苯甲酰化展青霉素和青霉酸的高效液相色谱紫外吸收测定法
应用高效液相色谱法对饲料中五种抗生素的同时检测
行紫外扫描 ， 。 结果表 明五种共均在 ２ １ ０ ｎ ｍ波长处
１ ． １ ． ２ 试剂 甲醇、 乙腈 为色 谱纯 ；甲酸 ；纯净 有吸收 ，且杂质峰影 响较小 ，因此选用 ２ １ ０ ｎ ｍ作
水 ；金 霉 素 （ ｃ ｈ ｌ ０ ｒ ｔ ｅ ｔ ｒ ａ ｃ ｙ ｃ ｌ ｉ ｎ ｅ ，Ｃ Ｔ Ｃ ） 氯 霉 素 为检测波长。
（ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ａ ｍ ｐ ｈ ｅ ｎ ｉ ｃ ｏ ｌ ，Ｃ Ａ Ｐ ） 、红 霉 素 （ ｅ ｒ ｙ ｔ ｈ ｒ ｏ ｍ ｙ ｃ ｉ ｎ ， ２ ． ３ 专 属性试 验
分别取 空 白饲料 溶液 、混合
Ｅ Ｒ Ｙ ） 、罗红霉 素 （ ｒ ｏ ｘ ｉ ｔ ｈ ｒ ｏ ｍ ｙ ｃ ｉ ｎ ，Ｒ Ｏ Ｘ） 、青 霉素 抗生素 标准 品溶液 、供试 品溶液 ，按照色谱条件 钾（ ｂ ｅ ｎ ｚ ｙ ｌ ｐ ｅ ｎ ｉ ｃ ｉ ｌ ｌ ｉ ｎ ｐ ｏ ｔ ａ ｓ ｓ ｉ ｕ ｍ，Ｐ Ｇ ）标准品 。 进行考 察，结果见图 １ 。
２ ０１ ３ ，１ ２
【 作者简介】 李丽 （ １ ９ ７ ８ 一 ） ， 女， 博士 ， 讲师， 研究方 向为药物新剂
型 的研究 。
『 通讯作者】 陈立江（ １ ９ ６ ９ 一 ） ， 硕 士， 教授 ， 研 究方向为药物 新剂型
及药物机理 。
ｆ 基金 项 目１ 沈阳 市科技计划项 目“ 动物饲料 中多种抗生 素检测
的技术服务” （ Ｆ Ｉ １ － ２ ５ ５ — ４ — ０ ０ ）
畜牧 兽 医
饲黹 ｉ Ｉ 兽药
峪予华 仪器厂 ） ；旋转蒸发 器 （ Ｒ Ｅ ５ ２ — ９ ９ ，上海亚 Ｒ Ｏ Ｘ 、Ｐ Ｇ 对照品溶液在２ ０ ０ ， － ￣ ８ ０ ０ ｎ ｍ波长范围内进
超高效液相色谱法食品中展青霉素的方法研究
ａ ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｎ．Ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｉｓ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ｒｏｔｔｅｎ ａｐｐｌｅｓ ａｎｄ ａｐｐｌｅ ｊｕｉｃｅ，ｐａｔｕｌｉｎ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔｏｍａｃｈ，ｅａｓｉｌｙ ｌｅａｄ
ＨＵＡＮＧ Ｌｉｕ－ｘｉａ ，ＹＥ Ｒｉ－ｊｉｎ ， ＨＵＡＮＧ Ｙｏｎｇ－ｌｉａｎ ． ＣＨＥＮ Ｒｕ ，
（Ｊ．Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｆｏｏｄ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｒ ｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｏ．，Ｌｔｄ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１１４４２，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｆｏｏｄ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ ａｎｄ Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ Ｓｔａｔｉｏｎ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１１４４２，Ｃｈｉｎａ； ３．Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ｆｏｏｄ Ｉｎｄｕｓ ｔｒｙ Ｐｕｂｌｉｃ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１１４４２，Ｃｈｉｎａ）
