淋巴细胞亚群检测在儿科的应用分析

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侵袭性真菌感染儿童外周血T淋巴细胞亚群变化分析

侵袭性真菌感染儿童外周血T淋巴细胞亚群变化分析
后 比较有显著性差异 ( P < 0 . 0 1 ) , 见表 1 。
3 讨

1 . 2 . 1 血清 1 , 3 - 3 1 一 D葡聚糖( B G) 检测
采用光度法检测患
真菌 为条件致病 菌 ,对 免疫功能正常的人群危害不大 ,
Hale Waihona Puke 儿 血清 1 , 3 - 3 1 一 D葡 聚糖浓度 。 用一 次性无菌无热原真空采血 管采血 4 m l ,分 离血清后取 1 0 0 p , 1 加入 0 . 9 m l 样品处理液 ,
真菌侵犯皮下组织 、 黏膜 和内脏所引起的感染性疾病 , 可 以是 单一器官感染 , 也 可以是 2个或 2个 以上器官 ( 组织 ) 受 侵犯 的系统性真菌感染 , 其 病死 率很 高 , 近年来国内外研究较多 。 笔者对 I F I 儿童进 行 1 , 3 - 3 1 一 D葡聚糖 ( B G) 和 外周血 T淋巴 细胞亚群检测 ,以探讨其与 T细胞 亚群改变之间的关系 , 为 临床儿童侵袭性真菌感染的诊 断和治疗提供具有一定临床价 值 的实验依据。
1 . 2 方 法
与对照组 比较 , 感染组儿童 的 1 , 3 - 1 3 一 D葡聚糖含量异常 增高 , C D 4 + 表达显著 降低而 C D 8 + 表达显著升高 , 导致 C D 4 + /
C D 8 + 下降。 按文献 [ 1 ] 抗真菌治疗一周后 , 随着患病儿童症状 的改善 , 其血浆 1 , 3 - 3 1 一 D葡聚糖含量降低 , C D 4 + 表达显著升 高, C D 8 + 表达则显著下降 , 使得 C D 4 + / C D 8 + 升高 ; 同组治疗前
1 。 2 . 2 T淋 巴细胞亚群检测 取外周血 2m l 用E D T A — K 2 抗

T淋巴细胞亚群检测,帮助了解你的免疫力

T淋巴细胞亚群检测,帮助了解你的免疫力

一次传染病的爆发,就可充分体现免疫系统的重要作用。

没有什么灵丹妙药,也没有什么神奇的事情发生,唯一能依靠的,就是免疫系统。

人的身体抵抗力强,就不容易生病。

反之,许多疾病就会趁虚而入。

所以身体的免疫力和疾病的发生和发展有很大的关系。

淋巴细胞亚群是一种反映自身免疫力的指标,也是进行人体免疫功能研究的一种主要方向,它可以用来判定人体的细胞免疫和体液免疫的程度,反应出人体目前的免疫功能、状态和平衡水平,还可以帮助进行一些疾病的诊断,可以帮助分析病因,观察疗效,判断预后。

我们现在就来看一看关于 T淋巴细胞亚群的具体情况吧!1简述免疫系统免疫系统作为人体的一种重要的防御系统,除了可以抵抗外界微生物的入侵之外,还能在体内将衰老、变异、恶化、甚至凋亡的细胞及时清除,从而确保身体的健康。

免疫系统由三个主要的部分组成:免疫器官,免疫细胞,免疫分子。

保持人体的免疫功能比较稳定,主要靠的就是免疫系统中各个部分发挥作用。

而在人体内,淋巴细胞是免疫系统最基础的组成成分,其中, T、 B淋巴细胞是机体免疫应答的中心环节。

在正常状态下, T、 B淋巴细胞在体内维持着一个固定的数量与比例,它们之间也会互相调节,以保持自身的免疫机能。

由于各种亚群的比例及数目的异常,会引起一系列的病理性改变及免疫功能紊乱,从而引发多种疾病。

2什么是T淋巴细胞亚群?T细胞、 B细胞、 NK细胞等都是人体内的免疫细胞。

负责细胞免疫的 T淋巴细胞亚群,它不仅可以对抗病毒,还可以调整人体的免疫系统。

其细胞功能,取决于T淋巴细胞总值(CD3)及其亚群(CD4、CD8)相对组成。

成熟 T淋巴细胞(CD3)用来表达机体的 T细胞总量,反应机体的免疫机能状态;CD4是一种诱导性的/辅助型 T细胞,作为人体免疫系统的核心,也被称为“人体免疫系统的指挥官”;CD8细胞是一种具有抑制/细胞毒的 T淋巴细胞,它可以对病原体进行直接的识别和杀死,和CD4一起对抗外来入侵。

