2份野桑蚕材料线粒体ATPsynthaseF0 subunit 6基因的克隆及遗传进化分析
野桑蚕Bmand—Sxl基因的克隆及原核表达
（ａｃｎ １，９８ 中都 发现 了 Ｓｌ 同源 体 ＳｃｏｅＧｅ ａ． １９ ） ｔ ｘ的 基 因。Ｔ ｒｙｋ Ｎｉｉ （ ０６ 从 家 蚕 的胚 胎 中克 ｅｕｕｉ ｉ 等 ２０ ） ｍ
上 内含子剪 切点 结合 ， 引起 内含 子剪切 的差异 ， 而 从 产生 不 同的 ｍ Ｎ 而且 Ｓｌ 因有 ２个 启 动 子 ， Ｒ Ａ， ｘ基 建 立性 启 动 子 Ｓｌｅ和 维 持 性启 动子 Ｓｌｍ（ ａ ｕｌ ｘＰ ｘＰ Ｓｍ ｅ ｓ
同春 ，９ ３ 。生 物 性 别 决 定 存 在 多样 性 ， 蜥 蜴 、 １９ ） 如
ａｄＮ ｔｉｅ ２ ０ ） ｎ ￣ ｇｒ ｈ Ｒ，０ ０ 。母 系 因 子 包括 起 正 调 控 的 Ｄ ｄｕｅｌ ｓ 、 Ｅ ｈｒ ａ ｈｏ ｉ ） 起 负调 控 的 Ａ（ ａｔｒ ｓ） Ｈ Ｒ（ ｅｍ ｐ ｒｄｔ 和 ｅ ｅ Ｅ （ ｘ ａ ｃｏｈ ｅ ｅ 、 Ｒ ＭＣ ｅ ｔ ｍａｒｃａｔ ） Ｇ Ｏ。主控 因子 是 由来 自 ｒ ａ 常染色 体 的 ｄａ ｅｐ表达 的 Ｄ Ｎ， Ｐ Ｐ Ｄ Ｎ对 Ｓ ｌ ｘ 的表 达起
究仍 停 留在 染 色 体 或基 因水 平 。Ｓｌ 为果 蝇 性 别 ｘ作
决定 调 控 阶 梯 中 的 关 键 基 因 （ ｅｌＲ Ｌ ｅ ａ． Ｂ ｌ ｔ １，
１８ ） 其产 物 Ｓ Ｌ是 一 种 Ｒ Ａ 结合 蛋 白 ， 有 两 ９８ ， Ｘ Ｎ 含
个 Ｒ Ａ识别 基 序 （ Ｒ ， 够 选 择 性 的与 ｍ Ｎ Ｎ Ｒ Ｍ） 能 Ｒ Ａ
Ｊ Ｋ Ｓ Ａ ｓ 息通 道对 Ｓｌｅ起正调 控 （ ｉ ｏ ｔ Ａ —Ｔ Ｔ 信 ｘＰ Ｔｍ ｎｈ Ｍ ｙ
Ｊｅ ａ． ２ ０ Ｓｆ ｎＬｅ ａ．２ ０ ） ｔ １，００；ｅ ｏ １ ，０ ０ 。 ｉ ｔ
野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆分析与原核表达
野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆分析与原核表达丛海峰;徐世清;司马杨虎;张升祥;王更先;董航;刘莹;柳学广【期刊名称】《蚕业科学》【年(卷),期】2007(33)2【摘要】超氧化物歧化酶是野桑蚕保护酶体系的重要酶类。
利用RT-PCR方法克隆出野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)cDNA(EMB I登陆号:AM410997),其开放阅读框ORF长465 bp,编码154个氨基酸。
同源性及系统进化分析表明,推导出的氨基酸序列与3种果蝇的同源性平均为69.3%,与线虫为57%,各物种中与Cu/Zn结合的残基高度保守。
利用ExPASy的ScanProsite以及PSort和TMpred对此编码的蛋白质结构和功能域分析,预测出其具有2段Cu/Zn-SOD特异序列,且该蛋白不存在信号肽以及跨膜区。
