链球菌属
链球菌属检验
1．概述链球菌属是一群触酶试验阴性、呈链状排列的革兰阳性球菌。
该菌属种类繁多，目前临床上仍沿用Lancefield血清学方法进行分群（A、B、C、D、F、G等18个群），或根据溶血现象（β溶血、α溶血或草绿色溶血、γ溶血或不溶血）进行分类。
化脓性链球菌是临床上最重要的链球菌，属A群、β溶血的链球菌。
2. 标本类型血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。
3. 鉴定3.1 形态与染色革兰阳性球菌，固体培养基上呈单个或成双排列，较少呈链状排列，肉汤培养基中呈长链状排列，肺炎链球菌呈矛头状，成双或链状排列。
3.2 培养特性在血琼脂平板上菌落可出现三种溶血反应：α溶血周围有灰绿色的狭窄溶血环；β溶血周围有明显较大的完全透明环；γ溶血（不溶血性）无异常变化。
肺炎链球菌菌落中央呈脐窝状、表面光滑、灰色、扁平，周围有草绿色α溶血环。
3.3 生化反应触酶试验阴性，对各种碳水化合物的分解因菌种而异，链球菌不被胆汁溶解。
肺炎链球菌胆盐溶菌试验阳性，Optochin试验敏感（抑菌环＞14mm）。
3.4 鉴别要点3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，单个、成双或链状排列，菌落较小，可出现β溶血、α溶血或不溶血，触酶试验阴性。
3.4.2 根据溶血及关键性试验，对链球菌进行推测性鉴定分群。
A群链球菌（化脓性链球菌）：β溶血，杆菌肽敏感。
B群链球菌（无乳链球菌）：β溶血，CAMP试验阳性，马尿酸钠试验阳性。
C群链球菌（似马链球菌、兽疫链球菌和马链球菌等）：马尿酸钠、6.5%氯化钠耐盐试验均为阴性，血清学分型、杆菌肽耐药（抑菌试验阴性）。
D群肠球菌（粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌等）：胆汁七叶苷、6.5%氯化钠耐盐试验均为阳性，45℃生长。
现归属于肠球菌属。
C、F及G群链球菌的鉴定常需用血清学方法。
非β溶血链球菌的鉴别见表1。
表1 非β溶血链球菌的鉴别菌名Optochin试验胆汁溶菌试验胆汁七叶苷试验肺炎链球菌+ + -牛链球菌- - +其他草绿色链球菌群- - -3.5 操作步骤3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，挑取可疑菌落，涂片染色镜检。
临床微生物学检验：链球菌属
肺炎链球菌脐窝状菌落（培养48h后）
27
肺炎链球菌粘液样菌落 28
3.生化反应
• 分解葡萄糖，产酸不产气。 • 一般不分解菊糖，不被胆汁溶解（鉴别
甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）。 • 触酶（-），与葡萄球菌不同。
•肺炎链球菌： 分解葡萄糖、乳糖和菊糖，胆汁可溶菌， Optochin敏感，触酶（-）
45
小结
• 链球菌属细菌种类多，其中某些菌种为毒力强的 致病菌。分类较为复杂，临床分离株仍以传统的 血平板上溶血现象、菌落特点和Lancefield抗原 血清分型，结合生化反应进行鉴定。
• 肺炎链球菌：革兰阳性双球菌，有荚膜，脐窝样 菌落、OP（+）、胆汁溶菌（+）
• A群链球菌：镜下特点、菌落特点、杆菌肽、血清 试验
42
链球菌微生物检验程序
涂片染色 G+球菌，触酶（-）
43
五、药敏试验药物选择
β溶血链球菌 肺炎链球菌 草绿色链球菌
药敏时药物选择不同
首选青霉素和氨苄西林
44
预防分娩妇女B群链球菌感染：
①推荐使用青霉素和氨苄西林。 ②低危险性青霉素过敏者，推荐头孢唑林。 ③高危险性青霉素过敏者推荐克林霉素或红霉素
41
血清学检查
