BALBC小鼠尿素氮(BUN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
BALB/C小鼠尿素氮(BUN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
检测范围:96T
60 pmol/L - 1600pmol/L
使用目的:
本试剂盒用于测定BALB/C小鼠血清、血浆及相关液体样本中尿素氮(BUN)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中BALB/C小鼠尿素氮(BUN)水平。
用纯化的BALB/C小鼠尿素氮(BUN)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入尿素氮(BUN),再与HRP标记的尿素氮(BUN)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的尿素氮(BUN)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中BALB/C小鼠尿素氮(BUN)浓度。
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。
艾美捷生物-小鼠β2 微球蛋白(BMG β2-MG)酶联免疫吸附测定试 剂盒说明书
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Mouse BMG/β2-MG(Beta-2-Microglobulin) ELISA Kit产品货号:E-EL-M2411c96T/48T/24T使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************电子邮箱(销售)********************电子邮箱(技术)**************************QQ客服800110755网址具体保质期请见试剂盒外包装标签。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其他相关生物液体中BMG/β2-MG浓度。
灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度:0.02ng/mL。
●检测范围:0.03–20ng/mL。
●特异性:可检测样本中的小鼠BMG/β2-MG,且与其它类似物无明显交叉反应。
●重复性:板内,板间变异系数均<10%。
检测原理本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
用抗小鼠BMG/β2-MG抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠BMG/β2-MG会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗小鼠BMG/β2-MG抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
抗小鼠BMG/β2-MG抗体与结合在包被抗体上的小鼠BMG/β2-MG结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。
加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。
用酶标仪在450nm波长处测OD值,BMG/β2-MG浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中BMG/β2-MG的浓度。
试剂盒组成及保存未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
小鼠乙肝表面抗体(HBsAb)酶联免疫分析(ELISA)
小鼠乙肝表面抗体(HBsAb)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中乙肝表面抗体(HBsAb)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠乙肝表面抗体(HBsAb)水平。
用纯化的小鼠乙肝表面抗体(HBsAb)抗原包被微孔板,制成固相抗体,往包被抗原的微孔中依次加入乙肝表面抗体(HBsAb),再与HRP标记的乙肝表面抗体(HBsAb)抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的乙肝表面抗体(HBsAb)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠乙肝表面抗体(HBsAb)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:90IU/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明
BCA蛋白浓度测定试剂盒BCA蛋白浓度测定试剂盒保质期:本试剂盒自订购之日起一年内有效。
BCA蛋白浓度测定试剂盒产品内容:BCA产品简介:碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+,Cu+与BCA试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。
常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。
实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。
BCA蛋白浓度测定试剂盒操作说明:一. 微孔酶标仪法1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。
BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。
将标准品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。
3. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。
由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
4. 各孔加入200微升BCA工作液,37℃放置15-30分钟。
用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。
使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
二. 分光光度计法如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。
步骤如下:1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。
人封闭抗体(BA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书
人封闭抗体(BA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中封闭抗体(BA)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人封闭抗体(BA)水平。
用纯化的人封闭抗体包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入封闭抗体(BA),再与HRP标记的封闭抗体结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的封闭抗体(BA)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人封闭抗体(BA)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:135ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存20倍浓缩洗涤液20ml×1瓶23ml×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
小鼠红细胞生成素(EPO)酶联免疫分析试剂盒 说明书
小鼠红细胞生成素(EPO)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:1.56ng/ml-100ng/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠EPO,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中EPO 含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗EPO抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗EPO抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的EPO呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
