链球菌和葡萄球菌分离鉴定
临床细菌培养鉴定流程及报告.介绍
3．分离培养 ⑴一般培养: 用定量接种环或无菌微量 加样器取尿液0.001ml或0.01ml(已使用 抗生素患者),接种于血平板和麦康凯/中 国兰平板,不能定量时需用倾碟法记数， 35～37℃培养18～24小时。 (2)特殊培养: 对临床要求真菌、淋病奈 瑟菌及结核菌等培养者，根据细菌所需 条件接种相应特殊培养基，放臵相应条 件下进行培养。
(三 ) 尿 尿路感染是指尿道内有大量微生物繁殖 而引起的尿路炎症。从肾脏排泌出来的 尿液正常情况下是无菌的，如果在尿液 中分离出细菌（排除污染因素）即为菌 尿，同时伴有感染症状者称为尿路感染。 根据感染部位可分为上尿路感染（肾盂 肾炎）及下尿路感染（膀胱炎），男性 还可出现前列腺炎。
1.尿中常见分离菌
⑵采血时间及采血量 采血培养应该尽量在使
用抗菌药之前进行，在24小时内采集2～3份血
培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视
为单份血培养）。对间歇性寒战或发热应在寒 战或体温高峰到来之前0.5～1小时，采集血液， 或于寒战或发热后1小时进行。成人采血量8～ 10ml，儿童1～5ml。血液和肉汤之比1：5 ～1：
(2)标本采集 a.清洁中段尿 最好是晨尿，是临床上 最常留取尿标本的方法 b.耻骨上膀胱穿刺法 是评估膀胱内细 菌感染的“金标准” c.直接导尿法 d.小儿收集包 e.留臵导尿
(3)标本运送 标本采集后应及时送检， 2小时内进行接种，否则应臵4～8℃冰箱 保存，冷藏保存标本时间不得超过8小时。
(2)报告方式 初步报告：在分离出细菌后，进行革兰 氏染色，作出初步报告。 最终报告：有意义的阳性结果报告，应 报告菌落计数、细菌种名及药敏结果。 无意义的阳性结果报告，报告菌落 数、革兰氏染色形态特征，并注明是纯 培养或是混合菌生长。 阴性结果报告:应报告无菌生长和菌落计 数＜1000cfu/ml或 ＜100cfu/ml尿。
球菌的培养与鉴定(实验)
链球菌属
（一）菌落特征（血琼脂平板） • 肺炎链球菌
– 灰色，较小， α溶血，“脐窝”状凹陷，有荚膜菌株可 成粘液样
• 化脓性链球菌（A群）
– 灰白色，较小，半透明，无/有光泽，周围有较大的β 溶血环
• 无乳链球菌（B群）
– 灰白色，较A群大，平坦，有光泽，不透明，周围有狭 窄的β溶血环
蕈糖 乳糖 麦芽糖 蔗糖 甘露糖
四、操作步骤
（2）肺炎链球菌
Optochin敏感试验 胆汁溶菌试验（有对照）
（3）化脓性链球菌与无乳链球菌
杆菌肽敏感试验 CAMP试验
四、操作步骤
（4）粪肠球菌
触酶试验 65g/LNaCl 胆汁-七叶苷试验 精氨酸双水解酶试验（有对照管） 甘露醇 山梨醇 阿拉伯糖 棉子糖
球菌的培养与鉴定
苏州大学附属第二医院 刘婷婷
1
实验目的
2
实验内容
3
实验材料
4
操作步骤
5
实验结果
一、实验目的
• 掌握葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属的 菌落特点、染色形态及鉴别实验；
• 了解其它球菌的菌落特点、染色形态及鉴 别。
二、实验内容
葡萄球菌属
金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌
链球菌属
肺炎链球菌 化脓性链球菌 无乳链球菌
3 结果
在两种细菌划线交界处出现箭头状透明溶血环区 为阳性，否则为阴性。
CAMP试验
链球菌属
2、肺炎链球菌
Optochin敏感试验：＋ 胆汁溶菌试验：＋ 荚膜肿胀试验：＋ 分解菊糖
Optochin敏感试验
1 原理
Optochin能干扰肺炎链球菌叶酸合成，抑制 细菌生长，故肺炎链球菌对其敏感。
病原性球菌的检验
