白血病免疫分型5[1].11

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T-ALL特点: 1. 幼稚T细胞数量增多:CD34+,TdT+ 2. 泛T标志丢失 3. CD4/8双+或CD4/CD8单阳
意义:儿童:ALL发病率占肿瘤的25%, B-ALL 预后比T-ALL相对好 成人:ALL 发病率20% T-ALL 预后比B-ALL 好。
(三).正常粒细胞标志
AML M0 M1 M2 M3 M4 M5 M5a M5b M6 M7
二.急性白血病的MIC分型:1985-1986提出
MIC:Morphology Immunology Cytogenitics 80年代免疫学研究的进展,单克隆抗体的大量涌现, 利用特异的单抗可以明确区分ALL、AML及进一步 鉴定亚型,对研究白血病的生物学特性,指导临床 治疗及判断预后起着重要的作用
CD117 CD11 7
CD45
CD64 CD64
CD34 CD34
பைடு நூலகம்
CD64 CD64
CD34 CD34
CD79a
cMPO
CD11b CD11b
CD117 CD117
Side scatter Side scatter
HlA-DR HLA-DR
CD5 CD5
CD45 CD45
CD64
CD34
CD64
cMPO CD13 CD34 CD117 HLA-DR CD33 CD11b CD15 CD64 CD10
幼稚粒 成熟粒
+ +
+ +
+ -
+ -
+ -
+ -
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全粒细胞标志:CD13, cMPO 幼稚粒细胞:CD34,CD117,HLA-DR,CD33 成熟粒细胞:CD15,CD11b,CD10,CD64
三.免疫分型的作用:
1.区分ALL、AML:形态、组化难以诊断的病例(不典型、 治疗后) 2.将ALL分为B、T细胞及根据细胞发育阶段分为几种亚型 3.对M0、M6 、M7具有诊断意义: M0:形态似ALL、组化(-), MPO(+), 髓标志+, T,BM6:GlyA+,CD71+ M7:CD41+,CD61+(Iib/IIIa)
CD19 CD19
CD11b CD11b
CD7
Side scatter Side scatter
CD117 CD5 CD5
CD45 CD45
CD13 CD13
CD34 CD34
CD64 CD64
CD64
CD19
CD11b CD11b
CD117 CD117
Side scatter
Side scatter
B-ALL的分型
亚型 CD19 CD34 TdT CD10 CyIg SmIg
急性早期B前体细胞白血病 + early B-precursor ALL 普通型B 细胞白血病 + Common B-ALL 急性前B细胞白血病 + Pre B-ALL 急性B细胞白血病 + B-ALL
+
+/-
+
+
+
-
-
CD13
CD117
cCD13
CD34
HLA-DR
CD11b CD11b
CD117 CD117
Side scatter scatter
HlA-DR HLA-DR
CD5 CD5
CD45 CD45
CD64
CD34
CD64
CD19 CD19
CD11b
CD117 CD117
Side scatter
CD11b
四.正常血细胞分化发育过程中免疫标志变化特点及 白血病细胞免疫标志特点 (一). 正常B细胞标志:
CD19 TdT CD34 CD10 CD20 FMC7 CD22 CD23 I期 : + + + II期: + + -/+ III期: + + + + Ⅳ期: + + + + + 泛B标志:CD19,HLA-DR,cCD79a/cCD22 幼稚B标志:CD34,TdT, CD10, 成熟B标志:CD22,CD23,FMC7
CD11b
CD117
CD45
CD11b
CD5
Side scatter
CD64
CD34
CD64
CD19
CD11b
CD7
Side scatter
HLA-DR
CD5
CD45
CD117
CD34
CD117
CD19
CD11b
CD7
CD45
CD11b CD10-,CD34CD117
CD7
Side scatter
白血病免疫分型
北京大学血液病研究所
一.急性白血病FAB分型:1976年提出,以形态为基础。
