山楂黄酮最佳提取工艺探讨_刘北林
167※工艺技术食品科学2007, Vol. 28, No. 06
的乙基麦芽酚与混合盐在温度为１０～１８℃，时间为４８ｈ条
件下进行腌制，对腌制系列产品的脱腥效果非常好。采
用２％的酵母粉，在３５℃左右的条件下，１ｈ发酵，处
理后的产品腥味全无，鱼体表面的颜色也白了很多，并
且还产生一种特殊的令人喜欢的甜香味。经过以上两种方
法进行脱腥之后的鱼产品，其营养成分不仅没有发生改
变，还增加了一些很好的呈味物质，大大提高了鱼制产
品的质量，促进了我国鱼类等水产品的全面开发。参考文献：
［１］段振华， 张敏． 香脆鳙鱼片的制备工艺［Ｊ］． 食品工业科技， ２００３（２）：４４－４７．［２］裘迪仙， 周涛． 鲐鱼蛋白水解液脱苦脱腥的研究［Ｊ］． 食品科学， ２００１（５）： ３７－３９．［３］杨文鸽， 张芝芬． 三角帆蚌肉酶解液的脱苦脱腥研究［Ｊ］． 食品科学，２００３（４）： ９４－９７．［４］马美湖， 陈力力． 无烟薰新工艺降低腌腊薰肉制品中３，４－苯并（ａ）芘残留量的研究［Ｊ］．
食品科学， ２００３（８）： ２９－３３．收稿日期：２００７－０３－０８基金项目：国家自然科学基金项目（３０３７１２２２）作者简介：刘北林（１９４９－）
，男，教授，研究方向为食品商品学与食品营养与卫生。山楂黄酮最佳提取工艺探讨
刘北林，董继生，霍 红
（哈尔滨商业大学，黑龙江 哈尔滨 １５００７６）
摘 要：目的：研究提取工艺对提取山楂总黄酮含量的影响。方法：采用单因素和正交试验法方法研究不同工
艺条件对山楂黄酮提取效率的影响，最后采用响应曲面分析法，确定最佳浸提工艺及相关工艺参数。结果：溶
剂：７０％乙醇；超声波频率：４０ｋＨｚ；超声波作用时间：１５ｍｉｎ；料液比：１：４０。结论：乙醇超声波提取方
法具有操作简单、超声波作用时间短、纯度高、得率高、无需加热，剩余物无有害残留，可以综合利用。
关键词：山楂黄酮；黄酮提取；超声波；响应曲面法
Ｔｏ Ｐｒｏｂｅ ｉｎｔｏ Ｏｐｔｉｍｕｍ Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ Ｈａｗｔｈｏｒｎ Ｆｒｕｉｔｓ
ＬＩＵ Ｂｅｉ－ｌｉｎ，ＤＯＮＧ Ｊｉ－ｓｈｅｎｇ，ＨＵＯ Ｈｏｎｇ（Ｈａｒｂｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｏｍｍｅｒｃｅ， Ｈａｒｂｉｎ １５００７６， Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ： Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｈａｗｔｈｏｒｎ ｆｒｕｉｔｓ． Ｍｅｔｈｏｄｓ： Ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ
ｔｅｓｔ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｈａｗｔｈｏｒｎ ｆｒｕｉｔｓ， ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ
ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｈａｗｔｈｏｒｎ． Ｒｅｓｕｌｔｓ： Ｓｏｌｖｅｎｔ： ７０％ ｅｔｈａｎｏｌ；
ｓｕｐｅｒｓｏｎｉｃ ｗａｖｅ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ： ４０ ｋＨｚ； ｔｉｍｅ ｏｆ ｓｕｐｅｒｓｏｎｉｃ ａｃｔｉｏｎ １５ ｍｉｎ； ｔｈｅ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ １：４０． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ： Ｔｈｅ ｅｔｈａｎｏｌ
ｓｕｐｅｒｓｏｎｉｃ ｗａｖｅ ｄｒａｗｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｔｈｅ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ， ｔｉｍｅ ｓｈｏｒｔ ｐｕｒｉｔｙ ｈｉｇｈ ｙｅｉｌｄ ｈｉｇｈ ａｎｄ ｎｏ ｎｅｅｄ ｆｏｒ ｈｅａｔ， ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｉｓ
ｕｎｈａｒｍｆｕｌ ｔｏ ｂｅ ｄｉｓｐｏｓｅｄ， ａｎｄ ｃａｎ ｂｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｍｕｌｔｉｐｕｒｐｏｓｅｌｙ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｏｆ ｈａｗｔｈｏｒｎ；ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ；ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－６６３０（２００７）０６－０１６７－０４
