植物生理学实验讲义
植物生理学实验讲稿
实验一
植物蒸腾强度的测定
一、植物蒸腾强度的测定 （钴纸法，p.14） 蒸腾作用是植物根系吸水的主要动力，蒸腾强度的大小 在一定程度上反映了植物生命活动（代谢）的强弱。测定 方法较多，其中钴纸法较为简单、适用。也可用光合蒸腾 仪测定，精确度更高。 1. 原 理： 单位面积的氯化钴纸吸收水量一定。 2. 氯化钴纸的制备 5 %CoCl2浸泡滤纸，60～80℃烘干，干燥皿中保存。 3. 钴纸标化：标准吸水量（X）=0.023 g/dm2 4. 材 料：红苕、天竺葵等（叶片） 5. 测 定： 用二玻片夹住叶片，橡皮筋固定。测定上、下表皮上的 钴纸由蓝色变为粉红色的时间（秒），重复3次。吸水变红 的钴纸，用电吹风吹干后再用。
4、测定准备。把连接参考气源的长塑料管子连接到面板上的“IN”接 气嘴上，并把手柄上的两根标有“IN2”、“OUT2”的管子分别与面 板上的“IN2”、“OUT2”接气嘴相连；同时，把手柄上传感器电缆 的插头插到面板上的“手柄连接”插座上，并拧紧。 5、测定。按下“参/初”键，待显示器（8）的 CO2 浓度值相对稳定 后，按下“测/终”键（CO2 初始值确定，待测CO2 最终值）；把 待测叶片夹到叶室上（叶片面积必须大于叶室面积，且使叶室密 封），当显示器（9）显示的 CO2浓度值相对稳定后，按下“完成” 键（CO2 最终值确定）。记下各显示器的数值。 6、更换叶片，重复上述第 “5” 步测定，共 3 次。 7、测定完毕，按回“开/闭路”测量键、“气泵”键、“电源”键， 结束开路测量。 8、将所得各显示器的数值，按要求输入本仪器自带软件，得到样品 的（净）光合速率（和蒸腾速率），计算3次平均值。
分子量no6作业计算材料由kno1fw193处理01moll磷酸缓冲液ph755ml蒸馏水5ml01moll磷酸缓冲液ph755ml02mollknoml4实验步骤材料0304处理液三角瓶抽气5min30酶促反应30min反应液1ml显色30min测定od5205标准曲线的制作nano取各标准液1ml于试管中加磺胺试剂2ml摇匀加萘胺试剂2ml摇匀30显色30min测定od5206作业计算材料由kno1fw20实验五叶绿体色素的提取分离及理化性质的鉴定一层析用叶绿体色素的提取及色素分离1原理叶绿体色素各组分的脂溶性和分子量不同可用有机溶剂层析分离
植物生理学实验
实验一植物细胞渗透势的测定（质壁分离法）一、原理将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中，经过一段时间后，植物细胞与蔗糖溶液之间将达到平衡状态。
如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好处于临界质壁分离状态，则细胞的压力势ψp将下降为零，此时细胞液的渗透势ψπ等于外液的渗透势ψπ′，即ψπ＝ψπ′。
此溶液称为该组织的等渗溶液，其浓度称为该组织的等渗浓度，即可计算出细胞液的渗透势。
实际上临界质壁分离状态镜下很难看到，一般以初始质壁分离作为判断等渗浓度的标准。
（细胞水势=渗+压+衬，其中渗=外渗=-iCRT）（注：内外浓度差不一定质壁分离，因为外高内低才会分离）二、器材、试剂与材料1、器材：显微镜，小培养皿（60mm），载盖玻片，温度计，试剂瓶，吸水纸等。
2、试剂：1mol/L蔗糖溶液，蔗糖系列标准溶液。
3、材料：洋葱。
三、操作步骤1、取干燥、洁净培养皿9套，顺序编号，顺序加入蔗糖系列标准溶液，呈一薄层，盖好皿盖。
（为什么？）2、用镊子撕取材料内表皮（0.5cm见方即可），吸去表面水分，迅速浸入上述培养皿中，每皿4—5片。
3、经20～30min（为什么等这么长时间？因为达渗透平衡）记录室温，同时从高浓度开始依次取出材料放于载片上，滴一滴同浓度的蔗糖溶液，盖上盖片，显微镜下观察。
若所有细胞都发生质壁分离现象，则取相邻低浓度的材料观察，并记录质壁分离的相对程度。
若有50％左右细胞发生初始质壁分离(即原生质体刚从细胞壁的角隅处分离)，则该浓度就是等渗浓度。
若两个相邻浓度的材料中，一个未发生质壁分离，另一个发生质壁分离数超过50％，则两浓度平均值即为等渗浓度。
