准噶尔山楂叶总黄酮的超声波提取及抗氧化研究_任艳利

黄酮类化合物是一类广泛存在于自然界的具有 C － C 基本母核的一大类化合物［1 －2］，总黄酮作为一种天然的植物提取物，不仅有广泛的药理作用，还具有低毒安全的特性。现代研究表明，黄酮类化合物有明显的抗氧化、抗炎、抑菌、抗癌及降血脂等生物活性，已广泛应用于食品和医药行业［3 －4］。准噶尔山楂（ Crataegus songorica K． Koch．）是蔷薇科蔷薇属的植物，在新疆伊犁州霍城县大、小西沟有大量分布［5 －6］。笔者采用超声波法提取准噶尔山楂叶中的总黄酮，探讨了准噶尔山楂叶中总黄酮提取工艺的影响因素，通过单因素和正交试验法得出超声波提取的优化条件，并对总黄酮的抗氧化性进行了探讨，为准噶尔山楂叶的综合利用和深度开发提供一定的参考［7 －9］。 1 材料与方法 1． 1 材料以采自霍城县大、小西沟的准噶尔山楂叶为材料，自然避光干燥，用粉碎机粉碎为粉末后备用。722 型紫外可见分光光度计，上海光谱仪器有限公司； HHS 型电热恒温水浴锅，上海博远实业有限公司医疗设备厂； FA1004． MAX100g 电子天平，上海天平仪器厂； TGL-18M，台式高速冷冻离心机，上海安亭科学仪器公司； DILON99-IID 型超声波细胞粉碎机，西安比朗仪器公司； RE-52AA 旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂； DZF-6020 真空干燥箱，上海和呈仪器制造有限公司。 1． 2 方法 1． 2． 1 准噶尔山楂叶总黄酮的提取。称取一定质量的准噶尔山楂叶粉，用不同体积分数的乙醇作溶剂，在超声波细胞粉碎机中提取，抽滤。将抽滤液用旋转蒸发仪浓缩，浓缩液
用力摇匀，将 Ai 所表示的样品在室温下静置 30 min 后，加入比色皿中进行吸光度的测定，测出 A0 、Ai 、Aj 所表示样品的吸光度值，清除率按下式计算：
SA（ % ） = 1 －（ Ai － Aj ） / A0 × 100 式中，A0 ，未加提取液的 DPPH 溶液的吸光度； Ai ，加入提取液后的 DPPH 溶液的吸光度； Aj，DPPH 溶液与提取液混合后的吸光度。 2 结果与分析 2． 1 单因素试验结果分析 2． 1． 1 乙醇浓度对总黄酮提取率的影响。称取 5 g 准噶尔山楂叶粉末于 100 ml 烧杯中，在料液比 1∶ 16 g / ml、温度 50 ℃ 、功率 90 W 时，考察不同乙醇浓度对总黄酮提取率的影响。从图 2 看出，总黄酮提取率在乙醇浓度 40% ～ 70% 时随乙醇浓度的增大而增加，70% 乙醇超声波提取总黄酮提取率最高；当乙醇浓度大于 70% 随着乙醇浓度的增大总黄酮提取率降低。因此，从提取率来看，乙醇浓度最好选取 70% 。
图 2 乙醇浓度对总黄酮提取率的影响
2． 1． 2 提取时间对总黄酮提取率的影响。称取 5 g 准噶尔山楂叶粉末，以 70% 乙醇为溶剂，超声温度 50 ℃ 、料液比 1∶ 16 g / ml、功率 90 W，考察不同时间对总黄酮提取率的影响。从图 3 看出，在提取时间 20 ～ 40 min，随着超声波提取时间的增加总黄酮提取率增加明显；提取时间 50 min 时总黄酮提取率最高，在 60 min 时有下降趋势。由此可见，并不是提取时间越长越好。因此，提取时间可选在 50 min。 2． 1． 3 料液比对总黄酮提取率的影响。称取 2 g 准噶尔山楂叶粉末，以 70% 乙醇为溶剂，在超声温度 50 ℃ 、时间 50 min、功率 90 W，考察料液比对提取率的影响。从图 4 看出，总黄酮提取率随提取溶剂的比例增大而增加，而在 1∶ 16 ～ 1∶ 20 g / ml 时增加较快；料液比 1∶ 24 g / ml 时开始下降。由此可见，并不是提取溶剂越多越好。因此，料液比可选在 1∶ 20 g / ml。
40 卷 15 期
