基于胆汁酸代谢网络分析中药黄药子的肝毒性_徐英
黄药子毒性组分对肝细胞内Ca2+浓度的影响
黄药子毒性组分对肝细胞内Ca2+浓度的影响王加志;刘树民;汤青;李伟【摘要】目的:观察黄药子毒性组分对SD大鼠肝细胞内游离Ca2+浓度的影响,阐释黄药子肝毒性的分子机制.方法:以黄药子的醇提物氯仿萃取部位进行在体肝损害机制探讨,制备原代肝细胞悬液,FLUO-3 AM染色,激光共聚焦显微镜观察细胞内Ca2+变化情况.结果:黄药子组肝细胞内Ca2+浓度显著升高.结论:细胞内Ca2+作为第二信使参与了黄药子对肝脏的毒性作用,其信号转导机制有待进一步研究.【期刊名称】《中医药信息》【年(卷),期】2012(029)006【总页数】2页(P15-16)【关键词】黄药子;化学组分;激光共聚焦扫描显微镜;钙超载【作者】王加志;刘树民;汤青;李伟【作者单位】黑龙江中医药大学佳木斯学院,黑龙江佳木斯154007;黑龙江中医药大学中医药研究院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学中医药研究院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学佳木斯学院,黑龙江佳木斯154007【正文语种】中文【中图分类】R285.5黄药子临床应用时肝损害时有报道［1］，表明人们对用药安全的关注日益加深。
本研究组前期研究发现，黄药子的肝损害作用与氧化应激有关［2］。
本研究通过对肝细胞内Ca2+浓度的初步研究，探讨氧化应激与肝细胞内Ca2+的变化情况，为从细胞凋亡及信号转导方面研究中药肝损害奠定基础。
1 仪器与试剂1．1 实验仪器LSM－510－META激光共聚焦扫描显微镜(德国ZEISS公司);倒置式显微镜(Axiovert 200 MBP);BQ 50－1J恒流泵(河北保定兰格恒流泵有限公司);KDC－160HR高速冷冻离心机(科大创新股份有限公司中佳分公司)。
1．2 试剂FLUO－3 AM(美国分子探针(AP)公司);胰蛋白酶(美国SIGMA公司);Ⅳ型胶原酶(美国SIGMA公司);PBS(美国SIGMA公司);DMEM培养基(美国SIGMA公司);DMSO(美国SIGMA公司);试剂均为国产分析纯。
应用基因表达谱芯片研究黄药子对小鼠肝脏的毒性机制(简报)
应用基因表达谱芯片研究黄药子对小鼠肝脏的毒性机制(简报)陈勇;夏启松;程明;杜鹏
【期刊名称】《分子细胞生物学报（英文版）》
【年(卷),期】2006(039)006
【摘要】黄药子为薯蓣科植物黄独（Dioscorea bulbiferaL.）的块茎，临床常用
于治疗甲状腺肿、抗肿瘤、抗炎、抗病毒等。
近年来临床上关于黄药子的毒副作用，尤其是对肝、肾的不良反应屡有报道。
当黄药子或其代谢物在肝细胞内累积时会直接干扰肝细胞代谢，病变肝组织在形态上表现出脂肪样变、嗜酸样变性、小灶性坏死或片状坏死，且肝损伤程度与给药剂量和时间密切相关。
目前，关于黄药子的肝毒成分一般认为是其所含的薯蓣皂苷、薯蓣毒皂苷、黄药子萜ABC及鞣质等，但
关于黄药子肝损伤的病理过程与分子机制还不清楚。
【总页数】5页(P568-572)
【作者】陈勇;夏启松;程明;杜鹏
【作者单位】湖北大学中药生物技术省重点实验室,武汉,430062;湖北大学中药生
物技术省重点实验室,武汉,430062;湖北大学中药生物技术省重点实验室,武
汉,430062;湖北大学中药生物技术省重点实验室,武汉,430062
【正文语种】中文
【中图分类】R2
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黄药子及其制剂致药物性肝损伤病例临床分析
黄药子及其制剂致药物性肝损伤病例临床分析作者：陈红高水群肖锦仁唐来源：《湖南中医药大学学报》2021年第09期〔摘要〕目的探讨黄药子及其制剂所致药物性肝损伤（drug-induced liver injury， DILI）的原因、治疗及预后情况，为其临床合理用药提供参考。
方法回顾性分析成都医学院第二附属医院2015年1月至2020年10月确诊43例黄药子及其制剂致DILI 患者的住院资料，依据国际医学组织理事会制订的DILI临床分型判断标准进行分型，记录其肝功能状况及临床表现，分析临床原因，统计常规保肝治疗、黄药子解毒方联合还原型谷胱甘肽治疗及血浆置换治疗后患者的临床有效率。
结果 43例DILI患者临床分型中肝细胞损伤型占20.93%，胆汁淤积型肝损伤占44.19%，混合型肝损伤占34.88%。
相比于肝细胞损伤型和混合型，胆汁淤积型患者的总胆红素（TB）和直接胆红素（DB）水平均明显升高（P<0.01）;胆汁淤积型患者的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）水平均明显高于混合型（P<0.01）。
患者肝损伤的临床表现主要以皮肤、巩膜黄染（69.77%），发热（62.79%），纳差、乏力（58.14%）为主;服药时间过长、服药剂量过大为引起肝损伤的主要原因。
对于非重症急性肝衰竭患者，采用常规保肝治疗方案与黄药子解毒方联合还原型谷胱甘肽治疗方案的患者临床有效率分别为95.65%、100.00%，差异无统计学意义（P>0.05）。
结论临床使用该类药物时，可引起多种类型的肝损伤，应密切关注使用剂量、使用疗程及患者肝功能变化情况。