4、由所得的等渗浓度和室温计算细胞液的渗透势：ψπ＝ψπ′＝－iCRT(MPa)，其中：ψπ——细胞的渗透势，MPa；ψπ′——供试溶液的渗透势，MPa；C——供试溶液的浓度，moL/L；R——气体常数，0.008314·L·MPa／(moL·K)；T——绝对温度，(273十t℃)K；i——等渗系数，蔗糖为1。
植物生理学实验讲义最新
实验一植物组织渗透势的测定（质壁分离法）一、实验目的植物细胞的渗透势主要取决于溶液的溶质浓度，因此又称溶质势。
渗透势与植物水分代谢、生长及抗性密切相关。
在干旱、盐渍等条件下，一些植物常在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势，增加吸水能力，在一定程度上保持膨压，保持细胞的生长和气孔的开放，这种现象称为渗透调节作用。
渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞的渗透势的降低值来表示，在水分生理与抗性生理研究中经常需要测定。
掌握质壁分离法测定植物细胞渗透势的原理和方法。
二、实验原理当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势，该溶液的浓度称为等渗浓度。
当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。
带入公式即可计算出其渗透势。
三、实验材料、仪器设备和试剂1. 实验材料洋葱鳞茎（最好是紫色洋葱）2. 仪器设备光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、干净的小培养皿、滴瓶、吸水纸。
3. 试剂（1）1 mol/L蔗糖溶液，（2）蔗糖系列标准液以1 mol/L蔗糖溶液作为母液，配置梯度溶液: 0.20、0.30、0.35、0.40、0.45、0.5、0.55、0.60、0.65、0.70 mol/L的蔗糖溶液。
四、实验步骤1. 取10套干燥洁净的小培养皿，编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使成一薄层，盖好皿盖。
2. 用刀片在洋葱鳞片外表皮或其它带有色素的组织表皮上纵横划成0.5cm2左右的小块，用镊子将表皮小块轻轻撕下，依次迅速投入各浓度蔗糖溶液中，每个培养皿中放材料3个左右，使其完全浸没，并立即盖好皿盖。
浸泡10～15分钟。
3. 从0.70 mol/L 蔗糖溶液开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上载玻片，于显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的表皮做制片，进行同样观察，并记录质壁分离的相对程度。
本科课件-植物生理学实验(完整)
放蓝色液流时，不可震动小瓶。
12
根系活力的测定(TTC法)
植物生理生化教研室 曾汉来 2012.03.12
一、实验目的 • 理解植物根系活力的内涵 • 掌握TTC法测根系活力的原理与方法
提供合成所需能量; 合成氨基酸和植物激素 （ABA、CTK、GA等）
H2O 无机盐
硫酸，其他 操作相同。
加入1mol/L硫酸2ml
取出根吸 干水分
与3～4ml乙酸乙酯在研钵 内磨碎
查标准曲线， TTC还原量(mg)
空白试验作参比测 红色提取液移入试管且 485nm下吸光度 用乙酸乙酯定容到10ml
五、实验结果
TTC还原能力 （mg/g(根鲜重)/h）
＝
四氮唑还原量（mg） [根重（g）×时间(h)]
(5)手持测糖仪4 分别测定蔗糖原液浓度（C ）
四、结果计算 自由水的含量(%)=
植物组织中束缚水的含量(%) = 组织总含水量 － 组织中自由水含量
5
注意事项： 1. 清洗植物组织后应注意用
吸水纸擦干其表面的游离水分。 2. 植物组织与外部溶液之间
达到充分平衡。
6
实验01-2 植物组织水势的测定 （小液流法）
根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长 测定根系活力，为植物生长状况、营养供应研究提供依据。
二、验原理