任艳利等准噶尔山楂叶总黄酮的超声波提取及抗氧化研究
8711
醇溶解定容至 50 ml 容量瓶中，摇匀，作为储备液保存于冰箱中，用时逐级稀释。
吸取 2 ml DPPH·储备液，用无水乙醇定容于 100 ml 容量瓶中摇匀待测。利用 DPPH·溶液的特征紫红色团的吸收，用紫外－可见分光光度法测定加不同浓度提取液后在波长 517 nm 处吸光度的下降来表示其对有机自由基的消除能力。其中，样品 A0 ： 2 ml DPPH·溶液 + 2 ml 无水乙醇；样品 Ai ： 2 ml DPPH·溶液 2 ml 样品溶液；样品 Aj ： 2 ml 样品溶液 + 2 ml 无水乙醇。
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2012，40（ 15）： 8710 － 8712
责任编辑李菲菲责任校对李岩
准噶尔山楂叶总黄酮的超声波提取及抗氧化研究
任艳利，张维，刘影（伊犁师范学院化学与生物科学学院，新疆伊宁 835000）
摘要［目的］为准噶尔山楂叶的综合利用和深度开发提供一定的参考。［方法］利用超声波法提取准噶尔山楂叶中的总黄酮，用总黄酮提取率作为衡量提取工艺的指标，对影响超声波提取的多个因子进行单因素、正交试验分析。［结果］准噶尔山楂叶中的总黄酮的超声波提取最佳条件为：乙醇浓度 80% ，提取温度 50 ℃ ，提取时间 50 min，提取功率 75 W，总黄酮的得率高达 84． 50% ；影响总黄酮得率的主次因素依次为：乙醇浓度＞提取时间＞提取功率＞提取温度。［结论］准噶尔山楂叶总黄酮有较强的清除自由基能力，表现出明显的抗氧化性。关键词超声波；准噶尔山楂叶；总黄酮；提取；抗氧化性中图分类号 S 122 文献标识码 A 文章编号 0517 － 6611（ 2012） 15 － 08710 － 03
作者简介任艳利（ 1978 －），女，河南偃师人，讲师，硕士，从事生物化学与分子生物学研究，E-mail： ryl2003@ 126． com。
收稿日期 2012-02-22
再经氯仿萃取、醇沉、过滤后，将滤液浓缩成膏状，置于真空干燥箱中干燥，得到准噶尔山楂叶总黄酮测试样品。 1． 2． 2 标准曲线的绘制。先用甲醇将烘干的标准品芦丁配制成浓度 1． 128、0． 940、0． 752、0． 564、0． 376、0． 188 mg / ml 的标准溶液［10］，依次移取不同浓度的标准液 1 ml 分别置于带刻度的 10 ml 试管中，各加甲醇至 5 ml，分别加入 5% NaNO2 溶液 0． 5 ml，摇匀，室温放置 6 min，再加 10% Al（ NO3 ） 3 溶液 0． 5 ml，摇匀，室温放置 6 min，加 4% NaOH 溶液 4． 0 ml，摇匀，室温放置 15 min，在波长 500 nm 测定吸光度，绘标准曲线（图 1）。其回归方程为： A = 1． 022 8X + 0． 045 7（ R2 = 0． 998 6）。
图 5 提取温度对总黄酮提取率的影响
2． 1． 5 提取功率对总黄酮提取率的影响。称取 5 g 准噶尔山楂叶粉末，以 70% 乙醇为溶剂，在超声时间 50 min、温度 60 ℃ 、料液比 1∶ 20 g / ml 条件下，考察提取功率对总黄酮提取率的影响。由图 6 可知，功率在 60 ～ 90 W，随功率增大，总黄酮提取率增大； 90 ～ 120 W 时，随功率增大，总黄酮提取得率呈下降趋势。分析原因，是因为在功率不断增大的过程中，温度也会不断地升高，影响了提取率，故选择 90 W 为最佳提取功率。 2． 2 正交试验结果及分析称取 5 g 准噶尔山楂叶粉，以料液比为 1∶ 20 g / ml，置于超声波提取器中提取，在单因素试验
图 3 提取时间对总黄酮提取率的影响
图 4 料液比对总黄酮提取率的影响