将Cu/Zn-SOD cDNA克隆到pET-28 a(+)表达载体,测序鉴定后以IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定其表达的融合蛋白质分子量为19.4 kD。
【总页数】7页(P234-240)【关键词】野桑蚕;铜锌超氧化物歧化酶;序列分析;原核表达【作者】丛海峰;徐世清;司马杨虎;张升祥;王更先;董航;刘莹;柳学广【作者单位】苏州大学生命科学学院;山东农业大学林学院;溧阳市蚕桑技术指导站【正文语种】中文【中图分类】S885.9;Q78【相关文献】1.翘嘴鳜铜锌超氧化物歧化酶基因的分子克隆与原核表达 [J], 程周玉;许亮清;胡向萍;胡宝庆;简少卿;阳刚;张明;文春根;宁瑞红2.蜡样芽胞杆菌905铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆及原核表达 [J], 莫小丹;王勇军;王琦;梅汝鸿3.野桑蚕Bmand-Sxl基因的克隆及原核表达 [J], 宋艳;柳学广;司马杨虎;朱晓苏;徐丽;徐世清4.小胸鳖甲胞外铜锌超氧化物歧化酶重组蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 [J], 孜拉吉古丽·西克然木;马纪;库尔班·吐松;刘小宁5.野桑蚕泛素基因的克隆及原核表达 [J], 陈正凯;周君;包立军;徐剑;沈卫德;陆小平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
（论文）家蚕线粒体nd2、coⅰ和若干trna基因的克隆及序列分析
动物学报48（3）：375~383，2002Acta Zoolo g ica Sinica家蚕线粒体ND2、CO !和若干tRNA 基因的克隆及序列分析!廖顺尧刘运强鲁成!!周泽扬向仲怀（西南农业大学蚕桑丝绸学院，农业部蚕桑学重点开放实验室，重庆400716）摘要克隆并测定了家蚕（Bomb y x mori ）线粒体基因组3468b p 的Eco R !和Hind "双酶切片段序列，根据序列同源性比较，该DNA 片段包括3个蛋白质编码基因：ND2基因、CO !基因和CO #基因5'端399b p 的序列，以及6个IRNA 基因和一个尚待确定的IRNA MeI 基因。
家蚕与果蝇的ND2基因序列同源性约69.7%，CO !基因的同源性约83.8%，CO #基因5'端的同源性约80%，这表明细胞色素氧化酶基因在物种间比烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶基因保守。
6个推定的IRNA 基因序列与果蝇相应IRNA 基因序列差异较大。
另外，除IRNA GIn 基因的二级结构相似外，其它IRNA 基因的二级结构与果蝇相应IRNA 基因的二级结构也有较大差异。
关键词家蚕线粒体基因组3.5kb 片段基因组成基因结构2000-12-05收稿，2001-01-15修回!国家自然科学基金（30170719）资助项目!!通讯作者E-maiI ：Iuchen g @swau.c g .cn第一作者简介廖顺尧，女，28岁，博士。
研究方向：蚕桑生物化学与分子生物学。
E-maiI ：Iiaosh y @线粒体DNA 的发现，为核外遗传系统的研究展开了新的一页。