3淋巴细胞亚群检测的临床意义3.1淋巴细胞亚群检测与肿瘤肿瘤的生长与转移主要通过两种途径实现,即获得能量并逃逸机体的免疫监控。

淋巴细胞亚群检测的临床意义

淋巴细胞亚群检测的临床意义

淋巴细胞亚群与临床人体外周血的淋巴细胞是机体重要的免疫细胞,主要包括三种:T淋巴细胞(TC)、B淋巴细胞(BC)、自然杀伤细胞(NK)。

TC主要表达CD3+,约占正常人外周血淋巴细胞总数的60--80%;BC主要表达CD19+,约占正常人外周血淋巴细胞总数的15--20%;自然杀伤细胞(NK)主要表达CD3--CD16+CD56+,约占正常人外周血淋巴细胞总数的10--20%。

通过T淋巴细胞亚群的监测可以了解在不同疾病状态下患者的细胞免疫功能状态,已经广泛在肿瘤、自体免疫、感染性疾病中,辅助临床诊断、帮助了解发病机理、判断预后和指导临床治疗。

T淋巴细胞亚群检测的内容为总T细胞(CD3+)及其亚群(辅助性T淋巴细胞,CD4+;抑制性或细胞毒T淋巴细胞,CD8+)的数量和比例。

在某些自身免疫性疾病,如类风湿性关节炎、自体免疫性溶血性贫血患者中CD3+/CD4+细胞的比值升高。

在病毒感染(上感,AIDS等)、恶性肿瘤、再生障碍性贫血等疾病中,患者CD4+/CD8+比值降低,三种淋巴细胞的数量和比例均可能有相应的改变。

T 细胞亚群已被用来监测器官移植病人的免疫状态,协助发现和使其避免受到GVHD的攻击。

由于在感染性、肿瘤性疾病、自体免疫性疾病和器官移植中患者的免疫功能和预后之间有着密切的关系,对其给予密切注意并及时采取适当措施、调节患者的免疫状态以改善预后就成为现代医学的一个重要内容。

常见疾病T淋巴细胞的改变(参考)疾病T细胞亚群CD4+/CD8+CD4+(辅助T)CD8+(抑制T)类风关↑(活动期)↑↑SLE--或↓(活动期)↑↓↑胰岛素依赖性糖尿病↑多发性硬化症↓↓↑乙型肝炎↑自身免疫溶血性贫血↑↑上呼吸道感染↓↓↓结核↓AIDS↓↓↑CD4+/CD8+CD3+(总T)CD4+(辅助T)CD8+(抑制T)恶性肿瘤(白血病)↓↓↓↓↑↑↑↑再障及粒细胞减少症↓↑↓CMV感染↓↑↓血小板减少↓↓↓↓↓↓CD19为全部B细胞共有的表面标志,增高见于B细胞系统的恶性肿瘤,减低见于体液免疫缺陷病。

流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识(2019完整版)

流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识(2019完整版)

流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识(2019完整版)流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种对单细胞或生物颗粒进行多参数、定量分析的技术,具有速度快、精度高、准确性好等优点。

目前FCM广泛应用于临床医学,在疾病的预防、诊断、治疗及预后判断中具有重要作用。

但是淋巴细胞亚群在不同年龄阶段有不同的正常参考范围[1],并且其结果受多种因素的影响,造成临床判读相对困难。

为科学合理应用FCM协助诊治儿科疾病,"流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用共识"在多个学术组织的协作下于2016年正式发表[2]。