抗O试验（ASO test）： 链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生
相应抗体ASO(血清），加入SLO乳胶试剂，SLO 抗体(ASO)与乳胶试剂(吸附有SLO)反应，产生 凝集，为阳性；无凝集，为阴性。
–原理：中和试验，用SLO检测血清中的ASO –方法：间接凝集 –结果：效价大于400单位 –意义：活动性风湿热及肾小球肾炎辅助诊断
16
急性肾小球肾炎的临床表现：水肿、 血尿、蛋白尿等。
链球菌属
+ +
+ +
+ -
+ V
-
VP
--脲酶 透明质酸 酶 碱性磷酸 酶Biblioteka NTNTNT
V
V
缓症链球菌的鉴别
生化反应 血链生物1 血链生物 2 血链生物 3 副血链球菌 缓症链球
β-岩藻糖苷酶 β –DAcetylgal 唾液酸酶
-
+ -
+ -
V + -
V
α-L-岩藻糖 苷酶
-
-
-
V
-
β-D-乙酰葡 糖苷酶
－
－
＋
－
－
Ｖ
－
－
－
－
－
－
－
－
－
＋
＋
－
猪链球菌生化反应
• • • •
可用API手工鉴定进行鉴定 鉴别要点 １：羊血平板为α溶血、马血平板β溶血 ２：VP 、胆汁七叶苷、 ６５ g ／Ｌ氯化钠、45 ℃ 、 10℃ 生长、胆汁耐受(麦康凯培养基)以上均为阴 性． • ３：棉子糖+ 乳糖- 露甘露醇- 山梨醇- 核糖葡萄糖+甘露糖- 丙酮酸- 甘油- 松三糖- 马尿酸盐• ４：血清学检测分型． • ５：初认为猪链球菌交到有条件单位做进一鉴定．
－
－ － － －
－
－ － － ＋
－
－ － － －
Ｖ
－ Ｖ ＋ ＋
－
－ － － －
－
＋ － ＮＤ ＮＤ
－
－ ＋ ＮＤ －
非β溶血型链球菌的鉴别
菌种／ 群 肺炎链 球菌 Optochi 胆汁溶 n敏感 菌 ＋ ＋ 胆汁七 叶苷 － ＰＹＲ 卫星现 象 － 血清群
链球菌属
生物学性状
生物学性状
抗原结构
（1）荚膜多糖抗原
具有型特异性，可将肺炎链球菌分为85个型别。
（2）其他抗原
肺炎链球菌含有M蛋白和C多糖。
C反应蛋白（C reactive protein，CRP）：CRP 不是抗体，但在炎症的活动期（如风湿热） 含量增多。
致病性和免疫性
致病性 条件致病。
致病物质：主要是荚膜的抗吞噬作用。
3．核蛋白抗原
生物学性状
抵抗力
本菌抵抗力不强，加热60℃30min即被杀死。 对一般消毒剂、抗生素如红霉素、霉素、氯霉素、
磺胺等均敏感。
致病物质
致病性与免疫性
②M蛋白（M protein）；
(1)细胞壁成分 ①脂磷壁酸（lipoteichoic acid,LTA）；
③肽聚糖； ④细胞壁受体。
第 一 节 化脓溶血性链球菌
化脓性链球菌（S.pyogenes)： 肺炎链球菌（S.pneumoniae)
化脓性链球菌
化脓性链球菌（S.pyogenes）按传统分类属于A族
溶血性链球菌，是本属细菌的代表种，致病性强，对 人致病的链球菌有90%属此种。
生物学性状
形态与染色
生物学性状
培养和生化反应
第 二 节
（一）甲型溶血性链球菌
其他链球菌
也称草绿色链球菌（Streptococcus viridans）。
因无多糖抗原，故不属于Lancefield血清学分类的任何族。包括 多个种，条件致病性，引起下列两种疾病:
1．龋齿（dental caries） 常由变形链球菌引起。 2 . 亚 急 性 细 菌 性 心 内 膜 炎 ( subacute bacterial endocarditis) 由此菌引起的亚急性心内膜炎占全部病例50%。
《细菌学》教学课件：链球菌属(Streptococcus)和肠球菌属(Entercoccus)
2020/9/7
Streptococcus-Junqi's Lecture for