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４—５０６Ｘ．２０１８．０２—０２５
收 稿 日期 ：２０１８—０４—１７ 基金项 目：特种食品配料绿色制造 技术研发 与创新平 台建设 （２０１７Ａ０７０７０１０３９） 作 者 简 介 ：黄 柳 霞 （１９９０一），女 ，助理 工 程 师 ，主 要 从 事 食 品 安全 与检 测工 作 。
食 品 与 发 酵 科 技
Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ＆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
青霉素含量测定的方法
青霉素含量测定的方法
青霉素含量测定方法：
①采用高效液相色谱法HPLC为精确测量青霉素浓度首选方案样品溶液注入色谱柱通过不同化合物与固定相相互作用差异实现分离；
②实验前需配制标准溶液选取已知浓度青霉素溶解在适当溶剂中如水乙腈混合物制备一系列浓度梯度用于绘制标准曲线；
③样品处理阶段样品需经过溶解过滤离心等预处理步骤去除杂质避免干扰检测结果并将样品浓缩至一定体积提高检测灵敏度；
④色谱柱选择根据待测物性质挑选适合类型如反相柱适用于极性较低物质分析正相柱适合强极性成分分离；
⑤流动相组成设计直接影响分离效果通常由水有机溶剂缓冲盐组成需优化比例流速以达到最佳分离度；
⑥检测器设置紫外检测器常用于青霉素检测因其在特定波长下有较强吸收信号需根据文献报道确定最佳检测波长；
⑦数据采集分析过程中记录峰面积保留时间等参数通过与标准品比较计算样品中青霉素含量；
⑧为验证方法可靠性需进行回收率试验加标样品分析考察方法准确性精密度重现性等指标；
⑨除了HPLC外微生物法也被广泛应用于青霉素定量通过观察对敏感菌株抑制圈大小间接反映抗生素活性强度；
⑩微生物法实施前需制备适宜培养基接种适量细菌确保在整个
平板表面均匀分布形成单层细胞；
⑪样品点样时需小心控制点样量避免扩散过快或过慢影响抑菌圈形态随后放入恒温培养箱等待规定时间；
⑫观察记录抑菌圈直径根据牛津杯法或者直接测量法计算样品效价并与标准品对照得出最终结果；。
超高效液相色谱-串联质谱法测定果汁中的展青霉素
超高效液相色谱-串联质谱法测定果汁中的展青霉素1.引言1.1 概述概述部分的内容可以如下所示：概述展青霉素作为一种广泛应用于医药和农业领域的抗生素，其在果汁中的检测具有重要的意义。
果汁作为一种常见的饮料，其质量的好坏直接关系到消费者的健康。
因此，对果汁中展青霉素的快速、准确和可靠的检测方法的研究具有重要的实际应用价值。
本文主要介绍了一种基于超高效液相色谱-串联质谱法测定果汁中展青霉素的方法。
超高效液相色谱-串联质谱法具有分离效果好、灵敏度高、定量准确等优点，能够有效地应用于展青霉素的检测。
通过对方法的优化和样品的处理，可以获得较高的检测灵敏度和准确度。
文章结构本文主要分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分旨在对文章的研究背景和意义进行介绍，以及概述本文的结构。
正文部分主要分为超高效液相色谱-串联质谱法、展青霉素的特性以及果汁中展青霉素的检测方法三个方面进行详细阐述。
结论部分主要对实验结果进行分析，并评价所使用方法的可行性，最后探讨了对果汁质量控制的意义。
目的本文的目的是研究和提出一种高效、可靠的检测果汁中展青霉素的方法，以提供给相关工业和监管部门作为果汁质量控制的辅助手段。
通过该方法的应用，可为果汁生产企业提供及时、准确的检测结果，从而保证产品质量，确保消费者的健康和安全。
