改良油红O染色试剂盒说明书
细胞成脂油红O染色以及成肌吉姆萨染色
细胞成脂油红O染色以及成肌吉姆萨染色油红O染色注：操作过程中往培养皿中加液体时要沿壁轻轻加入一、0.2% 油红O工作液的配制：1．油红O粉与异丙醇比例为300mg/100ml，将称好的油红O 粉用100%异丙醇充分溶解配制成饱和溶液2. 油红饱和溶液与超纯水以3:2比例充分混合均匀，配制成0.2%油红O工作液3. 0.2?m无菌滤器过滤后即可使用注：油红O工作液在室温下保存时间最多不超过2h，所以应当严格注意现配现用二、10%甲醛固定液的配制取30ml超纯水加入10ml 40%甲醛溶液，混合均匀后配制成10%的甲醛固定液三、60%异丙醇孵育液将30ml 100%异丙醇与20ml超纯水混合均匀，制成60%异丙醇孵育液四、油红O与苏木素染色1.将培养皿中的培养基弃去，用PBS洗3次2.加入2.4ml 10%甲醛溶液对细胞进行固定1h3.弃去甲醛固定液，用超纯水冲洗3次4.往培养皿中加入2.4ml 60%异丙醇溶液孵育2min5.弃去60%异丙醇，加入1ml配置好的油红O染液，染色10min6.弃掉油红，用去离子水冲洗数次，至弃液澄清无色7.加入1ml苏木素染色液室温染色1min8.弃掉苏木素，用超纯水冲洗数次，至弃液澄清无色9.加入0.1%氨水溶液显色，然后用超纯水冲洗3次10.最后往各培养皿中加入少量去离子水，保持细胞湿润，染色后的细胞置于倒置显微镜下进行细胞形态的观察五、油红OD值的测定1.将上述用油红O染色后的细胞培养皿中的液体吸掉2.向培养皿中加入3.6ml 100%异丙醇，室温孵育10min，将细胞中的油红洗脱到异丙醇中3.将洗脱下的油红吹打混合均匀，加入到5ml离心管中，摇匀4.吸取200?l 洗脱液加入到96孔酶标板上，每个培养皿测3次重复5.用酶标仪在520nm波长下测定OD值，以100%异丙醇作为空白对照调零吉姆萨染色1.弃去培养皿内的培养基，用PBS反复漂洗2次2.加入PBS溶液，再加入等体积无水甲醇，边加边混合静止10min（在摇床上添加，各加2ml）3.将50%甲醇与PBS混合液弃去，加入新鲜的甲醇液浸泡（各加2ml），固定细胞10min，然后用PBS漂洗细胞1次4.每孔各加入1ml吉姆萨染色（吉姆萨染液可重复利用），覆盖细胞层，染色2min5.回收染色液，用去离子水冲洗细胞6.各培养皿加少量水，用显微镜观察单层潮湿的细胞。
GENMED细胞脂质比色法定量检测试剂盒 产品说明书(中文版)
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS10110.1 v.A GENMED细胞脂质比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途GENMED细胞脂质比色法定量检测试剂是一种旨在通过脂溶性偶氮染料油红O特异性地使细胞内中性甘油三脂、脂质以及脂蛋白显示红色或深红色，在分光光度仪上进行比色分析，而获得细胞脂质定量信息的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种呈单细胞层（Monolayer）生长的新鲜人体和动物细胞。
用于成脂细胞定性、细胞病理学分析（脂质细胞瘤；LIPOID）等研究。
产品严格无菌，即到即用，性能稳定，着色清晰。
技术背景脂类物质（LIPIDS）是一类脂溶性（疏水性）的自然分子，包括脂肪酸（FATTY ACID）及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂，以及其它固醇类（STEROL）物质，例如胆固醇。
脂类物质在机体中具有能量储存的作用，是膜结构的组成成分和细胞信号分子。
油红O（OIL RED O），又称为27号红色溶剂（SOLVENT RED 27）、苏丹红5B（SUDAN RED 5B），是优于氢醇染料溶剂（HYDROALCOHOLIC DYE SOLVENT）的脂溶性偶氮染料（LYSOCHROME DIAZO DYE）。
其分子式为C26H24N4O，分子量为408.51。
染色显示细胞脂类物质呈红色或深红色。
在分光光度计或酶标仪上（520nm波长）可以进行定量分析脂质含量。
