光合细菌培养基

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光合细菌培养基配方

光合细菌培养基配方

光合细菌培养基配方光合细菌是兼性厌氧的,不同的光合细菌用的培养基不一样我现在就在做关于光合细菌的问题,这几中细菌都是常见的细菌,培养基在许多微生物上后面都有,光合细菌的富集培养基是:NH4Cl0.1g NaHCO3 0.1g KH2PO4 0.02g CH3COONa 0.1-0.5g MgSO4.7HO2 0.02gNaCl0.05-0.2g 三生长因子1ml 微量元素溶液1ml 蒸馏水97ml PH7.0生长培养基加氮源(谷氨酸钠)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸盐等)及可.其他菌的分离只要选择不同的培养基就可以选择分离啊光合细菌富集纯化详见网易网盘光合细菌培养基配方氯化氨1克,磷酸氢二钾0.5克,氯化镁0.2克,氯化钠2克,酵母膏0.1克,水900毫升。

各成份溶解后15磅灭菌20分钟,然后无菌的加入过滤的碳酸氢钠5.0克/50毫升水;50毫升过滤的乙醇。

用过滤的0.1N磷酸调PH=7.0即可。

响应面设计法优化光合细菌培养基配方。

培养基成分中醋酸钠和蛋白胨对于光合细菌的生长影响最为显著,最优培养基配方为:醋酸钠1.145g/L、蛋白胨0.055g/L、碳酸氢钠0.6g/L、硫代硫酸钠0.4g/L、氯化钠0.3g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.05g/L。

在此条件下,光合细菌生长最为良好,经过5d培养以后,培养液OD600可以达到0.5以上光合细菌(含生产工艺)优良的光合细菌菌种的外观质量是啥样?一般优良的光合细菌菌种和产品的外观质量有以下几点:1、外观上看比较均匀,基本无上下分层。

相反,市场上有许多光合细菌是上下分层的,包括我中心初期的产品也是这样,上层比较清淡,下层则比较深厚,上层颜色浅,下层颜色深,最底层可能还会有一层黑黑的沉淀。

而优秀的光合细菌菌种和产品,上下都是比较均匀的,没有较明显的分层,颜色比较均匀,外观看起来也悦目。

(当然,除了培养基溶解时,会与硬水中的重金属离子反应产生的絮装沉淀除外)这种上下无分层,颜色均匀,不是靠加悬浮剂,或增稠剂而造成的,而是自然培养出来的,不加任何修饰而成的。

光合细菌 的培养方法

光合细菌 的培养方法

光合细菌的培养方法光合细菌的培养方法2010-09-11光合细菌是兼性厌氧的,不同的光合细菌用的培养基不一样我现在就在做关于光合细菌的问题,这几中细菌都是常见的细菌,培养基在许多微生物上后面都有,光合细菌的富集培养基是:NH4Cl0.1gNaHCO30.1gKH2PO40.02gCH3COONa0.1-0.5gMgSO4.7HO20.02gNaCl0.05-0.2g三生长因子1ml微量元素溶液1ml蒸馏水97mlPH7.0生长培养基加氮源(谷氨酸钠)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸盐等)即可.其他菌的分离只要选择不同的培养基就可以选择分离啊光合细菌培养基配方氯化氨1克,磷酸氢二钾0.5克,氯化镁0.2克,氯化钠2克,酵母膏0.1克,水900毫升。

各成份溶解后15磅灭菌20分钟,然后无菌的加入过滤的碳酸氢钠5.0克/50毫升水;50毫升过滤的乙醇。

用过滤的0.1N磷酸调PH=7.0即可。

响应面设计法优化光合细菌培养基配方。

培养基成分中醋酸钠和蛋白胨对于光合细菌的生长影响最为显著,最优培养基配方为:醋酸钠1.145g/L、蛋白胨0.055g/L、碳酸氢钠0.6g/L、硫代硫酸钠0.4g/L、氯化钠0.3g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.05g/L。

