9-_植物胚胎培养
植物组织培养技术所有填空题
植物组织培养技术所有填空题填空题(每空1分，共20分)1、去除植物病毒的主要方法是_组培法___和_理化法___两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。
2、原生质体的融合可实现__ 体细胞___的杂交，其融合的方式分为_自然融合__和_人工诱导融合_两类。
3、在组织培养中，非洲菊是靠__丛生芽 ____的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以__原球茎增殖_的方式进行快繁的。
4、单细胞培养的方法主要有 --看护培养--、 ---微室培养--- 及 ---平板培养----。
5、在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以__0.3—0.5___mm、带__1—2__个叶原基为好。
6、植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为__ _光___培养和__ _暗__培养。
7、细胞的再分化有 ----器官发生--- 和 ---体胚发生---- 两种形式。
8、连续培养有 ----浊度恒定法---- 和----化学恒定法---- 两种方法。
9、通过茎尖培养脱毒苗的过程中，切取茎尖的大小与其成活率成__正比 __，而与脱毒效果成_反比 __。
10、一个已停止分裂的成熟细胞转变为_____未分化_____状态，并形成__未分化的愈伤组织___的现象称为"脱分化"。
11、植物的胚胎培养，包括____胚__培养、__ _胚乳____培养、____胚珠___培养、子房培养以及离体授粉的。
12、在组织培养中，IAA、ZT 和GA 必须用____过滤灭菌__法灭菌，而接种室空间采用_ __紫外线照射_或__甲醛熏蒸__法灭菌。
13、幼胚培养时，其发育过程有__ __早熟萌发__、_ _呸性发育____、_ __形成愈伤___三种方式。
14、原生质体的分离有__ _机械法___和__ 酶降解法____两种方法。
15、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为_普通茎尖培养__培养和__茎尖分生组织__培养两种类型。
植物胚胎培养
（2）防止幼胚早熟萌发的方法
①提高培养基渗透压。胚龄越小要求的渗透 压（糖浓度）越高，高糖浓度控制幼胚早熟 萌发的效果早已被证实。下述实例阐明不同 胚龄对糖浓度的要求。
②提高无机盐浓度。提高无机盐浓度也是为 了提高培养基渗透压。可加入适量的NaCl 以提高渗透压，浓度一般为0．2％－0．4 ％，超过0．8％对胚有毒害作用。
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（二）幼胚
发育早期的幼胚，由于胚胎发育要求更 为完全的人工合成培养基，而且剥离技 术要求很高，用成熟胚的培养方法很难 成功，可以采用胚珠预培养的方法。
具体做法：将授粉后的子房剥出用药剂
进行表面消毒，在无菌条件下切取胚珠
进行预培养。培养一定时间后，再将胚
从胚珠中剥出，接着培养裸露的胚，使
曼陀罗：5.0一8.1
水稻：5.0
番茄： 6.50
大麦：4.9
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(三) 环境条件对胚性发育的影响
1）光照条件：
由于胚在胚珠内发育是不见光的。一 般认为在黑暗或弱光下培养幼胚比较适 宜。光照对胚胎发育有轻微抑制作用， 离体培养条件下，幼胚正常胚性发育对 光的要求，还应根据植物种类来决定。
③加人甘露醇提高渗透压。甘露醇的浓度为 1．l％－5．5％，以部分地代替蔗糖，使幼 胚在等渗条件下继续胚性发育。
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（二） 培养基酸碱度对胚性发育的影响
培养基酸碱度对胚性发育也是非常重 要的。通常胚培养所用pH值的范围为。 因植物种类不同而有所差异。
如：
荠菜： 5.4－7.5
桃：5.8
（五）克服种子的自然不育性
（六）种子生活力的测定
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内容 3
第4章-胚胎培养PPT演示课件
•56
复习思考题：
1、植物胚胎培养分为哪些类型？各有何种特点 和要求？
2、胚胎培养有何意义？
3.花器官培养通常指花的哪些部分培养?常用的 基本培养基是什么?
4.在进行幼胚培养时，由于幼胚过小而分离困 难，可采取什么途径解决?
