医学寄生虫——综合性实验

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注意:粪便量要适中,花生米大小;液面要略高于管口而不溢出为 宜;静置时间要充分;玻片要清洁无油,要与液面接触。
Saturated salt floatation technique 饱和盐水浮聚法
Modified Kato’s thick smear method 改良加藤厚涂片法(厚涂片透明法)
Saturated salt floatation technique 饱和盐水浮聚法
原理:利用比重大的饱和盐水使虫卵上浮而集中于液面,适于检查 线虫卵,对钩虫卵效果尤佳。
操作:用竹签取约花生米大小的粪便置漂浮管内(用青霉素瓶代替 亦可),加饱和盐水少许(约为容器1/3),用竹签搅匀,加饱和盐水至 管口,挑去大块粪渣,再缓慢滴加饱和盐水至液面略高于管口,满而不 溢,管口上放一张载玻片,与液面接触,静置20-30分钟后,将载玻片迅 速提起并翻转,加盖玻片,镜下观察。
操作:①先将玻璃纸剪成大小为20×30mm的小片,浸于甘油-孔雀 绿溶液(含纯甘油100ml,水100ml和3%孔雀绿1ml)中,浸泡24小时以 上,直至玻璃纸呈现绿色。②用大小为4×4cm的100目的尼龙网覆盖粪 便标本,用塑料刮片在网上刮取粪便约50mg(相当于黄豆大小,如要计 数,改用定量板),置于载玻片上,用浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片 覆盖于粪便上,轻压使粪便展开成20×25mm的涂面,置30-36℃温箱中 约半小时或25℃约1小时,待粪膜稍干后镜检。
本法适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计数,方法简便,操作过程 中虫卵不会散失,检出率比直接涂片法高。 注意:玻璃纸浸泡时间要充分;粪膜透明时间要适度,时间不够, 粪膜透明不好,虫卵难以发现,时间太长则虫卵变形,不易辨认。
Modified Kato’s thick smear method 改良加藤厚涂片法(厚涂片透明法)
注意:静置时间要充足;倾去上层液体要小心,要留下沉渣。
Natural sedimentation method 自然沉淀法(水洗自然沉淀法)
实验操百度文库过程要求:
1.在实验操作过程中,每人应注意避免污染,包括显微镜、 实验室地面墙面桌面凳子等、自身及他人衣物等,用过的竹签、 玻片、漂浮管、量杯、手套、口罩、未用完粪便及装粪便的容器 或袋子等务必投入指定的容器内。
Direct faecal examination in saline粪 便直接涂片法
Iodine stain 碘液染色涂片法
操作:用碘液代替生理盐水,其它操作及注意事项与生理盐 水直接涂片法相同或在直接涂片法的标本上,于小盖片的一侧以 吸管滴进一小滴碘液,待碘液渗进粪膜即成。 主要用于检查原虫包囊如阿米巴、贾第虫包囊等。 注意:及时观察,碘染效果才佳。
Direct faecal examination in saline 粪便生理盐水直接涂片法
操作:在清洁的载玻片上滴一滴生理盐水,取少许粪便(约绿豆大 小)置水滴中,涂成均匀粪膜,去除大块粪渣,加盖片,避免空泡出现 和液体溢出。粪膜厚度以透过涂片能辩认书上字迹为宜。
主要用于检查原虫滋养体和包囊、蠕虫虫卵或幼虫,对观察溶组织 内阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫和结肠小袋纤毛虫的活滋养体特别有用。也 可用于痰、尿、阴道试子、十二指肠抽出物、脓肿、组织活检和乙状结 肠镜检查。 本法操作简单,但检出率低,可连续三次涂片检查以提高检出率。 (1)拿玻片时应用手指夹着玻片的边缘,勿以指面接触玻片面,以避 免油渍污染; (2)取粪量以绿豆大小为宜,涂片厚薄要适宜; (3)镜检时应按一定顺序检查,使整个涂片无遗漏地被观察到; (4)掌握多种虫卵、滋养体及包囊的基本结构,以便与粪渣中易混淆 的物体相鉴别,避免误诊和漏诊。
③Saturated salt floatation technique 饱和盐水浮聚法
Familiar with ①Modified Kato’s thick smear method 改良加藤厚涂片法(厚 涂片透明法) ②Natural sedimentation method自然沉淀法(水洗自然沉淀法)
Comprehensive experiment
综合性实验
-Examination of faeces 粪便检查
Purpose and Requirements
Master:
①Direct faecal examination in saline 粪便直接涂片法 ②Iodine stain 碘液染色法
2.在操作过程中,不要大声喧哗、戏闹。
3.操作完毕后要做好清洗,包括清理操作盘、洗手等。
结果判定:
阴性用“-”,阳性用“+”表示; 阳性程度表示法:在中倍镜下,“+”指每个视野1-5个虫卵, “++”指每个视野6-10个, “+++”指每个视野11-20个 ,“++++” 指每个视野21个以上。
实验报告内容(上交纸质作业):
Natural sedimentation method 自然沉淀法(水洗自然沉淀法)
原理:主要用于比重大于水的蠕虫卵检查。由于虫卵重,下沉于水底 而使虫卵集中,经过水洗后,视野较清晰,易于检出,但操作费时、费 水,较繁琐。 操作:取粪便20-30g(约乒乓球大)置于杯中加水调成混悬液,经60目 铜筛过滤于500ml锥形量杯内,用清水冲洗筛上残渣,直至量杯将满,静 置20-30分钟,倾去上液,留沉渣,再加清水静置沉淀,如此反复3-4次 直至上液清晰为止,最后倾去上液,留渣、吸取沉渣涂片镜检。
1.实验目的: 2.实验结果: 3.讨论:
①结合受检者入学前居住地寄生虫病流行情况、本人 生活饮食习惯、操作技能及所采用方法的缺点分析讨论实 验结果。
②哪些寄生虫的病原学检测不适合采用粪检方法?
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