病原性球菌的检验一、葡萄球菌属Staphylococcus⏹广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。
⏹致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中毒等。
分类与分型1）金黄色葡萄球菌(S. aureus)：多数致病。
（2）表皮葡萄球菌(S. epidermidis)：偶可致病。
（3）腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)：不致病。
（4）致病性菌株能产生黄色或柠檬色素。
（5）多数金黄色葡萄球菌可被相应噬菌体裂解，表皮葡萄球菌不敏感。
金黄色葡萄球菌的致病性⏹用噬菌体可将金葡萄菌分为4群23个型。
⏹肠毒素型食物中毒由Ⅲ和Ⅳ群金葡萄菌引起，Ⅱ群菌对抗生素产生耐药性的速度比Ⅰ和Ⅳ群缓慢很多。
⏹造成医院感染严重流行的是Ⅰ群中的52、52A、80和81型菌株。
⏹引起疱疹性和剥脱性皮炎的菌株经常是Ⅱ群71型。
金黄色葡萄球菌的流行病学⏹作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。
因而，食品受其污染的机会很多。
金黄色葡萄球菌及其检验⏹革兰氏阳性球状，排列呈葡萄串状。
无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，个别形成荚膜。
致病性葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）菌体较小、约0.5~1um., 普通0.4~1.2um。
培养及生化特性1.在普通培养基上生长良好（需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃、pH7.4 ，对营养要求不高，加少量葡萄糖或血液生长更旺盛。
），在麦康凯琼脂平板不生长。
2. 血平板上生长更佳，致病菌株β溶血3. 产生金黄色色素4. 高度耐盐: 可在7.5~15%NaCl肉汤中生长。
5. 分解葡、乳、麦、蔗糖，产酸不产气，触酶阳性，致病菌株能分解甘露醇。
6. 金黄色葡萄球菌能产生的毒素和酶（致病因素P149）1）溶血毒素2）杀白细胞素3）血浆凝固酶：区分葡萄球菌是否具有致病性的重要标志。
4）脱氧核糖核酸酶：5）肠毒素6）溶纤维蛋白酶7）透明质酸酶抗原性1. 多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁，借此可分群。
微生物实验设计-病原性球菌的鉴定
医学微生物学实验设计姓名：***学号：**********班级：10级临床十一班病原性球菌的鉴定姚淑宝（石河子大学医学院石河子832000）摘要：球菌是细菌中的一大类，其中对人类有致病性的球菌包括分属葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的一些细菌。
本次实验设计以掌握病原性球菌的形态和培养特性，熟悉病原性球菌的分离和鉴定程序为目的。
对脓汁中的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌进行鉴别。
一、鉴定思想本次鉴定试验，先将脓汁标本直接镜检，再分离培养，观察镜下菌体的形态特征以及形成菌落的形态特征确定待测菌的菌属。
然后，对可疑菌落纯培养，通过不同生化反应对同一菌属中的不同细菌进行区别。
（具体见图1-1）分离纯化葡萄球菌属奈瑟菌属血浆凝固酶试验胆汁溶菌试验麦芽糖发酵试验二、鉴定方法（一）直接镜检将脓汁标本涂片进行革兰染色，然后在显微镜下观察细菌菌体的形态、排列、染色性并作出初步诊断。
葡萄球菌属：革兰染色阳性，球形，无芽胞、无鞭毛，呈葡萄串状排列。
链球菌属：革兰染色阳性，球形或椭圆形，无芽胞、无鞭毛，呈链状或成双排列。