高血压、高血脂等心脑血管疾病的增加已成为当
今社会影响人类健康的一大难问题，因此，具有降
压、降脂功效的药物研制一直受到人们的广泛重视；
黄酮类化合物在这方面具有较好的疗效［ｌ］，对它的研
究也比较深入；黄酮类化合物的来源广泛存在于多种
天然植物中，现主要从银杏叶、山楂叶、葛根等天然植物中提取黄酮，但其含量较低，提取效率受到
限制。
山楂果实中黄酮类化合物含量较高［２－３］，并含有其它
有机酸等多种生物活性物质，利用山楂果实提取黄酮和
生理活性物质，并对剩余物综合利用，是解决问题的一个很好途径。 2007, Vol. 28, No. 06食品科学※工艺技术168
目前对山楂有效成分提取的研究多集中在山楂
叶方面，并取得了丰富的成果，对果实和果核的研
究较少［４］，本实验采用单因素和正交试验法方法研
究了乙醇回流提取和超声波辅助提取工艺条件对山楂
黄酮提取效率的影响。利用比色法测定含量，最后
采用响应曲面分析法，得出最佳浸提工艺及相关工
艺参数。
１材料与方法
１．１原料及试剂
山楂 经哈尔滨商业大学药学院中药鉴定室鉴定为
北山楂；芦丁标准品 中国药品生物制品鉴定所。
甲醇、乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、ＮａＯＨ均为
国产分析纯试剂。
反渗透水为哈尔滨商业大学食品学院制备。
１．２仪器及设备
７２２紫外分光光度计 上海精密科学仪器有限公司；
索氏提取器 上海第三分析仪器厂；ＤＷＦ－１００植物粉碎
机 河北省黄骅市科研器械厂；ＬＸＪ－６４－０１离心机 北京
医疗仪器修理厂；ＭＡＬＬＯ电子天平 上海第二天平仪
器厂。
１．３方法
１．３．１原料预处理
将干山楂果，粉碎过２０目筛，１０５℃干燥２ｈ，备用。
１．３．２芦丁标准液
精密称取芦丁１５．０ｍｇ，加甲醇溶解并定容至１００ｍｌ，
配制成１５０μｇ／ｍｌ的芦丁标准溶液，作为对照品溶液。
１．３．３标准曲线
分别精密吸取芦丁标准液０．００、１．００、２．００、３．００、
４．００、５．００ｍｌ相当于含芦丁０、１５０、３００、４５０、６００、
７５０μｇ，置于１２．５ｍｌ比色管中，加３０％的乙醇补至５ｍｌ，
各加入５％亚硝酸钠溶液０．３０ｍｌ，摇匀后放置５ｍｉｎ，加
入１０％硝酸铝溶液０．３ｍｌ摇匀后放置６ｍｉｎ，加１．０ｍｏｌ／Ｌ
ＮａＯＨ溶液２．００ｍｌ，用３０％乙醇定容至刻度，摇匀，放
置１５ｍｉｎ，以零管为空白。摇匀后用１ｃｍ的比色杯，在
５１０ｎｍ处波长处测定吸光度，测３次取平均值，经回归处
理，得标准曲线的回归方程和相关系数，Ｙ＝７．１９×１０－４Ｘ
－３．３１×１０－２，得出ｒ＝０．９８７９。绘制芦丁含量（μｇ）
与吸光度的标准曲线，结果表明，芦丁浓度在１５０～
７５０μｇ／ｍｌ范围内具良好的线性关系。
２结果与分析
２．１乙醇回流提取单因素试验条件
条件：将干山楂果，粉碎过２０目筛，１０５℃干燥
２ｈ，取山楂粉末１ｇ，置于回流提取器中，回流提取三温度高低体现出分子无规则热运动的激烈程度，随
温度提高，黄酮类化合物在乙醇溶液中的溶解度增加，
提取率提高，但当温度过高时，则杂质的溶出也会增
加，影响提取效率。
２．３．２乙醇浓度次，合并提取液，回收乙醇，得山楂黄酮提取液，定
容至１００ｍｌ，测吸光度。
分别改变提取温度、乙醇浓度、料液比和超声波
作用时间进行单因素试验。
２．２超声振荡法单因素试验条件
条件：将干山楂果，粉碎过２０目筛，１０５℃干燥
２ｈ，取山楂粉末１ｇ，置于提取器中，超声波辅助提取
３次，合并提取液，回收乙醇，得山楂黄酮提取液，
定容至１００ｍｌ，测吸光度。
分别改变超声波频率、作用时间、乙醇浓度和料
液比进行单因素试验。
２．３乙醇回流提取单因素试验结果
２．３．１提取温度
温度（℃）５０６０７０８０９０黄酮含量（μｇ）３９５５２９６３４６４１６３７
乙醇浓度（％）４０５０６０７０８０９０黄酮含量（μｇ）２８４５４９．５７１５８０５８２７８３３
随乙醇浓度的增加，黄酮的提取率提高，并呈现
先急后缓的趋势。浓度也并非越大越好，而有一个最
佳值。在浓度为７０％时，提取最佳，超过此值，提
取率增加不明显，且增加成本。
２．３．３料液比
料液比１：２０１：４０１：６０１：８０１：１００黄酮含量（μｇ）３５６５８３３８４５６１５４５
随料液比的增加，提取率增加，但当料液比（质量：
体积）＞１：９时，提取率增加缓慢，增加液料比提取率变
化不大，这时黄酮类化合物的提取已经比较充分了。
２．３．４超声波作用时间
在其它条件相同的前提下，增加超声波作用时间，
黄酮的提取率并不是一直增高，当时间超过２ｈ后，提
取率甚至有下降趋势，这可能是黄酮提取物受氧化所
致。因此确定２．０ｈ为最佳。
２．４超声振荡法单因素试验结果
２．４．１超声波频率超声波作用时间（ｈ）０．５１１．５２２．５３黄酮含量（μｇ）５３０５３１５３６５４４５３１５３０169※工艺技术食品科学2007, Vol. 28, No. 06
一般来讲，料液比愈大提取率愈大。但当料液比
超过４０时，提取率趋于稳定，即一定比例的溶剂已将
有效成分基本全部溶出。
２．５正交试验的设计
在以上单因素试验的基础上，设计了Ｌ９（３４）（表１）的