2． 1． 4 提取温度对总黄酮提取率的影响。称取 2 g 准噶尔山楂叶粉末，以 70% 乙醇为溶剂，料液比 1∶ 20 g / ml、功率 90 W、时间 50 min，考察不同温度对总黄酮得率的影响。由图 5 可见，当提取温度在 40 ～ 60 ℃ ，随着温度的升高总黄酮提取率随之增大； 50 ～ 60 ℃ 时总黄酮提取率增幅较大；但温度超过 60 ℃ 时，随着温度的升高总黄酮提取率反而下降。因此，提取温度选在 60 ℃ 为宜。
图 1 总黄酮标准曲线
1． 2． 3 单因素试验。以准噶尔山楂叶总黄酮提取率为指标，分别研究乙醇浓度、提取时间、料液比、提取温度、提取功率对准噶尔山楂叶总黄酮提取率的影响。 1． 2． 4 正交试验。在单因素试验的基础上，对提取时间、料液比、提取温度、提取功率进行 4 因素 3 水平正交试验设计分析各因素影响主次，确定其最优提取工艺。 1． 2． 5 DPPH 法测定总黄酮对总自由基的清除作用［11］。 DPPH·溶液的配制：准确称取 0． 198 4 g DPPH·，用无水乙
Study on the Ultrasonic Extraction and Antioxidative Activity of Total Flavonoids from Crataegus songorica K． Koch． Leaves REN Yan-li et al （ College of Chemistry and Biological Science，Yili Normal University，Yining，Xinjiang 835000） Abstract ［Objective］ To provide references for the comprehensive utilization and deep processing of Crataegus songorica K． Koch leaves．［Method］ The total flavonoids were extracted from Crataegus songorica K． Koch leaves by ultrasonic wave，and the impact factors were analyzed by single factor and orthogonal experiments．［Result］ The best ultrasonic extraction conditions were 80% ethanol concentration，50 ℃ extraction temperature，50 min extraction time and 75 W extraction power，under the conditions，the yield of total flavonoids could reach up to 84． 50% ，and the influential degree of each impact factor decreased in the order of ethanol concentration ＞ ultrasonic time ＞ ultrasound power ＞ ultrasonic temperature．［Conclusion］The total flavonoids from Crataegus songorica K． Koch leaves had strong radical scavenging ability and significant antioxidative activity． Key words Ultrasonic extraction； Crataegus songorica K． Koch leaves； Total flavonoids； Extraction； Antioxidative activity

