江南大学1990-2009年生物化学历年真题部分问答题答案
考研生物化学重点问答题,内附参考答案
生物化学问答题（一）ELISA的基本原理？答：EILSA主要是基于抗原或抗体能吸附至固相载体的表面并保持其免疫活性，抗原或抗体与酶形成的酶结合物仍保持其免疫活性和酶催化活性的基本原理。
在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应，用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量有一定的比例，加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。
6. ELISA的优点和影响因素？答：ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。
不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于血清流行病学调查。
影响结果的主要因素：1．试剂的因素: 不要用无批号的试剂，最好选用与仪器配套的试剂。
更不要使用过期的试剂和混用不同批号的试剂。
2.样本的因素：内源性干扰因素，包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等。
3.外源性干扰因素：包括标本溶血、标本被细菌污染、标本保存时间过长和标本凝固不全等。
4．操作中的因素; 加样; 温育时间、温度的选择; 洗板; 显色,结果判定列出5种常用蛋白质分离和纯化技术，并说明它们分别根据蛋白质的什么特性？答：（一）根据蛋白质溶解度不同的分离方法蛋白质的盐析：将大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子（如硫酸铵的SO4和NH4)有很强的水化力，可夺取蛋白质分子的水化层，使之“失水”，于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出。
（二）根据蛋白质分子大小的差别的分离方法1.凝胶过滤法：这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。
柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶（Sephadex ged）和琼脂糖凝胶（agarose gel）。
2.透析与超滤：透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。
生化-1990年江南大学硕士生招生生物化学命题A
7、组氨酸的pK1= 1.82，pK2= 6.0，pK3= 9.17，则其等电点为（）
A.5.495 B.6.0C.3.91D.7.85
8、蛋白质分子中常见的20种氨基酸中，带有两个手性碳原子的氨基酸是（）
A.苏氨酸和异亮氨酸B.甘氨酸和丙氨酸
C.苯丙氨酸和酪氨酸D.缬氨酸和蛋氨酸
基本单位
各单位间连结键
三、改错（40分）下列叙述都有错处，请作简明扼要的修正。
1、
2、
3、直链淀粉分子和支链淀粉分子一样都只有一个非还原性末端。
4、支链淀粉和糖原互为同分异构体。
5、
6、丙酮酸是酮酸，而乙酰乙酸不是酮酸。
7、
8、1g油脂样品能吸收100毫克碘，则该样品的碘值为100。
9、某大麦样品0.5克，经用凯氏定氮法测得其含氮量为8毫克，则该大麦样品的粗蛋白含量为1.6%。
6、写出葡萄糖由酵母进行酒精发酵的总反应式，且计算理论产率。
（原子量C=12,O=16,H=1）
15、甲、乙两厂有一相同的酶产品，甲厂的酶活力为1000单位/克酶制剂，乙厂的酶活力为2000单位/克酶制剂（两厂酶活力单位含义相同），则得知甲厂的酶制剂的比活力一定比及乙厂的酶制剂的比活力。