正交试验。四个因素为：超声波频率、乙醇质量分数、
浸提时间、料液比。响大小依次是：乙醇浓度＞超声波频率＞超声波作用时
间＞料液比。
通过对正交试验数据进行趋势面回归分析，从而获
得各个因素之间的相互影响关系，其回归方程为：
ｙ＝１．７１５ ＋ １．１６１ｘ１－０．３５９ｘ１２－０．７４７ｘ２ ＋ ０．２２５ｘ２２－０．４５９ｘ３＋ ０．０５５ｘ３ ２－０．５０１ｘ４ ＋ ０ｘ４２ ＋ ０ｘ１ｘ２ ＋ ０ｘ１ｘ３ ＋ ０ｘ１ｘ４ ＋ ０ｘ２ｘ３ ＋ ０ｘ２ｘ４＋ ０ｘ３ｘ４，ｒ＝０．９９６
其各个因素交互影响之后对于黄酮提取率的影响效
果如图１～６所示。
２．６验证实验
为进一步证实乙醇回流提取和超声波辅助提取山楂
黄酮的可靠性和合理性，我们对所优选的工艺条件作了
验证实验。重复三次。考虑到生产成本，确定乙醇回
流提取的条件为，乙醇浓度７０％，温度７０℃，作用时
间２ｈ，料液比１：４０；超声波辅助提取的正交试验的验超声波频率（ｋＨｚ）２０３０４０５０黄酮含量（μｇ）５４１５５８５８０５３８
超声波频率增大，作用增强，提取率增加，但并
非一直增加，其最佳值为４０ｋＨｚ。
２．４．２超声波作用时间
超声波作用时间（ｍｉｎ）５１０１５２０２５３０黄酮含量（μｇ）５３０５３３５４４５３６５３３５３０
随超声波作用时间的增加，黄酮的提取率呈正态分
布，时间超过１５ｍｉｎ后，提取率有下降趋势。因为超
声波作用时间延长黄酮提取物也可能被氧化。最佳时间
确定为１５ｍｉｎ。
２．４．３乙醇浓度
乙醇浓度（％）４０５０６０７０８０９０黄酮含量（μｇ）５６２６３８．５７２５８１９８５１８６２
随乙醇浓度的增加，黄酮的提取率也呈正态分布，
在浓度超过７０％时，提取率增加不明显，确定乙纯浓
度为７０％。
２．４．４料液比
料液比１０２０３０４０５０黄酮含量（μｇ）３５６５６９６１３．５６２６６３０
山楂籽中黄酮类化合物最佳提取工艺
山楂籽中黄酮类化合物最佳提取工艺
王立娟;李坚;张丽君;何杰
【期刊名称】《东北林业大学学报》
【年(卷),期】2002(030)005
【摘 要】利用正交实验设计探讨山楂籽中黄酮类化合物的最佳提取工艺.研究结果表明:在70℃条件下回流提取3次(每1g山楂籽用15mL80%的乙醇),每次1.5h,山楂籽中黄酮类化合物提取的效果最好.
【总页数】2页(P56-57)
【作 者】王立娟;李坚;张丽君;何杰
【作者单位】东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040
【正文语种】中 文
【中图分类】O623.59
【相关文献】
1.银杏叶中黄酮类化合物的最佳提取工艺研究 [J], 高晗;孙俊良;孔瑾;张浩;江国胜
2.山楂叶黄酮类化合物最佳提取工艺研究 [J], 何改
3.银杏叶中黄酮类化合物的最佳提取工艺条件 [J], 盛建国;彭小根
4.天然绿色棉纤维中黄酮类化合物的最佳提取工艺探究 [J], 张亭亭;孙冬阳;徐秋燕;邬淑芳;何力;陈益人;
5.天然绿色棉纤维中黄酮类化合物的最佳提取工艺探究 [J], 张亭亭;孙冬阳;徐秋燕;邬淑芳;何力;陈益人 因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买
山楂中黄酮的提取实习报告
实习报告
实习内容：山楂中黄酮的提取
实习时间：XX年XX月XX日
实习地点：实验室
一、实习背景及目的
山楂是一种常见的水果，也是一种重要的中药材。山楂中含有丰富的黄酮类化合物，具有多种药理作用，如抗氧化、抗炎、降压等。本实习旨在学习并掌握山楂中黄酮的提取方法，并对其进行含量测定，以了解山楂中黄酮的含量。
二、实习过程
1. 材料准备
本次实习所需材料有新鲜山楂、70%乙醇、盐酸、氢氧化钠、碳酸钠、丙酮、石英砂等。
2. 提取方法
采用70%乙醇超声波提取法进行山楂中黄酮的提取。具体操作如下：
（1）将新鲜山楂洗净，去核，切片，干燥后粉碎过筛，得到山楂粉末。
（2）将山楂粉末与石英砂按1:10的比例混合，加入70%乙醇，放入超声波清洗器中，设定频率为40kHz，功率为200W，超声波提取30分钟。
（3）提取结束后，滤渣重复提取一次，合并滤液，减压回收乙醇，得到提取液。
3. 含量测定
采用分光光度法测定山楂中黄酮的含量。具体操作如下：
（1）准备一系列不同浓度的黄酮标准溶液，分别测定其在200-400nm波长范围内的吸光度。
（2）以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
（3）将提取液稀释至适当浓度，测定其在200-400nm波长范围内的吸光度，并根据标准曲线计算黄酮含量。 三、实习结果与分析
1. 标准曲线
通过测定不同浓度的黄酮标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，得到线性方程为：y
= kx + b，其中y为吸光度，x为浓度，k为斜率，b为截距。
2. 提取液黄酮含量测定
将提取液稀释至适当浓度，测定其在200-400nm波长范围内的吸光度，根据标准曲线计算黄酮含量。
四、实习总结
