：《中国医药导报》2008年第23期[摘要] 目的：完善药典方丹参片的质量标准，测定制剂中丹参酮ⅡA及丹酚酸B的含量，考察制备工艺中有效成分的转移率。
方法：采用HPLC法进行含量测定。
丹参酮ⅡA，以甲醇-水（80∶20）为流动相，检测波长为270 nm；丹酚酸B以甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)，检测波长为286 nm。
结果：3批丹参片平均含丹参酮ⅡA 2.83 mg/g，转移率为42.3%；丹酚酸B含量为 51.8 mg/g，转移率为50.9%。
结论：建立了丹参片中丹参酮ⅡA 的含量测定方法，可以更好地控制丹参片的质量。
[关键词] 丹参片；丹参酮ⅡA；丹酚酸B；HPLC[中图分类号]R917 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）08（b）-030-03Quantitative determination of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in pharmacopoeial prescription Danshen Tablets by HPLCLIU Tao(Center for Certification and Evaluation, Shanghai Food and Drug Administration, Shanghai 200020, China)[Abstract] Objective: To determine tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in Danshen Tablets quantitatively. Methods: HPLC with Hypersil ODS column was used in the content determination. For tanshinoneⅡA , the mobile phase was composed of methanol-water (80∶20) and the detective wavelength was at 270 nm. For salvianolic acid B, the mobile phase was composed of methanol-acetonitrile-formic acid-water (30∶10∶1∶59) and the detective wavelength was at 286 nm. Results: The average contents of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in three batch of tablets were 2.83 mg/g and 51.8 mg/g respectively. The extraction rate of the preparation processes were 42.3% and 50.9% respectively. Conclusion: The method is available with a good reproducibility and can control the quality of Danshen Tablets effectively.[Key words] Danshen Tablets；TanshinoneⅡA；Salvianolic acid B；HPLC丹参片为《中国药典》2005版一部收载的成方制剂，是单味丹参提取制得的片剂，功能活血化瘀，主要用于冠心病心绞痛等疾病[1]。
丹参药材提取液中丹酚酸B稳定性影响因素的考察
第 ３ 卷 第 ｌ 期 ０ ０
２０ 年 ５ ０５ 月
中 国 中 药 杂 志
Ｃ ｉａＪ ｕ ｎ ｌ ｆ ｈｎ ｓ ａｅｉ ｅ ｉａ ｈｎ ｏ ｒ ａ ｉｅｅＭ ｔｒ Ｍ ｄｃ ｏ Ｃ ａ
Ｖ １３ Ｉ ｕ ｌ ｏ． ０， ｓ ｅ ｓ ０
酚酸 Ｃ迷 迭香 酸 、 参 素、 、 丹 原儿 茶醛 等 。药 理研 究 表明丹参 酚酸类 具有 抗凝 、 氧化 的活性 ｊ其 中 抗 ０，
丹酚酸 Ｂ是含量最高的活性成分， 有文献提示丹酚
酸 Ｂ的稳 定性较 差 ， 制剂 工艺过 程 中稳 定性 影 响 其
因素有待探讨 ［。本 实验对丹参提取液施 以不 同影 响因素 ， Ｈ Ｌ 用 Ｐ Ｃ测定丹 酚酸 Ｂ的含 量 ， 各种 因 考察
表 ２ ０℃丹参酚酸乙醇溶液中丹酚酸 Ｂ不同时间含量 ５
受热 时间／ ｈ 含 量／Ｔ・ Ｌ ｒ ｍ一 ｌ ｇ