ALL L1 以小细胞为主,大小一致 L2 以大细胞为主,大小不一 L3 以大细胞为主,大小一致 微小分化型急性髓细胞白血病, 原始细胞>30% 急性髓细胞白血病未分化型, 原始细胞》90% 急性髓细胞白血病部分分化型,原始细胞30-89% 急性早幼粒细胞白血病,异常早幼粒细胞>30% 急性粒单核细胞白血病,原始细胞>30%,单核20-80% 急性单核细胞白血病,原单+幼单>30% 未分化型,原单细胞》80% 部分分化型,原单细胞<80% 急性红白血病,原始细胞>30%,有核红细胞>50% 急性巨核细胞白血病,原巨核细胞>30%
正常BM各系细胞比率: 淋巴:20-30%:T:70%,B:20%,NK:10%; 单核:2-6%±;粒细胞:40-60%;有核红:<50%
FCM的主要测定指标:FSC,SSC,FL1,FL2,FL3(FL4) FSC:反应细胞的大小。SSC:反应细胞内颗粒的多少。 FCM设门法: FSC/SSC: 缺点: 不能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开 CD45/SSC:CD45是WBC抗原,RBC、Plt为阴性。 CD45在成熟细胞表达强,幼稚细胞表达弱, 在淋巴、单核及粒细胞表达强度不同。 优点:能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开。特异分析 白血病细胞免疫表型 FCM标记方法: 单标:一种单抗/tube: FL1,FSC,SSC(三参数) 双标:(两种单抗/tube/):FL1,FL1,FSC.SSC(四参数) 三/四标:(三种单抗/tube)(四种单抗/tube):FL1-FL3/4,FSC,SSC
-/+
-
+
-
+
-
+
-/+
+
意义:Common B-ALL 预后相对较好,CD34+B-ALL比CD34预后好,但CD34+患者伴Ph1+预后差。B-ALL预后相对 差,但随化疗方案改进,预后有所改善。
(二).正常T细胞标志:根据在胸腺内发育阶段分4期
CD7 CD2 CD5 CD34 CD1a CD3c/m CD4 CD8 I期 : II期: III期: Ⅳ期: + + + + + + + + + + + + + -/+ -/+ +/+ +/+
CD34
CD117
CD19
CD34
CD7
CD45
HLA-DR
CD7
Side scatter
CD117
CD3
CD38
CD8
HLA-DR
CD7 CD45
CD34
CD7
Side scatter
CD38
CD3
CD117
CD8
cCD3
IGg1
Side scatter
CD45
cCD22
CD10
cCDMPO
(四).正常单核细胞标志:
HLA-DR CD33 CD13 CD34 CD117 CD14 CD64
幼稚单 成熟单
+ +
+ +
+ +
+ -
+ -
+
+
全单核细胞标志:CD33,CD13,HLA-DR 幼稚单核细胞标志:CD34,CD117, 成熟单核细胞标志:CD14,CD64 (五).成熟粒、单核细胞主要区别: 成熟粒细胞:CD33- HLA-DR- CD14- CD64+dim 成熟单核细胞:CD33+ HLA-DR+ CD14+ CD64+st
B祖细胞 + + + +/-
髓祖细胞 + + + +
诊断白血病主要标志: B-ALL:CD34,HLA-DR,CD19,CD10+/-,cCD79 T-ALL: CD34,CD38, CD7,CD2+/-,CD5+/-,cCD3 AML: CD34,CD117,CD33,CD13,cMPO M3:CD34 -,HLA-DRM2:CD19+:t(8,21) M4/M5:CD14+ M6:GlyA+,CD71+ M7:IIb/IIIa(CD41,CD61)+
+ + -
+ +/-
+ +/-
泛T:CD2,CD5,CD7, cCD3 幼稚T:CD34,TdT,CD1a, CD4/8, 成熟T:CD3,CD4,CD8
T-ALL的分型
分型 急性早期T前体细胞白血病 early T precursor ALL CD7 + CD2 TdT CD3c/m + +
急性T细胞白血病 T-ALL
CD11b CD11b
CD5 CD5
CD45 CD45
CD64
CD34
CD64 CD64
CD19 CD19
GlyA GlyA
CD11b
CD117
CD45
CD11b
CD5
CD64
CD34
GlyA
CD64
CD19
CD41
干祖细胞标志:T祖细胞 CD34 + TdT + CD117 -/+ HLA-DR +/CD38 +
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