通过本次实习，我学习了山楂中黄酮的提取方法，并掌握了分光光度法测定黄酮含量的技巧。实验结果显示，山楂中黄酮含量较高，具有一定的药用价值。本次实习不仅提高了我的实验操作能力，还增强了我对中药化学成分提取与分析的认识。在今后的学习中，我将继续努力，深入了解更多的中药提取技术，为中药现代化研究贡献力量。
山楂总黄酮超声波提取工艺研究
山楂总黄酮超声波提取工艺研究
马艳妮;马子君
【期刊名称】《中外医药研究》
【年(卷),期】2022(1)12
【摘 要】目的:通过正交试验筛选出超声波提取山楂饮片总黄酮的最佳工艺。方法:以乙醇浓度、超声时间、乙醇用量作为山楂总黄酮超声波提取工艺三因素,采用正交试验方法设计,分别以山楂总黄酮含量和干膏重量为主要考察指标,考察山楂总黄酮超声波提取的最佳工艺。结果:影响超声波提取山楂总黄酮最大因素为超声提取时间,其次是乙醇浓度,最后是乙醇用量。结论:最佳工艺确定为A3B3C3,即最优超声提取工艺为乙醇浓度90%、超声时间75min、乙醇用量200mL。
【总页数】3页(P9-11)
【作 者】马艳妮;马子君
【作者单位】江苏省徐州市新沂市中医医院药剂科
【正文语种】中 文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.超声波辅助提取山楂叶中总黄酮工艺研究2.超声波提取山楂叶总黄酮的工艺研究3.酶解法协同超声波法提取山楂中总黄酮的工艺条件优化4.山楂皮渣中总黄酮的超声波辅助提取工艺研究5.果胶酶酶解法辅助超声波法提取山楂中总黄酮的初步工艺优化 因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买
超声辅助提取山楂黄酮的研究
- 1 - 超声辅助提取山楂黄酮的研究
近年来，全球范围内对山楂及其黄酮成分的研究越来越看重，而山楂黄酮的提取是研究山楂及其黄酮成分的基础与关键。超声，被公认为一种有效、环保、低成本的技术工艺，可以有效提取细胞内的有效成分，因此超声辅助提取山楂及其黄酮成分的研究受到了学术界的高度重视。
首先，本文介绍了超声辅助提取山楂黄酮的原理。超声波可以产生瞬时的压力波，产生的空气动力使得植物的细胞壁受到振动，进而使细胞内有效成分释放出来，从而提高了提取山楂黄酮的效率。
其次，本文讨论了超声辅助提取山楂黄酮的参数研究。研究表明，超声处理参数，如超声处理时间、超声处理功率、超声频率，对山楂黄酮的提取效率有较大的影响，因此，在超声处理过程中要根据不同的山楂品种、不同的山楂年份、不同的山楂黄酮成分选择合适的超声处理参数，从而获得高品质的山楂黄酮。
最后，本文讨论了超声辅助提取山楂黄酮的应用前景。超声作为提取山楂黄酮的新技术有着良好的发展前景，超声提取技术可以更快速、更低成本、更环保地提取出山楂黄酮成分，因此超声技术在提取山楂黄酮方面具有很好的应用前景。
综上所述，超声辅助提取山楂黄酮是一种技术先进而有效的提取山楂黄酮的方法，是一项具有较高学术价值的研究，尤其是在提取山楂黄酮的低成本、环保方面应用潜力巨大，也受到了越来越多学者的重视和研究。为更好地提取山楂黄酮，未来还有很多研究工作需要做， - 2 - 比如完善超声处理参数，研究山楂品种、山楂年份等对山楂黄酮提取效率的影响，以及探索更有效更环保、更低成本的技术工艺。通过有效把握超声技术的应用，会为我国提取和开发山楂黄酮技术服务创造诸多有利的条件。
本文以《超声辅助提取山楂黄酮的研究》为题论述了超声辅助提取山楂黄酮的原理、参数以及应用前景。超声可以产生瞬时的压力波，从而使植物的细胞壁受到振动，从而提高了提取山楂黄酮的效率。同时，超声处理参数，如超声处理时间、超声处理功率、超声频率，也 - 3 - 会影响到山楂黄酮的提取效率，因此在超声处理过程中要根据不同的山楂品种、不同的山楂年份、不同的山楂黄酮成分选择合适的超声处理参数。超声作为提取山楂黄酮的新技术具有良好的发展前景，超声技术在提取山楂黄酮方面具有很好的应用前景。未来将会有更多的研究工作来完善超声处理参数，提取更高质量的山楂黄酮，以及更有效更环保、更低成本的技术工艺。因此，超声辅助提取山楂黄酮是一项具有较高学术价值的研究，受到了越来越多学者的重视和研究。
山楂中有效成分的提取工艺研究进展
本栏编辑山楂系蔷薇科植物山里红或山楂的干燥成熟果
实袁为传统的药食同源植物袁具有健胃消食尧降脂尧
维护心脑血管健康等功效遥山楂中富含黄酮类尧多
糖类尧有机酸类和三萜类等主要有效成分遥不同成
分的山楂袁其性质不同袁提取工艺不同袁提取效果
也不同遥
1山楂中黄酮类成分的提取
1.1溶剂提取工艺
郭艳华等探讨水提取山楂中黄酮的工艺条件袁
考察浸提时间尧温度尧料液比尧酸度等条件对提取
山楂中总黄酮含量的影响曰用化学显色反应和紫外
光谱初步确定提取产物的黄酮类型曰研究山楂黄酮
的理化性质遥结果表明袁水提取山楂黄酮的适宜工
艺条件为提取时间2h袁温度50℃袁山楂与蒸馏水
的料液比为1∶30袁酸度pH=8袁黄酮得率为
4.96%遥
张文叶等以山楂浸提液中黄酮提取量为指标袁
选取浸提时间尧乙醇体积分数和料液比渊m/V冤为
主要影响因素袁进行山楂黄酮乙醇热浸提工艺的优
化研究遥在单因素试验基础上袁通过响应面优化得到山楂黄酮的最佳热浸提条件为料液比1∶6袁乙醇
体积分数60%袁浸提时间80min遥此条件下的黄酮
提取率达到98.12%.