16、
17、β-淀粉酶可以催化淀粉分子使其全部水解成麦芽糖。
18、米氏常数Km是酶的特性常数，所以每一种酶都只有一个Km值。
A.腺嘌呤B.鸟嘌呤C.胞嘧啶D.尿嘧啶
11、DNA结构的沃森-克里克模型说明（）
A.DNA为三股螺旋结构B.DNA为双股螺旋结构
C.碱基之间形成共价键D.磷酸-核糖骨架位于螺旋内部
12、下列哪一种维生素是辅酶A的前体（）
生化大题问答题含答案解析-大全精华必备
．什么是生物化学？它的研究对象和目的是什么？答：①生物化学是研究生物体内化学分子和化学反应的基础生命科学，从分子水平探讨生命现象的本质。
②生物化学的研究对象是生物体的分子，研究目的是从分子水平探讨生命现象的本质。
2．什么是分子生物学？它与生物化学的关系是什么？答：①分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构、功能及基因结构、表达与调控的科学。
②分子生物学是生物化学的重要组成部分，是生物化学的发展和延续。
3．当代生物化学与分子生物学研究的主要内容是什么？生物化学与分子生物学和医学的关系是什么？答：①当代生物化学与分子生物学研究的主要内容是：生物分子的结构和功能、物质代谢及其调节、基因信息传递及其调控等三方面。
②生物化学与分子生物学是重要的医学基础学科，与医学的发展密切相关、相互促进。
各种疾病发病机制的阐明，诊断手段、治疗方案、预防措施等的实施，无一不依据生物化学与分子生物学的理论和技术。
生物化学与分子生物学的发展必将对基础医学、临床医学、预防医学、护理学、影像学、检验学和药学等领域产生重大影响。
蛋白质1．生物样品的含氮量能表示其蛋白质含量，为什么？试验中是如何计算的。
答：由于蛋白质是体内的主要含氮物，且平均含氮量为16%，因此测定生物样品的含氮量就可以按照下列公式推算出蛋白质的大致含量：每克样品含氮克数×6.25×100=100g样品中蛋白质含量（g%）2．什么是蛋白质的两性解离？利用此性质分离纯化蛋白质的常用方法有哪些？答：蛋白质分子除了两端的氨基和羧基可解离外，氨基酸残基侧链中某些基团，如谷氨酸残基中的γ-羧基、天冬氨酸残基中的β-羧基、赖氨酸残基中的ε-氨基、精氨酸残基中的胍基和组氨酸残基中的咪唑基，在一定的pH条件下均可解离成带负电荷或正电荷的基团，此种性质称蛋白质的两性解离。
利用蛋白质的两性解离性质分离纯化蛋白质的常用方法有用电泳法和离子交换层析法。
3．简述蛋白质的一、二、三、四级结构的概念及其维持稳定的化学键。
江南大学历年考研试卷
名词解释97年1原生质体原生质体 2芽孢芽孢 3菌落菌落 4诱导酶诱导酶 5生长因素生长因素 6回复突变回复突变 7诱导诱导 8拮抗拮抗 9血清学反应血清学反应 10巴斯德效应巴斯德效应98年1芽孢芽孢 2菌落菌落 3质粒质粒 4回复突变回复突变 5生长因子生长因子 6诱导酶诱导酶 7拮抗拮抗 8巴斯德效应巴斯德效应 9光复活作用光复活作用 10活性污泥活性污泥99年1原生质体原生质体 2菌落菌落 3质粒质粒 4芽孢芽孢 5诱导酶诱导酶 6生长因子生长因子 7巴斯德效应巴斯德效应 8营养缺陷型营养缺陷型 9 BOD 10血清学反应血清学反应 00年1温和性噬菌体温和性噬菌体 2巴斯德效应巴斯德效应 3 艾姆斯试验（Ames test） 4 ELISA 5 PCR 01年1类毒素类毒素 2暗修复作用暗修复作用 3巴斯德效应巴斯德效应 4 诱导酶诱导酶02年1转化转化 2 半抗原半抗原 3活性污泥活性污泥 4回复突变回复突变 5 PCR 填空 97年1微生物生长的特点是：―――――微生物生长的特点是：――――― 生长旺、繁殖快。
生长旺、繁殖快。