在此条件下,光合细菌生长最为良好,经过5d培养以后,培养液OD600可以达到0.5以上光合细菌(含生产工艺)优良的光合细菌菌种的外观质量是啥样?光合细菌发生剂的用法(即光合细菌的生产工艺)一、光合细菌生长所需的营养条件用"光合细菌发生剂"生产的终端产品:光合细菌液,PSB细胞浓度达到30--100亿/毫升,生产成本只要0.30元/公斤,而使用价值可达到2元/公斤,投入产出比达到1:6--12以上。

做成的液体产品,密封保存在通气干燥处,可保质达1年以上。

二、光合细菌生长所需环境条件有了营养全面的"光合细菌发生剂",还必须有一个良好的培养环境条件,才能生产出优质产品出来。

光合细菌、硝化细菌、小球藻、螺旋藻的培养基配方

光合细菌、硝化细菌、小球藻、螺旋藻的培养基配方

光合细菌、硝化细菌、小球藻、螺旋藻的培养基的配方,培养条件及其用途海洋本141 谢滨桂光合细菌光合细菌培养基配方培养基成分:醋酸钠1.145g/L、蛋白陈0.055g/L、碳酸氢钠0.6g/L、硫代硫酸钠0.4g/L、氯化钠0.3g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.05g/L。

光合细菌生长所需的环境条件1培养介质,含杂菌比较少的清洁淡水2酸碱度PH值在8-8.5为最好,光合细菌的适应PH范围在6-10之间3温度以28-36℃为最好生长温度,其适应的生长温度范围为15-41℃4光照强度以3000-4000勒克斯为最佳,即每25kg菌液需要相当于60W左右的白炽灯作光源,而太阳光照为最好且不要成本。

光合细菌的应用1养殖业①净化水质②维持生态平衡③培养浮游动物作饵料④间接增氧⑤饲料添加剂2种植业3环保业消化细菌硝化细菌培养基配方培养基成分:硫酸铵0.5g、氯化钠0.3g、硫酸亚铁0.03g、磷酸二氢纳1g、硫酸镁0.03g、氯化钙7.5g、蒸馏水1000ml、PH7.5、固体培养基加5%琼脂。

硝酸钠1g、硫酸镁0.03g、硫酸锰0.01g、硫酸二氢钾0.75g、无水碳酸钠1g、磷酸二氢钠0.25g、蒸馏水1000ml、PH7.5硝化细菌生长所需环境条件消化细菌培养的最优化条件为PH范围在7.0-9.0之间,温度30℃左右,溶解氧的量70%消化细菌的应用1亚硝酸属“氨的氧化者”因其所维持生物的食物来源是氨,氨和氨化合成的化学能足以使其生存。

2硝酸菌属,使亚硝酸分子氧化再转化为硝酸分子的细菌类,其所维持生物的食物来源是亚硝酸。

它和氨化合产生硝酸,所生成的化学能足以使其生存。

3利用这样可以净化水质。

螺旋藻螺旋藻培养基配方培养基成分:碳酸氢钠16.8g/L、碳酸钠2.5g/L、氯化钠1.00g/L、硫酸钾1.00g/L、磷酸氢二钾0.50g/L、氯化钙0.08g/L、MgSO4.7H2O 0.20g/L、FeSO4.7H2O 0.01g/L、Na2-EDTA 0.08g/L 微量元素A5溶液2ml/L微量元素溶液成分:H3BO3 2.86g/L、(NH4)6Mo17O24 0.02g/L、MnCl12.4H2O 1.80g/L、CaSO4.5H2O0.08g/L、ZnSO4.7H2O 0.22g/L螺旋藻生长所需环境条件养殖螺旋藻最重要的条件是光照、温度、培养液和通风等,培养液的PH值深度、流动、排氧及营养元素的合理供给都是影响产量的重要因素,因此,培养地应建在水质好,、光照条件适宜场地宽阔的地方PH值范围为7-11,最好是8-9,水深在0.2-0.3米之间,水温18-38℃,最好在26-32℃。