动物线粒体DNA 是共价闭合的环状双链DNA ，分为重链（H 链）和轻链（L 链），分子量较小（15~20kb ）。
一般动物线粒体基因组包括13个编码疏水性蛋白质亚基基因、22个IRNA 基因、2个rRNA 基因和非编码序列（包含复制起点区域）。
其中，除一个蛋白质基因（ND6）和8个IRNA 基因由L 链编码外，其余都由H 链编码。
野桑蚕应用于家蚕育种的分子标记分析
安学 院
安康 学院 安康学 院 安康 学院 安康 学院 安康学院 安康 学院
１ ２
１ ３ １ ４ １ ５ １ ６ １ ７ １ ８ １ ９
Ａ ｌ０ ３ 安康学 ｋ １ １
Ａ ｌ０ 安康学 院 ｋ １１ Ａ ｌ０ 安康学 院 ｋ １３ Ａｋ １ ２ 安康学 ｌ０ Ａ ｌ ０２ 安康学 ｋ １ １ Ａｋ １ ７ 安康学蹋 ｌ ０ Ａ ｌ０ ５ 安康学 蹋 ｋ １ １ Ａ ｌ ０４ 安康学 院 ｋ１１
ｂ ｓ ｄ ｏ ｉ ｗｏｍ ａ ｅ ｔ ８ ３ ｎ ｈ ｅ ｏ ｄ ｃａ ｓｗ ｓ ｈ ｂ ｄ ｄ ｓ ｅ ｄ ｎ ｓｂ ｓ ｄ ｏ ｉ ｗ ｒ ａ ｅ ｔ ７ ．Ｃ ｕ ｔｒｎ ａ ｅ ｎ ｓｌ ｒ ｐ ｒ ｎｓ ７ ，ａ ｄ ｔ ｅ ｓ ｃ ｎ ｌ ｓ ａ ｙ ｒ ｅ ｃ ｎ ａ ｔ ａ ｅ ｎ ｓｌ ｏ ｋ ｉ ｋ ｍ ｐ ｒ ｎ ｓ ８ ４ ｌ ｓｅ ｇ ｉ ｄ ｖ ｓ ｎ ｒ ｓ ｌ ｒ ｎ ａ ｃ ｒ ｔ ｈ ｏ ｒ ｅ ｏ ｅ ｓ ａ ｎ ． ｉｉｉ ｅ ｕ ｔ ｗｅ ｅｉ ｃ ｏ ｄ ｗｉ ｔｅ ｓ ｕ ｃ ｆｔ ｔ ｉ ｓ ｏ ｓ ｈ ｈ ｒ
ｂ ｍｂ ｘ ｍａ ｄ ｒ ａ ａ ｓ ｔｒａｓ ｔ ｅｐ ｙ ｏ ｅ ｅｉ ｅ ａｉｎ ｈ ｐ ｆｔ ｏ ｅ ｈ ｂ ｄ ｏ ｓ ｒｎ ｒ ｕ ｓｗｅｅ ａ ａｙ ｅ ｙ Ｓ Ｒ ｏ ｙ ｎ ａ ｉ ｓｔ ｔ ｎ ｅ ｍａ ｅ ｌ， ｈ ｈ ｌ ｇ ｎ ｔ ｒ ｌ ｔ ｓ ｉ ｓｏ ｓ ｙ ｒ ｆ ｐ ｇ ｇ ｏ ｐ ｒ ｎ ｌ ｚ ｄ ｂ Ｓ ｉ ｃ ｏ ｈ ｉ ｉ ｍｏｅ ｕ ａ ｒ ｅｓ ｎ１ ｅ ｕ ｔ ｓ ｏ ｄ ｔ ａ ｈ ｙ ｗ ｒ ｉｉ ｅ ｎ ｏ ｔ ａｅ ｏ ｅ ． ｈ ｒｔｃａ ｓｗａ ｙ ｒｄ ｄ ｓ ｅ ｄ ｎ ｓ ｌ ｃ ｌ ｒｍａ ｋ ｒ ． ｅ ｒ ｓ ｌ ｈ ｗｅ ｈ ｔｔ ｅ ｅ ｅ ｄ ｖ ｄ ｄ ｉｔ ｗｏ ｃ ｔ ｇ ｒ ｓ ｔ ｅ ｆ ｓ ｌｓ ｓｈ ｂ ｅ ｃ ｎ ａ ｔ ｓ ｉ ｉ ｉ
酵母菌中ATPase的基因克隆及其功能研究
酵母菌中ATPase的基因克隆及其功能研究酵母菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，它们与人类的生活息息相关，参与了食品、酿酒、制药等众多行业的生产过程。
酵母菌是一种真核生物，与人类细胞有许多相似之处。
酵母细胞中的ATPase就是一个重要的示例。
本文将介绍酵母菌中ATPase的基因克隆和其功能研究的最新进展。
ATPase是一种酶，参与细胞中ATP代谢的过程。
在酵母菌中，ATPase主要存在于线粒体内膜上。
线粒体是细胞中主要的能量生产器，ATPase在线粒体内膜上发挥着重要的作用。