2微生物的学名是由－和－所组成微生物的学名是由－和－所组成 属名属名 种名加词种名加词3细菌革兰氏染色的主要原理是－。
影响染色的主要因素是－和－，革兰氏染色后为红色的是－是－4酵母菌是－，其无性繁殖方式是－和－芽殖、裂殖，有性繁殖是－酵母菌是－，其无性繁殖方式是－和－芽殖、裂殖，有性繁殖是－ 形成子囊和子囊孢子形成子囊和子囊孢子 5霉菌产生的无性孢子有―――霉菌产生的无性孢子有―――6噬菌体的特点是－－－，其生长繁殖过程包括－－－－－五个步骤。
噬菌体的特点是－－－，其生长繁殖过程包括－－－－－五个步骤。
7培养基按用途可分为－－－－－培养基按用途可分为－－－－－ 基础、加富、选择、鉴别~ 8根据生长和O 2的关系，大多数酵母属于－，大多数霉菌属于－的关系，大多数酵母属于－，大多数霉菌属于－9影响微生物生长的延滞期长短的因素有－－－等影响微生物生长的延滞期长短的因素有－－－等10光复活作用是指－－－－四种情况光复活作用是指－－－－四种情况11染色体畸变是指－－－－四种情况染色体畸变是指－－－－四种情况12大肠杆菌是指－食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是－大肠杆菌是指－食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是－13影响微生物的抗热性的因素是－－－－－影响微生物的抗热性的因素是－－－－－14 BOD 是指－是指－15在空气中能较长时间的微生物类群是－－特点是－在空气中能较长时间的微生物类群是－－特点是－16培养时，培养皿倒置是为了－和－培养时，培养皿倒置是为了－和－17平板菌落计数法结果表达中常用的“clu ”的意思是－”的意思是－98年1微生物的特点是－－－－－微生物的特点是－－－－－2微生物的学名有－和－所组成微生物的学名有－和－所组成3细菌革兰氏染色的主要原理是－影响染色的主要因素是－和－，细菌革兰氏染色的主要原理是－影响染色的主要因素是－和－，革兰氏染色后为红色的是革兰氏染色后为红色的是－菌－菌4霉菌产生的无性孢子是－－－霉菌产生的无性孢子是－－－5微生物的培养基按用途可分为－－－－－微生物的培养基按用途可分为－－－－－6根据生长和氧气的关系，大多数酵母属于－，大多数霉菌属于－根据生长和氧气的关系，大多数酵母属于－，大多数霉菌属于－7影响微生物生长的延滞期长短的因素有－－－等影响微生物生长的延滞期长短的因素有－－－等8染色体畸变有－－－－四种情况染色体畸变有－－－－四种情况9影响微生物的抗热性的因素是－－－－－影响微生物的抗热性的因素是－－－－－10在空气中能较长时间的微生物类群是－－特点是－在空气中能较长时间的微生物类群是－－特点是－11培养时，培养皿倒置是为了－和－培养时，培养皿倒置是为了－和－12平板菌落计数法结果表达中常用的“clu”的意思是－”的意思是－13 BOD是指－是指－2000年1影响革兰氏染色结果的因素是－－－，E.coli属于－性菌，染色结果为－色属于－性菌，染色结果为－色2生长因子是－，主要包括－－－生长因子是－，主要包括－－－3影响微生物生长的延滞期的主要因素是－－－影响微生物生长的延滞期的主要因素是－－－4根据微生物生长和氧气的关系，可分为－－－三大类型。
2009年江南发酵考研微生物试题及答案
2009江南大学微生物(发酵)一判断题1、一般情况下，在土壤中细菌的总数和生物量往往都是高的。
×2、青霉素抑制肽聚糖分子中肽桥的形成，因此对于生长旺盛的细胞明显的抑制作用，而对于休止细胞无抑制作用。
√3、芽孢在适宜条件下可以萌发成为营养细胞，但芽孢不是细菌的繁殖方式。
√4、发酵是一种没有外源电子受体的生物氧化方式。
√5、有鞭毛细菌去除CW后鞭毛失去了着生位点，从而将失去运动能力。