1.2闪式提取工艺
杨燕新等通过响应面分析法对山楂果核总黄酮
的闪式提取工艺条件进行优化遥分别选取料液比尧
乙醇浓度尧闪式提取时间完成单因素试验袁然后通
过响应面Design-Expert软件的Box-BehnkenDe-
sign程序进行试验设计袁优化出山楂果核总黄酮的
闪式提取工艺参数袁并进行验证遥结果显示袁料液
比为1∶29渊g/mL冤尧乙醇浓度为49%尧闪式提取时
间为91s时袁山楂果核总黄酮提取率最佳袁可达
0.644%遥
1.3超声提取工艺
高世杰等运用均匀试验及正交试验袁以黄酮类
化合物得率为指标对山楂中黄酮类化合物的超声波
水提取工艺进行优化遥在固定超声功率为40kHz的
条件下袁通过均匀试验设计对超声温度尧超声时间尧
料液比3个因素进行考察袁并在均匀设计结果的基
础上选取因素水平进行正交试验设计袁对提取工艺
进行优化遥所得最佳提取条件为院超声温度60℃袁山楂中有效成分的提取工艺研究进展
山楂片中黄酮类物质的提取与检测
山楂片中黄酮类物质的提取与检测
一、前言：
山楂是我们冬天最喜欢吃的食物之一，黄酮成是山植中主要成分之一。有资料表明:山植黄酮类物质对252例冠心病心绞痛病人总有效率为为 94.4 %。 对降低血脂总有效率达 85 %,对治疗冠心病、心肌炎及心肌病 引起的早博总有效率为 62·5 %。此外,对降低舒张压,
防治心律失常、心血管病和化痰也起重要作用
二、材料、试剂、主要仪器设备
材料：廊坊师院10教后采集的山楂叶
试剂5 % 乙醇AR;无水乙醇;5％NaNO溶液 20％AL（NO3）3 溶液;
４％Na（OH）溶液;
主要仪器设备:紫外光 /可见光自动记录分光光度计 ;高速离心机;
三．提取、纯化
取干山植叶50g ,经破碎成1cm2左右。置于烧杯中,加入蒸馏水加热煮沸3 h。冷却后进行粗滤,滤液用高速离心机分离。4000r/min;20min。弃去滤渣。滤液蒸发器上进行浓缩。加热温度,加热温度 7 0 ℃浓 缩液冷却后加入等体积95％乙醇。放于冰箱内2h。进行分离,高速离心机5000r/min3分钟,弃去粘稠滤渣。滤液于蒸发器蒸馏( 7 0 ℃ );。待乙醇蒸发后,将浓液置于真空干燥箱中干燥成疏松固体、然后粉碎得终产物。再将浸提过的山植叶再以同样方法处理2次。合并3次产物,称重计收率。
四、黄酮类物质的测定 芦丁标准曲线的建立
（1）配置标准溶液 精密称量干燥至芦丁样品10mg，置与50ml容量瓶中，加无水乙醇30ml轻摇使之充分溶解，定容摇匀得0.2mg/ml的芦丁标准溶液
（2）测绘标准曲线，根据中国药典委员会规定的紫外分光光度计法，以芦丁标准品进行测量。精密吸取标准溶液0、1、2、3、4、5和6ml分别置于250ml容量瓶中，加水至6ml，加5％NaNO2溶液1ml后摇匀，静置6min加10％AL（NO３）３溶液１ｍｌ，摇匀静放６ｍｉｎ加入４％的Nａ（ＯＨ）溶液１０ｍl，摇匀后加水至刻度，摇匀放置15分钟，立即在510nm波长处测量吸光度（A）值，以吸光度为横坐标，浓度（C,m/v）为纵坐标测绘曲线，计算曲线的回归方程。可分析出相应结果
山菊降压片中山楂提取工艺研究
２０１０年２月第２卷第２期 Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１０ Ｖｏ１．２ Ｎｏ．２ 中国中医药咨讯 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎａ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ・６７・ 山菊降压片中山楂提取工艺研究 韩宏伟马秀军佟占柱 （成大方圆医药连锁店，辽宁，沈阳，１１０００１）） 【摘要】 目的：对山菊降压片中山楂的提取工艺进行研究优选最佳提取工艺，最终确定提取工艺。方法：通过正交试验筛 选工艺，主要对乙醇浓度、乙醇用量、提取次数及提取时间进行考察，以出膏率和总黄酮的含量为指标进行综合评分，对影响总 黄酮含量提取工艺的因素进行研究。结果：山楂采用５０％乙醇为溶媒，溶剂为ｌ０倍量，提取３次，每次２小时，为最佳工艺。