DP421-TRNzolA+总RNA提取试剂盒-120227
植物总rna提取试剂
植物总rna提取试剂植物总RNA提取试剂是一种用于从植物组织中提取总RNA的试剂盒。
总RNA是植物细胞中的一个重要组成部分，可以用于基因表达研究、转录组学和其他分子生物学研究。
本文将介绍植物总RNA提取试剂的原理、操作流程、优缺点以及注意事项。
一、植物总RNA提取试剂的原理植物总RNA提取试剂通过破碎细胞壁和细胞膜，溶解蛋白质，并在碱性条件下使DNA和RNA不同程度地溶解从而实现总RNA的提取。
它通常包括下述主要步骤：1.细胞破碎：将植物样品研磨或经过冻融循环处理，释放细胞。
2.蛋白质沉淀：添加试剂进行蛋白质沉淀，将细胞残渣上清液中的蛋白质沉淀下来。
3. RNA沉淀：通过加入酒精等试剂使RNA从上清液中沉淀下来。
4.清洗：用特定的试剂将沉淀洗涤，去除污染物。
5.溶解：加入溶剂溶解沉淀，得到纯度较高的总RNA。
二、植物总RNA提取试剂的操作流程1.准备样品：收集新鲜的植物组织，将其迅速冷冻在液氮中，然后使用试剂研磨或液氮研磨法将其破碎。
2.加入试剂：向研磨好的样品中加入试剂，根据试剂盒的要求进行操作。
3.离心：离心样品，以将细胞碎片和蛋白质沉淀分离。
4.沉淀RNA：将上清液转移至新的离心管中，加入酒精等试剂，使RNA沉淀下来。
5.清洗：用特定的试剂洗涤RNA沉淀，去除杂质。
6.溶解：使用特定的溶剂将RNA沉淀溶解，使其完全溶解。
7.检测：采用比色法、荧光法或电泳等方法对提取得到的RNA进行定量和质量检测。
三、植物总RNA提取试剂的优缺点1.优点：-操作简单，不需要复杂的仪器和设备。
-高效提取总RNA，得到纯度较高的RNA。
-可以快速提取大量的样品。
-可以适用于多个植物种类和组织类型。
2.缺点：-可能存在某些试剂无法完全溶解质体等问题。
-部分试剂存在对环境的污染隐患。
四、植物总RNA提取试剂的注意事项1.使用新鲜的植物组织进行提取，以确保RNA的质量和完整性。
2.严格按照试剂盒的说明进行操作，不要改变试剂的使用顺序或添加量。
磁珠法动物组织总rna提取试剂
磁珠法动物组织总rna提取试剂磁珠法动物组织总RNA提取试剂是一种常用于从动物组织中提取总RNA的试剂。
总RNA是指包括mRNA、tRNA、rRNA等各种类型的RNA，它们在细胞中起到重要的生物学功能。
动物组织总RNA的提取对于研究基因表达、生物学功能以及疾病研究等领域具有重要意义。
下面将详细介绍磁珠法动物组织总RNA提取试剂的原理、操作流程以及优缺点。
一、原理：磁珠法动物组织总RNA提取试剂的原理是利用磁珠在磁场中的作用来实现RNA的分离和纯化。
磁性珠子（磁珠）是一种微米级别的颗粒，表面含有特异性结合分子（如寡聚核苷酸、抗体等），可以与RNA特异性结合。
通过结合物的磁场作用，可以将RNA与其他杂质分离开，并进行纯化。
二、操作流程：磁珠法动物组织总RNA提取试剂的操作流程通常可以分为样品处理、细胞破碎、RNA结合、磁珠分离、洗涤和洗脱等步骤。
（一）样品处理：首先要将收集到的动物组织样品进行样品处理，如清洗、离心等，以去除表面的杂质并提取细胞。
（二）细胞破碎：将经过样品处理的细胞进行破碎，以释放细胞内的RNA。
目前常用的破碎方法包括机械破碎、酶解和超声破碎等。
选择不同的破碎方法需要根据所研究的组织类型、细胞数量以及目标RNA 的适应性来确定。
（三）RNA结合：将破碎后的细胞溶液与磁珠结合试剂加入，并进行混匀。
通过磁性珠子表面的特异性结合分子与RNA结合，使得RNA能够与磁珠结合。
（四）磁珠分离：通过磁力，将含有磁性珠子的RNA溶液与其他不具有磁性的杂质分离。
可以利用磁力器将磁性珠子收集到一侧，将无磁性的溶液倒掉，从而分离纯化RNA。
（五）洗涤：为了去除残留的污染物，可以进行洗涤步骤。
将洗涤缓冲液加入含有磁珠的管中，再次使用磁力使磁性珠子沉淀，倒掉上清液，然后重复该步骤多次以保证洗涤的彻底性。
（六）洗脱：最后，用洗脱缓冲液将RNA从磁珠上洗脱下来。
将洗脱缓冲液加入磁性珠子所在的管中，轻轻摇晃管子，使RNA溶解在洗脱缓冲液中，从而得到纯化的RNA溶液。
天漠科技 总RNA提取试剂盒说明书
总RNA提取试剂盒(配合TRIZOL使用)Catalog No. TR205-50 (50次反应含DNaseI)TR205-200 (200次反应含DNaseI)TR205-50N (50次反应无DNaseI)TR205-200N (200次反应无DNaseI)Highlights∙适用于从细胞，组织，酵母菌，植物，细菌或生物液体（任何TRIZOL或类似产品可以裂解的样品）中提取到总RNA（含microRNA）。
