葛根总黄酮成分的超声提取及抗氧化作用
葛根中黄酮提取工艺的优化及抗氧化作用
ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｄ ｔ ｈ ｅ ａ ｎ ｔ ｉ ｏ ｘ ｉ ｄ ａ ｎ ｔ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｍａ ｓ ｓ ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｆ １ ， ２ ， ５ ｍｇ ／ ｍＬ ｏ ｆ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｆ ｌ ａ ｖ ｏ ｎ ｏ ｉ ｄ ｓ
第 ５ ５卷
第 ４期
吉 林 大 学 学 报 （理 学 版 ）
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ（ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｅｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ）
Ｖｏ １ ． ５ ５ Ｎｏ ． ４
２ ０ １ ７年 ７月
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化 作用 ．
关键 词 ：葛根 ；黄 酮 ；秀 丽 隐杆 线 虫（ 线虫） ；抗 氧化
中图分 类号 ： Ｑ９ ４ ６ 文 献标 志码 ： Ａ 文 章 编号 ： １ ６ ７ １ — ５ ４ ８ ９ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ４ — １ ０ ２ ０ — ０ ５
超声波辅助提取葛根中总黄酮及其体外抗氧化性的研究
超声波辅助提取葛根中总黄酮及其体外抗氧化性的研究
朱德艳;陈晗
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2017(038)002
【摘要】利用超声波辅助乙醇浸提法探索提取葛根中总黄酮的最佳条件,并进一步考察葛根总黄酮提取物的体外抗氧化性.结果表明,葛根中总黄酮最佳提取工艺为:温度60℃,提取固液比为1:15(g/mL),70%体积分数的乙醇溶液,提取25 min.在此条件下,葛根中总黄酮的提取率可达2.91 mg/g.葛根黄酮提取物对DPPH·、羟基自由基有明显的清除作用.
【总页数】4页(P62-65)
【作者】朱德艳;陈晗
【作者单位】荆楚理工学院生物工程学院,湖北荆门 448000;荆楚理工学院生物工程学院,湖北荆门 448000
【正文语种】中文
【相关文献】
1.鱼腥草根总黄酮的超声波辅助提取与体外抗氧化性研究 [J], 李湘;吕芳楠;朱洪平;螯琴;孙建波
2.均匀设计优化超声波辅助索氏提取陈皮的总黄酮及抗氧化性研究 [J], 韩鹏虎;董树国;刘佳铭;王薇;刘培根;陆钊;张圣喆
3.超声波辅助提取羊奶果提取物中总黄酮及其抗氧化性研究 [J], 李扬; 邵永明
4.超声波辅助黄芩总黄酮提取及抗氧化性能研究 [J], 辛莹娟;李祯
5.藤三七总黄酮的超声波辅助提取及其抗氧化性研究 [J], 杨申明;王振吉;戴玥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
葛根总黄酮提取工艺比较研究
葛根总黄酮提取工艺比较研究杨丽维;陈颖;张峻【摘要】本研究采用乙醇浸提法和超声波辅助乙醇提取法对葛根黄酮进行提取,以期筛选出较佳的提取方法.通过试验对比,确定乙醇浸提法的工艺条件为乙醇浓度40％,固液比1∶20(g/mL),提取温度50℃,提取时间30 min.超声波辅助提取法的工艺条件为超声功率200 W,乙醇浓度40％,固液比1∶20(g/mL),提取温度50 ℃,超声时间20 min.在条件相近的前提下,超声波辅助提取法的葛根黄酮提取率为8.03％,比乙醇浸提法提取率提高了54％.可见,超声波辅助提取法提取效果较好,具有节时、简便、提取率高等优点.【期刊名称】《天津农学院学报》【年(卷),期】2016(023)003【总页数】4页(P27-30)【关键词】葛根;黄酮;乙醇浸提;超声波辅助提取【作者】杨丽维;陈颖;张峻【作者单位】天津市林业果树研究所,天津300384;天津市林业果树研究所,天津300384;天津市林业果树研究所,天津300384【正文语种】中文【中图分类】TS218葛根（Pueraria lobata（Willd.）Ohwi），别名鹿藿、黄斤、鸡齐，为豆科植物野葛的根，是一种常用的传统中药，也是药食两用的天然植物资源[1]。