它能将ATP分解为ADP，释放出能量，为线粒体膜上的其他蛋白提供能量。
因此，ATPase在维持细胞生命活动中起着重要的作用。
为了研究ATPase的生物学功能，科学家们需要克隆ATPase的基因。
基因克隆是研究生物学的基础，它可以获取具有特定基因的DNA序列，并用于构建转基因生物、制备特定蛋白等。
在酵母菌中，ATPase基因的克隆也是一个必要的步骤。
早期，科学家通过分离酵母菌细胞质糖酵解酶，得到一种ATPase。
它的特点是可被重金属离子抑制，并能被系统酸处理失活。
1980年，一组科学家从酵母菌中克隆得到了对ATPase编码的基因，命名为ATP1。
ATP1基因编码了一种能够跨越线粒体内膜的蛋白，由于ATPase在线粒体内膜上发挥着重要的作用，因此ATP1也被称为“线粒体ATPase亚基8”。
随着基因测序技术的发展，科学家们对ATPase的研究也取得了新的进展。
2009年，德国科学家从酵母菌中克隆得到了第二个ATPase基因ATP2。
ATP2与ATP1编码的蛋白有些相似，但它更加稳定且耐酸碱性能力更强。
研究表明，ATP2在酵母菌线粒体内发挥着不同于ATP1的重要作用。
最近，法国的科学家进行了更加深入的研究，发现酵母菌中ATPase基因有着更为复杂的表达调控机制。
他们发现，在ATPase基因转录过程中，有多种启动子和剪接方式的选择，不同的启动子和剪接方式会影响ATPase的表达水平和功能。
野蚕基因克隆研究进展
狭义的野蚕指的是经过长时间驯化成为家蚕的
野桑蚕（wild silkworm），广义的野蚕为鳞翅目中除家 蚕以外的吐绢丝类昆虫的总称，包括柞蚕（Antheraea pernyi ）、蓖 麻 蚕（Philosamia cynthia ricini ）、天 蚕 （Antheraeay amamai）、栗蚕（Dictyoploca japonica）、樗 蚕（Philosamia cynthiam）、樟 蚕（Eriogyna pyretorum pyretorum）、柳蚕（Actia sselene ningpoana）、透目大蚕 （Rhodinia fugax）、乌桕大蚕（Attacus atlas）、琥珀蚕 （Antheraea assamensis）、明 目 大 蚕（Antheraea frithi javanensis）、合目大蚕（Caligula boisduvalii fallax）、胡 桃 大 蚕（Dictyoploca cachara）、丁 目 大 蚕（Aglia tau amurensis）、曲线透目大蚕（Rhodinia jankowskii ）、黄 目 大 蚕（Caligula anna）、弧 目 大 蚕（Neoris haraldi ）
野桑蚕羧酸酯酶基因cDNA片段的克隆及序列分析
宋 宏图Ｉ ， 李兵Ｉ 东－ ， 王 ， 赵华强Ｉ ， 王文兵２ 德Ｉ ， 沈卫 ＊