∙无需进行相分离，无需使用氯仿，无需沉淀过程。
∙提取到的RNA不含DNA,并可应用于Q-PCR，高通量测序等实验。
∙整个过程仅需10分钟。
Ver.1.0.9产品组成:50200RNA洗涤液1 室温40 ml 160 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNA洗涤液2室温12 ml 48 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇DNase I -20℃ 300μl x 1管（5U/μl） 300μl x 4管（5U/μl）DNA消化液室温 4 ml 16 mlRNase-free H2O 室温 6 ml 30 ml2号柱室温50个200个收集管（2ml）室温50个200个特性:1.样品来源：TRIZOL等类似试剂裂解的样品。
2.样品范围：≥17核苷酸。
3.RNA纯度：高质量的RNA可应用于高通量测序等敏感的下游实验。
4.RNA结合量：每个柱子可最多结合50μg的RNA。
试剂制备RNA洗涤液在使用之前一定要配好，添加好乙醇后在试剂瓶上做好标记！！！添加10ml或40ml的无水乙醇（95-100%）到40ml或160ml的RNA洗涤液1中。
添加48ml100%的乙醇（或52 ml95%的乙醇）到12ml的RNA洗涤液2添加192ml100%的乙醇（或208 ml95%的乙醇）到48ml的RNA洗涤液2操作步骤:整个操作步骤是由2个步骤组成：（I）样品裂解匀浆（I I）样品纯化（I）样品裂解匀浆此步骤主要参考TRIZOL等类似裂解试剂说明书的裂解液用量，以下给出我公司提供的可完美替换TRIZOL的TRIcom试剂用量作为参考。
总RNA提取试剂盒说明书
总RNA提取试剂盒说明书货号：R1200规格：50T/100T产品内容：试剂盒组成R1200-50R1200-100保存有效期裂解液50ml100ml2-8℃一年漂洗液15ml15ml×2RT一年洗柱液50ml50ml×2RT一年RNase free ddH2O15ml15ml×2RT一年RNase free吸附柱50个100个RT一年RNase free收集管(2ml)50个100个RT一年操作步骤：1.样品处理：a.植物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨，把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b.动物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液，用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c.贴壁细胞：直接在培养板中加入裂解液裂解细胞，每106细胞加1ml裂解液。
用取样器吹打混匀。
d.细胞悬液：离心收集细胞。
每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e.血液处理：取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，10000rpm离心1分钟。
弃上清，若沉淀含有红细胞，可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。
离心后沉淀加入1ml裂解液混匀。
2.将处理后的样品在室温放置5分钟，使得核酸蛋白复合物完全分离。
3.向匀浆样品中加0.2ml氯仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置3-5分钟。
4.2-8℃12000rpm离心10分钟。
RNA主要在上层无色的水相中，把水相转移到新管中，不要吸到沉淀。
5.吸附柱前处理：在吸附柱中加入500ul洗柱液，室温放置2分钟，2-8℃12,000rpm离心2min，弃废液。
6.第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀，加入吸附柱静置2分钟，2-8℃12000rpm离心2min，弃废液。