通过本文的研究和探索，希望能够为果汁生产企业提供一种有效的展青霉素检测方法，为果汁质量控制提供科学依据，促进果汁工业的可持续发展。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以包括以下内容：文章的结构部分旨在对整篇文章的组织和内容进行简要介绍，为读者提供一个大致了解文章结构的导引。
本文的结构分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分包括概述、文章结构和目的三个方面。
首先，通过概述部分，介绍了超高效液相色谱-串联质谱法在果汁中展青霉素检测方面的重要性和应用前景。
其次，文章结构部分将详细描述整篇文章的组织和内容，以帮助读者更好地理解文章的框架。
高效液相色谱法测定化妆品中17种紫外线吸收剂_毛希琴
＊ 通 讯 联 系 人 ．Ｔｅｌ：（０４１１）８４６０４４６０，Ｅ－ｍａｉｌ：ｍａｏｘｉｑｉｎ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ．ｃｎ． 基 金 项 目 ：国 家 食 品 药 品 监 督 管 理 局 专 项 资 金 项 目 ． 收 稿 日 期 ：２０１３－０２－０６
· ７７６ ·
色
谱
第 ３１ 卷
１５％ （ｍ／ｍ）外 ，其 他 限 量 均 在２％～１０％ 范 围 内 。 化 学防晒剂的添加，多 采 用 复 配 的 形 式 以 增 强 防 晒 效 果。国内外文献中对化妆品中防晒剂的检测涉及的 检测方法 包 括：液 相 色 谱 法［２－９］、气 相 色 谱－质 谱 联 用法 以 ［１０］ 及液相色谱－质谱联用 等 ［１１－１５］ 方法。其中 高效液相色谱法的 使 用 频 率 最 高，文 献 中 涉 及 的 防 晒剂的种类少则１ 种 多 则 十 几 种 不 等，流 动 相 多 采 用含四氢呋喃和高氯酸的梯度洗脱条件。目前用于 防 晒 化 妆 品 质 量 监 管 的 主 要 方 法 是 《规 范 》给 出 的 化 学 防 晒 剂 检 测 方 法 ，涉 及 了 １５ 种 化 学 防 晒 剂 的 定 量 检 测 。 但 是 该 方 法 的 使 用 ，存 在 ３ 个 明 显 的 缺 陷 ：１． 液 相 色 谱 分 离 的 流 动 相 中 使 用 了 高 含 量 （超 过 ４０％） 的四氢呋喃，这样的 流 动 相 体 系 由 于 对 于 聚 醚 醚 酮 （ＰＥＥＫ）材 料 的 腐 蚀 性 ，普 通 的 液 相 色 谱 仪 需 要 进 行 改造后才能使用。２．采 用 高 氯 酸 作 为 酸 性 改 性 剂， 因其具强氧化性，也 会 损 害 色 谱 仪 及 色 谱 柱 的 使 用 寿命。３．样品前处 理 方 法 存 在 缺 陷，实 际 样 品 分 析 中遇到某些样品分 散 不 好，导 致 个 别 目 标 物 测 试 结 果偏低的情况。以上３个问题影响了该方法的适用 性 。 近 年 也 陆 续 有 对 《规 范 》方 法 进 行 优 化 和 改 进 的 文献 报 道。 文 献［２，３］均 采 用 甲 醇－水 为 流 动 相，在 Ｃ１８或 Ｃ８色谱柱上实现了１０～１２种常用防晒剂的 分离分析。但所涉及 防 晒 剂 的 种 类 均 未 能 覆 盖 《规 范》方法，且涉及化 妆 品 样 品 的 种 类 也 未 覆 盖 唇 膏、 指甲油等实际有防晒剂添加的样品。本文从样品前 处 理 、色 谱 柱 的 选 择 以 及 流 动 相 的 优 化 等 方 面 对 《规 范 的 １５种常用防晒剂的同时，加入了２ 种 新 的 化 学 防 晒 剂 （二 苯 酮 和 二 乙 氨 基 羟 苯 甲 酰 基 苯 甲 酸 己 酯 ）。 所 建立的方法采 用 甲 醇／异 丙 醇／水 梯 度 洗 脱，在 五 氟 苯基 （ＰＦＰ）色 谱 柱 上 实 现 了 １７ 种 目 标 物 的 基 线 分 离 ；同 时 ，该 方 法 是 采 用 常 规 液 相 色 谱 分 析 化 妆 品 中 １７种紫外线吸收剂，为化妆品的质 量 监 管 提 供 了 适 用性更强的方法。