肺炎链球菌具有荚膜双球的典型形态。
奈瑟菌属：革兰染色阴性，无芽胞、无鞭毛，常成双排列。
脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌大多于中性粒细胞内外分布。
通过直接镜检可以确定脓汁标本中细菌的菌属。
在确定菌属的基础下再对脓汁标本中的细菌分离纯化，然后挑取可以菌落通过再次涂片染色镜检、致病物质检查、生化反应、血清学鉴定等方法进行菌属内的区别。
（二）分离纯化用分区划线法将脓汁中的细菌接种在血琼脂平板培养基或巧克力色培养基上并在5%二氧化碳、37℃的条件下培养18~48小时。
观察菌落的形态。
葡萄球菌属：在血平板上形成圆形凸起、表面光滑、润湿、边缘整齐、不透明的菌落。
形成金黄色、白色和柠檬色脂溶性色素，多数金黄色葡萄球菌菌落周围有β溶血现象。
链球菌属：在血平板上形成灰白色、圆形凸起、半透明或不半透明的细小菌落。
肉鸡葡萄球菌、链球菌混合感染的鉴定及其诊治
摘 要 ：从辽南 肉鸡 场的病死鸡体 内分离到 ５ 不同菌株的病 原菌 。通过培养 特性 、菌落 形态 、染色 特性 、生 种
化 试 验 等 一 系列 鉴 定 ，确 定 这 ５种 菌 株 中 有 １ 为 兽 疫 链 球 菌 、２株 为 禽 链 球 菌 、 ３株 为 金 黄 色 葡 萄 球 菌 。 致 病 株 性 实 验 表 明 ２株 链 球 菌 呈 Ｂ 血 ，１ 呈 ｎ 血 ，呈 ｎ 溶 株 溶 、ｐ溶 血 的 菌 株 对 小 白 鼠 的致 病 性 为 １ ０ 。将 ５ 菌 株 单 ０ 种 独 进 行 药 敏 试 验 时 抗 生 素 对 这 些 菌 有 较 好 的效 果 ，并 且 选 择 药 物 范 围 较 广 。而 用 混 合 菌 进 行 药 敏 试 验 时 药 物 敏 感 效 果 均 不 显 著 。临 床 肉鸡 两 种 菌 混 合 感 染 时 病 程 轻 ， 则 能 治 愈 ，重 症 鸡 极 少 有 治 愈 ，需 要 淘 汰 ，对 肉 鸡 的 养 殖 业造 成 很 大 的 经 济 损 失 。
关 键 词 ： 肉鸡 ；链球菌 ；葡萄球 菌；诊 治
中 图分 类号 ：Ｓ８１ ３
文献 标识 码 ：Ａ
文 章编 号 ：１７ －０１ ２０ ）０ －００ －０ ６ １ ５７（０６ ３ ０１ ３ 发 病后 期 爪 僵 直 消瘦 ， 别 鸡 只 有 鳞 片发 黑 现 象 。 个
近年 来 ， 养鸡 业 呈 集 约 化 、 规 模 的发 展 ， 规 大 且 模 化养 肉鸡 场 的疾病 情况 ， 日趋复 杂 型 ， 往是两 种 往 或两 种 以上 的疾 病 同时感 染 ， 继发 感染 也很 常见 。 肉鸡葡 萄球 菌 、链球 菌感 染 疾病 的分 布范 围极 广 ，世 界各 地均 有发 生 ，危 害严 重 ，是 多年来 一直 困扰养 鸡业 的主要 疾病 之 一 。但 肉鸡 混 合感染 以上 两 种菌 ，在 国内报 道甚 少 。近 年来 ，辽 南地 区养 肉
病原性球菌及检验
病原性球菌及检验球菌种类很多，根据革兰氏染色的不同，分为G-、 G+两类球菌。
G+有：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌和微球菌。
G-有：脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌、卡他布兰汉氏菌等。
对人体致病的球菌称病原性球菌，因能引起机体化脓性炎症，故又称为化脓性球菌。
常见的有葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌。
一、葡萄球菌属(一)形态与染色葡萄球菌呈不规则堆集排列，形似葡萄串状，也可见单个、成对或短链排列。