〔关键词〕黄药子;药物性肝损伤;还原型谷胱甘肽;肝功能;回顾性研究〔中图分类号〕R288 〔文献标志码〕B 〔文章编号〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2021.09.023Clinical Analysis of Drug-induced Liver Damage Caused by Huangyaozi（Dioscorea bulbifera L.） and Its PreparationCHEN Hong1， GAO Shuiqun2， XIAO Jinren3， TANG Jing2（1. Department of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine， The Second Affiliated Hospital of Chengdu Medical College/Nuclear Industry 416 Hospital， Chengdu， Sichuan 610057， China; 2. Department of Pharmacy， The Second Affiliated Hospital of Chengdu Medical College/Nuclear Industry 416 Hospital， Chengdu， Sichuan 610057， China; 3. Pharmacy School， Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China）〔Abstract〕 Objective To investigate the causes， treatment and prognosis of drug-induced liver injury （DILI） caused by Huangyaozi （Dioscorea bulbifera L.） and its preparations， so as to provide reference for clinical rational drug use. Methods The hospitalization data of 43 patients diagnosed with DILI caused by Huangyaozi （Dioscorea bulbifera L.） and its preparations from January 2015 to October 2020 in The Second Affiliated Hospital of Chengdu Medical College were retrospectively analyzed. The patients were classified according to the criteria for clinical classification and judgment of DILI formulated by the Council of International Medical Organizations. The liver function status and clinical manifestations were recorded， and the clinical causes were analyzed. After conventional liver protection treatment， Huangyaozi Jiedu Prescription combined with reduced glutathione treatment and plasma exchange treatment， the clinical effective rate was calculated. Results In 43 DILI patients， liver cell injury type accounted for 20.93%， cholestasis liver injury type accounted for 44.19%， and mixed liver injury type accounted for 34.88%; the levels of total bilirubin （TB） and direct bilirubin （DB） in patients with cholestasis type were significantly higher than those in patients with hepatocyte injury type and mixed type （P<0.01）; the levels of alanine aminotransferase （ALT）， aspartate aminotransferase （AST） and alkaline phosphatase （ALP） in patients with cholestasis type were significantly higher than those in patients with mixed type （P<0.01）. The main clinical manifestations were skin and sclera yellow staining （69.77%）， fever （62.79%）， poor appetite and fatigue （58.14%）. The main cause of liver injury was taking medicine for too long and taking too much. For non severe acute liver failure patients， the clinical effective rates of the conventional liver protection treatment and Huangyaozi Jiedu Prescription combined with reduced glutathione treatment were 95.65% and 100.00%，respectively， and there was no statistical significance （P>0.05）. Conclusion The clinical use of these drugs can cause a variety of types of liver injury， and it is necessary to pay close attention to the dosage， duration of use and changes in the patient's liver function.