０． ３ １ １９
围 ０２８ ２８ ， ； ．８ ～ ．８ｔ 精密度试验 Ｒ Ｄ０５ （， ６ ； ｔ ｇ Ｓ ．％，／＝ ） ７
重复性 试验 Ｒ Ｄ １０ ， ｔ＝ ）加样 回收试验得平 Ｓ ．％ （， ６ ； ／
丹参药 材提取液 ５ ＝ ０ ｃ受热 １ 【 ， 含量几 乎 ｈ时 其
２１１ 色谱 条件 ．．
Ｋｏａｉ ｃ８ （ ． ｉｎ×２０ ｒ ｓ 】 ４６ ｎ ｍ ｌ 柱 ｌ ５
不降低， 受热 ８ｈ时， 丹酚酸 Ｂ含量降低约 ４ ％。 ０
以上结果表 明丹参 水 提 液 中丹 酚 酸 Ｂ对 受 热
受热 时 间／ １ １ 药 液含量 ／ ｇｍ ｍ ・Ｌ
Ｏ． ５ ２６５ ０． ３ ２ １５ Ｏ．４ ２８８ Ｏ． ５ ２ ７７
大大降低 ， 一点 中试研究 中已经得 到重复验证 。 这 ３２ 乙醇体 系有利 于丹 酚酸 Ｂ的稳定 。考虑 在工 ． 艺中将 丹参水提 液过 大孔 吸附树 脂 ， 以乙醇洗 脱 富
丹参中丹酚酸B含量的测定方法
丹参中丹酚酸B含量的测定方法丹参是一种唇形科植物丹参的根茎和干燥根部分，而丹酚酸B则是从丹参中分离提取的一种也具有新木质素骨架和咖啡酰缩酚酸结构的水溶性成分。
单分散有抗前列腺肿瘤、抗氧化清除自由基、抗肝纤维化和放置神经推行性疾病等效用，其开发利用的前景极为广阔。
标签：丹参；丹酚酸B含量；测定方法由《中国药典》2005版和当前报道中丹酚酸B测定方法中可知，供试品溶液制备手段，是采用75%甲醇，进行1 h的加热回流后提取，并采取HPLC测定其含量[1]。
这种测定丹参中丹酚酸B含量的方法，具有良好的重现性，然而操作比较复杂，耗时较长，有方法改进的必要。
1材料和仪器从广州广弘中药材有限公司中购得丹参药材，且通过中药鉴定，确定其为唇形科植物丹参根茎和干燥根，与2005年版的《中国药典》中相关规定相符合。
其中，甲醇是色谱纯，水为纯净水，其他试剂都是分析纯。
仪器则采用由安捷伦科技有限公司生产的Agilent1100高效液相色谱仪，及上海科导SK1200H超声波提取器。
2方法和结果2.1丹酚酸B供试液制备方法2.1.1回流提取法去本品中粉0.2 g，在去本品粉末的测定水分，通过精密称定后，将其放置在色锥形的容量瓶中，再加入50 ml的75%甲醇，称定重量后，行1 h的加热回流，取出放冷后，再行重量称定，使用75%的甲醇不足所减失的重量，将其摇匀，再滤过，将滤液取出，即得，其编号定为1。
2.1.2超声提取法取本品中粉0.2 g，同时去本品粉末的测定水分四分，通过精密称定后，将其分别放置在四个100 ml的容量瓶中，再加入4 ml的75%乙醇，提取10，20，30，40 min，再精密量取其中的1 ml提取物，放置在100 ml的量瓶例，将甲醇加至刻度，摇匀后即得，其编号定为2，3，4，5。
2.2使用HPLC测定超声提取法和回流提取法中丹酚酸B含量2.2.1色谱条件色谱柱为Symmetry C18（4.6 mm ×150 mm，5 m）；流速为1.0 ml/min；柱温为35℃；检测波长为286 mm；流动相为甲醇.乙腈.甲酸水（30：10：1：59）；理论半数根据丹酚酸B峰值计算，且要高于2000。
HPLC法测定复方丹参丸中丹酚酸B的含量
HPLC法测定复方丹参丸中丹酚酸B的含量目的建立复方丹参丸中丹酚酸B含量测定方法。
方法采用高效液相色谱法，Kromasil C18色谱柱（（250mm×4.6mm，5μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸（22：78），检测波长为286nm；柱温30℃；流速1.0ml·min-1。
结果丹酚酸B在0.1034～1.034μg 范围内，呈良好的线性关系（r=1.000），回收率为98.2%，RSD为1.2%（n=9）。
结论本方法简便、准确。
方法的稳定性、重复性良好，可作为复方丹参丸的质量控制。
标签：复方丹参丸；丹酚酸B；高效液相色谱Determination of Salvianolic acid B in Fufang Danshen Pill by HPLCZHANG Qian，SUN Yan-lii ，GAO Xiao-yan，CHEN Mei-ling，LING Ya（Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co.，Ltd.