7.向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，2-8℃12,000rpm离心2min，弃废液。
OMEGA总RNA提取试剂盒说明书_BBH
E.Z.N.A. Total RNA Kit I (R6834-01 50 preps) 步骤A．真核细胞和组织自备材料：β－巯基乙醇、70％乙醇（DEPC水配置）、除RNase的枪头和EP管、disposable latex gloves。
细胞的步骤1．在microfuge tube中用TRK裂解缓冲液裂解细胞，使细胞团松散，轻弹EP管或者用枪头吹旋，再用漩涡振荡混匀。
使用前每1ml TRK裂解缓冲液加入20ul的β－巯基乙醇。
如果是单层的组织培养细胞（成纤维细胞，内皮细胞等），可以直接在细胞培养器里裂解细胞。
吸净培养基后直接加TRK裂解缓冲液至细胞中。
加600ul的TRK到T35细颈瓶或10cm的培养皿中，更小的培养器则加350ul的TRK。
Pipette buffer over entire surface of vessel 以使裂解完全。
将液体布满整个器皿表面，确保细胞裂解完全。
将裂解产物转移至干净的1.5mlEP管中，然后进行第2步。
如果细胞是悬液培养，收集细胞（≤1,500rpm or 400*g）*5min，弃上清，加入TRK）裂解液，漩涡振荡混匀（具体略，见说明书）。
2．匀浆化裂解产物“裂解和匀浆化样品”－第四页有更详细的说明，如果细胞≤1*105，漩涡振荡1min。
样品匀浆化不完全会显著的减少RNA的产量并容易造成柱子堵塞。
a)用匀浆器（rotor-stator ）30 s，使样品匀浆化，而后进行第3步。
b)使裂解产物通过钝的针头的注射器（0.9mm直径20-gauge），使之匀浆化。
注射器要除RNase。
进行第3步。
c)将裂解物转移入omega homogenizer spin column,10000g离心1分钟。
将flow-though移入新的tube中，进行第3步。
组织的步骤：1．TRK裂解缓冲液在microfuge tube中裂解细胞，使用前每1ml TRK裂解缓冲液加入20ul 的β－巯基乙醇。
全血总RNA提取试剂盒
全血总RNA提取试剂盒(离心柱型)货号：KTSM2908■ 产品简介：本产品适用于从血液中提取高品质总RNA。
本试剂盒配有独特的裂解体系，将RNA从组织中释放出来后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过去蛋白液和漂洗液将蛋白等杂质去除，最后由RNase-Free Water将RNA从硅基质膜上洗脱下来。
本产品提取RNA方便快捷，无需使用氯仿、苯酚等有毒有害化学物质，对操作人员及实验环境无毒害作用。
■主要成分：■保存条件：DNase I，10 × DNase I Buffer置于-20℃保存；其他溶液于室温（15-25℃)保存。
■自备试剂：无水乙醇，β-巯基乙醇。
■ 注意事项：1．第一次使用前请先在去蛋白液RD和漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇，并做好标记。
2．裂解液RG在使用前请加入β-巯基乙醇至终浓度为1%，如1 ml裂解液RG加10 µl β-巯基乙醇。
加入β-巯基乙醇的裂解液RG 在4℃可保存1个月，如出现沉淀，请加热溶解后使用。
3．裂裂解液RG和去蛋白液RD中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4．人类的血液或体液可能有潜在的感染性，所以如果对人类的全血进行处理，请注意做好防护措施。
5．在白细胞裂解后，该说明书中的所有步骤需在室温（15-25℃）进行，操作速度越快越好。
6．本试剂盒不适用于冻存的全血。
■ 预防RNase污染：1．全程佩戴一次性手套，经常更换新手套。
皮肤经常带有细菌和霉菌，可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。
培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。
2．使用无RNA酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。