光合细菌培养方法

光合细菌培养方法

光合细菌培养方法光合细菌是一类能够利用光合作用进行能量合成的微生物,其在生物科学研究和工业生产中具有重要的应用价值。

光合细菌的培养方法对于研究其生长特性、代谢途径以及应用开发都具有重要意义。

本文将介绍光合细菌的培养方法,希望能够对相关研究和生产工作提供一定的参考。

首先,对于光合细菌的培养基选择非常关键。

光合细菌需要光能作为能量来源,因此在培养基中需要添加适量的光合作用底物,如二氧化碳、硫化氢等。

同时,培养基中还需要含有适量的氮源、磷源、微量元素等营养物质,以满足光合细菌的生长需求。

常用的光合细菌培养基包括Brock培养基、Zobell培养基等,选择合适的培养基可以有效提高光合细菌的生长速度和产量。

其次,光合细菌的培养条件也需要特别注意。

光合细菌对光照强度、温度、pH 值等环境因素都有一定的要求。

一般来说,光合细菌的培养温度在25-30摄氏度之间,光照强度一般为1500-3000勒克斯,培养液的pH值在7-8之间。

在培养过程中需要注意控制这些环境因素,以提供良好的生长条件。

在培养过程中,还需要注意光合细菌的通气和搅拌。

光合细菌需要充足的氧气进行呼吸作用,因此在培养过程中需要进行适当的通气。

同时,适当的搅拌可以保持培养液的均匀性,有利于光合细菌的生长和代谢。

因此,在培养罐或培养皿中需要设置合适的通气装置和搅拌装置。

最后,对于光合细菌的培养过程需要进行严密的监控和调节。

定期检测培养液中的细菌数量、生长速率、代谢产物等参数,根据监测结果及时调节培养条件,保证光合细菌的生长和产量。

同时,需要对培养液进行无菌操作,避免外源性微生物的污染,影响光合细菌的纯度和产量。

总结起来,光合细菌的培养方法涉及培养基的选择、培养条件的控制、通气搅拌的操作以及监控调节等多个方面。

只有在这些方面都做到位,才能够获得高质量的光合细菌培养产物。

希望本文介绍的内容能够对相关研究和生产工作提供一定的帮助,也欢迎大家在实际操作中根据具体情况进行进一步的优化和改进。

光合细菌的培养及应用方法

光合细菌的培养及应用方法

光合细菌的培养及应用方法光合细菌是一类能够进行光合作用的细菌,通过光合作用将光能转化为化学能并合成有机物质。

尽管光合细菌的数量和种类相对较少,但它们在生态系统的功能和应用方面具有重要作用。

光合细菌在环境修复、生物能源产生、食品工业以及医学领域中都存在重要应用。

为了进行对光合细菌的有效培养和应用,下面介绍光合细菌的培养及应用方法。

一、光合细菌的培养方法1. 培养基选择和制备:光合细菌可以使用富含碳源、氮源和无机盐的培养基进行培养。

例如,常用的培养基可以包括Gao's培养基和Harrison培养基。

培养基的pH应在6.5-7.0之间,温度应保持在适宜的生长温度范围内。

2.培养条件的调节:培养条件对光合细菌的生长和光合作用非常重要。

光合细菌需要光照以进行光合作用,所以需要提供适当的光照条件。

一般来说,白天至少需要12小时的光照,光照强度一般在1000-2000勒克斯之间。

此外,还需要调节培养基的气体成分,保持适当的氧气和二氧化碳浓度。

3.培养方法的选择:光合细菌可以选择液体培养和固体培养两种方法。

液体培养适合大规模培养和实验目的,而固体培养适合用于分离和纯化光合细菌。

4.培养物的处理:在培养过程中,需要定期检查培养物的生长情况和纯度。

如果发现有杂菌污染,需要进行分离和纯化处理。

5.培养物的保存:光合细菌的保存可以使用冻存法或冻干法。

冷冻保存的方法可以将光合细菌保存在-80℃以下,而冻干法则需要先将培养物冷冻,然后在真空下去除冷冻水。

二、光合细菌的应用方法1.环境修复:光合细菌具有分解有毒物质和污染物质的能力,可以通过光合作用将有害物质转化为无害的物质。

因此,光合细菌可以应用于环境修复领域,例如处理废水和土壤修复。

2.生物能源产生:光合细菌可以利用太阳能合成有机物质,并产生氢气或甲烷等能源物质。

这些能源物质可以应用于生物能源产生领域,为可再生能源的开发提供新的途径。

3.食品工业:光合细菌可以产生一些有益的物质,例如胶体、营养酵素等,可以应用于食品工业中。

光合细菌培养基配方及扩培方法

光合细菌培养基配方及扩培方法

光合细菌培养基配方及扩培方法光合细菌的培养基对光合细菌培养条件进行了优化研究,结果表明:菌株的生长温度为30℃时,最适培养光照为3000lx,最低接种浓度为6%。