理化分析表明，葛根中主要有效成分为黄酮类物质以及异黄酮类化合物，其中包括葛根素、大豆甙等。
这些有效成分具有预防心脑血管疾病，舒张平滑肌解痉，抗促癌及诱导癌细胞分化，抗氧化，解酒、解热及增强机体免疫力等功能[2]。
随着医药科学的发展，葛根有效成分的提取及开发利用价值备受研究者的关注。
葛根的主要应用一方面是加工各种淀粉类产品，二是提取葛根黄酮，将其作为食品、生物医药的重要原料[3]。
目前报道从葛根中提取有效成分的方法主要有：加热回流法、渗漉法、碱液法、浸提法（包括水提法、有机溶剂提取）、酶解法和物理强化辅助提取等，但普遍存在能耗大，时间长，效率低等问题[4]。
葛根中总黄酮的测定以及葛根片剂的压制
葛根中总黄酮的测定以及葛根片剂的压制一，葛根简介葛根是常用的传统中药，异黄酮类化合物，淀粉和膳食纤维是葛根中所含的三种主要成分。
根据国内现代医学研究表明：异黄酮类化合物在增强免疫力、预防心血管疾病、降低血糖等方面有显著效果，对冠心病、心绞痛、突发性耳聋、中老年骨质疏松症和妇女更年期综合征等也有特殊功效。
国内外学者从葛根中分离鉴定出许多化学成分，主要包括异黄酮类、三帖类及芳香类化合物。
二，葛根黄酮及其苷类化合物葛根的药用成分研究较多的是野葛，食用成分研究较多的是粉葛。
葛根中主要有效成分是异黄酮类化合物以及少量的黄酮类物质，包括：：大豆苷元(daidzein) 、大豆苷(daidzin) 、葛根素(puerarin) 、金雀花异黄素(genistein) 、鹰嘴豆芽素A (biochanin A) 、染料木素苷( genistin) 、芒柄黄花素( formononetin) 、芒柄花苷(ononin) 、3′- 羟基葛根素(PG1) 、葛根素木糖苷(PG2 ) 、3′- 甲氧基葛根素(PG3) 、大豆黄素4′,7-双葡萄糖甙、葛根素芹菜糖苷(mirificin) 、异甘草素( isoliquiritigeni n)、3′- Methoxydaidzin等30余种异黄酮。
在葛根的有效成分中,最受关注的是葛根素、大豆苷元等。
葛根素能扩张冠状动脉血管,降低血脂,增强心肌收缩力,降低血压,防治高血压头晕、头痛、颈项疼痛。
大豆素具有抗乙酰胆碱作用,被认为是葛根主要功效之一解痉作用的有效成分。
大豆素、大豆苷、葛根素都能抑制人体对酒精的吸收,而前两者效果更加显著。
大豆素、大豆苷、葛根素、金雀花异黄素、鹰嘴豆芽素A 具有抗氧化、抗癌及抗炎作用。
体外试验表明它们的糖配基抗氧化活性比糖甙强,同时鹰嘴豆芽素A 显示了非常强的抗癌活性。
葛根总异黄酮含量随产地和品种而变化,野葛中总黄酮含量一般为7. 6 % 。
三，葛根中总黄酮的提取与含量测定总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。
葛根总黄酮的提取及抗氧化特性研究
2.2 乙醇提取法提取条件优化
表1 正交试验提取结果及极差分析表
序 A乙醇浓度 B体积倍数
号
/%
S:l
C提取时 间 /min
葛根素得 率 /%
1
1(30)
2
1
3
1
4
2(60)
5
2
6
2
7
3(90)
8
3
9
3
K1
12.953
K2
10.669
K3Leabharlann 8.934R4.019
1(1：6) 2(1：8) 3(1:10)
邻苯三酚溶液、浓度梯度为2.0 g/L，1.5 g/L，1.0 g/
32对乙醇回流提取法的提取条件进行了摸索在在乙醇浓度为30料液比为11080下回流提取9033对葛根总黄酮乙醇提取物纯化后进行了颜色反应和薄层色谱等定性表征结果表明葛根总黄酮粗提物中含有葛根素粗提物中含有黄酮类化合34以新鲜豆油初始po葛根总黄酮的添加量为004利用80烘箱加速试验对葛根总黄酮的康油脂氧化的活性考察葛根总黄酮比空白样的油脂氧化诱导期延长60左右
powder iron[J], J. Food Sci.，1990，55(3):869-871. [6] 邓舜扬.食品保鲜技术.[M].北京：中国轻工业出版 社,2006,295-303. [7] 张志健，李新生.食品防腐保鲜技术.[M].北京：科学 技术文献出版社，2006，194-207. [8] 周霞凤.一种保鲜剂的研制及名优绿茶贮藏条件的研 究[D].华中农业大学园艺园林学院,2007. [9] 王钦德，杨坚.食品试验设计与统计分析[M].北京： 中国农业大学出版社，2003，331-351. [10] 林灿煌，张灿河.正交试验设计优化脱氧剂配方亚硫 酸盐系脱氧剂的研究 [J].福建化工，2003（4）：1-4. [11] 陈红兵，高金燕.D-饱和试验设计优化脱氧剂配方I.铁 系脱氧剂的研究[J].中国食品添加剂，1996，（3）：1-5.