（． １ 苏州大学蚕桑研究所 ， 苏州大学生命科学学院 ， 江苏苏 州 ２ ５ ２ ；＿ １ １３ ２江苏大学生命科学学 院 ， ’ 江苏镇 江 ２ ２ １ ） １０ ３ 摘 要 利 用反 转录一 多聚酶链 式反 应 （ｅｅＳ ｔ ｎｃ ｐ ｏ ｌ ｅａ ａ ａｔ ｎ Ｒ － Ｒ ｒｖｒ ｒ ｓ ｔ ｎ ｏ ｍ ｒ ｅ ｈ ｉ ｒ ｃ ｏ ， Ｔ Ｐ ）技 术 克隆 了野桑蚕 羧 酸酯酶 基 因 ｃ Ｎ ｅ ａ ｒ ｉ ｐｙ ｉ ｓｃ ｎｅ ｉ Ｃ Ｄ Ａ 片段 。 片段 长 ４ ７ Ｄ 共编码 １２个氨基 酸残 基 ； 来 自同一发 育 时期 的不 同组 织分别进 行 Ｐ Ｒ扩增 。 结果显 示 ： 了丝 腺 外其他 组 ２ ， ｂ ４ 对 Ｃ 除 织均有 目的 条带 。 经与 其他 昆 虫酯酶氨 基酸 同源性 比较 发现 ： 桑蚕羧 酸 酯酶与 家蚕 羧酸 酯酶 同 源性 最 高 ， ９ ． 与 赤拟谷 盗 同 野 达 ８ ６％；
桑树花青素合酶基因的克隆与信息学分析
作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2012, 38(7): 1253−1263/zwxb/ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9E-mail: xbzw@本研究由国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-22-ZJ0103), 重庆市蚕桑重大科技专项(CSTC, 2009AA1024)和国家自然青年科学基金(31101769)资助。
*通讯作者(Corresponding author): 余茂德, E-mail: yumd@, Tel: 023-********第一作者联系方式：E-mail: noscjoey@Received(收稿日期): 2011-06-13; Accepted(接受日期): 2012-04-28; Published online(网络出版日期): 2012-05-11. URL: /kcms/detail/11.1809.S.20120511.1816.030.htmlDOI: 10.3724/SP.J.1006.2012.01253桑树花青素合酶基因的克隆与信息学分析张琼予 李 军 赵爱春 王茜龄 金筱耘 李镇刚 余茂德*家蚕基因组生物学国家重点实验室 / 西南大学生物技术学院, 重庆北碚 400715摘 要: 花青素合酶ANS 是花青素合成过程中的一个关键限速酶。
本文利用同源克隆、RT-PCR 从桑椹中克隆出花青素合酶(MaANS )基因, 并进行生物信息学分析和组织特异性表达分析。
通过染色体步移法获得的MaANS 基因的5′端和3′端, 获得基因全长1 535 bp, 由2个外显子和1个内含子组成,包含完整CDS 区域为1 077 bp, 编码358个氨基酸, 与来源于草莓、甘薯、苹果、沙梨的ANS 基因同源性均达到80%以上。
MaANS 编码的蛋白质属于2-酮戊二酸双加氧酶家族。
MaANS 在进化树中的位置与草莓最近,与苹果、沙梨次之。
野蚕孵化酶基因的克隆与生物信息学分析
（ 录号 ： ６０６ ） 登 Ｊ ２３６ 。 Ｎ
Ｂ ａｄ Ｅ Ｏ Ｆ编码 ２ 个氨基酸残基 ， 白质的分 ｍ ｎＨ Ｒ ４ ９ 蛋