青霉素V分析方法及相关物质研究进展
青霉素V分析方法及相关物质研究进展摘要：对青霉素V钾分析方法进行了分析，并对青霉素V钾相关物质的研究进行了描述。
指出有效控制生产工艺条件，减少青霉素V钾的降解，研发β-内酰胺环更稳定的抗生素, 或应用利于β-内酰胺环稳定的环境有效控制青霉素类抗生素高分子聚合物可能成为本领域研究的新热点。
关键词：青霉素V钾、相关物质、高效液相色谱中图分类号：R978.1青霉素V钾又名苯氧甲基青霉素钾，属于β-内酞胺类抗生素，多用于青霉素敏感菌株所致的轻、中度感染，也可用于螺旋体感染和作为风湿热复发和感染性心内膜炎的预防用药。
青霉素V钾原料及制剂中可能会含有其合成前体、工艺副产物以及各种降解产物。
另外，青霉素V钾也可能自身聚合，产生高分子聚合物。
聚合物既可能来自生产过程，又可在储存或用药过程中形成。
β-内酞胺类抗生素所致的过敏反应，经多年来的研究已经证明和药物中存在的高分子聚合物有关。
1、青霉素V钾分析方法青霉素V的方法主要由容量分析法、紫外分光光度法、高效液相色谱法[1]。
碘量法广泛应用于青霉素V生产中间过程的定量检测，但检测结果易受试验条件和分解产物的影响。
同电位滴定法一样具有操作步骤烦琐的缺点。
高效液相色谱法是近年来发展很快的样品分离分析技术，具有快速、高效、灵敏、特异性强及重现性好等特点，受到各国药典的重视。
美国药典采用此法测定青霉素V和青霉素V钾的含量，要求色谱柱效按青霉素V计不低于1800理论板数，青霉素G与青霉素V的分离度大于3.0。
祝波[2]等分别采用了不同流动相和梯度洗脱方式，使青霉素V和许多结构与性质相似的副产物或杂质得到很好分离。
中国药典2 0 15年版( C h P 2 0 15 ) 中除控制青霉素V钾原料总杂与最大单杂外, 还控制青霉素V聚合物；而国外BP标准中除控制青霉素V钾原料总杂，还控制各已知杂质及未知任意其他杂质。
而且C h P 2 0 15 中青霉素V 钾有关物质检查方法与国外药典及文献报道方法在流动相、检测波长等方面均有较大差异。
高效液相色谱法快速分离测定4种青霉素类药物
2 结果与讨论
收稿日期: 2009-12-25 基金项目：山西大同大学科研项目[2008K6] 作者简介: 关翠林(1968-)，女，山西阳高人, 硕士，副教授，研究方向: 液相色谱的应用．
2010 年
关翠林等：高效液相色谱法快速分离测定 4 种青霉素类药物
·39·
液． 测定时取上述标准储备液配制成适宜浓度的 标准溶液． 1．3．3 样品溶液的配制
HPLC[J]． The Analyst，1996, 121(10)：1473-1477． [5]王超，王星． 柱前衍生高效液相色谱法测定猪肉中 5 种青霉素残留量[J]． 分析化学研究简报，2001，29(7)：779-781． [6]林萍，陈研． 高效液相色谱法替代电位滴定法测定青霉素钠含量[J]． 黑龙江医药，2004，17(4)：256-257．
3 结语
目前，高效液相色谱-紫外检测法已被广泛用 于各种青霉素类药物的测定． 它具有灵敏度高、选 择性好、分析时间短、样品用量少和易实现自动化 等优点，已在医药、食品等领域得到广泛的应用， 但同时分离氨苄西林钠、美洛西林钠、青霉素 V 钾、氯唑西林钠四种青霉素类药物含量还未见报 道． 该方法无需衍生化，且快速、准确、灵敏度高， 适用于青霉素类药物的质量控制和含量测定．
目前高效液相色谱法已被广泛用于青霉素类药物的测定本文研究了高效液相色谱一紫外检测法分离氯唑西林钠青霉素v钾氨苄西林钠和美洛西林钠四种青霉素类药物的条件并将建立的方法用于四种青霉素药物制剂含量的测定发现该方法快速准确灵敏适用于青霉素类药物的质量控制和含量测定
食品中展青霉素的测定 液相色谱
食品中展青霉素的测定液相色谱-串联质谱法1 范围本标准适用于食品（果汁饮料、果酒、果酱、果干及薯类制品等）中展青霉素的测定和确证。