，Lianyungang 222047，Jiangsu，China）Abstract：Objective To establish a HPLC method for Salvianolic acid B in Fufang Danshen Pill. Methods A Kromasil C18（250mm×4.6mm，5μm）column was used with the mobile phase was acetonitrile-0.1% phosphoric acid（22：78），at the detection wavelength was 286nm. The column temperature was 30℃.The flow rate was 1.0ml·min-1 . Results Salvianolic acid B was linear at the range of 0.1034μg～1.034μg（r = 1.000）. The recovery was 98.2% ，and RSD was1.2% （n = 9）. Conclusion The method is specific and accurate. The method are stable with good reproducibility，and can be used for the quality control of Fufang Danshen Pill.Key words：Fufang Danshen Pil；Salvianolic acid B；HPLC复方丹参丸由丹参、三七、冰片三味中药经提取精制而成，为黑色的浓缩丸，除去包衣后丸芯显棕黄色至棕褐色；气芳香，味微苦。
丹参药材用不同水温超声提取后丹酚酸B的含量测定
丹参药材用不同水温超声提取后丹酚酸B的含量测定戴金明;林徐剑;施晓萍;沈莹【摘要】目的测定丹参药材用不同温度的水超声提取后丹酚酸B的含量,以及含量的稳定性考察,并分析含量变化的原因。
方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Zorbax SB-C18,流动相为5%冰乙酸-乙腈（82∶18）,流速为1.0 m L·min-1,柱温为25℃,检测波长为285 nm。
结果加入2060℃的温度的水所超声提取的丹酚酸B 的含量低且不稳定性,随时间延长而下降较快,而采用70100℃的温度的水所超声提取的丹酚酸B的含量高且较稳定。
结论丹参药材中的某种酶类或菌类物质在一定温度和有水的条件下会水解丹酚酸B,应尽量避免丹参药材与水的接触。
【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2016(035)008【总页数】3页(P460-462)【关键词】丹参;丹酚酸B;不同水温;超声提取;含量测定;高效液相色谱法【作者】戴金明;林徐剑;施晓萍;沈莹【作者单位】正大青春宝药业有限公司,浙江杭州310023【正文语种】中文【中图分类】R927.2中药丹参(Salvia miltiorrhiza)以唇形科植物丹参的干燥根及根茎入药，在《神农本草经》中列为上品，具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的功效。
现代药理研究表明，丹参具有抑制血小板聚集和抗血栓形成、抗动脉粥样硬化、扩张冠状动脉和改善微循环、保护受损心肌、抗心律失常、调节脂质代谢、降血压、抗氧化等诸多功效[1-4]。
随着对丹参研究的深入，发现丹参中酚酸类成分才是其主要的活性成分，而丹酚酸B在丹参酚酸类成分中所占的比例最大[5-6]。
所以丹酚酸B的含量也是丹参药材质量的一个重要指标[7]。
我们在丹参药材炮制成饮片的过程中发现，原丹参药材中丹酚酸B的含量较高，以丹参药材干燥品计含量有7%左右，但炮制成饮片后丹酚酸B的含量只有1%。
通过一系列试验以及数据分析后我们发现，丹酚酸B的含量与炮制丹参药材时加水闷润的时间以及温度有关。
不同产地丹参药材中丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量测定
38中国处方药 第18卷 第10期·实验研究·采用乙腈-0.1%磷酸系统进行梯度洗脱。
③本试验考察了不同柱温、流速对分离度及基线是否平稳的影响。
本试验考察的柱温为25℃，30℃和35℃，试验结果表明，柱温对其的影响较小，因此本试验柱温采用30℃；还考察3种不同流速0.8 ml/min 、1.0 ml/min 、1.2 ml/min 对分离度的影响，试验结果表明1.0 ml/min 时分离度较好，基线也较平衡，故本试验采用的流速为1.0 ml/min 。