子质量（ 为 ３ ．７ｋ 等电点 （Ｉ 为 ５ ５ 。Ｎ端存在 ｍ） ３５ Ｄ， ｐ） ．５ ｌ ６个氨基酸的信号肽 ， 其切割位点位 于 Ａａ 与 Ｔ ｒ 间 ｌ ｈ。 。 （ ） 图３ 。第 ９ — ４ ２ ２２氨基酸残基间的序列是锌依赖金属 蛋 白酶功能域 ， 这与 Ａ ｔ ｉ ｆ ｙ功能域相似。在 １７ ｓ ｃ ￣ｌ ａｎ ａ ８
ｊ ｎ １０８ Ｃ ｉ ） ｉ ｇ ２ １ ， ｈｎ ａ ２ ａ Ａ ｓ ａｔ Ｂ ａｓｏ Ｔ—Ｐ Ｒ ｔ ｈ ｏ ｇ ， ｅｃ ｎｄａ８５ｂ ｉ ｌ ｇ ）ｈｔ ｉｇｅｚｍ Ｈ ）ｇｎ ｏ ｅｅ ｂ ｏｏ ｂｔ ｃ： ｙｍｅｎ ｆ ｒ Ｒ Ｃ ｃｎｌ ｅ ｏ ｗ ｌ ｅ ８ ｐ（ｎ ｅ ｔ ａ ｈｎ ｎｙ ｅ（ Ｅ ｅｅｆ ｍ ｔ ｍ ｒ ｆ ｙ ｏ ｎｈ ｃ ｒ ｈ ｙ Ｃ ｉ ｓ ｉ ｉ ｗ ｒ （ ｏ ｂｘｍ ｎａ／ａ ， ｎ ｉ ｇｎ ａ ｅｉｎｔ ｓ ｍ ｎＨ （ ｎ ａ ｋａｃｓｉ ： Ｎ ２ ３６ ． ｍ ｎ － ｈｎ ｅｗｌ ｓｋ ｏ ｅ ｄ ｌ ｍ Ｂ ｍ ｙ ａ ｄ ｒ ） ａｄｔ ｓ ｅｅｗ ｓ ｓ ａ ｄａ ａ ｄ Ｅ Ｇ Ｂ ｎ ｃｅｓ ｎ Ｊ ６０ ６ ） Ｂ ａ ｄ ｎ ｈ ｄ ｇ ｅ Ｂ ｅ ｏ
野桑蚕br-c基因的克隆与序列分析
1--生物技术•遗传育种 DOI:10.16498/ki.hnnykx.2018.010.001昆虫的生长和发育主要受保幼激素（Juvenilehormone ，JH ）和蜕皮激素（20-hydroxyecdysone ，20E ）的系统调控，因此探究这2种激素的代谢调控及信号传导途径是昆虫生长发育研究领域的热点之一[1-2]。
转录因子BR-C （Broad complex ）是20E 的初级应答基因之一，最早是在黑腹果蝇（Drosophila melanogaster ）中被发现的[3]。
br-c 基因在昆虫变态发育过程中发挥着至关重要的作用，其突变会影响其他20E 初级应答基因及蜕皮相关的20E 次级应答基因的表达[4]。
在果蝇中，br-c 突变使其不能完成幼虫至蛹的转化，而幼虫期br-c 基因表达上调可抑制幼虫表皮基因的表达，而激活蛹表皮基因的表达[5]。
黑腹果蝇、烟草天蛾（Manduca sexta ）、赤拟谷盗（T ribolium castaneum ）和家蚕（Bombyx mori ）中的研究表明，BR-C 的生物学功能是十分保守的，参与调控了胚胎发生、翅分化、神经系统发育、表皮蛋白合成、卵巢干细胞分化以及细胞凋亡等多个发育事件[6-10]。
研究还发现，br-c 基因存在多种剪接形式。
在黑腹果蝇中，br-c 存在z1、z2、z3和z4等4种不同剪接体，家蚕中则仅鉴定出z1、z2和z4这3种异构体形式[11]，赤拟谷盗中则多达5种[12]。
不同br-c 剪接体编码蛋白的C 端都含有一个保守的C 2H 2锌指结构域（C 2H 2-ZF ），N 端则含有一个保守的BTB 结构域，参与基因的转录调控，因而属于BTB-ZF 类转录因子家族[13]。
BTB/ZF 蛋白在不同昆虫结构上具有很高的相似性，它们在激活或者抑制靶标基因的表达中发挥着重要的作用，其中BTB 结构域是决定该蛋白与其他蛋白相互作用的最主要功能域[14]。