产品内容GENMED清理液（Reagent A）毫升GENMED固着液（Reagent B）毫升GENMED净化液（Reagent C）毫升GENMED染色液（Reagent D）毫升GENMED溶解液（Reagent E） 毫升产品说明书 1份保存方式保存GENMED染色液（Reagent D）在4℃冰箱里，其余的保存在室温下；确保瓶盖密闭。
GENMED染色液（Reagent D），避免光照，有效保证6月用户自备显微镜：用于观察细胞脂质染色情况平式摇荡仪：用于染色萃取的混匀分光光度仪或酶标仪：用于定量检测细胞脂质含量情况实验步骤1．小心抽掉多孔细胞培养板里的培养液2．轻轻加入适量的GENMED清理液（Reagent A）到每个培养孔里（见下表）多孔培养板容量96 毫升48 毫升24 毫升12 毫升6 毫升3．小心抽去清理液4．小心加入适量的GENMED固着液（Reagent B）到每个培养孔里（见实验步骤2表）5．室温下孵育10分钟6．小心抽去固着液7．小心加入适量的GENMED净化液（Reagent C）到每个培养孔里（见实验步骤2表）8．小心抽去净化液9．小心加入适量的GENMED染色液（Reagent D）到每个培养孔里（见下表）多孔培养板 容量96 微升48 微升24 微升12 毫升6 毫升10．在室温下静置15分钟11．小心抽去染色液12．小心加入适量的GENMED净化液（Reagent C）到每个培养孔里（见实验步骤2表） 13．小心抽去净化液14．重复实验步骤12和13二次，或净化液不再显示粉红色15．（选择步骤）置于一般光学显微镜下观察染色情况：脂滴（LIPID DROPLET）呈现深红色 16．小心加入适量的GENMED溶解液（Reagent E）（见下表）多孔培养板容量96 微升48 微升24 微升12 微升6 毫升17．轻轻摇动培养板，直到GENMED溶解液（Reagent E）均匀分布18．置于平式摇荡仪，在室温下，孵育30分钟，速度为50RPM19．（选择步骤）移入到比色皿20．即刻放进分光光度仪或酶标仪测读，波长为520 nm21．构建细胞脂质定量曲线：横座标（x轴）为细胞浓度（细胞量）；纵坐标（y轴）为样品读数（吸光单位OD值）注意事项1．本产品为20次（24孔板）、50次（48孔板）、100次（96孔板）操作2．操作时须戴手套3．试剂瓶务必密封保存4．GENMED染色液（Reagent D）避免－20℃低温保存，否则出现沉淀5．如果GENMED染色液（Reagent D）出现沉淀，须过滤后再使用6．染色时，避免光照7．细胞染色前后的清洗过程中，小心操作，以免将细胞冲洗掉，而影响定量分析8．如果没有520nm波长的滤波器，可以使用490nm波长替代9．本公司提供系列脂质检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定着色清晰使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。
饱和油红 O 染色液（Oil Red O Staining Solution）说明书
北京普利莱基因技术有限公司电话：************，62027915Email:************************Applygen Technologies Inc.DocRev:201704Page 1of 1-饱和油红O 染色液（Oil Red O Staining Solution ）B1094描述：油红O (Oil Red )CAS 号1320-06-5，分子式C26H24N4O ，分子量408.495。
油红O 是一种亲脂染料，不溶于水，可溶于醇和油酯，根据其在溶剂中可以向脂质扩散的特点，可使脂滴呈红色。
本品以适量的醇为溶剂，无需稀释、可直接使用。
控制染色时间，可避免溶剂导致的脂滴溶解融合、形态破坏的问题，而且能降低背景染色。
可用普通光学显微镜和荧光显微镜（激发波长540-580nm ）观察。
如果肝、肾、心等实质脏器发生脂肪变性，细胞内会出现多数中性脂肪滴。
适用范围：本产品主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着、以及干细胞向脂肪细胞定向分化的研究。