氯化三苯基四氮唑（TTC）的标准氧化电位为80mV的氧化还 原物质，获得H的能力强。溶于水为无色溶液，还原后即生成 红色而不溶于水的三苯基甲腙 （TTF）。
—
生成的TTF比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，可用 分光光度法定量测定。
实验01-1 植物组织中自由水和束缚水 含量的测定
(精)植物生理学实验讲义
植物生理学实验讲义目录目录 (I)实验一植物材料的无土培养及缺素症状观察（3学时） (1)实验二植物组织水势的测定（小液流法）（3学时） (2)实验三缺磷、缺铁对植物叶片中叶绿素含量影响（叶绿体色素的提取、分离及定量测定）及光合速率的测定（3学时） (3)实验四：缺素培养对叶片质膜透性及过氧化物酶活性的影响（电导率的测定&愈创木酚法测定POD酶活性）（3学时） (5)Part Ⅰ缺素培养对叶片过氧化物酶活性的影响 (5)Part Ⅱ缺素培养对叶片质膜透性的影响 (6)实验五：设计性实验：逆境胁迫下植物的适应机制研究（6学时） (7)PartⅠ蒽酮法测定可溶性糖 (7)Part Ⅱ植物体内可溶性蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝法） (9)Part Ⅲ植物组织中丙二醛含量的测定 (11)实验一植物材料的无土培养及缺素症状观察（3学时）【实验原理】只要满足植物正常生长发育的要求(光、温、水、气、必需元素)，植物可以在水中或砂中生长。
把必需矿质元素配制成培养液培养植物称溶液培养，而把培养液加于洁净的石英砂中培养植物则称砂基培养。
由于培养液中元素的种类和数量可以人为控制，因此当要了解某种元素是否为植物必需时，只要有意识地配制缺乏该种元素的培养液，根据植物在该培养液中所表现出来的症状，便可了解该元素的作用以及对植物生长发育的必要性。
【器材与试剂】器材:，贮液塑料桶（10个)，量筒，移液管，石英砂或蛭石适量，水培设备4个移液器，酸度计，电子天平，数码相机。
试剂：硝酸钙，硝酸钾，硫酸镁，磷酸二氢钾，硝酸钠，氯化镁，硫酸钠，磷酸二氢钠，氯化钙，氯化钾，EDTA-Na2，FeSO4，CuSO4，HBO3，KI，MnCl2，ZnCl2，Na2MoO4。
HCl，NaOH，Na2ClO4或CaClO4以上试剂均需分析纯。
【方法与步骤】1.准备工作1）幼苗准备:实验用种子用漂白粉溶液灭菌半小时，用灭菌水洗几次，然后放在干净的湿石英砂中发芽，加以蒸馏水培养长至一定高度(5cm左右)。
《植物生理学》实验大纲
《植物生理学》实验大纲授课教师：***授课班级：生教2004级一、二班授课时间：2006年秋季学期《植物生理学》实验大纲一、实验教学说明：植物生理学是研究植物生命活动规律、揭示生命本质的一门科学。
要了解植物生命活动的规律，研究各个生理功能的机理，都离不开科学而严密的实验手段、方法和技术，这也是现代植物生理学不断发展的唯一途径。
因此，结合植物生理学这门课程的课堂讲授，在现有实验条件下开设相应的实验，是熟化课堂讲授内容的有效措施。
（一）、实验目的：通过具体的实验，使学生能够将课堂所学的理论知识更好地、有机地与一些实际生产实践中的植物生命活动的现象相联系，同时，通过本课程的实验教学帮助学生能够在具体地实验操作中逐渐培养起良好的实际及设计安排实验的思路。
（二）、实验要求：通过涉及到细胞生理、水分生理、光合代谢、呼吸代谢等过程的实验内容的安排，要求学生在实际操作中能够很好地掌握实验设计的原理、目的，并能熟练掌握相应的实验操作方法，在此基础上能够独立设计较简单实验。
（三）、与课程教学关系：通过实验课教学可以帮助学生将课堂理论知识在实际的动手操作过程中得到更进一步的理解，并可以加深他们的印象。
教师也可以在实验教学中更好地了解学生、指导学生、帮助学生，使他们可以从课堂理论知识学习、实验实际操作两个方面将本课程应掌握的知识熟化。
二、总学时及学时分配总学时20学时，共安排5个实验，其中验证性实验4个，设计性综合实验1个。
三、内容及安排实验一植物细胞死活鉴定（验证性实验，2学时）实验二植物叶片水势测定（验证性实验，2学时）实验三叶绿素含量的测定（验证性实验，2学时）实验四呼吸强度的测定（验证性实验，2学时）实验五不良环境对植物的影响（设计性综合实验，12学时）具体测定指标包括：细胞膜透性、脯氨酸含量、丙二醛含量、过氧化物酶活性、光合速率。
