猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法(摘自农牧发[2001]38号)
猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法（摘自农牧发
[2001]38号）
发布日期：2010-12-15 浏览次数：33
本标准规定了猪尿中克伦特罗检验的制样和酶联免疫吸附测定方法。
本标准适用于猪尿中克伦特罗的残留常规快速筛选及定量检测。
猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法
前言
克伦特罗为β—肾上腺素受体激动药，是一种用于人治疗哮喘、支气管痉挛的药物。
研究发现在饲料中添加克伦特罗可促进动物生长、提高瘦肉率，特别是改进脂肪型动物的肉与脂肪的比例，猪饲用后生长速度快，体型好，且瘦肉多、脂肪少，被当作“瘦肉精”而成为一些饲料生产企业和养猪户的“秘密武器”。
但是克伦特罗进入猪体内后，主要分布在肝等内脏器官，在体内代谢的时间较长，容易造成药物在组织中残留，给消费者带来危害；健康的人在食用一定量的残留有克伦特罗的猪肉或内脏后，可能出现肌肉震颤、心慌、战栗、恶心、代谢紊乱、呼吸急促、烦躁不安等症状。
由于克伦特罗的性质稳定，能够在猪尿中以原形排出，因此制订猪尿中克伦特罗的检测方法，以监测“瘦肉精”的使用，显得非常重要。
竞争酶标免疫法是非常有效的筛选方法，可定量测定尿、肌肉、肝脏及牛眼中的克伦特罗。
此法快速简便、经济实用，较易掌握推广。
本标准由江西省农业厅提出。
本标准由江西省兽药饲料监察所负责起草。
本标准起草人：刘安南、陈文云、万文根、徐国茂。
猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法
1 范围
本标准规定了猪尿中克伦特罗检验的制样和酶联免疫吸附测定方法。
本标准适用于猪尿中克伦特罗的残留常规快速筛选及定量检测。
2 测定方法
2.1 原理与方法
测定的基础是抗原抗体反应。
酶联板包被有克伦特罗特异性抗体的抗体，加入抗克伦特罗的特异性抗体，两者结合被固定。
标样或试样中克伦特罗与酶（辣根过氧化酶）标记抗原竞争抗克伦特罗的特异性抗体。
通过洗涤以除去没有与抗克伦特罗的特异性抗体结合的酶标记抗原。
加入酶基质（过氧化尿素）和发色剂（四甲基联苯胺）结合到酶联板上的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的产物。
加入反应停止液后使颜色由蓝色转变为黄色。
在450nm 处测定吸光度值。
吸光度值与样品中的克伦特罗浓度成反比。
2.2 试剂、用途及仪器、设备
竞争酶标免疫法试剂盒可用于定量测定尿、肌肉、肝脏等中的克伦特罗。
试剂盒中包括了所有检测用的试剂，在使用前，请详细阅读试剂盒说明书。
定量分析须用微孔板酶标仪（450nm）进行测量。
2.2.1 克伦特罗系列标准溶液（0ng/L，100 ng/L，300 ng/L，900 ng/L，2700 ng/L，8100 ng/L）
2.2.2 酶标板
2.2.3 抗克伦特罗的特异性抗体
2.2.4 酶标记抗原
2.2.5 缓冲溶液
2.2.6 酶基质/发色剂
2.2.7 反应停止液（1mol/LH2SO4）
2.2.8 微孔板酶标仪（450nm）
2.2.9离心机
2.2.10微型振荡器
2.2.11 微量加样器（20μl，50μl，100μl，200μl，250μl）
3 制样
3.1 样品的制备
取适量新鲜或冷冻空白或供试尿液，如尿样浑浊，则必须2000g离心10min，取上清液留用。
3.2 样品的保存
-20℃冰箱中贮存备用。
3.3 测定
测定之前将所有试剂回升至室温20℃—24℃，取解冻后的供试样品，2000g离心10min，取上清液，作为供试液。
3.3.1 测定程序（室温20℃—24℃条件下操作）
（1）将足够标准和样品所用数量的孔条插入微孔架，标准和样品做两个平行实验，记录下标准和样品的位置。
（2）加入100μl稀释后的抗体溶液到每一个微孔中底部，在室温孵育15min。
（3）倒出孔中的液体，将微孔架倒置在吸水纸上拍打（每行拍打3次），以保证完全除去孔中的液体，用250μl蒸馏水充入孔中，再次倒掉微孔中液体，重复操作两遍以上。