结 论：本工艺科学、合理、可行，适合工业化大生产。 【关键词】 山楂；提取工艺；正交设计；总黄酮；紫外分光光度法 山菊降压片为２００５年版中国药典收载制剂品种，服用剂 量为５片／次，服用剂量大，不利于患者应用，设计对处方中药 材分别进行提取研究，以降低服用剂量。研究表明山楂中的 黄酮类是降血压、降血脂、增加冠脉流量、抗心律失常的有效 成分，是评价山楂质量的重要依据。本文主要对山菊降压片 中山楂的提取工艺进行研究，通过正交实验，筛选优化了提取 工艺条件，为保证制剂质量和疗效的奠定了基础。为设计该 药的科学合理的提取工艺，采用正交设计试验，探索科学合理 的提取工艺，从中最后确定出一条优良的提取工艺流程路线， 然后对此工艺流程进行扩大试验，不断完善，从而开发出一种 适用于药厂生产的新药。 １ 仪器与试剂、原料药材 １．１ 实验仪器数显恒温水浴锅，电子分析天平，减压真空 干燥箱，ＫＱ２１８型超声清洗器，ＲＥ一５２ＡＡ旋转蒸发器，循环 水多用真空泵，ＦＡ１００４ Ｍａｘｌ００ｇ型电子天平，ＺＦ一２型三用 紫外分光光度仪 １．２ 实验试剂９５％乙醇，氢氧化钠，亚硝酸钠，氯化铝 １．３ 实验原料药生山楂片（蔷薇科植物山里红＜Ｃｒａｔａｅ． ｇｕｓ ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄａ Ｂｇｅ．ｔａｒ．ｍａｊｏｒ Ｎ．Ｅ．Ｂｒ＞的干燥成熟果实）；对 照品芦丁（００８０－－９７０５，北京中国药品生物制品检定所）； ２方法与结果： ２．１ 正交设计实验根据预试实验，山楂用乙醇提取可将 其中主要成分提出。考虑到乙醇提取工艺与乙醇的浓度、加 醇量、提取的时间及提取的次数等因素有关，因此，采用四因 素、三水平 （３ ）进行正交实验设计。精密称取山楂药材， 共计九份，每份５０ｇ，按因素水平表的不同条件进行回流提 取，将每份的提取液分别合，回收乙醇，将浓缩液置于已恒重 的蒸发皿中，分别测定出膏率，以出膏率为评价指标进行考察 山楂的最佳提取工艺。 ２．１．１ 总黄酮含量测定山楂中含有多种黄酮类化合物． 其黄酮母核所含的游离羟基，在适当的介质条件下能与金属 铝离子形成络合物而显色。显色后的对照品溶液和供试品溶 液的吸收光谱。表明二者均在５０２ｎｍ处有最大吸收，因此测 定波长选择５００ｎｍ。 ２．１．２ 标准溶液的制备精密称取在１２０￣Ｃ下干燥至恒重 的芦丁标准品１０ｍｇ，置５０ｍＬ容量瓶中，加无水乙醇２０ｍＬ，轻 摇使充分溶解，定容，摇匀，得０．２ｇ／ｍＬ芦丁标准溶液。 ２．１．３ 标准曲线的绘制精密吸取标准溶液１ｍＬ、２ｍＬ、 ３ｍＬ、４ｍＬ、５ｍＬ、６ｍＬ和ＯｍＬ分别置２５ｍＬ容量瓶中，各加水 至６ｍＬ；加人５％亚硝酸钠溶液１ｍＬ后摇匀，静置６ｍｉｎ；加 １０％硝酸铝溶液ｌｍＬ，摇匀，静置６ｍｉｎ后；加人４％氢氧化钠 溶液１０ｍＬ；摇匀后再加水定容，放置１５ｍｉｎ；立即用分光光度 法在５００ｎｍ波长处测定吸光度（Ａ）值。以吸光度为纵坐标， 浓度（Ｃ，ｍ／ｖ）为横坐标绘制曲线，计算标准曲线的回归方程 为：ｃ＝０．０８３（Ａ一０．０２２）；ｒ＝０．９９９２ ２．１．４ 样品溶测定精密称取山楂浸膏粉末３ｇ（Ｗ）加入 ６０％乙醇２０ｍＬ，混匀，超声４５ｍｉｎ，减压抽滤，转移置１００ｍｌ容 量瓶中，加入６０％乙醇，定容，摇匀，得样品溶液。吸取样品 溶液１ｍＬ至２５ｍＬ容量瓶中，按标准曲线方法配制，立即用分 光广度法在５００ｎｍ波长处测定吸光度（Ａ）值，根据标准曲线 的回归方程，读出总黄酮浓度值，计算出总黄酮含量。 ２．２ 结果分析以出膏率和总黄酮含量为指标进行综合评 分，将表３正交试验出膏率结果表和表４总黄酮含量表进行 加权分析，所得结果见表５正交设计实验直观分析表。正交 设计试验结果的方差分析表得出，各因素对实验结果的影响 均不显著。可从表５正交设计试验直观分析表看出，影响本 实验的主要因素依次是提取次数、提取时间、乙醇浓度、加醇 量，即Ｄ）ｃ）Ａ＞Ｂ，优选提取工艺条件为Ａ３Ｂ１Ｃ１Ｄ１。即以 ５０％乙醇为溶媒，加醇量为ｌ２倍量，提取３次，每次提取时问 为２小时。