不同提取方法对葛根总黄酮得率的影响
一
２ ４一 ３
江苏农业科学
２１ ０２年第 ４ Ｏ卷第 １ 期
表 １ 紫外分 光光度法测定不同提取物总黄酮含量的ｂ较
声 与冷浸结合使用法提取葛根总黄酮 。 １２ １ １ 冷浸法 ．．． 葛根粉各 ５ （ ） 提取溶剂为 ９ ％ 乙 ０ｇ ３份 ， ５ 醇各 ２ ０ｍ ， ５ Ｌ 常温浸泡 ２ 、８ ７ ， １ ４ ４ 、２ｈ 隔 ２ｈ搅拌 １ ， 次 减压过 滤， 回收乙醇， 药液浓缩至干 ， 得葛根提取物。 １２ １２ 超声法 葛根粉各 ５ （ ） 提取溶剂为 ９ ％ 乙 ．．． ０ｇ ３份 ， ５ 醇 各 ２０ｍ ， ５ Ｌ 分别 超 声 （ 率 ２０Ｗ ） 取 ２ 、０ １０ｍ ｎ 温 功 ０ 提 ０ ６ 、２ ｉ， 度为 ５ ０℃ ， 减压 过滤 ， 回收 乙醇 ， 药液浓 缩 至干 ， 葛根 提 得
研 究 。 Ｅ—ｍ ｉ ｑｕｕ ｃｔ．ｄ ．ｎ ａｌ ｉｌ＠ ｘ ｅｕ ｃ ｏ ： ｃ
１２ Ｉ 不同方法提取葛根 总黄酮 ． ．
采用冷浸法 、 超声法 、 超
（ 上接 第 ２ ２页） ３
可取性 。 ３ 结论
［ ］ ｅｒ ａＳＮ， ｏｋｖ Ｙ，ａ ｈｒｖＡ Ｇ ｘｄｔｅｄｌ ｎｉａｉ ３ Ｐｔ ｖ Ｖ ｌｏａＩ Ｚ ｋａｏ ．Ｏ ｉａ ｖ ｅｉ ｉｅｔ ｎｏ ｏ ｉ ｇｉ ｏ ｆ ｌ ｂｒ Ｊ ．Ｒ ｓｉ ｏｒ ｌｆ Ａｐｌ ｄＣ ｅ ｓｙ ２０ ７ ８ ： ｆｘｆ ｅ［ ］ ｕｓ ｎＪｕ ａ ｏ ｐｉ ｈｍｉｒ，０ ３，６（ ） ａｉ ａ ｎ ｅ ｔ
Ｂｏ ｏｗｅＴ ｃ ｎｌ ｙ２０ ，８ １ ：９—９ ． ｉ ￣ｓｕ ｈｏｏ ，０ １７ （ ）８ ｅ ｇ ４
［］ ７ 熊和平 ， 喻春 明， 王玉福 ， 麻类技术 １０问［ ． 等． ０ Ｍ］ 北京 ： 中国农
葛根总黄酮的提取及其抗氧化性能研究
周率， 周武， 张彬 ， 黎新江， 欧阳辉 （昌 学 品 学 技 国 重 实 室江 南 ３ｏ） 桂 南 大 食 科 与 术 家 点 验 ，西 昌３４ ｏ７
摘要 【 目的１ 提取 葛根 总 黄酮 的最佳 工 艺条件 ， 究其抗 氧化 性能 。 法１ 乙醇提 取 葛根 总黄 酮 ， 过 正 交试验 ， 究影 响 葛根 优化 研 『 方 用 通 研 总 黄酮提 取 率的 因素 ， 定最佳 提 取 工 艺参数 ； 胶 柱 层析 法纯 化 葛根 总 黄 酮提 取 物 ， 用 Ｂ Ｃ 确 用硅 采 Ｐ Ｌ法 测 定 葛根 总黄 酮 的抗氧 化 性 能 。 果】 交 实验 表 明 ， 响葛根 总黄 酮提取 率 的 ４ 因素 的强 弱顺 序为 ： ＞ ［ 结 正 影 个 温度 乙醇 浓度＞ 固液 比＞ 取 次数 。 取 葛根 总黄 酮 的最 提 提 佳 工 艺条件 为 ： 乙醇 浓度 ７ ％， Ｏ 固液 比为 １ ， ： 提取 次 数 ３次 ， 次 ３ｈ 温度 ８ ８ 每 ， Ｏ℃， 葛根 总 黄 酮的提取 率为 ２ ． 样 品 纯度 为 ｌ． ２ ％， ９ ５ ％。 ５ ｆ 用Ｂｃ 结论 Ｐ Ｌ法测定 葛根 总黄酮对超 氧 自由基 （ ２ ） 羟基 自由基 （Ｏ 的抑 制率 ， 果证 明葛根 总黄酮具 有一定 的抗氧 化作 用。 ０＿ 和 ・ ・Ｈ） 结
葛根总黄酮的提取及抗氧化性能评价_胡崇琳
[4]余秀玲.花粉的活性成分[J].食品工业科技,2007,28(4):236-238[5]王昭晶,罗巅辉.麦冬水溶性多糖OPA 的分离纯化及其抗氧化活性研究[J].现代中医药,2008,28(5):77-79[6]茆广华,吴向阳,仰榴青,等.苯酚-硫酸法测定银杏外种皮多糖的含量[J].食品科技,2008,33(6):197-199[7]Shimada K,Fujikawa K,Yahara K,et al.Antioxidative properties of xanthone on the auto oxidation of soybean in cylcodextrin emulsion [J].J Agric Food Chem,1992,40(6):945-948[8]Oyaizu.Studies on product of browning reaction prepared from flucose amine[J].Japanese Journal of Nutrition,1986,44:307-315[9]周海华,马海乐.云芝多糖的体外抗氧化活性研究[J].食品研究与开发,2008,29(3):44-48[10]竺巧玲,杨文鸽,楼乔明,等.提取工艺对龙须菜多糖得率及其抗氧化性能的影响[J].食品科技,2008,33(2):162-164[11]王光慈.食品营养学[M].北京:中国农业出版社,2001:190-191葛根总黄酮的提取及抗氧化性能评价Study on extracting process of Pueraria flavone and evaluation ofanti-oxidant activityHU Chong-lin,LIU Dong-li,WANG Rui-xia,LIU Xiao-yu *,LI Ai-fang(College of Food Science and Technology,Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070)Abstract:The optimal process of extracting flavone from Pueraria by ethanol was studied in this paper,andthe total content of flavones was 11.7%.Meanwhile,the anti-oxidant activities of the extraction liquid were also studied by Luminol-H 2O 2chemiluminescence system and the optimal conditions were obtained by orthogonal胡崇琳，刘东莉，王蕊霞，刘晓宇*，李爱芳（华中农业大学食品科技学院，武汉430070）摘要：以野葛根为原料，以醇回流法提取总黄酮，得总黄酮含量为11.7%。