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７ ２ ５ ０ ０ ０ ）
要： 本研 究对 ２份 野桑蚕材料 （ Ｗ Ｓ —ａ ｋ ｓ ｑ和 ｗ ｓ —ａ ｋ ｈ ｂ ） 线粒体 ａ ｔ ｐ ６基 因进行 了克隆和序 列分析 。克 隆结
果表 明 ， ２株 野 桑蚕 ａ ｔ ｐ ６基 因 Ｏ Ｒ Ｆ框 全 长 ６ ７ ８ ｂ ｐ ， 编码 ２ ２ ５个 氨 基 酸 残 基 。 序 列 联 配 比 对 结 果 表 明 ２株 野 桑 蚕ａ ｔ ｐ ６基 因之 间 存 在 ６处碱 基 的 差 异 。ｗ ｓ — ａ ｋ ｓ ｑ野 桑蚕 ａ ｔ ｐ ６基 因 与 家蚕 ｃ １ ０ ８ 、 野桑蚕 Ｑ ｉ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ系 、 野桑蚕 日
陕西农业 科学 ２ ０ １ ７ 。 ６ ３ （ ０ ８ ） ： ３ ８— ４ １
２份 野 桑 蚕 材 料 线 粒 体 Ａ Ｔ Ｐ ｓ ｙ ｎ ｔ ｈ ａ ｓ ｅ Ｆ Ｏ ｓ ｕ ｂ ｕ ｎ ｉ ｔ ６ 基 因 的克 隆 及 遗 传 进 化 分 析
楚 渠， 孟 刚， 彭 云武
（ 安康 学院 陕 西省蚕 桑 重 点 实验 室 ， 陕西 安康
野桑蚕 （ Ｂ ｏ ｍ ｂ ｙ ｘ ｍ ａ ｎ ｄ ａ ｒ ｉ ｎ ａ ） 是 鳞 翅 目（ Ｌ ｅ ｐ ｉ —
酶 。位 于线 粒体 内膜 上 的 Ａ Ｔ Ｐ ａ ｓ ｅ由 Ｆ ０和 Ｆ １两
ｄ ｏ ｐ ｔ ｅ ｒ ａ ） 蚕蛾科 （ Ｂ ｏ ｍｂ ｙ ｃ ｉ ｄ ａ ｅ ） 中 的一 类 昆虫 ， 与 家
同时 推测 家 蚕 起 源 于 多 种 生 态 类 型 混 杂 的野 桑 蚕 』 。野 桑蚕 中蕴 含 大 量 极 为 宝 贵 的基 因资 源
本 单 位 长期 致力 于野 桑 蚕资 源 的保存 和 开发 利 用工 作 ， 因此利 用 线 粒 体 基 因组 开 展 对 野 桑 蚕 的分 子分 类学 研究 ， 判 定所 得 野桑 蚕 之 间品系 、 遗 传 差异 及 与 家蚕 的驯 化关 系 等极 为必 要 。本研 究 利用 野外 采集 得 到 的 ２份 野 桑 蚕 材 料 ， 克 隆 了线
和 ａ ｋ ｌ ０ ２ 。
粒体具有分 子量较小 、 结构简单 ， 利 于操 作 等 优 点， 因此 ｍ ｔ Ｄ Ｎ Ａ广 泛 应 用 于 系 统 发 育 、 种 内遗 传 分 子标 记 、 物 种 分 类 和 群 体 遗 传 等 研 究 上 Ｊ 。 Ａ Ｔ Ｐ ａ ｓ ｅ 是 细胞 内 为 主 动 运 输 提 供 能 量 的 专 一 性
部分 构 成 ， 部分又 由 ａ ｔ ｐ ６等 ４个 亚基 构 成 ， 在
能量 形 成过 程 中起 重要作 用 。 目前 利用 线粒 体 编 码基 因 ｃ ｏ ｘ Ｉ 、 ｃ ｏ ｘ Ｉ Ｉ 、 ｃ ｔ ｙ Ｂ 、 ａ ｔ ｐ ６以及 线 粒 体 全 基 因
蚕具 有 极 为 密 切 的 联 系 。 现 代 研 究 表 明 ， 家 蚕 （ Ｂ ｏ ｍｂ ｙ ｘ ｍ ｏ ｒ ｉ ） 由５ ０ ０ ０—１ ０ ０ ０ ０年前 的 古 野桑 蚕 驯化 而来 ¨ Ｊ 。鲁 成 等对 家 蚕 和野桑 蚕 进 行 基 因 组 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ分 析 ， 结果 表 明 中 国野 桑 蚕 的遗 传 多样