玻璃器皿可以在150℃的烘箱中烘烤4 h，塑料器皿可以在0.5 M NaOH中浸泡10 min，用水彻底漂洗干净后高压灭菌备用。
■ 操作步骤：1．向新鲜的抗凝全血样本中，加入5倍血液样本体积的1×红细胞裂解液（请于使用前用RNase-Free Water 将10×红细胞裂解液稀释10倍），轻轻涡旋或颠倒混匀。
磁珠法动物组织总rna提取试剂
磁珠法动物组织总rna提取试剂动物组织总RNA提取是一项重要的实验步骤，其中磁珠法被广泛应用。
本文将介绍磁珠法动物组织总RNA提取试剂的原理、操作步骤和优势，以及其在科研工作中的应用。
一、磁珠法动物组织总RNA提取试剂的原理磁珠法动物组织总RNA提取试剂是一种基于磁性珠子的提取方法。
其原理是利用磁性珠子表面的羧基与RNA中的氨基结合，形成稳定的结合，从而实现RNA的高效提取。
该试剂具有高选择性和高纯度的特点，可有效去除DNA、蛋白质和其他杂质。
二、磁珠法动物组织总RNA提取试剂的操作步骤1. 准备工作：将动物组织样品切割成小块，并加入适量的细胞裂解缓冲液。
2. 组织裂解：利用机械或化学方法将组织完全裂解，使细胞内的RNA充分释放。
3. 加入磁性珠子：将磁性珠子加入细胞裂解液中，并充分混匀，使珠子均匀分散。
4. 结合RNA：在一定的温度和时间下，RNA与磁性珠子表面的羧基发生结合，形成RNA-磁性珠子复合物。
5. 分离复合物：利用磁性装置将RNA-磁性珠子复合物迅速沉降，然后去除上清液，以实现复合物的分离。
6. 洗涤：用洗涤缓冲液洗涤复合物，去除杂质和残余试剂。
7. 释放RNA：将洗涤后的复合物加入洗脱缓冲液，使RNA从磁性珠子上释放出来。
8. 收集RNA：将释放的RNA收集下来，即可用于后续的实验操作。
三、磁珠法动物组织总RNA提取试剂的优势1. 高效性：磁珠法能够在较短的时间内提取高纯度的RNA，适用于大规模样品的处理。
2. 纯度高：该方法能够有效去除DNA、蛋白质和其他杂质，获得高纯度的RNA。
3. 灵敏度高：磁珠法能够提取低浓度的RNA，适用于少量样品和低表达基因的研究。
4. 操作简便：该方法操作简单，不需要复杂的仪器设备，适用于实验室内各种规模的科研工作。
5. 可靠性强：磁珠法提取的RNA具有较好的稳定性和可靠性，适合多种分子生物学实验的需求。
四、磁珠法动物组织总RNA提取试剂在科研工作中的应用磁珠法动物组织总RNA提取试剂在生物医学研究中广泛应用。
rna提取试剂盒
RNA提取试剂盒1. 简介RNA提取试剂盒是一种用于从生物样品中提取RNA的试剂盒。
RNA提取是分子生物学和遗传学研究中的一个重要步骤，它可以从细胞中提取出RNA，并用于进一步的RNA分析，如逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、实时定量PCR（qRT-PCR）、Northern印迹、原位杂交等实验。
2. 原理RNA提取试剂盒的原理通常基于以下步骤：2.1 细胞破碎首先，样品中的细胞需要被破碎，以释放细胞内的RNA。
常用的方法有机械破碎、化学破碎和酶解法等。
机械破碎是利用高速旋转的珠子等破碎细胞膜，而化学破碎通常使用细胞裂解液来破坏细胞膜。
酶解法则是利用特定酶来降解细胞膜。
2.2 RNA结合破碎的细胞后，RNA需要与试剂盒中的特定试剂结合。
这些试剂通常包括抗RNA酶和助剂，可以保护RNA不被降解，同时也可与其他细胞成分如DNA和蛋白质区分开来。
2.3 吸附和洗脱结合的RNA会通过离心等操作与试剂盒中的吸附材料结合，并且其他杂质如DNA、蛋白质等被洗脱。
这一步骤通常是通过向细胞裂解液中加入酒精或其他特定试剂来实现。
2.4 最后的RNA洗脱和纯化最后，从吸附材料上洗脱RNA，并通过离心等方式纯化RNA。
这样可以得到纯度较高的RNA样品，并且可以进一步用于RNA分析。
3. 使用RNA提取试剂盒的优势使用RNA提取试剂盒进行RNA提取的主要优势如下：3.1 高纯度RNA提取试剂盒可以通过洗脱和纯化步骤，获得高纯度的RNA，可以减少其他杂质对实验的干扰，提高实验结果的可靠性。
3.2 方便快捷相对于传统的RNA提取方法，使用RNA提取试剂盒可以更快速、更方便地提取RNA。
通常只需要几个步骤即可完成RNA提取，节省了实验人员的时间和精力。
3.3 可重复性好由于使用RNA提取试剂盒的步骤相对标准化，因此可以获得较好的重复性。
这对于需要进行大量实验或进行样本比较分析的研究非常有价值。