终稿-葛根总黄酮超声提取
目的：筛选超声法提取葛根总黄酮的最佳工艺条件。
方法：采用均匀设计法考察了乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取温度、超声提取次数等五个因素对葛根总黄酮提取的影响；利用紫外-可见分光光度法测量葛根总黄酮的含量；以葛根总黄酮最终得率为指标进行工艺条件的优化，结果：结果表明，最佳工艺条件为乙醇浓度75%，乙醇用量20 ml/g，提取时间40 min，提取温度68 ℃，超声5次。
该提取工艺省时、节能、操作简便、得率高。
结论：影响超声辅助提取葛根总黄酮的主要因素有乙醇浓度、乙醇用量、提取温度、提取时间和超声处理次数，各因素对葛根总黄酮得率的影响强弱顺序为：乙醇浓度＞提取温度＞乙醇用量＞超声处理次数＞提取时间。
关键词：超声法；提取；葛根；总黄酮；工艺条件；均匀设计Objective: Optimize the extraction condition of total falconoids from Radix Puerariae Lobatae by ultrasonic wave，Methods: Choosing the uniform design as method, the experiment was carried out to study the influence of alcohol content, quantity of solvent, extraction time, extraction temperature and operation times on the result of extraction. The content of total falconoids of Radix Puerariae Lobatae was determined by ultraviolet-visible spectrophotometry. The optimal extraction condition was selected with the extraction yield of total Radix Puerariae flavonoids as marker. Results: The results indicated that the optimum process was: extracting with 75% alcohol, the quantity of solvent 20 ml/g, extraction time 40 min, temperature at 68 ℃, 5 operation times. Compared with the traditional extraction methods, this extraction process is time- and energy saving, and also convenient and efficient.Conclusion: The influence of alcohol content, quantity of solvent, extraction time, extraction temperature and operation times is the primary factor on the extraction of total flavonoids from radix Pueraria Lobata Ohwi by ultrasonic wave. Various factors to the extraction yield of total Radix Puerariae flavonoids influence strong and the weak order: alcohol content > extraction temperature > quantity of solvent > operation times > extraction time.Key words: ultrasonic wave extraction; Radix Puerariae Lobatae; total flavonoids; extraction condition; uniform design.葛根总黄酮超声提取学生：指导教师：正文1 前言葛根Pueraria是豆科：（或称蝶形花科）多年生落叶藤本植物野葛Pueraria Lobata Ohwi 或甘葛藤（粉葛）Pueraria thomsonu Benth 的根或块状茎。
葛根总黄酮的两种不同提取方法比较