〔Keywords〕 Huangyaozi （Dioscorea bulbifera L.）; drug-induced liver injury; reduced glutathione; liver function; retrospective study黄药子为薯蓣科薯蓣属植物黄独（Dioscorea bulbifera Linn）的干燥块茎，首载于唐代孙思邈《千金月令》，药性苦寒，有毒，归肺、肝经，李时珍在《本草纲目》中阐述其功效为：“凉血降火，消瘿解毒”，具有凉血消瘿、解毒消肿、化痰散结等功效[1]。
有毒中草药之黄药子
有毒中草药之黄药子黄药子亦名黄药根(《开宝本草》)、黄药(《日华子本草》)等。
味苦，性平。
有毒。
入肺、肝经。
下面是店铺为大家整理的相关知识，欢迎阅读!黄药子的药理作用：1. 对甲状腺的作用给正常大鼠饲喂含2%～10%黄药子的饲料4周，对体重及甲状腺功能(基础代谢、甲状腺重及其含碘量)均无影响;黄药子对硫氧嘧啶与磺胺吡啶等抗甲状腺药物造成的甲状腺肿(体重、基础代谢率、甲状腺重量及含碘量、血清蛋白结合碘等指标)无影响。
对0.1%硫氰酸钾造成的轻度甲状腺肿有对抗作用;对缺碘食物引起的甲状腺肿有一定的治疗作用，其表现为肿大的甲状腺重量减轻、腺组织和血清蛋白结合碘增加。
对大鼠自发性甲状腺肿亦有改善作用。
黄药子的该治疗作用与其中所含碘有关。
2. 对心脏的作用黄药子煎剂与酊剂对离体和在位蛙心均有抑制作用。
3. 对平滑肌的作用黄药子酊剂和煎剂对离体兔肠有抑制作用;对未孕家兔与豚鼠子宫有兴奋作用，表现为强直性收缩与节律性收缩，对子宫的兴奋作用，能被苯海拉明所取消。
酊剂的作用较煎剂强而快。
4. 抗病原微生物作用黄药子水浸剂(1:3)，在试管内，对堇色毛癣菌、同心性毛癣菌、许兰黄癣菌、奥杜盎小芽胞癣菌、铁锈色小芽胞癣菌、羊毛状小芽胞癣菌、石膏样小芽胞癣菌、腹股沟表皮癣菌、红色表皮癣菌、星形奴卡菌等皮肤真菌均有不同程度的抑制作用。
黄药子提取物(0.1mg/ml)对家兔实验性单纯疱疹病毒性角膜炎有治疗作用，能使炎性病变减轻，痊愈时间缩短。
5. 其他作用有实验证明：黄药子对小鼠肉瘤180及子宫颈癌U14有抑制作用。
黄药子流浸膏有止血作用。
黄药子能抑制银屑病表皮增生，促进角质层角化,纠正角化不全,以达到治疗银屑病的目的。
黄药子的毒副作用和解毒急救方式：对小鼠腹腔给药和口服给药的半数致死量分别为25.49g/kg和79.98g/kg。
本品长时间应用会造成肝、肾损害，此与给药剂量和时间密切相关。
给犬长期服用本品后，造成食欲减退、厌恶油腻、恶心呕吐和肝功能异常。
基于胆汁酸代谢网络分析中药黄药子的肝毒性_徐英
基于胆汁酸代谢网络分析中药黄药子的肝毒性徐英1, 陈崇崇1, 杨莉1, 2*, 王君明1, 季莉莉1, 2, 王峥涛1, 2*, 胡之璧1(1. 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室,上海 201210; 2. 上海中药标准化研究中心, 上海 201210)摘要: 本文采用超高效液相色谱质谱联用 (UPLC-MS) 胆汁酸代谢网络分析方法评价黄药子乙醇提取物(ethanol extraction, ET) 和单体化合物黄独素B (diosbulbin B, DB) 致小鼠的肝毒性。
通过小鼠毒性实验, ET和DB给药组小鼠都可见明显的肝脏毒性。
血清胆汁酸含量测定结果经主成分分析后, 空白组和给药组区分明显, ET和DB给药组矢量方向一致, 但两者之间也有一定距离, 提示DB是黄药子致肝毒性的主要毒性成分之一。
经偏最小二乘法-判别分析后, 结果表明牛磺酸结合型胆汁酸对表征ET和DB致小鼠肝毒性具有重要的贡献, 且以牛磺酸结合型为主的胆汁酸与ALT和AST具有很好的相关性, 因此以牛磺酸结合型为主的胆汁酸可作为评价黄药子致小鼠肝毒性的生物标识物。
本研究为进一步深入评价黄药子致肝毒性及致毒机制研究奠定了基础。
关键词: 胆汁酸; 黄药子; 黄独素B; 主成分分析; 偏最小二乘法-判别分析; 相关分析中图分类号: R991 文献标识码:A 文章编号: 0513-4870 (2011) 01-0039-06Evaluation on hepatotoxicity caused by Dioscorea bulbiferabased on analysis of bile acidsXU Ying1, CHEN Chong-chong1, YANG Li1, 2*, WANG Jun-ming1, JI Li-li1, 2,WANG Zheng-tao1, 2*, HU Zhi-bi1(1. The MOE Key Laboratory for Standardization of Chinese Medicines and The SATCM Key Laboratory for New Resources andQuality Evaluation of Chinese Medicines, Institute of Chinese Materia Medica, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 201210, China; 2. Shanghai R＆D Centre for Standardization of Chinese Medicines, Shanghai 201210, China)Abstract: Metabolic profile of bile acids was used