•57
温度。 C.光照：通常弱光培养。光暗交替有利幼胚生
长
•25
原胚(幼胚)的培养的条件
➢ 无机氮：
包括硝酸盐、亚硝酸盐或铵盐；
➢ 渗透压：
蔗糖，8%-10%，不同发育期，渗透压不一 样，初期高（WHY）。因为自然条件下，原 胚被一ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ高渗液体包围着。
➢ 复杂的天然提取物：
椰乳 CM有促进幼胚生长和分化的作用
4.培养：
加入生长素和CTK，诱 导形成愈伤组织或胚状 体，再分化成植株。
•51
•52
二、种子培养
优点： 1.植株分化容易，无菌操作方便，
打破休眠。 2.使杂种败育种子正常萌发。
•53
种子结构
•54
培养方法：
1.种子消毒：
◇种皮厚或不饱满的用0.1%升汞浸10-20min， 或用10%次氯酸钠浸15-20min。
（2N）
•8
一.培养类型
1、离体胚培养时期 A.异养期 B.自养期
A.异养期，完全依赖于周围细胞中的代谢，而 且依赖于周围胚乳消耗的养料。B.自养期，胚 能吸收培养基中的无机盐和糖，经过自身的代 谢作用合成其生长所必需的物质。
•9
2、离体胚培养类型 ⑴成熟胚培养 ⑵幼胚培养
•10
2、离体胚培养类型
完全成熟的胚乳，生理活动很弱，在诱导脱分化前， 必须借助于原位胚的萌发，使其活化。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料一、名词解释。
（每个3分，共24分）１、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。
又称植物离体培养。
２、细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
3、脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
4、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。
5、单细胞培养：对分离的到的单个细胞进行培养，诱导其分裂增殖，形成细胞团，再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体，直至长成完整植株的技术。
6、胚状体：亦称体细胞胚。
指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。
它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。
7、平板培养：是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中，使其与培养基充分配合，再倒入培养皿中进行培养的方法。
8、人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。
9、次生代谢产物：指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
10、再分化：细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化，进行器官形成，产丛生芽或胚状体，形成完整植株的过程。
11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。
A Kt；B IAA；C NAA；D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。
植物组织培养技术所有名词解释
植物组织培养复习材料一、名词解释。
1、植物组织培养(plant tissue culture) :植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术2、脱分化(dedifferentiation ):指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞即愈伤组织的现象。
3、再分化(redifferentiation ):愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
4、外植体(explant):植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
(如器官、组织、细胞、原生质体、种子等)5、愈伤组织(callus):原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。
在组培中，则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
6、器官发生：胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。
包括细胞分化和器官形成。
7、胚状体发生：在植物细胞、组织或器官体外培养过程中，由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。
可进一步发育成植株。
8、细胞全能性(cell totipotency ):指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组, 并具有发育成完整植株的潜在能力。
9、细胞分化：一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。
10、极性:细胞(也可指器官或植株)内的一端与另一端在形态结构和生理生化上的差异。
11、试管苗：通过组织培养产生的植株。
12、看护培养:是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
这块愈伤组织被称为看护组织。
13、固相化培养：将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻（月元）酸盐或多聚赖氨酸中，然后将他们放入液体培养基中震荡培养。
这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点，有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用。
14、悬浮细胞培养:将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术。
植物的胚胎培养
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8.1.3 幼胚培养（immature embryo culture） 是指对发育早期胚或未成熟胚的培养，即供给一