（４）精密吸取２０μl标准溶液及处理好的样品到各自的微孔中，标准和样品做两个平行实验。
（5）加入100μl稀释的酶标记物到微孔底部，在微型震荡器上混匀，室温孵育30min。
（6）重复步骤（3）。
（7）加入100μl基质/发色剂到微孔中，在微量振荡器上充分混匀（或小心地在平面上转动酶标板以充分混合），并在室温暗处孵育15min。
（8）加入100μl反应停止液到微孔中，混匀。
在60min内450nm处以空气为空白测定吸光度值。
3.3.2 结果判定和表述
按下式计算百分吸光度值：
百分吸光度值=B/B0×100%
式中：B—为标准溶液或供试样品的平均吸光度值；
B0—为零标准的标准溶液平均吸光度值；
以X轴为标准溶液中克伦特罗浓度（ng/L）的自然对数，Y轴为百分吸光度值，在半对数坐标纸上绘制标准曲线图。
从标准曲线上查出供试样品中克伦特罗的浓度（ng/L）。
也可以用专业计算机软件求出供试样品中克伦特罗的浓度。
检测结果小于1000ng/L时判为未检出，大于或等于1000ng/Lg时判为可疑，需要复检后再确定。
复检后小于或等于1000ng/L为未检出，大于1000ng/L为阳性。
尿液稀释系数为1。
酶联免疫法测定猪尿中克伦特罗残留的检测与分析
酶联免疫法测定猪尿中克伦特罗残留的检测与分析作者：曹忠君来源：《新农业》2022年第14期摘要：应用酶联免疫法对来自某地区屠宰厂100批次猪尿样品进行克伦特罗的检测。
结果显示，检测猪尿中克伦特罗含量试验的回收率范围为74.3%～109.7%。
该方法具有简单、快速、灵敏、准确的特点，适合检测人员操作和推广。
检测数据没有克伦特罗残留检出，表明该地区屠宰厂所屠宰的生猪其克伦特罗残留符合屠宰要求。
本研究对屠宰企业产品检测和基层检测机构业务开展有一定的参考价值。
关键词：酶联免疫法；克伦特罗；猪尿在现代化畜牧业养殖过程中，普遍存在着用于提高经济动物产品产量的药物及违禁品被广泛滥用的现象，盐酸克伦特罗就是其中最常用的一种。
它属于拟肾上腺素类药物，被人们意外发现盐酸克伦特罗可明显促进经济动物生长，显著提高瘦肉率。
能够促进动物肌肉生长，特别是机体蛋白质的合成，阻碍脂肪的形成，从而改善肉品质，所以盐酸克伦特罗又称为“瘦肉精”。
大量试验证明，盐酸克伦特罗在动物体内蓄积残留的主要器官和组织是，肝、眼睛、肌肉、肺、毛发、肾和脂肪组织。
药物残留对环境、人体健康、畜牧业健康发展等方面影响极大。
近年来，我国政府及相关部门对兽药的科学用药和残留检测极为重视，因此应重视对盐酸克伦特罗的检测。
本研究旨在探讨应用酶联免疫法检测猪尿中克伦特罗残留的方法，同时也为了监测某地区屠宰的生猪克伦特罗残留的现状。
结果表明，该方法具有快速、简单、准确、检测成本不高的特点，本次试验检测数据全部合格。
本方法适用于大批量检测，便于基层检测机构以及屠宰企业应用，能够起到监测经济动物药物使用情况的作用。
1.1 仪器和设备DNM9602G型酶标分析仪（配备450纳米滤光片）；CF160RXⅡ型高速立式冷冻离心机；恒温培养箱（可调至25℃）；可调式移液器（规格为50微升、300微升、1000微升）；八道移液器（规格为300微升）；移液器吸头50微升、300微升、1000微升；吸水纸。
猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法(摘自农牧发[2001]38号)
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猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法（摘自农牧发[2001]38号）发布日期：2010-12-15 浏览次数：33本标准规定了猪尿中克伦特罗检验的制样和酶联免疫吸附测定方法。
本标准适用于猪尿中克伦特罗的残留常规快速筛选及定量检测。
猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法前言克伦特罗为β—肾上腺素受体激动药，是一种用于人治疗哮喘、支气管痉挛的药物。