to evaluate hepatotoxicity of mice caused by ethanol extraction of Dioscorea bulbifera L. (ethanol extraction, ET) and diosbulbin B (DB), separately. Ultra- performance liquid chromatography coupled with quadrupole mass spectrometry (UPLC-MS) was applied to determine the contents of all kinds of endogenous bile acids including free bile acids, taurine conjugates and glycine conjugates. Obvious liver injuries could be observed in mice after administrated with ET and DB.Based on the analysis using principle components analysis (PCA), toxic groups could be distinguished from their control groups, which suggested that the variance of the contents of bile acids could evaluate hepatotoxicity caused by ET and DB. Meanwhile, ET and DB toxic groups were classified in the same trends comparing to control groups in the loading plot, and difference between the two toxic groups could also be observed. DB proved to be one of the toxic components in Dioscorea bulbifera L. Bile acids of tauroursodeoxycholic acid (TUDCA), taurochenodeoxycholic acid (TCDCA), taurocholic acid (TCA), taurodeoxycholic acid (TDCA), cholic acid (CA) and others proved to be important corresponds to ET and DB induced liver injury according to analysis of partial least square-discriminant analysis (PLS-DA) and the statistical analysis showed that there were significant differences between the control groups and toxic groups (P < 0.01). Furthermore, good correlation收稿日期: 2010-08-08.基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (30701104, 81073027); 上海市教育委员会科研创新项目 (09YZ125); 上海市青年科技启明星计划项目(09QA1405500).*通讯作者 Tel / Fax: 86-21-51322506, 86-21-51322519, E-mail: cpuyl@, wangzht@could be revealed between the foregoing bile acids and ALT, AST. It indicated that taurine conjugated bile acids as TUDCA, TCDCA, TCA and TDCA along with CA could be considered as sensitive biomarkers of ET and DB induced liver injury. This work can provide the base for the further research on the evaluation and mechanism of hepatotoxicity caused by Dioscorea bulbifera L.Key words: bile acid; Dioscorea bulbifera L.; diosbulbin B; principle components analysis; partial least square-discriminant analysis; correlation analysis黄药子为薯蓣科属植物黄独(Dioscorea bulbifera L.) 的块茎, 其性寒凉, 味苦, 具有凉血、消瘿、降火、解毒的作用[1]。
黄药子醇提物肝脏毒性部位筛选研究
黄药子醇提物肝脏毒性部位筛选研究
李伟;赵艳;汤青;刘树民
【期刊名称】《中医药信息》
【年(卷),期】2009(026)001
【摘要】目的:通过其毒性作用机制分析中药薯蓣科植物黄药子可能含有的肝毒性组分.方法:将黄药子75%乙醇提取物依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取,采用SD雄性大鼠进行体内筛选和研究,观察不同组分对肝毒性的影响,分析其致毒机理.结果:氯仿部位肝毒性作用强于其它部位.结论:黄药子氯仿萃取物具有显著的肝毒性,且与自由基损伤有关.