四、考核方式实验成绩占本课程的20%，由出勤情况、实验操作熟练程度及实验报告成绩三部分组成。
植物生理学全课程讲义
植物生理学绪论一植物生理学的定义和内容研究植物生命活动规律和机理及其与环境相互关系的科学。
植物生命活动：从种子开始到形成种子的过程中所进行的一切生理活动。
植物生命活动形式：代谢过程、生长发育过程、植物对环境的反应植物生命活动的实质：物质转化、能量转化、信息转化、形态建成、类型变异1 物质转化体外无机物[H2O、CO2、矿质（根叶）]→体内有机物[蛋白质核酸脂肪、碳水化合物] →体外无机物[CO2 H2O]→植物再利用2 能量转化光能（光子）→电能（高能电子）→不稳定化学能（ATP，NADPH）→稳定化学能（有机物）→热能、渗透能、机械能、电能3 信息转化[1]物理信息：环境因子光、温、水、气[2]化学信息：内源激素、某些特异蛋白（钙调蛋白、光敏色素、膜结合酶）[3]遗传信息：核酸4 形态建成种子→营养体（根茎叶）→开花→结果→种子5 类型变异植物对复杂生态条件和特殊环境变化的综合反应植物生命活动的“三性”v植物的整体性v植物和环境的统一性v植物的变化发展性Ø植物生命活动的特殊性1 有无限生长的特性2 生活的自养性3 植物细胞的全能性和植株的再生能力强4 具有较强的抗性和适应性5 植物对无机物的固定能力强6植物具有发达的维管束植物生理学的内容1、植物细胞结构及功能生理﹕2、代谢生理：水分代谢、矿质营养、光合作用、呼吸作用等3、生长发育生理：种子萌发、营养生长生理、生殖生理、成熟衰老4、环境生理（抗性生理）以上的基本关系光合、呼吸作用→生长、分化水分、矿物质运输发育、成熟(功能代谢生理) (发育生理)↖↗环境因子（抗性生理）(温、光、水、气)二植物生理学的产生与发展（一）萌芽阶段（16以前世纪）*甲骨文：作物、水分与太阳的关系*战国时期：多粪肥田*西汉：施肥方式*西周：土壤分三等九级*齐民要术：植物对矿物质及水分的要求轮作法、“七九闷麦法”（1）科学植物生理学阶段1.科学植物生理学的开端（17~18世纪）1627年，荷兰 Van Helmont ，水与植物的关系1699年，英国Wood Ward，营养来自土壤和水18世纪，Hales,植物从大气获得营养1771年，英国Priestley发现植物绿色部分可放氧2年，瑞士 De Saussure，灰分与生长的关系2.植物生理学的奠基与成长阶段（19世纪）Ø1840年，德国Liebig建立矿质营养说。
植物生理学实验(考研复试专用)
植物生理学实验讲义吴恩岐内蒙古师范大学生命科学与技术学院2007.4实验1 植物组织水势的测定（小液流法）一、目的学会用小液流法测定植物组织的水势二、材料用具及仪器药品花生叶片、试管、移液管（10ml, 0.1ml）、吸球、镊子、小方块、钻孔器、牙签、玻棒、蔗糖、次甲基蓝三、原理当把植物组织或细胞放在溶液中时，两者便会发生水分交换。
如果植物组织（或细胞）的水势低于溶液的水势，组织（或细胞）则吸水，使外溶液浓度增大，比重也增大；若植物组织（或细胞）的水势高于溶液的水势时，组织（或细胞）则失水，使溶液的浓度变小，比重也变小；如果植物组织（或细胞）的水势与溶液的水势相等时，外溶液的浓度不变，其比重也不变，若把浸过组织的溶液慢慢滴回同一浓度而未浸过组织或细胞的溶液中。
比重小的液流便往上浮，比重大的则往下沉。
如果小液流停止不动，则说明溶液的浓度未有发生改变。
此溶液的渗透势（水势）即等于所测组织（或细胞）的水势。
根据溶液的浓度，可以用公式（ψs=-CiRT）, 计算出溶液的渗透势（ψw so1=ψs so1）ψs表示渗透势。
R表示气体常数：0.0083 MPa·l/mol·K。
T表示绝对温度，即273+实验时(℃)i表示解离系数。
四、方法步骤1．将1mol/L蔗糖溶液的母液分别配成0.1、0.2、0.3、 0 4、0.5、0.6mol/L的蔗糖溶液各10ml，分别注入6支大试管中，摇匀。
2．从上述的大试管中各取2ml溶液，分别放到另6支小试管中，各试管塞上软木塞。