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浅析超声波法乙醇提取山楂叶黄酮

摘要：楂叶中有效成分黄酮的提取，目前广泛使用的乙醇提取法存在提取温度高、时间长等缺点，本文研究在超声波条件下，采用正交实验设计考察了乙醇浸提山楂叶中黄酮的提取工艺条件。

关键词:超声波；乙醇；山楂叶；黄酮作者简介：邓光辉（1957-）,男，教授，主要从事天然产物化学研究。

基金项目：广西省科学基金项目(桂科基:0236037)，广西教育厅项目(桂教科研[20xx]316号)资助黄酮类成分有降压、降血脂、增加冠脉流量、强心、抗心律不齐等药理作用。

山楂果肉及山楂叶中含有丰富的黄酮类化合物，由于其对心脑血管疾病有显著疗效而被受人们的关注。

山楂叶中有效成分黄酮的提取，目前广泛使用的乙醇提取法，是采用索氏提取器回流提取。

但此方法存在提取温度较高、提取时间长、乙醇消耗大、成本高等缺点。

超声技术应用于提取山楂叶中黄酮的研究尚未见报道。

本研究在超声波条件下，采用正交实验设计考察了乙醇浸提山楂叶中黄酮的提取工艺条件。

1实验部分1.1材料试剂与仪器KQ-320xxDB型数控超声波仪（昆山超声仪器有限公司）；916型紫外-可见分光光度计（澳大利亚GBC公司），离心沉淀器，分析天平（上海第三分析仪器厂），循环水式多用真空泵。

山楂叶：采自广西靖西。

芸香叶苷：即芦丁（中国生物制品鉴定所）。

1.2实验方法1.2.1芦丁标准曲线的绘制芦丁的测定采用亚硝酸钠-硝酸铝分光光度法。

精密称取芦丁42.5mg，用60的乙醇溶解并稀释至250ｍL，作为芦丁标准液。

精密量取1、2、3、4、5、6mL 芦丁标准液，分别置25mL容量瓶中，各加水至6mL，加5亚硝酸钠溶液1mL，混匀，放置6min；加10硝酸铝溶液1mL，混匀，放置6ｍin；加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min；以试剂空白作参比，用1cｍ比色皿在500nm波长处测定吸光度。

所得数据经回归处理，回归方程为ｙ=0.0885A 0.0013，ｒ=0.9998。

芦丁浓度在0.02-1.212mg/ml范围内具良好的线性关系。

山楂叶总黄酮含量测定及抗氧化活性研究

山楂叶总黄酮含量测定及抗氧化活性研究薛宇彤;郑锦秀;邵莹;杨利军【期刊名称】《包头医学院学报》【年(卷),期】2023(39)1【摘要】目的:评价山西晋南地区采集的山楂叶中总黄酮的含量及体外抗氧化活性。

方法:采用显色法测定总黄酮含量;通过对1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydra-zyl,DPPH)、2,2-联氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(2,2′-azino-bis[3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid]diammonium salt,ABTS)和羟自由基的清除能力评价体外抗氧化活性。

结果:山楂叶总黄酮含量为(79.06±2.05)mg/g。

总黄酮对DPPH、ABTS自由基清除半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为(91.63±1.75)和(64.34±4.53)μg/mL,与抗坏血酸相比,相对抗氧化活性(relative antioxidant activity,RAA)分别为40.71%和76.64%;对羟自由基清除率较低,三者均低于同质量浓度下的抗坏血酸。

结论:山西晋南地区采集的山楂叶总黄酮含量较高,有较高的抗氧化活性,可用于后续研究。

【总页数】5页(P18-22)【作者】薛宇彤;郑锦秀;邵莹;杨利军【作者单位】山西医科大学汾阳学院;山西医科大学基础医学院【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.准噶尔山楂叶总黄酮提取、测定及抗氧化活性研究2.复方罗欧咳祖帕中总多酚总黄酮的含量测定与抗氧化活性研究3.不同产地沙棘中总黄酮、总多酚含量测定及其抗氧化活性研究4.苗药透骨香的抗氧化活性研究及总黄酮、总酚酸的含量测定5.同时测定山楂叶总黄酮中6种黄酮含量及体外抗氧化活性评价因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