培养基正交试验研究表明其最优培养基配方为:氯化铵2.00g、磷酸氢二钾0.20g、乙酸钠4.00g、碳酸氢钠2.00g、氯化钠1.00g、酵母膏0.15g、硫酸镁0.20g、T.M储液少量、蒸馏水1000mL;其中乙酸钠为最大影响因子。

酵母膏对产品品质影响较大,要求酵母膏质量稳定,无杂菌。

目前应用的光合细菌有多种配方,现介绍一种常用的配方:磷酸氢二钾(K2HPO4) 0.5g磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.5g硫酸铵((NH4)2SO4 ) 1g硫酸镁(MgSO4.7H2O 0.5g乙酸钠 2g (或95%酒精3ml )酵母浸出汁(或酵母膏) 2g消毒海水1000m光合细菌培养基的制备1、灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。

小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。

大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用2、接种培养基配好后,应立即进行接种。

光合细菌生产性培养的接种量比较高,一般为20—50%,即菌种母液量和新配培养液量之比为1:4—1:1,不应低于20% ,尤其微气培养接种量应高些,否则,光合细菌在培养液中很难占绝对优势,影响培养的最终产量和质量。

3、培养管理光合细菌的培养过程中,管理工作包括日常管理操作和测试、生长情况的观察和检查以及出现问题的分析处理等三个方面。

4、日常管理和测试1)搅拌和充气:光合细菌培养过程中必须充气或搅拌,作用是帮助沉淀的光合细菌上浮获得光照,保持菌细胞的良好生长。

2)调节光照度:培养光合细菌需要连续进行照明。

在日常管理工作中,应根据需要经常调整光照度。

白天可利用太阳光培养,晚上则需要人工光源照明,或完全利用人工光源培养。

人工光源一般使用碘钨灯或白炽灯泡。

光合细菌培养基


原因:气温较高的季节,刚培养好的菌液因长时间失去光照。 对策:施以光照。
原因:可能是菌液中绿硫菌大量繁殖,多见于高温季节。 对策:连续多次密闭培养,或更换菌种和水源。
原因:接种量少,菌种不纯,光照不足,PH值过低。 对策:选用优质菌种,按要求接种,增强光照,调适PH值。
感谢观看
生产方法
培养容器
生产过程
1、两端开口的长筒状透明塑料农膜,尽量选择厚一点的不破,尽量选择幅度宽一点的,剪成10米长一个备 用
2、透明玻璃连接而成的池子,类似于金鱼池,但是要做薄(30厘米厚)以方便两边采光
1、第一次培养,可以得到220公斤菌种
(1)在阳光充足的上午10点左右,先将准备用水160公斤(有条件可以先将水加温到30度,这样培养的速度 更快,菌液质量更好。注意温度不可过高破坏菌种)加入到敞口塑料容器(400升)内,再加入培养基二袋,建 议先用小容器少量水溶解培养基搅拌,慢慢加水慢慢溶解直至溶解完全,最后接种菌种60公斤搅拌均匀,可以按 照上述比例相应增Cl1.0g,CH3COONa 3.5g,MgCl20.1g,CaCl2 0.1g,KH2PO4 0.6g,K2HPO4 0.4g,酵母膏 0.1g,蒸馏水1000mI,pH7.2。
固体培养基,由在液体培养基中加入2%的琼脂制成。
生产条件
1、培养介质:含菌量较低的清洁淡水。地下水(井水)含菌量低,为最佳水源;清洁的地表水(河水)也可 使用;含氯量较高的自来水应敞口放置一天;蒸馏水及纯净水固然很好,但成本太高。选取水源时,最好先 做几种方便取用的水源的对比试验,使用哪里的水源在培养试验中最先变成红色(生长良好),就选用哪里的水 作为生产用水。 2、酸碱度:PH值在7.5-8.5为最好,光合细菌的适应PH范围在6-10之间。 3、温度:以30-34℃为最适生长温度,其适应的生长温度范围为18-45℃,实际操作越接近最适温度范围越好。 本公司产品配方中含有抑制高温季节绿硫菌的产生,所以不惧高温,也不会大量产生绿硫菌。 4、光照强度:以3000-4000勒克斯(LX)为最佳,即每25公斤菌液需要用相当于60瓦左右的白炽灯炮作光 源,而太阳光照为最好且不要成本。 5、透气性:密闭、敞口皆可培养,密闭但是留十分之一空气效果更好。