研究发现在饲料中添加克伦特罗可促进动物生长、提高瘦肉率，特别是改进脂肪型动物的肉与脂肪的比例，猪饲用后生长速度快，体型好，且瘦肉多、脂肪少，被当作“瘦肉精”而成为一些饲料生产企业和养猪户的“秘密武器”。
但是克伦特罗进入猪体内后，主要分布在肝等内脏器官，在体内代谢的时间较长，容易造成药物在组织中残留，给消费者带来危害；健康的人在食用一定量的残留有克伦特罗的猪肉或内脏后，可能出现肌肉震颤、心慌、战栗、恶心、代谢紊乱、呼吸急促、烦躁不安等症状。
由于克伦特罗的性质稳定，能够在猪尿中以原形排出，因此制订猪尿中克伦特罗的检测方法，以监测“瘦肉精”的使用，显得非常重要。
竞争酶标免疫法是非常有效的筛选方法，可定量测定尿、肌肉、肝脏及牛眼中的克伦特罗。
此法快速简便、经济实用，较易掌握推广。
本标准由江西省农业厅提出。
本标准由江西省兽药饲料监察所负责起草。
本标准起草人：刘安南、陈文云、万文根、徐国茂。
猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法1 范围本标准规定了猪尿中克伦特罗检验的制样和酶联免疫吸附测定方法。
本标准适用于猪尿中克伦特罗的残留常规快速筛选及定量检测。
2 测定方法2.1 原理与方法测定的基础是抗原抗体反应。
酶联板包被有克伦特罗特异性抗体的抗体，加入抗克伦特罗的特异性抗体，两者结合被固定。
标样或试样中克伦特罗与酶（辣根过氧化酶）标记抗原竞争抗克伦特罗的特异性抗体。
通过洗涤以除去没有与抗克伦特罗的特异性抗体结合的酶标记抗原。
加入酶基质（过氧化尿素）和发色剂（四甲基联苯胺）结合到酶联板上的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的产物。
酶联免疫吸附法测定猪肉中盐酸克伦特罗的方法
酶联免疫吸附法测定猪肉中盐酸克伦特罗的方法作者：张清超来源：《现代食品》 2017年第11期盐酸克伦特罗俗称瘦肉精，是人工合成类的β- 肾上腺素兴奋剂的一种，在治疗支气管扩张方面有显著效果，用量适当时，是防治哮喘、肺气肿等肺部疾病的有效物质；但当其用量为正常治疗量的5 ～ 10 倍时，在能量重分配的作用下，将导致脂肪沉积异常减少、肌肉合成异常增加，部分非法使用者往往将其添加到动物饲料中，用以改善动物胴体品质。
当动物食用盐酸克伦特罗后，其体内将残留不同程度的盐酸克伦特罗，用其制作的食品一旦被人们食用，将引发一系列中毒症状，严重危害人体生命安全。
调查显示，盐酸克伦特罗一次摄入量过大，人体将产生呕吐、心跳骤然加速等异常生理反应，严重者甚至直接死亡，因此被世界上大多数国家禁用。
近年来，在我国的严厉打击下，非法生产销售添加盐酸克伦特罗食品的现象显著减少，但畜产品抽检的实际工作显示，瘦肉精仍时有检出，加强对畜产品中盐酸克伦特罗的检测势在必行。
在多种检测方法中，胶体金免疫层析法、酶联免疫吸附法较为常见，广泛应用于畜牧业中，具有准确率高、操作简便、耗时短等优点。
下面本文将就酶联免疫吸附法测定猪肉中盐酸克伦特罗的方法进行进一步分析和总结。
1 原料与方法1.1 原料到附近市场随机抽取一批剔除杂质、脂肪的无皮精肉，使用高速捣碎机对无皮精肉进行处理，彻底捣碎后将所有精肉混合均匀并置于冰箱冷冻备用。
检测时，从冰箱冷冻室抽取5 g 捣碎样品，将25 mL 的50 mmol/L HCl与样品混合，持续摇动至均质。
在离心管中加入5 g 均质物，以10 000 r/min 的速度高速离心15 min，分离血清，提取上清液，在上清液中加入300μL 的1 mol/L NaOH，混匀并静置15 min。
15 min 后，在混合上清液中加入4 mL 的500 mmol/L KH2PO4，混匀静置，保存在温度为4 ℃左右的环境中。
90 min 后，取出混合液，以10 000 r/min的速度高速离心15 min，分离上清液，待检，待检标本共10 份[1]。
ELISA方法检测猪尿中克伦特罗的方法验证
2020年第03期盐酸克伦特罗(Clenbuterol ，CLE)俗称“瘦肉精”，是一种人工合成β-肾上腺素受体激动剂，在促进动物生长、提高饲料转化率和利用率以及产品品质等方面确实起到了十分显著的作用。