定的培养条件，使幼胚逐步发育成成熟胚，并进 一步发育成小植株的技术。 幼胚培养要根据幼胚发育的不同阶段，选用相应 的培养基、营养条件和培养条件。
远缘杂交杂种胚拯救 ，使胚发育不全的植株 获得大量的后代
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8.2.2、子房培养:
包括授粉子房和未授粉子房培养。 1949年和1951年最早在黄瓜、番茄、菜 豆、草莓、烟草等植物上获得成功。 授粉子房培养形成成熟果实和种子； 未授粉子房培养形成小的无籽果实。
授粉后3d的玉米子房， 其中6颗发育成种子， 其余产生愈伤组织。
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（1）子房培养的意义: ➢获得杂种植株； ➢未授粉子房培养为试管受精提供技术基础； ➢未授粉子房培养能获得获得单倍体植株，用
具有特殊的意义。 在柑桔杂交育种中一个问题是杂交往往得不到杂种
胚，由于珠心胚的生长把合子胚挤到旁边去。
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(6) 用于有关理论研究
离体胚培养还可用于许多重大理论问题 的研究，如胚胎发育过程，影响胚发育的各种因 素，胚乳作用以及与胚发育有关的代谢和生理变 化等。
(7) 脱分化与再分化培养
以幼胚或成熟胚为外植体诱导愈伤组织， 建立胚性无性系，不仅可以应用于研究体细胞胚 胎发生、分离原生质体，还可应用于植物体细胞 遗传饰变和转基因技术的研究等。
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8.1 离体胚培养
8. 1.1 离体胚培养的概念 离体胚培养（embryo culture）指从植物种子中分
离出胚组织进行离体培养的技术。包括幼胚培养和 成熟胚培养。
幼胚
植物组织培养期末复习题
植物组织培养期末复习题一、填空题每空0.5分1.植物组织培养按培养对象分为__组织培养__、_器官培养_、_胚胎培养_、__细胞培养_、_原生质体培养__等几种类型.2.在分离原生质体的酶溶液内,需要加入一定量的Cacl2·2H2O和葡聚糖硫酸钾_其作用是保持原生质体膜的稳定,避免破裂.3.1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物__细胞具有全能性_____的理论概念；1943年White提出植物细胞“____全能性_____”学说,并出版了植物组织培养手册,从而使植物组织培养成为一门新兴的学科;4.用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_80_℃的温度范围内,而若用它高温干燥灭菌则需在__150__℃的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_60_℃.5.细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__全部遗传信息__和___形成完整植株的潜在__的能力;6.1962年,Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__MS_培养基,其特点是_无机盐_浓度较高,且为较稳定的__________;7. 7.6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进_根_的生长,这时_脱分化_占主导地位；比值高促进_芽_的生长,这时_分化占主导地位.9.组织培养的特点是：__无菌_、__人工控制_、_离体_.10.1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得__单倍体植株_,这促进了花药和花粉培养的研究;11.在组织培养中,不耐热的物质用__过滤__法灭菌,而培养基常用___湿热灭菌__法灭菌.13.在组织培养中,非洲菊是靠_从生芽的方式进行繁殖的,而蝴蝶兰是以__原球茎_的方式进行快繁的;15.在通过微茎尖培养脱毒时,外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定,一般以__0.3-0.5__mm、带__1-2__个叶原基为好;16.原生质体的分离有_机械法_和__酶解法_两种方法.17.进行植物组织培养最基本的前提条件是__离体_;18.植物组织培养按培养过程中是否需要光,可分为___适光_培养和___嗜光培养;20.组织培养中有三大不易解决的问题,它们分别是__黄化污染、_褐化__、_玻璃化;21.White培养基_无机盐_浓度低,适合生根培养;22.在无毒苗的组织培养中,外植体的大小与其成活率成__正比_,而与脱毒效果成__反比__;23.一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象称为"__脱分化___";25.茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为__普通茎尖__培养和_茎尖分生组织_培养两种类型;27.愈伤组织的形态发生有_器官发生__和__体细胞胚发生__两种情况;28.植物组织培养按培养的方式分为__液体_培养和__固体__培养;29.1960年,英国学者Cocking用__真菌纤维素酶酶解_分离原生质体成功,从而创新原生质体的培养技术;30.大多数植物组织培养的适宜温度范围是_23-25__℃,培养基的PH值是__5.8_.32.在组织培养中,ZT和GA必须用_过滤_法灭菌,而接种室空间采用_紫外线照射__或_甲醛熏蒸_法灭菌.33.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样,次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生_cl离子ClO-_来杀菌的；升汞是靠_汞离子_来达到灭菌目的;34.幼胚培养时,其发育过程有_早熟萌发___、___胚性发育__、_形成愈伤__三种方式;35.植物的胚胎培养,包括__胚胎__培养、幼胚培养、__胚乳__培养、胚珠_培养以及子房的培养.38.一个已停止分裂的成熟细胞转变为__分生_状态,并形成_愈伤组织_的现象称为"脱分化".39.由胚乳培养可以获得__单__倍体植株,经秋水仙素处理可以获得_二_倍体植株.40.去除植物病毒的主要方法是_理化法_和_组培法__两种方法,当把二者结合起来脱毒效果最好.41.花药培养是_器官__培养,花粉培养属于__细胞__培养,但二者的培养目的一样,都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞,最后发育成__单倍体植株__.43.原生质体的融合可实现_体细胞_的杂交,其融合的方式分为__自然融合_和__人工诱导_两类.