光合细菌培养基

光合细菌培养基光合细菌培养基是一种用于培养和研究光合细菌的基础培养基。

光合细菌是一类具有光合作用能力的微生物,它们通过光合作用将光能转化为化学能,并利用该能量合成有机物质。

光合细菌在生态系统中扮演着重要的角色,同时也具有广泛的应用价值。

光合细菌培养基的配方和制备是研究光合细菌的重要基础工作。

光合细菌培养基主要包含碳源、氮源、无机盐、微量元素和缓冲剂等组分。

其中,碳源是细菌所需的能量来源,氮源则是细菌合成生命构建物质的必要元素。

在光合细菌的培养基中,常用的碳源包括葡萄糖、蔗糖和麦芽糖,而氮源则可以选择氨基酸、尿素和硝酸盐等。

除了碳源和氮源,无机盐也是光合细菌培养基中重要的组分。

无机盐提供了细菌所需的微量元素和矿物质。

光合细菌常需要的无机盐包括钠盐、钙盐、锰盐和镁盐等。

微量元素对细菌的生长和代谢起着重要的调节作用,能够促进光合细菌的生长和光合作用的进行。

缓冲剂的添加可以调节培养基的酸碱度,保持培养基的稳定性。

常用的缓冲剂包括磷酸盐和碳酸盐。

磷酸盐缓冲剂通常用于调节培养基的pH值,而碳酸盐缓冲剂则可以稳定培养基中的碳酸盐浓度,保持培养基的渗透压稳定。

光合细菌培养基的制备过程需要严格的操作和一定的实验经验。

首先,将所需的组分按一定比例称取并加入适量的纯水中。

然后,通过高压灭菌器对培养基进行灭菌处理,确保培养基中不含有任何其他的污染物和微生物。

最后,将灭菌后的培养基分装到培养皿或培养瓶中,即可用于光合细菌的培养和研究。

利用光合细菌培养基进行培养和研究可以帮助我们深入了解光合细菌的生长特性、代谢途径和光合机制。

通过研究光合细菌,我们可以揭示光合作用的分子机理,并应用于能源转化、环境修复和农业生产等领域。

此外,光合细菌还具有许多有益的应用,比如用于食品工业、制药业和生物能源开发等。

总之,光合细菌培养基是一种重要的用于培养和研究光合细菌的基础培养基。

通过合理配比和制备,可以获得适合光合细菌生长和研究的培养基。

光合细菌培养基的使用能够促进我们对光合细菌的了解,并为相关领域的研究和应用提供有力支持。

低成本自制光合细菌

低成本自制光合细菌
现在跟大家一起分享《光合细菌培养基》:乙酸钠3g/L、氯化铵1g/L、酵母浸膏0.5g/L、磷酸二氢钾0.1g/L,淡水80%+菌种20%=光合细菌100%。

接下来就讲讲光合细菌制作流程:取80公斤淡水经过滤,在用硫代硫酸钠解余氯搅拌均匀待全部溶解后放入培养基,乙酸钠300g、氯化铵100g、酵母浸膏50g、磷酸二氢钾10g,放入桶里搅拌均匀在放入20公斤光合细菌菌种,搅拌均匀,密封培养,气温保持在35℃左右,晚上开个60w灯泡,每天搅拌2次,直到水体感觉粘稠就可以使用了,一般培养时间7天左右。

