质谱尿素检测方法
尿素检测步骤
y-吸光度x-尿素浓度（g/L）
尿素浓度为：
x= ×稀释倍数（g/L）
3.操作步骤
（1）取5mlDMBA溶液加入到25ml比色管中，用水稀释到刻度，做为空白样。
（2）尿素含量大于2%的时候，稀释500倍
用1ml移液管吸取1ml样品加入到100ml容量瓶中，定容。然后吸取稀释后溶液5ml，加入25ml比色管中，加入5mlDMBA溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置20min。以空白样做对比，用紫外分光光度计在420nm波长下测定，记录吸光度。
（3）尿素含量小于2%的时候，稀释100倍
用5ml移液管吸取5ml样品加入到100ml容量瓶中，定容。然后吸取稀释后溶液5ml，加入25ml比色管中，加入5mlDMBA溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置20min。以空白样做对比，用紫外分光光度计在420nm波长下测定，记录吸光度。
4.计算
标准曲线为：
尿素检测步骤
1.原理：
DMBA与尿素反应生成黄色的对二甲胺基甲醛脲，此物质的颜色深度与溶液中尿素含量成正比，因此可以通过测定在一定波长下反应溶液的吸光值来定量溶液中的尿素浓度（该反应需要在酸性条件下进行）。
2.试剂：
对二甲胺基苯甲醛(ＤＭＡＢ)溶液(浓度0.0975ｍｏｌ/Ｌ):溶解8.0ｇＤＭＡＢ于500ｍＬ无水乙醇中,加50ｍＬ盐酸。
尿素检测步骤
尿素检测步骤1.原理：
DMBA与尿素反应生成黄色的对二甲胺基甲醛腺，此物质的颜色深度与溶液中尿素含量成正比，因此可以通过测定在一定波长下反应溶液的吸光值来定量溶液中的尿素浓度（该反应需要在酸性条件下进行）。
2.试剂：
对二甲胺基苯甲醛（DMA B）溶液（浓度m o 1 /L）:溶解g DMA B于500 m L无水乙醇中，加50m L盐酸。
3.操作步骤
（1）取5ml DMBA溶液加入到25ml比色管中，用水稀释到刻度，做为空白样。
（2）尿素含量大于2%的时候，稀释500倍
用1ml移液管吸取lml样品加入到100ml容量瓶中，定容。
然后吸取稀释后溶液5ml,加入25ml比色管中，加入5ml DMBA溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置20min o以空白样做对比，用紫外分光光度计在420nm波长下测定，记录吸光度。
（3）尿素含量小于2%的时候，稀释100倍
用5ml移液管吸取5ml样品加入到100ml容量瓶中，定容。
然后吸取稀释后溶液5ml,加入25ml比色管中，加入5ml DMBA溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置20min o以空白样做对比，用紫外分光光度计在420mn波长下测定，记录吸光度。
4.计算
标准曲线为：
y二吸光度x-尿素浓度（g/L）
尿素浓度为:
+ 0.006S
X稀释倍数(g/L) 0.0013。
尿素测定标准操作规程
尿素测定标准操作规程1.检验原理：（酶偶联检测法）尿素经脲酶催化水解生成氨与二氧化碳，在谷氨酸脱氢酶催化下，氨与α-酮戊二酸、还原型辅酶Ⅰ（NADH ）作用生成谷氨酸与氧化型辅酶Ⅰ（+NAD ），还原型辅酶Ⅰ在340nm 波长处有吸收峰，而氧化型辅酶Ⅰ几乎无吸收峰，还原型辅酶Ⅰ在340nm 吸光度的下降速率与样品中尿素含量成正比。
尿素+2O H 2−−→−脲酶2+4NH +-23CO Α-酮戊二酸++4NH +NADH++H −−−−→−谷氨酸脱氢酶L-谷氨酸++NAD +O H 2 2.试剂主要组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清。
在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！样本中抗坏血酸含量≤0.3g/L 、胆红素含量≤0.4g/L 、血红蛋白含量≤5.0g/L 、脂血含量≤5.0g/L 对检测结果基本无影响。
4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V ）的氯化钠溶液稀释样本，最大稀释不超过10倍。
6.2.单位换算：mg/dl=mmol/L×6.027.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊，或以水空白在340nm处吸光度小于1.000时不能使用。
7.3检验结果仅供参考，不作为临床诊断的唯一依据。
8.试剂性能指标8.1试剂外观：无色透明液体，无悬浮物及沉淀。
8.2装量：不低于标识值。
8.3试剂空白8.3.1试剂空白吸光度：在340nm处，光径1cm时，空白吸光度A≥1.0008.3.2试剂空白吸光度变化率：在340nm处，光径1cm时，△A/min≤0.004.8.4线性区间：试剂的线性区间为[0.9-35.7]mmol/L，在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b)[0.9-4.0]mmol/L区间内，线性绝对偏差不超过±0.4mmol/L；[4.0-35.7]umol/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
尿素检测标准操作规程SOP
还原型辅酶I（NADH)
0.3mol/l
α-酮戊二酸
13.0mol/l
不同批次的试剂不推荐混合使用
7.4储存条件有效期
试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
7.5参数设置
主波长
340nm
辅助波长
405nm
反应方法
速率法