然而，一连串因食用含“瘦肉精”的动物源食品中毒事件发生后，包括世界上许多国家明文规定不得在养殖业中使用盐酸克伦特罗，2002年我国农业部第176号公告明确禁止在动物饲料和饮用水中添加RAC 等β-受体激动剂,将其列为兽药残留监控的重点对象。
目前，活体样本宰前尿检是保证动物源食品安全监管的一个有效手段，盐酸克伦特罗残留检验已成为生猪屠宰前的必检项目之一。
实验室多采用间接竞争ELISA 检测试剂盒方法对克伦特罗残留量进行初筛，该法适合对样本中克伦特罗进行定性或半定量检测，能在短时间内完成大批量样品的检测,且无需复杂的仪器设备,具有特异性强、灵敏度高、试剂稳定性高、试验效率高等优点。
由于商品化试剂盒生产商众多，试剂盒质量参差不齐，试剂盒的质量直接影响检测结果的准确性，为了验证ELISA 方法检测猪尿中克伦特罗残留量的可行性，对试剂盒的校正曲线的线性相关关系、检测限、重复性和样品加标回收率进行了验证，现将试验结果报告如下。
1材料与方法确定无盐酸克伦特罗的猪尿，采自东莞市中心定点屠宰场。
Multiskan FC 型酶标仪，购自美国Thermo 公司。
盐酸克伦特罗，购自曼哈格BePure ，批号：A0004128，纯度90.5%；克伦特罗ELISA 试剂盒,购自浙江迪恩生物,批号：60119。
将试剂盒中所有试剂置于22~25℃条件下回温1h 以上。
猪尿样品2500rmp/min 离心3min 。
在微孔板中加入50μL 的标准溶液/猪尿样品，立即在所有孔中加入100μL 酶标工作液，轻轻晃动反应板几秒钟，在22～25℃条件下孵育10min ，倒掉微孔中的液体，所有微孔置于洗板机洗板中洗板4次，每次每孔250uL 清洗液。
猪尿冻干粉中盐酸克伦特罗标准物质的研制
猪尿冻干粉中盐酸克伦特罗标准物质的研制李兰英，许丽，徐勤，闻艳丽，丁敏，刘刚（上海市计量测试技术研究院，上海201203）摘要：研制一套4种浓度水平的猪尿冻干粉中盐酸克伦特罗标准物质，以健康安全的猪尿作为空白基体，利用添加的方法，经过均匀性和稳定性检验，由8家实验室采用液相色谱-串联质谱法对该套标准物质进行协同定值，并进行不确定度评估。
结果表明该套标准物质均匀性良好，在4℃条件下保存稳定性在1年以上，标准物质中CLB 的含量及不确定度分别为：0.65±0.15，1.28±0.44，3.78±0.46，11.5±1.8ng/mL （k =2）。
该标准物质可应用于猪尿中盐酸克伦特罗检测过程的方法验证和检测结果质量控制等。
关键词：标准物质；盐酸克伦特罗；猪尿冻干粉；食品安全中图分类号：TB99；R914.3；TS202.3；TS207.3文献标志码：A文章编号：1674-5124（2014）02-0049-04Development of reference materials of clenbuterol hydrochloride inswine urine lyophilisateLI Lan-ying ，XU Li ，XU Qin ，WEN Yan-li ，DING Min ，LIU Gang（Shanghai Institute of Measurement and Testing Technology ，Shanghai 201203，China ）Abstract:Reference materials （RMs ）of clenbuterol hydrochloride （CLB ）in lyophilized swine urine powder were developed by spiking CLB stock solution into healthy ，safe and CLB-free swine urine.The homogeneity and the stability of the RMs were strictly inspected.The concentration of the RMs was certified using LC-MS/MS method by 8different laboratories ，and the uncertainty evaluation was performed finally.The analysis results showed that the RMs were