参考文献[1]尚云冰，曲夷.再论大承气汤[J].山东中医药大学学报，2016，40（2）：135-136.[2]魏江存，秦祖杰，谢臻，等.大黄不同炮制品对大承气汤泻下作用变化研究[J].中华中医药杂志，2018，33（12）：5392-5396.[3]张保国，梁晓夏，刘庆芳.大承气汤现代药效学研究[J].中成药，2009，31（9）：1427-1430.[4] Peigen X ， Liyi H ， Liwei W.Ethnopharmacologic study of Chinese rhubarb[J].J Ethnopharmacol ，1984，10（3）：275-293.[5]魏江存，陈勇，谢臻，等.中药大黄炮制品的化学成分及药效研究进展[J].中国药房，2017，28（25）：3569-3574.[6]阴健，郭力弓.中药现代研究与临床应用[M].北京：学苑出版社，1993：492.[7]刘学仁，张莹，林志群.橙皮苷和橙皮素生物活性的研究进展[J]. 中国新药杂志，2011，20（4）：329-333，381.[8]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S]. 2015年版.北京：中国医药科技出版社，2015：23-24.[9]历淑芬. 大承气汤传统煎煮工艺及质量控制研究[D].杭州：浙江中医药大学，2012.[10]李丽，肖永庆.大黄饮片炮制前后物质基础变化规律研究[J].中华中医药杂志，2012，27（4）：803-813.表5：DCQT 样品测定结果（n ＝6）成分/样品平均质量浓度（μg/ml）RSD （%）柚皮苷867.24 1.55橙皮苷22.86 2.29新橙皮苷482.81 1.26芦荟大黄素 6.90 2.05大黄酸27.84 2.21和厚朴酚19.60 2.53厚朴酚74.04 2.64大黄素13.57 3.01大黄酚38.69 2.75大黄素甲醚14.212.83丹参属于唇形科植物丹参的根茎与干燥根，同时也属于我国传统珍贵中药材，历史悠久[1]。
高效液相色谱法测定丹参中丹酚酸B等3种有效成分_游勇基
药品质量及检验高效液相色谱法测定丹参中丹酚酸B 等3种有效成分游勇基1,陈铭辉2(1.福建省药品检验所,福建福州350001;2.福建中医学院药学系,福建福州350003)摘要:目的 测定丹参中丹酚酸B,丹参素和原儿茶醛等3种水溶性有效成分的含量。
方法 采用高效液相色谱法测定。
以甲醇-5%冰醋酸为流动相进行梯度洗脱,以对羟基苯甲酸为内标,检测波长为281nm,柱温30 。
结果 丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B 浓度分别在3.95~47.4 g mL -1(r =0.9996),5.14~61.68 g mL -1(r =0.9999),16.8~117.6 g mL -1(r =0.9994)范围内呈良好线性关系,丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B 的平均回收率分别为101.43%(RSD = 2.88%,n =6),99.89%(RSD=3.04%,n =6)和103.43%(RSD=1.52%,n =6)。
结论 方法简便,分离效果好,能同时测定丹参中丹酚酸B 、丹参素、原儿茶醛等3种水溶性有效成分的含量,结果准确可靠。
关键词:丹参;丹参素;原儿茶醛;丹酚酸B;高效液相色谱法中图分类号:R917文献标识码:A文章编号:1001-2494(2003)12-0950-03Determination of three effective components in Salvia miltiorrhiza by means of HPLCYOU Yong -ji 1,CHEN M ing -hui 2(1.Fuj ian I ns titute f or Dr ug Contr ol,Fuz hou 350001,China;2.D ep ar tment of Phar macy ,Fuj ian Colle ge of T r aditional Chinese M edicine,Fuz hou 350003,China)ABSTRAC T:OBJECTIVE T o investigate the determination of three water soluble components in S alvia miltior r hiz a .METHODS T he analysis w as carr ied on a column of Hypersil C 18(250mm 4.6mm,5 m)w ith a mobile phase of methano-l 5%acetic acid (gradient elution from 10 90to 35 65in 20minutes),using 