×6、好氧处理能更快的分解废水中的有机物，因此废水中的有机物浓度越高，越适于采用好氧方式处理。
×7、啤酒酿造的发酵温度与酿酒酵母的最适生长温度基本上是一致的。
×8、通常在耐氧厌氧微生物与兼性厌氧微生物细胞中都有SOD酶和H2O2酶。
×9、已经发现的嗜高温微生物都是古生菌，他们的最适生长温度一般要高于80度。
√10、EMB培养基中，伊红美兰有促进E,coli生长的作用。
×11、两株具有不同营养缺陷型标记的霉菌进行准性生殖时，所形成的异核体和杂合二倍体的分生孢子在基本培养基上都能够形成。
×12、无义突变是指不造成任何遗传效应的无意义突变。
×13、SOS修复系统是诱导产生的一种修复体系，他是一种倾向差错的修复。
√14、Ames试验是利用细菌突变来检查环境中存在的致癌物质是一种简便、快捷、灵敏的方法。
可以通过某待测物质对微生物的诱变能力间接判断其致癌能力。
√15、亚硝酸、羟胺和5-溴尿嘧啶都能诱发碱基置换，因此在大多数情况下。
他们诱发的突变都可以被他们自己诱发而得以回复。
×二.名词解释(10个一个三分)1.转导噬菌体：指能够将供体基因组入受体细胞内的噬菌体，一般为溶源性噬菌体。
2.巴斯德效应：在有氧情况下，由于呼吸作用，酒精产量大大下降，糖的消耗速率大幅减慢，氧的吸收抑制发酵的想象。
对酵母菌而言，乙醇发酵属于厌氧发酵，如果将厌氧条件改为好氧条件，葡萄糖分解效率降低，发酵停止的现象。
江南大学1990-2009年生物化学历年真题部分问答题答案
1、五只试剂瓶中分别装的是核糖、葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉溶液，试用最简便的化学方法鉴别。
答：依次使用下列化学试剂进行鉴定2、某一已纯化的蛋白无SDS的凝胶电泳图如下所示，两种情况下的电极槽缓冲液都为8.2 从下面两副图给出的信息，有关纯化蛋白的结构你能得出什么结论？该蛋白的PI是大于还是小于？答：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质时主要是根据各组分的pI的差别。
图（a）的结果只呈现单一的带，根据题中给出的条件，表明该蛋白质是纯净的。
由于SDS是一种带负电荷的阴离子去垢剂，并且具有长长的疏水性碳氢链。
它的这种性质不仅使寡聚蛋白质的亚基拆离，而且还能拆开肽链的折叠结构，并且沿伸展的肽链吸附在上面。
这样，吸附在肽链上的带负电荷的SDS分子使肽链带净负电荷，并且吸附的SDS量与肽链的大小成正比。
结果是，不同大小的肽链将含有相同或几乎相同的q/r值。
由于聚丙烯酰胺凝胶基质具有筛分效应，所以，分子较小的肽链将比较大的、但具有相同的q/r值的肽链迁移得更快。
若蛋白质是由单一肽链或共价交联的几条肽链构成（在不含β-巯基乙醇的情况下），那么在用SDS处理后进行SDS-PAGE，其结果仍是单一的一条带。
若蛋白质是由几条肽链非共价结合在一起，在用SDS处理后进行SDS-PAGE，则可能出现两种情况：一种仍是一条带，但其位置发生了变化（迁移得更快），表明此蛋白质是由几条相同的肽链构成，另一种可能出现几条带，则可以认为该蛋白质是由大小不同的几条肽链构成。
图（b）的结果表明该蛋白质是由两种大小不同的肽链借非共健结合在一起的寡聚体蛋白质。
从图（b）的电泳结果我们可以断定该蛋白质的等电点低于。
3、含有以下四种蛋白质混合物：A，分子量12000，pI=10；B，分子量62000 ，pI=3；C，分子量28000，pI=7；D，分子量9000，pI=5。
若不考虑其他因素，当它们（1）流过DEAE-纤维素阴离子交换柱时，用线性盐洗脱时。
生物化学题库参考答案(江南大学)
生物化学题库参考答案其实我也不知道我是怎么过的...8缩1吧一、名词解释1．T m：指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。