homogeneous and stable for at least one year in 4℃.The certified value and expanded uncertainty of the RMs were as following ：0.65±0.15，1.28±0.44，3.78±0.46，11.5±1.8ng/mL respectively （k =2）.These RMs were intended for CLB analysis method validation and quality control.Key words:reference material ；clenbuterol hydrochloric ；swine urine powder ；food safety收稿日期：2013-04-18；收到修改稿日期：2013-06-13基金项目：国家自然科学基金青年基金项目（21205079）科技部质检行业公益项目（201310016）国家质检总局科研计划项目（2012QK273）上海市质监局科研项目（2012-04）作者简介：李兰英（1984-），女，山东阳谷县人，工程师，硕士，主要从事兽药残留基体标准物质的研制和生物传感器的研究。
酶联免疫吸附法测定猪肉中盐酸克伦特罗的方法
酶联免疫吸附法测定猪肉中盐酸克伦特罗的方法
张清超
【期刊名称】《粮食流通技术》
【年(卷),期】2017(011)022
【摘要】随着社会经济的持续发展、人们生活水平的日益提高,人们对于畜产品的质量要求越来越高,优质高效的畜产品已经成为人们日常生活的基本要求.但是,受到利益的驱使,仍有部分不法分子在畜产品的饲料中添加不同含量的盐酸克伦特罗以改善动物肉质,获取非法利益,严重威胁人民群众的身体健康.基于此,本文以猪肉中的盐酸克伦特罗的测定为例,从酶联免疫吸附法的原理、操作步骤以及注意要点等方面出发,分析总结酶联免疫吸附法测定猪肉中盐酸克伦特罗的方法,研究结果发现,采用胶体金免疫法进行初筛,使用酶联免疫吸附对初筛结果为阳性的样品进行二次检测,是提高检测准确率的有效途径.
【总页数】3页(P80-82)
【作者】张清超
【作者单位】宁城产品质量计量检测所,内蒙古赤峰 024200
【正文语种】中文
【中图分类】TS251.51
【相关文献】
1.酶联免疫吸附法测定猪肉中的盐酸克伦特罗 [J], 刘维红;厉磊;秦玲
2.高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中的盐酸克伦特罗 [J], 王娇;高永慧;姚华;史
靖宏
3.竞争酶联免疫吸附法测定猪肉中的盐酸克伦特罗的研究 [J], 史建国;邵秀芝
4.酶联免疫吸附法测定猪肉中盐酸克伦特罗的方法 [J], 张清超;
5.酶联免疫吸附法（ELISA）检测猪肉中盐酸克伦特罗 [J], 薛金英
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酶联免疫吸附法（ELISA）检测猪肉中盐酸克伦特罗
BB 0×100%百分吸光度值（%）=酶联免疫吸附法（ELISA ）检测猪肉中盐酸克伦特罗薛金英（山东省诸城市畜牧兽医管理局山东诸城262200）盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精）为一种人工合成的β-肾上腺素兴奋剂，具有扩张支气管的作用，常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病。
当其应用量达到治疗量的5～10倍时，其有能量重分配作用，可使肌肉合成增加，脂肪沉积减少，因此俗称为“瘦肉精”。
在畜牧业生产中一些非法使用者将其作为一种和生长促进剂添加到动物饲料中，用以改善胴体的品质，同时也造成食品中盐酸克伦特罗（瘦肉精）的残留。
当人们食用盐酸克伦特罗残留的产品后会出现一系列的中毒症状。
动物源性食品药物残留问题逐渐引起人们的重视。
本法用于定量、定性检测猪肉中盐酸克伦特罗的残留。