4-hydrox y -benzoic acid as the internal standard.T he detection wave -length w as at 281nm.RESULTS T he linearit y w as obtained over 3.95~47.4 g mL -1(r =0.9996)for Danshensu,5.14~61.68 g mL -1(r =0.9999)for pro to catechuic aldrhyde and 16.8~117.6 g mL -1(r =0.9994)for salviamolic acid B,respectively.T he average recoveries w er e 101.43%(R SD=2.88%,n =6)for Danshensu,99.89%(RSD=3.04%,n =6)for protocatechuic a-l drhyde and 103.43%(RSD = 1.52%,n =6)for salv iamolic acid B,respectively.C ONC LUSION T his method appear ed to be r apid,simple and accurate.KEY WORDS :S atvia miltior r hiz a Bg e.;Danshensu;protocatechuic aldehyde;salv iamo lic acid B;HPL C 作者简介:游勇基,男,硕士,副主任药师Tel:(0591)7621966-3521E -mail:youyj @丹参为唇形科植物丹参(Salvia miltiorr hiz a Bge.)的干燥根及根茎,是重要的传统中药。
2015年版《中国药典》药材修订内容汇总.
鉴别（1）
照黄曲霉毒素测定法（通则2351）测定。 33-麦芽 检查-黄曲 本品每1000g含黄曲霉毒素B1不得过5μ g，黄曲霉 霉毒素 毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉 毒素B1总量不得过10μ g。 饮片-检查 -黄曲霉毒 同本品每1000g含黄曲霉毒素B1不得过5μ g，黄曲霉 霉毒素 毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉 34-远志 毒素B1总量不得过10μ g。 饮片-检查 同药材。 -黄曲霉毒 本品粉末灰棕色至棕色。种皮表皮细胞淡黄色， 表面观呈长条形，常与下皮细胞上下层垂直排列 。下皮细胞含棕色或红棕色物。色素层细胞多皱 纹，内含深红棕色物。油细胞类圆形或长圆形， 54-豆蔻 鉴别（1） 含黄绿色油滴。内种皮厚壁细胞黄棕色、红棕色 或深棕色，表面观多角形，壁厚，胞腔内含硅质 块；断面观为1列栅状细胞。外胚乳细胞类长方形 或不规则形，充满细小淀粉粒集结成的淀粉团， 有的含细小草酸钙方晶。 特征图谱 37-羌活 饮片 略 ……体轻，质脆。香气，味微苦而辛。 【鉴别】【检查】【特征图谱】【浸出物】【含 量测定】同药材。
23-山楂
性状 47-川芎
饮片
取本品粉末1g，加乙醇5ml，超声处理15分钟，离 心，取上清液作为供试品溶液。另取丹参对照药 材1g，同法制成对照药材溶液。再取丹参酮ⅡA对 照品、丹酚酸B 对照品，加乙醇制成每1ml分别含 0.5mg 和1.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照 薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述三种溶液 各5μ l，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条 鉴别（2） 状，以三氯甲烷-甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（6 : 4 : 8 : 1 : 4 ) 为展开剂，展开，展至约4cm， 取出，晾干，再以石油醚（60〜90°C)-乙酸乙酯 24-丹参 （4 : 1)为展开剂，展开，展至约8cm，取出，晾 干，分别在日光及紫外光（365nm)下检视。供试 品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应 的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
高效液相色谱测定丹参滴注液中丹酚酸B含量