超声波提取山楂叶总黄酮的工艺研究

ｅｈｎｌｗａｉｈｓ．ｌｔｔｌｆｖｎｉｓｙｅｄｉｃｅｅｂｉｕｌｌｎｔｅｉｃｅｎｆｅｔｃｉｎｔｕｉｇ２ —４ｎａｄｔｎｅｏｂｌｎｅｔａｏｓｈｇｅｔｅｏａａｏｏｄｉｌｎｒａｄｏｖｏｓａｏｇｗｉｔｎｒｍｔｏｘｒｔｉｄｒｎ０ｌｓｙｈｈｅａｏｍｅｏｍｉｎｅｄｔａａｃｄｄｒｎｏ一５ｎｕｉｇ４０ｍｉｌｏａａｏｏｄｉｌｎｒａｅａｔｒｗｈｌｅｒｔｆｍｔｒｌｔｉｕｄｗａ１ｅｔｔｌｆｖｎｉｓｙｅｄｉｃｅｓｄｆｓｅｉｔａｉｏｎｅｉｏｌｉｓ１：６～１２，ｄｃｅｓｄａｌｔｅｅｒｔｓｌｅｈｏａｑ：０ｅｒａｅｉｌｗｈｎｔａｉｗａｔｅｈｏ１２ｌｏａａｏｏｄｉｌｃｅｓｄａｏｔｅｅｈｎｅｎｆｔｍｐｒｔｒｉｅｔｍｐｒｔｒｓｏ～印ｏｎｅｉｃｍｅｔｗａｉｇｒ＂８、ｅｔｔｌｆｖｎｉｓｙｅｄｉｒａｅｌｎｗｉｔｎａｃｍｅｔｏｅｅａｔｅｗｌｔｅｅａｔｅｗａ４ｌｎｇｈｈｃｈｅｈｃＣａｄｔｎｒｎｓｂｇｅｈｅｈｎｔｅｅａｕｅｗａ５ｗｅｅｔｍｐｒｔｒｓ～６Ｃ．ａｄｄｃｅｓｄａｏｔｅｅｈｎｅｎｆｔｍｐｒｔｒｅｅｔｍｐｒｔｒｓｖｒ０ ℃ 、ｈｒｅｆｆｃｏｓｈ００ｏｎｅｒａｅｌｎｗｉｔｎａｃｍｅｔｏｅｅａｕｅｗｎｔｅｅａｔｅｗａｏｅ６ｇｈｈｈｈｃ１ｅｏｄｒｏａｔｒ

连云港山楂叶黄酮的超声提取及体外活性研究

文章编号：１６７４－８０８５（２０１６）０６－００２４ — ０６
连云港山楂叶黄酮的超声提取及体外活性研究
许瑞波，一，杨雯雯２，万蓓蓓２
（１．江苏省海洋资源开发研究院，江苏，连云港２２２００５；２．淮海工学院药学院，江苏，连云港２２２００５）
ｌａｆｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍｈａｔｈｗｏｎｌｒｅａｖｅｓｉＳ２．５３％．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｏｆｔｈｅｆｌａｖｏｎｏｉｄｓａｇａｉｎｓｔ
第３７卷第６期２０１６年１１月
、，ｏｌ＿３７ＮＯ．６
ＮＯＶ．２０１６
井冈山大学学报（自然科学版）
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉｎｇｇａｎｇｓｈａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ）２４
２０：１（ｍＬ／ｇ），ｅｘｒｔａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆ７０ ℃，ｅｘｒｔａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｏｆ４０ｍｉｎａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｓｏｆ３．Ｔｈｅｙｉｅｌｄｏｆ
ｏｐｔｉａｌｍｅｘｒａｔｃｔｉｏｎｔｅｃｎｏｈｌｏｇｙｗａｓｏｂａｉｔｎｅｄａｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇ：ｅｔｈａｎｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ７０％．ｓｏｌｖｅｎｔ — ｔｏ — ｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏｏｆ

山楂叶黄酮的超声提取、精制及抗氧化性研究

摘要：单因素实验和正交实验设计探讨了山楂叶黄酮的超声辅助提取工艺条件，通过采用溶剂萃取法对粗提物进
一
步除杂精制，并对提取物的抗氧化性能进行了研究。实验结果表明：山楂叶黄酮的最适宜提取工艺是温度８Ｏ℃～
８５℃，液料比（乙醇体积：原料质量）８１用６１：，０％乙醇超声提取２次，次４ｉ，每０ｍｎ然后再７Ｏ℃，回流提取１ｈ。精制后。黄酮在甲醇：：水丙酮１２２体系中进行聚酰胺薄层色谱分离效果最好，到４个黄酮斑点。山楂叶黄酮对猪油：：得抗氧化能力较强，ｃ具有很好的正协同效应。ｖ关键词：山楂叶；黄酮；超声辅助；提取；精制；抗氧化性
维普资讯
囊品究与羿发
—＝６＝＝４
科研学究
山楂叶黄酮的超声提取、精制及抗氧化性研究
许瑞波，赵跃强，升丽，利斌，鲁马李敏敏，陶磊
（淮海。学院化工系，【江苏连云港２２０）２０５
（ｈｍｉｌｎｉｅｒｇＤｐｒｅｔＨａａＩｓｔｔｆｅｈｏｏｙＬａｙｎａｇ２２０，ｉｇｕＣｅｃｇｅｎｅａｔｎ，ｕｉｉｎｔｕｅｃｎｌ，ｉｕｇｎ２０５Ｊｎｓ，ａＥｎｉｍｈｉｏＴｇｎａ
ｓｏｄｔａｅｏｔｍｘｒｃｉｇｃｎｉｏｓｒｓｏｌｗｎ：ｘｒｃｉｎｔｍｐｒｔｒｓ８Ｃ８ ℃ 。ｈｗｅｔｈｐｉｈｔｍｕｅｔａｔｏｄｔｎｅａｌｉｇｅｔａｔｎｉｗｅｆｏｏｅｅａｕｅｗａ０￣￣５

山楂叶黄酮提取与测定研究进展

高了ｌ６．９％。
要指标是黄酮类化合物的含量，其测
定方法研究日益深入。目前已报道的
１、水提法。将山楂叶干燥粉碎，
加水浸煮２～３次，冷却后粗滤，滤液
山楂叶黄酮测定方法主要有以下几种。（一）定性测定
山楂，是我国特有的药果兼用树种，在我国河北、北京、辽宁、河南、山
（二）微波提取法
微波提取法具有操作简单、副产物少、产率高及产物易提纯等优点，
还具有高效性和高选择性的特点。其
东、山西、江苏、云南、广西等地均
高。
二、山楂叶黄酮的测定
结了山楂叶的提取和测定方法，以期对加强山楂叶黄酮的开发力度、提高
其综合利用水平及附加值提供依据。
～
、
山楂叶黄酮的提取方法
（一）溶剂提取法
酶解法是利用酶的高度专一性，将山楂ｎｔ２１￣胞壁的纤维素以及细胞间
农业科学
ＮｏＮＧＹＥＫＥＸＵＥ
山楂叶黄酮提取与测定研究进展
河南农业职业学院
摘
焦
镭
石明生
曹乐民
柴梦颖
辉县市九大聚仙农贸有限公司
赵运华
要：综述了山楂叶黄酮提取与检测的研究进展，分析了山楂叶黄酮在相关产业开发利用中存在的问题并提出了相应的对策。

山楂叶片中黄酮类物质的提取工艺与检测

山楂叶片中黄酮类物质的提取工艺与检测1项目设计的意义山楂为蔷薇科植物，资源丰富,叶片中含有的黄酮类化合物具有降压、降血脂、软化血管、增加冠状动脉流量、助消化等药理作用。

随着人们健康观念的更新以及黄酮类化合物越来越广泛的生物活性被发现,其开发利用已成为目前的一个研究热点。

研究证实,山楂叶和果含有相近的营养及药用成分,特别是总黄酮含量远高于果实,有很高的利用价值。

但长期以来,人们只注重果实的利用,而山楂叶则自生自落,白白浪费。

超声波法提取总黄酮具有简单、低成本、快速、有效的优点,且不破坏其有效成分。

为了充分开发利用山楂叶这一丰富的资源,本试验对山楂叶总黄酮的超声波提取工艺条件进行了研究,为进一步合理开发利用山楂资源提供理论依据。

2项目设计的原理2.1超声波提取法原理用超声波法提取黄酮类物质,是目前比较新的方法。

它的原理是超声波的空化作用对细胞膜的破坏有助于黄酮类化合物的释放与溶出,超声波使提取液不断震荡,有助于溶质扩散,同时超声波的热效应使水温基本在57℃,对原料有水溶作用。