考虑到加醇量因素影响不显著和大生产中经济， 有效等方面的因素，为降低工业化生产的成本，确定加醇量为 ｌ０倍量。故确定山楂最佳提取工艺为Ａ３Ｂ２Ｃ１Ｄ１，即以５０％ 乙醇为溶媒，提取３次，加醇量为ｌ０倍量，第一次加１Ｏ倍量， 第二次加８倍量，第三次加８倍量，每次提取２小时。 参考文献 ［１］张培成，徐绥绪，郭虹．山楂果化学成分的研究［Ｊ］．沈阳化工学 院学报，１９９９，１３（２）：８７—８９． ［２］董英杰，张乃先，张明磊，等．大果山楂叶黄酮成分研究［Ｊ］．沈 阳药科大学学报，１９９６，１３ｆ１）：３１—３３． ［３］． 张春桃，熊阳．正交设计优选山楂的醇提工艺［Ｊ］．湖南中医学 院学报，２００２，１． ［４］ 张静，程岚，康廷国．优选山楂中黄酮类成分提取工艺［Ｊ］．辽 宁中医学院学报，２００４，３ ［５］刘春宇，唐丽华，顾振纶．不同提取方法对山楂总黄酮含量的影 响［Ｊ］．苏州医学院学报，１９９８．１２．２５：１８（１２）：１２６６． ［６］孙立立，于文强．比色法测定山楂中总黄酮的含量［Ｊ］．中成药， ２００１，１０ ［７］李晓妮，贺晋辉．山楂中总黄酮的几种提取分离方法及含量测 定［Ｊ］．山西医学院学报，１９９６，１．
山楂中黄酮类化合物提取工艺条件优化
亿 与生物Ｚ程２０１２，ＶｏＩ．２９ Ｎｏ．６ Ｃｈｅｍｌｓ的，＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒ哟 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２—５４２５．２０１２．０６．０２５ 山楂中黄酮类化合物提取工艺条件优化 韩秋菊 （辽宁石油化工大学环境与生物工程学院，辽宁抚顺１１３００１） 摘要：对乙醇浸提法提取山楂黄酮的工艺条件进行了优化。通过单因素实验和正交实验确定最佳提取工艺条件 为：料液比１ ｔ ６０（ｇ ｔ ｍＬ）、乙醇体积分数７Ｏ％、提取时闭７ ｈ、提取温度５ｏ℃，在此条件下提取率达到２．８Ｏ ，提取效果 稳定． 关键词：山楂；黄酮；提取工艺Ｉ优化 中图分类号：ＴＱ ０２８ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７２—５４２５（２０１２）０６－－００８５－－０３ 山楂为蔷薇科植物山楂的成熟果实，为药食两用 中药，性微温，味酸甘，具有消积食、健脾胃、行气散淤 等功效。山楂中含有３Ｏ多种生物活性物质，其中黄酮 类化合物是主要的活性成分 卜引，提取山楂中黄酮类 化合物是提高山楂利用率的新途径。乙醇浸提法工艺 简单、易于推广，广泛应用于黄酮类化合物的提取。作 者在此对乙醇浸提法提取山楂黄酮的工艺条件进行优 化，拟为更充分地开发利用山楂资源提供理论基础。 ｌ 实验 １．１材料、试剂与仪器 山楂，产自辽宁营口。 芦丁标准品，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，无水乙 醇． ＵＶ７５７ＣＲＴ型紫外可见分光光度计，上海精密科 学仪器有限公司；２０５—２Ａ型低速离心机，北京医用离 心机厂；电子精密天平，北京赛多利斯仪器系统有限公 司；ＦＷ８００型高速万能粉碎机，天津泰斯特仪器有限 公司。 １．２方法 １．２．１标准曲线的绘制 准确称取芦丁标准品０．２ ｇ，用少量乙醇溶解后， 用５Ｏ （体积分数，下同）乙醇定容到１００ ｍＬ，得到浓 度为２ ｍｇ・ｍＬ 的芦丁标准溶液。取１０ ｍＬ该标准 溶液，用５Ｏ 乙醇定容到１００ ｍＬ，得到浓度为０．２ ｍｇ ・ｍＬ 的芦丁标准溶液。分别量取０．２ ｍｇ・ｍＬ－１ 的芦丁标准溶液０．５ ｍＬ、１．０ ｍＬ、３．０ ｍＬ、５．０ ｍＬ、 ７．０ ｍＬ、９．０ ｍＬ、１３．０ ｍＬ、１７．０ ｍＬ、２３．０ ｍＬ置于 ｉ００ ｍＬ容量瓶中，加５ （质量分数）亚硝酸钠溶液 １．０ ｍＬ放置６ ｍｉｎ，再加１０ （质量分数）硝酸铝溶液 １．０ ｍＬ放置６ ｍｉｎ，最后加４％（质量分数）氢氧化钠 溶液１０．０ ｍＬ，用５Ｏ 乙醇定容，放置１０ ｍｉｎ。以 ５Ｏ 乙醇为空白对照，采用紫外可见分光光度计在 ５０８ ｎｍ处测定吸光度，绘制标准曲线，如图１所示。