【总页数】2页(P28-29)
【作者】李伟;赵艳;汤青;刘树民
【作者单位】黑龙江中医药大学佳木斯学院,黑龙江,佳木斯,154007;黑龙江中医药大学中医药研究院,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学中医药研究院,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学中医药研究院,黑龙江,哈尔滨,150040
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.黄药子不同提取物对肝脏毒性的研究 [J], 樊铁波;刘树民;王加志;赵艳
2.黄药子分离部位的肝脏毒性药理学研究 [J], 赵艳;王家志
3.黄药子对小鼠肝脏毒性的表达及其机理研究 [J], 李玉洁;刘树民;罗明媚;刘红凤
4.黄药子的肝脏毒性研究 [J], 谭兴起;阮金兰;陈海生;王菊英
5.黄药子肝脏毒性研究进展 [J], 宋聿明;苏钰文;江振洲;张陆勇
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基于网络药理学探讨黄药子肝毒性的作用机制
基于网络药理学探讨黄药子肝毒性的作用机制
余雪纯;柯佳群;史欣悦;熊印华
【期刊名称】《江西科技师范大学学报》
【年(卷),期】2022()6
【摘要】本文采用网络药理学方法和分子对接技术探讨了黄药子(RDB)肝毒性的作用机制。
从黄药子中筛选出13种毒性候选化合物、184个肝脏毒性潜在作用靶点。
分子对接结果表明“毒性成分-肝脏毒性作用靶点”网络中的关键化合物8-表黄独素E乙酸酯和黄独素B与蛋白相互作用(PPI)网络中度值最高的靶点雌激素受体1(ESR1)均具有较好的结合力。
黄药子肝毒性体现了中药的多成分、多靶点和多途径特点,为深入研究其机制提供了新的线索。
【总页数】6页(P89-94)
【作者】余雪纯;柯佳群;史欣悦;熊印华
【作者单位】江西科技师范大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.基于网络药理学与分子对接技术探讨益肝草凉茶解酒保肝的作用机制
2.基于网络药理学和实验验证探讨苦参治疗乙型病毒性肝炎的作用机制
3.基于网络药理学和分子对接探讨黄药子-夏枯草-五味子治疗亚急性甲状腺炎的作用机制
4.基于网络药理学和分子对接探讨黄芪治疗病毒性心肌炎的作用机制
5.基于网络药理学和分子对接探讨金银花、连翘药对治疗病毒性心肌炎的作用机制
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基于代谢组学的中药毒性评价研究进展
基于代谢组学的中药毒性评价研究进展高小恒;陈达艳;李喜香;刘效栓【期刊名称】《实用中医药杂志》【年(卷),期】2012(028)011【总页数】2页(P976-977)【作者】高小恒;陈达艳;李喜香;刘效栓【作者单位】甘肃省中医院,甘肃,兰州730050;甘肃省中医院,甘肃,兰州730050;甘肃省中医院,甘肃,兰州730050;甘肃省中医院,甘肃,兰州730050【正文语种】中文【中图分类】R285.1传统药物的毒性评价方法有时难以发现某些药物的潜在毒性，代谢组学通过分析与毒性作用靶位与作用机制密切相关的生物液体中内源性代谢产物浓度的特征性变化，可以确定毒性靶组织、毒性作用过程以及生物标志物［1］。
代谢组学已被应用于中药安全性及毒性作用机制研究，并在中药毒性作用机制的研究中显示出强大的潜力［2］。
现综述如下。
代谢组学(metabonomics)最早是由Nicholson教授及其同事于1999年正式提出，将代谢组学定义为是生物体在病理生理刺激和遗传因素改变的条件下，在不同时间、多方位定量检测其代谢变化，通过测定整个机体的系统代谢图谱来探讨基因功能调控机制的学科［3］。
代谢组学应用高效液相色谱(HPLC)、液相色谱－质谱(LC－MS/MS)、气相色谱－质谱(GC/MS)以及核磁共振(NMR)等高通量、高分辨和高灵敏度的现代分析仪器分析手段，定性定量研究生物体体液中(包括血浆、尿液、组织液和细胞培养液等)的内源性代谢产物即代谢组，并结合模式识别等化学信息学技术，分析生物体在不同状态下(如生理与病理状态、给药前后等)的代谢指纹图谱的差异，获得相应的生物标志物群(Biomarkers)，从而揭示生物体在特定时间、环境下的整体功能状态［2］。
作为一门新兴的学科，代谢组学从研究生物体整体代谢变化出发，全面反映药物作用后生物体内各个组织器官代谢的变化，并可发现药物毒性及不良反应的情况。
因此，代谢组学作为毒理学研究中一种重要的手段，广泛应用于药物毒性早期评价及其机制研究等多项领域［4］。
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基于胆汁酸代谢网络分析中药黄药子的肝毒性徐英1, 陈崇崇1, 杨莉1, 2*, 王君明1, 季莉莉1, 2, 王峥涛1, 2*, 胡之璧1(1. 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室,上海 201210; 2. 上海中药标准化研究中心, 上海 201210)摘要: 本文采用超高效液相色谱质谱联用 (UPLC-MS) 胆汁酸代谢网络分析方法评价黄药子乙醇提取物(ethanol extraction, ET) 和单体化合物黄独素B (diosbulbin B, DB) 致小鼠的肝毒性。