2 规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
3 原理澄清液体样品（果酒样品需出去乙醇）直接固相萃取净化；混浊液体样品和固体样品先用果胶酶水解，再以乙酸乙酯提取，吹干浓缩后固相萃取净化，液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量。
4 试剂除另有说明外，所用试剂均为分析纯，试验用水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1 乙腈（色谱纯）。
4.2 甲醇（色谱纯）。
4.3 冰乙酸。
4.4 乙酸乙酯（色谱纯）。
4.5 果胶酶溶液：活度不低于1300 U/mL（果胶酶固体则需按活度配制为溶液）。
4.6 0.2%乙酸溶液：量取2 mL冰乙酸以水定容于1000 mL容量瓶。
4.7 展青霉素标准品（patulin）：CAS编号149-29-1，纯度大于99.0%。
4.8 展青霉素标准储备溶液：准确称取适量的展青霉素标准品，用乙酸乙酯配成200 µg/mL 的标准储备溶液，避光于-18℃下保存，稳定期1个月。
4.9 展青霉素标准中间溶液：准确移取适量的展青霉素标准储备溶液，用氮气吹干后，用0.2%乙酸（4.7）配成2 µg/mL的标准中间溶液，避光于4℃下保存，即用即配。
4.10 标准工作溶液：以相应的空白样品为基质，加入相应浓度的标准中间液，配制成1.0µg/L、5.0µg/L、10.0µg/L、50.0µg/L、100.0µg/L标准溶液，同样品一同进行前处理及上机检测，并绘制标准曲线。
4.11 固相萃取小柱：Osais HLB或相当者，3 mL/60 mg。
使用前对固相萃取柱依次加入3 mL 水、3 mL甲醇和3 mL水活化，流速控制在每秒2滴~3滴。
高效液相色谱法分离测定化妆品中三种紫外吸收剂的含量
高效液相色谱法分离测定化妆品中三种紫外吸收剂的含量来国桥;张建兴;卢良
【期刊名称】《香料香精化妆品》
【年(卷),期】2003()3
【摘要】用一种新的高效液相色谱法一次测定化妆品中紫外吸收剂UvinulM 4 0 ,ParsolMcx及Eusolex32 3含量。
结果显示 ,该方法线性系数在 0 .999以上 ,系统和方法的精密度均在 1%以下 ,回收率在 98.2 9%至 10 1.6 9%之间。
强迫降解试验表明该方法不受紫外吸收剂降解产物的干扰。
因此该方法能准确、快速、简便地一次定量测定三种紫外吸收剂在化妆品中的含量。
【总页数】5页(P22-26)
【关键词】高效液相色谱法;分离;测定;化妆品;紫外吸收剂;含量;防晒化妆品
【作者】来国桥;张建兴;卢良
【作者单位】杭州师范学院新材料研究所;靳羽西-科蒂化妆品(上海)有限公司【正文语种】中文
【中图分类】TQ658.24
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定防晒化妆品中水杨酸酯类紫外线吸收剂的含量 [J], 池琴;钱春苹;王魁
2.高效液相色谱法同时测定防晒类化妆品中15种紫外线吸收剂 [J], 孟宪双;马强;白桦;张庆;吕庆
3.高效液相色谱法测定化妆品中11种二苯酮类紫外线吸收剂 [J], 曲宝成;边海涛;毛希琴;李尽
4.高效液相色谱法测定化妆品中22种紫外吸收剂 [J], 崔凤杰;谷婕;张坤;时文春;张慧敏
5.高效液相色谱法同时测定化妆品中9种二苯甲酮类紫外吸收剂 [J], 鲁素雅;邢海艳;吴义春;金鹏
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高效液相色谱法测定青霉素菌丝体中青霉素的残留