成本也就1毛/斤左右。

光合细菌培养基操作说明

一、用途:本品用于培养光合细菌(PSB)
二、性状:枯黄色糊状、粉状或块状物体,带醋味,无毒。

三、含量:净重300+5克,可培养出50千克成品菌液(浓度为每毫升30亿个活菌体以上)。

四、主要成份:碳、氢、氧、氮、磷、钾。

五、执行标准:Q/321081BJA001-2009
六、用法:取本品一袋溶于50千克清洁的淡水或海水中,加入10千克以上PSB菌种(优质成品菌),制成培养液;将培养基放于阳光下,保持温度30℃左右,约10天即可达到成品菌浓度,成为成品菌,可将此再作菌种,继续培养扩大。

培养容器应为白色或透明容器。

七、保存:本品宜存放于阴凉避光处,不能存放于高温和强光照射的环境中。

八、保存期:包装完好并且符合第七项要求时,本品可长期保存。

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红螺菌培养基:1、富集培养基:经典的紫色非硫细菌(红螺菌)的富集培养基的配方为:NH4CI :0.1g ;NaHC03:0.1g ;K2HPO4:0.02g ;CH s COONa: 0.1~0.5g ;MgSO4 7H2O:0.02g; NaCI : 0.05〜0.2g; 生长因子1ml,蒸馏水97ml,微量元素溶液1ml, pH 为7.0。

其中,①5% NaHCO水溶液,过滤除菌取2m1加入无菌培养基中。

②生长因子:维生素B10.001mg、乙尼克丁酸0.1mg、对氨基苯甲酸0.1mg、生物素0.001mg,以上药品溶于蒸馏水中,定容至10ml,然后过滤除菌。

③微量元素溶液:FeCl3・6H2O : 5mg; CuSO • 5I4O: 0.05mg; fBOImg ;MnCb • 4H2O 0.05mg; ZnSO • 7H2O: 1mg; Co(NO)2 • 6H2O: 0.5mg。

以上药品分别溶于蒸馏水中,并定容至1000m1。

除①、②、③外,各成分溶解后100 Pa灭菌20min。

然后分别加入①、②、③,如加入0.1 %〜0.3 %的蛋白胨则能促进该菌生长。

2、分离培养基:传统的红螺科分离培养基的配方为:NHCI: 0.1g ; MgCl2: 0.02g ;酵母膏:0.01g ; K2HPO: 0.05g ; NaCl : 0.2g ; 琼脂2g,蒸馏水90ml。

100Pa 灭菌20min。

灭菌后,无菌操作加入经过滤除菌的0.5g/5mlNaHCO3,再无菌加入过滤除菌的0.1g或0.1mlNa2S・ 9H2O (降低培养基的氧化还原值),最后再加入5ml 经过滤除菌的乙醇、戊醇或4%丙氨酸。

用过滤灭菌的0.1mol/H 3PO 调pH至7.0。

摘自百度知道。

筛选富集培养基为:NH4CI 1g/L, NaHCO 3 1g/L, CH s COONa 3g/L, KH 2PO4 0.3g/L, MgSO40.1g/L,酵母膏0.5g/L,微量元素母液1g,自然pH值。

扩大培养培养基以海水代替微量元素母液。

1000~4000lx光照,(30 ± 2) C恒温培养。

参考文献:固定化海洋光合细菌处理生活污水的研究* 黄宝兴,李兰生,赵亮,张微,唐迎迎海洋湖沼通报基础培养基:NH4CI:1g; Na 2HPO4: 0.5g; MgSO 4: 0.2g; NaCI: 2g; NaHCO 3: 5g;酵母膏:2g ; 乙醇2ml,用0.1N H3PO4调至pH7.0。

划线培养基:采用固体琼脂培养基,即在基础培养基的基础上添加 1.0%的琼脂。

以上培养基初始pH值均用H3PO4调至7.0,经121 C灭菌30分钟,NaHCO3过滤除菌后加入。

培养条件:光照培养箱温度控制在30 C、光照强度控制在3000uE.m-2s-1培养。

光合细菌是一种兼性嫌气细菌,需要深层培养或在真空干燥器内达到嫌气或半嫌气状态,一般将混合菌放入培养液中先富集再分离。

具体方法:将混合菌装入10ml试管中,加入培养液充满至刻度,盖上胶塞,在光照条件下保持在30C左右培养。

待培养液出现红色后,取培养液加1.5%的琼脂,制成固体培养基,取菌液分别用无菌水以10-100000000倍稀释,分别取lml样本涂在平皿上,光照、30C培养2d左右在平板上长出菌落。