3．用钻孔器钻取叶圆片（花生叶、菠菜均可），依次分别在小试管的蔗糖溶液中各放入叶圆片40片（钻孔器的直径为6mm），叶圆片要全部浸在溶液中，塞上塞子，每隔5分钟摇动一次。
4．30分钟后，用牙签取次甲基蓝结晶少许，分别投入小试管中，摇匀。
5．用0.1ml的移液管从小试管中吸取溶液约0.1ml，然后将之插之相对应浓度的大试管中的中部，慢慢放出蓝色液，并观察记录小液流的流向，从中找出小液流停止不动的该溶液的浓度（每一浓度配备0.1ml移液管一支）。
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植物生理学实验（第一版）目录实验一质壁分离法测定植物组织的渗透势 (2)实验二植物体内硝态氮含量的测定 (4)实验三叶绿素a，b含量的测定 (5)实验四赤霉素对水稻α--淀粉酶的诱导形成 (6)实验五植物呼吸强度的测定 (7)实验六种子活力的快速测定—氯化三苯基四氮唑(TTC)法及红墨水法 (8)实验七丙二醛含量的测定 (11)实验一质壁分离法测定植物组织的渗透势[实验目的]观看植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生进程及其用于测定植物组织渗透势的测定[实验原理]原生质层（细胞膜、原生质、液泡膜）具有选择透过性，近似于半透膜，一个成熟的植物细胞确实是一个完整的渗透装置：当外界溶液浓度大于细胞液浓度时(高渗溶液），细胞失水，发生质壁分离；当外界溶液浓度小于细胞液浓度时（低渗溶液），细胞吸水；当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平稳状态，当外界溶液浓度等于细胞液浓度时（等渗溶液），植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。
细胞水势等于细胞液的渗透势等于外界溶液渗透势。
将植物组织置于对其无迫害的一系列不同浓度的溶液里处置一按时刻，然后镜检发生质壁分离的情形，细胞的等渗浓度将界于方才引发初始质壁分离的浓度和不能引发质壁分离的浓度之间。
代入公式即可计算渗透势。
[材料、器材与试剂]1 实验材料洋葱表皮2 实验仪器显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，刀片，培育皿，记号笔，滴管。
3 实验试剂别离配制、、、、、、、、L的蔗糖溶液，贮9个试剂瓶中。
称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1mol/L(母液)。
再配制成以下各类浓度：L：吸母液25ml+水25mlL：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水[方式与步骤]1. 取6套干净清洁的小培育皿，用记号笔编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培育皿中使成一薄层，盖好皿盖。
3.选用有色素的洋葱鳞片的外表皮迅速别离投入各类浓度的蔗糖溶液中，每一个培育皿中放材料3个左右，使其完全浸没，浸泡20分钟左右。
4. 到时后，掏出表皮，放在载玻片上，滴一滴相同浓度的蔗糖，盖上盖玻片，在显微镜下观看质壁分离的细胞数若是所有的细胞都产生质壁分离现象，那么取低浓度溶液中的制片做一样的观看，并记录质壁分离的相对程度。
5. 在实验中确信一个引发半数以上细胞原生质方才从细胞壁角隅上分离的最低浓度，和不引发质壁分离的最高浓度。
6. 在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几回，直到有把握为止。
在此条件下，细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。
求得C1按下式计算渗透势ψπ =-iRTC1ψπ为细胞渗透势(bar)；R为气体常数*105L.Pa/mol·K)；T为绝对温度(273+t℃)；i解离系数，蔗糖为1；C1等渗溶液的质量摩尔浓度，单位是mol/kg；实验二植物体内硝态氮含量的测定[实验目的]硝态氮是植物最要紧的氮源。
植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供给情形，因此可作为土壤肥氮肥的指标。