二、不定选择题每小题2分1.培养室里的湿度一般保持在_C_.A30~40%；B50~60%；C70~80%；D80~90%2.下列不属于生长素类的是__AD_;AKt；BIAA；CNAA；DZT3.影响培养基凝固程度因素有_ABD_.A琼脂的质量好坏；B高压灭菌的时间；C高压灭菌的温度；D培养基的PH4..活性炭在组织培养中的作用有_ABC_;A吸附有毒物质；B减少褐变,防止玻璃化；C创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长；D增加培养基中的养分；5.下列具有细胞全能性的细胞是：_ABCD_;A成熟的老细胞；B幼嫩的组织细胞；C愈伤组织细胞D番茄的受精合子6.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是_B_：.A□Morel；BHaberland；C□Schleiden；D□White7.下列培养基中__C_无机盐的浓度最低;AMS培养基；BB5培养基；CWhite培养基；N6培养基8.高温易被破坏分解的植物激素是__AbD_;AIAA；BGA；CNAA；DZt9.从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织,大致经历__ACD三个时期;A诱导期；B潜伏期；C分化期；D分裂期10.下列不属于活性炭在组织培养中作用的是___D_.A吸附有毒物质；B减少褐变,防止玻璃化；C创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长；D增加培养基中的养分；11.下列不属于细胞分裂素的植物激素是_B_;A6-BA；BNAA；CZt；DKt12.植物组织培养的特点是_ABC_;A培养条件可人为控制；B生长周期短,繁殖率高；C管理方便；D产量大14..下列不属于大量元素的盐是_C_;ANH4NO3；BKNO3；CZnSO4.7H2O；DMgSO4.7H2O15.下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是__ABCD_;A细胞分裂加快B正在分裂的细胞体积小,内无液泡C细胞的核和核仁增至最大D细胞中的RNA含量减少,16.在原生质体的培养中,渗透稳定剂的作用是：AA稳定原生质体的形态而不使其被破坏B支持作用C提供营养D调节PH值17.能打破种子休眠,促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是：ABAGA；BIAA；CNAA；DZt3.下列实验中可能获得单倍体植株的是_BCD_;A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养18.在组培条件下,花粉的发育大致有下列几种途径：cdA营养细胞发育途径B生殖细胞发育途径C营养细胞和生殖细胞同时发育途径D花粉的均等分裂19.同一植株下列_B_部位病毒的含量最低.A叶片细胞；B茎尖生长点细胞；C茎节细胞；D根尖生长点细胞20.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是__B_：.AMorel；BHaberland；CSchleiden；DWhite21.脱落酸ABA需要用__C__法灭菌;A灼烧灭菌；B干热灭菌；C过滤灭菌；D高压湿热灭菌；23.下列实验中可能获得三倍体植株的是__C__.A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养24.原生质体纯化步骤大致有如下几步：①将收集到的滤液离心,转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准,一般以500r／min离心15min;用吸管谨慎地吸去上清液;②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中除不含酶外,其他成分和酶液相同,再次离心,去上清液,如此重复三次;③将原生质体混合液经筛孔大小为40~100um的滤网过滤,以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质,收集滤液;④用培养基清洗一次,最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养;一般原生质体的培养密度为104~106／ml;正确的操作步骤是：③①②④CA①②③④B②③①④C③①②④D③②①④25.下列不属于生长素类的植物激素是_A_D_.AKtBIAACNAADABA26.玉米素ZT需要用_C_法灭菌.A灼烧灭菌B干热灭菌C过滤灭菌D高压湿热灭菌三、判断题对的画“√”；错题画“×”,并改正;每小题2分1.一个已分化的细胞若要表现其全能性,首先要经历脱分化过程;√2.由胚乳培养获得的三倍体植株,也一定要进行染色体倍数的检查.√3.一般来说,光照强度较强,幼苗容易徒长,而光照强度较弱幼苗生长的粗壮;×4.经过花药培养所获得的植株都是单倍体;×5.2,4—D可用0．1mol／L的HCl助溶,再加蒸馏水定容.×6.环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发,一般要求80％-90％的相对湿度;√7.幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易.√8.一般的说,PH值高于6.5时,培养基全变硬；低于5时,琼脂不能很好地凝固;√9.在配制6-BA母液时,要先加少量的1mol的HCl溶解,再加蒸馏水定容;√10.未成熟胚较小、较嫩、颜色浅,不易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深,易培养.√11.花器脱分化比茎叶容易；幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难;×12.通过子房的培养,即可能得到单倍体植株,又可能得到二倍体植株..√13.在配制NAA母液时,要先加少量的1mol的HCl溶解,再加蒸馏水定容;×15.环境的相对湿度过低会使培养基丧失大量水分,湿度过高时,易引起棉塞长霉,造成污染;√16.White培养基无机盐浓度低,适合生根培养;√17.由性细胞发育而成的胚叫做胚状体,而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚.×18.2,4-D可用0．1mol／L的NaOH或KOH助溶,而后加无菌水定容;√20.二倍体细胞比单倍体细胞容易诱导愈伤组织.×21.在MS的培养基成分中,MgSO4.7H2O属于微量元素.×22.未成熟胚较小、较嫩、颜色浅,易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深,不易培养.