第25卷第2期2002年4月鞍山钢铁学院学报Journal of Anshan Institute of I.&S.T echnologyV ol.25N o.2Apr.,2002葛根总黄酮的两种不同提取方法比较赵丽娟,王翠艳,陈崇军(鞍山师范学院化学系,辽宁鞍山 114005)摘 要:对超声波和回流法两种不同提取葛根中总黄酮方法进行了探讨,测定了葛根中总黄酮的质量百分含量.试验结果表明,超声波提取方法较回流法提取率高,乙醇做溶剂提取效果好.超声波提取总黄酮的最佳操作条件是95%乙醇,时间25min,温度5℃,3次.关键词:葛根;黄酮;提取方法;超声波提取中图分类号:O655 文献标识码:A 文章编号:1000Ο1654(2002)02Ο0105Ο03 葛根为豆科植物的块根,将根洗净,刮去外皮,纵切或横切成块片,晒干或微火烘干即可.春季清明前采挖,质佳;秋季霜降后采挖,质差.以块大、质坚实、色白、粉性足、纤维少者为佳.根据文献[1]记载,其所含有的黄酮类物质,具有防止高血压及动脉硬化,活血化瘀,抗肝脏毒,抗炎,祛痰,解热,提高机体免疫功能,抗菌,抗病毒,缓解高血压患者的头痛等多种药理作用[2].葛根的提取方法有回流法、冷浸法、铅盐沉淀法等[3],其中冷浸法、回流法较铅盐沉淀法收率高,且操作简便;冷浸法较回流法收率高,但费时.本文在此基础上采用超声波提取方法[4],并与传统的回流提取方法比较;同时对超声波提取方法的各项影响因素进行了研究.结果表明,超声波提取法不但提取率高且节省时间.1 试验部分111 仪器与药品 仪器:G BC916型紫外可见分光光度计(澳大利亚G BC公司);恒温水浴槽(深圳天南海北实业有限公司);上皿电子天平(上海天平仪器厂);旋转蒸发器(上海申科机械研究所);SHZ-D循环水式真空泵(河南巩义市英峪豫华仪器厂);K Q-250A型渣油超声波清洗器(昆山市超声波仪器厂). 药品:95%乙醇(分析纯);葛根(鞍山药材采购站).112 葛根中黄酮的提取 采用回流热提取法和超声波提取法.11211 回流热提取法 分别称取葛根5g置入3个圆底烧瓶中,分别加入蒸馏水各30ml,加热回流3次(时间分别为1h,015h,015h),趁热过滤,合并3次滤液,浓缩,加95%乙醇,充分搅拌,静置,过滤,减压蒸馏回收乙醇,得浓缩液. 分别称取葛根5g置入3个圆底烧瓶中,分别加入95%乙醇各30ml,加热回流3次(时间分别为1 h,015h,015h),趁热过滤,合并3次滤液,减压蒸馏回收乙醇,得浓缩液.11212 超声波提取法 分别称取葛根5g置于3个锥形瓶中,分别加入30ml95%乙醇,超声波提取3次(时间各为25min,温度控制在5℃),过滤,合并3次滤液,减压蒸馏回收乙醇,得浓缩液.11213 超声波提取过程各种因素的影响 (1)时间因素:分别称取葛根5g置于5个锥形瓶中,分别收稿日期:2002-10-31.作者简介:赵丽娟(1963-),女,河北芦龙人,讲师.加入30ml 95%乙醇,在0℃时,超声波提取,时间分别为10min ,15min ,20min ,25min ,30min ,过滤,减压蒸馏回收乙醇,分别得浓缩液.(2)温度因素:分别称取葛根5g 置于5个锥形瓶中,分别加入30ml 95%乙醇,分别在0℃,5℃,10℃,15℃,20℃超声波提取,时间25min ,过滤,减压蒸馏回收乙醇,分别得浓缩液.(3)提取次数因素:分别称取葛根5g 置于5个锥形瓶中,分别加入30ml 95%乙醇,在0℃,超声波提取分别提取1次,2次,3次,4次,5次,每次10min ,滤液分别合并,减压蒸馏回收乙醇,分别得浓缩液.113 葛根中总黄酮质量分数的测定 用精芦丁做标准曲线[5],测定上述各提取法提取的葛根总黄酮的质量分数.2 试验结果 按前述11211和11212步骤试验,表明用两种不同提取法得到的总黄酮质量分数是不同的,如表1所示.按前述11213步骤试验,得出各条件因素对超声波提取法提取总黄酮质量分数的影响情况,如表2所示.表1 不同提取法提取的总黄酮质量及质量分数T ab.1 Mass and Mass -Percent of T otal Anthoxanthin Extroted by T w o Different Methods 方法条件时间Πh总黄酮质量Πg总黄酮质量分数Π%回流法水20102682015495%乙醇201047650195超声波法95%乙醇温度5℃112501049510199表2 超声波法提取总黄酮时各条件因素的影响T ab.2 In fuient Factors of T otal Anthoxanthin Extracted by Ultras onic Method 条件因素总黄酮质量Πg总黄酮质量分数Π%最佳质量分数Π%时间Πm in 100103108016215010378001752001040580181250104696019430010466601930194温度Π℃0010473401955010528811061001041800184150103740017420010030001601106提取次数Π次1010310001622010370001753010414401834010417501845010424001850183・601・ 鞍山钢铁学院学报 第25卷3 结 论 (1)用超声波法提取葛根总黄酮比回流法提取率高,操作简便,节省时间. (2)用95%乙醇比用水做溶剂提取率高. (3)超声波法提取时间25min ,温度5℃,提取率高.连续提取1,2,3次,提取率增加幅度较大;连续提取4,5次,提取率虽然增加,但增加幅度很小,表明连续提取3次已基本将总黄酮从葛根中提取完毕.