柿子多酚与山楂黄酮抗氧化性的相关性研究
陕西农业科学
・试验研究・
柿子多酚与山楂黄酮抗氧化性的相关性研究
王智斌，肖春玲，刘源源，饶泽剑，邢怡璇，龚 静
（山西师范大学工程学院，山西临汾０４１００４）
摘 要：以柿子和山楂为原料，采用索氏抽提乙醇回流法提取多酚和黄酮，分别测定柿子中多酚、山楂中黄酮 及多酚黄酮两者复合的ＤＰＰＨ・清除率，从而确定了他们的ＩＣ 。比值，并进一步研究了柿子多酚与山楂黄酮 抗氧化性的相关关系。结果表明：柿子多酚、山楂黄酮的Ｉｃ５ｏ值分别为１２．０４ ｍｇ・Ｌ＿。、２５．３１ ｍｇ・Ｌ～；柿子
多酚及山楂黄酮对ＤＰＰＨ・自由基有明显的清除作用，且浓度越大，ＤＰＰＨ・清除率越大；Ｉｓｏｂｏｌｏｇｒａｍ分析 图显示柿子多酚与山楂黄酮抗氧化性为协同作用，复配组合清除ＤＰＰＨ・强弱顺序１：１＞１：２＞２：１。 关键词：柿子多酚；山楂黄酮；抗氧化性；相关性
柿子（Ｄｉｏｓｐｙｒｏｓ ｋａｋｉ）属柿科柿属，其味甘、
涩，性寒，具清热去燥、润肺化痰、止渴生津、健脾、
治痢、止血功能，可以缓解大便干结、痔疮疼痛、干
咳、喉痛、高血压等症，柿蒂、柿霜、柿叶还可入
药［１］。山楂（Ｃｒａｔａｅｇｕｓ ｐｉｎｎａｔａｆｉｄａ）属蔷薇科
山楂属，其果实内含有三萜类和黄酮类成分，具有
扩张血管、增加冠状动脉血流量、降低血清胆固醇
以及杀菌、防癌等作用＿２］。目前李西柳、庞明、王
俊儒［３ 对柿子渣中多酚提取工艺及其抗氧化进行
了研究；王燕 对柿子皮多酚物质的提取和除臭
活性进行了研究；刘北林、董继生、霍红ｒ５ 对山楂
黄酮最佳提取工艺进行了研究，张妍、李厚伟、张
永春＿６ 对山楂中总黄酮提取分离方法的考察及含
量测定进行了研究；张大鹏ｌ７］对山楂黄酮提取方
法及主要山楂属植物黄酮含量进行了研究，周玮
婧、隋勇、孙智达ｒ８］对荔枝皮原花青素与Ｖｃ、ＶＥ
的协同抗氧化进行了研究，何伟平、藤建文、朱晓
韵＿ｇ］对刺梨Ｖｃ和体系协同抗氧化性进行了研
大果山楂黄酮提取的方法研究
大果山楂黄酮提取的方法研究
作者：陈兵兵等
来源：《现代养生·下半月版》 2017年第3期
【摘 要】据调查，在成熟的大果山楂果实里面，含有十分丰富的黄酮类物质。其有着天然无毒与多种生物活性等优点。在大果山楂黄酮的提取方面，不同的方法对结果有着较大影响。通过乙醇回流法与超声法对大果山楂黄酮提取结果的对比分析，得到最有效的提取工艺及各类参数。结果显示，超声法是提取大果山楂中黄酮的最佳方法，其具有操作简单与纯度高的优势。
【关键词】大果山楂；黄酮；提取
1 引言
大果山楂在植物当中，被划归为蔷薇科的一类。适应我国南北种植。山楂是我国原有和特有的栽培果树，其果实营养丰富，食用与药用价值都很高，已被国家卫生部确定为药食两用食品。在2015 年版的《中国药典》中，再一次将大果山楂收录。它有着消食健胃与活血化瘀的良好疗效，临床常用于消化不良与产后腹痛等症状的缓解。其主要功能除了消食健胃与活血化瘀，还包括腹痛腹胀、肠胃不顺、经闭、心腹疼痛以及高血脂症等症状的治疗[1]。近些年来，大果山楂在临床上，也广泛被用于治疗高血压、冠心病以及高脂血症等一系列的心血管疾病，并取得了良好的疗效。其药理研究中也显示，大果山楂中的关键成分即黄酮。
相关的统计显示，2016 年全国大果山楂种植面积突破600 万亩，总产量突破60万吨。但是大果山楂的食用与药用量仅占到总产量的一成。怎样改善大果山楂的利用率，是大果山楂加工业与医药领域发展面临的重点问题。提取大果山楂中的黄酮，同时对剩余物进行有效利用，是解决该问题的科学手段[2]。
本文通过乙醇回流提取法与超声法这两类不同的方法，研究了这两种不同方法对大果山楂黄酮提取效率的结果。借助于比色法测定提取的黄酮含量，最后得出大果山楂黄酮提取的最佳方法与工艺条件[3]。
2 原料与方法
2.1 材料与试剂
大果山楂：选择成熟度良好均匀，外观圆润，没有病虫害的广西贺州地区的大果山植实施黄酮提取实验分析。