3.4 更适合高通量实验随着高通量实验技术的发展，需要处理大量样本的实验也越来越常见。
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植物叶片 动物组织 动植物培养细胞 血液
100–200 µg/g 叶片 6-10 µg/mg 肝脏组织 5–10 µg/106 细胞 3–5 µg/ml 人类全血
问 题 指 南
低得率 A260/ A280<1.65
RNA降解
DNA污染 蛋白和多糖污染
A．样品裂解或匀浆处理不彻底。 B．最后得到的RNA沉淀未完全溶解。 A．检测吸光度时，RNA样品不是溶于TE，而是溶于
4. 每使用1 ml TRNzol–A+加0.2 ml氯仿，盖好管盖，剧烈振荡15sec，室温放置3min。 注意：如不能旋涡混匀，可手动快速颠倒混匀2min。
5. 4℃ 12,000 rpm(~13,400×g)离心10-15min。样品会分成三层：黄色的有机相，中间 层和上层无色的水相，RNA主要在水相中，把水相（约500 µl）转移到新的离心管中。 （如果要分离DNA和蛋白质，可向天根公司索取提取方法）。
本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
TRNzol–A+ Reagent TRNzol–A+总RNA提取试剂
目录号：DP421
试剂盒内容
目录号
DP421 说明书
试剂盒组成
100 ml 1份
产品简介 TRNzol–A+是TIANGEN公司最新研发的总RNA提取产品，具有更强的裂解能力，更高
的灵敏度。可从细胞和组织中提取总RNA的试剂，在样品裂解或匀浆过程中，TRNzol–A+可 保持RNA完整性，同时裂解细胞，溶解细胞内含物。
储存条件： 2–8℃ 避光保存12 个月。
警告：本试剂有腐蚀性，请勿直接接触皮肤或吞咽；操作时请穿戴实验服、防护镜和手套；如果接触皮肤，应立即用洗涤剂和大量水冲洗；易燃。
注意事项
1． 匀浆后，加氯仿前，样品可在-70℃ 放置一个月。 2． RNA沉淀可以保存在75%乙醇中，2-8℃一个星期或-20℃一年。 3． 若提取细菌ＲＮＡ，推荐应用ＲＮＡｐｒｅｐ Ｐｕｒｅ培养细胞／细菌总ＲＮＡ提取试剂盒（目录号：
水。低离子浓度和低pH条件下，A280值会较高。 B．样品匀浆时加的试剂量太少。 C．匀浆后样品未在室温放置5min。 D．水相中混有有机相。 E．最后得到的RNA沉淀未完全溶解。 A．组织取出后没有马上处理或冷冻。 B．样品或提取的RNA沉淀保存于-5℃– -20℃，
未在-60℃– -70℃保存。 C．细胞在胰蛋白酶处理时被破坏。 D．溶液或离心管未经RNase去除处理。 E．电泳时使用的甲酰胺pH低于3.5。 A．样品匀浆时加的试剂体积太少。 B．样品中含有组织溶剂（如乙醇，DMSO等），强
少用1 ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。 9. 4℃ 5,000 rpm(~2,300×g)离心3min。倒出液体，注意不要倒出沉淀，剩余的少量液体
短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。 10. 室温放置晾干(不要晾的过干，RNA完全干燥后会很难溶解，大约晾干2-3min左右即
可)，根据实验需要，加入30-100 µl RNase-Free ddH2O，反复吹打、混匀，充分溶解 RNA。
本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
2)胰蛋白酶处理法：确定细胞数量，吸除培养基，用PBS洗涤细胞，吸除PBS， 向细胞中加入含有0.1-0.25%胰蛋白酶的PBS处理细胞，当细胞脱离容器壁时，加 入含有血清的培养基失活胰蛋白酶，将细胞溶液转移至RNase-Free的离心管中， 300×g离心5min，收集细胞沉淀，仔细吸除所有上清。 注意：收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净，否则会导致裂解不完全，造成 RNA的产量降低。
ＤＰ４３０）。
预防ＲＮａｓｅ污染，应注意以下几方面
1． 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。 2． 使用RNase-Free的塑料制品和枪头避免交叉污染。 3． RNA在TRNzol–A+试剂中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用