不同序列的DNA，Tm值不同。
DNA 中G－C含量越高，Tm值越高，成正比关系。
2．氧化磷酸化：电子从一个底物传递给分子氧的氧化与酶催化的由ＡＤＰ和Ｐi生成ＡＴＰ与磷酸化相偶联的过程。
3、复性：在一定的条件下，变性的生物大分子恢复成具有生物活性的天然构象的现象。
4、减色效应：随着核酸复性，紫外吸收降低的现象。
5、半保留复制：DNA复制的一种方式。
每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA，每个分子都是由一条亲代链和一条新合成的链组成。
6、盐溶：在盐浓度很低的范围内，随着温度的增加蛋白质溶解度升高的现象叫做盐析。
7、激活剂：凡是能提高酶活性的物质，都称激活剂，其中大部分是离子或简单的有机化合物。
8．呼吸链：是指有机物在生物氧化过程中，底物脱下的氢（H++e-）经过一系列传递体传递，最后与氧结合生成H2O的电子传递系统，又称呼吸链。
9．维生素：是一类动物本身不能合成，但对动物生长和健康又是必需的有机物，所以必需从食物中获得。
许多辅酶都是由维生素衍生的。
10．酶的活性中心：酶分子中直接与底物结合，并与酶催化作用直接有关的区域。
11．酶变性：12．DNA变性：DNA双链解链，分离成两条单链的现象。
13．遗传密码：DNA（或mRNA）中的核苷酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对应关系称为遗传密码。
14．蛋白质二级结构：在蛋白质分子中的局布区域内氨基酸残基的有规则的排列。
常见的有二级结构有α-螺旋和β-折叠。
二级结构是通过骨架上的羰基和酰胺基团之间形成的氢键维持的。
15．退火：既DNA由单链复性、变成双链结构的过程。
来源相同的DNA单链经退火后完全恢复双链结构的过程，同源DNA之间`DNA和RNA之间，退火后形成杂交分子。
16、底物水平磷酸化：ADP或某些其它的核苷-5′—二磷酸的磷酸化是通过来自一个非核苷酸底物的磷酰基的转移实现的。
生物化学问答题(附答案)
生物化学问答题（附答案）生物化学解答题(一档在手万考不愁)整理:机密下载有淀粉酶制剂1g，用水溶解成1000ml酶液，测定其蛋白质含量和粉酶活力。
结果表明，该酶液的蛋白质浓度为0.1mg/ml；其1ml的酶液每5min分解0.25g 淀粉，计算该酶制剂所含的淀粉酶总活力单位数和比酶活（淀粉酶活力单位规定为：在最适条件下，每小时分解1克淀粉的酶量为一个活力单位）。
答案要点：①1ml的酶液的活力单位是60/5×0.25/1=3（2分）酶总活力单位数是3×1000=3000U（1分）②总蛋白是0.1×1000=100 mg（1分）,比活力是3000/100=30（1分）。
请列举细胞内乙酰CoA的代谢去向。
（5分）答案要点：三羧酸循环；乙醛酸循环；从头合成脂肪酸；酮体代谢；合成胆固醇等。
（各1分）酿酒业是我国传统轻工业的重要产业之一，其生化机制是在酿酒酵母等微生物的作用下从葡萄糖代谢为乙醇的过程。
请写出在细胞内葡萄糖转化为乙醇的代谢途径。
答案要点：在某些酵母和某些微生物中，丙酮酸可以由丙酮酸脱羧酶催化脱羧变成乙醛，该酶需要硫胺素焦磷酸为辅酶。
乙醛继而在乙醇脱氢酶的催化下被NADH还原形成乙醇。
葡萄糖+2Pi+2ADP+2H+ 生成2乙醇+2CO2+2ATP+2H2O（6分）脱氢反应的酶： 3-磷酸甘油醛脱氢酶（NAD＋），醇脱氢酶（NADH+H+）（2分）底物水平磷酸化反应的酶：磷酸甘油酸激酶，丙酮酸激酶（Mg2+或K+）（2分）试述mRNA、tRNA和rRNA在蛋白质合成中的作用。
答案要点：①mRNA是遗传信息的传递者，是蛋白质生物合成过程中直接指令氨基酸掺入的模板。