用于固定组织或细胞的脂肪染色。
组成：100ml储存：室温避光保存，有效期12个月。
操作步骤：样品处理：1.冷冻切片：（1）4%多聚甲醛固定10分钟。
（货号B1057）（2）蒸馏水洗3次，每次3分钟。
2.培养细胞：（1）4%多聚甲醛固定10分钟。
（货号B1057）（2）蒸馏水洗3次，每次3分钟。
饱和油红O 染色：1.苏木精染色液染色3分钟，后水洗。
（货号C1411）2.盐酸乙醇分化后，反蓝，水洗。
（如不需复染细胞核，第1、2步骤可省略）3.蒸馏水冲洗干净的切片放入60%的异丙醇5分钟。
4.入饱和油红O 染色液染色5分钟。
5.在异丙醇中稍洗，脱去肤色即可。
6.保持切片湿润，滴加甘油水溶液封片。
（货号C1213）温馨提示：1.普通光镜观察：细胞质内脂滴呈红色；胞核呈蓝色。
2.荧光显微镜：在540-580nm 波长下，发出红色荧光；也可采用Cy3528-552nm 的波长。
油红O说明书
油红O染色液说明书【产品名称】油红O染色液【包装规格】货号：DL0011单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml；每套/盒包装规格分别为：3×20ml、3×100ml、3×250ml。
【预期用途】用于组织细胞中脂肪的染色。
【检验原理】油红O又名苏丹红5B，苏丹染料对脂质染色的机制一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色即先把苏丹染料溶于有机溶剂中，这种染料在冰冻切片内脂质的溶解度较在原溶剂中的溶解度更大，所以染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色，油红O染色可用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着，鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质等。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、油红O储存液油红O2、油红O稀释液水3、苏木素染色液苏木素【储存条件及有效期】5～35℃保存，原包装未开封试剂的有效期为18个月，在有效期内的已开封试剂建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】冰冻切片或碳蜡切片，厚度约6～10μm。
【检验方法】1、冰冻切片厚约若干μm，裱贴于玻片，蒸馏水稍洗；2、切片入60%异丙醇若干秒；3、配制油红O染色工作液：取适量的油红O储存液和油红O稀释液，按2：1比例混合，即为油红O 染色工作液，静置若干分钟，尽量吸取上层液体染色；4、入油红O染色工作液浸染若干钟，用60%异丙醇稍洗去多余染色液，流水洗若干秒；5、苏木素染色液染色若干分钟，流水冲洗若干分钟；6、用滤纸将切片周围水分吸干，用阿拉伯糖胶或甘油明胶封片。
【检验结果的解释】中性脂肪呈橙红色或橘红色，细胞核呈蓝色。
【检验方法的局限性】仅限于病理组织内容物染色观察。
【注意事项】1、冰冻切片制备后无需固定即可进行染色，也可于10%中性福尔马林固定液中稍固定1～2分钟，固定时间不宜过长，避免脂质溶解。
2、由于脂肪易溶于有机溶剂，所以显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理，而通过冰冻切片染色来显示。
软骨染色液(番红O法)使用说明书
软骨染色液（番红O法）使用说明书
货号：G2540
规格：100mL
保存：室温避光保存，12个月有效。
产品简介：
软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。
软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。
软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。
