补体C4 含量测定
补体C4测定标准操作程序SOP文件
9注意事项
9.1夏季运输本试剂盒时应注意冷藏。
9.2血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。
9.3仅应用于体外诊断。
10抗干扰能力：
10.1标准：回收率在90％－110％之间。
S1：0.9％的NaCl
S2-6：蛋白类定标液
批特异性的靶值乘以下列的因数用于计算定标结果：
S2:0.204S3:0.407 S4: 1.000 S5:1.750 S6:2.500
贮存条件：校准物在2-8℃保存可保存至有效期。
准备:直接使用。
定标频率：A试剂使用84天后
B试剂批号更换
C由质控结果决定
10.2黄疸：黄胆指数达到60时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl）
10.3溶血：溶血指数达到1000时不会有明显干扰。（血红素浓度约为1000mg/dl）
10.4脂血：乳糜指数达到1000时不会有明显干扰。（甘油三酯浓度约为2000mg/dl）
10.5类风湿因子的浓度小于1200IU/ml时无干扰。
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-49
补体C4测定
版序：ABCD
页码：第1页，共3页
1测定方法
免疫比浊法。
2测定原理
抗原与其相应抗体在液相中相遇，立即形成抗原-抗体复合物，并形成一定浊度，该浊度的高低在一定抗体存在时与抗原的含量成正比，同时，由于反应液中有稳定剂，可使非抗原-抗体复合物（如脂质、大分子蛋白多聚物等）消散，因此比一般浊度液更能反映抗原实际含量。
10.6 C4的浓度低于500mg/dl时不会有HOOK效应。
补体C4测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求迪迈
补体C4测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中补体C4浓度。
1.1 包装规格试剂1：1×30ml；试剂2：1×10ml试剂1：2×30ml；试剂2：1×20ml试剂1：1×60ml；试剂2：1×20ml试剂1：3×80ml；试剂2：4×20ml试剂1：4×60ml；试剂2：4×20ml试剂1：2×60ml；试剂2：2×20ml试剂1：2×30ml；试剂2：2×10ml试剂1：6×60ml；试剂2：2×60ml2.1 外观试剂1、试剂2应澄清、无异物。
2.2 净含量试剂的净含量不少于标称装量。
2.3 试剂空白吸光度用生理盐水作为样本加入试剂测试时，试剂空白吸光度应<0.40A。
2.4 分析灵敏度C4含量为0.6g/L时，测定吸光度差值的绝对值应>0.005△A。
2.5 线性区间试剂（盒）线性在[0.05，1.2]g/L区间内：2.5.1 线性相关系数（r）应不小于0.990；2.5.2 [0.05,0.3]g/L区间内，线性绝对偏差不超过±0.1g/L；(0.3,1.2]g/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 重复性用相同批号试剂盒测试两个水平的样本，所得结果的变异系数（CV）应<10%。
2.6.2 批间差用3个不同批号试剂盒测试两个水平的样本，试剂（盒）批间相对极差应<10%。
2.7 准确度与已上市的同类产品比对，用40个在[0.05,1.2]g/L区间内不同浓度的人源样本，用线性回归方法计算两组结果的相关系数（r）不小于0.990；[0.05,0.3]g/L区间内，线性绝对偏差不超过±0.1g/L；(0.3,1.2]g/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
补体C4测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求艾威德(北京)医疗
补体C4测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：用于体外定量测定人血清中补体C4的含量。
1.1 包装规格a) 试剂1：1×15mL 试剂2：1×5mLb) 试剂1：2×45mL 试剂2：2×15mLc) 试剂1：4×60mL 试剂2：4×20mLd) 试剂1：2×60mL 试剂2：2×20mL1.2 主要组成成分1.2.1试剂1主要组分1.2.2试剂2主要组分2.1 外观试剂1：无色澄清透明液体；试剂2：无色稍有浑浊液体。
2.2 试剂装量应不低于试剂瓶标示装量。