对 照组 血 糖 比较 ， 耳 子 中 剂 量 组 及 苯 乙 双 胍 组 有 显 著 性 差 异 苍 （ ０ Ｏ ） 苍耳子高 剂量组有 差异 （ ０ ０ ） 表 明中 、 Ｐ＜ ．１ ， Ｐ＜ ． ５ ， 高剂量 的苍耳水煎剂对高血糖模型小 鼠空腹血糖有降低作用 ， ５结果 表 显示苍耳子水提取 液 中 、 高剂 量能 改善 高血糖 模 型小 鼠的糖 耐 量 ， 降低高血糖模型小 鼠餐后血糖 ， 以中剂量作用 强 ， 明苍 能 尤 表 耳子具有显 著降低高血糖 小 鼠的血糖 值和改善 高血糖模型小 鼠 糖耐量的作用。通 过苍 耳子水 提取液对 正常小 鼠和高血 糖模 型 小 鼠血糖影响的研 究 ， 初步推测苍耳子可能具有促进胰岛 Ｂ细胞 产生和促进 葡萄糖代谢作用 ， 使正常血糖和葡萄糖负荷后 的血糖 值有所改 善。 苍耳 子为资源 丰富的常用 中药 ， 有必要 对其 化学成分 进行 系 统分离 ， 追踪活性成分 ， 其降糖作 用 ， 尤 民间一直 应用 ， 近半个 但
学 学报 ，９２，（ １ ：７ １６ ９ １ ） ６８．
世纪无文献报道 。在本 药效 学研究 基础 上 ， 耳子 降血糖 活 苍 性成分分离和提取有待进一步研究。
参考文 献 ：
［１ 金传山 ， ］ 吴德林 ， 张京生．不同炮制 方法对苍耳子 成分及药效 的影 响［ ］ Ｊ ．安徽中药学院学报 ，０ １ （ ）５ ． ２０，９ １ ：４
ｍ ｓ １ ５ ｍ，１０ ５ ｍ × ． ｍ） 流动 相 为 甲 醇 一 乙腈 一甲酸 一水 （０ １： １ ５ ） 流 量 为 ０ ８ｍ ・ ｎ 检 ａｉＣ ｌ ８ （ ０ Ａ２ ０ｍ ４ ６ｍ ； ３： ０ ： ９ ； ． ｌ ｍｉ～；
HPLC法测定药典方丹参片中丹参酮ⅡA及丹酚酸B的含量
ＨＰＬＣ法测定药典方丹参片中丹参酮ⅡＡ及丹酚酸Ｂ的含量目的：完善药典方丹参片的质量标准，测定制剂中丹参酮ⅡA及丹酚酸B 的含量，考察制备工艺中有效成分的转移率。
方法：采用HPLC法进行含量测定。
丹参酮ⅡA，以甲醇-水（80∶20）为流动相，检测波长为270 nm；丹酚酸B以甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)，检测波长为286 nm。
结果：3批丹参片平均含丹参酮ⅡA 2.83 mg/g，转移率为42.3%；丹酚酸B含量为51.8 mg/g，转移率为50.9%。
结论：建立了丹参片中丹参酮ⅡA的含量测定方法，可以更好地控制丹参片的质量。
[Abstract] Objective: To determine tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in Danshen Tablets quantitatively. Methods: HPLC with Hypersil ODS column was used in the content determination. For tanshinoneⅡA , the mobile phase was composed of methanol-water (80∶20) and the detective wavelength was at 270 nm. For salvianolic acid B, the mobile phase was composed of methanol-acetonitrile-formic acid-water (30∶10∶1∶59) and the detective wavelength was at 286 nm. Results: The average contents of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in three batch of tablets were 2.83 mg/g and 51.8 mg/g respectively. The extraction rate of the preparation processes were 42.3% and 50.9% respectively. Conclusion: The method is available with a good reproducibility and can control the quality of Danshen Tablets effectively.[Key words] Danshen Tablets；TanshinoneⅡA；Salvianolic acid B；HPLC丹参片为《中国药典》2005版一部收载的成方制剂，是单味丹参提取制得的片剂，功能活血化瘀，主要用于冠心病心绞痛等疾病[1]。