该共识提高了医务工作者对FCM在儿科临床应用的认识,促进了临床诊疗水平的提高。

医学技术飞速发展,FCM的应用也有了一定的进展。

为适应医学发展和临床应用的需要,多个学术组织的专家讨论撰写了"流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识(2019版)"。

一、淋巴细胞亚群分析常规检测项目和报告内容淋巴细胞亚群分析是临床开展最多的FCM检测项目,是指借助各种荧光染料标记的单克隆抗体测定各类淋巴细胞胞膜或胞内独特的分化抗原(cluster of differentiation,CD),对淋巴细胞的各个亚群进行分析。

原国家卫生部发布的FCM检测外周血淋巴细胞亚群指南(WS/T 360-2011)对于规范FCM在外周血淋巴细胞亚群分析中的应用具有重要指导意义。

检测过程需注意标本采集和运输、免疫荧光染色、检测和分析、结果报告和审核等方面。

常规检测的淋巴细胞亚群包括T细胞(CD3+)、B细胞(CD3-CD19+)和NK细胞(CD3-CD16+CD56+);T细胞又分为2个亚群:辅助性T细胞(CD3+CD4+)和杀伤性T细胞(CD3+CD8+)。

淋巴细胞亚群分析报告应提供各个亚群细胞的相对计数(百分比)和绝对计数。

FCM可以直接测得各淋巴细胞亚群的相对计数。

淋巴细胞亚群检测及临床应用

淋巴细胞亚群检测及临床应用
• T淋巴细胞又被分为两个亚群:T辅助/诱导淋巴细胞(CD3+CD4+)、T抑制/ 杀伤淋巴细胞(CD3+CD8+)。
一、概述
二、淋巴细胞亚群检测
1、检测原理
• 把全血加入到试剂中时,荧光标记的抗体会和白细胞表面抗原特异性结合,在采集 时,细胞通过激光束使激光散射。被染色的细胞就会发出荧光。这些被仪器检测到 的散射光和荧光信号提供了关于细胞大小、内部复杂度和相关荧光强度等信息。 BD Multitest检测试剂采用了荧光触发技术,能够直接对淋巴细胞群进行荧光设门, 以减少门中的未裂解细胞或有核红细胞带来的污染。
射光照射。于室温下(20-25℃)进行此程序操作 • 盖上管盖并轻轻混匀振荡进行混匀。室温(20-25℃)环境下避光孵育15min上
机检测。
二、淋巴细胞亚群检测
3、操作步骤-品牌B(六色淋巴细胞亚群试剂)
• 取一支 Trucounttube。用反向加样法加入50μl充分混匀的抗凝全血。注意血 不要碰到试管底部的微球( Beads)。
液时,将按钮按至第二个刻度点。释放按钮时,过量样本将被吸入吸头中。 将按钮按至第一个刻度点排出精确体积的样本,将过量样本留在吸头中。
二、淋巴细胞亚群检测
3、操作步骤-品牌B(四色淋巴细胞亚群试剂)
• 盖上管盖并轻轻混匀振荡进行混匀。在室温(20~25℃)环境下避光孵育 • 向各管中添加450μl 1× Multitest溶血素,注意:小心保护样本管,免受直
不能使用。室温保存的抗凝全血,可稳定48h;染色固定后的样本在2~8℃条 件下可稳定24h。 • 患者准备:无须特殊准备,检查对象生活饮食处于日常状态,空腹为宜, 静脉采血。
二、淋巴细胞亚群检测
3、操作步骤-品牌A