（3分）②.tRNA在蛋白质合成中不但为每个三联体密码子译成氨基酸提供接合体，还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供运送载体。
(4分) ③. rRNA与蛋白质结合组成的核糖体是蛋白质生物合成的场所（3分）。
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1、五只试剂瓶中分别装的是核糖、葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉溶液，试用最简便的化学方法鉴别。
答：依次使用下列化学试剂进行鉴定2、某一已纯化的蛋白无SDS的凝胶电泳图如下所示，两种情况下的电极槽缓冲液都为8.2 从下面两副图给出的信息，有关纯化蛋白的结构你能得出什么结论？该蛋白的PI是大于还是小于？答：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质时主要是根据各组分的pI的差别。
图（a）的结果只呈现单一的带，根据题中给出的条件，表明该蛋白质是纯净的。
由于SDS是一种带负电荷的阴离子去垢剂，并且具有长长的疏水性碳氢链。
它的这种性质不仅使寡聚蛋白质的亚基拆离，而且还能拆开肽链的折叠结构，并且沿伸展的肽链吸附在上面。
这样，吸附在肽链上的带负电荷的SDS分子使肽链带净负电荷，并且吸附的SDS量与肽链的大小成正比。
结果是，不同大小的肽链将含有相同或几乎相同的q/r值。
由于聚丙烯酰胺凝胶基质具有筛分效应，所以，分子较小的肽链将比较大的、但具有相同的q/r值的肽链迁移得更快。
若蛋白质是由单一肽链或共价交联的几条肽链构成（在不含β-巯基乙醇的情况下），那么在用SDS处理后进行SDS-PAGE，其结果仍是单一的一条带。
若蛋白质是由几条肽链非共价结合在一起，在用SDS处理后进行SDS-PAGE，则可能出现两种情况：一种仍是一条带，但其位置发生了变化（迁移得更快），表明此蛋白质是由几条相同的肽链构成，另一种可能出现几条带，则可以认为该蛋白质是由大小不同的几条肽链构成。
图（b）的结果表明该蛋白质是由两种大小不同的肽链借非共健结合在一起的寡聚体蛋白质。
从图（b）的电泳结果我们可以断定该蛋白质的等电点低于。
3、含有以下四种蛋白质混合物：A，分子量12000，pI=10；B，分子量62000 ，pI=3；C，分子量28000，pI=7；D，分子量9000，pI=5。
若不考虑其他因素，当它们（1）流过DEAE-纤维素阴离子交换柱时，用线性盐洗脱时。
（2）流经SephadexG-75凝胶过滤柱时，这些蛋白质的洗脱顺序如何？阴离子交换柱起始pH可选择什么范围。
答：（1）流过DEAE-纤维素阴离子交换柱时，洗脱下柱的顺序为等电点依次下降的顺序：A→C→D→B。
阴离子交换柱最先洗脱下来的是碱性蛋白质，然后中性蛋白质，最后酸性蛋白质。
（2）流经SephadexG-75凝胶过滤柱时，按相对分子质量从大到小的顺序被洗脱下来：B→C→A→D。
PH范围：3<PH<104、请解释什么是酶的活力和比活力，并说出这两个指标在酶的纯化过程中可以说明什么。
（我觉得第一种答法太啰嗦了，是别人整理的，可以就第二种那样答吗？）答：酶活力也叫酶活性，可以用酶活力单位表示，国际酶活力单位（U）的定义是在最适条件下，1min 内转化1μ mol底物所需要的酶量，或者是转化1μ mol的有关基因的酶量（1 IU=1μ mol/min）。
另一个酶活力国际单位（Kat）的定义为：在最适条件下，每秒钟能催化1mol底物转化为产物所需的酶量（1Kat=1 mol/S）。
酶活力是由酶催化一定反应的能力决定的，只是酶催化能力的大小，没有具体量的概念，酶活力与总体积或总质量的乘积所代表的总活力则引入量的概念。