反应温度
37℃
反应方向
向下
试剂1
200ulቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
样本
2.5ul
4.1生理性：高蛋白饮食可引起血尿素浓度和尿液排出量显著增高。成人血清尿素浓度男性比女性平均高出0.3-0.8mmol/l，并随着年龄增加有增高倾向。妊娠妇女由于血容量增加，尿素浓度比非孕妇低。
4.2病理性：分为肾前性、肾性、肾后性。①肾前性:主要是严重失水引起的血液浓缩，肾血流量減少及肾小球滤过率降低，从而使尿素潴留，可见于剧烈呕吐、肠梗阻和长期腹泻;②肾性:为最常见的因素，可见于急性肾小球肾炎、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎等，在肾功能不全的代偿期可见尿素轻度升高(＞8.0mmol/L)，肾功能衰竭失代偿期，尿素可中度升高(17.9～21.4mmol/L)，肌酐也中度升高(442.0umol/L);尿毒症时尿素＞21.4mmol/L，肌酐也可达1800umol/L，为尿毒症的诊断标准之一;③肾后性:如前列腺肥大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤等都可能使尿路阻塞引起血尿素升高。血液尿素减少较为少见，除了妊娠、蛋白质营养不良等情況外。常表示有严重的肝病、肝坏死。
12.2尿素氮测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
13.1线性范围：在（0.3-35.7）mmol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（0.3-10.0）mmol/L范围内，线性偏差应≦2.0mmol/L;（10.0-35.7）mmol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
尿素检测--检测技术
迪信泰检测平台
尿素检测
尿素（Urea），又称碳酰胺（Carbamide)，是哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质代谢分解的主要含氮终产物，也是目前含氮量最高的氮肥。
作为一种中性肥料，尿素适用于各种土壤和植物。
它易保存，使用方便，对土壤的破坏作用小，是目前使用量较大的一种化学氮肥。
工业上用氨气和二氧化碳在一定条件下合成尿素。
迪信泰检测平台采用液相质谱联用(LC-MS)的方法，使用Thermo Scientific的
U3000快速液相色谱对样品进行分离，Thermo Scientific™ Q Exactive™对样品进行鉴定，可高效、精准的检测尿素的含量变化。
此外，我们还提供其他极性小分子系列检测服务，以满足您的不同需求。
LC-MS测定尿素样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关参数（中英文）。
3.质谱图片。
4. 原始数据。
5. 尿素含量信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
尿素法测定实验报告
一、实验目的1. 理解尿素在生物化学分析中的应用及其原理。
2. 掌握尿素含量的测定方法，包括样品处理、标准曲线的绘制和样品的测定。
3. 学会使用紫外-可见分光光度计进行定量分析。
二、实验原理尿素是一种含氮化合物，在生物体内参与氨基酸的代谢。
尿素法测定尿素的原理基于尿素在碱性条件下与苯酚和次氯酸钠反应生成紫色络合物，该络合物在特定波长下具有特征吸收峰，其吸光度与尿素的浓度成正比。
三、实验材料与仪器1. 仪器：紫外-可见分光光度计、电子天平、移液器、容量瓶、试管、烧杯、蒸馏水等。
2. 试剂：尿素标准溶液、苯酚溶液、次氯酸钠溶液、碱性缓冲溶液、盐酸等。
四、实验步骤1. 样品处理：准确称取一定量的尿素样品，用蒸馏水溶解并定容至一定体积，配制成尿素样品溶液。
2. 标准曲线的绘制：a. 准备一系列已知浓度的尿素标准溶液。
b. 在每个试管中加入苯酚溶液、次氯酸钠溶液和碱性缓冲溶液。
c. 将尿素标准溶液加入试管中，混匀。
d. 使用紫外-可见分光光度计在特定波长下测定吸光度。
e. 以尿素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品测定：a. 在每个试管中加入苯酚溶液、次氯酸钠溶液和碱性缓冲溶液。
b. 将尿素样品溶液加入试管中，混匀。
c. 使用紫外-可见分光光度计在特定波长下测定吸光度。
d. 根据标准曲线计算样品中尿素的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制：根据实验数据，绘制标准曲线，计算相关系数R²，验证曲线的线性关系。
2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中尿素的含量，并计算回收率。
六、实验讨论1. 实验过程中可能存在的误差来源，如样品处理、试剂配制、仪器校准等。
2. 提高实验准确性的方法，如多次重复实验、优化实验条件等。
3. 尿素法测定尿素的适用范围和局限性。
七、实验结论通过本实验，我们成功掌握了尿素法测定尿素的原理和操作步骤。
实验结果表明，该方法具有较高的准确性和重复性，适用于生物化学分析中尿素的测定。
气相色谱-质谱法测定尿素产品中的煤气化有机物
５ ＭＳ色谱柱 分 离 ． 并用 Ｇ Ｃ — ＭＳ联 用技 术对 萃取 物进行 分析 ， 从 中分 离鉴 定 了 １ １ 个 成分 。 结 果表 明 ：
尿 素 萃 取 液 中含 有 甲苯 （ ６ ． ６ ４ ％） ， 邻硝基苯胺（ １ ． ６ ８ ％） ， 直链 烃 类 （ ８ ７ ． ２ ３ ％） ， 邻 硝 基 苯 导 致 尿 素 变
Ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｗ ａ ｓ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｄ ｂ ｙ ｇ ａ ｓ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ－ ｍ ａ ｓ ｓ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ（ Ｇ Ｃ— ＭＳ ） ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ， ｗ ｉ ｔ ｈ １ １ ｃ ｏ ｍ ｐ ｏ ｎ ｅ ｎ ｔ ｓ
ｉ ｎ ｕｒ ｅ ａ ｐ ｒ ｏ ｄｕｃ ｔ
ＣＵＩ Ｗｅ ｉ － ｙ ｉ １ ， ＨＵＩ Ｊ ｉ － ｘ ｉ ｎ ｇ
ｆ １ ． Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｅ ｍ ｉ ｃ ａ ｌ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ Ｔ ｈ ｅ Ｋ ｅ ｙ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｆ ｏ Ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ｌ ａ Ｃ ｌ ｅ ａ ｎ ｅ ｒ Ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｙ ｇ ｆ ｏ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ ｒｏ Ｐ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ ， Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ １ ３ ２ ０ ２ ２ ； ２ ． Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｉ ｓｔ ｎ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｆＰ ｏ ｅ ｔ ｒ ｏ ｃ ｈ ｉ ｎ ａ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｐ ｅ ｔ ｒ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ｍ ｐ ａ ｎ ｙ ， Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ ， １ ３ ２ ０ ２ １ ）
13c-尿素同位素丰度的检测方法
13c-尿素同位素丰度的检测方法13C-尿素同位素丰度检测方法是一种分子分析技术，用于分析样品中13C标记的尿素分子的相对丰度。
这种技术可以用来研究胃肠道的运动、蛋白质消化和氮代谢等方面的生理学和病理学过程。
在临床应用中，13C-尿素同位素丰度检测方法主要用于检测幽门螺杆菌感染和胃肠道功能障碍等疾病。
下面将详细介绍13C-尿素同位素丰度检测方法的原理、步骤和实验注意事项。
一、原理13C-尿素同位素丰度检测方法是基于13C同位素的质谱分析技术。
在13C-尿素同位素丰度检测方法中，将富含13C的尿素与患者饮食中含有12C的食物混合后口服，经过一段时间后，采集患者呼出气体中的CO2样品，并利用质谱仪分析13C和12C的相对丰度。
由于富含13C的尿素可以被幽门螺杆菌分解产生CO2，因此这种检测方法可以用来检测幽门螺杆菌感染和评估幽门螺杆菌的灭菌效果。
二、步骤1. 饮食控制：检测前患者需要遵循一些特殊的饮食控制，在检测前3-7天内禁止摄入大量含有13C的食物和药物，如牛奶、面包、饼干、鸡蛋等含有13C的食物，以及含有13C标记的药物。
2. 收集呼气样品：患者进食后，将样品收集瓶插入患者口中，患者闭上嘴唇，用吸气器吹出口腔的空气，然后舌头抵住瓶口，再用力吹气至瓶内。
3. 测量同位素丰度：将收集好的呼气样品放入质谱仪中测量同位素丰度，可以得到13C和12C的相对丰度比例，从而计算出13C-尿素的相对丰度。
三、实验注意事项2. 样品收集：收集患者的呼气样品时，需要采取严格的措施，保证样品不被外界的污染物所影响，建议在空气清新的环境下进行。
3. 质谱分析：在质谱分析时，要注意仪器的调试和校准，确保分析数据的准确性和可靠性。
4. 个体差异：需要注意的是，13C-尿素同位素丰度的检测结果可能受到个体差异的影响，因此一定要结合临床病史和其他检查结果进行综合分析。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
质谱尿素检测方法
质谱尿素检测方法是利用质谱仪对尿液中的尿素进行定量和定性分析的方法。
通常，尿素检测方法包括以下步骤：
1. 采集尿液样品：收集患者的尿液样品，通常使用无菌容器进行采集，避免样品受到污染。
2. 样品处理：将尿液样品进行预处理，一般包括离心沉淀、过滤等步骤，去除尿液中的杂质。
3. 质谱仪检测：将处理后的尿液样品注入质谱仪中进行检测。
质谱仪会将样品中的尿素分子离子化，并根据其质量和荷质比进行分析。
4. 数据分析：质谱仪会生成一个质谱图，该图显示了尿液样品中尿素的质量/荷质比峰值。
通过与标准品对比，可以确定尿液中尿素的浓度。
质谱尿素检测方法的优点包括灵敏度高、检测范围广、准确性高等。
同时，质谱仪还可以用于检测其他尿液中的物质，如代谢产物、药物等，具有很大的应用潜力。