18
Medical Studentccus）和 肠球菌属（Entercoccus）
β-hemolytic streptococcus
Aschoff nodule
链球菌属(Streptococcus)
链球菌是具有分类复杂、 致病物质复杂及引起的临床疾 病病种也复杂的一大类G＋球菌。 一、 生物学特性 二、 链球菌的分类 三、 A群链球菌的致病物质及临 床所致疾病 四、 微生物学诊断 五、 防治原则
Streptococcus-Junqi's Lecture for
7
Medical Students
hyaluronidase
可分解细胞间质的透明质酸，使病菌易在组织中扩散；
streptokinase，SK
使血中纤维蛋白酶原转变为纤维蛋白酶。可溶解血块 或阻止血浆凝固，有利于病菌在组织中扩散；
streptodornase，SD
降解脓汁中高度粘稠的DNA，使脓汁稀薄，促进病菌 扩散；
2020/9/7
Streptococcus-Junqi's Lecture for
8
Medical Students
*streptolysin O, SLO
对氧敏感 抗原性强，抗O试验 破坏细胞膜胆固醇，造成心肌损坏
streptolysin S, SLS
（2）乙型溶血性链球菌 （β-hemolytic streptococcus） 溶血性链球菌（Streptococcus hemolyticus） 致病能力强
链球菌属
需氧或兼性厌氧。营养要求较高，在含血液、血清、葡萄糖的培养基中才能生长。最适生长温度为35℃，最 适pH为7.4~7.6。在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状沉淀。在血琼脂平板上形成灰白色、表面光滑、凸起、边 缘整齐、直径0.5~0. 75 mm的小菌落。不同菌株有不同的溶血现象。
链球菌不产生触酶，可与葡萄球菌相区别。链球菌不分解菊糖，不被胆汁溶解，这两个特性常被用来鉴别甲 型溶血性链球菌和肺炎链球菌。
实验室检查
病原检查
血清学实验
1．标本采集根据不同的疾病采取不同标本。如化脓性感染的脓汁、咽喉及鼻腔等病灶的棉拭、败血症取血液、 免疫学检查取血液等。
2．病原检查直接涂片染色镜检，发现有典型的革兰阳性球菌链状排列可做出初步诊断。
3．分离培养与鉴定脓汁或棉拭直接接种于血琼脂平板上。血液标本应先在肉汤中增菌后再做分离培养。细菌 鉴定主要根据菌落形态、溶血现象、染色镜检、生化反应等进行。
(3)致热外毒素(pyrogenic exotoxin)又称红疹毒素或猩红热毒素，是人类猩红热的主要毒性物质，致热外 毒素抗原性强，具有超抗原作用，对兔有致热性和致死性。
(4)侵袭性酶类 A群链球菌可产生多种侵袭性酶，均是扩散因子，主要有三种。
肺炎链球菌属链球菌属。广泛分布于自然界，经常寄居于正常人的鼻咽腔中，多数不致病，少数引起大叶性 肺炎等疾病。
2．致病物质本菌的致病物质主要是荚膜荚膜有抗吞噬作用，失去荚膜，细菌就失去致病力。此外，肺炎链球 菌溶血素O、脂磷壁酸、神经氨酸酶是肺炎链球菌较重要的致病物质。
3．所致疾病该菌寄生在正常人的口腔及鼻咽腔，一般不致病，当机体免疫力下降时才致病。肺炎链球菌主要 引起大叶性肺炎，其次是支气管炎肺炎后可继发脓胸、胸膜炎，也可引起乳突炎、中耳炎、败血症和脑膜炎 等。
化脓性细菌链球菌属
在人类中，GAS可引起皮肤和皮下组 织感染，如淋巴结炎、蜂窝织炎等， 也可引起全身感染，如肺炎、心内膜 炎等。
化脓性链球菌属的传播途径
GAS主要通过飞沫传播，也可通 过直接接触感染部位或污染物传
播。
在拥挤、不通风的环境中，如学 校、幼儿园、军队等集体居住地
，容易发生GAS的传播。