因此,超声波连续提取3次即可.参考文献:[1] 吴家荣,邱德文,韦克,等.中国常用中草药彩色图谱[M].贵阳:贵州科技出版社,1997.41.[2] 姚新生,赵守训,潘德济,等.天然药物化学[M].北京:人民卫生出版社,1996.191-195.[3] 郭建平,孙其荣,周全,等.葛根总黄酮不同提取工艺的探讨[J ].中草药,1995,26(10):522,523.[4] 张新,王志伟,马琳.娑罗子中总皂甙的比色测定[J ].天然产物研究与开发,2000,12(5):28-30.[5] 吴红菱,刘先林,龚坚,等.不同季节银杏叶中总黄酮的测定[J ].中草药,1995,26(8):445.Comparation of Tw o Different Methods for Extraction of Total Anthoxanthinfrom Pueraria Thomsonii BenthZH AO Li -juan ,WANG Cui -yan ,CHEN Chong -jun(Dept.of Chemistry ,Anshan T eachers C ollege ,Anshan 114005,China )Abstract :This paper discusses extraction of the anthoxanthin content from pueraria thoms onii benth L by using tw o different methods :altros onic and reflux ,and measures the mass percentage of the total anthoxanthin in pueraria thom 2s onii benth L.The results show that the rate of ultras onic extraction is much higher than that of reflux ,esp.,when ethonal is used as diss olvent.The optimal conditions under which the total anthoxanthin is extracted :95%ethonal ,duration 25min ,tem perature 5℃and 3operation times.K ey Words :pueraria thoms onii benth L ;anthoxantion ;method of extraction ;ultras onic extraction(R eceived October 31,2001)待发表论文预报可复用构件的制作和组装李桂丽,刘 悦,田 莹(鞍山钢铁学院计算机科学与工程学院,辽宁鞍山 114002)摘 要:软件复用和基于构件的软件开发是软件工程化开发和工业化生产的必然趋势,可复用构件的制作和集成组装是其中涉及的两个重要活动.首先提出软件复用的条件、环境和注意问题,其次提出支持接口连接式和插头插座式体系结构的构件模型和基于体系结构的构件集成组装框架,再次给出构件的制作和组装过程.・701・第2期 赵丽娟,等:葛根总黄酮的两种不同提取方法比较。
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[收稿日期] 2003-04-10[作者简介] 裴凌鹏(1976—),男,北京市人,北京联合大学应用文理学院助教,理学硕士,从事食品生物技术、基因工程、分子细胞生物学教学与研究。
葛根总黄酮成分的超声提取及抗氧化作用裴凌鹏,李文卅,唐粉芳(北京联合大学应用文理学院,北京 100083)[摘 要] 采用超声波方法从葛根中提取总黄酮,用正交法确定了超声波方法提取总黄酮的最佳工艺条件为:乙醇浓度70%,超声波提取25min ,提取次数3次,温度25℃;同时测定了在最佳条件下提取的葛根总黄酮对DDPH 自由基的清除率,证实葛根总黄酮具有一定的抗氧化作用,是一种天然的抗氧化剂。
[关键词] 葛根;总黄酮;超声萃取;抗氧化作用[中图分类号] Q 503 [文献标识码] A [文章编号] 100520310(2003)0320025203 利用超声波产生的强烈振动、高加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等,都可加速药物有效成分进入溶剂,从而提高提出率,缩短提取时间,并且避免高温对提出成分的影响。
[1,2]葛根为豆科葛属植物,在我国各地均有分布,资源丰富。
其体内的总黄酮具有抗氧化作用、抑菌活性、抗癌作用、能够防治骨质疏松、改善妇女更年期等作用。
[3,4]因此,研究葛根总黄酮的提取、优化工艺流程、开发天然抗氧化剂日益成为人们关注的焦点。
1 实验111 主要仪器和试剂K Q 2100超声波清洗器(昆山市定山湖检测仪器厂);UV8500紫外-可见分光光度计(上海天美仪器公司);冰冻真空干燥仪(美国);芦丁(北京化学试剂公司);葛根(重庆地区);无水乙醇;大孔吸附树脂(天津农业股份公司)。
112 超声波提取工艺流程原料→破碎→超声提取→过滤→滤液过柱→水洗脱→乙醇洗脱→减压浓缩→真空干燥→总黄酮。
113 葛根总黄酮质量分数的测定11311 标准曲线的建立精密称取芦丁对照品10mg ,于50m L 容量瓶中,加70%乙醇溶液,并稀释至刻度。