2.3 试剂空白吸光度在340nm处测定试剂空白吸光度，应≤0.5。
2.4 分析灵敏度测定C4含量为0.4g/L样本时，其△A应≥0.04。
2.5 线性范围2.5.1在（0.05，1.2）g/L范围内，线性回归的确定系数应不低于0.990；2.5.2测试浓度在（0.05，0.3] g/L范围内，线性绝对偏差应不超过±0.045 g/L；测试浓度在（0.3，1.2）g/L范围内，线性相对偏差应不超过±15%。
2.6 测量精密度2.6.1重复性：用三个水平质控血清重复测试其变异系数（CV）应不超过10％。
2.6.2批间差：抽取3个不同批号试剂，对同一份样本进行重复测定，相对极差≤10％。
2.7 准确度在样本中加入一定量的纯品，计算回收率，应在85%～115% 范围内。
2.8 稳定性取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月的试剂进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
补体C4 含量测定
补体C4 含量测定C 4 是补体传统途径（CP）活化中的一个早期成分，由α、β、γ3条肽链经二硫键连接而成，分子量200kD，为β1 球蛋白，合成于肝细胞和巨噬细胞中，经两次细胞内蛋白酶解形成分泌型C4（C4s），分泌于细胞外，再次酶解后成为血浆型C4（C 4p），二者溶血活性相等。
在Mg 离子存在下，C1使C4的a链裂解成C4a 和C4b，C4a 为一弱过敏毒素，C4b 大部分游离于液相中，无活性，与免疫复合物（IC）或靶细胞膜结合的C4b则与C 2a形成了C4b2a（C3 转换酶）在C 4b2a作用下，C 3开始裂解，在激活补体，促进吞噬，防止IC 沉淀和中和病毒方面，C 4 起着一定作用。
常用方法有速率散射浊度法、单向免疫扩散法（SID）、ELISA 法检测患者血清或其他体液中C4含量。
参考值：血清：0．1～0．4g／L （速率散射浊度法）；0．553 ±0．109g／L （SID）临床意义传染病、组织损伤和急性炎症的早期，血清C4 含量可因合成增加而升高，可能是一种急性时相反应（参见补体C3含量测定），特别是多发性骨髓瘤C4 水平可高出正常人8 倍之多。
其降低原因亦同于C3，应当注意的是在补体成分的遗传性缺损中，以C1r、C1s、C4及C2的缺损为多见，已发现由于C4的两个基因座位：C4A、C4B表现出高度的多态性，而出现了30 余种同种异型，这对于医学研究某些相关疾病的发生和发展有重要意义。
临床上，C4的遗传缺损可引起全身性SLE、肾小球肾炎、反复感染以及自身免疫性慢活肝。
在病程活动期时，C4水平更呈显著降低，尤其是SL E ，降低早于其他补体成分，回升晚于其他成分。
对狼疮性肾炎和非狼疮性肾炎，前C 4 降低，后者多数正常。
此外还见于胰岛素依赖性糖尿病、多发性硬化、类风湿性关节炎、良性复发性血尿、IgA 肾病、Henoch－Schonlein紫癜、亚急性硬化性全脑炎、IgA 遗传性缺乏症、麻风病等多种疾病。
补体的测定及应用
正式试验
分类:小量法、微量法，以小量法常用 实验过程:
稀释和处理后的标本与已知抗原或抗体、补体温育
与指示系统共育
结果判度: 对照管: 阴性对照管:溶血 阳性对照管:不溶血 抗体或抗原对照管:完全溶血 待检血清对照管:完全溶血 绵羊红细胞对照管:不出现自发性溶血
2个单位:全溶 ➢ 补体对照管： 1个单位:全溶或略带少许红细
4、补体的性质不稳定，试验前均应进行滴定
待测标本 1、采血并及时分离血清用于检测或－20℃保存备用。 2、试验前，应先将血清56℃加热30min（或60℃3min）以灭活补体。
血清标本遇有抗补体现象时，可作下列处理： 加热灭活时提高12℃ －20℃冻融后离心去沉淀 以3mmol/L盐酸处理 加入少量补体后再行灭活 以白陶土处理 通入CO2 以小白鼠肝粉处理 用含10％新鲜鸡蛋清的生理盐水稀释血清
补体的活化途径
1、经典途径 以抗原抗体复合物结合C1q启动激活的途径，又称第一途径或传统 途径，是抗体介导的体液免疫应答的主要效应方式
2、MBL途径 MBL结合至细菌启动的途径，激活剂是机体的炎症反应急性期时 产生的MBL和C反应蛋白等
3、旁路途径 通过微生物表面等膜性物质，从C3开始，不依赖特异性抗体的形 成，在感染早期可为机体提供有效的防御。
方法学评价和临床意义
方法简便、快速，但敏感性低，补体的活性除与反应体积成反比 外，还与反应所用的缓冲液、SRBC的数量以及反应温度有关
总补体活性的参考范围为50～100U/ml