通过小鼠毒性实验, ET和DB给药组小鼠都可见明显的肝脏毒性。
血清胆汁酸含量测定结果经主成分分析后, 空白组和给药组区分明显, ET和DB给药组矢量方向一致, 但两者之间也有一定距离, 提示DB是黄药子致肝毒性的主要毒性成分之一。
经偏最小二乘法-判别分析后, 结果表明牛磺酸结合型胆汁酸对表征ET和DB致小鼠肝毒性具有重要的贡献, 且以牛磺酸结合型为主的胆汁酸与ALT和AST具有很好的相关性, 因此以牛磺酸结合型为主的胆汁酸可作为评价黄药子致小鼠肝毒性的生物标识物。
本研究为进一步深入评价黄药子致肝毒性及致毒机制研究奠定了基础。
关键词: 胆汁酸; 黄药子; 黄独素B; 主成分分析; 偏最小二乘法-判别分析; 相关分析中图分类号: R991 文献标识码:A 文章编号: 0513-4870 (2011) 01-0039-06Evaluation on hepatotoxicity caused by Dioscorea bulbiferabased on analysis of bile acidsXU Ying1, CHEN Chong-chong1, YANG Li1, 2*, WANG Jun-ming1, JI Li-li1, 2,WANG Zheng-tao1, 2*, HU Zhi-bi1(1. The MOE Key Laboratory for Standardization of Chinese Medicines and The SATCM Key Laboratory for New Resources andQuality Evaluation of Chinese Medicines, Institute of Chinese Materia Medica, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 201210, China; 2. Shanghai R＆D Centre for Standardization of Chinese Medicines, Shanghai 201210, China)Abstract: Metabolic profile of bile acids was used to evaluate hepatotoxicity of mice caused by ethanol extraction of Dioscorea bulbifera L. (ethanol extraction, ET) and diosbulbin B (DB), separately. Ultra- performance liquid chromatography coupled with quadrupole mass spectrometry (UPLC-MS) was applied to determine the contents of all kinds of endogenous bile acids including free bile acids, taurine conjugates and glycine conjugates. Obvious liver injuries could be observed in mice after administrated with ET and DB.Based on the analysis using principle components analysis (PCA), toxic groups could be distinguished from their control groups, which suggested that the variance of the contents of bile acids could evaluate hepatotoxicity caused by ET and DB. Meanwhile, ET and DB toxic groups were classified in the same trends comparing to control groups in the loading plot, and difference between the two toxic groups could also be observed. DB proved to be one of the toxic components in Dioscorea bulbifera L. Bile acids of tauroursodeoxycholic acid (TUDCA), taurochenodeoxycholic acid (TCDCA), taurocholic acid (TCA), taurodeoxycholic acid (TDCA), cholic