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材 料
传， 比核基 因组 具有 更 高 的突变 率 ， 突变 固定后 形
成 的多态位 点 可 反 映 出 群 体 的 遗 传 结 构 ， 同时 线
研究 中使 用 的 ２份野 桑 蚕蛹 体材 料采 集 白陕
西省安 康 市石 泉 县 、 汉 滨 区， 分别 命 名 为 ａ ｋ ５ ８
潜力 。
目 ８个 科 目 ２ ０中昆 虫 中 的遗 传 进 化 关 系进 行 了 分析 ， 可 以为深入 开 展基 于线 粒 体 基 因组 的野 桑 蚕分类 及 与 家蚕 等 昆虫之 间 的遗 传进 化关 系研 究
积 累数 据 资料 。
线 粒体 基 因组 （ ｍｉ ｔ ｏ ｃ ｈ ｏ ｎ ｄ ｒ ｉ ａ ｌ Ｄ Ｎ Ａ，ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ）
本 系的 相 似 度 分 别 为 ０ ． ９ ９ ２ ６ 、 ０ ． ９ ９ １ ２和 ０ ． ９ ６ ９ ０； Ｗ Ｓ —ａ ｋ ｈ ｂ野 桑 蚕 与 上述 ３者 的相 似 度 分 别 为 ０ ． ９ ９ ２ ６ 、 １ ． ０ ０ ０ ０ 、
０ ． ９ ６ ７ ６ 。 系统发 生分析表 明 ， 鳞 翅 目下 ７个亚科的 昆虫 ａ ｔ ｐ ６基 因分别聚为 ７枝 ， ２份 野桑蚕 ａ ｔ ｐ ６基 因与 中 国
性 十 分丰 富 ＿ ４ ～ 。杜 周 和等 利用 ａ ｍ ｙ基 因研 究 中
组 等开 展 物 种 遗 传 进 化 分 析 是 为 开 展 分 子 生 物 学、 遗 传学 等研 究 的前 期基 础 之一 ， 在 此方 面也 有
大 量报 道 。
国野 桑蚕 遗 传 多样 性 ， 结 果 表 明 野桑 蚕 遗 传 差 异 主要 在种 群 内 ， 种 群 间 和地理 组 群 间差异 不 显著 ，
系野 桑 蚕 亲 缘 关 系较 为接 近 ， 与 日本 株 较 远 。本 研 究 为 深 入 利 用 线 粒 体 基 因 组 开 展 野 桑 蚕 分 类 及 与 其 它 昆
虫 的遗 传 进 化 研 究提 供 了理 论 基 础 。
关键词 ： 野 桑蚕 ； 线粒体 ； ａ ｔ ｐ ６ ； 克隆 ； 进 化
是位 于 动植 物 细 胞 内 的 共 价 闭环 双 链 Ｄ ｂ之 间 ， 编码 ３ ７个
基因 ， 包含 １ ３个 蛋 白编码 基 因 、 ２个 ｒ Ｒ Ｎ Ａ基 因和
２ ２个 ｔ Ｒ Ｎ Ａ 基 因 …。 由 于 ｍ ｔ Ｄ Ｎ Ａ 属 于 母 性 遗
粒体 ａ ｔ ｐ ６基 因 ， 并 对 该基 因在 蚕 蛾 科 昆 虫及 鳞 翅
和生 物 多样 性 ， 是 家 蚕起 源分 化 研究 的基 础 材料 ，
在 当前 驯化 机制 研 究 以及 家 蚕 遗 传 育 种 、 建 立 特
殊性 状基 因库 、 种 质 改 良等 热 点 问题 上 极具 发 掘