×23.固体培养基可加进活性炭来增加通气度,以利于发根;×24.兰花可以通过芽丛分离的组培途径快繁,非洲菊通过原球茎增殖的途径快繁.×25.用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大,消毒效果越好.×四、名词解释1.植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术;2.细胞全能性：指每一个植物细胞都携带有该植物的全部遗传信息,在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息,分化出植物有机体所有不同类型的细胞,形成不同类型的器官甚至胚状体,直至形成完整植株的潜在能力;3.脱分化：是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程;4.母液：在配制培养基之前,为了使用方便、简化操作、用量准确,减少每次配药称量各种化学成分所花费的时间和误差,常常将配制培养基所需无机大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素成分分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液5.驯化：指通过改变其遗传性状以适应新环境的过程6.外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体7.愈伤组织培养：将一个细胞、一块组织或一个器官的细胞,通过去分化形成愈伤组织,并在体外培养使之再分化成植株的技术;8.单细胞培养.:亦称游离细胞培养freecellculfure;是指酵母菌、细菌等单细胞生物的培养,或取多细胞生物体上的一个细胞的无菌培养;9.灭菌：是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物,包括致病和非致病微生物以及,使之达到无菌保障水平;10.玻璃化现象：指试管苗的一种生长失调症状,当植物材料进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化;其苗称为玻璃化苗;11.无病毒苗：指不含该种植物主要危害病毒的苗木;12.胚状体：离体培养条件下,没有经过受精过程,但是经过了过程所形成的胚状类似物,此现象无论在培养还是生殖细胞培养中均可以看到,因而统称为胚或胚状体;在离体、组织或过程中,由一个或一些体细胞,经过和发育过程,形成与相类似的结构13.细胞全能性：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力;14.指示植物：指示植物与被指示对象之间在全部分布区内保持联系的称为普遍指示植物；只在分布区的一定地区内保持联系的则称为地方指示植物;15.消毒：消毒是指杀死病原、但不一定能杀死细菌芽孢的方法;通常用化学的方法来达到消毒的作用;16.植物生长物质：是指一些在低浓度下能调节植物生长发育的微量有机物;植物生长物质包括五大类被公认的植物激素和其他内源植物生长调节物质;17.单倍体：只含有配子体染色体组数的植株;18.无菌操作：用于防止进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作19.脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞,经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程;21.花粉胚：花粉胚就是用花粉经过人工的组织培养而形成的幼胚,发育成的植株就只有正常胚一半的染色体组,所以由花粉胚发育成的植株不会产生种子;22.褐变：饲料在加工过程中或长期贮存于湿热环境下,其所含的氨基化合物如、氨基酸及醛、酮等与还原糖相遇,经过一系列反应生成褐色聚合物的现象称为褐变反应,简称褐变;24.指示植物法：25.再分化：离体培养的植物细胞和组织可以脱分化状态重新进行分化,形成另一种或几种类型的细胞、器官、组织、、甚至完整植株;26．平板培养：亦称平面培养;将琼脂或明胶等凝胶状固体培养基制成平面状,然后在此平面上培养微生物或多细胞生物的细胞、组织或器官,这种培养称为平板培养27．次生代谢产物：植物中一大类并排植物生长发育所需的小分子化合物,其产生和分布通常有种属、器官组织和生长发育期的特异性;次生产物在植物中的合成与分解过程称为此生代谢;28．人工种子：又称合成种子,指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽,被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,从而形成能发芽出苗的颗粒状;五、简答题1.植物组织培养有哪些特点答：植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞;特点：①培养条件可人为控制②植物生长周期短,繁殖系数高③管理方便,不受季节环境条件影响,有利于工厂化生产和自动化控制;2.培养基一般包括哪些基本成分其作用是什么如何配制答：培养基的构成要素通常可分为：水分、无机盐类、有机营养成分、植物生长调节物质、天然物质、Ph、凝固剂等;水分是一切生物生命活动的物质基础,是很多生物化学反应的原料和代谢产物;无机盐类是构成植物细胞中核酸、蛋白质以及生物膜系统等必不可少的营养元素;有机营养成分为植物生命活动提供必不可少的碳源、氮源、能源等物质;植物生长调节剂可以促进植物组织的脱分化和形成愈伤组织,还可以诱导不定芽、不定胚的形成;天然有机添加剂通常富含有机营养成分或生理活性物质;pH过高时,培养基会变硬；pH过低时,则影响培养基的凝固;凝固剂是在配制固体培养基时使用,使培养基凝固;其他添加物是有时为了减少外植体的褐变,需要向培养基中加入一些防止褐化的物质;3.简述愈伤组织细胞分化;4.原生质体融合有哪几种主要方法答：植物原生质体最大特性是去掉细胞壁的裸细胞无论来源如何都具有彼此融合的能力1.自发融合2.诱发融合：a,NaNO处理b,高PH值—高浓度钙离子处理c,聚乙二醇PEG处理d,电融合3.化学融合5.组织培养中,pH值起什么作用如果pH值过高或过低会有什么后果6.植物组织培养技术主要包括哪些环节各环节的主要工作内容是什么答：1培养基配置技术：包括培养基的选择、母液配制、培养基配制、培养基灭菌;2培养材料制备灭菌技术：供体植物材料选择、外植体的选择和处理;3无菌接种技术：包括接种室的消毒、工作人员用工作服、口罩等的消毒、超净工作台的清洁与杀菌、操作工具的灭菌;4培养技术：主要是培养条件的控制,包括温度、光照、湿度等各种物理环境条件及培养基组成、PH、渗透压等各种化学环境条件;7.