acid (CA) and others proved to be important corresponds to ET and DB induced liver injury according to analysis of partial least square-discriminant analysis (PLS-DA) and the statistical analysis showed that there were significant differences between the control groups and toxic groups (P < 0.01). Furthermore, good correlation收稿日期: 2010-08-08.基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (30701104, 81073027); 上海市教育委员会科研创新项目 (09YZ125); 上海市青年科技启明星计划项目(09QA1405500).*通讯作者 Tel / Fax: 86-21-51322506, 86-21-51322519, E-mail: cpuyl@, wangzht@could be revealed between the foregoing bile acids and ALT, AST. It indicated that taurine conjugated bile acids as TUDCA, TCDCA, TCA and TDCA along with CA could be considered as sensitive biomarkers of ET and DB induced liver injury. This work can provide the base for the further research on the evaluation and mechanism of hepatotoxicity caused by Dioscorea bulbifera L.Key words: bile acid; Dioscorea bulbifera L.; diosbulbin B; principle components analysis; partial least square-discriminant analysis; correlation analysis黄药子为薯蓣科属植物黄独(Dioscorea bulbifera L.) 的块茎, 其性寒凉, 味苦, 具有凉血、消瘿、降火、解毒的作用[1]。
长期服用黄药子后可使肝内转氨酶活性增高, 产生类似中毒性肝炎的临床体征。
研究表明, 黄药子的毒性成分主要是薯蓣皂苷类和以黄独素 B (diosbulbin B, DB) 为代表的二萜内酯类。
据报道黄独素B可引起小鼠急性中毒, 且毒性与给药剂量和时间密切相关[2]。
现代药理研究表明, 黄药子除对肝细胞的直接损害外, 胆汁淤积、胆盐的刺激可能是造成肝损伤的原因之一[3, 4]。
胆汁酸是胆汁的主要成分, 胆汁酸的合成和排泄过程, 经过了肝脏的生物化学和生物物理两大屏障, 机体内整个胆汁酸代谢谱与肝、肠及胆道系统密切相关。
因此, 胆汁酸代谢网络变化对于研究肝损伤机制, 肝毒性中药的毒性研究及其防治药物的筛选和评价等具有重要意义。
目前对黄药子和黄独素B致肝毒性的研究仅限于一些常规的药理(毒理) 实验, 对于中毒前后生物体内的内源性物质的影响未见报道, 因此黄药子及其主要成分黄独素B所致肝毒性是否与内源性胆汁酸代谢网络变化相关值得进一步深入研究。
本研究在黄药子和黄独素B致小鼠肝毒性药理实验基础上, 采用超高效液相色谱-质谱的分析技术(UPLC-MS) 对小鼠血清中的胆汁酸进行准确定量分析并结合相关的统计分析方法, 揭示胆汁酸代谢网络与肝毒性效应之间的关系, 为进一步研究黄药子肝毒性机制奠定基础, 对于其他肝毒性中药的毒性研究、化学性肝损伤的评价等也具有借鉴意义。
材料与方法材料及仪器 黄药子采于安徽青阳县, 经安徽中医学院药学院刘守金教授鉴定为薯蓣科属植物黄独(Dioscorea bulbifera L.) 的块茎。
黄独素B单体(diosbulbin B, DB) 自制, 纯度为97.7%。
谷丙转氨酶(ALT) 和谷草转氨酶 (AST) 购于上海荣盛生物药业有限公司。
分析纯羧甲基纤维素钠购于上海国药集团化学试剂有限公司。
胆酸 (CA)、去氧胆酸 (DCA)、鹅去氧胆酸 (CDCA)、石胆酸 (LCA)、熊去氧胆酸(UDCA)、猪去氧胆酸 (HDCA)、甘氨胆酸 (GCA)、牛磺胆酸 (TCA)、甘氨去氧胆酸 (GDCA)、牛磺去氧胆酸 (TDCA)、甘氨鹅去氧胆酸 (GCDCA)、牛磺鹅去氧胆酸 (TCDCA)、甘氨熊去氧胆酸 (GUDCA)、牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)、牛磺猪去氧胆酸(THDCA)、甘氨石胆酸 (GLCA) 和牛磺石胆酸 (TLCA) 均购于Sigma-Aldrich公司, 化合物结构见图1。