高效液相色谱法测定青霉素菌丝体中青霉素的残留刘莎;唐政洁【摘要】目的:建立高效液相色谱(HPLC)法,测定青霉素菌丝体中青霉素的残留.方法:采用依利特Hypersil ODS柱(200mm*4.6mm,5μm),以0.02mol/mL磷酸二氢钾缓冲液(磷酸调pH至3.5)-甲醇(65:35)为流动相,紫外检测波长为220mm.结果:青霉素质量浓度在0.4988-39.904μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为99.85%,RSD=0.50%(n=9).结论:HPLC法简便、准确、灵敏度高,重现性好,适用于青霉素菌丝体中微量青霉素残留的检测.【期刊名称】《黑龙江科技信息》【年(卷),期】2011(000)006【总页数】1页(P9)【关键词】高效液相色谱法;青霉素菌丝体;青霉素;残留【作者】刘莎;唐政洁【作者单位】哈药集团制药总厂,黑龙江,哈尔滨,150000;哈药集团制药总厂,黑龙江,哈尔滨,150000【正文语种】中文青霉素是由青霉经发酵产生的一种抗生素。
在发酵过程中，大量的青霉素菌丝体产生的代谢产物青霉素经提取、精制等一系列过程形成终产品青霉素钠、青霉素钾，而剩余的大量青霉素菌丝体，除用作饲料和肥料的添加剂外，还用于生产麦角固醇、壳聚糖等化工原料。
青霉素菌丝体是否有青霉素残留就成了许多厂家关心的问题。
笔者在常规方法的基础上加以改进，建立了用于测定青霉素菌丝体中青霉素残留量的高效液相色谱（HPLC）法，方法简便、准确，有很好的实用价值，现报道如下: 岛津LC-2010C HT型高效液相色谱仪，CLASS-VP分析软件。
青霉素钾对照品(中国药品生物制品检定所，批号为0437-9501，含量为89.7%；青霉素菌丝体由厂家提供；甲醇为色谱纯；其余试剂为分析纯。
色谱柱：依利特HypersilODS柱（200mm*4.6mm，5μm）：流动相：0.02mol/mL磷酸二氢钾缓冲液（磷酸调pH至3.5）_甲醇（65：35）；流速：1.0mL/min；紫外检测波长：220nm；进样量：20μL。
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归方程， 倍信噪比计算检出限， 以２ 见表１ 。
表１ 展青霉素和青霉酸的标准曲线回归方程和检出限
３２ 最适流动相组成的确定 ．
本实验选取 乙腈－ 水作流动相 ， 了流动相的 研究 组成及 ｐ Ｈ值对 毒素衍 生物 和 Ｄ Ｐ保 留行 为的 ＭＡ
作者［４ ｌ］ － 利用软基质的离子交换色谱和亲和色谱分
离纯化 了 － 淀粉酶的粗酶提取液 。 但是 ， 软基质色 谱介质的机械强度 小， 受压易变形 ， 析速 度慢 ， 分 分
Ｓ Ｅ） Ａ 很好地分离了 － 淀粉酶粗品， 其活性回收率 高达９％， ６ 比活性达３８／ ｇ ８ｕｍ 蛋白质， 纯度提高３ ０
１８ ；６ １ ： ５ ９ ３６ （）８
１ ８ ３ ２： ８ ９ ７； ９ ３ ９
５ ｏｂ ｏ Ｒ Ｂ ｂｋ ， Ｅ Ｊ ｓｃ Ａ ａＣ ｅ Ｆｒｉ Ｐ ａｓｙ Ｎ Ａ ｏ Ｏｆ ｌ ｍ， ｔ ， ． ｓ ｆ ｎ ｈ
１８ ；８ ５ ：５ ９ ５ ６ （ ）９ ０ ６ ｒｎｎ Ｋｕｏ ｅ Ｐ ．Ａｒｈ ｖ ｏ Ｃ ｎａ Ｔ ｘｃ ｌ ９ ９ １ ： ｃ Ｅ ｉ ｎ ｔｍ ｏ ｉ ，１ ８ ； ８ ｎ ｒ ｏ ｏ
液和 催化剂 溶液定量 ， 改变 ＰＢＣ 的用量 ， Ｉ－ｌ 衍生物 峰高随 ＰＢＣ 与毒素的摩尔比增加而增加 ， ＰＢ Ｉ－ｌ 当 Ｉ－ Ｃ 与毒素的摩 尔比达到８１ ｌ ：时衍生物峰 高恒定（ 图 １。 ， ）同理 取毒素标准试液和 ＰＢＣ 溶液定量 ， Ｉ－ｌ 催化 剂 Ｄ Ｐ用量的改变对衍生物峰高的影响见 图２ ＭＡ 。 当 Ｄ Ｐ与毒素的摩尔 比达到８ ：时衍生物峰高 ＭＡ ０１
３ ０ １ －ｍｏ／ 。 ． ０ ３ ｌＬ）
２２ 色谱条件 ． 流动相为乙腈－ ４ ：３ Ｖ Ｖ）用磷酸调 ｐ 水（７５ ， ／ ， Ｈ 值为３２流量１０ Ｌ ｍｎ 记录纸速 ５ ｍ／ ｉ； ．； ．ｍ ／ ｉ； ｍ ｍ ｎ进样