GAS也可通过皮肤微小伤口或污 染的食物传播，引起全身感染。
化脓性链球菌属感染的控制与管理
监测与报告
建立有效的监测系统，及时发现 并报告化脓性链球菌属感染病例
，采取必要的控制措施。
隔离与治疗
对感染者进行隔离治疗，防止疫 情扩散，同时对接触者进行追踪
和观察。
提高公众意识
加强公众对化脓性链球菌属感染 的认识，提高预防意识，减少感
染风险。
05
化脓性链球菌属的研究进展
化脓性细菌链球菌属
汇报人：可编辑 2024-01-11
目录
• 链球菌属的概述 • 化脓性链球菌属的特性 • 化脓性链球菌属感染的症状与诊断 • 化脓性链球菌属的治疗与预防 • 化脓性链球菌属的研究进展
01
链球菌属的概述
Chapter
链球菌属的定义
01
链球菌属是一类革兰氏阳性球菌，属于化脓性细菌，广泛分布于自然界、人及动 物粪便和健康人的鼻咽部，大多数为正常菌群，并不致病。
Chapter
化脓性链球菌属的耐药性研究
总结词
化脓性链球菌属的耐药性研究主要关注 其耐药机制、传播途径及对临床治疗的 影响。
VS
详细描述
随着抗生素的广泛使用，化脓性链球菌属 的耐药性问题日益严重。研究显示，其耐 药机制主要包括产生抗菌药物酶、改变抗 菌药物作用靶点以及降低细胞膜通透性等 。耐药性的传播主要通过基因突变和质粒 传递实现。耐药性的出现对临床治疗带来 了挑战，需要开发新的抗菌药物和治疗方 法。
链球菌属检验
编写：常晓林2011-09-09 审核：文佳琼2011-11-01 批准：牛华2011-11-011．概述链球菌属是一群触酶试验阴性、呈链状排列的革兰阳性球菌。
该菌属种类繁多，目前临床上仍沿用Lancefield血清学方法进行分群（A、B、C、D、F、G等18个群），或根据溶血现象（β溶血、α溶血或草绿色溶血、γ溶血或不溶血）进行分类。
化脓性链球菌是临床上最重要的链球菌，属A群、β溶血的链球菌。
2. 标本类型血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。
3. 鉴定3.1 形态与染色革兰阳性球菌，固体培养基上呈单个或成双排列，较少呈链状排列，肉汤培养基中呈长链状排列，肺炎链球菌呈矛头状，成双或链状排列。
3.2 培养特性在血琼脂平板上菌落可出现三种溶血反应：α溶血周围有灰绿色的狭窄溶血环；β溶血周围有明显较大的完全透明环；γ溶血（不溶血性）无异常变化。
肺炎链球菌菌落中央呈脐窝状、表面光滑、灰色、扁平，周围有草绿色α溶血环。
3.3 生化反应触酶试验阴性，对各种碳水化合物的分解因菌种而异，链球菌不被胆汁溶解。
肺炎链球菌胆盐溶菌试验阳性，Optochin试验敏感（抑菌环＞14mm）。
3.4 鉴别要点3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，单个、成双或链状排列，菌落较小，可出现β溶血、α溶血或不溶血，触酶试验阴性。
3.4.2 根据溶血及关键性试验，对链球菌进行推测性鉴定分群。
A群链球菌（化脓性链球菌）：β溶血，杆菌肽敏感。
B群链球菌（无乳链球菌）：β溶血，CAMP试验阳性，马尿酸钠试验阳性。
C群链球菌（似马链球菌、兽疫链球菌和马链球菌等）：马尿酸钠、6.5%氯化钠耐盐试验均为阴性，血清学分型、杆菌肽耐药（抑菌试验阴性）。
D群肠球菌（粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌等）：胆汁七叶苷、6.5%氯化钠耐盐试验均为阳性，45℃生长。
现归属于肠球菌属。
C、F及G群链球菌的鉴定常需用血清学方法。
非β溶血链球菌的鉴别见表1。