RNase-Free的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4h，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10min，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。 4． 配制溶液应使用RNase-Free ddH2O。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓 度0.1%( v/v)，放置过夜，高压灭菌）。
缓冲液或碱性溶液。 A． 样品中蛋白、多糖含量高。 B． 样品量太大。 C． 水相中混有有机相。
技术支持：010-59822661/2665 订货电话：010-59822688
版本号: RP120227
TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD. Order: 010-59822688 Technical: 010-59822661/2665 Toll-free: 800-990-6057
d. 细胞悬液：离心取细胞。每5×106-107动物细胞和植物细胞加入1 ml TRNzol–A+。 加入TRNzol–A+前不要洗涤细胞，以免降解mRNA。
e. 血液处理：直接取新鲜的血液，加入3倍体积TRNzol–A+(推荐0.25 ml全血加入0.75 ml TRNzol–A+)，充分振荡混匀。
TRNzol–A+试剂既可用于小量样品(50–100 mg组织、5×106细胞)的总RNA提取，也可 用于大量样品(≥1g组织或≥107细胞)的总RNA提取，对动物、植物组织提取都适用，可同时 处理大量不同样品。一个小时内即可完成反应，提取的总RNA没有DNA和蛋白的污染，可用 于Northern Blot、Dot Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆。
ＲＮＡ提取操作步骤
准备试剂：氯仿、异丙醇、RNase-Free ddH2O 、75%乙醇(用RNase-Fr组织：以叶片RNA提取为例。取新鲜叶片在液氮中充分研磨或将叶片剪碎后直 接在TRNzol–A+中研磨，研磨要迅速，最好不要超过1 min。大约100 mg 叶片使用 1 ml TRNzol–A+。
b. 动物组织：以鼠肝脏RNA提取为例。取新鲜或-70℃冻存组织，每30-50 mg组织加 入1 ml TRNzol–A+，用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积一般不要超过TRNzol–A+体 积的10%。
c. 单层培养细胞：单层贴壁细胞的收集（收集细胞数量请不要超过1×107）：可直接 在培养容器中裂解（容器面积不超过10 cm2）,或者使用胰蛋白酶处理后离心收集细 胞沉淀。（在摇瓶中培养的单层贴壁细胞通常采用胰蛋白酶处理的方法）。 1)直接裂解法： 直接在培养板中加入TRNzol–A+裂解细胞，每10cm2面积加入1 ml TRNzol–A+。用取样器吹打几次。注意：TRNzol–A+加量根据培养板面积决定， 不是由细胞数决定。如果TRNzol–A+加量不足，可能导致提取的RNA中有DNA污 染。
6. 在得到的水相溶液中加入等体积异丙醇，混匀，室温放置20-30min。 7. 4℃ 12,000 rpm(~13,400×g)离心10min，去上清。离心前RNA沉淀经常是看不见的，
离心后在管侧和管底形成胶状沉淀。 8. 加入1 ml 75%乙醇（用RNase-Free ddH2O配制）洗涤沉淀。每使用1 ml TRNzol–A+至
2. 将匀浆样品在15－30℃放置5min，使得核酸蛋白复合物完全分离。 3. 可选步骤：4℃ 12,000 rpm(~13,400×g) 离心10min，取上清。
注意：如果样品中含有较多蛋白、脂肪、多糖或肌肉、植物结节部分等，可离心去除。 离心得到的沉淀中包括细胞外膜、多糖、高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪 组织样品时，上层是大量油脂，应除去。取澄清的匀浆溶液进行下一步操作。