移至平板采用划线法进行分离,将划好线的平板倒置,在相同条件下培养,反复分离纯化,挑取不同特征的菌落,用斜面保存,纯化分离后的菌种置于冰箱保存备用。

PSB培养中除碳、氮、磷等主要营养元素外,还需要一定量的镁、钙、钠和有关的微量元素,将所需的营养元素按一定的比例配成适于菌体生长繁殖的培养基。

本实验室采用酵母膏、蛋白胨培养基,基本配方为:CaCl2 0.3g, MgSO4 • 7H2O 0.5g,酵母膏3g,蛋白胨3g,蒸馏水1000ml , pH: 6.8.如需制固体培养基再加2%琼脂。

培养温度:25C〜30C最佳,光照强度:2000LX 〜5000LX , PH: 7.5 〜8.5 最佳。

把菌种接种到灭好菌的培养基中,在三角瓶中进行二级培养,每天摇晃几次。

把40L的反应器中加满自来水,放入通气管,盖上保鲜膜一起用次氯酸杀菌消毒24小时,用硫代硫酸钠(1L次氯酸需要150g硫代硫酸钠)来中和。

以15%的接种量接入反应器中,用泵通气培养,用分光光度计跟踪测量菌液的密度,得到菌液的密度较高,而且反应器还可以进一步放大。

参考文献:光合细菌的培养及应用魏玉利4. 2, 1.2细菌生长培养區NaCOOH3. 酵母育尤倔.N&C1 2*0浙駆£山①2g, KHJ0几龍,天然海水lODOmLi話温灭亂4 2. 2. 1光合细菌的培养lOOmL具塞容量瓶中装有豊0ml比合细菌培养基.按10%接种量接种母液(釣1/个FmLh混合均匀培覽「恒温允照堆毎箱中光照厌氣胡菲•朮强约25OOLux,温度SOC,光合细菌的增殖培养及对有机磷农药的降解参考文献:捷2-2 11CII光合细菌堵养甚冋试剂名称j n化试剂名称含量DL苹果酸 4.0g/L酵母膏0.1 g/L0.12 / L F尹0.0025 moL L(NH.):SO> 1 g/L Mti:+0.0090 iticl/LCaCl:0.075 g/L Zi严0.0033 IIM I/LKHyPOj0,5 ft/L Co:+0.0024 mcKLK:HPOj Cu J+0-0Q24 IUQ LTNanEDTA0.020 g/L pH 6.S2.5.1.1灭菌条件(1)高压蒸汽灭菌小件玻璃器皿、培养基等采用湿式高压蒸汽灭菌。

这种灭菌方式可以达到彻底的灭菌。

灭菌条件:0.103 MPa,120 C, 20min。

(2)紫外灭菌无菌操作台采用紫外灭菌方式,用紫外灯灭菌30min。

该种方式对空气进行灭菌。

2.5.1.2光合细菌的纯培养本课题研究所用光合细菌为Z08,除特殊说明外,皆是由纯培养获得。

将50 mL HCH 培养基灌装于250 mL三角瓶,用封口膜将瓶口密封,以防止灰尘和杂菌进入。

灌装好的培养基采用高压蒸汽灭菌20 min。

待冷却以后,在无菌操作台中接种0D660=1.0 (干重840 mg/L)的Z08 15 mL。

接种后将菌液放置在140 rpm的恒温摇床中培养,控制温度30 C, 24 h照明,照度500—1000 lx,培养48 h达到稳定期。

培养后的光合细菌保存在 4C条件下备用。

红色非硫光合细菌富集培养基的配制:NaHCO s 1.0 g; NH4CI 1 g; K2HPO4 0.2 g;CH s COONa 1.0~5.0 g;MgSO 4 7H2O 0.2 g; NaCI 0.5~2.0 g;酵母浸汁0.1 g;微量元素10 mL。