吸取上述溶液1、2、3、4、5m L 分别置于50m L 容量瓶中,以5m L 70%乙醇精密加水至50m L 稀释。
同时以上述溶剂为对照,在250nm 处进行比色测定。
用最小二乘法以对照品芦丁质量浓度与吸光度作线形回归,得芦丁质量浓度c (g ΠL )与吸光度A 的关系:c =010217A -010007,r =019982。
11312 总黄酮含量的测定准确称取葛根提取物110mg 置于50m L 容量瓶中,加70%乙醇溶解,加70%乙醇至5m L ,再加水至刻度混匀,同时以110m L 70%乙醇精密加水至10m L 的溶液做空白对照,在250nm 处测定吸光度。
代入下列公式计算:总黄酮质量分数=(质量浓度×50)Π原料质量×100%。
11313 提取率的计算提取率=提取物质量(g )Π原料质量(g )×100%。
114 葛根总黄酮的提取称取4份葛粉,每份为10g ,分别加入60m L 乙醇中依据112工艺流程通过正交法对葛根总黄酮在不同超声时间、不同提取温度、不同超声次数、不同醇浓度等4个因素进行研究,同时将4份提取物合并后计算提取率。
115 大孔吸附树脂分离提取总黄酮[5,6]将所得葛根提取物分别加入适量蒸馏水,搅匀,分别加入1g CaCl 2,静止过夜,次日离心。
分别收集上清液,用氨水调pH 至7～8,分别加入大孔吸附树脂中,调节流速5m L Πmin ,用蒸馏水洗去杂质,以乙醇为流动相解吸附,回收乙醇,得总黄酮提2003年9月第17卷第3期总53期北京联合大学学报(自然科学版)Journal of Beijing Union University (Natural Sciences )Sep.2003V ol.17N o.3Sum N o.53取物。
116 葛根总黄酮抗氧化作用11611 DPPH溶液的配制称取20mg DPHH用无水乙醇溶解并定容于250m L容量瓶中,使DPPH浓度为2×10-4m olΠL。
11612 葛根总黄酮溶液的配制称取以乙醇为溶剂超声25min提取的葛根总黄酮25mg,用无水乙醇定溶至25m L,制成1gΠL的溶液,再将其稀释5倍制成012gΠL的葛根总黄酮无水乙醇溶液。
11613 葛根总黄酮清除自由基活性的测定将葛根总黄酮溶液2m L与2×10-4m olΠL DPPH 溶液均匀混合。
30min后用溶剂作参比测定其吸光度Ax(加抗氧剂后DPPH溶液的吸光度),同时测定2×104m olΠL DPPH溶液与2m L溶剂混合后的吸光度Ay(未加抗氧剂DPPH溶液的吸光度),以及2m L提取液与2m L溶剂混合后的吸光度A v(提取液在测定波长的吸光度)。
依据下列公式计算抑制率:抑制率=[1-(Ax-A y)ΠA v]×100%。
2 实验结果211 葛根黄酮超声波提取结果见表1。
212 葛根总黄酮抗氧化作用结果依照(11513)方法测定结果为葛根总黄酮的浓度为2gΠL和016gΠL时对DPPH自由基的清除率分别为74126%和43181%。
3 讨论1)采用乙醇作为溶剂对其不同浓度、不同超声时间、不同超声次数以及不同超声温度等4个因素进行综合分析,可以得出葛根总黄酮超声提取的最佳条件为70%乙醇、25℃、3次提取、25minΠ次。
此工艺下所得葛根总黄酮提取率为1010%,质量分数为5016%。
2)采用超声法从葛根中提取总黄酮成分与冷浸法相比该方法提取速度快,容易实现产业化;而与回流法相比节省能源、所得产物总黄酮质量分数高[7]。
3)最佳条件下提取的葛根总黄酮在浓度016 gΠL时对DPPH自由基的清除率仍为43181%,表明葛根总黄酮是一种天然的抗氧化剂,具有较强的抗氧化作用。
表1 正交法对超声波提取工艺流程的优化溶剂tΠmin提取次数θΠ℃m总黄酮粉末Πg提取率Π%m总黄酮Πg w总黄酮Π% 50%乙醇25125218471111063712 60%乙醇25125311271811193811 70%乙醇25125317691411724518 80%乙醇25125316991211564212 90%乙醇2512531629101150411570%乙醇10125110521601363412 70%乙醇15125117741401673716 70%乙醇20125214661111014111 70%乙醇25125317391311714519 70%乙醇3012531769141176461870%乙醇25110219271511204110 70%乙醇25115312481111384217 70%乙醇25125317291311714519 70%乙醇25130316591111714618 70%乙醇2513531418151150441170%乙醇25125317391311174519 70%乙醇25225318991711914912 70%乙醇253254101101021015016 70%乙醇254254110101221015019 70%乙醇25525410710112107511162北京联合大学学报(自然科学版)2003年9月[参考文献][1] 郭孝武.超声技术在中草药成分提取中的应用[J ].中草药,1993,24(10):548.[2] 王昌利,杨景亮.超声提高芦丁得率的实验研究[J ].陕西师范大学学报,1991,19(3):89.[3] 孙克杰,汤坚.黄酮化合物在不同氧化体系中的作用研究[J ].食品科学,2001,22(3):22-26.[4] 中国人民解放军第一五七医院中草药研究组.山楂[J ].