番红0软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，它常与固绿合用用于显示软骨，是基于阳离子染料粘多糖中阴离子集团的结合，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织与骨组织区分开。
操作步骤（仅供参考）：
1.标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2.常规脱蜡至水。
3.入Safranin O stain内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。
4.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
5.二甲苯透明，光学树脂封固。
也可参照改良番红O-固绿软骨染色液进行。
染色结果：
软骨基质、细胞浆红色
注意事项：
1.需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。
2.切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。
3.Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。
4.95%乙醇脱水时间不宜过长。
5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
(完整word版)油红O染色法及Masson染色法
油红O染色及Masson染色油红O染色1. 染色液的配制材料：油红染料棕色可密封瓶异丙醇研钵漏斗定性滤纸称取预先研磨粉碎的0。
5g油红干粉，溶于少量异丙醇中，然后加异丙醇至100ml,棕色瓶密封（或锡箔纸包裹避光）4℃保存,为储存液,可长期保存。
用时取6ml加三蒸水4ml混匀，定性滤纸过滤，稀释后数小时内用完。
2。
10％中性甲醛的配制材料:中性甲醛（多聚甲醛）密封瓶称取1g中性甲醛粉末，加入10ml的三蒸水中,密封，在60度水浴中过夜才能溶解。
配好的溶液1个星期内有效,最好4度保存。
3。
染色对象间充质细胞脂肪诱导后不同时间段。
4.培养载体 3毫升培养瓶。
如果培养载体为塑料制品，hoechst33342染核的话,塑料板自发荧光也为蓝色，必须考虑。
5.染色步骤：5.1 先小心轻缓倒去培养夜。
5。
2 用pbs轻缓漂洗（不洗没问题)。
5。
3 加10%中性甲醛固定30min（实际固定时间过夜都没问题.固定液用95%酒精也可）.固定的是细胞膜。
5.4 稀释油红储存液，油红：去离子水＝3:2，滤纸过滤，室温放置10min（除去一些杂质,染色结果更清晰）。
5。
5 染色10min左右，加的体积覆盖住板底即可,如6孔加1。
5ml，24孔加0.5-1ml（实际染色时间1小时都可以）。
5。
6 脱色，用75%酒精/60％异丙醇漂洗，除去多余的染料（实际用其他平衡液洗也没问题，背景并不会残留多少）。
5.7 复染，淡苏木染色1/5分钟，pbs漂洗（这一步不做也可，看试验需要，并且苏木素会把胞浆染红，如要显示核， hoechst33342也可以，浓度5微克/毫升染10分钟即可把核染上）. 5。
8甘油明胶封片（封片后可长期保存)。
5.9 显微镜观察。
注意事项：脂肪油红染色，有的是动物/人体脂肪组织切片，或细胞爬片。
各有操作差异。
以下是各论坛方法小结,不全。
1.完全成熟饱满的脂肪细胞，容易破裂，脂滴泄漏,所以压片，切片都要考虑到这个问题。
油红O染色说明书
油红O染色说明书
产品简介
以油红O溶液染色是鉴定间充质干细胞向成脂细胞分化的一个重要指标。
用特定的成脂诱导培养基（货号：PH-B009）培养一段时间后，间充质干细胞可分化为成脂细胞，并在细胞中形成脂滴。
油红 O属于偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，与甘油三酯结合呈小脂滴状。
脂溶性染料能溶于细胞中的脂滴。
当染料加入细胞中，染料则离开染液而溶于细胞内的脂滴中，使细胞内的脂滴呈红色或橘红色。
包装组成成分
油红O染色操作规程：
所需材料：
菩禾生物油红O染色试剂盒