每一纯化步骤后存留的总酶活力占化步骤后存留的总酶活力占第一次总活力的百分比可以反映回收率。
比活力是指单位质量（mg蛋白）的酶制剂的酶活力单位数，酶的比活力反应酶的纯度，以及计算纯化倍数。
判断酶分离纯化的优劣有两个指标来衡量，一是总活力的回收；二是比活力提高的倍数。
总活力的回收表示提纯过程中酶的损失情况，活力提高的倍数表示提纯方法的有效程度。
答：酶活力：酶活力是指酶催化某一化学反应的能力，酶活力的大小可以用在一定条件下所催化的某一化学反应的反应速率来表示。
酶活力反应的是反应速率。
在纯化过程中表示酶活力的损失程度。
酶的比活力代表酶的纯度，比活力用每mg蛋白质所含的酶活力单位数表示。
表明纯化过程中纯化的程度。
（可以）5、有一份核酸样品，可能含有少量蛋白质，只允许测定一种元素即可确定其有无蛋白质污染，您选哪一种元素，为什么？答：确定有无蛋白质污染，只需测定样品中是否含有只存在于蛋白质而不存在核酸的元素，如果样品有此元素存在，很明显说明存在蛋白质污染，满足此条件的是硫（S），核酸一般不含硫，而大多数蛋白质含硫。
6、某种溶液中含有三种三肽：Tyr-Arg-Ser，Glu-Met-Phe和Asp-Pro-Lys，α-COOH基团的pK a为；α-NH3基团的pK a为。
在哪种pH（或）下，通过电泳分离这三种多肽的效果最好。
（10分）答：效果好。
能提供更好的分辨率。
时，3种肽（Tyr-Arg-Ser，Glu-Met-Phe和Asp-Pro-Lys）都带有不同的电荷，净电荷分别是+1、-1和0；而在pH 2.0时净电荷分别是+2、+1和+2；在时净电荷分别是-2、-2和-2。
7、比较底物水平磷酸化和氧化磷酸化的主要异同点。
答：底物水平磷酸化是指产物氧化还原反应过程中，分子内部能量重新分布，使无机磷酸酯化。
形成高能磷酯健，后者在酶的作用下能将能量转给ADP，生成ATP；氧化磷酸化是指与生物氧化相偶联的磷酸化作用，发生在线粒体中，生物氧化过程中的电子传递在线粒体内膜两侧产生了H+浓度差，H+顺浓度差流动时推动了ATP的生成，能量的最终来源是代谢过程中产生的还原型辅酶所含的化学能。
8、什么是蛋白质的变性作用？蛋白质变性后哪些性质会发生改变？答：天然蛋白质分子受到某些物理因素如高温、高压、紫外线照射和表面张力等或化学因素如强酸、强碱、尿素、胍、有机溶剂等的影响生物活性丧失、溶解度降低，不对称性增加以及其他物理化学性质发生改变，这种现象称为蛋白质的变性作用。
变性后的蛋白质称为变性蛋白质。
蛋白质变性的实质是蛋白质分子中的次级键破坏，引起天然构像解体，变性不涉及共价键的断裂。
蛋白质变性后许多性质发生了改变：（1）生物活性丧失：蛋白质的生物活性是指蛋白质具有的酶、激素、毒素、抗原与抗体等活性，以及其他特殊性质如血红蛋白的载氧能力等，这是蛋白质变性的主要特征。
（2）一些侧链基团暴露：蛋白质变性时、原来在分子内部保藏而不易与化学试剂起反应的侧链基团，由于结构的伸展松散而暴露出来。
（3）一些物理化学性质改变：蛋白质变性后，疏水基外露，溶解度降低，易形成沉淀析出；分子形状也发生改变，球状蛋白分子伸展，不对称性加大，表现为粘度增加，旋光性、紫外吸收光谱等改变、扩散系数降低。
（4）生物化学性质的改变：蛋白质变性后，分子结构伸展松散，易被蛋白水解酶分解。
9、描述蛋白质的一级结构及高级结构，并说明一级结构与空间结构的关系。
答：蛋白质是生物大分子，具有明显的结构层次性，由低层到高层可分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。
蛋白质一级结构：是指肽链的氨基酸组成及其排列顺序，包括二硫键的位置。
氨基酸序列决定蛋白质的高级结构。
蛋白质二级结构：是指蛋白质多肽链主链的空间走向（折叠和盘绕方式），是有规则重复的构象。