体积３Ｌ检测波长３０ｍ。 μ； ０ｎ
２３ 衍生反应 ． 定量移取３μ ０Ｌ毒素的标准混合液 于１Ｌ具塞 由于它们的广泛存在及其致癌性 ， 严重危 害人 类的健康 ， 引起了分析工作者的高度重视 ， 各种检测 手段相继出现 ， 主要有薄层色谱法 （ Ｌ ），和高效 Ｔ Ｃ ［］ １ ２
３３ 精密度、 ． 工作曲线和检出限 取含展青霉素１５ ０４ｏ／ 青霉酸３０ ． ×１－ｍ ｌ Ｌ， ．
１－ｍ ｌ ０４ ｏ／ Ｌ标准混 合液 ， 按选 定 的条 件 平行操 作 ７ 次， 测得相对标准 偏差 （ 分别为展 青霉素 １３青 ％） ．，
霉酸３８配制系列毒素标准混合液按选定的条件实 ．。
展青霉素和青霉酸标样（ｉ ａ Ｓ ｍ 公司）４二甲 ｇ ；－
胺基吡啶 （ Ｍ Ｐ （ｌ ａ 司）ＰＢＣ 为作者按 Ｄ Ａ ）Ｆｕ 公 ｋ ；Ｉ－ｌ
文献［方法合成， 产品经质谱验证； ｆ 乙腈为 二噁烷、
分析纯试剂 ， 使用前需经蒸馏提纯 。
本文收稿 日 ： ９年５ 日， 期 １ ３ 月３ 修回 日 ：９３ 月４ ９ 期 １９年９ 日
１ ７ ；９ ２ ９ ９ ８２ ：３
７傅 承光， 达． 徐宏 分析测试 通报， ９；（ ： １１ ６５ ９ ８）
８ Ｔ ｕｕａ ，Ｋｃａｈ Ｋ．Ａ ａ Ｃ ｅ Ａｃａ ９ ７ １ ２ ｓ ｒｔ Ｔ ｈ ｓｉ ｎ ｌ ｍ ｔ ，１ ８ ； ９ ｈ （ ）３ ７ ２ ：０
４ ｕｓ Ｗ ， ｎｄｒ ， ｒｎ Ａ Ｊ ｒｍ ｔ ｒ Ｈｒ ｔ Ｊ Ｓｙｅ Ｋ Ｍａ ｉ Ｒ ． Ｃ ｏ ａ ｇ， Ｐ ｔ ｈ ｏ
毒代谢物， 有很强的致癌性 。 结构如下 ：
ＰＢＣ 溶于 乙腈 中制 成浓度 为５０ ０ ３ｏ／ Ｉ－Ｉ ． ×１－ｍ ｌ Ｌ的溶液 ，ＭＡ 溶 于乙腈中制成浓度为４０ １－ Ｄ Ｐ ． ０２ ｍｌ ｏ Ｌ的溶液 ， ／ 展青霉素和青霉酸溶于 乙腈 中制成 贮 备液 （ａ ｌ ：． １－ｍ ｌ ， ｅｉｌｃ ｄ Ｐｔ ｉ １ ５ ０３ ｏ Ｌ Ｐｎ ｉ ａｉ； ｕｎ ／ ｃｌ ｃ ｉ
同， 经衍生后由于试剂主体的吸收， 使衍生物的吸收
波 长趋于一致 ， 移到３０ｍ， ０ｎ 这样可排除其它吸收波 长较低物质的干扰 ， 了 测灵敏度 。 提高 检 毒素衍生物 在室温下存放４ ， 天 峰高不变 。
参考文献
１ ｉｅｏ ， ｒｎ Ｍ ．Ｊ ｓｃ ｆ ａ Ｃ ｅ Ｇｍ ｎ Ａ Ｍａｔ ｓ Ｌ Ａ ｏ Ｏ Ａ ｌ ｍ， ｉ ｓ ｆ ｎ ｈ催化作 ａＨ
用
ｐ Ｈ值增 加而 显著增 加， ｐ 值在５ ６ 当 Ｈ ～ 时影响衍生
物的测定， 因此流动相的ｐ Ｈ值宜控制在２５ ． ．～４５
之 间。 综合上述条 件并兼顾 分析时 间， 选取 乙腈－ 水 的配 比为４ ： （ ／ 。 ７５ Ｖ Ｖ）色谱图见图５ ３ 。
－ 粉酶粗 品， 淀 回收率为９ 。 ０ 但是 ， 高效液相 利用 离子交换色谱纯化 － 淀粉酶国内外尚未见报道。 本 研 究 利 用我 们 自 己合成 的强 阴离 子 交 换 柱 （ － Ｌ
常用作食品添加剂。 高纯度的 － 淀粉酶可作为酶试
剂 ， 究生物作 用的特性、 研 酶反应 机理 ， 测定生化反 应 的平衡 常数。 为了获得高纯度 的 － 淀粉酶 ， 一些
对 － 淀粉酶具有特异亲和能力的色谱介质 ， 并成功
用微量天平准确称取５ ｇ ｍ 高纯度的 － 淀粉酶
（ 下页 ） 接
本文收稿 日期：９３ 月８ 修 回日 ：９３ 月１ 日 １９年１ 日， 期 １９年４ ３ （ 接上页）
＊ 通讯联系人
Ｈ ｇ Ｐ ｒ ｒ ａｃ Ｌｑ ｉ Ｃ ｒｍ ｔｇａｈｃ Ｐ Ｃ Ｄ ｔ ｍ ｎｔ ｎ ｉ ｅｆ ｍ ｎｅ ｕ ｈｏ ａ ｒｐ ｉ （ Ｌ ） ｅ ｉａ ｏ ｈ ｏ ｉ ｄ ｏ Ｈ ｅｒ ｉ
ｏ Ｔ ａｅ ｔｌ ａ ｄ ｎｅ ｌ Ａ ｉ ｂ Ｐ ｅｏｕ Ｄ ｒ ａｉ ｔ ｎ ｆ ｃ Ｐ ｕｉ ｎ Ｐ ｉ ｌｃ ｄ ｒｃｌｍｎ ｉ ｔ ａｉ ｒ ａ ｎ ｅ ｉｉ ｃ ｙ ｅｖ ｚ ｏ ｗｔ ４ （－ ｈｈ ｌ ｄｌ Ｂ ｎｏ ｌ ｌ ｉｅ ｉ －２Ｐ ｔａｉ ｙ） ｚｙ Ｃ ｏ ｄ ｈ ｍｉ ｅ ｈｒ