培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌答：1培养基一般采用湿热灭菌,如果培养基中的有些成分高温易分解,则可采用过滤灭菌;2培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌;3植物材料一般采用药剂浸泡灭菌,具体操作如下：A外植体的预处理,对植物组织进行修整,去掉不需要的部分,并将外植体用流水冲洗干净;B用70%的酒精浸润材料30s左右;C用灭菌剂浸泡灭菌,灭菌时不时搅动,使植物材料与灭菌剂有良好的接触,若灭菌过程中加入数滴吐温,则灭菌效果更好;D植物材料用无菌水冲洗3--5次,以除去灭菌剂;8.由胚乳培养获得的植株,是否一定要进行染色体倍数的检查为什么9.花药培养产生的植株染色体倍性如何其产生的原因是什么10.为什么对脱毒处理后产生的植株必须进行病毒鉴定为什么已通过病毒特定病毒鉴定的无病毒苗还须重复鉴定11.使用植物生长物质应注意些什么12.为什么幼胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂13.胚胎培养技术在育种工作中有哪些应用14.试比较花药培养与花粉培养的异同;15.简述酶法分离原生质体的步骤.答：叶片表面消毒→去除表皮,将叶片切成小块→叶碎片放入含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→摇床保温培养→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次→重悬浮于培养基16.影响马铃薯茎尖培养脱毒的因素有哪些17．简述人工种子生产步骤答：选取目标植物→从适合的外植体上诱导愈伤组织→将愈伤组织转移到液体培养基→愈伤组织在液体培养基中增生扩大→愈伤组织转移至无激素培养基→产生体细胞胚→包裹人工种皮→炼苗→温室大棚播种→获得目标植物18．愈伤组织的形态发生有哪两种情况并比较各自由此形成完整植株的不同;1、答：愈伤组织的形态发生可通过两种途径实现,一种是根芽器官直接分化形成植株,即器官发生途径；另一种是产生具胚芽、胚根的胚状体结构再形成植株,即体细胞胚胎发生途径;在器官发生途径中,芽或芽原基起源于培养组织中比较表层的细胞,即外起源,而根原基则发生于组织较深处,呈现单向极性,所形成植株的维管组织与外植体的维管组织联在一起;而在胚状体发生途径中,绝大多数体细胞胚起源于单细胞,形成的胚状体有双极性,维管组织与外植体没有联系;19．简述幼胚和成熟胚的区别;20．无病毒原种母株的保存及繁殖中最关键的问题是什么怎样解决21．NAA的中文名称是什么有何作用和特点答：NAA的中文名称叫萘乙酸,是一种人工合成的生长素;其在植物体内有促使茎和节间伸长、向性运动、顶端优势、器官脱落和生根的作用;在组织培养中NAA被用于诱导细胞的分裂和根的分化,并能与细胞分裂素互作促进茎芽的增殖;六、论述题1.请你设计一个组培实验室,说明你设计组培实验室各分室的作用及其所需主要仪器设备;2.请论述非洲菊的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程;3.某地区的一种马铃薯经多年的种植后,植株变的矮小,产量和品质都下降,怀疑是由病毒所至;请你设计一个病毒的鉴定和脱毒的技术方案;4.请阐述原生质体的分离、纯化和活力鉴定的技术过程;5.请分别列出七种仪器设备和七种玻璃器皿的名称,并说明它们的作用;6.请阐述用大蒜脱毒和快繁的程序;为什么试管苗在经过热处理和茎尖培养等方法脱毒后,还需要进行病毒的鉴定7.请论述非洲菊的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程;8.请论述香石竹的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程;9.现在需要你配制3升胡萝卜肉质根愈伤组织诱导培养基,其配方为MS＋2.4-D2mg/L＋KT0.2mg/L＋蔗糖3%＋琼脂0.7%,请你阐述培养基的配制和分装直到灭菌的全部技术过程;。
细胞工程题库精简版
细胞工程题一、名词解释1.植物组织培养：是指将植物组织在适当培养条件下诱导长成完整植株的技术。
2.植物的器官发生：指离体培养的组织或细胞团分化形成不定根、不定芽等器官的过程。
3.脱分化：已有特定结构和功能的植物组织的细胞，在一定的条件下被诱导改变原有的发育途径，逐步失去原有的分化状态，转变为具有分生能力的胚性细胞的过程。
4.愈伤组织：脱分化后的细胞经过细胞分裂产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团5.外植体：植物体上切下来进行培养的部分组织或器官。
可以是器官、组织、细胞和原生质体。
6.继代培养：指愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已经积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上，这种转移称为继代培养或传代培养7.体细胞胚：又叫胚状体，是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。
8.植物胚胎培养：指对植物的胚及胚器官进行人工离体无菌培养，使其发育成幼苗的技术。
9.人工种子：又称合成种子或体细胞种子，是指将植物离体培养的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中的类似种子的颗粒。
10.植物脱毒：利用物理、化学或生物学方法脱除植物所感染的病毒，在无菌条件下培养不带病毒的植株，进行快速繁育无病毒种苗的技术。
11.看护培养：指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
这块愈伤组织被称为看护组织。
12.细胞系：是以一种细胞为主、能在体外长期生存的不均一的细胞群体13.细胞株：是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。
14.细胞融合：指使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。
15.体细胞杂交：指将不同来源的体细胞融合并使之分化再生、形成新品种的技术。
16.单倍体：细胞中含有正常体细胞一半染色体数的个体，即具有配子染色体组的个体。
17.花药和花粉培养：指离体培养花药和花粉，形成花粉植株，从中鉴定出单倍体植株并使之二倍体化的细胞工程技术。
植物组织培养的过程是什么？
植物组织培养的过程是什么？根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术——植物的组织培养技术植物组织培养的简单过程如下：剪接植物器官或组织——经过脱分化（也叫去分化）形成愈伤组织——再经过再分化形成组织或器官——经过培养发育成一颗完整的植株。