为G+性球菌，直径0.5-1.5um，（致病性葡萄球菌菌体较非致病性葡萄球菌菌体小）无芽胞，无鞭毛、无荚膜；无动力。
(二)分类 1965年按血浆凝固酶分为：血浆凝固酶阴性葡萄球菌，血浆凝固酶阳性葡萄球菌。
1.血浆凝固酶阴性葡萄球菌包括：表皮、腐生葡萄球菌。
2.血浆凝固酶阳性葡萄球菌包括：金黄色、中间型、家畜葡萄球菌。
(三)抗原本菌水解后，用沉淀法可获两种抗原即蛋白抗原和多糖抗原。
1.蛋白抗原：是一种表面抗原，为完全抗原；有种特异性，无型特异性。
存在葡萄球菌细胞壁的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白。
2.多糖抗原：是半抗原，存在于细胞壁上，是金黄色葡萄球菌的重要抗原。
有型特异性，分A、B、C三型。
(四)标本接种1.脓汁、尿道分泌物、脑脊液沉淀物，通常直接接种在血琼脂上，经37℃24-48h培养，可见直径2-3mm，产生不同色素的菌落。
2.粪便、呕吐物应接种卵黄高盐、高盐甘露醇琼脂平板上，经37℃24-48h培养可形成细小菌落，48h后形成典型菌落。
3.疑为败血症者，抽取静脉血5ml，注入50ml葡萄糖肉汤培养基中。
(五)培养特性需氧或兼性厌氧，对营养要求不高。
在20%CO2环境中，有利于毒力产生。
最适温度37℃，最适PH7.4。
DNA中G+C含量：30-39%。
1.在普通琼脂平板上，经37℃、24-48h培养，可形成圆形，凸起、边缘整齐、表面光滑、湿润、有光泽、不透明、脂溶性色素的菌落，直径一般为1-2mm，但大者也有4-5 mm的菌落。
葡萄球菌的鉴定
血浆凝 固酶
甘露醇 发酵
金葡
表葡
腐生
（4）新生霉素敏感试验
血平板 菌悬液涂布 5ug/L新生霉素纸片 35℃孵育16~18h S:抑菌圈直径>16mm，R:≤16mm
结果 ATCC25923 表葡 S R
腐生
阳性结果 （S）
实验七 葡萄球菌鉴定
检验系微生物教研室
（一）葡萄球菌检验程序
脓液、咽拭子、穿刺液 尿液、痰液脑脊液血液粪便、呕吐 物
直接涂片染色
初报
分离培养 （血平板）
分离培养
增菌培养 （高盐甘露醇 平板）
涂片染色 触媒 血浆凝固酶 甘露醇发酵 耐热核酸酶 其他鉴定试验
取可疑菌落
鉴定试验
药敏试验
报告
（二）目的要求
培养基：血琼脂平板，MH琼脂，甘露醇发酵管 试剂：生理盐水，3%H2O2,EDTA抗凝兔血浆，革兰染液，
新生霉素纸片、头孢西丁、红霉素、克林霉素纸片 其他：酒精灯，接种环，接种针，玻片，显微镜，孵箱等
（四）步骤方法
1.细菌菌落特征观察：
大小 形态 光泽 表面 边缘 透明度 颜色 溶血 金葡 表葡 腐生
玻片法
【操作】取兔血浆和生理盐水各1滴分别滴于载玻 片上，用接种环挑取细菌，混合后观察。
【操作】
试管法
（3）甘露醇发酵试验：
【原理】致病性葡萄球菌多含有分解甘露醇的酶类， 能发酵甘露醇产酸，培养基由紫色变为黄色。
【操作】细菌分别接种甘露醇单糖发酵管，经35℃ 孵育18-24h观察结果。
【结果】金葡为阳性，表皮、腐生为阴性
H2O2
H2O + O2
链球菌和葡萄球菌分离鉴定
青岛农业大学兽医微生物学课程论文题目：链球菌和葡萄球菌分离鉴定姓名：学院：动物科技学院班级：马业科学1201 学号： 2012 任课教师：温建新二0一四年四月十二日链球菌和葡萄球菌分离鉴定班 2012指导教师温建新摘要：为了鉴别致病性葡萄球菌和链球菌，我们将用过氧化氢试验，甘露醇试验，凝固酶试验等方法进行鉴别，并根据他们的不同性质出现不同的结果，得出菌的种类。
关键词：葡萄球菌；链球菌引言：葡萄球菌是一群革兰氏染色阳性球菌【1】，因常常堆聚成葡萄串状而得名。
多数葡萄球菌为非致病菌，少数可致病。
代表种有金黄色葡萄球菌。
白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌等。