磨口试管内， 加入４ ＰＢＣ 溶液，０Ｌ Ｐ溶 ０Ｌ Ｉ－ｌ ５ Ｄ ＭＡ 液混匀， 室温下反应３ｍｎ取３Ｌ ０ ｉ， 进样分析。
３ 结果和讨论
３１ 衍生反应条件 ． 展青霉素和青霉酸在催化剂 Ｄ Ｐ存在下与 ＭＡ ＰＢＣ 反应生成酯 ， Ｉ－ｌ 若有水存在 ， 还产 生 ＰＢＣ 的 Ｉ－ｌ 水解反应 。 溶剂 的选择 本文探讨了 乙腈 、 噁烷 等非质 二 ｆ 子 溶剂对衍生反 应的影响， 发现选 用乙腈 、 作溶剂能使反应顺利进行。 衍生反应 的温度和反应 时间 两种毒素在室温 下 与 ＰＢＣ 反应２ｍｎ即可完成， Ｉ－ｌ ５ｉ 若在６ ℃水浴 中 ０ 加热则１ｍｎ ０ ｉ完成。 烷
苯甲酰化展青霉素和青霉酸的高效液相色谱紫外吸收测定法
郭玉凤 傅承光
（ 河北大学理化分析 中心 保定 ０１０） ７０２ 提要 建立了一种快速、 灵敏检测痕量展青霉素 （ａ ｌ ） ｐｔ ｉ 和青霉 酸（ｅｉｌ ａｉ 的新方法。 ｕｎ ｐｎ ｉｃ ｄ ｃｌ ｃ ） ｉ 对酞 内酰胺苯 甲
酸 ４ ２ ｈ ａｍ ｙ ｂ ｚ ｌ ｒｅ 氯［ （ｐｔ ｌ ｉｌ ｅ ｏ ｃｌｉ ， － － ｈ ｉｄ ｎ ｙ ｈ ｄ 简称ＰＢ ｌ 柱前 ｏ Ｉ－］ Ｃ 为 衍生试剂同展青 素和青霉酸衍生反 衍生物 应，
液相色谱仪由岛津（ｈ ａｚ）Ｃ６ Ｓｉ ｄｕＬ － ｍ Ａ高压输
液泵， 岛津 Ｓ Ｄ６ Ｖ紫外可见分 光检测器，１５ Ｐ －Ａ ７２注 射进样阀 ， Ｈ － Ｃ８ μ ）．ｍ Ｐ Ｓ５ （ ｍ ４６ ｍ×１５ ｍ 色谱 Ｅ １５ ２ｍ 柱和 Ｐ Ｒ１０ Ｅ ０Ａ型单笔记录仪组成 。 －
ＰＢＣ 和催化剂用量的选取 取毒素标准试 Ｉ－ｌ
Ｇ ｏ ｆ ｇ Ｆ Ｃ ｅｇｕｎ ｕ Ｙ ｅ ａｄ ｈｎｇａｇ ｕ ｎ ｎ ｕ
（ｅｔ ｏ Ｐ ｙｉ ｌ Ｃ ｅ ｉ ｌ ｌ ｉ ＨｅｅＵ ｉ ｒｔ， ａｄｎ ，７０２ Ｃｎ ｅ ｈｓ ａ ａｄ ｍｃ Ａ ａ ｓ ｂ ｎ ｅ ｉ Ｂ ｏｉ ０１０） ｒ ｆ ｃ ｎ ｈ ａ ｎ ， ｉ ｖ ｓｙ ｇ Ａ ｗ ｄ ｓｉ ｍ ｔ ｄ ｓ ｅ ｐｄ ｔｅ ｅ ｎｔ ｎ ｔ ｃ ｐｔｌ ａｄ ｉｌ ａｉ ｂ ｎ ａ ｓｎｉｖ ｅｈ ｗ ｄｖｌ ｅ ｆ ｈ ｄｔ ｍｉ ｉ ｏ ｒ ｅ ｕｎ ｐｎ ｉｉ ｃ ｙ ｅ ｎ ｅ ｔ ｅ ｏ ａ ｅ ｏ ｏ ｒ ｅ ｒ ａｏ ｆ ａ ａ ｉ ｎ ｅ ｃｌ ｄ ｅ Ｈ Ｌ ｕｉ ｕ ｒ ｉｅ ｄｔ ｔ ｎ Ｔ ｅ ｔｏ ｉ ｏｖｓ ｅ ｅｉ ａｏ ｏ ｐｔ ｉａｄ ｉｌｃ ｂ ｕｅ Ｐ Ｃ ｎ ｌａ ｏ ｔ ｅ ｉ ． ｈ ｍ ｈｄ ｌ ｔｅ ｒｉ ｔ ｎ ａ ｌ ｎ ｐｎ ｉｉａｉ ｙ ｓ ｇ ｖ ｌ ｅ ｃｏ ｔ ｅ ｎ ｅ ｈ ｓ ｆ ｉ ｆ ｕｎ ｅ ｃｌ ｃ ｖ ｔ ｃ ｄ ｓ
用Ｏ Ｓ Ｄ 柱分离， 乙腈－ （７５， ／ ） 水 ４ ：３ Ｖ Ｖ 作流动相， 紫外检测器检测 （ ＝３０ｍ 。 倍信噪比计算最低检出限 ， λ ０ｎ ）以２
展 素２ ｐ ｏ 青霉 ０ ｏ 青 ． ｍｌ 酸１ ｍ ｌ ０ ， ｐ 。
关键词 高效液相色谱， 展青霉素， 酸 青
１ 前言 展青霉素和青霉酸是由曲霉属（ｓｅｇｌ ） ａ ｒｉ ｓ和 ｐ ｉｌ ｕ 青霉属（ｅｉｌｕ 的真菌在生长过程中产生的有 ｐｎｉ ｍ） ｃｌ ｉ
仅能纯化工业粗酶 ， 也可纯化其它来源的 － 淀粉酶 。 关键词 离子交换 色谱 ， － 淀粉酶 ， 纯化
１ 前言
－ 淀粉酶是一种催化淀粉水解酶 ， 主要来源于 动物胰、 唾液、 、 细菌、 血液 尿、 霉菌和 各种高等植物， 地分离纯化了工业粗酶， 了高纯度产品， 活性 获得 其
回收率＞８％，ａ 等［也用高效疏水色谱纯化了 ８ Ｋｔ ］ ｏ
液相色谱法（ ＰＣ ［７ Ｈ Ｌ ）－］ ３ 。