植物组织培养的大致过程是：在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。
不过这种组织没有发生分化，只是一团薄壁细胞，叫做愈伤组织。
再适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，愈伤组织便开始分化，产生出植物的各种器官和组织，进而发育成一棵完整的植株。
植物组织培养即植物无菌培养技术，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官如根、茎、叶、茎尖、花、果实等）组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等）或细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的学科植物组织的培养方法：1、非试管微组织快繁非试管微组织快繁技术是将外植体（一般要求带一叶一芽）放置在室内外普通沙子培养基上进行培养，利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。
一般植物7～15天可以生长出根系。
此技术投资低，操作环节少。
2、试管组织培养试管组织培养是将外植体（即离体组织、器官或细胞）放置在试管等器皿中在无菌的条件下进行组织培养获得试管苗。
植物组织培养的优点：1、占用空间小，不受地区、季节限制。
2、不携带病毒3、培养周期短4、可用组培中的愈伤组织支取特殊的生化制品5、可短时间大量繁殖，用于拯救濒危植物6、可诱导之分化成需要的器官，如根和芽7、解决有些植物产种子少或无的难题，8、不存在变异，可保持原母本的一切遗传特征9、投资少，经济效益高10、繁殖方式多，试用品种多植物组织培养一般分为以下几种：1、胚胎培养指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。
名词解释
植物细胞培养是指对从植物器（或小细胞团）进行培养，形官或由愈伤组织上分离的单细胞成单细胞无性系或再生植株的技术。
Haberlandt（1902）首次尝试分离和培养植物叶片单细胞技术。
植物组织培养：指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生完整植株的技术。
简称组培。
也称离体培养或试管培养。
植物细胞全能性：任何有完整细胞核的植物细胞，具有全部的遗传信息，在一定条件下均具有分化、发育成一个完整植株的潜在能力。
动植物细胞分化差异。
外植体：在组织培养中，由植物体上取下来进行离体培养的那部分组织或器官。
脱分化/去分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞，经过离体培养，产生愈伤组织的过程。
（一个成熟细胞转变为分生状态的再分化：指脱分化的分生细胞重新恢复分化能力沿着正常的发育途径形成具有特定结构和功能的细胞的过程。
（脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。
）植物细胞培养是指对从植物器官或由愈伤组织上分离的单细胞（或小细胞团）进行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术。
Haberlandt（1902）首次尝试分离和培养植物叶片单细胞技术。
平板培养法：是将悬浮培养的细胞接种到薄层培养基上进行培养的过程，是常用的单细胞培养法。
看护培养法:用同种或异种材料的愈伤组织作为看护组织来培养细胞的一种方法。
微室培养:将单个细胞放到人工制造的一个小室中进行培养的一种方法条件培养基培养法: 在培养基中加入高密度的细胞进行培养，经过一定时间后, 这些细胞向培养基中分泌一些促进细胞生长的活性物质，使培养基条件化。
使原来在合成培养基上不能分裂的细胞发生分裂。
Torres(1989)设计。
悬浮培养:指将游离的植物单细胞或小细胞团,按一定的细胞密度,在受到不断搅动或摇动的液体培养基中进行培养的一种方式。
分批培养:指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。
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鱼雷形胚或更幼龄的胚位置都局限在纵向剖开
的半个胚珠之中（图10. 2D)，由于它们的绿色或由 于它们透明的胚柄囊，因而透过合点清晰可见。在 剥取这种未成熟胚的时候，将留下有胚的一半，仔 细地剔除胚珠组织，即可把连着胚柄的整个胚取出。
在剥取较老的胚时，在胚珠上无胚的一侧切一
小口（图10. 2C)，用一根钝头解剖针轻压珠被，即 可把完整的胚挤出到周围的液体中。整个操作过程 （特别是在剥取未成熟胚时）必须小心进行，以免 使胚受伤。
三、胚珠和子房培养
2.胚珠培养和子房培养的技术 子房培养 影响子房培养的因素 材料的选择：品种间的差异、胚囊发育时期
培养基：基本培养基、激素、蔗糖（3-10%）
接种方式：要注意极性；营养吸收 单倍体来源和发育途径 由助细胞或胚囊的无配子生殖产生单倍体 卵细胞、助细胞、反助细胞均可发育产生单倍体
第九章
植物胚胎培养
第八章 植物胚胎培养
主要内容： 第一节 胚培养 第二节 胚乳培养 第三节 胚珠和子房培养 第四节 离体授粉与离体受精 学习的目标与要求： 了解植物胚培养类型、过程、培养条件，以及胚培养 的应用。了解植物胚乳培养过程和培养条件，了解胚乳培 养在实践中的应用。认识植物胚珠和子房培养方法及其在 生产上应用。 具备胚胎培养基本认知，有进行各类胚胎培养的基本 能力。
二、胚乳培养
胚乳培养（Endosperm culture）：是指将胚乳组织从母
体上分离出来，通过离体培养，使其发育成完整植株的技
术。 被子植物胚乳是由2个单倍的极核和1个单倍的精子结合而 成的3倍体组织。由它可获得无子结实的3倍体植株，进而 可将它加倍成6倍体植株。
裸子植物很特殊，它的胚乳在受精前就已形成。裸子植物
一、胚培养
2.胚培养技术 成熟胚培养 珠柄 珠被 成熟胚珠 珠心 合点 胚囊
珠孔
一、胚培养
2.胚培养技术
成熟胚培养：指子叶期至发育成熟的胚培养。成熟胚是自 养的，培养基需要简单。仅提供一定的温度、湿度就可以 发芽生成植物体。如种子的发育。 培养过程：
种子——95%酒精消毒——选取完好种子——70%酒
三、胚珠和子房培养
2.胚珠培养和子房培养的技术 子房培养：将子房从母株上摘下，放在无菌的人工环境条 件下，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程。包括 授粉子房和未授粉子房培养。 受精后的子房仍需进行表面消毒后再接种。而未受精 子房可将花被表面消毒后，在无菌条件下直接剥取子房接 种。 子房培养只需较简单的培养基即可形成果实，并含成 熟种子。 子房培养的方法 授粉或授粉后的子房 表面消毒 接种培养