淋巴细胞亚群检测的临床应用ppt课件

淋巴细胞亚群检测的临床应用ppt课件

-发挥抗独特型抗体的免疫调节
-防御细胞外病原体(细菌),以抗体介导,促使 巨噬细胞和补体系统活化,ADCC -Th2(IL-4,IL-5)
-T细胞活化先天性免疫系统的防御机制,如
巨噬细胞 -Th1(IFN-α)
何时检测“淋巴细胞亚群”?
•评价免疫功能(血常规、Ig、补体、淋巴细胞亚群)
术前; 新生儿筛查(原发性免疫缺陷病); 体检
Surface immunoglobulin (sIg) for B-cells
流式细胞仪检测原理
Surface immunoglobulin (sIg) for B-cells
流式细胞术的特点
流式细胞术:利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参
数、快速的定量分析及分选的技术
•诊断免疫相关疾病(如HIV初筛有反应时) •免疫治疗疗效观察 •出现免疫功能低下症状时检测
1、经常感到疲劳; 2、经常感冒; 3、伤口容易感染; 5、易受到传染病的侵袭; 8、爱做梦(恶梦)
4、肠胃功能下降;自身保护能力差; 6、精神萎靡; 7、易昏睡
9、身心憔悴
Sheep erythrocyte rosetter ( E-rosettes) for T-cells
流式细胞术 = 细胞荧光化学技术+单克隆抗体技术+激光技术+流体力学+光
ห้องสมุดไป่ตู้
电测量技术+计算机技术
测量速度快:最快可在1秒种内检测上万个细胞 可进行多参数测量:可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测
量 具有明显的统计学意义:提供细胞群体的均值和分布情况 高分辨率(CV<2%)、高灵敏度(荧光检测灵敏度≤100MESF,前向角散射光检 测灵敏度(0.2∼0.5um) 既是细胞分析技术,又是精确的分选技术,分选纯度可达99%以上

急性支气管炎患儿治疗前后血清SOD、TNF-α和T-淋巴细胞亚群检测的临床意义

急性支气管炎患儿治疗前后血清SOD、TNF-α和T-淋巴细胞亚群检测的临床意义
殳 l 学 杂 志 20 射r 见疫 08
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401 一
急性 支气 管 炎 患儿 治 疗 前 后 血 清 S OD、 T F—o和 T一淋 巴细胞 亚 群检 测 的临床 意 义 N 【
Xu i eJe,Z o n g h u Ha ,Xu Weqn ii
Dp r etfP d tc , h y n ol’ H si l S u ag, ins 23 0 ) eat n ei r s S ua gP pe s o t , h yn J gu(2 60 m o ai e pa a A src Obe t e os d eca gso rl S D. bt t a jci T t yt hn e f eu O 哪 v u h l f n 一 lvl adT—cl sbe i r ui p f rra n ee n s e st dsi tnt eae et t l u s tb o y t t me
C 8 低於正常儿组 ( 0 0 ) 经 2周治 疗后则与正 常儿 比较无显 著性 差异 ( 0 0 ) D 值 P< .5 , P> . 5 。结 论 : 检测 急性支
气 管炎患儿血清 S D T F 旺 T一 巴细胞 亚群水平 对了解病情 、 O 、N 一 和 淋 观察治疗效果均具有重要 的临床价值 。
TNF —a L v l a d T —c lSu s t s r u in T p fe e t a e iti e es n e l b e s Di i t y e A r tb o t Tr a me ti P d a r n c P t n s wi ue Br n ht a i t t Ac t o c is e h i