测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情形，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
[实验原理]在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反映，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在必然范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。
[材料、器材与试剂]1 实验材料白菜叶片。
2 实验仪器722型分光光度计、电子天平。
3 实验试剂（1） 500ppmNO3-标准溶液精准称取烘至恒重的KNO3 0.7221克溶于无离水中，定容至200ml。
（2） 5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100ml，浓硫酸中（密度为1. 84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中。
置冰箱保留一周有效。
（3）8%氢氧化纳溶液称取10克氢氧化纳溶于1升无离子水中即可。
[实验步骤]1. 标准曲线的制作（1）吸取500ppmNO3-标准溶液1ml. 2ml. 3ml. 4ml. 6ml. 8ml. 10ml. 12ml别离放入501ml容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成10、20、30、40、60、80、100、120ppm的系列标准溶液。
（2）吸收上述系列标准溶液，别离放入刻度试管中，以无离子水代替标准溶液作空白，再别离加入水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20分钟后再加入8%NaOH溶液9. 51ml摇匀冷却至室温，显色液整体积为101ml。
（3）以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度。
以NO3-N浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品中硝酸盐的测定（1）样品液的制备，取一定量的植物材料剪碎混匀后，精确称取2-3克别离放入三支刻度试管中，加入10ml无离子水，用玻璃塞封口，置入滚水浴中提取30分钟，到时刻后掏出，用自来水冷却，将是取液过滤到25ml容量瓶中，并反复冲洗残渣，最的定容至刻度。
（2）样口液的测定吸取样品ml分别于三支刻度试管中，然后加入5%水杨酸一硫酸溶液ml，混匀后置室温下20分钟，再慢慢加入9. 5 ml 8%NaOH溶液，待冷却至室温后，以空白作参比，在410nm波长下测期吸光度。
在标准曲线上查得或用回归方程计算出NO3-—N浓度，再用下公式计算其含量。
实验三叶绿素a、b含量的测定[实验目的]熟悉在未经分离的叶绿体色素溶液中测定叶绿素a和b的方式及其计算。
[实验原理]若是混合液中的两个组分，它们的光谱吸收峰尽管有明显的不同，但吸收曲线彼此有重叠，在这种情形下要别离测定两个组分，可依照朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律，通过代数方式，计算一种组分由于另一种组分存在时对光密度的阻碍，最后别离取得两种组分的含量。
依照叶绿素a和b的吸收光谱曲线，叶绿素a的最大吸收峰在663nm，叶绿素b的最大吸收峰在645nm, 吸收曲线彼此又有重叠。
依照朗伯-比尔定律，最大吸收光谱峰不同的两个组分的混合液，它们的浓度C与光密度OD 之间有如下关系：OD1=C a·k a1+C b·k b1(1) OD2=C a·k a2+ C b·k b2 (2)式中，k a1、k a2、k b1、k b2别离为组分a、b在浓度1g/L时，对应波长为λ1、λ2、λ1、λ2时的光密度OD值，即比吸收系数。