植物胚胎培养
胚胎培养的类型
植物胚胎培养
植物胚胎培养
植物胚胎培养
合子发育成胚
珠被发育成种皮 受精极核发育成胚乳
一、胚培养
胚培养：指在无菌条件下将胚从胚珠或种子中分离出
来，臵于培养基上进行培养的技术。
胚的发育过程包括从合子分裂到幼胚形成直至发育为 成熟胚的过程。
一、胚培养
植物胚胎发生过程： 原胚－球形胚－心型胚－鱼雷胚－子叶胚 球 形 胚 前 期 球 形 胚 心 型 胚 前 期
三、胚珠和子房培养
2.胚珠培养和子房培养的技术
胚珠培养：将胚珠从母株中分离出来，放在无菌的人工
环境条件下，让其进一步生长发育，以致形成幼苗的过程。 根据胚珠是否受精分为两类： 受精胚珠的培养 未受精胚珠的培养
植物胚珠结构图示
三、胚珠和子房培养
2.胚珠培养和子房培养的技术 胚珠培养 胚珠培养的方法 培养受精胚珠，摘取授粉时间合适的子房，如培养未 受精胚珠，则在授粉前摘取子房→表面灭菌→剖开子房壁， 取出胚珠或带胚珠的胎座接种培养。 影响胚珠培养成功的因素 材料的选择 发育时期 胎座组织 培养基
一、胚培养
2.胚培养技术
幼胚培养：是指处于原胚期、球形期、心形期、鱼雷期的
胚培养；幼胚完全是异养的，离体条件下培养要求培养基 成分复杂，培养不易成功。 幼胚培养的基本程序 取子房
常规表面消毒
解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚。 固体培养
一、胚培养
2.胚培养技术
幼胚培养
幼胚离体培养的生长发育方式： ▓ 胚性发育： 胚只是在体积上增大甚至超过正常胚大小 而不能萌发成苗。 ▓ 早熟萌发：幼胚不再发育，迅速萌发成幼苗。多数情况 一个幼胚萌发成一个植株，有时因细胞分裂形成许多胚 状体，进而形成许多植株，即丛生胚现象。 ▓ 愈伤组织：多数植物幼胚形成愈伤组织。再分化成胚 状体或形成芽苗。
体组织提供营养。
自养期：这一时期胚能吸收培养基中的无机盐和糖， 经过自身的代谢作用合成其生长必需的物质，在营养上已 可以完全独立。
一、胚培养
2.胚培养技术 依据所剥离胚的发育时期不同：
培养类型 幼胚培养 (immature embryo) 成熟胚培养 (mature embryo)
子叶形成之前
子叶形成之后
的胚乳为配子体的一部分，由大孢子直接分裂发育而成， 因此是单倍体组织。
二、胚乳培养
1.胚乳离体培养的意义
胚乳培养再生植株证明了全能性理论；
研究胚和胚乳的关系及胚乳组织的功能； 再生植株多为三倍体，产生无籽果实； 可以从胚乳愈伤中分离和筛选各种类型 的非整倍体植株。
胚乳细胞是研究淀粉、蛋白质和脂类天
精浸数秒——0.1%升汞或10%次氯酸钠浸泡——无菌水冲 洗——种子培养几天——剥离种胚——接种在培养基上。
成熟胚培养一般较易获得成功
一、胚培养
2.胚培养技术 成熟胚培养
胚的剥离
把胚从周围组织中剥离出来 子房 种子 胚珠 胚
小种子或胚很小必须借助解剖镜进行
先把消过毒的蒴果（图10. 2A）放在几滴无菌培 养基中。然后切开胎座区域，用镊子将外壁的两半撑 开，露出胚珠（图10. 2B)。由胎座上取下的1个胚珠 放在载玻片的凹穴中（内有1滴培养基），然后用一 把锋利的有柄刀片将胚珠纵切成两半（图10. 2D)，
四、离体授粉与离体受精
3.影响离体授粉与离体受精成功的因素
影响离体授粉结实的因素
培养材料的选择和处理
培养基
影响离体受精成功的因素
思考题
1、为什么幼胚培养比成熟胚培养要求的培养基和培养条件更 为严格？ 2、比较胚培养、胚珠培养和子房培养的异同。
3、胚胎培养在育种工作中有哪些应用？
4、离体授粉的意义主要表现在哪些方面？
一、胚培养
2.胚培养技术 幼胚培养 影响幼胚培养成功的因素
培养基：无机盐、碳水化合物、激素等
环境条件(温度：多数为25-30℃，因植物种类有所差
别。光照：一般认为黑暗或弱光条件较为合适。)
提高幼胚的成活率，可采用胚乳看护培养
一、胚培养
2.胚培养技术 胚龄与胚性发育的关系 胚龄越小，离体培养越困难； 胚的发育分为自养期和异养期，双子叶植物球形胚之前属于异养， 心形胚以后转入自营养；
二、胚乳培养
2.胚乳培养技术
胚乳培养的器官发生
愈伤组织形成、器官发生 （1）愈伤组织的诱导 （2）愈伤组织的再分化 （3）胚乳苗的生根培养
三、胚珠和子房培养
雌 蕊 与 子 房 的 类 型
三、胚珠和子房培养
柱头 反足细胞
株心
卵细胞 珠 被 珠 孔
胚囊 极核
花柱 子房
花托
花梗
株柄
胚 珠
花组成
三、胚珠和子房培养
鱼 雷 胚
一、胚培养
一、胚培养
1.胚培养的意义
促使发育不良或中途败育的胚发育成熟
缩短育种周期
获得单倍体植株
打破休眠期促进胚萌发 建立高频再生体系 可作为转基因受体材料
一、胚培养
2.胚培养技术 胚的发育对营养的要求有2个阶段，即： 异养期：这一时期的幼小胚完全依赖胚乳和周围的母
植物胚胎培养
植物胚胎培养（Embryo Culture）概念: 指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使 其发育成完整植物的技术。包括胚培养(embryo culture)
（成熟胚培养、幼胚培养）、胚珠培养(ovule culture)、子
房培养(ovary culture)、胚乳培养(endosperm culture)、离 体受精(in vitro pollination)等类型。 1904年Hanning最早成 功培养萝卜和辣根的胚。
受精。受精后的胚珠进一步发育成种子。
根据授粉的部位可分为：离体胚珠授粉、离体胎座授粉和 离体柱头授粉
四、离体授粉与离体受精
2.离体授粉与离体受精技术 离体受精技术：在离体条件下完成被子植物精、卵融合， 并将受精所所生的“人工合子”培养成再生植株。
离体受精技术的突破的技术前提：
雌配子和雄配子分离技术 单对原生质体(精卵)融合技术 微培养技术(合子培养与植株再生技源自)然产物代谢途径的理想系统。
二、胚乳培养
2.胚乳培养技术
胚乳培养过程
含胚乳的果实或种子→表面消毒→无菌条件下胚乳的 剥离→接种培养基培养 培养室温度25-27℃，黑暗或弱光下
二、胚乳培养
2.胚乳培养技术 影响植物胚乳培养的主要因素 胚乳是一种独特的组织，在被子植物中它是双受精的 产物，在倍性上属于三倍体，事实上我们培养胚乳的首要 目的也是为了直接获得三倍体植株。 基因型 胚乳的发生类型和发育程度：胚乳处于细胞形成期并 仍保持旺盛分生能力。（游离胚乳核时期和成熟胚乳时期 均不适合）。 胚因子 培养基
三、胚珠和子房培养
1.胚珠培养和子房培养的意义 胚珠培养的意义: 防止杂种胚早期败育，获得杂种植株； 受精前胚珠培养，可作为试管受精的基础； 未受精胚珠培养，能培养获得单倍体植株，用于单倍体育 种。 子房培养的意义: 获得杂种植株； 未授精子房培养为试管受精提供技术基础； 未受精子房培养能获得获得单倍体植株，用于单倍体育种。