淋巴细胞亚群检测在小儿过敏性紫癜诊治中的应用

淋巴细胞亚群检测在小儿过敏性紫癜诊治中的应用

淋巴细胞亚群检测在小儿过敏性紫癜诊治中的应用蔡莉莉;郝维敏;夏宏林【摘要】目的探讨淋巴细胞亚群检测在小儿过敏性紫癜(HSP)诊治中的作用及意义.方法选取73例HSP患儿作为HSP组,并根据是否感染溶血性链球菌分为链球菌感染组(31例)和链球菌未感染组(35例),并设同期正常体检的30例儿童为健康对照组.分析两组患儿入院时及采用相同治疗方案2周后的临床症状和淋巴细胞亚群检测结果.结果与健康对照组比较,HSP组存在CD4+ [33.572±7.408)%比(37.225±5.789)%]、CD4+/CD8+[1.270 ±0.218)%比(1.582±0.176)%]及CD16+ CD56+[12.301 ±4.946)%比(15.553±4.249)%]细胞比值下降,CD8+[29.887±5.538)%比(24.500±3.589)%]、CD19+ [20.603±4.713)%比(14.100 ±3.699)%]细胞比值上升,差异有统计学意义(P<0.05).治疗2周后,链球菌感染组患儿淋巴细胞亚群检测数值及临床症状改善均不明显,而链球菌非感染组患儿的淋巴细胞亚群数值和临床症状明显改善,差异有统计学意义(P<0.05).结论HSP患儿急性期存在细胞免疫紊乱,溶血性链球菌感染会进一步加重该类患者细胞免疫功能紊乱,淋巴细胞亚群检测对小儿HSP诊治具有重要的作用与意义.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2018(022)008【总页数】4页(P1507-1510)【关键词】淋巴细胞亚群检测;过敏性紫癜;抗溶血性链球菌O;儿童【作者】蔡莉莉;郝维敏;夏宏林【作者单位】宿州市立医院检验科,安徽宿州234000;宿州市立医院检验科,安徽宿州234000;宿州市立医院检验科,安徽宿州234000【正文语种】中文过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)又叫亨舒综合征,是儿科常见的小血管出血性炎症,病因复杂,多与感染、过敏等因素有关,病变引起全身免疫功能紊乱,表现为免疫球蛋白IgA介导的免疫复合物沉积在小血管管壁,引起小血管脆性增加,导致出血[1-3]。

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正常人外周血白细胞CD45-SSC及T亚群散点图
CD3+CD4+ (Th/Ti细胞)
CD3+CD8+ (Ts/Tc细胞)
患儿男, 5个半月,以“发热、腹泻11天,皮疹7天”为主诉入院。入院后诊断为: (1)腹泻病; (2)发热待查:结缔组织病?(3)营养不良性贫血。入院后给予抗感染、补 液,调整肠道微生态,营养支持治疗,腹泻治愈,仍发热,皮疹渐增多,蔓延至上腹部、 胸前,皮疹呈棕色或棕黑色。入院第12天对患儿左大腿内侧一皮疹下结节进行活 检见:表皮角化,真皮脂肪坏死,炎性细胞浸润,考虑脂膜炎。但疗效不显。体液免疫 检查正常; T细胞亚群: CD3+ 2.41%(56%~84% ), CD4+ 0.53% (27%~51% ), CD8+ 0.50% (15%~44% ), CD4+/CD8+ 1.06。追问病史:此患儿生后接种卡介 苗部位常有渗液,不久结痂,结痂后不久又出现渗液,如此反复。遂对既往骨髓片及 组织片进行抗酸染色,均见大量抗酸杆菌。确诊为原发性T细胞免疫缺陷病合并卡 介苗接种后播散性结核病、结核性结节性脂膜炎。后因经济困难家长要求出院随 访结果出院2 d后死亡。
《原发性免疫缺陷病的早期识别和干预》:
2001年11月,美国疾病控制和预防中心在乔治亚洲首 府Atland召开了一个专题研讨会。会议最终就PID(primary immunodeficiency,原发性免疫缺陷病)的相关问题达成了 四点框架: ①公共卫生评估:运用传统公共卫生学方法评价PID对社会 健康的影响; ②以人群为基础的干预:建立、贯彻和评价针对新生儿筛 查实验和早期识别原发性免疫缺陷病的方案,以便能早期诊 断和治疗PID患者; ③筛查和诊断手段的评估:以保证PID患者对治疗的顺应性 和提高生活质量; ④交流:加强医疗保健者与公众之间的交流,以促进及时、 恰当地对PID进行诊断和干预。
淋巴细胞亚群检测在儿科的应用
淋巴细胞亚群检测在儿科的应用