1试验原理采用间接竞争ELISA 法，在微孔板上包被抗盐酸克伦特罗检测抗原，样品中的盐酸克伦特罗将和酶标板上的盐酸克伦特罗检测抗原竞争结合盐酸克伦特罗抗体，盐酸克伦特罗检测抗原结合的盐酸克伦特罗抗体再与同时加入的酶标二抗结合，洗涤后，用TMB 底物系统显色，微孔板吸光值与样品中盐酸克伦特罗含量成负相关，与标准曲线比较再乘以浓度比值即可得出盐酸克伦特罗在样品的实际含量。
2试验方法（稀释倍数为4倍）称取1.0g （±0.05g ）均质样品于50mL 聚苯乙烯离心管中，加入1mL 0.1M 盐酸，再加入2mL 提取工作液，充分振荡混匀5min ，4000rpm （20～25℃）离心10min 。
取1mL 上清液加入约25μL 1M 氢氧化钠调节pH 至6.5～7.5之间，充分振荡混匀，取50μL 用于分析。
如果上层中存在白色脂肪层，取样时应避开。
试剂准备：将10×浓缩洗涤液和蒸馏水（或去离子水）按1∶9充分混匀，即为1×洗涤液。
编号：将盐酸克伦特罗标准溶液和待测样品对应微孔按序编号，建议每个标准溶液和待测样品均做重复孔。
酶联免疫吸附法检测猪肉和猪尿中莱克多巴胺残留
喜甍与 拱添 裁 ２９ 第ｌ 第２ 饲 加 ｏ年 ４ 期 ｏ 卷
酶联 免疫吸附法检 测猪 肉和 猪 尿 中 菜 克 多巴胺 残 留
张 亚 峰 ， 张会 彩 ， 刘 聚 祥 ， 王 建 平
（ 北 农 业 大 学动 物 科 技 学 院 ．河 北 保 定 河 ０ １０ ７ ０ ０）
心 管 中 （ 白 样 品 按 ｌ ４ ｇｇ 加 Ｒ Ｃ）加 入 ｌ 空 ～ ０ｎ／ 添 Ａ ， ０ ｍ Ｌ丙 酮 ． 动 １ｍ ｎ后 再 ２０ ０ｒ ｎ离 心 １ ｉ 涡 ｉ ０ ｍｉ ／ ０ｍ ｎ
美 国 ５ ０型 Ｂｏ Ｒ ｄ酶 标仪 ： ５ ｉ ａ ２ Ｊ Ｂ型组 织 捣 卜２
１０ ＬＴ ０ ＭＢ 系统 底 物 显 色 液 ，７℃显 色 １ ｉ ， ３ ５ｒ ｎ 最 ａ
准检 测 方法 是液 相 色谱 法 、气 相 色谱一 谱 法和 液 质
相色谱 一 串连质谱 法 仪器 法虽 可定性 定量 检测 ， 但 设备 昂贵 ， 步骤 繁琐 ， 费时费 力 。Ｅ ＩＡ法可 同时 对 ＬＳ 大 批 量 样 品进 行 快 速 筛 选 ，操作 简 单 。本 文 采 用 Ｅ ＩＡ法 对 猪 肉 和猪 尿 中 Ｒ Ｃ残 留检 测进 行 了研 ＬＳ Ａ 究 和探讨 ． 以供 参考
摘 要 ： 莱克 多 巴胺 单 克 隆抗 体 『 接 竞 争酶 联 免 疫 吸 附 （ Ｌ Ｓ ￣ 以 日 】 Ｅ ＩＡ）
定猪 肉和 猪 尿 中 莱克 多 巴胺 残 留。 该 法 对
莱 克 多 巴胺 的检 测 限 为 ０８ｎ ／ Ｌ ｇ ， 空 白组 织 中的 添加 回收 率 为 ８ ． １ ９５ ， 异 系 数 为 ５８ １ ． ． ｇ （） 在 ｍ ０４ ％～ ０ ． 变 ％ ． ％～ ２ ％。 ６
分子印迹电位型传感器快速检测猪尿液中的克伦特罗
分子印迹电位型传感器快速检测猪尿液中的克伦特罗梁荣宁;高奇;秦伟【摘要】以盐酸克伦特罗为模板分子,采用沉淀聚合法合成了克伦特罗的分子印迹聚合物,并以其为离子载体,制得分子印迹聚合物膜克伦特罗离子选择性电极.在最优实验条件下,电极对克伦特罗阳离子的检出限可达7.0×10-8mol/L,线性范围为1.0×10 7～1.0×10-4 mol/L,能斯特斜率为55.7 mV/decade.此电极具有优越的选择性、快速的响应时间以及良好的稳定性；已成功应用于实际猪尿样品中克伦特罗的测定,加标回收率为98％～107％,检测时间小于3 min.%A polymeric membrane ion-selective electrode for the determination of clenbuterol is described. It is based on a molecularly imprinted polymer (MIP) as an ionophore for molecular recognition, which can be synthesized by precipitation polymerization using clenbuterol hydrochloride as a template molecule. Under the optimized conditions, the proposed membrane electrode exhibits Nernstian response to the protonated clenbuterol over the concentration range of 1. 