CH50增高见于： 急性炎症、组织损伤、恶性肿瘤等
CH50降低见于： 系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和强直性脊柱炎 、急性肾小球 肾炎等
➢现 状
影响的因素多、各种制剂需要烦琐的稀释和滴定等， 现代化、自动化抗原抗体检测方法的不断涌现，补体结合试验逐 渐被遗弃 补体结合试验作为一种经典的免疫方法类型，其设计和原理仍对 新型免疫方法的建立有着启迪和指导作用
血清补体C3、C4测定在病毒性肝炎患者中的临床意义
化的发生发展 ， 补体 ｃ 、 水平 随着呈下 ｃ 降趋 势， ＨＡ则 呈上 升趋 势 ， 炎肝 硬 化 肝 患者最明显 ， 故补体 ｃ 、 对病毒性肝炎 ｃ 患者的病情评估 及预后 判 断有一定 参考 价值 ， 对肝 纤维化有辅助诊 断。
关键词
慢性肝 炎
】 ２ Ｏ． ５】
径， 补体 ｃ 下降 ， 此时经典途径可能 尚未 激活 ， 补体 ｃ 尚未参 与 ， Ｃ 故 无 明显下 降。导致本组检测结果的原 因可能是 ： ① 随着肝脏炎症进一步加重 ， 抗原 一抗体 复 合物产生 ， 疫 复合物 的形成 ， 典 途径 免 经 同时激活 ， 补体 ｃ 参与 ， 下降 ， Ｃ 补体 Ｃ 进 一 步 下 降 ； 在 慢 性 肝 炎 和 肝 硬 化 患 且 者， 由于门体侧枝循 环建 立 ， 内毒 素大量
资料 与方 法
讨 论
血清补体 Ｃ 、 水平及与 血清透 明质酸 ｃ 酶（ Ａ） Ｈ 的相关分析 ， 行相 关统计 学处 进 理。结果 ： 患者补体 Ｃ 水平随着急性 ｃ
肝 炎 、 性 肝 炎 及 肝 炎 肝 硬 化 呈 下 降 趋 慢
补体是 由存在 于人和 脊椎 动物 正常
血清及组织液 中的一组 具有 酶活性 的糖 蛋 白， 是机体 重要 的免疫效 应系 统之 一。 在 病 理情 况下 补体 被 异 常 激 活 并 消 耗 ， 导 致 血 清 中 补体 水 平 发 生 改 变 ， 此 通 过 检 因 测补体 ｃ 、 水平能反 映肝脏疾病进 程 、 ｃ
关性更好。结论 ： 随着 肝 脏 炎症 及 肝 纤 维
性肝 炎患 者 １９例 ， １７例 ， ５ ６ 男 １ 女 ２例 ； 年龄 １ ９—８ ６岁 ， 平均 ５ ． ９±１ ．８岁。 Ｏ０ ５２ 急性肝炎 ３ ９例 ， 慢性 肝炎 ７ ４例 ， 炎肝 肝 硬化 ５ ６例。病毒性肝炎 的诊断及分 型按 ２０ ０ ０年 ９月 中华 医学会 修订 的《 毒性 病 肝炎防治方 案》 执行 … ， 并排 除引起补体 Ｃ、４ ３Ｃ 下降 的疾病 。 方法 ： ①标本采 集 ： 被检 者于入 院后 早晨 空腹采集静脉血 ３０ ｌ ２份 ， ．ｍ 各 放人 ３ ７恒温箱 约 １ 钟 ， 时分 离 血清 ， Ｏ分 及 置 ３￣ ０ Ｃ冰箱 冰冻保 存统一 测定 。② 补体
血清补体C4含量测定
血清补体C4含量测定血清补体C4含量测定介绍：C4是血中11种补体成分之一。
测定C4含量有助于系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的诊断和治疗。
血清补体C4含量测定正常值：0.12～0.36克／升（12～36毫克／分升）。
(注：具体参考值请根据各实验室而定。
)血清补体C4含量测定临床意义：增高：见于风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗死、肝癌及各种类型的多关节炎等。
降低：见于系统性红斑狼疮、慢性活动性肝炎、多发性硬化性全脑炎、IgA肾病、胰腺癌晚期。
血清补体C4含量测定注意事项：一、抽血前的注意事项1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。
血液中的酒精成分会直接影响检验结果。
2、体检前一天的晚八时以后，应禁食，以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。
3、抽血时应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。
有晕血史者请提前说明，另作特别安排。
二、抽血后应注意1、抽血后,需在针孔处进行局部按压3-5分钟，进行止血。
注意：不要揉，以免造成皮下血肿。
2、按压时间应充分。
各人的凝血时间有差异，有的人需要稍长的时间方可凝血。
所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫，可能会因未完全止血，而使血液渗至皮下造成青淤。
因此按压时间长些，才能完全止血。