小鼠 B 因子(BF)酶联免疫分析试剂盒 说明书
小鼠B因子(BF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠BF,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中BF含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗BF抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗BF抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的BF呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent)1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)。
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)。
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
尿素测定试剂盒使用说明
尿素测定试剂盒使用说明
尿素是由碳、氮、氧和氢组成的有机化合物,又称脲。
其化学公式为CON2H4、(NH2)2CO 或 CN2H4O,分子质量60,它是动物蛋白质代谢后的产物,通常用作植物的氮肥。
尿素在肝合成,是哺乳类动物排出的体内含氮代谢物。
哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质代谢分解的主要含氮终产物,同时尿素是第一种以人工合成无机物质而得到的有机化合物。
在《游泳池水质标准》(CJ 244-2007 )标准中,对游泳池水中的尿素提出明确的限量要求小于3.5mg/L。
广东环凯微生物科技有限公司开发的尿素试剂盒适用于水中尿素快速分析,采用酶法,不需要现场加热等操作,方便简单。
原理:
脲酶-水杨酸法
测定范围:
0.5-1.0-1.5-2.0-2.5-3.5-5.0-10.0mg/L。
尿素氮(BUN)试剂盒使用说明
尿素氮(BUN)试剂盒使用说明微量法货号:BC1535规格:100T/96S产品内容:标准品:液体1mL×1支,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,4℃避光保存,临用前加4mL蒸馏水充分溶解。
试剂二:液体8mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体8mL×1瓶,4℃避光保存。
产品说明:尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物,在尿酶催化下分解转化成氨。
血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。
在碱性条件下,尿酶水解尿素产生氨,氨与次氯酸反应生成氯胺,再与酚衍生物作用生成绿色吲哚酚,在630nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
操作步骤:一、样品处理1.组织:按照质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL蒸馏水),匀浆后于25℃,12000rpm离心10min,取上清待测。
2.细胞:按照细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL)为500-1000:1的比例(建议500万个细胞加入1mL蒸馏水),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3s,间隔7s,总时间3min);然后4℃,12000rpm离心10min,取上清置于冰上待测。
3.血清或其它液体:直接检测。
二、测定操作空白管标准管测定管样品(μL)20标准品(μL)20H2O(μL)20试剂一(μL)404040充分混匀,于37℃反应10min试剂二(mL)707070试剂三(mL)707070充分混匀,于37℃显色10min,于微石英比色皿/96孔板,双蒸水调零,测定630nm处吸光值,记为A空白管、A标准管和A测定管三、计算公式:1.按样本质量计算:尿素氮含量(mg/g)=(A测定管-A空白管)/(A标准管-A空白管)×C标准品÷W=0.005×(A测定管-A空白管)/(A标准管-A空白管)÷W2.按细胞数计算:尿素氮含量(mg/104cell)=(A测定管-A空白管)/(A标准管-A空白管)×C标准品÷细胞数量=0.005×(A测定管-A空白管)/(A标准管-A空白管)÷细胞数量3.按液体体积计算:尿素氮含量(mg/L)=(A测定管-A空白管)/(A标准管-A空白管)×C标准品=5×(A测定管-A空白管)/(A标准管-A空白管)C标准品:标准品浓度,5mg/L;W:样品质量,g注意事项:配制好的试剂一在2-8℃条件下可保存一周。
尿素氮(BUN)含量检测试剂盒说明书 微量法
尿素氮(BUN)含量检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC1535规格:100T/48S产品内容:试剂一:粉剂×2瓶,4℃避光保存,临用前加2mL蒸馏水充分溶解。
试剂二:液体6mL×1瓶,4℃保存。
试剂三A液:液体0.4mL×1支,4℃保存;试剂三B液:液体1.6mL×1瓶,4℃保存;临用前将A液倒入B液中混合,或者根据比例(A:B=1:4)现用现配;试剂四:液体2mL×1瓶,4℃避光保存。
标准品:粉剂×1瓶,4℃保存。
10mg尿素。
临用前加入4.66mL蒸馏水配制成1mg/mL尿素氮标准液。
产品说明:尿素(BUN)是人体蛋白质代谢的主要终末产物,BUN构成了血液中绝大部分的非蛋白质氮,血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。
用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N,生成的蓝色靛酚和尿素氮的浓度成正比自备实验用品及仪器:可见分光光度计/酶标仪、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
操作步骤:一、样品处理1.组织:按照质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL蒸馏水),冰上匀浆后于4℃,13000g离心15min,取上清待测。
2.细胞:按照细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL)为500-1000:1的比例(建议500万个细胞加入1mL蒸第1页,共3页馏水),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3s,间隔7s,总时间3min);然后4℃,13000g离心15min,取上清置于冰上待测。
3.血清(浆)或其它液体:直接检测。
二、测定操作:1、分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至630nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、将1mg/mL尿素氮标准液用蒸馏水稀释至50μg/mL备用。
3、加样表:试剂名称(μL)空白管标准管测定管对照管样品1212标准品12-蒸馏水1224试剂一242424-试剂二44444444充分混匀,于37℃反应10min,试剂三16161616试剂四12121212混匀,室温静止30min。
酶联免疫吸附法试剂盒说明书
酶联免疫吸附法试剂盒说明书酶联免疫吸附法试剂盒说明书一、试剂盒组成本试剂盒包括:酶标板、标准品、检测样本、酶标记抗体、辣根过氧化物酶标记物、缓冲液和洗涤缓冲液。
二、试剂的保存1. 试剂盒在2℃~8℃冷藏保存,避光、避震;2. 酶标板使用后,建议立即密封保存;3. 严禁冻融。
三、试剂的使用须知1. 标准品和检测样本前应准备好,标准品稀释后应立即使用;2. 操作前应熟悉试剂盒的使用说明,按照说明操作;3. 操作中保持操作台洁净,管嘴不得脱落,试剂不得相互污染;4. 尽量避免脱落物进入酶标板孔内;5. 严格掌握各试剂使用量,不要随意更换试剂和试剂量;6. 辣根过氧化物酶标记物可能会对皮肤和眼睛产生刺激,操作时需保护好皮肤和眼睛;7. 实验后废液应严格按照规定处理。
四、实验步骤1. 取出酶标板,加样品。
2. 打开包装袋,取出标准品,加入试剂杯。
3. 加标准品及待测样品缓冲液,混匀。
4. 加入酶标记抗体,混匀,孵育。
5. 洗涤板孔。
6. 加入辣根过氧化物酶标记物,孵育。
7. 停止反应,加入停止液。
8. 检测A值,计算结果。
五、实验结果在试剂使用说明范围内,本试剂盒结果准确,有较好的可重复性和灵敏度。
六、注意事项1. 本试剂盒仅用于科研目的,不得用于临床诊断。
2. 试剂盒使用过期或者保存不当会影响实验结果,建议在有效期内使用,如有过期,请勿使用。
3. 如果有任何疑问,请与生产厂家联系。
生产厂家:***公司联系地址:***市***区***路***联系电话:***-*******。