0 X 10-7-1. 0× 10-4 mol/L with a slope of 55.7 mV/decade, and the detection limit is 7. 0×10-8 mol/L. The MIPbased sensor shows excellent selectivity, rapid response time and satisfactory long-term stability. The potentiometric sensor has been successfully applied to determine the clenbuterol in pig urine samples with recoveries between 98% and 107% and an analytical time of less than 3 min.【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2012(040)003【总页数】5页(P354-358)【关键词】分子印迹聚合物;电位型传感器;克伦特罗【作者】梁荣宁;高奇;秦伟【作者单位】中国科学院烟台海岸带研究所,中国科学院及山东省海岸带环境过程重点实验室,烟台264003;中国科学院烟台海岸带研究所,中国科学院及山东省海岸带环境过程重点实验室,烟台264003;中国科学院研究生院,北京100049;中国科学院烟台海岸带研究所,中国科学院及山东省海岸带环境过程重点实验室,烟台264003【正文语种】中文“瘦肉精”的主要化学成分包括克伦特罗、莱克多巴胺以及沙丁醇胺等，其中在中国使用最广泛的是克伦特罗。
酶联免疫法对猪尿中克伦特罗的测定
现 代农 业科技
２１ 年第 ｌ ０１ ５期
酶联免疫 法对猪尿 中克伦特 罗的测定
高 月明 梁 润娴 赵 瑞琴
（ 东 省佛 山 市禅 城 区 农 产 品 质 量 安 全 监 督 检 测 中 心 ， 东佛 山 ５ ８ ０ ） 广 广 ２ ０ ０
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摘要 介 绍 了酶 联免 疫 法测 定猪 尿 中克 伦特 罗的方 法 ， 用酶 标仪 进行 检 测分析 。 此方 法具 有操 作 过程 简单 ， 品 处理 快 捷 ， 同时分 样 可 析 多个样 品 ， 灵敏 度 高等优 点 ， 保证 肉品卫 生安全 的较 好 的监控 方 法。 是 关键 词’ 酶联免 疫 法 ； 尿 ； 猪 克伦特 罗 ； 检测 中圈分 类号 Ｔ ２ １８ Ｓ５ ． 文献标 识码 Ａ
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其 可 以 增加 动 物 的瘦 肉率 ， 国 ２ 我 Ｏ世 纪 ９ ０年 代 曾 一 度 引 入 并 推 广克 伦 特 罗作 饲 料 添加 剂 。 由于 克伦 特 罗 在 食 物 中 引起 中毒 。 界 上 已经普 遍 禁用其 作 为饲 料添 加 剂 。 国已 世 我 经在 畜 牧行 业 生产 中明令 禁止 生产 、 用 、 售盐 酸克 伦特 使 销 罗 。 非 法使 用克 伦 特罗 现 象依 然存 在【 因此 ， 须加 强对 但 ｌ １ 。 必 克 伦特 罗残 留 的检测 。 酶 联 免 疫法 是 常 用 的克 伦 特 罗残 留快 速 检 测 方 法 ， 我 国已将 其 列 为 国家 标准 （ ／ ０ ９１ ２ ２ ０ ＧＢＴ５ ０ ．９ — ０ ３动 物 性 食 品 中克伦 特 罗残 留量 的测定 》 第 三法 ） 陈 穗等 嚼 用克 伦特 （ 。 使 罗 试剂 盒 （ 国 ｒ Ｂｏ ｈｒ 德 — ｉｐ ａｍ公 司 ）从 检 测 下限 、 ， 校正 曲线 的 线 性检 验 、 密 度验 证 、 标准 品 的 回收 率测定 等 方面 对 酶 精 加 联 免 疫 法 检 测 克 伦 特 罗残 留 量 的质 量 控 制方 法进 行 了 探