如有出血倾向，更应延长按压时间。
3、抽血后出现晕血症状如：头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水，待症状缓解后再进行体检。
4、若局部出现淤血，24小时后用温热毛巾湿敷，可促进吸收。
三、静脉血2ml，不抗凝，分离血清尽快进行测定。
血清补体C4含量测定检查过程：暂无相关信息。
血清补体C3＼C4测定在病毒性肝炎患者中的临床意义
血清补体C3＼C4测定在病毒性肝炎患者中的临床意义摘要目的：通过血清补体C3、C4水平测定，探讨其在病毒性肝炎患者中的临床意义。
方法：169例病毒性肝炎患者按急性肝炎、慢性肝炎、肝炎肝硬化分组，检测血清补体C3、C4水平及与血清透明质酸酶(HA)的相关分析，进行相关统计学处理。
结果：患者补体C3、C4水平随着急性肝炎、慢性肝炎及肝炎肝硬化呈下降趋势；补体C3在各组间均有显著的统计学意义(P＜0.05)，补体C4在急性肝炎与慢性肝炎组无统计学意义(P＞0.05)，其余各组间均有统计学意义(P ＜0.05)；补体C3、C4与HA均呈负相关，C3与HA相关性更好。
结论：随着肝脏炎症及肝纤维化的发生发展，补体C3、C4水平随着呈下降趋势，HA则呈上升趋势，肝炎肝硬化患者最明显，故补体C3、C4对病毒性肝炎患者的病情评估及预后判断有一定参考价值，对肝纤维化有辅助诊断。
关键词补体C3、C4 HA 急性肝炎慢性肝炎肝炎肝硬化本文现通过对169例肝病患者血清补体C3、C4水平测定，探讨其与疾病进程、肝纤维化之间的关系，了解其在肝病患者中的临床意义，现报告如下。
资料与方法2008年1月～2009年6月收治病毒性肝炎患者169例，男117例，女52例；年龄19～86岁，平均50.09±15.28岁。
急性肝炎39例，慢性肝炎74例，肝炎肝硬化56例。
病毒性肝炎的诊断及分型按2000年9月中华医学会修订的《病毒性肝炎防治方案》执行［1］，并排除引起补体C3、C4下降的疾病。
方法：①标本采集：被检者于入院后早晨空腹采集静脉血3.0ml各2份，放入37恒温箱约10分钟，及时分离血清，置-30℃冰箱冰冻保存统一测定。
②补体C3、C4检测：采用免疫散射比浊法，用贝克曼仪器。
按说明书方法进行操作。
③HA检测：采用化学发光法，用源德仪器。
严格按说明书方法进行操作。
统计学处理：用EXCEL建立数据库，所有数据均以(X±S)表示，用SPSS16.0软件进行单因素方差分析，方差齐组用LSD检验，方差不齐组用Tamhane检验。
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补体C4 含量测定
C 4 是补体传统途径（CP）活化中的一个早期成分，由α、β、γ3条肽链经二硫键连接而成，分子量200kD，为β1 球蛋白，合成于肝细胞和巨噬细胞中，经两次细胞内蛋白酶解形成分泌型C4（C4s），分泌于细胞外，再次酶解后成为血浆型C4（C 4p），二者溶血活性相等。
在Mg 离子存在下，C1使C4的a链裂解成C4a 和C4b，C4a 为一弱过敏毒素，C4b 大部分游离于液相中，无活性，与免疫复合物（IC）或靶细胞膜结合的C4b则与C 2a形成了C4b2a（C3 转换酶）在C 4b2a作用下，C 3开始裂解，在激活补体，促进吞噬，防止IC 沉淀和中和病毒方面，C 4 起着一定作用。
常用方法有速率散射浊度法、单向免疫扩散法（SID）、ELISA 法检测患者血清或其他体液中C4含量。
参考值：
血清：0．1～0．4g／L （速率散射浊度法）；0．553 ±0．109g／L （SID）
临床意义
传染病、组织损伤和急性炎症的早期，血清C4 含量可因合成增加而升高，可能是一种急性时相反应（参见补体C3含量测定），特别是多发性骨髓瘤C4 水平可高出正常人8 倍之多。
其降低原因亦同于C3，应当注意的是在补体成分的遗传性缺损中，以C1r、C1s、C4及C2的缺损为多见，已发现由于C4的两个基因座位：C4A、C4B表现出高度的多态性，而出现了30 余种同种异型，这对于医学研究某些相关疾病的发生和发展有重要意义。
临床上，C4的遗传缺损可引起全身性SLE、肾小球肾炎、反复感染以及自身免疫性慢活肝。
在病程活动期时，C4水平更呈显著降低，尤其是SL E ，降低早于其他补体成分，回升晚于其他成分。
对狼疮性肾炎和非狼疮性肾炎，前C 4 降低，后者多数正常。
此外还见于胰岛素依赖性糖尿病、多发性硬化、类风湿性关节炎、
良性复发性血尿、IgA 肾病、Henoch－Schonlein紫癜、亚急性硬化性全脑炎、IgA 遗传性缺乏症、麻风病等多种疾病。