表1 非β溶血链球菌的鉴别菌名Optochin试验胆汁溶菌试验胆汁七叶苷试验肺炎链球菌+ + -牛链球菌- - +其他草绿色链球菌群- - -3.5 操作步骤3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，挑取可疑菌落，涂片染色镜检。
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细菌鉴定的基本程序
标本
直接涂片 革兰染色镜检
分离培养 取可疑菌落
鉴定试验和药敏试验
2020/4/3
结果报告
脓、痰、咽拭
脑脊液
血液
直接涂片染色
分离培养
增菌培养
观察菌落及溶血现象
触酶试验（－）
血清学 分类
杆菌肽
Optochin 敏感试验
胆汁 七叶苷
6.5％ NaCl
A群 链球菌
2020/4/3
2020/4/3
肺炎链球菌与甲型链球菌的鉴别
菌 名
形态
菌落
胆汁 溶菌
Optoc hin
菊糖 分解
小白 鼠
毒 力
肺 矛尖状、成双 脐窝状、草绿 链 排列、有荚膜 色溶血环
+
+ +/－ +
甲 圆形、短链、 针尖状、草绿
链 无荚膜
色溶血环
－
－
－－
2020/4/3
乙型溶血性链球菌的鉴定
• β-溶血环 • 包括A、B、C、D、F、G群 • C群可采用血清学鉴定 • 其它群采用生化反应或其他鉴定试验
• 型特异性抗原（表面抗原）：细胞壁蛋 白抗原，有M、T、R、S四种，根据M抗 原不同，可将（－） • A群链球菌：杆菌肽敏感试验（+） • B群链球菌：CAMP试验（+）、马尿酸
钠水解试验（+） • D群链球菌：胆汁七叶苷试验（+）
2020/4/3
草绿色 链球菌
肺炎 链球菌
D群 链球菌
肠球菌
检验方法—直接镜检
• 方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜检 • 初步报告:
“查见革兰阳性球菌” “查见革兰阳性矛尖状双球菌，有荚膜 ，疑似肺炎链球菌” 荚膜肿胀试验可确诊， “找到肺炎链球 菌”
2020/4/3
检验方法—分离培养
• 脓、痰、脑脊液标本－→接种血平板，进行分 离培养
• 液体培养基：呈沉淀生长现象
• 血平板：灰白色、细小、圆形、光滑的 、有不同溶血现象的菌落
分类
菌落特征
甲型（α）溶血性链 灰色、针尖状菌落、周围有草绿
球菌
色溶血环（ α溶血）
乙型（β）溶血性链 灰白色、细小菌落、周围有宽大
球菌
透明溶血环（ β溶血 ）
丙型（γ）链球菌 灰白色小菌落、无溶血环
2020/4/3
2020/4/3
临床意义－－其他链球菌
• B群链球菌：条件致病菌，是新生儿败血 症和脑膜炎主要致病菌
• 肺炎链球菌：引起大叶性肺炎等疾病 • 甲型链球菌：条件致病菌，在一定条件
下引起亚急性细菌性心内膜炎。 • 变异链球菌：与龋齿有密切关系
2020/4/3
链球菌常规检验
2020/4/3
标本采集
• 根据临床标本不同采集不同标本
2020/4/3
临床意义－－A群链球菌
致病物质: • 致热外毒素：致热、细胞毒作用、使皮肤
产生红疹、抗原性强 • 溶血素：溶解红细胞、破坏血小板和白细
胞，分为溶血素O和溶血素S两种 • 侵袭性酶：透明质酸酶、链激酶、链道酶
，有利于细菌在体内扩散 • M蛋白：具有抗吞噬作用；与肾小球基底
膜有共同抗原成分，与超敏反应有关
2020/4/3
链球菌溶素O
• 对氧敏感、 • 抗原性强，刺激机体产生抗O抗体， • 抗O试验可用于风湿热等链球菌感染所致
超敏反应性疾病的辅助诊断
2020/4/3
临床意义－－A群链球菌
• 所致疾病 • 化脓性感染：扁桃体炎、丹毒、蜂窝织
炎、淋巴管炎、败血症等 • 猩红热 • 风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎
在液体培养基中易形成长链 致病性强的菌株多为长链 在脓汁标本中多为短链
2020/4/3
链球菌电镜图
2020/4/3
链球菌革兰染色
2020/4/3
培养特点－－生长条件
• 营养要求高，在含血液、血清培养基上 生长良好
• 需氧、兼性厌氧 • D群链球菌可在10℃、45 ℃生长
2020/4/3
培养特点－－生长现象
肺炎链球菌生物学特性
• 形态染色：革兰阳性球菌，矛尖状，成双 排列，在人和动物体内形成荚膜
• 血平板上菌落特征：菌落细小、周围有草 绿色溶血环，48小时后，由于菌落自溶， 呈现“脐窝状”
• 生化反应：Optochin敏感试验（+） 胆汁溶菌试验（+） 菊糖分解试验（+）
• 动物试验：小白鼠毒力试验（+）
水解试验（+） • D群链球菌－－胆汁七叶苷（+）、6.5％氯
化钠生长（－） • 肺炎链球菌－－Optochin敏感试验（+）、胆
汁溶菌试验（+）、形态和菌落特征典型 • 甲型链球菌－－ Optochin敏感试验（－）、
胆汁溶菌试验（－）
2020/4/3
肠球菌
• 革兰阳性球菌，短链排列 • 营养要求高 • 在10℃、45℃、pH9.6条件下均可生长 • 血平板上溶血现象不定 • 触酶试验（-） • 胆汁七叶苷试验（+） • 6.5％NaCl生长试验（+） • PYR试验（+） • 血清学分类属D群
2020/4/3
肠球菌临床意义
• 引起的医院感染仅次于葡萄球菌 • 肠球菌感染以粪肠球菌为主 • 以尿路感染多见 • 有不同程度耐药
2020/4/3
肺炎链球菌电镜图
2020/4/3
肺炎链球菌光镜图
2020/4/3
肺炎链球菌 Gram’s染色镜检图
2020/4/3
链球菌在血平板上菌落特征
丙链
甲链
乙链
2020/4/3
分类－－根据溶血现象分类
• 甲型链球菌：属条件致病菌 • 乙型溶血性链球菌：致病力强 • 丙型链球菌：无致病力
2020/4/3
分类－－根据抗原构造分类
• 群特异性抗原（C抗原）：细胞壁多糖抗 原，可将链球菌分为20群（A、B、C、 D、E、D、E等），引起人类感染的链球 菌90％为A群。
50ml增菌液。 • 拮抗剂：硫酸镁（拮抗多种抗生素）、对氨
基苯甲酸（拮抗磺胺）等 • 培养时间：
常规培养：18～24小时至1周； 亚急性细菌性心内膜炎：观察7天至1月
2020/4/3
链球菌鉴定
• 细菌形态及染色性 • 菌落特征 • 鉴定试验
杆菌肽敏感试验 CAMP试验 胆汁七叶苷试验 Optochin敏感试验 血清学分群快速胶乳凝集试验
• 菌落特征： 甲型链球菌：针尖样菌落、周围有草绿色溶血 环； 乙型链球菌：灰白色小菌落、周围有透明溶血 环； 丙型链球菌：灰白色菌落、无溶血环 肺炎链球菌：灰白色扁瓶小菌落、周围有草绿 色溶血环，培养较久形成脐窝样菌落
2020/4/3
检验方法—增菌培养
• 增菌培养基：葡萄糖肉汤、硫酸镁肉汤 • 血液与培养基比例：1：10，即5ml标本，
链球菌属
• 分布：自然界、人和动物肠道、健康人 鼻咽部
• 所致疾病：致病链球菌引起各种化脓性 炎症、猩红热、风湿热等疾病。
2020/4/3
生物学性状
• 形态染色 • 培养特点 • 生化反应 • 抗原构造 • 分类 • 抵抗力
2020/4/3
形态染色
• 革兰阳性球菌，链状排列，无鞭毛，无 芽孢，可形成荚膜
2020/4/3
非β-溶血性链球菌鉴定
包括 • 肺炎链球菌 • 牛链球菌 • 无乳链球菌 • 草绿色链球菌 • 营养变异链球菌
2020/4/3
草绿色链球菌鉴定
α溶血或不溶血，胆汁七叶苷阴性，包括 • 变异链球菌群 • 唾液链球菌群 • 血液链球菌群 • 咽峡炎链球菌群
2020/4/3
鉴定依据
• A群链球菌－－杆菌肽敏感试验（+） • B 群链球菌－－CAMP试验（+）、马尿酸钠