典型的葡萄球菌为圆形或卵圆形，常葡萄状排列，革兰氏染色阳性，无鞭毛，无荚膜，不产生芽胞，呈球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成葡萄状。
葡萄球菌无鞭毛，不能运动。
无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。
易被常用的碱性染料着色，其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。
营养要求不高，在普通培养基上生长良好，在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳，需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧【2】., 多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产生气。
致病性菌株能分解甘露醇.链球菌是一类球形的革兰氏阳性细菌【2】，属于厚壁菌门的一个属。
这些细菌细胞分裂时总是沿一个轴，所以通常成对或者链状的。
因为这些特征，他们被称作“链球菌” . 球形或卵圆形，直径0.6～1.0um，多数呈链状排列，短者4～8个细菌组成，长者有20～30个细菌组成。
链的长短与菌种及生长环境有关，在液体培养基中形成链状排列比在固体培养基中形成的链长。
幼龄菌大多可见到透明质酸形成的荚膜，如延长培养时间，荚膜可被细菌自身产生的透明质酸酶分解而消失。
无芽胞，无鞭毛，有菌毛样结构，含M蛋白，革兰氏染色阳性。
能发酵简单的糖类，产酸不产气, 需氧或兼性厌氧，有些为厌氧菌。
营养要求较高。
【1】普通培养基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生长。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
青岛农业大学
兽医微生物学课程论文
题目：链球菌和葡萄球菌分离鉴定
姓名：
学院：动物科技学院
班级：马业科学1201 学号： 2012 任课教师：温建新
二0一四年四月十二日
链球菌和葡萄球菌分离鉴定
班 2012
指导教师温建新
摘要：为了鉴别致病性葡萄球菌和链球菌，我们将用过氧化氢试验，甘露醇试验，凝固酶试验等方法进行鉴别，并根据他们的不同性质出现不同的结果，得出菌的种类。
关键词：葡萄球菌；链球菌
引言：葡萄球菌是一群革兰氏染色阳性球菌【1】，因常常堆聚成葡萄串状而得名。
多数葡萄球菌为非致病菌，少数可致病。
代表种有金黄色葡萄球菌。
白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌等。
典型的葡萄球菌为圆形或卵圆形，常葡萄状排列，革兰氏染色阳性，无鞭毛，无荚膜，不产生芽胞，呈球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成葡萄状。
葡萄球菌无鞭毛，不能运动。
无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。
易被常用的碱性染料着色，其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。
营养要求不高，在普通培养基上生长良好，在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳，需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧【2】., 多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产生气。
致病性菌株能分解甘露醇.