操作方法与步骤（以6孔板为例）
1.油红O工作液制备：油红染色液与染色稀释液按照3:2的比例进行稀释，混
匀后室温静置10min，滤纸过滤；
2.移除孔内培养基，每孔加入2ml洗涤液1号静置1min后移除，洗涤2次；
3.每孔加入2ml固定液，37℃（或室温）固定30min；
4.移除固定液，每孔加2ml洗涤液1号冲洗，洗涤2次；
5.每孔加入油红O工作液2ml，37℃（或室温）染色10-20min；
6.每孔加入洗涤液3号2ml，快速移除，根据染色背景情况可重复1-2次；
7.每孔加洗涤液2号2ml，洗2次后显微镜下观察
成脂细胞油红O染色图例：
产品保存及使用注意事项：
1.需避光保存。
2.请于保质期内使用。
3.为了您的健康，请在实验过程中穿上实验服，带好手套。
本产品仅用于科研用途，不可用于诊断、治疗、临床、家庭及其他用途。
油红O染色试剂盒说明书
深圳市达科为生物工程有限公司地址：深圳市坪山区坑梓街道金辉路14号深圳市生物医药创新产业园区1号楼702、703518122油红O 染色试剂盒说明书Cat#：6063221产品描述：油红O 是一种脂溶性的偶氮染料，在脂肪内高度溶解，能特异性地使组织和细胞内中性甘油三酯、脂质和脂蛋白染色。
该染色液使用便捷，性能稳定，显色清晰。
包装规格：用户自备：DPBS 去离子水注意事项：●本品久置会出现沉淀，属于正常现象。
●本品仅供研究使用，不能用于动物或人体的体外诊断。
●使用时，请做好个人卫生防护。
●废弃物按相关规定进行处理。
使用方法：以六孔板为例：1.工作液准备，将油红O 染色液（6063221-1）和去离子水按照3:2的比例进行稀释，滤纸过滤，配置为工作液，该工作液2h 内用完；2.将培养基轻柔吸出，避免破坏细胞层；3.DPBS 轻柔洗涤细胞两次，每次1mL ；4.加入固定液-油红O （6063221-2）至覆盖整个底部，室温固定15min ；5.移除固定液后，去离子水轻柔洗涤3次；6.移除去离子水后，加入工作液至覆盖住整个底部即可（通常加入1mL ），室温放置15min ；7.移除染色液，去离子水洗涤3-5次；8.加入1mL 去离子水防止细胞脱水，随后将样本置于镜下观察。
货号组分数量规格保存6063221-1油红O 染色液1100mL 2~8℃6063221-2固定液-油红O1100mL2~8℃深圳市达科为生物工程有限公司地址：深圳市坪山区坑梓街道金辉路14号深圳市生物医药创新产业园区1号楼702、703518122Tel**************E-mail:*************相关产品：货号名称规格6063211茜素红染色试剂盒100mL/kit 6063231阿利新蓝染色液100mL/瓶6114531人间充质干细胞成脂分化培养基200mL/kit 6114541人间充质干细胞成骨分化培养基200mL/kit 6114551人间充质干细胞成软骨分化培养基200mL/kit 6062011DPBS500mL/瓶版本号：C/1。
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南京森贝伽生物科技有限公司
改良油红O染色试剂盒说明书
产品简介：
显示中性脂类的“染色方法”是用易溶于脂的染料，使之溶于所检查的脂滴中。
常用苏丹染料，近年来添用了油红O，属于偶氮染料。
油红O是很强的脂溶剂和染脂剂，较易与真脂（三酰甘油）结合（呈小脂滴状），而与磷脂结合稍差。
阳性染色结果成橘黄至红色，视脂质浓度而定。
改良油红O染色试剂盒的产品说明：
标本处理：
冰冻切片，不固定，或10%甲醛溶液固定10分钟后水洗
操作步骤：
1.切片如双蒸水中清洗。
2.于试剂（B）内浸洗。
3.入试剂（A）中，染10-15分钟，瓶塞封严。
4.入试剂（B）中浸洗（分色）
5.入双蒸水中清洗，
6.自来水冲洗5-10分钟。
7.入双蒸水中清洗。
8.甘油明胶封固。
结果：脂滴呈橘黄色
注意事项：
1.染液不够稳定，易产生沉淀。
2.本染色液加入糊精，不容易产生沉淀，染色效果较好
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件：本试剂盒应置4℃保存，试剂（A）需要避光保存。