因此,超声波法大大缩短了提取时间,提高了有效成分的提取率和原料的利用率，且实验可在室温下进行,设备简单,操作方便,是提取山楂中黄酮类物质的一种有效方法。

2.2测定原理黄酮类化合物主要包括黄酮苷和黄酮醇苷两大部分，三氯化铝与黄酮类化合物作用后，生成黄酮的铅盐络离子，呈黄色，颜色的深浅与黄酮的含量成一定的比例关系，可以定量测定。

3主要仪器及试剂KQ-5000DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司,额定功率为500W),754型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司),JA-5003A型千分之一电子天平,DHG-9146A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司),RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)及其他玻璃仪器。

芦丁为生化试剂，乙醇、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠等均为分析纯。

4实验内容和步骤4.1山楂叶总黄酮超声波法提取工艺条件的筛选(1)准确称取干燥山楂叶1.000g,加入20mL(料液比1:20)体积分数分别为60%、70%、80%、90%的乙醇,在40℃下以80%超声功率(400W)提取30min,测定其黄酮的提取率。

超声波法提取山楂叶中总黄酮条件研究论文.

本科生毕业设计（论文）题目：超声波法提取山楂叶中总黄酮的条件研究学生姓名：李友鹏刘浩刘高鹏学号：院系：化学工程学院专业年级：2011级应用化学3班指导教师：2015年6月12日摘要总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。

山楂叶的化学成份复杂，从山楂叶中分离出的最多的功效组分是黄酮类物质。

利用超声波法，以芦丁为参照品，硝酸铝作显色剂，在510nm波长以分光光度法测定总黄酮含量。

结果测得工作曲线的回归方程为A=0.0091C+0.0023，r=0.9980，a=0.0023，b=0.0091。

线性相关系数R=0.9980。

采用单因素考察法对不同提取溶媒、乙醇浓度、温度、时间、料液比进行总黄酮含量的测定，得出较佳的实验条件为：乙醇的体积分数为70%，料液比1:20、超声温度50℃，超声时间60min，此时得到的黄酮质量为137.555mg。

通过四因素三水平的正交实验，得出影响总黄酮提取率的主要因素为乙醇浓度＞超声温度＞料液比＞超声时间。

关键词：山楂叶；黄酮类化合物；超声波法；分光光度法ABSTRACTRefers to the total flavones, it is a kinds of natural products, widely exist in the plant kingdom, is many effective components of Chinese herbal medicine.Hawthorn complex chemical composition, isolated from hawthorn leaves most of the efficacy ingredient is flavonoids.This experiment using ultrasonic method，use Rutin as reference，Aluminum nitrate as chromogenic agent。

应用超声辅助法对山楂果实中的黄酮物质进行萃取

山楂（Crataegus pinnatifida Bunge ），属于蔷薇科落叶乔木，其果实具有药用价值，成熟果实颜色为红色或暗红色，可直接食用。

科学研究表明，山楂中重要的药用成分为黄酮，山楂黄酮能消食健胃、行气化瘀，在抗氧化活性、抗癌、降血脂、血栓素A2合成酶抑制剂等方面都有良好的效果，同时还具备潜在的肝损伤治疗价值[1-5]。

超声波辅助法在植物有效成分提取中不仅可以很大程度上减少萃取溶剂的使用剂量，缩短提取时间，并且具有优秀的提取效率。

研究表明，该方法应用在山楂黄酮的提取实验中，能有效提高山楂黄酮的提取率[6]。

孙协军等[8]采用超声波辅助法对山楂中的芦丁等三种主要的黄酮类物质进行提取，效果令人满意。

李利华等[7]在山楂黄酮的超声波辅助提取中，使用正交实验进行分析，其黄酮提取率可达7.61%。

响应曲面法（Response Surface Methodology ，RSM ）的优点是能够将实验的响应值表现成一个或多个因素相互之间的函数关系，并将这种函数关系直观地反映给实验人员，可以更容易计算出实验的最佳工艺条件。