为临床提供更多信息,提高医疗安全防护措施。 筛查免疫缺陷疾病及监测药物对免疫功能的影响。


指导临床合理用药。
《反复呼吸道感染的临床概念和处理原则》:
免疫功能测定有助于发现原发、继发 免疫缺陷病。包括体液免疫、细胞免疫; 补体、吞噬功能等检查,也应注意有无 顽固湿疹、血小板减少、共济失调、毛 细血管扩张等异常。
体液免疫与细胞免疫的联系:
在特异性免疫反应中,体液免疫和细胞免疫 之间既各有其独特的作用,又可以相互配合,共同 发挥免疫效应。当细菌、病毒等病原体侵入人体后, 首先诱发体液免疫,因为T细胞不能识别入侵的病 毒等抗原,只有当病毒或胞内寄生菌侵入宿主细胞, 细胞表面出现了来自病毒等病原体的小分子蛋白质 抗原,并与细胞表面的受体结合成复合物时,T细 胞才能识别,进而引发细胞免疫,使靶细胞裂解, 暴露出隐藏其中的病原体,再通过体液免疫将其清 除。假若病原体不是胞内寄生物,则只能诱发体液 免疫。
《医学综述》2000年第6卷第7期
①艾滋病:免疫功能普遍低下是艾滋病患者最明显的特征。艾滋病患者外 周血中CD4细胞显著低于正常对照组,而CD8细胞在正常范围内,CD4 /CD8 比值下降。 ②慢性乙型病毒性肝炎说明慢性肝炎患者T细胞辅助性、杀伤性功能下降,引起 病毒清除困难,导致慢性迁延性肝损伤;慢活肝、肝硬化组CD3下降,CD4亦 明显下降,CD8增高, CD4 /CD8比值下降,造成患者免疫自稳功能下降,从而 引起自身免疫损伤,肝细胞持续性、大量损伤,形成慢活肝、肝硬化;乙肝患 者CD8细胞增高,CD4 /CD8下降,导致过度活化的细胞毒性T细胞对肝细胞产 生损害作用。因此,对T细胞亚群的检测,有助于慢性肝炎类型的鉴别,有助 于了解肝炎病毒复制的程度,了解药物疗效,更好地指导治疗。 ③此外,在传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染、流行性出血热、 麻疹急性期、水痘、猩红热和一些上呼吸道感染的患者均可表现为CD4细胞下
目前以人群为基础的新生儿筛查(newborn screening, NBS)主要应用于遗传性疾病,但尚未开展有关PID的 NBS。SCID是一种严重的联合免疫缺陷,患儿在出生后 处于无症状期的时间很短,如果不进行有效的免疫重建, 往往在婴儿期死亡。免疫重建的时间与预后的关系密 切,如果在出生3个月内进行造血干细胞移植存活率接 近95%,如果在出生3个月后进行移植则存活率降至76%。 这是将SCID纳入NBS的重要原因。SCID的免疫表型 特点主要为严重的T淋巴细胞减少,流式细胞仪分析T 细胞亚群(包括CD3+、CD4+和CD8+)、B细胞(CD19+) 和NK细胞(CD16+/CD56+)比例是主要的实验室检查, 可对大多数患儿作出诊断。
体液免疫和细胞免疫的区别:
从作用对象上看,体液免疫清除的是 游离在寄主细胞外的抗原及其产生的有毒物 质;细胞免疫则摧毁侵入到寄主细胞内的病 毒、胞内寄生菌或外来的组织团块、癌变的 细胞等。 从作用方式上看,体液免疫是通过效应 B细胞(浆细胞)分泌抗体,并与抗原发生 特异性结合来清除抗原;细胞免疫则是通过 效应T细胞(杀伤T细胞)分泌穿孔素使靶细 胞溶解死亡。
CD4/CD8比值 的倒置被认为是病毒感染性疾病的重要指征。
降,CD8细胞升高以及CD4 /CD8比值下降。因此,
在细菌性疾病中的研究表明,结核性胸膜炎患者胸水 中CD4/CD8比值明显增高,而重症结核病患者外周血中该 比值下降。 不同类型麻疯患者的T细胞亚群研究发现,瘤型麻疯患 者CD8细胞下降,CD4细胞上升,而结核样型患者CD8细 胞则在正常范围。 寄生虫病:Coney等研究了曼氏血吸虫病患者外周血T 细胞亚群,发现肝脾大的患者,其CD3和CD4细胞均较正 常人显著下降。另外,弓形体病、疟疾、利什曼病等都表 现为CD8细胞上升,CD4细胞及CD4 /CD8比值下降。 总之,测定外周血CD3、CD4和CD8细胞亚群的水平 可以正确判断机体的细胞免疫功能,为临床提供用药指导 和判断预后的可靠指标。
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