链球菌是一类球形的革兰氏阳性细菌【2】，属于厚壁菌门的一个属。
这些细菌细胞分裂时总是沿一个轴，所以通常成对或者链状的。
因为这些特征，他们被称作“链球菌” . 球形或卵圆形，直径0.6～1.0um，多数呈链状排列，短者4～8个细菌组成，长者有20～30个细菌组成。
链的长短与菌种及生长环境有关，在液体培养基中形成链状排列比在固体培养基中形成的链长。
幼龄菌大多可见到透明质酸形成的荚膜，如延长培养时间，荚膜可被细菌自身产生的透明质酸酶分解而消失。
无芽胞，无鞭毛，有菌毛样结构，含M蛋白，革兰氏染色阳性。
能发酵简单的糖类，产酸不产气, 需氧或兼性厌氧，有些为厌氧菌。
营养要求较高。
【1】普通培养基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生长。
血琼脂平板上形成灰白色、有乳光、表面光滑、边缘整齐、直径0.5—0.75mm的细小菌落，不同菌株有不同溶血现象。
肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌均产生α溶血环【3】。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1待鉴定菌A.B各一，健康兔。
1.1.2 试剂及其配制1:5兔血浆，革兰氏染色液，百分之三的过氧化氢溶液
1.1.3 器材：普通营养琼脂平板，血琼脂平板，甘露醇微量发酵管。
无菌注射器，碘酒棉，酒精棉，无菌离心管，无菌平皿，离心机，接种环，小试管，载玻片。
1.2方法
1.2.1 划线分离，由接种环以无菌操作分别沾取少许待分离的材料A，B.。
在无菌平板表面进行平行划线、，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来。
如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。
分别取待测A，B菌于普通培养基划线培养和血琼脂培养基。
置于37摄氏度培养18至24小时。
1.2.2 血平板制作取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用
1.2.3兔心脏取血法和大、小鼠心脏取血法类似，且比较容易掌握。
将兔固定在手术台上，用碘酒酒精消毒皮肤，选择心搏最明显处穿刺，针头刺入心脏后即有血液涌入注射器。
取得所需血量后，迅速将针头拔出，这样心肌上的穿孔易于闭合。
经6～7天后，可以重复进行心脏采血。
1.2.4 生化鉴定：分别取待测菌A，B。
取2毫升百分之三的过氧化氢溶液，加入干净的小试管中，用细玻璃棒蘸取试验菌，插入过氧化氢液面下，发现B有气泡产生，为葡萄球菌，A为链球菌。
1.2.5形态鉴定：进行革兰氏染色。
1.2.6凝固酶试验：挑取细菌菌苔，混悬于1:4稀释的0.5毫升兔血浆，同时用已知阳性菌株作对照，置37摄氏度培养2至4小时，观察结果，凝固者B为阳性。
1.2.7甘露醇发酵实验：将各种葡萄球菌分别接种于甘露醇发酵管中，置37摄氏度培养24小时，观察情况。
2 结果与分析
2.1普通琼脂是直径1到2毫米的白色或米色略微凸起的光滑球面，菌落呈圆形，湿润，不透明，边缘齐整。
血液琼脂平板：多数病菌株形成明显的溶血。
但链球菌比葡萄球菌的效果明显。
2.2过氧化氢酶试验若有气泡产生，B则为葡萄球菌，A否则为链球菌。
2.3凝固酶试验：挑取细菌菌苔，混悬于1:4稀释的0.5毫升兔血浆，同时用已知阳性菌株作对照，置37摄氏度培养2至4小时，观察结果，凝固者为阳性。
2.4甘露醇发酵实验：将各种葡萄球菌分别接种于甘露醇发酵管中，置37摄氏度培养24小时，观察情况。
3.1 结果讨论
经试验结果鉴定A为链球菌，B为金黄色葡萄球菌。
3.2操作的过程中可能出现的问题：触媒实验①
3％H2O2溶液要新鲜配制。
②不宜用血琼脂平板上生长的菌落，因红细胞含有触酶，可致假阳性反应。
③取对数生长期的细菌。
4 结论：A为链球菌，B为金黄色葡萄球菌。
参考文献：
【1】李一经，兽医微生物学，2011年1月第一版。
【2】陆承平，兽医微生物学第四版。
【3】兽医微生物学(原书第2版）。