中药通讯,1975,(5):46-55.[5] 张培成.山楂中新黄酮化合物的分离与结构鉴定[J ].中国药物化学杂志,1999,9(3):214-215.[6] 邓少伟,马双成.用大孔吸附树脂分离川弓总提物[J ].中草药,1999,30(1):23-24.[7] 郭建平,孙其荣,周全,等.葛根总黄酮不同提取工艺的探讨[J ].中草药,1995,26(10):552-523.Study on Extraction of Total Flavone From Pueraria LobataOhwi by U ltrasonic W avePEI Ling 2peng ,LI Wen 2sa ,T ANG Fen 2fang(C ollege of Applied Sciences and Humanities of Beijing Union University ,Beijing 100083,China )Abstract :The total flav ones can be extracted from Pueraria Lobata Ohwi by ultras onic wave.According to the result of orthog onal design ,the best reaction condition is :alcohol =70%,time of extracting 25min ,3operation times ,tem pera 2ture 25℃.Meanwhile ,the Antioxidative E ffect of Pueraea total flav one in the optimum technological conditions was determined by the method of DPPH.Pueraea total flav one has a stronger antioxidative effect and is a natural antioxdi 2ant.K ey w ords :pueraria lobata ohwi ;total flav one ;ultras onic wave ;antioxidative effect(上接第8页)Studies on the Chelation of A β1240and Cu(Ⅱ)and the N eurotoxicity of Cu(Ⅱ)A β1240CompoundsJ I ANG Zhao 2feng 1,ZH AO Jiang 2yan 1,ZHE NG Y ing 2guang 2,Y ANG Han 2yi3(11C ollege of Applied Sciences and Humanities of Beijing Union University ,Beijing 100083,China ;21ESR R oom ,the Center for Experimental Analysis of Jilin University ,Changchun 130021,China ;31Department of Biochemistry ,C ollege of Basic Medical Science of Jilin University ,Changchun 130021,China )Abstract :T o investigate the mechanism of A βneurotoxicity ,and Cu (Ⅱ)A β1240was prepared and its activity in vitro and in viv o was observed 1ESR spectra of Cu (Ⅱ)A β1240shows Cu (Ⅱ)binded by the peptide 1Cu (Ⅱ)A β1240can conve 2rt O 2in water and O ・—2in Xanthine Oxidase ΠXanthine system into H 2O 21α2Helix (%)of Cu (Ⅱ)A β1240decreased from1513%(A β1240)to 914%1The injected Cu (Ⅱ)A β1240into hippocam pus on rat behavior was m ore significant than that in 2jected Cu (Ⅱ)A β1240only (p <0105)1The inhibition of Cu (Ⅱ)A β1240on growing of hippocampus neurons of neonatal rat in culture was m ore significant than that only with A β12401The results suggest that the neuronal damage of the reactive oxygen species activated by the binding of Cu (Ⅱ)and A β1240may be one of the mechanism of A βneurotoxicity in AD brain 1K ey w ords :Cu (Ⅱ)A β1240;neurotoxicity ;mechanism72第17卷第3期裴凌鹏等:葛根总黄酮成分的超声提取及抗氧化作用。