天然蛋白质的二级结构主要有四种基本类型：α螺旋，β折叠和β转角和无规卷曲。
复杂的蛋白质分子结构，就由这些比较简单的二级结构单元进一步组合而成。
蛋白质三级结构：多肽链在二级结构、超二级结构和结构域的基础上进一步盘绕、折叠形成的紧密地借各种次级键维持的球状分子构象。
由两条或两条以上肽链通过非共价键构成的蛋白质称为寡聚蛋白质。
其中每一条多肽链称为亚基，每个亚基都有自己的一、二、三级结构。
亚基单独存在时无生物活性，只有相互聚合成特定构象时才具有完整的生物活性。
蛋白质四级结构：具有三级结构的多肽链通过次级键彼此缔合形成的聚集体。
每个具有三级结构的多肽称为亚基。
四级结构就是各个亚基在寡聚蛋白的天然构象中空间上的排列方式。
一级结构是蛋白质的共价键的全部情况，一级结构包含着决定高级结构的因素，蛋白质的种类和生物活性都与肽链的氨基酸种类和排列顺序有关，蛋白质分子肽链的排列顺序包含了自动形成复杂的三维结构（即正确的空间构象）所需要的全部信息，所以一级结构决定其高级结构，蛋白质的空间结构决定于蛋白质的一级结构。
10、请设计一种测定蔗糖酶K m及V max的实验方案，并做简要说明。
答：采用如下几种实验方法进行测定：①V~[S]作图法；②Lineweaver-Burk双倒数作图法；③Hanes-Woolf作图法；④ Eadie-Hofstee作图法；⑤ Eisenthal和Cornish-Bowden直接线性作图法。
Lineweaver-Burk双倒数作图法：在一系列不同[S]下，测定蔗糖酶的V°，以1/ V°对1/[S]作图，得一直线（如下图所示）。
直线的斜率=K m/V max，在1/ V°轴（纵轴）上的截距是1/ V max，在1/[S] 轴（横轴）上的截距是-1/K m。
（写出Lineweaver-Burk方程）11、试述DNA双螺旋结构（B结构）的理论要点（哪种答法更好）答：（1）两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴形成右手双螺旋；（2）磷酸和脱氧核糖形成的主链在外侧，嘌呤碱和嘧啶碱在双螺旋的内侧，碱基平面垂直于中轴，糖环平面平行于中轴；（3）双螺旋的直径2 nm。
螺距3.4 nm，沿中心轴每上升一周包含10个碱基对，相邻碱基间距0.34 nm，之间旋转角度36°；（4）沿中心轴方向观察，有两条螺旋凹槽，称为大沟和小沟；（5）两条多核苷酸之间按碱基互补配对原则进行配对，两条链依靠彼此碱基之间形成的氢键和碱基堆积力而结合在一起。
答：1）DNA分子是由两条方向相反的平行多核苷酸链构成的，一条链的5-末端与另一条链的3-末端相对。
两条链的糖-磷酸主链都是右手螺旋，有一共同的螺旋轴，螺旋表面有一条大沟和一条小沟。
（2）两条链上的碱基均在主链内侧，一条链上的A一定与另一条链上的T配对，G一定与C配对。
（3）成对碱基大致处于同一平面，该平面与螺旋轴基本垂直。
相邻碱基对平面间的距离为0.34nm，双螺旋每旋转一周有10对碱基，螺旋直径为2nm。
第一种更好一点，但没有必要说的那么详细。
12、扼要解释为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。
（1）当离子强度从零逐渐增加时，其溶解度开始增加，然后下降，最后出现沉淀。
（2）在一定的离子强度下，达到等电点pH值时，表现出最小的溶解度。
（3）加热时沉淀。
（4）加入一种可和水混溶的非极性溶剂，溶解度减少。
（5）如果加入一种非极性强的溶剂，会导致变性。
（15分）答：（1）虽然盐浓度开始增加时能相应稳定带电基团，但其进一步增加将导致盐离子与蛋白质竞争水分子，这不仅会降低蛋白分子的溶剂化，而且会因为促进蛋白分子间的极性互作和疏水相互作用而导致沉淀。