将上述成分溶于蒸馏水中,调节pH至7.0,定容1000 mL。

在115C下灭菌20 min。

参考文献:光合细菌菌体分离回收以及实现啤酒废水资源化的研究戴晓光合细菌的分离与培养①液体富集培养基:CH s COONa 3.0 g , CH s CH z COONa 0.3 g , NaCI 1.0 g ,(NH4)2SO4 0.3 g , MgSO4 • 7H2O 0.5 g, K2HPO4 0.7 g , CaCl2 0.05 g, MnSO4 0.0025 g, FeSO4 0.005 g,酵母膏0.1 g,谷氨酸1.0 g,蒸馏水定容至1 L,调pH至7.4。

②固体分离培养基:CH3COONa 3.0 g L-1 ,酵母膏3.0 g -L-1 , CaCl2 0.3 g L-1 , MgSO4 -7H2O 0.5g L-1 ,琼脂20 g • L-1 ,调pH7.4。

培养条件:取少量活性污泥样品于装有120 mL富集培养基的125 mL血清瓶中富集,置于光照培养箱中30 C培养,照度为2000 1x。

6~9 d后,液体培养基变为红色,经摇床振荡稀释处理后,涂布和划线于平板固体培养基上,置于恒温培养箱中黑暗好氧培养,7d后获得单菌落。

在平板固体培养基中重复划线3次以上,直到在显微镜下观察为纯菌。

参考文献:一株光合细菌的分离鉴定及污水处理能力研究周洪波,刘飞飞,邱冠周A o E产览1 •2 培养基优化培养实验采用RCVBN扩大培养基,其组成为:CH s COONa 3.0g, (NH4)2SO4 1.0g,MgSO4 0.2g, NaCl 1.0g, KH 2PO4 0.3g, K 2HPO4 0.5g, CaCl2 0.05g,酵母膏0.1g,微量元素溶液1mL,蒸馏水1000mL.微量兀素溶液为改良的Imhoff和Truper生长因子溶液,其组成为:EDTA-2Na 2g, FeSO4 • 7H2O 0.2g, MnCl 2 4H2O 0.1g, H3BO3 0.1g, C0CI26H2O 0.1g, ZnCI2 0.1g, Na2MoO4 2H2O 0.02g, NiCl 2 6H2O 0.02mg, CuCl 2 • 2H2O 0.01g,蒸馏水1000mL。

1 •3 培养方法在8个CSTR光合培养器中进行分批培养,培养器体积为50 L。

培养器光照根据强度不同的需要分别由三只25W,40W,60W,100W白炽灯泡组合提供,培养器的底部设有穿孔曝气管根据DO含量间歇开启,培养器内设有温控器。

参考文献:应用于废水处理的光合细菌优化培养和生长动力学研究熊万永,林君锋,李玉林(1)光合细菌培养基无水乙战钠(CHjCOONa)氯化技(NH4CI)磷酸氢二钾5 mg 1.0 mg 0.2 mgMgSO4• 7H2O 碳酸氢钠0.2 mg1.0 mg酵母浸膏氯化钠0.1 mg L0 mg调节pH值为L05Mpa> 1219条件下天菌20分钟.固体培养基为在戕体培养基的基础上.添加15^20%的琼脂。

参考文献:有效微生物菌群的构建及处理苯酚与焦化废水的研究第…阶段:光合细雷的培养「菌种取门株洲市环境保护研究院实於电,采用范尼尔氏液体堵养基•在28e C恒温・厌氧光照条件卜培养3-4天出光照强度4001. 再离心分离收集,川丁以后实验”范尼尔氏液体培养妹f VAN. Sell培养秦)成分如下£酵母甘1〜2gNH^CI1g0 2gK2HP(.)40 5gNaCJ lgNMOi5g蒸馄/K lOOflmLPH中性表]鷺色非施细菌液体培养基Tab. I The liquid mcdiuni of purple non-sulfur biiciaia化学试剂化学试剂含報DL・苹果醸KH;PO4600nigKiHPO^90(Jmg MgCl:40Qmg CaClj/iHiO75mg FeSO4 7H.O11 Jimg懸母島200mg NH^Cl360mg ZnSO47HjO0.24m 呂Cu(NOj)2-3HiO U,04mgH汩0? 2.80mg MgSOr4H:O 2 J Omg Na;Mo04 2H2O0.75mg去离子水1000ml2.122分离用固体培养基在液体培养基中加入2%的琼脂,其它成分不变。

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