因此，本实验在使用超声波辅助提取的基础上，通过BBD 响应面优化法对影响实验的因素条件进行优化分析，研究采用超声波辅助提取山楂黄酮的工艺效果[9]；同时进一步探究该法提取出来的黄酮的结构活性，采用DPPH 法（以抑制率来表示，它对DPPH 自由基的抑制率越高，其抗氧化能力越强），评价本法提取的黄酮的结构活性[10]。

1材料与方法1.1试剂与仪器山楂，市购；芦丁标品，北京普天同创生物科技有限公司；DPPH ，上海吉至生化科技有限公司；NaNO 2、Al （NO 3）3、NaOH 和无水乙醇，AR 。

GT SONIC-P13型超声波清洗机，广东固特超声股份有限公司；DHG-9076A 型鼓风干燥箱，甘易仪器设备（上海）有限公司；LC-LX-H185C 型台式高速离心机，湖南力辰仪器科技有限公司；ALPHA 型傅立叶变换红外光谱仪，江苏同生科技有限公司；752型紫外可见分光光度仪，上海光学仪器五厂有限公司；FA-3104N 电子分析天平，上海菁海仪器有限公司。

超声辅助提取山楂黄酮的研究

超声辅助提取山楂黄酮的研究近年来，全球范围内对山楂及其黄酮成分的研究越来越看重，而山楂黄酮的提取是研究山楂及其黄酮成分的基础与关键。

超声，被公认为一种有效、环保、低成本的技术工艺，可以有效提取细胞内的有效成分，因此超声辅助提取山楂及其黄酮成分的研究受到了学术界的高度重视。

首先，本文介绍了超声辅助提取山楂黄酮的原理。

超声波可以产生瞬时的压力波，产生的空气动力使得植物的细胞壁受到振动，进而使细胞内有效成分释放出来，从而提高了提取山楂黄酮的效率。

其次，本文讨论了超声辅助提取山楂黄酮的参数研究。

研究表明，超声处理参数，如超声处理时间、超声处理功率、超声频率，对山楂黄酮的提取效率有较大的影响，因此，在超声处理过程中要根据不同的山楂品种、不同的山楂年份、不同的山楂黄酮成分选择合适的超声处理参数，从而获得高品质的山楂黄酮。

最后，本文讨论了超声辅助提取山楂黄酮的应用前景。

超声作为提取山楂黄酮的新技术有着良好的发展前景，超声提取技术可以更快速、更低成本、更环保地提取出山楂黄酮成分，因此超声技术在提取山楂黄酮方面具有很好的应用前景。

综上所述，超声辅助提取山楂黄酮是一种技术先进而有效的提取山楂黄酮的方法，是一项具有较高学术价值的研究，尤其是在提取山楂黄酮的低成本、环保方面应用潜力巨大，也受到了越来越多学者的重视和研究。

为更好地提取山楂黄酮，未来还有很多研究工作需要做，比如完善超声处理参数，研究山楂品种、山楂年份等对山楂黄酮提取效率的影响，以及探索更有效更环保、更低成本的技术工艺。

通过有效把握超声技术的应用，会为我国提取和开发山楂黄酮技术服务创造诸多有利的条件。

本文以《超声辅助提取山楂黄酮的研究》为题论述了超声辅助提取山楂黄酮的原理、参数以及应用前景。

超声可以产生瞬时的压力波，从而使植物的细胞壁受到振动，从而提高了提取山楂黄酮的效率。

同时，超声处理参数，如超声处理时间、超声处理功率、超声频率，也会影响到山楂黄酮的提取效率，因此在超声处理过程中要根据不同的山楂品种、不同的山楂年份、不同的山楂黄酮成分选择合适的超声处理参数。

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