波长/nm 叶绿素a 叶绿素b663645将表中数值代入（1）、（2）式，并解方程可得：C a= (3) C b = (4).将单位改成mg/L，于是总叶绿素浓度为C T= C a +C b= OD663+ OD645 (5)[器材与试剂]1 实验仪器高级型分光光度计，离心机，天平，剪子，研钵，漏斗，移液管等。
2 实验试剂丙酮，碳酸钙，石英砂。
3 实验材料大叶黄杨叶片。
[实验步骤]称取新鲜叶片0.5g —→加纯丙酮5ml研磨成匀浆—→再加80%丙酮5ml，并转入离心管—→ 充分洗涤研钵—→ 离心—→ 定容至20 ml —→取上述提取液1ml，加80%丙酮4ml稀释后转入比色杯中，以80%丙酮为对照，测定光密度—→计算各种浓度（C a、C b）。
[注意事项]1 由于植物叶子中含有水分，故先用纯丙酮进行提取，以使色素提取液中丙酮的最终浓度近似80%。
2 由于叶绿素a、叶绿素b的吸收峰很陡，仪器波长稍有误差，就会使结果产生专门大的误差。
实验作业1 什么缘故提取色素时先用纯丙酮提取，再用80%丙酮提取？2 依照你的实验结果计算出该种植物的叶绿素a、b的比值。
3. 依照你的实验结果，计算出该植物每克鲜重叶片中叶绿素的含量（单位用mg·g-1FW表示）实验四赤霉素对水稻α-淀粉酶的诱导形成[实验目的]1．通过实验深切了解赤霉素在种子萌生进程中的调控作用。
2．把握测定α-淀粉酶活的一种简便方式[实验原理]淀粉性种子在萌动进程中，胚释放出来的赤霉素能诱导糊粉层细胞中α-淀粉酶基因的表达，引发α-淀粉酶生物合成，并分泌到胚乳中催化淀粉水解为糖。
外源赤霉素能代替胚的分泌作用，诱导α-淀粉酶的形成。
β-淀粉酶也能将淀粉水解成还原糖，但β-淀粉酶不耐热，在高温下易钝化。
将酶液在高温下维持一段时刻，钝化β-淀粉酶，可准确测定α-淀粉酶的活性。
[材料、仪器设备及试剂]1 实验材料：水稻种子2 实验仪器设备：1. 分光光度计；2. 恒温箱；3. 水浴锅；4. 移液管；5. 烧杯；6. 试管；7. 青霉素小瓶；8. 镊子；9. 刀片。
3 实验试剂：2mol/LNaOH溶液；1%淀粉溶液；20mg/L赤霉素溶液；L柠檬酸缓冲液；2，3，5-二硝基水杨酸（DNS）试剂[实验步骤]1.水稻种子的选择和预处置选取大小一致、健康的水稻种子，一份放入盛有适量的20mg/LGA溶液中，另一份放入盛有适量清水的培育皿中处置24h,掏出后用清水冲洗，置于培育箱中再陪养1d，处置与培育温度均为300C。
2.酶的提取取对照和GA3处置培育的种子2g→磨成匀浆→到入50ml容量瓶中→用蒸馏水定容至刻度→混匀→放置15-20min（每2min震荡一次）→离心（4000r/min,15min）3.α-淀粉酶活性的测定取试管4只→编号（清水实验；清水调零；GA3实验；GA3调零）→每管中各加入酶液1ml→700C恒温水浴加热12min→各加入1ml柠檬酸缓冲液→①将实验管置于400C恒温水浴15min→再迅速加入预热的淀粉溶液2ml→400C恒温水浴5min→加入NaOH溶液终止反映；②调零管中加入2mol/LNaOH溶液→混匀→加入预热的淀粉溶液2ml.4.样品的测定取以上各管中的溶液1ml于15ml刻度试管中→加入DNS试剂1ml→混匀→滚水煮沸5min→迅速冷却→定容至12ml→520nm波长测定OD值。
[结果计算]α-淀粉酶活性=（OD520×稀释倍数）/样品鲜重/反映时刻实验五植物呼吸强度的测定[实验目的]熟悉小篮子法测定萌生水稻种子呼吸强度的方式及其计算。
[实验原理]利用NaOH溶液滴定呼吸进程中释放的CO2，实验终止后，用草酸溶液滴定残留的NaOH，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差，即可计算出呼吸进程中释放的CO2的量。
C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O2NaOH+CO2→Na2CO3+H2O2NaOH+C2H2O4(草酸) →Na2C2O4(草酸钠)+2H2O[材料、器材和试剂]1.实验仪器锥形瓶，秒表，酸式滴定管，移液管，尼龙网袋2个。
2.实验试剂1/44mol/L草酸溶液，0.2M NaOH溶液，1%酚酞。
3.实验材料萌生的水稻种子（48h）。